JPS6328061B2 - - Google Patents
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- JPS6328061B2 JPS6328061B2 JP3346980A JP3346980A JPS6328061B2 JP S6328061 B2 JPS6328061 B2 JP S6328061B2 JP 3346980 A JP3346980 A JP 3346980A JP 3346980 A JP3346980 A JP 3346980A JP S6328061 B2 JPS6328061 B2 JP S6328061B2
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Landscapes
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明はL−イソロイシン〔以下()と略称
する〕とDL−α−アミノ酪酸〔以下()と略
称する〕の混合水溶液より()を分離する方法
に関する。
する〕とDL−α−アミノ酪酸〔以下()と略
称する〕の混合水溶液より()を分離する方法
に関する。
本発明の目的は醗酵法により()を前駆前と
して()を製造した()と()を含む培養
液より()を有利に分離精製するにある。
して()を製造した()と()を含む培養
液より()を有利に分離精製するにある。
()は必須アミノ酸として人間及び動物の栄
養上重要な役割をするアミノ酸であり、医薬、食
品、飼料強化剤としての需要は近年急激に増加し
つつある。()は古くは蛋白質の加水分解物よ
り分離精製されていたが最近()やD−スレオ
ニンを前駆体とする醗酵法が確立され、醗酵液中
に生成された()を分離精製することが行われ
ている。しかしながら生成された()と醗酵液
中に残存する()の両方を含有する醗酵終了液
中より()を好収量で分離精製することは従来
の技術では工業的に困難であり、良い工業的な方
法が強く要望されている。
養上重要な役割をするアミノ酸であり、医薬、食
品、飼料強化剤としての需要は近年急激に増加し
つつある。()は古くは蛋白質の加水分解物よ
り分離精製されていたが最近()やD−スレオ
ニンを前駆体とする醗酵法が確立され、醗酵液中
に生成された()を分離精製することが行われ
ている。しかしながら生成された()と醗酵液
中に残存する()の両方を含有する醗酵終了液
中より()を好収量で分離精製することは従来
の技術では工業的に困難であり、良い工業的な方
法が強く要望されている。
従来一般的にイオン交換樹脂クロマトグラフイ
ーがアミノ酸の分離精製法として用いられてい
る。この方法は例えば実験農芸化学下巻445〜452
頁東京大学農学部農芸化学教室編 朝倉書店(昭
和44年度版)に記載されている。然しながら従来
用いられているこの技術は複雑な操作を要するこ
となどから、大量処理を必要とする工業的方法に
は好ましくない。
ーがアミノ酸の分離精製法として用いられてい
る。この方法は例えば実験農芸化学下巻445〜452
頁東京大学農学部農芸化学教室編 朝倉書店(昭
和44年度版)に記載されている。然しながら従来
用いられているこの技術は複雑な操作を要するこ
となどから、大量処理を必要とする工業的方法に
は好ましくない。
()と()の分離にイオン交換樹脂カラム
クロマトグラフイーが用いられた例として「日本
農芸化学会誌 第36巻、437〜441頁 1962年」が
ある。この方法では()と()の分離が悪く
効率的な分離法とは言えない。又この場合は
()は1規定の塩酸水溶液により溶出される為
強い耐酸の器材を使用しなければならない。又こ
の溶出液より純品の()を得るには塩酸を除く
必要がある。この為には、濃縮やイオン交換樹脂
処理が必要で使用機器の材質の問題があり且手法
が複雑となる難点がある。
クロマトグラフイーが用いられた例として「日本
農芸化学会誌 第36巻、437〜441頁 1962年」が
ある。この方法では()と()の分離が悪く
効率的な分離法とは言えない。又この場合は
()は1規定の塩酸水溶液により溶出される為
強い耐酸の器材を使用しなければならない。又こ
の溶出液より純品の()を得るには塩酸を除く
必要がある。この為には、濃縮やイオン交換樹脂
処理が必要で使用機器の材質の問題があり且手法
が複雑となる難点がある。
本発明者は鋭意研究を行つて()と()の
共存する水溶液から()を分離する為に次の様
な方法を見出し本発明に到達した。
共存する水溶液から()を分離する為に次の様
な方法を見出し本発明に到達した。
即ち、強酸性陽イオン交換樹脂(ダイヤイオン
SK−1BSやダウエツクス50Wなど)を充填した
樹脂塔に()と()の混在する水溶液を貫流
して液中の両アミノ酸を該樹脂に吸着せしめ、樹
脂層内の非吸着物質を脱イオン水にて洗滌した後
に0.02〜0.6特に好ましくは0.05〜0.07規定の希塩
酸を貫流することにより、先ず()を選択的に
十分溶出せしめることが出来る。その際のSVは
2前後が望ましい。又樹脂塔の形はL/D4が
好ましい。()が実質的に全て溶出された後希
塩酸の貫流を続けて()が溶出し始めるのに若
干の余裕があるが、この間に希塩酸の貫流を終
え、脱イオン水を貫流して樹脂内の塩酸を洗滌
後、次に希アンモニア水を樹脂塔内に貫流するこ
とにより()を()とは別個に溶出し()
と()とを分離することができる。
SK−1BSやダウエツクス50Wなど)を充填した
樹脂塔に()と()の混在する水溶液を貫流
して液中の両アミノ酸を該樹脂に吸着せしめ、樹
脂層内の非吸着物質を脱イオン水にて洗滌した後
に0.02〜0.6特に好ましくは0.05〜0.07規定の希塩
酸を貫流することにより、先ず()を選択的に
十分溶出せしめることが出来る。その際のSVは
2前後が望ましい。又樹脂塔の形はL/D4が
好ましい。()が実質的に全て溶出された後希
塩酸の貫流を続けて()が溶出し始めるのに若
干の余裕があるが、この間に希塩酸の貫流を終
え、脱イオン水を貫流して樹脂内の塩酸を洗滌
後、次に希アンモニア水を樹脂塔内に貫流するこ
とにより()を()とは別個に溶出し()
と()とを分離することができる。
希アンモニア水で溶出された()の溶液は濃
縮するとアンモニアがガス状で放出され()を
結晶化することが出来る。この濃縮工程はアルカ
リ性である為塩酸水溶液中で()を濃縮する前
記の農芸化学会誌第36巻に記載されている方法
(以下この方法を旧法と呼ぶ)の様に耐酸機器を
使用する必要もなく非常に有利である。次に旧法
と本発明の実施例1の方法につき培養液よりイソ
ロイシンを精製する流れを示す。
縮するとアンモニアがガス状で放出され()を
結晶化することが出来る。この濃縮工程はアルカ
リ性である為塩酸水溶液中で()を濃縮する前
記の農芸化学会誌第36巻に記載されている方法
(以下この方法を旧法と呼ぶ)の様に耐酸機器を
使用する必要もなく非常に有利である。次に旧法
と本発明の実施例1の方法につき培養液よりイソ
ロイシンを精製する流れを示す。
旧 法
培養液9.2(イソロイシン17.2g含有)
↓
強酸性陽イオン交換樹脂(内径7.4×高さ61cm)
↓アンモニア水
溶出液
↓濃縮メタノール添加
粗結晶
↓再溶解
濃縮液
↓
強酸性陽イオン交換樹脂
(内径2.3×高さ57cm
〃 1.6×〃 40cm)直列
↓1.0規定塩酸
イソロイシン画分溶出液
↓濃縮
アンバーライトIR4B OH型(中和)
↓濃縮
結晶
↓溶解
濃縮液
↓濃縮
再結晶(L−イソロイシン
11.2g収量65%) 本発明実施例 1 培養液200ml(イソロイシン3.0g含有) ↓ 強酸性陽イオン交換樹脂(内径3.5×高さ21cm) ↓0.06規定希塩酸 ↓2%W/Vアンモニア水 溶出液() 溶出液() ↓ ↓濃縮 棄てる 結晶(イソロイシン
2.72g収量90.6g) 〔注;溶出液()の操作の後溶出液()の操
作を行う〕 以上2つの流れを比較すると、旧法は培養液上
澄を一度脱塩処理後に更に分画の必要があるが、
本発明の方法は一段処理が可能であつて、旧法に
対し本発明の方法によるものが流れが簡単であり
且イソロイシンの収量が優れていることが明らか
である。
11.2g収量65%) 本発明実施例 1 培養液200ml(イソロイシン3.0g含有) ↓ 強酸性陽イオン交換樹脂(内径3.5×高さ21cm) ↓0.06規定希塩酸 ↓2%W/Vアンモニア水 溶出液() 溶出液() ↓ ↓濃縮 棄てる 結晶(イソロイシン
2.72g収量90.6g) 〔注;溶出液()の操作の後溶出液()の操
作を行う〕 以上2つの流れを比較すると、旧法は培養液上
澄を一度脱塩処理後に更に分画の必要があるが、
本発明の方法は一段処理が可能であつて、旧法に
対し本発明の方法によるものが流れが簡単であり
且イソロイシンの収量が優れていることが明らか
である。
実施例 1
強酸性陽イオン交換樹脂のダイヤイオンSK−
1BS200mlを、内径35mm、長さ250mmのガラス円筒
管に充填し、10%W/V塩酸水溶液を200ml貫流
してH型の再生後400mlの脱イオン水を流速SV=
1で流して充分水洗し、残在塩酸の完全除去を確
認する。次に醗酵終了液より菌体を除いた培養液
上澄(液中にL−イソロイシン15mg/ml、DL−
α−アミノ酪酸4mg/ml含有)400ml(PH4.0)を
前記陽イオン交換樹脂に貫流(流速SV=1)し、
液中の両アミノ酸を吸着させた。その後800mlの
脱イオン水にて水洗(流速SV=1)後0.06規定
塩酸水溶液を流速SV=2にて貫流すると約1.2
貫流時より2.3貫流時までにDL−α−アミノ酪
酸の殆ど全量がL−イソロイシンを伴うことなく
溶出された。次に脱イオン水400mlにて水洗(流
速SV=2)後2%W/Vアンモニア水溶液を流
速SV=1にて貫流し、L−イソロイシンを溶出
させた。このL−イソロイシン画分を減圧濃縮純
品化することにより、L−イソロイシンの結晶
2.72gを得た。
1BS200mlを、内径35mm、長さ250mmのガラス円筒
管に充填し、10%W/V塩酸水溶液を200ml貫流
してH型の再生後400mlの脱イオン水を流速SV=
1で流して充分水洗し、残在塩酸の完全除去を確
認する。次に醗酵終了液より菌体を除いた培養液
上澄(液中にL−イソロイシン15mg/ml、DL−
α−アミノ酪酸4mg/ml含有)400ml(PH4.0)を
前記陽イオン交換樹脂に貫流(流速SV=1)し、
液中の両アミノ酸を吸着させた。その後800mlの
脱イオン水にて水洗(流速SV=1)後0.06規定
塩酸水溶液を流速SV=2にて貫流すると約1.2
貫流時より2.3貫流時までにDL−α−アミノ酪
酸の殆ど全量がL−イソロイシンを伴うことなく
溶出された。次に脱イオン水400mlにて水洗(流
速SV=2)後2%W/Vアンモニア水溶液を流
速SV=1にて貫流し、L−イソロイシンを溶出
させた。このL−イソロイシン画分を減圧濃縮純
品化することにより、L−イソロイシンの結晶
2.72gを得た。
添付の第1図は強酸性陽イオン交換樹脂に吸着
された培養終了液中のDL−α−アミノ酪酸とL
−イソロイシンを0.06規定の塩酸で溶出した場合
の溶出パターンを示す図である。使用した強酸性
陽イオン交換樹脂はダイヤイオンSK−1BS200ml
である。この樹脂を内径35mm長さ250mmの円筒ガ
ラス管に充填したものを樹脂塔として、実施例1
と同じ上記両アミノ酸の混合水溶液200mlを貫流
して該両アミノ酸の樹脂に吸着させ、次に樹脂塔
に0.06規定の塩酸をSV=2で貫流して両アミノ
酸を溶出した結果が図示されている。
された培養終了液中のDL−α−アミノ酪酸とL
−イソロイシンを0.06規定の塩酸で溶出した場合
の溶出パターンを示す図である。使用した強酸性
陽イオン交換樹脂はダイヤイオンSK−1BS200ml
である。この樹脂を内径35mm長さ250mmの円筒ガ
ラス管に充填したものを樹脂塔として、実施例1
と同じ上記両アミノ酸の混合水溶液200mlを貫流
して該両アミノ酸の樹脂に吸着させ、次に樹脂塔
に0.06規定の塩酸をSV=2で貫流して両アミノ
酸を溶出した結果が図示されている。
添付の第2図は第1図の場合において、0.06規
定塩酸の代りに1規定塩酸で溶出した場合のパタ
ーン図である。(1段処理では全く分離されな
い。)
定塩酸の代りに1規定塩酸で溶出した場合のパタ
ーン図である。(1段処理では全く分離されな
い。)
第1図は強酸性陽イオン交換樹脂に吸着された
DL−α−アミノ酪酸()とL−イソロイシン
()を0.06規定の塩酸で溶出した場合の溶出パ
ターンを示す図である。第2図は強酸性陽イオン
交換樹脂に吸着されたDL−α−アミノ酪酸
()、イソロイシン()を1規定の塩酸で溶出
した場合の溶出パターンを示す図である。ただ
し、両図共横軸は溶出量を示す。
DL−α−アミノ酪酸()とL−イソロイシン
()を0.06規定の塩酸で溶出した場合の溶出パ
ターンを示す図である。第2図は強酸性陽イオン
交換樹脂に吸着されたDL−α−アミノ酪酸
()、イソロイシン()を1規定の塩酸で溶出
した場合の溶出パターンを示す図である。ただ
し、両図共横軸は溶出量を示す。
Claims (1)
- 1 L−イソロイシンとDL−α−アミノ酪酸を
含む混合水溶液を強酸性陽イオン交換樹脂に貫流
して両アミノ酸を該樹脂に吸着せしめた後先ず
0.02〜0.6規定の希塩酸水溶液にてDL−α−アミ
ノ酪酸を溶出し次にアンモニア水でL−イソロイ
シンを溶出することを特徴とするL−イソロイシ
ンをDL−α−アミノ酪酸より分離する方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP3346980A JPS56131550A (en) | 1980-03-18 | 1980-03-18 | Separation of l-isoleucine |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP3346980A JPS56131550A (en) | 1980-03-18 | 1980-03-18 | Separation of l-isoleucine |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS56131550A JPS56131550A (en) | 1981-10-15 |
JPS6328061B2 true JPS6328061B2 (ja) | 1988-06-07 |
Family
ID=12387398
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP3346980A Granted JPS56131550A (en) | 1980-03-18 | 1980-03-18 | Separation of l-isoleucine |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS56131550A (ja) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH0276526U (ja) * | 1988-11-30 | 1990-06-12 | ||
CN106831465A (zh) * | 2016-12-28 | 2017-06-13 | 安徽省虹升生物股份有限公司 | 一种由骨胶中水解提炼β‑丙氨酸的方法 |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR2603581B1 (fr) * | 1986-04-28 | 1993-08-13 | Ajinomoto Kk | Procede pour isoler et purifier des aminoacides par chromatographie |
JPH0617343B2 (ja) * | 1986-04-28 | 1994-03-09 | 味の素株式会社 | イソロイシンの分離精製法 |
-
1980
- 1980-03-18 JP JP3346980A patent/JPS56131550A/ja active Granted
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH0276526U (ja) * | 1988-11-30 | 1990-06-12 | ||
CN106831465A (zh) * | 2016-12-28 | 2017-06-13 | 安徽省虹升生物股份有限公司 | 一种由骨胶中水解提炼β‑丙氨酸的方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPS56131550A (en) | 1981-10-15 |
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