JPS6259221A - 組織プラスミノ−ゲン活性化因子含有組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （１）産業上の利用分野 本発明は組織プラスミノーゲン活性化因子含有組成物に
関する。すなわち本発明は医療の分野において利用され
る発明であり、さらに詳しくは血栓の形成によって起る
循環器系の諸疾患の治療の目的のために使用される組織
プラスミノーゲン活性化因子を医療の分野においていっ
そう利用しやす（するために発明された組成物に関する
。

（２）従来技術と問題点 組織プラスミノーゲン活性化因子、すなわちテイッシュ
ープラスミノーゲンアクチベーターはｔＰＡと一般に略
記されており、以下の記述においてもこの略記を使用す
ることとする。

血栓の形成によって発生する循環器系の障害を除去する
目的のために、プラスミノーゲンアクチベーターと呼ば
れる一群の物質を使用して血栓を線溶系によって溶解す
ることはよく知られている。

すなわち、プラスミノーゲンアクチベーターによって活
性プラスミンが生成し、これが血栓のフィベーターはス
トレプトキナーゼとウロキナーゼである。しかしながら
、これらの薬物は血栓に対して特異的ではなく、フィブ
リン以外にフィブリノーゲン、プロトロンビン、第５因
子、第８因子のごとき血液蛋白までも破壊するので内出
血の副作用を起すおそれがある。このためにストレプト
キナーゼ、ウロキナーゼの投与はカテーテルを通して血
栓へ向けて直接に注入するごとき処理がおこなわれてお
り、操作が繁雑となり１次第に使用されなくなっている
。しかしながら他方、正常組織および癌組織から抽出さ
れるプラスミノーゲンアクチベーターがあり、これらは
抽出基源によってウロキナーゼ型プラスミノーゲンアク
チベーター（ｕＰＡ）と本発明に係る組織型プラスミノ
ーゲンアクチベータ−（ｔＰＡ）に分類される。

ｔＰＡグループはｕＰＡグループと比較するとフィブリ
ンに対する親和性が非常に高（、従って治療目的に有用
であることが判っている。かくてｔＰＡが有する上記治
療効果を最大限に発揮させるために必要な製剤技術の提
供が望まれるに至っているのである。

ところが、　ｔＰＡは水にきわめて難溶性の蛋白である
から、　ｔＰＡを水に溶解して投与する製剤１例えば注
射剤とすることは非常に困難である。これはｔＰＡの医
療への実用化にあたって最大の問題点である。ｔＰＡは
循環器系に直接に投与すべき薬剤となるから十分な水溶
化が達成されなければ実用化かできないことになる。し
かしながらｔＰＡの水溶化については未だ満足のできる
解決技術が提供されていないのが実情である。ｔＰＡ製
剤に関する従来技術としては特開昭５９−１９６８２４
号公報記載の発明が開示されているが、　ｔＰＡの水溶
化を解°決する技術には至っていない。

（３）問題点を解決するための手段 前記した問題点にかんがみ１本発明者はｔＰＡの水に対
する溶解度を向上させるための技術について種々の検討
をおこなった。その結果、ジイソシアネートと結合した
ゼラチン部分加水分解物を添加することによってｔＰＡ
の水に対する溶解度が飛躍的に増大することを知り９本
発明を完成するに至った。すなわち本発明の目的はｔＰ
Ａの水に対する溶解度の向上であり、当該目的の達成の
ために本発明はジイソシアネートと結合したゼラチン部
分加水分解物を添加する技術を開示するものである。

以下に本発明の詳細な説明する。

本発明においてｔＰＡは天然物より抽出して得られたも
のであっても、また遺伝子組換技術によって人工的に製
造された閑あるいは細胞より得られたものであってもよ
い。すなわち、ヒト組織プラスミノーゲン活性化因子と
して一般に使用され。

入手されるものであればよく、その物の基源によって本
発明は限定されない。

本発明に係るジイソシアネートと結合したゼラチン部分
加水分解物はより詳しくはゼラチンを部分加水分解して
低分子ポリペプチドとし、このポリペプチドをジイソシ
アネート結合させた抗原性のない代用血漿成分であり９
通常は平均分子量が３５０００のものが使用される。ヘ
キスト社よりＨａθｍａｃｃθｌ、ヘマセルの登録商標
をもって市販されるものを入手して使用すればよい。本
物質の詳細についてはドイツ特許第１１１８７９２号明
細書およびドイツ特許第１１５５１３４号明細書におけ
る記述が参照される。後記実験例によって示されるごと
く本物質の濃度の土性に伴ないｔＰＡの溶解度は増加す
るので１本発明組成物において本物質およびｔＰＡの濃
度については特に限定はない。しかしながら本物質が高
濃度になるとその水溶液の粘度ぐＣ＊（＜ も大きくなり、取扱いに（くなる。侠−Ｊ’１４＃＆は
水溶液とした場合に濃度が１０％以下、さらに好ましく
は５％以下となるように本発明組成物中に配合されるの
が望ましい。

本発明組成物中に他の成分９例えば増量剤、安定化剤、
緩衝剤９等張化剤等の成分を配合することは本発明の目
的をいちじるしく損うことがない限り自由であり、これ
らによって本発明は限定されない。例えば本発明組成物
を凍結乾燥製剤とするために糖類、アミノ酸類を自由に
配合してよい。

本発明組成物の主要な形態は水性液であるが。

水性液とするためにあらかじめ準備された。すなわち水
性液用の形態も含まれる。

具体的な組成物形態例をもって示せば下記１）〜ＩＶ）
を挙げることができる。

１）同一水性液中にｔＰＡおよびジイソシアネートと結
合したゼラチン部分加水分解物（以下。

本発明に係る添加物と呼ぶ）が共存する１１）ｔＰＡお
よび本発明に係る添加物が別々の水性液として準備され
るが２両者は用時に一体となるように組合せて与えられ
る １ｌｌ）　ｔＰＡは粉末（例えば凍結乾燥粉末）として
準備され９本発明に係る添加物は水性液として準備され
るが１両者は用時に一体となるように組合せてムｊえら
れる ｊｖ）　ｔＰＡ粉末（例えば凍結乾燥粉末）および本発
明に係る添加物の粉末（例えば凍結乾燥粉末）が一体の
ものとして準備される。これを用時溶解するために適当
な水性液が用意され、これをさらに組合せて与えること
は自由である。

本発明組成物の製造は所望の組成物形態に応じて。

それぞれにおける通常の製造方法に従っておこなえばよ
い。−例を示せば次のごとくである。ｔＰＡ水溶液をバ
イアルに分注し、凍結乾燥してｔＰＡ含有粉末のバイア
ルを用意する。別に本発明に係る添加物の水溶液をバイ
アルに分注し、用意する。

両者を組合せて本発明組成物とする。

（４）作用 本発明の作用はｔＰＡの水に対する溶解度の上昇であり
、それによってｔＰＡの高濃度水溶液が提供される。従
って具体的な例としては高力価のｔＰＡ含有注射剤が提
供される。後記実験例によれば。

ｔＰＡの水に対する溶解度を力価単位（ｕ）で示せばジ
イソシアネートと結合したゼラチン部分加水分解物を添
加しない場合には２１４４ｕ／ｍｌであったが、当該物
を添加する場合には、その１％で３４０４２　ｕ　１ｍ
ｌ、　２．５　％で５９８４５　ｕ　１ｍｌ、　　５％
で１０６９２３ｕ／ｍｌ、　１０％で１３８０３８　ｔ
１／ｍｌであった。すなわち溶解度に対する飛躍的な増
大作用が観察されるのである。

（５）実施例 以下に記載する実施例によって本発明をさらに具体的に
説明する。

実施例１ ｐＨ７，５（７）　０．０３　Ｍリン酸緩衝液１００ｍ
１中にジイソシアネートと結合したゼラチン部分加水分
解物１０ｇ、マユトールミ０＆、ｔＰＡｌ千万単位を含
む水溶液を無菌的に調製し１．ｍｌずつバイアルに分注
し凍結乾燥し密封する。

別に注射用蒸留水２ｍｌを含むアンプルを用意し溶解用
のアンプルとする。

実施例２ 無菌的に調製したｔＰＡ粉末１千万単位と、無菌のマニ
トール１０ｇを均一に混合し、１バイアル当りｔＰＡが
１０万単位となるように充填し密封する。

別に、　０．０１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７，５）　２０
０　ｍｌ中にジイソシアネートと結合したゼラチン部分
加水分解物１０ｇを含む溶液を無菌的に調製し２ｍｌず
つアンプルに分注し、溶解用アンプルとする。

実施例３ ０．０３Ｍリン酸緩衝液１００　ｍｌ　１９月こジイソ
シアネートと結合したゼラチン部分加水分解物１０．！
ｉ’、　　グリシン４ｇを含む水溶液を無菌的に調製し
凍結乾燥後粉末化する。この粉末にｔＰＡ粉末１千万単
位を加え均一に混合し、１バイアル当りｔＰＡが１０万
単位となるように充填し密封する。

別に注射用蒸留水２　ｍｇを含むアンプルを用意し溶解
用のアンプルとする。

発明の効果 以下の実験例によって本発明の詳細な説明する。

実験例１ り′ ｔＰＡを小試験管に１０００ｕ４一つとり、これに水５
０μｌまたは下記添加物（１）〜（６）の５％水溶液５
０μｌを加えてよく混合し、遠沈し、一定量の上澄液を
とって０．１．Ｍ）リス塩酸緩衝液（ｐＩ（８，ＢＳＡ
含有）で希釈し、フィブリンプレートによるｔＰＡの活
性を測定した。

（１）　　ヒドロキシエチルスターチ（ＨＥＳと略記）
（２）低置換ヒドロキシエチルスターチ（ヘスパンダー
と略記） （３）エチレンオキサイドプロピレンオキサイド共重合
体　（プルロニックと略記） （４）プルラン （５）デキストラン （６）　　ジイソシアネートと結合したゼラチン部分加
水分解物　（ヘマセルと略記） 結果 結果を図１に示す。図１は水中または５％の各添加剤水
溶液中におけるｔＰＡの溶解度をｕ　／１ｆｒｌによっ
て示した棒グラフである。

図１よりジイソシアネートと結合したゼラチン部分加水
分解物がｔＰＡの水に対する溶解度をいちじるしく増大
する作用をもつことが判明する。

実験例２ 実験例１において添加物（１）〜（６）の５％水溶液の
代ワリに１％へマセル水溶液、　　２．５％ヘマセル水
溶液、５９６ヘマセル水溶液、１０％ヘマセル水溶液を
使用した点を除いて実験例１記載と同様におこない、ヘ
マセル水溶液の濃度とｔＰＡの水に対する溶解度との関
係を求めた。

結果 結果を表１に示す。表１を図示すると図２のどと（にな
る。

図２は各種濃度のへマセル水溶液中におけるｔＰＡの溶
解度をｕ　／ｍｌによって示したグラフである。

図２よりジイソシアネートと結合したゼラチン部分加水
分解物の濃度の上昇にともないｔＰＡの水に対する溶解
度が増大することが判明する。

表１

【図面の簡単な説明】

図１は、水中または５％の各添加剤水溶液中におけるｔ
ＰＡの溶解度を示す棒グラフである。 図２は、ヘマセル水溶液の濃度とヘマセル水溶液中にお
けるｔＰＡの溶解度との関係を示すグラフである。

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）ジイソシアネートと結合したゼラチン部分加水分
   解物を必須成分とする水性液または水性液用の組織プラ
   スミノーゲン活性化因子含有組成物
2. （２）ジイソシアネートと結合したゼラチン部分加水分
   解物の平均分子量が３５０００である特許請求の範囲第
   １項記載の組織プラスミノーゲン活性化因子含有組成物