JPWO2006077793A1 - 抗腫瘍剤 - Google Patents

Abstract

医薬、消化器癌、白血病、下垂体腫瘍、肺小細胞性癌、甲状腺癌、神経星状細胞腫の治療または予防に有用な抗腫瘍剤を提供すること。一般式（１）【化１】（式中、Ｒ１はＣ１−６アルキル基を示し、Ｒ２はフェニル基またはシクロヘキシル基を示し、Ｙは単結合またはＣ１−４アルキレン基を示す。）で表される１，５−ベンゾジアゼピン誘導体またはその薬学的に許容される塩を有効成分とする抗腫瘍剤。

Description

本発明は抗腫瘍剤、特に消化器癌、白血病、下垂体腫瘍、肺小細胞性癌、甲状腺癌、神経星状細胞腫の治療または予防に有用な抗腫瘍剤に関する。

わが国では、癌による死亡率が上昇し続けており、昭和５６年から死因の第１位を占め、平成１４年には死亡数３０４，２８６人、人口１０万人対死亡率２４１．５人、総死亡率の３１．０％となっている。そのうち、膵臓癌、大腸癌、胃癌などの消火器癌の発症率は特に高い。
なかでも、膵臓がんは難治性の癌として知られており、わが国では化学療法剤として塩酸ゲムシタビンが唯一、承認されているのみである。
しかし、塩酸ゲムシタビン、フルオロウラシルなどの化学療法剤は骨髄抑制や間質性肺炎などの重篤な副作用を起こすことが多く、そのため投与間隔や投与期間が制限される。さらには点滴静注の薬剤が多いことから、その投与形態も制限されるため、これらに替わる抗腫瘍剤の開発が望まれている。

抗腫瘍剤は細胞毒性、殺細胞効果を有する化学療法剤が主流であり、またいくつかの化学療法剤を組みあわせて使用すると副作用は分散され、効果が増強するという理由から多剤化学併用療法が頻用されている。多剤化学併用療法では異なる作用機序、異なる副作用を持つ薬剤が組み合わされることが多いが、骨髄抑制のような共通の毒性が発生した場合は、それぞれの薬剤を減ずる必要があることが問題となっている（非特許文献１）。また、薬剤耐性が起きた場合も薬剤の変更を余儀なくされることも問題である。
近年、癌の増殖、転移、浸潤、悪性化などの作用機序が分子レベルで解明されつつあり、標的とする分子が特定された分子標的薬がいくつか開発されている。これらの薬剤は細胞毒性が低いものが多く、従来の殺細胞効果を有する化学療法剤と比べて副作用発現の低減が期待でき、単剤での作用はもとより、化学療法剤との併用薬としても注目されている（非特許文献２）。
さらに、癌治療の指標としても以前は、化学療法剤の殺細胞効果による癌の縮小が唯一の評価基準であったが、近年では生活の質（ＱＯＬ）の改善、転移の抑制あるいは生存期間の延長作用が評価項目として着目され始め、化学療法剤と分子標的薬の併用による効果が期待されている（非特許文献３）。

一方、ガストリンは腫瘍の増殖因子のひとつであると考えられている消化管ホルモンである。消化器癌である膵臓癌、大腸癌および胃癌細胞にはガストリン受容体遺伝子が発現しており、ガストリンに反応して強力な細胞増殖性を示すことが明らかにされている（非特許文献４、５）。
また、白血病、下垂体腫瘍、肺小細胞性癌、甲状腺癌、神経星状細胞腫にも同様にガストリン受容体遺伝子が発現し、ガストリンが癌細胞の増殖因子として機能しうることが報告されている（非特許文献６）。

細胞増殖を亢進させる経路としては、ガストリンが細胞表面に存在するガストリン受容体を刺激することが主要因と考えられていた。しかし、近年の研究により、ガストリンが細胞増殖を亢進させる経路として、ガストリン受容体への結合後エンドサイトシスによって細胞内に取り込まれる経路があること（非特許文献７）、細胞内に存在するガストリン結合タンパクに結合して細胞増殖を調節する経路があることが推測されている（非特許文献８、９）。
さらに、ガストリンの前駆体であるグリシン延長型ガストリンは、ガストリン受容体以外の未同定な受容体にも結合して細胞増殖を調節しているという報告（非特許文献１０、１１）もあり、ガストリンを介した細胞増殖には複数の経路があると推定されている。

これまでに開発されてきたガストリン受容体拮抗薬は、ガストリン受容体のみを標的として開発されてきた化合物であるため、従来のガストリン受容体拮抗薬には一定の安定した抗腫瘍効果が見出されていない。例えば、ベンゾジアゼピン系化合物であるＬ−３６５，２６０は、ヒト膵臓癌ＰＡＮＣ−１移植マウスモデルにおけるガストリン誘発腫瘍増殖を抑制することが報告されている。しかし、ガストリンによる刺激がない場合には、腫瘍増殖を抑制しなかったことが報告されている（非特許文献１２）。グルタミン酸誘導体ＣＲ２０９３についても、同様な結果が報告されている（非特許文献１３）。

これらの結果は、外部から強制的にガストリン刺激を与えた場合のみ、すなわち非生理的なガストリン刺激によって誘導される癌細胞の増殖についてはガストリン受容体拮抗薬が抑制することを示している。従って、生理的な条件下では細胞増殖の抑制効果が消失することから、ガストリン受容体拮抗薬の抗腫瘍剤としての効果は不十分であると考えられる。

ＣＣＫのＣ末端ペンタペプチド誘導体であるＣＩ−９８８は、強力なガストリン受容体拮抗薬として知られている。しかし、ヒト大腸癌移植マウスに２５ｍｇ／ｋｇの用量で経口投与した場合には、非生理的なガストリン刺激条件無しで増殖抑制作用を示すのに対し、５０ｍｇ／ｋｇの用量で経口投与した場合には増殖抑制効果が全く見られなかったことが報告されている（非特許文献１４）。

ベンゾジアゼピン系の化合物であるＹＦ４７６は、選択的かつ強力なガストリン受容体拮抗薬として知られている。特許文献１には、膵臓癌や大腸癌移植モデルにおいて腫瘍縮小作用を発現することが報告されているが、２００ｍｇ／ｋｇ以上の高用量で認められる効果であり、その作用機序としてはガストリン受容体を介したものかは不明であるとの記載がある。

上記のとおり、多くのガストリン受容体拮抗薬が開発されているが、これらの抗腫瘍効果については一定の見解が得られていない。すなわち、ガストリン受容体拮抗作用と抗腫瘍作用との関係は、単純な相関関係としては説明できず、癌においてガストリン受容体がどのような役割を果たしているのかは、未だ完全には解明されていない。
特許文献２に記載されているガストリン拮抗作用を有する１，５−ベンゾジアゼピン化合物においても、有用な抗腫瘍作用を有しているか否かについては、実際に不明である。
国際公開公報 第ＷＯ０２／０９２０９６号 国際公開公報 第ＷＯ０１／４０１９７号 日本臨床 ２００３，６１，６，１０１５−１０２０ 日本臨床 ２００４，６２，７，１２３２−１２４０ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ ２００３，２１，７，１４０４−１４１１ Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏｌ １９８５，２４９，Ｇ７６１−７６９ Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏｌ １９９４，２６６，Ｒ２７７−２８３ 医学のあゆみ １９９８，１８４，４，２６０−２６１ Ｃｅｌｌ Ｔｉｓｓｕｅ Ｒｅｓ．１９９７，２８７，３２５−３３３ Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ Ｈｅｐａｔｏｌ．１９９５，１０，２１５−２３２ Ｅｕｒ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２０００，３８８，９−１５ Ｓｃｉｅｎｃｅ １９９４，２６５，４１０−４１２ Ｒｅｇｕｌ Ｐｅｐｔ．２０００，９３，３７−４４ Ａｍ Ｊ Ｐｈｙｓｉｏｌ．１９９５，２６８，Ｒ１３５−１４１ Ｂｒ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ．１９９２，６５，８７９−８８３ Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｐｈｙｓｉｏｌ．１９９６，２３，４３８−４４０

本発明の目的は、抗腫瘍剤、特に消化器癌、白血病、下垂体腫瘍、肺小細胞性癌、甲状腺癌、神経星状細胞腫等の治療および／または予防に有用な抗腫瘍剤を提供することである。

本発明者等は、ＷＯ０１／４０１９７に記載の１，５−ベンゾジアゼピン誘導体またはその薬学的に許容される塩の抗腫瘍作用について鋭意研究を行った結果、当該化合物が、良好な抗腫瘍作用を有することを見出した。

すなわち、本発明は、一般式（１）

（式中、Ｒ^１はＣ_１−６アルキル基を示し、Ｒ^２はフェニル基またはシクロヘキシル基を示し、Ｙは単結合またはＣ_１−４アルキレン基を示す。）で表される１，５−ベンゾジアゼピン誘導体またはその薬学的に許容される塩を有効成分とする抗腫瘍剤を提供するものである。

また本発明は、上記一般式（１）で表される１，５−ベンゾジアゼピン誘導体またはその薬学的に許容される塩の、抗腫瘍剤製造のための使用を提供するものである。
さらに本発明は、上記一般式（１）で表される１，５−ベンゾジアゼピン誘導体またはその薬学的に許容される塩の有効量を投与することを特徴とする腫瘍の治療方法を提供するものである。

本発明の化合物は、従来の化学療法剤のような殺細胞効果が無く、動物を用いた安全性試験で重篤な副作用は認められていないことから、従来の化学療法剤に見られる骨髄抑制や間質性肺炎などの重篤な副作用の発現に対するリスクが少ないということができ、消化器癌、白血病、下垂体腫瘍、肺小細胞性癌、甲状腺癌、神経星状細胞腫等の抗腫瘍薬として有用である。
また、本発明の医薬は毒性が低いため継続的に投与することが可能なだけでなく、経口投与も可能であるため、従来の化学療法剤と比較して、簡便な投与形態とすることが可能である。
さらに、本発明の医薬を多剤併用化学療法に用いた場合、副作用の強い抗腫瘍薬の投与量を減少させることが可能であり、良好な抗腫瘍作用を有する副作用の低減された多剤併用化学療法の実現が期待される。また、従来の化学療法剤投与後であっても、継続的に投与することによって腫瘍増殖の抑制効果が期待でき、予防剤として用いることも可能である。

一般式（１）中、Ｒ^１で示されるＣ_１−６アルキル基としては、例えばメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基等が挙げられる。このうち、Ｃ_１−４アルキル基がより好ましく、Ｃ_４アルキル基がさらに好ましく、ｔｅｒｔ−ブチル基が特に好ましい。

Ｒ^２としては、シクロヘキシル基が特に好ましい。Ｙで示されるＣ_１−４アルキレン基としては、メチレン基、エチレン基、プロピレン基、ブチレン基、メチルメチレン基、ジメチルメチレン基、１−メチルエチレン基、１，１−ジメチルエチレン基、１−メチルプロピレン基、２−メチルプロピレン基等が挙げられる。このうち、ジメチルメチレン基が特に好ましい。また、Ｙとしては、単結合が特に好ましい。

化合物（１）のうち、（Ｒ）−（−）−３−［３−（１−ｔｅｒｔ−ブチルカルボニルメチル−２−オキソ−５−シクロヘキシル−１，３，４，５−テトラヒドロ−２Ｈ−１，５−ベンゾジアゼピン−３−イル）ウレイド］安息香酸またはその薬学的に許容される塩（化合物Ａ）および（Ｒ）−（−）−２−［３−［３−（１−ｔｅｒｔ−ブチルカルボニルメチル−２−オキソ−５−シクロヘキシル−１，３，４，５−テトラヒドロ−２Ｈ−１，５−ベンゾジアゼピン−３−イル）ウレイド］フェニル−２−メチルプロピオン酸またはその薬学的に許容される塩（化合物Ｂ）が特に好ましく、このうちさらに化合物Ａが好ましい。

化合物（１）の塩としては、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩等の無機塩類、アンモニウム塩、ピリジン塩、トリエチルアミン塩、エタノールアミン塩、（Ｒ）若しくは（Ｓ）体のα−フェネチルアミン、ベンジルアミン、４−メチルベンジルアミン塩等の有機塩類、および有機酸，無機酸との酸付加塩が挙げられるが、これらのうち塩基性塩が好ましく、塩基性塩の中でも無機塩がより好ましい。無機塩としては、アルカリ土類金属塩、特にカルシウム塩が好ましい。
化合物（１）には、光学活性やジアステレオマー体はもとより、水和物等の溶媒和物や結晶多形の物質も含まれる。

これらの化合物（１）は、ＷＯ０１／４０１９７号に記載の方法によって製造することができる。

化合物（１）は、後述の実施例に示すように、種々の腫瘍の増殖を抑制し、かつ担癌宿主の生存期間を有意に延長することから、種々の腫瘍に対する予防治療薬として有用である。また、化合物（１）、特に化合物Ａはラットおよびイヌにおいて１０００ｍｇ／ｋｇを２８日間連続投与しても死亡例は認められなかった。さらに、体重、摂餌量、眼科的検査、尿検査、器官重量、剖検所見及び病理組織学的検査においても異常所見は認められず、安全性が極めて高い。

本発明の抗腫瘍剤の対象癌としては、特に限定されないが、消化器癌、白血病、下垂体腫瘍、肺小細胞性癌、甲状腺癌、神経星状細胞腫が挙げられる。このうち、消化器癌、特に膵臓癌、大腸癌若しくは胃癌の予防および／または治療に有用である。

本発明の抗腫瘍剤は、薬学的に許容されている担体や補助剤を配合して、経口的にも非経口的にも投与することができ、経口投与の形態としては、錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤のごとき固形製剤とすることができる。固形製剤においては、例えば乳糖、マンニット、トウモロコシデンプン、結晶セルロースなどの賦形剤；セルロース誘導体、アラビアゴム、ゼラチンなどの結合剤；カルボキシメチルセルロースカルシウムなどの崩壊剤；タルク、ステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤等、適当な添加剤と組み合わせることができる。
また、これらの固形製剤をヒドロキシメチルセルロースフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート、セルロースアセテートフタレート、メタアクリレートコーポリマーなどの被覆用基剤を用いて放出制御製剤とすることができ、さらに、液剤、懸濁剤、乳濁剤のごとき液体製剤とすることもできる。

非経口投与の形態としては、注射剤とすることができる。この場合、例えば水、エタノール、グリセリン、慣用されている界面活性剤などと組み合わせることができる。また、適当な基材を用いて坐剤とすることができる。

本発明抗腫瘍剤における化合物（１）の投与量は、その投与方法、製剤形態、患者の症状、年令、性別等を考慮して個々の場合に応じて適宜決定される。通常、成人に対する１日の経口投与量は、１０〜１０００ｍｇであり、好ましくは５０〜６００ｍｇであり、さらに好ましくは１８０〜５００ｍｇである。これを１日１回または２〜３回に分けて投与することが好ましい。

さらに、本発明の抗腫瘍剤は、多剤併用療法に用いられる抗腫瘍剤、すなわち、少なくとも１つの他の抗腫瘍剤や放射線療法と、同時または異なる時に同一または異なる頻度で、および同一または異なる投与方法で、併用投与することが可能であり、このような多剤併用療法や放射線療法との併用により癌患者を治療することができる。

本発明の抗腫瘍剤を多剤併用療法に用いる場合は、各種多剤併用療法に追加して、或いは、その中の１〜２種の抗癌剤と置換して、適用することができる。本剤と併用できる他の抗腫瘍剤としては、好ましくは、代謝拮抗剤であるフルオロウラシル、塩酸ゲムシタビン、メトトレキサート、シタラビン、フルダラビン等、抗腫瘍性抗生物質である塩酸ブレオマイシン、マイトマイシンＣ、塩酸ドキソルビシン、塩酸ダウノルビシン、塩酸イダルビシン等、アルキル化薬であるブスルファン、配位金属錯体（カルボプラチン、シスプラチン）、シクロホスファミド、ダカルバジン、メルファラン等、非ステロイド系アロマターゼ阻害剤であるアナストロゾール、エキセメスタン、免疫療法剤であるトラスツマブ、リツキシマブ等、有糸***インヒビターであるパクリタキセル、ドセタキセル水和物、硫酸ビンクリスチン、硫酸ビンブラスチン等、トポイソメラーゼ阻害剤である塩酸イリノテカン等、ホルモン療法剤であるクエン酸タモキシフェン、酢酸リュープロレリン等、その他の抗腫瘍剤であるリボホリナートカルシウム、チロシンキナーゼ阻害剤であるゲフィチニブ、モノクローナル抗体（セツキシマブ、ベバシズマブ）、マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤、ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤等が使用されるが、これらに制限されるものではない。殊に、膵臓癌治療作用の知られる塩酸ゲムシタビンの使用時や塩酸ゲムシタビンと他の化学療法剤であるフルオロウラシルやリボホリナートカルシウム、塩酸イリノテカン、配位金属錯体との併用療法に追加することが好ましい。

化合物（１）並びに併用される他の抗腫瘍剤の投与量は、併用する薬剤、患者の症状、投与方法等に応じて薬剤毎に適宜決定される。多剤併用療法における化合物（１）の投与量は前記と同様である。また、投与時期、投与頻度および投与形態は、併用する薬剤毎に最適の方法が選択される。すなわち、化合物（１）は、少なくとも１つ（好ましくは１〜４）の他の抗腫瘍剤と、同時または異なる時に、同一または異なる頻度で、および同一または異なる投与形態で投与される。多剤併用療法における化合物（１）の投与形態としては、１日１回または複数回の経口投与あるいは静脈内投与が好ましい。抗腫瘍剤においては、点滴による静脈内投与のものが多いが、簡便な投与形態が可能であるという点で、経口投与がより好ましい。

後記実施例に示す様に、本発明抗腫瘍剤は他の抗腫瘍剤と併用することによって、副作用を増大させることなく、優れた抗腫瘍効果を達成することが確認されている。よって、本発明医薬を多剤併用化学療法に取り入れることによって、副作用の強い他の抗腫瘍剤の投与量を減少させたり、化学療法後も継続して本発明抗腫瘍剤を投与したりすることが可能であり、さらに優れた抗腫瘍効果を得ることが充分期待される。

化合物（１）のラットガストリン受容体への結合親和性（Ｋｉ値）は０．２４ｎＭと強力であり、また、ラットにおけるガストリン刺激胃酸分泌を０．１７ｍｇ／ｋｇの十二指腸内投与で５０％抑制することが報告されている（Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ ２００１；Ａ−３１１：１６０５）。それに対して、本剤の抗腫瘍作用を発現する用量は高用量である。

以下に実施例および比較例をもって本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。化合物（１）における抗腫瘍作用並びに毒性を以下の実施例１〜６により示す。また、本発明における抗腫瘍剤の調製例を製剤例１〜３に示す。

実施例１
３×１０^６個のヒト膵臓癌細胞株（ＭＩＡＰａＣａ ２）を雌性ヌードマウスに皮下移植した。腫瘍容量が１００ｍｍ^３以上となってから１日１回、それぞれ１０、３０、１００ｍｇ／ｋｇの（Ｒ）−（−）−３−［３−（１−ｔｅｒｔ−ブチルカルボニルメチル−２−オキソ−５−シクロヘキシル−１，３，４，５−テトラヒドロ−２Ｈ−１，５−ベンゾジアゼピン−３−イル）ウレイド］安息香酸カルシウム塩（以下、化合物Ａ１という）を２１日間、経口投与した。最終投与の翌日に腫瘍を摘出し、腫瘍重量を測定した。また、比較例として、薬物を経口投与しないものを対照群とし、同様に腫瘍重量を測定した。前記薬物投与群と対照群の腫瘍重量をもとに、抑制率を測定すると、３０ｍｇ／ｋｇ、または１００ｍｇ／ｋｇにおける抑制率はそれぞれ４０％、４２％であった。化合物Ａ１の投与により、用量依存的かつ有意に腫瘍増殖を抑制していた。

実施例２
１×１０^６個のヒト膵臓癌細胞株（ＰＡＮ１ＶＣ）を雄性ヌードマウスに膵臓内移植した。移植翌日から、１日１回、それぞれ３０、１００の化合物Ａ１を３６日間、経口投与した。また塩酸ゲムシタビン（Ｇｅｍｚａｒ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ（Ｒ））は、５ｍｇ／ｋｇを移植１、３、６日後に静脈内投与した。その結果、塩酸ゲムシタビン（Ｇｅｍｚａｒ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ（Ｒ））単独投与、前記化合物を３０ｍｇ／ｋｇ、または１００ｍｇ／ｋｇ投与において、薬物投与群と対照群の腫瘍重量をもとに、算出された抑制率は、それぞれ３２％、１９％、２３％であった。一方、塩酸ゲムシタビン（Ｇｅｍｚａｒ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ（Ｒ））と化合物Ａ１とを３０ｍｇ／ｋｇ、または１００ｍｇ／ｋｇ併用投与した場合には、抑制率はそれぞれ７３％、８４％であった。以上の結果から、化合物Ａ１と塩酸ゲムシタビン（Ｇｅｍｚａｒ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ（Ｒ））とを併用することにより、優れた抗腫瘍効果が示された。

実施例３
１．５×１０^６個／１ｍＬのヒト大腸癌細胞株（Ｃ１７０ＭＨ２）を雄性ヌードマウスに腹腔内投与した。移植後、１日１回、化合物Ａ１を３ｍｇ／ｋｇ、または３０ｍｇ／ｋｇ連日経口投与した。陽性対照薬として５−フルオロウラシル（以下、５−ＦＵ）およびロイコボリンを１回２５ｍｇ／ｋｇずつ静脈内投与（腫瘍投与１、４、７、１０日後）した。Ｃ１７０ＨＭ２腫瘍を腹腔内投与４０日後に肝臓に転移した腫瘍重量を測定した。化合物Ａ１を３ｍｇ／ｋｇ、または３０ｍｇ／ｋｇ投与することによって、肝臓への転移はそれぞれ７３％、または８１％抑制されていた。
一方、５−ＦＵおよびロイコボリン投与群の抑制率は６３％であった。以上の結果から、化合物Ａ１は化学療法剤と同程度以上の抗転移効果を有していることが示された。

実施例４
５×１０^５個／１ｍＬのヒト胃癌細胞株（ＭＧＬＶＡ１）を雌性ＳＣＩＤマウスに腹腔内移植投与した。移植後、１日１回、化合物Ａ１を３ｍｇ／ｋｇ、または３０ｍｇ／ｋｇずつ、連日経口投与した。このモデルはＭＧＬＶＡ１腫瘍による致死性のモデルであり、薬剤の効果は生存期間の延長作用として評価した。投与開始１６日後の生存率は、対照群では６．７％であるのに対し、化合物Ａ１を３０ｍｇ／ｋｇ投与すると生存率は４６．７％であった。以上の結果は、化合物Ａ１が腫瘍移植後の生存期間の延長作用を有することを示すものである。

実施例５
１×１０^６個のヒト大腸癌細胞株（ＨＴ−２９）を雌性Ｂａｌｂ／ｃヌードマウスに皮下移植した。移植４日後から１日１回、それぞれ１０、３０、１００ｍｇ／ｋｇの化合物Ａ１を１７日間、経口投与した。最終投与の翌日に腫瘍を摘出し、腫瘍重量を測定した。また、薬物を経口投与しないものを対照群とし、同様に腫瘍重量を測定した。前記薬物投与群と対照群の腫瘍重量をもとに、抑制率を測定すると、３０ｍｇ／ｋｇおよび１００ｍｇ／ｋｇにおける抑制率はそれぞれ４４％および５０％であった。化合物Ａ１は、用量依存的かつ有意に腫瘍増殖を抑制していた。

実施例６
１×１０^６個のヒト大腸癌細胞株（ＨＴ−２９）を雌性Ｂａｌｂ／ｃヌードマウスに皮下移植した。移植１０日後から１日１回、３０ｍｇ／ｋｇの化合物Ａ１を、１２日間経口投与した。
また、比較対象として、３、１０、３０ｍｇ／ｋｇの５−ＦＵを１２日間、腹腔内投与した。最終投与の翌日に腫瘍を摘出し、腫瘍重量を測定した。薬物を経口投与しないものを対照群とし、同様に腫瘍重量を測定した。前記薬物投与群と対照群の腫瘍重量をもとに、抑制率を測定すると、化合物Ａ１を３０ｍｇ／ｋｇ単独投与した場合の抑制率は３４％であった。また、３、１０、３０ｍｇ／ｋｇの５−ＦＵ単独投与における抑制率はそれぞれ２４、３０、５８％であった。
一方、化合物Ａ１ ３０ｍｇ／ｋｇと３、１０、３０ｍｇ／ｋｇの５−ＦＵを併用した場合の抑制率はそれぞれ３１、５４、７６％であった。以上のことから化合物Ａ１と５−ＦＵとを併用することにより優れた抗腫瘍効果が示された。

実施例７
腫瘍片７０〜８０ｍｇのヒト膵臓癌細胞株（ＰＡＮＣ−１）を雌性ＳＣＩＤマウス（各群１５匹）に膵臓内移植した。移植７日後から、１日１回、１００ｍｇ／ｋｇの化合物Ａ１を連日経口投与した。また、陽性対照薬として塩酸ゲムシタビン（Ｇｅｍｚａｒ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ（Ｒ））を、１回１００ｍｇ／ｋｇずつ、移植７、１０、１４日後に静脈内投与した。このモデルはＰＡＮＣ−１腫瘍による致死性のモデルであり、薬剤の効果は生存期間の延長作用として評価した。投与開始４０日後（移植後４６日後）の生存率は対照溶媒群では４６．７％であるのに対し、化合物Ａ１を１００ｍｇ／ｋｇ投与すると、８６．７％であった。また、塩酸ゲムシタビンでは、９３．３％であった。以上の結果は、化合物Ａ１が化学療法剤と同程度の腫瘍移植後の生存期間の延長作用を有することを示すものである。

実施例８
腫瘍片７０〜８０ｍｇのヒト膵臓癌細胞株（ＰＡＮＣ−１）を雌性ＳＣＩＤマウス（各群１５匹）に膵臓内移植した。移植７日後から、１日１回、１００ｍｇ／ｋｇの化合物Ａ１を連日経口投与した。また塩酸ゲムシタビン（Ｇｅｍｚａｒ Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ（Ｒ））は、１００ｍｇ／ｋｇを移植７、１０、１４日後に静脈内投与した。このモデルはＰＡＮＣ−１腫瘍による致死性のモデルであり、薬剤の効果は生存期間の延長作用として評価した。塩酸ゲムシタビン（表１中、ＧＥＭ）１００ｍｇ／ｋｇと化合物Ａ１ １００ｍｇ／ｋｇ併用投与した場合に、生存期間を延長させることが明らかとなった。以上の結果は、化合物Ａ１と化学療法剤の併用投与は腫瘍移植後の生存期間延長作用を有することを示すものである。

試験例１ ラットにおける２８日間反復経口投与毒性試験
６週齢の雌雄ＳＤ系ラットに化合物Ａ１の３０、１００、３００及び１０００ｍｇ／ｋｇを２８日間反復経口投与した。いずれの群においても死亡例は認められず、体重、摂餌量、眼科的検査、尿検査、器官重量、剖検所見及び病理組織学的検査において、異常所見は認められなかった。

試験例２ イヌにおける２８日間反復経口投与毒性試験
８ヶ月の雌雄ビーグル犬に化合物Ａ１の３０、１００、３００及び１０００ｍｇ／ｋｇを２８日間反復経口投与した。いずれの群においても死亡例は認められず、体重、摂餌量、眼科的検査、心電図、血圧、尿検査、血液学的検査、血液生化学的検査、器官重量及び剖検所見において、異常所見は認められなかった。

製剤例１
化合物Ａ１を２０ｇ、乳糖を３１５ｇ、トウモロコシデンプンを１２５ｇおよび結晶セルロースを２５ｇ、を均一に混合し、７．５％ヒドロキシプロピルセルロース水溶液２００ｍＬを加え、押出し造粒機により、直径０．５ｍｍスクリーンを用いて顆粒とし、直ちにマルメライザーにより丸めた後、乾燥して顆粒剤とする。

製剤例２
化合物Ａ１を２０ｇ、乳糖を１００ｇ、トウモロコシデンプンを３６ｇ、結晶セルロースを３０ｇ、カルボキシメチルセルロースカルシウムを１０ｇおよびステアリン酸マグネシウムを４ｇ、を均一に混合し、単発打錠機にて直径７．５ｍｍの杵で１錠２００ｍｇの錠剤とする。

製剤例３
化合物Ａ１を１００ｍｇ、酢酸ナトリウムを２ｍｇ、酢酸（ｐＨ５．８に調整用）を適量、蒸留水を残量（合計１０ｍＬ／バイアル）、を用いて、常法により注射剤とする。

Claims (27)

1. 一般式（１）
   

   

   （式中、Ｒ^１はＣ_１−６アルキル基を示し、Ｒ^２はフェニル基またはシクロヘキシル基を示し、Ｙは単結合またはＣ_１−４アルキレン基を示す。）で表される１，５−ベンゾジアゼピン誘導体またはその薬学的に許容される塩を有効成分とする抗腫瘍剤。
2. 一般式（１）において、Ｒ^１がｔｅｒｔ−ブチル基であり、Ｒ^２がシクロヘキシル基であり、Ｙが単結合である請求項１記載の抗腫瘍剤。
3. 有効成分が、（Ｒ）−（−）−３−［３−（１−ｔｅｒｔ−ブチルカルボニルメチル−２−オキソ−５−シクロヘキシル−１，３，４，５−テトラヒドロ−２Ｈ−１，５−ベンゾジアゼピン−３−イル）ウレイド］安息香酸またはその薬学的に許容される塩である請求項１記載の抗腫瘍剤。
4. 有効成分が、（Ｒ）−（−）−３−［３−（１−ｔｅｒｔ−ブチルカルボニルメチル−２−オキソ−５−シクロヘキシル−１，３，４，５−テトラヒドロ−２Ｈ−１，５−ベンゾジアゼピン−３−イル）ウレイド］安息香酸またはそのカルシウム塩である請求項１記載の抗腫瘍剤。
5. 消化器癌、白血病、下垂体腫瘍、肺小細胞性癌、甲状腺癌または神経星状細胞腫の治療剤および／または予防剤である請求項１〜４のいずれか１項記載の抗腫瘍剤。
6. 消化器癌の治療剤および／または予防剤である請求項１〜４のいずれか１項記載の抗腫瘍剤。
7. 膵臓癌、大腸癌または胃癌の治療剤および／または予防剤である請求項１〜４のいずれか１項記載の抗腫瘍剤。
8. 経口投与用剤である請求項１〜４のいずれか１項記載の抗腫瘍剤。
9. 他の抗腫瘍剤との併用投与または放射線療法との併用治療されるものである請求項１〜８のいずれか１項記載の抗腫瘍剤。
10. 一般式（１）
    

    

    （式中、Ｒ^１はＣ_１−６アルキル基を示し、Ｒ^２はフェニル基またはシクロヘキシル基を示し、Ｙは単結合またはＣ_１−４アルキレン基を示す。）で表される１，５−ベンゾジアゼピン誘導体またはその薬学的に許容される塩の、抗腫瘍剤製造のための使用。
11. 一般式（１）において、Ｒ^１がｔｅｒｔ−ブチル基であり、Ｒ^２がシクロヘキシル基であり、Ｙが単結合である請求項１記載の使用。
12. 有効成分が、（Ｒ）−（−）−３−［３−（１−ｔｅｒｔ−ブチルカルボニルメチル−２−オキソ−５−シクロヘキシル−１，３，４，５−テトラヒドロ−２Ｈ−１，５−ベンゾジアゼピン−３−イル）ウレイド］安息香酸またはその薬学的に許容される塩である請求項１記載の使用。
13. 有効成分が、（Ｒ）−（−）−３−［３−（１−ｔｅｒｔ−ブチルカルボニルメチル−２−オキソ−５−シクロヘキシル−１，３，４，５−テトラヒドロ−２Ｈ−１，５−ベンゾジアゼピン−３−イル）ウレイド］安息香酸またはそのカルシウム塩である請求項１記載の使用。
14. 抗腫瘍剤が、消化器癌、白血病、下垂体腫瘍、肺小細胞性癌、甲状腺癌または神経星状細胞腫の治療剤および／または予防剤である請求項１０〜１３のいずれか１項記載の使用。
15. 抗腫瘍剤が、消化器癌の治療剤および／または予防剤である請求項１０〜１３のいずれか１項記載の使用。
16. 抗腫瘍剤が、膵臓癌、大腸癌または胃癌の治療剤および／または予防剤である請求項１０〜１３のいずれか１項記載の使用。
17. 抗腫瘍剤が、経口投与用抗腫瘍剤である請求項１０〜１６のいずれか１項記載の使用。
18. 他の抗腫瘍剤との併用投与または放射線療法との併用治療されるものである請求項１０〜１７のいずれか１項記載の使用。
19. 一般式（１）
    

    

    （式中、Ｒ^１はＣ_１−６アルキル基を示し、Ｒ^２はフェニル基またはシクロヘキシル基を示し、Ｙは単結合またはＣ_１−４アルキレン基を示す。）で表される１，５−ベンゾジアゼピン誘導体またはその薬学的に許容される塩の有効量を投与することを特徴とする腫瘍の治療方法。
20. 一般式（１）において、Ｒ^１がｔｅｒｔ−ブチル基であり、Ｒ^２がシクロヘキシル基であり、Ｙが単結合である請求項１９記載の治療方法。
21. 有効成分が、（Ｒ）−（−）−３−［３−（１−ｔｅｒｔ−ブチルカルボニルメチル−２−オキソ−５−シクロヘキシル−１，３，４，５−テトラヒドロ−２Ｈ−１，５−ベンゾジアゼピン−３−イル）ウレイド］安息香酸またはその薬学的に許容される塩である請求項１９記載の治療方法。
22. 有効成分が、（Ｒ）−（−）−３−［３−（１−ｔｅｒｔ−ブチルカルボニルメチル−２−オキソ−５−シクロヘキシル−１，３，４，５−テトラヒドロ−２Ｈ−１，５−ベンゾジアゼピン−３−イル）ウレイド］安息香酸またはそのカルシウム塩である請求項１９記載の治療方法。
23. 腫瘍が、消化器癌、白血病、下垂体腫瘍、肺小細胞性癌、甲状腺癌または神経星状細胞腫である請求項１９〜２２のいずれか１項記載の治療方法。
24. 腫瘍が、消化器癌である請求項１９〜２２のいずれか１項記載の治療方法。
25. 腫瘍が、膵臓癌、大腸癌または胃癌である請求項１０〜２２のいずれか１項記載の治療方法。
26. 投与手段が、経口投与である請求項１０〜２２のいずれか１項記載の治療方法。
27. 他の抗腫瘍剤との併用投与または放射線療法と併用治療されるものである請求項１０〜２２のいずれか１項記載の治療方法。