JPS6291194A - Ｌ−グルタミン酸の製造法 - Google Patents
Ｌ−グルタミン酸の製造法Info
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- JPS6291194A JPS6291194A JP23173985A JP23173985A JPS6291194A JP S6291194 A JPS6291194 A JP S6291194A JP 23173985 A JP23173985 A JP 23173985A JP 23173985 A JP23173985 A JP 23173985A JP S6291194 A JPS6291194 A JP S6291194A
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- Japan
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- acid
- glutamic acid
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- brevibacterium
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
Ｌ−グルタミン酸は調味料として大きな用途があるほか
、医薬原料、界面活性剤原料等に巾広い用途がある。本
発明はＬ−グルタミン酸を発酵法によって製造する方法
を改良するものである。
、医薬原料、界面活性剤原料等に巾広い用途がある。本
発明はＬ−グルタミン酸を発酵法によって製造する方法
を改良するものである。
（従来の技術）
Ｌ−グルタミン酸は大寸生産されているアミノ酸であり
、製造方法に種々の改良が行なわれているっ （本発明が解決しようとする問題点） 本発明が解決しようとする問題点は工業的に安価なＬ−
グルタミン酸を製造する方法を開発することにある。
、製造方法に種々の改良が行なわれているっ （本発明が解決しようとする問題点） 本発明が解決しようとする問題点は工業的に安価なＬ−
グルタミン酸を製造する方法を開発することにある。
（問題点を解決するための手段）
本発明者らは発酵法によるＬ−グルタミン酸の製造法を
改良すべく鋭意研究した結果、ブレビバクテリウム属又
はコリネバクテリウム属のＬ−グルタミン酸生産菌より
誘導アス・母うギン酸アナログ又はアスノ臂うギンアナ
ログに耐性を有する変異株の中からＬ−グルタミン酸の
生産能が優れた菌株を分離することに成功し、本発明を
完成するに到った。
改良すべく鋭意研究した結果、ブレビバクテリウム属又
はコリネバクテリウム属のＬ−グルタミン酸生産菌より
誘導アス・母うギン酸アナログ又はアスノ臂うギンアナ
ログに耐性を有する変異株の中からＬ−グルタミン酸の
生産能が優れた菌株を分離することに成功し、本発明を
完成するに到った。
本発明でいうアスノ卆うイン酸アナログとはブレビバク
テリウム属又はコリネ・ぐクテリウム属に属する微生物
の増殖を抑制するがこの抑制がアス・！ライン酸が共存
することにより部分的又は全面的に解除されるようなも
のをいう。例えばフルオロアス・にライン酸、β−アス
・２ラギン酸ヒドラノド、アスノ９ラギン酸ヒドロキサ
メート、α−メチルアスパライン酸、β−メチルアスノ
ソライン酸、システィンスルフーン酸、ジフルオロコハ
ク酸、ハタ樗ジノン等がある。
テリウム属又はコリネ・ぐクテリウム属に属する微生物
の増殖を抑制するがこの抑制がアス・！ライン酸が共存
することにより部分的又は全面的に解除されるようなも
のをいう。例えばフルオロアス・にライン酸、β−アス
・２ラギン酸ヒドラノド、アスノ９ラギン酸ヒドロキサ
メート、α−メチルアスパライン酸、β−メチルアスノ
ソライン酸、システィンスルフーン酸、ジフルオロコハ
ク酸、ハタ樗ジノン等がある。
上記アスノ９ライン酸アナログによるブレビバクテリウ
ム属又はコリネバクテリウム属に属する微生物の生育阻
害はアス・９ラギンを共存させることによっても部分的
又は全面的に解除される。
ム属又はコリネバクテリウム属に属する微生物の生育阻
害はアス・９ラギンを共存させることによっても部分的
又は全面的に解除される。
本発明の要旨はブレビバクテリウム属またはコリネバク
テリウム属に寓し、アメ／９ライン酸アナログ又はアス
ノクラギンアナログに耐性を有し、かつＬ−グルタミン
酸生成能を有する変異株を培養して、培養液中にＬ−グ
ルタミン酸を生成蓄積させて、これを採取することを特
徴とする発酵法によるし一グルタミン酸の製造方法であ
る。以下本発明をさらに詳細に説明する。
テリウム属に寓し、アメ／９ライン酸アナログ又はアス
ノクラギンアナログに耐性を有し、かつＬ−グルタミン
酸生成能を有する変異株を培養して、培養液中にＬ−グ
ルタミン酸を生成蓄積させて、これを採取することを特
徴とする発酵法によるし一グルタミン酸の製造方法であ
る。以下本発明をさらに詳細に説明する。
本発明に使用するアス・９ライン酸アナログに耐性を有
する菌株は、例えば以下の菌株がある。
する菌株は、例えば以下の菌株がある。
ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタムＡＪ１２２
４７（ＦＥＲＭ−Ｐ ８３６４）フルオロアス・ぐライ
ン酸耐性 ブレビバクテリウム・フラバム ＡＪ１２２４６（ＦＥＲＭ−Ｐ ８３６３ ）フルオロ
アス・々ライン酸耐性 コリネバクテリウム・グルタミクム ＡＪ１２２４８（ＦｇＲＭ−Ｐ ８３６５）フルオロア
ス・母ライン酸耐性 これ等の菌株は、それぞれブレビバクテリウム・ラクト
フェルメンタムＡＴＣＣ１３８６９、ブレビバクテリウ
ム・フラ・ぐムＡＴＣＣ１４０６７、コリネバクテリウ
ム・グルタミクムＡＴＣＣ１３０３２を親株として変異
誘導したものである。
４７（ＦＥＲＭ−Ｐ ８３６４）フルオロアス・ぐライ
ン酸耐性 ブレビバクテリウム・フラバム ＡＪ１２２４６（ＦＥＲＭ−Ｐ ８３６３ ）フルオロ
アス・々ライン酸耐性 コリネバクテリウム・グルタミクム ＡＪ１２２４８（ＦｇＲＭ−Ｐ ８３６５）フルオロア
ス・母ライン酸耐性 これ等の菌株は、それぞれブレビバクテリウム・ラクト
フェルメンタムＡＴＣＣ１３８６９、ブレビバクテリウ
ム・フラ・ぐムＡＴＣＣ１４０６７、コリネバクテリウ
ム・グルタミクムＡＴＣＣ１３０３２を親株として変異
誘導したものである。
その他例えばブレビバクテリウム・ディパリカタム（Ｂ
ｒａｖｉｂａａｔｓｒｉｕｍ ｄｌｖａｒｉｃａｔｕｍ
） ＡＴＣＣ１４０２０、ブレビバクテリウム・サラ
カロリティカム（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｒｎ ａ
ａｅｅｈａｒｏｌｉｔｉｃｕｍ ） ＡＴＣＣ１４０６
６、及びコリネバクテリウム・アセトアンドフィラム（
Ｃｏｒｙｎａｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｃｅｔｏａｃｉｄ
ｏｐｈｉｌｕｍ ） ＡＴＣＣ１３８７０等を親株とし
て用いても同様に変異株をつくることができる。
ｒａｖｉｂａａｔｓｒｉｕｍ ｄｌｖａｒｉｃａｔｕｍ
） ＡＴＣＣ１４０２０、ブレビバクテリウム・サラ
カロリティカム（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｒｎ ａ
ａｅｅｈａｒｏｌｉｔｉｃｕｍ ） ＡＴＣＣ１４０６
６、及びコリネバクテリウム・アセトアンドフィラム（
Ｃｏｒｙｎａｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｃｅｔｏａｃｉｄ
ｏｐｈｉｌｕｍ ） ＡＴＣＣ１３８７０等を親株とし
て用いても同様に変異株をつくることができる。
上記変異株の変異誘導方法としては、紫外線照射、Ｘ線
照射、放射線照射、変異誘起剤処理等の通常の方法が用
いられ、例えば２５０μｌｉ／ｒｔｔｌのＮ−二トロー
Ｎ′−メチルーＮ−ニトロソグアニジンに関する実験は
以下に述べる方法によって行った。
照射、放射線照射、変異誘起剤処理等の通常の方法が用
いられ、例えば２５０μｌｉ／ｒｔｔｌのＮ−二トロー
Ｎ′−メチルーＮ−ニトロソグアニジンに関する実験は
以下に述べる方法によって行った。
グルコースｓ ｆ！／ Ｌ を尿素１．５ｇ／Ｌ、硫安
１．５１１／Ｌ 。
１．５１１／Ｌ 。
ＫＨ２ＰＯ４３１／Ｌ 、 Ｋ２ＨＰＯ４１１／／Ｌ
、 ＭｇＳＯ４・７Ｈ２００，１１／Ｔ、 、 ＣａＣ
２２’ ２ Ｉ（２０１，０η／Ｌ 、サイアミン塩酸
塩１００μｍ１／Ｌ 、ビオチ／３０μｙ／ Ｌ＊ Ｎ
ａ２Ｂ４Ｏ７・１０ Ｉ２０４．４＋！／Ｌ 、 Ｆｅ
Ｃ１，−６Ｉ２０４８．５η／Ｌ 。
、 ＭｇＳＯ４・７Ｈ２００，１１／Ｔ、 、 ＣａＣ
２２’ ２ Ｉ（２０１，０η／Ｌ 、サイアミン塩酸
塩１００μｍ１／Ｌ 、ビオチ／３０μｙ／ Ｌ＊ Ｎ
ａ２Ｂ４Ｏ７・１０ Ｉ２０４．４＋！／Ｌ 、 Ｆｅ
Ｃ１，−６Ｉ２０４８．５η／Ｌ 。
ＣｕＳＯ４−５）Ｉ２０１９．５＃／Ｌ 、 （ＮＨ４
）６Ｍｏ、０２４’ ４Ｉ（２０１，８５，’７１９／
Ｌ 、 ＺｎＳＯ４−７Ｉ２０４４０■／Ｌ及びＭｎＣ
６２・４Ｈ２０３，６■／Ｌの培地に第１表に示した量
のフルオロアメ／４’ライン酸を添加し、第１表に示し
た菌株を接種し、温度３１．５℃で９６時間振盪培養を
行った。
）６Ｍｏ、０２４’ ４Ｉ（２０１，８５，’７１９／
Ｌ 、 ＺｎＳＯ４−７Ｉ２０４４０■／Ｌ及びＭｎＣ
６２・４Ｈ２０３，６■／Ｌの培地に第１表に示した量
のフルオロアメ／４’ライン酸を添加し、第１表に示し
た菌株を接種し、温度３１．５℃で９６時間振盪培養を
行った。
フルオロアス・９ラギン酸無添加培地での生育を１００
とした時の相対生育度を第１表に示した。
とした時の相対生育度を第１表に示した。
第 １ 表
上記の本発明のアス・ぐライン酸アナログ又はアス７９
ラギンアナログに耐性を有する菌株を用いてＬ−グルタ
ミン酸を生成蓄積させるにはＬ−グルタミン酸発酵に用
いられる常法を用いて行なえばよい。
ラギンアナログに耐性を有する菌株を用いてＬ−グルタ
ミン酸を生成蓄積させるにはＬ−グルタミン酸発酵に用
いられる常法を用いて行なえばよい。
すなわち、使用する培地としては、通常の炭素源、窒素
源、無機イオンその他の栄養素の含有する通常の培地が
用いられる。炭素源としては例えばサトウキビ、甜菜か
らの糖汁あるいは廃糖蜜、澱粉、加水分解物等の糖質原
料等または酢酸等の有機酸等を用いる。
源、無機イオンその他の栄養素の含有する通常の培地が
用いられる。炭素源としては例えばサトウキビ、甜菜か
らの糖汁あるいは廃糖蜜、澱粉、加水分解物等の糖質原
料等または酢酸等の有機酸等を用いる。
窒素源としては通常のＬ−グルタミン酸発酵に用いられ
る例えばアンモニウム塩、アンモニア水、尿素等が用い
られ、その他すン駿イオン、マグネシウムイオン等の無
機イオンが必要に応じて適宜Ｊ 使用される。メビオチンに関して噌ビオチン又はビオチ
ン活性物質が生育の適量以下の制限量含有する培地が用
いられ、廃糖蜜等のビオチン過剰原料を炭素源として使
用するときは被ニジリンＧ。
る例えばアンモニウム塩、アンモニア水、尿素等が用い
られ、その他すン駿イオン、マグネシウムイオン等の無
機イオンが必要に応じて適宜Ｊ 使用される。メビオチンに関して噌ビオチン又はビオチ
ン活性物質が生育の適量以下の制限量含有する培地が用
いられ、廃糖蜜等のビオチン過剰原料を炭素源として使
用するときは被ニジリンＧ。
Ｆ、に、Ｏ，Ｖ、Ｘ等のペニシリン類あるいはシューク
ロースモノノ９ルミテート、ポリオキシエチレンソルビ
タン−モノ／４’ルミテート、ツクルミチン酸等の高級
脂肪酸又はその誘導体よりなる界面活性剤をビオチン抑
制物質として添加する等の常法で行なう。培養条件につ
いても、温度３０〜４０℃、−６〜８の範囲内で好気的
条件で実施する等、常法によって実施する。
ロースモノノ９ルミテート、ポリオキシエチレンソルビ
タン−モノ／４’ルミテート、ツクルミチン酸等の高級
脂肪酸又はその誘導体よりなる界面活性剤をビオチン抑
制物質として添加する等の常法で行なう。培養条件につ
いても、温度３０〜４０℃、−６〜８の範囲内で好気的
条件で実施する等、常法によって実施する。
以下本発明のフルオロアス・やライン酸に耐性を有する
変異株を用いた実施例を次に示す。
変異株を用いた実施例を次に示す。
実施例１
グルコース３６７＋９７ｍ１、尿素２ｍ９／ｍｌ 、
ＫＨ２ＰＯａｌ ｍ９７ｍ１、Ｍｇ５Ｏａ ・７ ａ
ｑ Ｏ−４ｍｌ／ｍｌ 、 Ｆ ｅ ＳＯ４・７ Ｈ
２Ｏ１０１ｔｌ／／ｍｌ、ＭｎＳＯ４−４Ｈ２０８ｔｔ
ｌ／ｍ！、大豆蛋白酸加水分解物（「味液」）５鱈／ｒ
ｒＬｌ！、サイアミン塩酸塩１００μｌ／ｌ、ビオチン
２．５μｍ１／ｌ を含有する培地を調製しその２０ｒ
ｎｌずつを５００Ｉｎ／容の振盪フラスコに入れ１１５
℃で１０分間加熱殺菌した。
ＫＨ２ＰＯａｌ ｍ９７ｍ１、Ｍｇ５Ｏａ ・７ ａ
ｑ Ｏ−４ｍｌ／ｍｌ 、 Ｆ ｅ ＳＯ４・７ Ｈ
２Ｏ１０１ｔｌ／／ｍｌ、ＭｎＳＯ４−４Ｈ２０８ｔｔ
ｌ／ｍ！、大豆蛋白酸加水分解物（「味液」）５鱈／ｒ
ｒＬｌ！、サイアミン塩酸塩１００μｌ／ｌ、ビオチン
２．５μｍ１／ｌ を含有する培地を調製しその２０ｒ
ｎｌずつを５００Ｉｎ／容の振盪フラスコに入れ１１５
℃で１０分間加熱殺菌した。
この培地に次に示す菌株を接種し往復振盪により３１．
５℃で培養を行った。培養中、培養液を−６，５ないし
８．０に保つように４５０〜／ｍｌの濃度の尿素溶液を
少量ずつ添加した。３０時間で発酵を終了し発酵液中に
蓄積したＬ−グルタミン酸の対糖収率を測定した。その
結果を＠２表に示す。
５℃で培養を行った。培養中、培養液を−６，５ないし
８．０に保つように４５０〜／ｍｌの濃度の尿素溶液を
少量ずつ添加した。３０時間で発酵を終了し発酵液中に
蓄積したＬ−グルタミン酸の対糖収率を測定した。その
結果を＠２表に示す。
第 ２ 表
実施例２
甘蔗糖蜜を、糖として１００ ｍ９／ｄ、ＫＨ２Ｐｏ４
１ｍ９７ｍ１、Ｍｇ５Ｏ４・７ Ｈ２Ｏ１”９／ｍｌ、
サイアミン塩酸塩１００μｍ１／ｌ の組成を有する培
地を調製しくＰ）（７，０）、そノ３０ｄｆツヲ５００
ｎ７ｍｉｉ７ ラ、ｘ、コに分注し、加熱殺菌した。こ
の培地に下記の菌株を接種し、往復振盪機により３１．
５℃で培養を行った０ 培養中、培養液をｐＨ６，５〜８．０に保つように４０
０〜／ｍｌの濃度の尿素溶液を少量ずつ添加した。
１ｍ９７ｍ１、Ｍｇ５Ｏ４・７ Ｈ２Ｏ１”９／ｍｌ、
サイアミン塩酸塩１００μｍ１／ｌ の組成を有する培
地を調製しくＰ）（７，０）、そノ３０ｄｆツヲ５００
ｎ７ｍｉｉ７ ラ、ｘ、コに分注し、加熱殺菌した。こ
の培地に下記の菌株を接種し、往復振盪機により３１．
５℃で培養を行った０ 培養中、培養液をｐＨ６，５〜８．０に保つように４０
０〜／ｍｌの濃度の尿素溶液を少量ずつ添加した。
培地の２６倍希釈液の５６２ｍμの吸光度が０．３０に
到達した時にポリオキシエチレンソルビタンモノパルミ
テートを添加した。３６時間で発酵を終了し、発酵液中
に蓄積したＬ−グルタミン酸の対糖収率を測定した。そ
の結果を第３表に示す。
到達した時にポリオキシエチレンソルビタンモノパルミ
テートを添加した。３６時間で発酵を終了し、発酵液中
に蓄積したＬ−グルタミン酸の対糖収率を測定した。そ
の結果を第３表に示す。
第３表
Claims (1)
- ブレビバクテリウム属又はコリネバクテリウム属に属し
、アスパラギン酸アナログ又はアスパラギンアナログに
耐性を有し、かつＬ−グルタミン酸生産能を有する変異
株を培養して、培養液中にＬ−グルタミン酸を生成蓄積
させて、これを採取することを特徴とするＬ−グルタミ
ン酸の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP23173985A JPS6291194A (ja) | 1985-10-17 | 1985-10-17 | Ｌ−グルタミン酸の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP23173985A JPS6291194A (ja) | 1985-10-17 | 1985-10-17 | Ｌ−グルタミン酸の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6291194A true JPS6291194A (ja) | 1987-04-25 |
| JPH055477B2 JPH055477B2 (ja) | 1993-01-22 |
Family
ID=16928278
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP23173985A Granted JPS6291194A (ja) | 1985-10-17 | 1985-10-17 | Ｌ−グルタミン酸の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6291194A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2747689A1 (fr) * | 1996-04-23 | 1997-10-24 | Ajinomoto Kk | Micro-organisme producteur d'acide l-glutamique et procede de production d'acide l-glutamique a l'aide de ce micro-organisme |
| EP0805202A1 (en) * | 1996-05-02 | 1997-11-05 | Ajinomoto Co., Ltd. | Yeast, and food and drink containing the same |
-
1985
- 1985-10-17 JP JP23173985A patent/JPS6291194A/ja active Granted
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2747689A1 (fr) * | 1996-04-23 | 1997-10-24 | Ajinomoto Kk | Micro-organisme producteur d'acide l-glutamique et procede de production d'acide l-glutamique a l'aide de ce micro-organisme |
| EP0805202A1 (en) * | 1996-05-02 | 1997-11-05 | Ajinomoto Co., Ltd. | Yeast, and food and drink containing the same |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH055477B2 (ja) | 1993-01-22 |
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