JPS6242055A - カテコ−ルアミン最終代謝産物分析装置 - Google Patents

カテコ−ルアミン最終代謝産物分析装置

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JPS6242055A
JPS6242055A JP60182759A JP18275985A JPS6242055A JP S6242055 A JPS6242055 A JP S6242055A JP 60182759 A JP60182759 A JP 60182759A JP 18275985 A JP18275985 A JP 18275985A JP S6242055 A JPS6242055 A JP S6242055A
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JP
Japan
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acetonitrile
final metabolite
silica gel
catechol amine
moving phase
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JP60182759A
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Tomio Fujita
登美雄 藤田
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 イ、技術の利用分野 本発明は、尿中のカテコール最終代謝産物を定量分析す
る液体クロマログラフ装置に関する。
口、従来技術 尿に含まれているバニリルマンデル酸(以下、VMAと
呼ぶ)やホモバニリン酸(以下、HVAと呼ぶ)等のカ
テコール最終代謝産物の測定は、神経芽細胞腫のスクリ
ーニングの目的で液体クロマトグラフ装置を使用して行
なわれているが、尿中に含まれている夾雑物を除去する
ために酢酸エチル等の有機溶媒による抽出操作を必要と
し、分析作業に手間がかなるという問題があった。
ハ、目的 本発明はこのよな問題に鑑み、抽出作業を不要として迅
速に分析を行なうことができるカテコールアミン最終代
謝産物分析用の液体クロマトグラフ装置を提供すること
を目的とする。
二0発明の構成 すなわち、本発明が特徴とするところは、酸性緩衝液と
アセトニトリルの混合溶液を移動相に、またシアノプロ
ピル基を化学結合したシリカゲル坦体を固定相に使用し
た点にある。
ホ、実施例 そこで、以下に本発明の詳細を図示した実施例に基づい
て説明する。
第1図は、本発明の一実施例を示すものであって、図中
符号1はシアノプロピル基が化学結合されたシリカゲル
粒子を充填したカラムで、一端がポンプ2を介して後述
する移動相液3を収容する容:A4に、他側が電気化学
検出器5に接続している。3は、前述の移動相液で、酒
石酸や酢酸、すン酸等の酸性緩衝液と5容量パーセント
のアセトニトリルを混合して調製されている。なお、図
中符号6は、試料注入口を示す。
この実施例において、カラムlに移動相液3を流した状
態で、採取した尿をカラム1に注入すると、尿に含まれ
ている夾雑成分は、極めて短時間で分離して検出器5に
流入する。他方、目的成分であるVMA、HVAは、夾
雑成分の影響を受けることなく相互が分離したピークと
して電気化学的検出器により検出される。
[実施例] 移動相液として5ミリモルの酒石酸を95容量%とアセ
トニトリルを5容量%とを混合してなるものを、またカ
ラムとして5gmの球状シリカ坦体にシアツブビル基を
化学結合した充填剤を内径6mm、長さ15c■のチュ
ーブに充填してなる液体クロマトグラフ装置を使用し、
標準VMA、VLA及びHVAを蒸留水に混合溶解して
なる標準試料について分析を行なったところ、第2図に
示した。J:’3にVMA、VLA及びHvAのピーク
をそれぞれ分離して検出することができた。
次に、平常な小児と神経芽細胞腫恵児の尿を移動相液と
同一組成からなる希釈液により10倍程度に希釈してか
ら上述した装置により分析を行なったところ、試料注入
から10分経過した時点で、それぞれ第3図(イ)(ロ
)に示したように。
尿中に含まれる夾雑物の影響を受けることなくVMAと
HVAのピークを分離して検出することができ、しかも
病状に対応してVMA及びHVAのピーク高さを顕著に
区別して検出できた。
このことから1尿に含まれているVMA及びHVAを夾
雑物の影響を受けることなく高い精度で定量できること
が解った。
また、アセトニトリルの濃度を3乃至8容量%の範囲内
で変化させて測定したところ、アセトニトリルの濃度が
小さくなると目的成分が溶出するまでの時間が畏くなる
ものの、実用り何らの問題はなかった。
また、アセトニトリルと酸性緩衝液の容T−比を変化さ
せる。いわゆるグラジェント溶離法を適用して分析を行
なったところ、目的成分溶出時間を短縮することができ
た。
また、検出器として蛍光検出器を使用したところ、同上
の電気化学的検出器と同様に妨害成分の影響を受けるこ
となく目的成分だけを選択的に検出することができた。
なお、上述した実施例においては、神経芽細胞腫の患者
の検診に有用なVMA、VLA、HVAを対象として説
明したが、他のカテコールアミン採取最終産物について
も検出することができた。
また、酒石酸の代わりに酢酸やリン酸等の他の酸性緩衝
液を使用したところ何ら検出精度に影響を与えることは
なかった。
へ、効果 以上、説明したように本発明によればアセトニトリルと
酸性緩衝液の混合物を移動相に、またシアノプロピル基
を化学結合したシリカゲル坦体を固定相に使用したので
、せいぜい希釈程度の前処理を施すだけでカテコールア
ミン最終代謝産物を高い精度で短時間に定量的に分析す
ることができ、神経芽細胞腫の集団検診等における検体
の迅速処理に極めて有効な装置を実現することができる
【図面の簡単な説明】
第1図は1本発明の一実施例を示す装置の構成図、第2
図及び第3図は、同一1−装置による測定結果の一例を
示すクロマトグラム図である。

Claims (1)

    【特許請求の範囲】
  1. アセトニトリルを3乃至8容量パーセントで含む酸性緩
    衝液を移動相に、シアノプロピル基を化学結合したシリ
    カゲル坦体を固定相に備えてなるカテコールアミン最終
    代謝産物分析装置。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS56154519A (en) * 1980-05-02 1981-11-30 Hiroyuki Kanai Rotary ring for yarn spinning
JP2019168319A (ja) * 2018-03-23 2019-10-03 国立大学法人名古屋大学 小児がん検査用尿中代謝物マーカー

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS56154519A (en) * 1980-05-02 1981-11-30 Hiroyuki Kanai Rotary ring for yarn spinning
JPS6242055B2 (ja) * 1980-05-02 1987-09-07 Hiroyuki Kanai
JP2019168319A (ja) * 2018-03-23 2019-10-03 国立大学法人名古屋大学 小児がん検査用尿中代謝物マーカー

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