JPS638539A - 蛍光測定装置 - Google Patents
蛍光測定装置Info
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- JPS638539A JPS638539A JP15256486A JP15256486A JPS638539A JP S638539 A JPS638539 A JP S638539A JP 15256486 A JP15256486 A JP 15256486A JP 15256486 A JP15256486 A JP 15256486A JP S638539 A JPS638539 A JP S638539A
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- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims description 15
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 5
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- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
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Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6408—Fluorescence; Phosphorescence with measurement of decay time, time resolved fluorescence
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2201/00—Features of devices classified in G01N21/00
- G01N2201/06—Illumination; Optics
- G01N2201/064—Stray light conditioning
- G01N2201/0648—Shutters
Landscapes
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明は生化学や医学の分野で広く応用される蛍光測定
装置に関するものである。
装置に関するものである。
蛍光ａ１ｑ定装置は、励起光や蛍光の分光に分光器を使
用するかフィルタを使用するかにより、慣習上、蛍光光
度計、蛍光分光光度計及び分光蛍光光度計の３種類に分
類される０本発明の蛍光測定装置はこれらの何れをも含
む意味で使用する。
用するかフィルタを使用するかにより、慣習上、蛍光光
度計、蛍光分光光度計及び分光蛍光光度計の３種類に分
類される０本発明の蛍光測定装置はこれらの何れをも含
む意味で使用する。
（従来の技術）
蛍光ｇ１ｇ定装置は吸光分析製値に比べて感度が高く１
選択性が優れているというような優れた特徴をもってい
る。
選択性が優れているというような優れた特徴をもってい
る。
第７図に蛍光測定装置の一例として分光蛍光光度計の基
本構成を示す。
本構成を示す。
２は光源であり、例えばキセノンランプが使用される６
光源２がらの光は集光ミラー４で集められて励起分光器
６に入射させられる。励起分光器６で分光された特定波
長の励起光は、ビームスプリッタ用石英板８で分割され
て、一方はレンズ１０を経て試料セル１２に入射する。
光源２がらの光は集光ミラー４で集められて励起分光器
６に入射させられる。励起分光器６で分光された特定波
長の励起光は、ビームスプリッタ用石英板８で分割され
て、一方はレンズ１０を経て試料セル１２に入射する。
ビームスプリッタ用石英板８で分割された他方の光はモ
ニタ用光電子増倍管１４に入射し、励起光強度がモニタ
される。励起分光器６がら試料セル１２に至る光路には
、励起光シャッタ１６が設けられ、蛍光測定を行なう場
合だけシャッタ１６が開けられて試料セル１２に励起光
が入射する。試料セル１２中の試料から放出された蛍光
は、レンズ１８及びミラー２０を経て蛍光分光器２２に
入射し、蛍光分光器２２で分光された後、測光用光電子
増倍管２４で検出される。
ニタ用光電子増倍管１４に入射し、励起光強度がモニタ
される。励起分光器６がら試料セル１２に至る光路には
、励起光シャッタ１６が設けられ、蛍光測定を行なう場
合だけシャッタ１６が開けられて試料セル１２に励起光
が入射する。試料セル１２中の試料から放出された蛍光
は、レンズ１８及びミラー２０を経て蛍光分光器２２に
入射し、蛍光分光器２２で分光された後、測光用光電子
増倍管２４で検出される。
（発明が解決しようとする問題点）
蛍光測定を行なう試料によっては、励起光が入射するこ
とによって光化学反応を起し、蛍光が出なくなる性質を
もっているものがある。一般に。
とによって光化学反応を起し、蛍光が出なくなる性質を
もっているものがある。一般に。
多くの蛍光試料は光照射によって蛍光量が減少する傾向
がある。したがって、定量分析を行なうときは、試料室
に試料セル１２を設定した後、一定時間後、例えば数秒
後、の蛍光強度を測定するように測定者は努力を払って
いる。
がある。したがって、定量分析を行なうときは、試料室
に試料セル１２を設定した後、一定時間後、例えば数秒
後、の蛍光強度を測定するように測定者は努力を払って
いる。
しかしながら、そのような方法は測定者に負担を与える
ことになるし、また、正しく一定時間後に測定したとい
う保証もない。
ことになるし、また、正しく一定時間後に測定したとい
う保証もない。
本発明は、励起光の照射によって光化学反応の生じる試
料であっても、再現性よく測定できる機能をもつ蛍光測
定装置を提供することを目的とするものである。
料であっても、再現性よく測定できる機能をもつ蛍光測
定装置を提供することを目的とするものである。
（問題点を解決するための手段）
第１図は本発明の構成を表わす。
１６はシャッタであり、試料セル１２に入射する励起光
１３を断続する。２６はシャッタ１６の開閉を制御する
シャッタ制御手段、２８は蛍光測定実行の開始信号を出
力する実行命令手段、３０は実行命令手段２８の出力信
号により一定時間だけシャッタ制御手段２６を作動させ
てシャッタ１６を開とさせるタイマである。
１３を断続する。２６はシャッタ１６の開閉を制御する
シャッタ制御手段、２８は蛍光測定実行の開始信号を出
力する実行命令手段、３０は実行命令手段２８の出力信
号により一定時間だけシャッタ制御手段２６を作動させ
てシャッタ１６を開とさせるタイマである。
（実施例）
第２図は本発明の一実施例として、マイクロコンピュー
タによる信号系を表わすものである。
タによる信号系を表わすものである。
３２はシャッタ１６の開閉動作や、測定データの処理を
行なうＣＰＵ、３４はＣＰＵ３２が使用するプログラム
を記憶しているＲＯＭ、３６は検出したデータなどを記
憶するＲＡＭ、３８は時間計開の基準となるクロック信
号を発生するクロック発生回路である。ＣＰＵ３２、Ｒ
ＯＭ３４、ＲＡＭ３６、クロック発生回路３８はそれぞ
れバス４０により相互に接続されている。バス４０には
また、測光用光電子増倍管２４からの検出信号をデジタ
ル信号に変換してこのマイクロコンピュータシステムに
取り入れるためのＡ／Ｄ変換器４２、分光器６．２２
（第７図）中の波長モータやスリットモータを駆動する
ためのインタフェース４４、シャッタ１６を駆動するた
めのインタフェース４６及び測定動作を開始するための
信号その他の信号を入力するためのキーボード４８が接
続されている。第１図で示されるタイマー３０と駆動手
段２６はこのマイクロコンピュータシステムにおいて実
現されている。第２図のバス４０にはまた、表示手段と
してＣＲＴ （図示略）も接続されている。
行なうＣＰＵ、３４はＣＰＵ３２が使用するプログラム
を記憶しているＲＯＭ、３６は検出したデータなどを記
憶するＲＡＭ、３８は時間計開の基準となるクロック信
号を発生するクロック発生回路である。ＣＰＵ３２、Ｒ
ＯＭ３４、ＲＡＭ３６、クロック発生回路３８はそれぞ
れバス４０により相互に接続されている。バス４０には
また、測光用光電子増倍管２４からの検出信号をデジタ
ル信号に変換してこのマイクロコンピュータシステムに
取り入れるためのＡ／Ｄ変換器４２、分光器６．２２
（第７図）中の波長モータやスリットモータを駆動する
ためのインタフェース４４、シャッタ１６を駆動するた
めのインタフェース４６及び測定動作を開始するための
信号その他の信号を入力するためのキーボード４８が接
続されている。第１図で示されるタイマー３０と駆動手
段２６はこのマイクロコンピュータシステムにおいて実
現されている。第２図のバス４０にはまた、表示手段と
してＣＲＴ （図示略）も接続されている。
第３図にキーボード４８とＣＲＴ５０を示す。
キーボード４８のキー５２は測定モードを選択するため
のキーであり、ＣＲＴ５０上のメニューから本発明に関
する定量モードを選択することができる。キー５４はシ
ャッタ１６を開いている時間を設定するためのキーであ
り、ＣＲＴ５０との対話で時間を設定することができる
。また、キー５６は本実施例の装置が定量モードに入っ
たときに、定量測定を実行するための実行命令キーであ
る。
のキーであり、ＣＲＴ５０上のメニューから本発明に関
する定量モードを選択することができる。キー５４はシ
ャッタ１６を開いている時間を設定するためのキーであ
り、ＣＲＴ５０との対話で時間を設定することができる
。また、キー５６は本実施例の装置が定量モードに入っ
たときに、定量測定を実行するための実行命令キーであ
る。
次に、本実施例の動作について第４図のフローチャート
を参照して説明する。
を参照して説明する。
まず、キーボード４８のキー５２により定量モードにモ
ード選択を行なう（ステップＳｔ）、次に実行命令キー
５６が押されると（ステップＳ２）、シャッタ１６が開
き（ステップＳ３）、Ａ／Ｄ変換器４２を経て測光用光
電子増倍管２４からデータを取り込み、ＲＡＭ３６に記
憶していく（ステップＳ４）。そして設定された一定時
間が経過すると（ステップＳ ５） 、ＣＰＵ３２から
の信号によりシャッタ１６が閉じられる（ステップＳ６
）。
ード選択を行なう（ステップＳｔ）、次に実行命令キー
５６が押されると（ステップＳ２）、シャッタ１６が開
き（ステップＳ３）、Ａ／Ｄ変換器４２を経て測光用光
電子増倍管２４からデータを取り込み、ＲＡＭ３６に記
憶していく（ステップＳ４）。そして設定された一定時
間が経過すると（ステップＳ ５） 、ＣＰＵ３２から
の信号によりシャッタ１６が閉じられる（ステップＳ６
）。
その後、取り込んだ検出データの演算が行なわれる（ス
テップＳ７）。そして試料セルの試料を交換した後（ス
テップＳ８）、再び実行命令キー５６を押すと（ステッ
プＳ２）、同様にして一定時間だけシャッタ１６が開け
られて蛍光測定が行なわれる。
テップＳ７）。そして試料セルの試料を交換した後（ス
テップＳ８）、再び実行命令キー５６を押すと（ステッ
プＳ２）、同様にして一定時間だけシャッタ１６が開け
られて蛍光測定が行なわれる。
第５図に本実施例の動作を示す。
実行命令キー５６を入力すると、初期状態では閉じてい
て励起光を遮断しているシャッタ１６が開き、設定され
たＴ１時間だけ試料に励起光を照射し、このＴ＋待時間
うち一定間隔でＡ／Ｄ変換器４２を介してＣＰＵ３２に
データを取り込み、積算平均化した後、表示器及びプリ
ンタに測定値を印字出力する。Ｔ１時間が経過した後、
シャッタ１６を閉じて試料に励起光を照射しないように
し、再び実行命令キー５６が押されるのを待つ状態とな
る。
て励起光を遮断しているシャッタ１６が開き、設定され
たＴ１時間だけ試料に励起光を照射し、このＴ＋待時間
うち一定間隔でＡ／Ｄ変換器４２を介してＣＰＵ３２に
データを取り込み、積算平均化した後、表示器及びプリ
ンタに測定値を印字出力する。Ｔ１時間が経過した後、
シャッタ１６を閉じて試料に励起光を照射しないように
し、再び実行命令キー５６が押されるのを待つ状態とな
る。
なお、第３図ではＣＲＴ５０が付属した装置を例示して
いるが、ＣＲＴ５０の付属していない装置であってもよ
い。
いるが、ＣＲＴ５０の付属していない装置であってもよ
い。
上記の実施例では試料交換を行なった後、実行命令キー
５６を押すことによりシャッタ１６が開き測定が行なわ
れるが、装置によっては試料交換を自動化したものもあ
る。その場合、実行命令スイッチ５６が不要になり、試
料交換が行なわれたことを検出すると自動的にシャッタ
１６が一定時間開き蛍光測定か行なわれていく。本発明
はそのような試料交換を自動化した装置に適用すること
も可能である。
５６を押すことによりシャッタ１６が開き測定が行なわ
れるが、装置によっては試料交換を自動化したものもあ
る。その場合、実行命令スイッチ５６が不要になり、試
料交換が行なわれたことを検出すると自動的にシャッタ
１６が一定時間開き蛍光測定か行なわれていく。本発明
はそのような試料交換を自動化した装置に適用すること
も可能である。
また、測定データを処理して印字したり出力する場合、
蛍光の強度として印字や出力を行なってもよいが、濃度
に変換して印字あるいは出力することもできる。その場
合、ブランク試料の蛍光強度をＢ、標準試料の蛍光強度
をＳとし、標準試料濃度の入力値がＣであるとすると、 （Ｓ−Ｂ）Ｋ＝Ｃ となるＫを求め、未知試料測定値ＦからＣｆ＝ （Ｆ−
Ｂ）Ｋ を求め、このＣｆを未知試料濃度として印字又は出力す
ればよい。
蛍光の強度として印字や出力を行なってもよいが、濃度
に変換して印字あるいは出力することもできる。その場
合、ブランク試料の蛍光強度をＢ、標準試料の蛍光強度
をＳとし、標準試料濃度の入力値がＣであるとすると、 （Ｓ−Ｂ）Ｋ＝Ｃ となるＫを求め、未知試料測定値ＦからＣｆ＝ （Ｆ−
Ｂ）Ｋ を求め、このＣｆを未知試料濃度として印字又は出力す
ればよい。
この場合の動作のフローは第６図に示されるようになる
。まず、ブランク試料を測定し、標準試料を測定した後
、標準試料濃度を入力する（ステップＳＬｌ〜５１３）
。その後、未知試料を測定し、濃度に変換して印字出力
する操作を繰り返す（ステップＳＬ４〜５１５）。ブレ
ークキーによりこのプログラムから抜ける（ステップ８
１６）。
。まず、ブランク試料を測定し、標準試料を測定した後
、標準試料濃度を入力する（ステップＳＬｌ〜５１３）
。その後、未知試料を測定し、濃度に変換して印字出力
する操作を繰り返す（ステップＳＬ４〜５１５）。ブレ
ークキーによりこのプログラムから抜ける（ステップ８
１６）。
濃度を印字又は出力する場合、ｖＡ＄試料の一点につい
てＫを求める方法の他に、複数の異なる濃度の標準試料
を測定し、それらのｖＡ？Ｉｓ試料濃度を入力して最小
自乗法により１次〜ｎ次式検量線を求め、その検量線を
使用して未知試料の濃度を算出するようにすることもで
きる。
てＫを求める方法の他に、複数の異なる濃度の標準試料
を測定し、それらのｖＡ？Ｉｓ試料濃度を入力して最小
自乗法により１次〜ｎ次式検量線を求め、その検量線を
使用して未知試料の濃度を算出するようにすることもで
きる。
（発明の効果）
本発明によれば、まず試料室に試料をセットした後、励
起光のシャッタを閉じておき、実行命令信号を入力する
ことにより一定の時間だけシャッタを自動的に開けるよ
うにしたので、光照射により光化学反応を起こすような
試料であっても精度よく定量分析を行なうことができる
。
起光のシャッタを閉じておき、実行命令信号を入力する
ことにより一定の時間だけシャッタを自動的に開けるよ
うにしたので、光照射により光化学反応を起こすような
試料であっても精度よく定量分析を行なうことができる
。
第１図は本発明の構成を示すブロック図、第２図は本発
明の一実施例を示すブロック図、第３図は同実施例にお
けるキーボードとＣＲＴを示す正面図、第４図は一実施
例の動作を示すフローチャート、第５図は一実施例の動
作を概略的に示すタイミング図、第６図は他の実施例の
動作を示すフローチャート、第７図は分光蛍光光度計の
基本構成を示す斜視図である。 １２・・・・・・試料セル。 １６・・・・・・シャッタ。 ２６・・・・・・シャッタ制御手段、 ２８・・・・・・実行命令手段、 ３０・・・・・・タイマ。
明の一実施例を示すブロック図、第３図は同実施例にお
けるキーボードとＣＲＴを示す正面図、第４図は一実施
例の動作を示すフローチャート、第５図は一実施例の動
作を概略的に示すタイミング図、第６図は他の実施例の
動作を示すフローチャート、第７図は分光蛍光光度計の
基本構成を示す斜視図である。 １２・・・・・・試料セル。 １６・・・・・・シャッタ。 ２６・・・・・・シャッタ制御手段、 ２８・・・・・・実行命令手段、 ３０・・・・・・タイマ。
Claims (1)
- （１）試料セルに入射する励起光をシャッタにより断続
し、試料セル中の試料からの蛍光を分光して検出する蛍
光測定装置において、前記シャッタに設けられたシャッ
タ制御手段と、蛍光測定実行の開始信号を出力する実行
命令手段と、この実行命令手段の出力信号により一定時
間だけ前記シャッツタ制御手段を作動させてシャッタを
開とさせるタイマとを備えたことを特徴とする蛍光測定
装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15256486A JPS638539A (ja) | 1986-06-27 | 1986-06-27 | 蛍光測定装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15256486A JPS638539A (ja) | 1986-06-27 | 1986-06-27 | 蛍光測定装置 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS638539A true JPS638539A (ja) | 1988-01-14 |
Family
ID=15543239
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP15256486A Pending JPS638539A (ja) | 1986-06-27 | 1986-06-27 | 蛍光測定装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS638539A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0355738A2 (en) * | 1988-08-26 | 1990-02-28 | Hitachi, Ltd. | Fluorophotometer for use in automatic equipment of chemical analysis for measuring the intensity of fluorescence in the automatic equipment |
| JP2005513497A (ja) * | 2002-01-03 | 2005-05-12 | カール ツァイス イエナ ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング | 試料担体上および／または試料担体中の蛍光性、ルミネセンス発光性および／または吸光性物質の同定のための方法および／または装置 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5649943A (en) * | 1979-09-21 | 1981-05-06 | Varian Associates | Method of and apparatus for measuring fluorescense |
| US4291230A (en) * | 1979-03-07 | 1981-09-22 | Baxter Travenol Laboratories, Inc. | Fluorometric analyzer including shutter means for simultaneously shielding sample and photodetector during sample change |
-
1986
- 1986-06-27 JP JP15256486A patent/JPS638539A/ja active Pending
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4291230A (en) * | 1979-03-07 | 1981-09-22 | Baxter Travenol Laboratories, Inc. | Fluorometric analyzer including shutter means for simultaneously shielding sample and photodetector during sample change |
| JPS5649943A (en) * | 1979-09-21 | 1981-05-06 | Varian Associates | Method of and apparatus for measuring fluorescense |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0355738A2 (en) * | 1988-08-26 | 1990-02-28 | Hitachi, Ltd. | Fluorophotometer for use in automatic equipment of chemical analysis for measuring the intensity of fluorescence in the automatic equipment |
| EP0355738A3 (en) * | 1988-08-26 | 1991-02-27 | Hitachi, Ltd. | Fluorophotometer for use in automatic equipment of chemical analysis for measuring the intensity of fluorescence in the automatic equipment |
| JP2005513497A (ja) * | 2002-01-03 | 2005-05-12 | カール ツァイス イエナ ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング | 試料担体上および／または試料担体中の蛍光性、ルミネセンス発光性および／または吸光性物質の同定のための方法および／または装置 |
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