JPS62273905A - 化粧料 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ３、発明の詳細な説明 〔産業上の利用分野〕 本発明はＮＱい保湿性を有し、べとつきのない化粧料に
関し、詳しくは、皮膚や毛髪に対して温和で良好な潤い
と保湿性を与える化粧料に関する。

本発明の化粧料は、化粧料としての通常の用途に使用さ
れ、また人の皮膚や毛髪に使用される。

〔技術の背景および従来技術の説明〕

化粧料は、皮膚に対して水分と潤いを与え、毛髪に対し
て光沢や柔軟性を−与えることを重要な目的の−とする
。このために化粧料には、吸湿性の大きい保湿剤を配合
し、このような保湿剤として、グリセリン、１．３−ブ
チレングリコール、プロピレングリコールなどの多価ア
ルコール、ヒアルロン酸などの水溶性高分子あるいは２
−ピロリドン−５−カルボン酸のナトリウム塩、アミノ
酸塩またはトリエタノールアミン塩などを用いている。

一方、キトサンは、エビやカニなどの甲殻類の殻に含ま
れるキチンを脱アセチル化して得られる多蔚類であって
、Ｄ−Ｐ−グルコサミンがβ−１，４結合によって直鎖
状に結合した多朝類であり、キトサンを分解して得られ
る低重合度のキトサンも知られている。キトサン尋分解
する方法には、塩酸による加水分解法、亜硝酸による酸
化分解法およぴ塩素による酸化分解法などの化学的な方
法、および酵素（キトサナーゼ）による方法がある。キ
トサナーゼを生産する微生物として、バチルス（Ｂａｃ
ｉｌｌｕｓ　ｓｐ、　）　　Ｒ−４（トミナガ他：ビオ
ヒミ力・工・ビオフィジ力・アクタ（Ｙ、　Ｔｏｍｉｎ
ａｇａｅｔ　ａｔ　：　Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ　ｅｔ　
Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ　Ａｃｔａ　）第４１０巻第１４
５−１５５頁（１９５７年）〕、ペニシリウム・イスラ
ンディクム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｉｓｌａｎｄｉｃ
ｕｍ　）　　（ディー・エム・フェントン他：ジャーナ
ル・オブ・ジェネラル・ミクロバイオロジー（Ｄ、Ｍ、
Ｆｅｎｔｏｎ　ｅｔ　ａｌ　Ｊｏｕｒｒ＋ａｌ　ｏｆ　
Ｇｅｎｅｒａ１Ｍｉｃｒｏｂｉｏ４ｏｇ）’　）　Ｗ　
１２６巻第１５１−１６５頁（１９８１年）〕、バチル
ス　（口ａｃｉｌｌｕｓ　Ｓｐ、　）　　９９−５　（
嘱内：日本農芸化学会、昭和５９年度大会講演要旨集第
５５０頁）、ストレプトミセス（５ｔｒｅｐｔｏ＋ａｙ
ｃｅｓ　）　Ｎ［Ｌ６　（ジェイ・ニス・プライス他：
ジャーナル・オブ・バクテリオロジー（Ｊ、Ｓ、　Ｐｒ
１ｃｅ　ｅｔ　ａｌ　：　Ｊｏｕｎａｌ　ｏｆＢａＣｔ
ｅｒｉＯＩＯｇＹ　）第１２４巻第１５７４−１５８４
頁（１９７５年）〕、ストレプトミセス・グリセウス（
Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｇｒｉｓｅｕ５　）　　Ｃ
オオタカラ他：キチン・キトサン・アンド・リレイテッ
ド・エンザイムス（Ａ、０ｈｔａｋａｒａ　ｅｔ　ａｌ
　：　Ｃｈｉｔｉｎ、　Ｃｈｉｔｏｓａｎａｎｄ　Ｒｅ
１ａｔｅｄ　　Ｅｎｚｙｍｅｓ　）第１４７−１６０頁
’　（１９８５年）アカデミツク・プレス〕およびバチ
ルス（［１ａｃｉｌｌｕｓ　Ｓｐ、　）　ＮＯ，７−Ｍ
　　（特願昭６０−１２０６７３号）があり、キトサン
が植物病原性のカビの生育に影響を及ばすこと〔ピー・
ニス・ストエラセル他：フイトパソロギッシエ・ツアイ
トシュリフト（Ｐ、　５ｔｏｅｓｓｅｌ　ｅｔ　ａｌ　
：ｒ’ｈｙｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｓｃｈｅ　Ｚｅｉｔ
ｓｃｈｒｉｆｔ　）第１１１巻第８２−８９頁（１９８
４年）、シー・アール・アラン他：エクスベリメンタル
・マイコロジー（Ｃ，Ｒ，Ａ１１ａｎ　　ｅｔ　ａｌ　
：　ＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＭｙｃｏｌｏｇｙ　）第
３巻第２８５−２８７頁（１９７９年）〕およびキトサ
ンの分解物かえん豆のカビの生育の抑制に影響を及ぼす
こと〔ディー・エフ・ケンドラ他：エクスペリメンタル
会マイコロジー（Ｄ、Ｆ、　Ｋｅｎｄｒａ　ｅｔ　ａｌ
　Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　Ｍｙｃｏｌｏｇｙ）第８
８第２７６−２８１頁（１９８４年）〕が知られ、さら
にキトサンおよびキトサンの軽度分解物が細菌の生育を
抑制すること（特願昭６０−２２３７４９号）およびキ
トサンならびにキトサンの分、解産物によって植物病害
を防除すること（特願昭６１−４０４００号）が提案さ
れている。

またキトサンの水に性塩を毛髪の手入れ用薬剤に加え、
それによって毛髪の状態を調整すること（特開昭５４−
９５７４０号公報）、Ｄ−グルコサミンのアミノ糖を高
級脂肪酸とともに乳化剤または洗浄剤として化粧料に使
用すること（特開昭５９−３９８１３号公報）およびＤ
−グルコサミンのアミノ糖を水浴性カルボキシビニルポ
リマーとともに増粘剤として化粧料に使用すること（特
開昭５９−３９８１４号公報）が提案されている。

本発明者らは、キチンの脱アセチル化物のキトサンにつ
いて研究を続けているが、キトサンを、バチルスＮｏ、
７−Ｍ（微工研菌寄第８１３９号）により生産されたキ
トサナーゼによって分解して得たキトサンオリゴ糖が高
い保湿性を有し、これを化１暫Ｉψ１′ｌＩ′＋ナナー
ン身Ｉ−ベン１どごンがｔｘど一古虐に対して、温和で
良好な潤いを与えることを見出し、この知見にもとづい
て本発明に到達した。

〔発明の目的および発明の要約〕

本発明の目的は、高い保湿性を有し、べとつくことがな
い化粧料を提供することにあり、詳しくは、人の皮膚や
毛髪に対して温和で良好な潤いおよび保湿性を与えるこ
とができる化粧料を提供することにある。

本発明は、化粧料にキトサンオリゴ糖を配合し、それに
よって化粧料に、べとつくことがなく、すぐれた保湿性
を与え、これを皮膚や毛髪に使用したとき、皮膚および
毛髪に温和で良好な潤いと保湿性を与え得る特性を付与
した化粧料である。

本発明の化粧料に配合するキトサンオリゴ聾は、Ｄ−グ
ルコサミンの重合度が２〜８のキトサンオリゴ粘である
のが好ましく、このキトサンオリゴ粘は、キトサンを、
バチルス属に属する微生物により生産され、ｐＨ５〜１
１において安定なキトサナーゼにより分解することによ
って得られるが、このようなキトサナーゼは、バチルス
Ｎｏ、　７−　Ｍ（微工研菌寄第８１３９号）によって
生産することができる。

〔発明の詳細な説明〕

本発明の化粧料において、キトサンオリゴ塘を配合する
化粧料は、皮膚または毛髪に使用するいかなるものであ
ってもよいが、化粧水、ヘアクリーム、口紅、クリーム
および整髪料に使用するのが好ましい。

本発明の化Ｍ料において、キトサンオリゴ糖は、化粧料
に保湿性を与え、これを使用したときに、皮膚または毛
髪に温和で良好な潤いと保湿性を与える限りにおいて、
いかなる量においても配合することができるが、通常化
粧料に対して０．５〜２０％（重ｆｆ１）の量において
配合される。

本発明の化粧料に配合するキトサンオリゴ糖は、化粧料
にすぐれた保湿性を与えるが、べとつくことがなく、こ
れを使用したときに、皮膚または毛髪に、温和で良好な
潤いと保湿性を与える限りにおいて、いかなるものであ
っても、これを使用することができるが、Ｄ−グルコサ
ミンの重合度が２０以下のもの（特に好ましくはＤ−グ
ルコサミンの重合度が２〜８のもの）であって、ＨＬＷ
を含まないものを使用するのが好ましい。

キトサンオリゴ糖は、単体または塩などのいかなる形態
のものであっても、これを化粧料に配合することができ
るが、水に溶解しうる酸の塩、たとえば塩酸、硝酸、ギ
酸、酢酸、グルタミン酸またはアスコルビン酸の塩を使
用するのが好ましい。

本発明の化Ｈａに配合するキトサンオリゴ替は、キトサ
ンを公知手段により分解し、所望の特性を有するキトサ
ンオリゴ糖を分別取得することによって得られるが、Ｉ
Ｉ！ＬｔＩ！まで分解することのないキトサナーゼによ
りキトサンを分解することによって得るのが好ましく、
キトサナーゼは、バチルス属に属する微生物により生産
され、５〜１１のｐＨ領域において安定なキトサナーゼ
を使用するのが好ましく、さらにバチルスＮｌＮ１１Ｌ
７−微工研菌寄第８１３９号）により生産されたキトサ
ナーゼを使用するのがさらに好ましい。

バチルスＮｏ、７−Ｍは、長崎県南高来郡小浜町雲仙の
原生沼の土壌よりキチンまたはキトサンを唯一の炭素源
とする培地に生育しうる細菌として分層されたバチルス
（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｐ、　）　Ｎｏ、　７株を親株
として、この親株をＮ−メチルーダ−ニトロソ−Ｎ−ニ
トロソグアニジン（ＮＴＧ）で処理して突然変異を誘発
させ、得られたストレプトマイシン耐性の変異株の中か
ら、高活性のキトサナーゼを生産しうるものとして分離
された変異株であって、微工研菌寄第８１３９号（ＦＥ
ＲＮ　Ｐ　−８１３９）として通商産業省微生物工業技
術研究所に寄託されている。

バチルスＮｏ、　７−　Ｍの菌学的性質は以下に示され
る。

Ａ、細胞の形態 （１）細胞の形および大きさ：短桿菌、（肉汁および肉
汁寒天斜面培養、３７℃、２４〜７２時間の培養） （２）細胞の多形性の有無：無し、 （３）運動性の有無：有り、 （肉汁寒天半流動高層穿刺培１） （４）胞子の有無二有り、内生胞子および裸の胞子、球
状、 〔トーナー（Ｄｏｒｎｅｔ　）の染色法およびウィッツ
（ＷｌｔＷ）変法〕 （５ングラム染色性：ｇ）性、 〔肉汁寒天斜面培養、３７’Ｃ，１８時間、ヒュヅカー
（Ｈｕｃｋｅｒ　）の変法によりＱ色〕口、各ｔ８地に
おける生育状態 （１）肉汁寒天平板培養（３７℃、２４〜１６８時間）
：糸状の周縁を有する円形で、***した乳白色のコロニ
ーを形成する。コロニーの表面は凹凸でやや光沢があり
、半透明である。時間の経過とともに盛上ってくる１色
葉は生産しない。

（２）肉汁寒天斜面培養（３７°Ｃ，２４〜１６８時間
）：拡布状に盛上った乳白色のコロニーを形成する。

コロニーは凸円形の***があり、光沢がある。生育は良
好で、時間とともに鉱がってくる。０塁は生産しない。

（３）　肉ｆＮＦｉ体ｔ１５ａ　（３７°Ｃ，２４−ｔ
６ｇ　時間）　　：表面に膜を形成しない。時間ととも
に全体的に濁ってくる。底部に葉状（顆粒状）の沈デン
が形成され、徐々に多くなってくる。

（４）肉汁ゼラチン穿刺培養（２５°Ｃ１２４〜１６８
時間）： 穿刺線に沿って生育し、液化する。表面および内部は漏
斗状に生育し、液化する。液化部分は内温する。

（５）リドマスミルク（３７℃、２４〜１６８時間）　
＝２日後から上部が少しずつ液化し、４日目には色は完
全に変色し、酸性となった。凝固はしない。

時間の経過とともに、液化は進み、半透明になった。

Ｃ・生理学的性質 口→硝酸塩の還元ニー （硝酸塩肉汁培地、３７°Ｃ１２４〜１２０時間）（２
）脱窒反応ニー （駒形らの方法、発酵管を使用、３７９Ｃ１２４〜１２
０時間） （３）ＭＲテスト：＋ （３７°Ｃ１２４〜１６８時間） （４）ＶＰテスト（アセチルメチルカルビノール生成試
験：＋ （３７℃、２４〜１６８時間） （５）インドールの生成ニー （３７℃、２４〜１６８時間） （６）硫化水素の生成ニー （ＴＳＩ寒天法、３７℃、２４〜１６８時間）（７）デ
ン粉の加水分解：＋ （３７℃、２４〜１６８時間） （８）クエン酸の利用 （コーザーの培地、３７°Ｃ１２４〜１６８時間）：　
− （クリステンセンの培地、３７°０１２４〜１６８時間
）：＋ （９）無機窒素源の利用（３７６０１２４〜１６８時間
） 硝酸塩：未定、 アンモニウム塩：未定、 Ｈｏ）色素の生成 （マンニット・酵母エキス寒天斜ｏ′ｉＪ培地）ニー〔
キング（Ｋｉｎｇ）　　Ａ５′！：天斜面培地〕ニー（
ｌ］）蛍光の有無二煎し く１２）ウレアーゼ：＋ （クリステンセンーウレア寒天培地、３７°ｃ１２４〜
１６８時間） （１３）オキシダーゼ：＋ （肉汁寒天培地、３７°０１２４〜４８時間）（１４）
カタラーゼ：＋ （肉汁寒天培地、３７６０１２４〜４８時間）（１５）
生育の範囲＝　（肉汁寒天培地）温度：未定、 ｐＨ：５〜１０゜ 添加食塩ｎ度：未定、 （１６）酸素に対する態度：好気性 （１％グルコース肉汁高層寒天培地、３７°ｃ１２４〜
７２時間） （＋７）Ｏ−Ｆテスト〔ヒューーライフソン（Ｉｌｕｇ
ｈ　−Ｌｅｉｆｓｏｎ　）法、３７°Ｃ，Ｄ−グルコー
ス〕　：発酵的に酸を生成する。

（＋８）ｕ類からの酸およびガスの生成の有無（３７℃
、２４〜１６８時間）： 剪　類　　　　　酸　　　ガス Ｄ−グルコース　　十　　　　− Ｄ−マンノース　　−− Ｄ−ガラクトース　−　　　− Ｄ−フラクトース　十　　　　− Ｌ−アラビノース　−− Ｄ−キシロース　　−− Ｄ−ソルビット　　−− Ｄ−マンニット　　−− イノシヅト　　　　−− マルトース　　　　＋　　　　− サッカロース　　　十　　　　− ラクトース　　　　−　　　　− デン粉　　　　　　十　　　− セルロース　　　　−− グリセリン　　　−− 以上の菌学的性質について、パージエイス・マオロジー
（Ｂｅｒｇｅｙ’　ｓ　Ｍａｎｕａｌ　ｏｆ　Ｄｅｔｅ
ｒｍｉｎａｔｉｖｅＢａｅｔｅｒｉｏｌｏｇｙ　）の第
８版（１９７４年）を検索したところ、ＮＯ，７−Ｍ株
はバチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　）属に属するのが相当
であることがわかった。

バチルスＮ１１７−Ｈにより生産されたキトサナーゼの
酵素化学的性質は以下に示すとおりである。

（１）作　用： キトサンに作用し、分子の内部鎖から任意にβ−１，４
結合を分解して、主としてキトサンオリゴ１！　（Ｇｌ
ｅＮ）　　（ｎ＝２〜８）　（２量体〜８量体）を生成
する。キトサンオリゴ糖は高速液体クロマトグラフィー
を用いてキトサン分解液から分層することができる。こ
の分解液におけるキトサンの分解度は約４５％である。

カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）にも作用し、あ
る程度はこれを分解するが、キチンには全く作用しない
。

（２）作用温度範囲および最適作用温度：可溶性キトサ
ンを基質とした場合、８０°Ｃまで作用し、最適作用温
度は５０°Ｃである。

ｐＨ６Ｊにおいて１０分間反応させた場合の温度と比活
性の関係を第１図に示す。

（３）作用ｐ＋（範囲および最ａｐ）ｌ：ｐＨ３〜９の
範囲において作用し、最ａｐ＋＋はｐｌ！　６である。

１％可溶性キトサンｌ　ｍｌｌに各ｐＨの緩衝液２ｒｒ
Ｌｉｌおよび酵素液Ｉ　ｍ／を加えた反応液を３７６Ｃ
において１０分間反応させた場合のｐＨと酵素の比活性
の関係を第２図に示す。

（４）熱安定性： ５０℃における１５分間の保温まで、はぼ安定で、６０
°Ｃにおける１５分間の加熱により、酵素の約４０％が
失活し、７０°Ｃにおける１５分間の加熱により、完全
に失活した。

温度と比活性の関係を第３図に示す。

（５）ｐＨ安定性： ０．１Ｍ緩衝液中で３０’（：において２時間展層した
後、残存する酵素活性を測定したが、ｐＨ５〜１１の範
囲において安定であった。ｐＨ１０〜１１において安定
であることは、バチルスＮｏ、７−Ｈにより生産された
キトサナーゼの大きな特徴の一つである。ｐＨと比活性
の関係を第４図に示す。

（６）阻害剤： バチルスＮｏ、７　１４により生産されたキトサナ−ゼ
は、１×ｌＯＭの終濃度のＨｇＣ１。

ＰｂＣ１、ＡｇＮ０　　、およびＰＣＭＢの存在により
はば１００％が阻害された。

（７）基質特異性： 種々の基質を使用し、基質の終濃度を０．２５％とした
時に、酵素反応液４　ｗｔｌｊ当り酵素蛋白質！ｒｒｔ
９によって１時間後に遊離する全還元糖とヘキソサミン
のｆｆｉ（７７Ｌｇ／ＴＬｇ蛋白質／時）を測定した。

その結果が第１表に示される。

（以下余白） 第１表　基質特異性 注）　※：ライシッヒ（Ｒｅ１５５１ｇ　）法による。

バチルスＮｏ、　７−　Ｈにより生産されたキトサナー
ゼは、コロイダルキトサン、可溶性キトサンおよびグラ
イコールキトサンをよく分解し、カルボキシメチルセル
ロース（ＣＭＣ）も若干分解したが、粉末キトサンには
作用しなかった。またコロイダルキチン、グライコール
キチン、粉末キチンおよびメチルセルロースは全く分解
しなかった。

（８）分子量： ５ＤＳ−ポリアクリルアミド電気泳動法により分子量を
測定した結果を第５図に示す。第５図において（０）は
バチルスＮＮ１１Ｌ７−により生産されたキトサナーゼ
の分子量であって、約４１　、　ＯＱＱである。

セファデックスＧ−１００を用いたゲル濾過法により分
子量を測定した結果を第６図に示す。第６図において（
○）はバチルスｌｈ７−Ｍにより生産されたキトサナー
ゼの分子量であって、約３０．０００である。

（９）＃業力価の測定法： ＩＱの粉末キトサン（２８メツシユ）を５０ｍ／！の０
．１Ｍ酢酸水着液に溶解し、Ｏ，１Ｍ酢酸ナトリウム水
溶液でｐｌ＋　６．０に調整した後、０．１Ｍ酢酸Ｉｊ
１１衝Ｈ（ｐＨ：　６−０）を加えて、全容をｌｏＯｍ
Ｊにして、基質の１％可溶性キトサン溶液を調製する。

３７°Ｃにおいて５分間ブレインキュベートした基質の
１％可溶性キトサン溶液１ｒｒＬβに、同様にブレイン
キュベートした酵素液１ｒｒＬβを加え、３７°Ｃにお
いて正確に１０分間酵素反応を行なわせる。その後反応
液を３分間煮沸して＃累度応を停止させ、反応液中に生
成した還元糖を定量する。

この条件において１μモルのグルコサミンに相当する還
元塘を遊離させる酵業量を、１単位（ｕｎｌｔ）のキト
サナーゼ活性とする。

以下において本発明を参考例、実施例および試験例によ
ってさらに詳しく説明する。

参考例１ （種培養の調ａｌｌ） ２５０　ｍｌｌ容三角フラスコに、酵母エキス０．８％
、ペプトン０．４％、肉エキス０．２９６、コロイダル
キトサン０・５％を含む液体培地（ｐＨ：　７．２）　
　５０ｍ１ｌを入れ、常法により殺菌した後、これに予
め液体培養したバチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｐ−）
　Ｎｏ、　７−Ｍ　　（ＦＥＲＭ　Ｐ　−８１３９）を
接種し、３０°Ｃにおいて、１日間振とう培養した。

（酵素生産用培養液の調製） ５１容三角フラスコ２本に、上記と同一の組成の液体培
地をそれぞれｌＥずつ入れ、常法により殺菌した後、こ
れに上記で得られた種培養液４０ｒｒＬｌを接種し、３
０６Ｃにおいて、４日間振とう培養した。培養液を６，
０００　ｒ、ｐ、ｍにおいて遠心分票して、菌体を除去
し、得られた上澄液のキトサナーゼの活性を前記の酵素
力価の測定法によって測定した。上ｇ１’ｅ　ｔ　ｒｎ
ｌ当り０．９９ｆｆｉ位であった。

（酵素液の精製） 上記で得られた上澄液を混合し、得られた混合液ＩＪＩ
　ｊ！に固体硫安１，０１５　ｊｐ　　（硫安８０％飽
利に相当する）を加え、濾過し、得られた沈デン物を蒸
留水に溶解し、１７７ｍｇとした。この酵素液を蒸留水
、引き続いて、０．０２　Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ：　ｅ
、ｏ）に対して透析した後、得られた酵ｆ液を、予め０
．０２　Ｍリン酸Ｎ衝液で平衡化したＣＭ−セファデッ
クスＣ−５０を充填したカラム（２，６Ｃｉ（径）Ｘ４
５ｃｆＩＬ（長さ）〕に流してキトサナーゼを吸首させ
た。はとんどの不純迅白質は素通り区分に集まっていた
。このカラムを０．０２Ｍ　ＩＪ　ン酸ＭｗＩｆＦＩ１
３５０　ｍ／！　テ洗浄シタｍ、Ｏ〜０．５Ｍの塩化ナ
トリウムで直線的濃度勾配により酵素出口質を溶出した
。

次にキトサナーゼ活性を示した第２１８〜２４０のフラ
クションを合し、これをダイアフローメンブレンフィル
ターＰＭ−１０（アミコン社製品）を用いた限外濾過装
置で１７倍に濃縮し、この濃縮液に、セファデックスｃ
−ｔｏｏを用いるゲル濾過を行なった。

このゲル濾過のキトサナーゼ活性を示した第５０〜６３
のフラクションを合し、再びＣＭ−セファデックスＣ−
５０によるカラムクロマトグラフィーを行なった。前回
と同じ条件で酵素を吸善し、０〜０．５Ｍの塩化ナトリ
ウムで直線的濃度勾配によりＭ素田白質を溶出した。

参考例２ ２５〇−容三角フラスコに、キトサン（脱アセチル化度
＝９９％）５ｇを取り、これに脱イオン水５０−および
ＩＮ酢酸２７．５−を加え、充分撹拌した後、脱イオン
水を加えて、全量を１００ｍｊ＋にした。

このキトサン酢酸溶液のｐＨは５．７４であった。この
キトサン酢酸溶液を３７６Ｃの恒温槽において１５分間
ブレインキュベートした。

これとは別に、参考例１のＣＭ−セファデツクスＣ−５
０によるカラムクロマトグラフィーで得たキトサナーゼ
溶液を希釈して、１０．５　ｕｎｉｔ　／１ｒｄｌとし
、そのｌＯ−を試験管に取り、前記と同様にブレインキ
ュベートし、これを前記のキトサン酢酸溶液に加え、３
７℃の恒温槽において反応させた。１時間４０分後に三
角フラスコを沸とう浴に６分間入れ、反応液を加熱して
反応を停止させた。

反応液の還元糖の生成量を、Ｄ−グルコサミン塩酸塩を
標準試料として、測定し、２２．５■／ｒｎｉの結果を
得た。反応液を遠心分層し、さらに濾紙で濾過した後、
凍結乾燥して、６．１８．９’のキトサンオリゴ話粉末
を得た。

反応液の一部を高速液体クロマトグラフィーにかけて、
キトサンオリゴ塘の重合度別の生成量を調べた。

その結果は第７図に示すとおりであった。

第７図において、ヨコ軸はキトサンオリゴ着の重合度で
あり、そのタテ軸は生成したキトサンオリゴ粘における
それぞれの重合度のキトサンオリゴ１の含有比率（％）
である。第７図におけるそれぞれの重合度のキトサンオ
リゴ曹の含有比率は棒グラフの面積比によって示される
。

参考例３ ＩＮ酢酸２７．５−の代りに、ＩＮ乳酸３１−を使用し
たこと以外は、参考例２と同様にして、ｐ）Ｉ５．７４
のキトサン乳酸溶液をつくり、これを参考例２と同様に
して、反応液の還元ＩＦｆｌを測定し、キトサンオリゴ
塘の重合度別の生成量を調べ、そしてキトサンオリゴ糎
の粉末を得た。

６時間の反応における反応液の還元糖の生成量は２４．
３■／艷であり、そしてキトサンオリゴ琥の収量は６．
９２１１であった。

キトサンオリゴ塘の重合度別の生成量の測定の結果は第
８図に示すとおりであった。

第８図において、ヨコ軸はキトサンオリゴ替の重合度で
あり、そのタテ軸は生成したキトサンオリゴ糖における
それぞれの重合度のキトサンオリゴ曹の含有比率（％）
である。第８図におけるそれぞれの重合度のキトサンオ
リゴ粘の含有比率は棒グラフの面積比によって示される
。

次に試験例、実施例および比較例を挙げて、本発明をさ
らに詳しく説明するが、本発明はこれらの例示に限定さ
れるものではない。

試験例 （１）試料 （１−１）Ｌ−３試料 参考例３の方法で得たキトサンオリゴ［１５ｇを取り、
これにＩＮ乳酸８５ｍ７１を加え、充分撹拌した後、脱
イオン水を加えて、全量を１５０−とじ、キトサンオリ
ゴ刻の乳酸塩の１０％水浴液を調製した。

（１−２）Ａ−５試料 参考例２の方法で得たキトサンオリゴ［１５／ｉを取り
、これにＩＮ酢酸３０−を加え、充分撹拌した後、脱イ
オン水を加えて、全量を＋５０　ｒｎｉとし、キトサン
オリゴ諧の酢酸塩の１０％水溶液を調製した。

（１−３）グリセリン グリセリンの１０％水啓液、 （１−４）　　１．３−ブチレングリコール１．３−ブ
チレングリコールの１０％水溶液、（２）試験方法 試料２μｌをマイクロシリンジに取り、これを暢紙（Ｉ
ＸＩ偲）に塗布し、２５℃の温度および５０％の相対湿
度の恒温恒温の室内で、ＲＧ型電気天秤〔カーノ（Ｃａ
ｈｎ）社製〕により、この濾紙の重量変化を調べ、次式
における水分蒸発速度定数（ｋ）を算出した。

ΔＷ ｋ＝− （Ｗ：試料の重量、△Ｗ：１分当 りの試料の減少した重ｆｆ１） 測定は各試料について３回行ない、その平均値を算出し
た。

対照試料として、保湿剤を加えない精製水について同様
の試験を行なった。

（３）試験結果 試験結果は第１表に示すとおりであった。

ｋの値が小さいものは水分の蒸発速度が遅く、保湿性が
高い。

第１表によると、キトサンオリゴ式のＬ−３試料はグリ
セリンと同程度の保湿性を有し、またキトサンオリゴ式
のＡ−５試料は１．３−ブチレングリコールと同程度の
保湿性を寵することがわかる。

実施例１ 下記の処方により栄養クリームを調製した。

（１）スクワラン　　　　　　　　　　　８．０％（２
）２−エチルへキシルパルミテート　３．０％（３）ラ
ノリンアルコール　　　　　　　２．０９６（４）ショ
ートニングオイル　　　　　　３．０％（５）　ミツロ
ウ　　　　　　　　　　　　　２・０％（６）マイクロ
クリスタリンワックス　　２．０％（７）セタノール　
　　　　　　　　　　　２．５％（８）ポリオキシエチ
レン（２０）ソルビタンモノステアレート　　　　　　
　　２．０％（９）プロピレングリコールモノステアレ
ート（ｌＯ）香料　　　　　　　　０．２９６（１１）
キトサンオリゴ糖（参考例３）　　　８．０９６（１２
）メチルバラヘン０．２９６ （１３）Ｍ製水　　　　　　　　　　　　　　残り上記
の処方の（Ｉｔ　）〜（Ｉ３）の成分を７０℃に加熱し
て水相を調製し、上記の処方の（１）〜（１０）の成分
を加熱して融解した後、これに香料を加え、７０°Ｃに
保持して油相を調製した。水相に油相を加え、ホモミキ
サーで均一に乳化し、その乳化後、よく撹拌しながら、
３０℃まで冷却して製品の栄養クリームを調製した。

比較例１ 実施例１の処方において、キトサンオリゴ替の代りにグ
リセリンを使用し、実施例１と同様にして、栄養クリー
ムを調製した。

比較例２ 実施例１の処方において、キトサンオリゴ塘の代りに、
１．３−ブチレングリコールを使用し、実施例１と同様
にして栄養クリームを調製した。

試験例２ 実施例１１比較例！および比較例２の製品の栄養クリー
ムを等間パネラー２０名が使用し、下記の（Ａ）〜（Ｃ
）の項目毎に各５段階の評点評価ルア千ｆＸ　−ｑ　　
？　− （評点評価） （Ａ）使用直後の肌のべたつき ｌ：べたつく、 ２：ややべたつく、 ３：普通、 ４：ややさっばりする、 ５：さっばりする、 （ｎ）肌のしっとりさ Ｉ：がさつく、 ２：ややがさつく、 ３：普通、 ４：ややしっとりする、 ５：しっとりする、 （Ｃ）翌朝の肌のしっとりさ １：がさつく、 ２：ややがさつく、 ３：普通、 ４：ややしっとりする、 ５：しっとりする、 試験の結果は第２表に示すとおりであった。

第２表における記号は、各項目毎のパネラ−２０名の評
点の平均値を次のとおりに表わしたものである。

記　号　　パネラ−２０名の評点の平均値■　　　”　
　４．５〜５．０ ０　　　　３．５〜４．４ Δ　　　　　２．５〜３．４ ×１＠５〜２．４ Ｘ　Ｘ　　　　　１．０〜１．４ 第２表によると、実施例１の製品は、グリセリンを使用
した比較例１の製品および１，３−ブチレングリコール
を使用した比較例２の製品の栄養クリームよりもすぐれ
た使用感覚を有することがわかる。

実施例２ 下記の処方により化粧水を調製した。

（１）キトサンオリゴ箇　　　　　　　２０．０％（重
合度６〜８、グルタミン酸塩） （２）９５％エタノール　　　　　　　　１０．０％（
３）ポリオキシエチレン ソルビタンラウレート　　　　　　１．０％（４）香Ｂ
　　　　　　　　　Ｏ，１％（５）メチルパラベン　　
　　　　　　　０．１％（６）精製水　　　　　　　　
　　　　　残り（１）を（６）に均一に溶解し、これに
（２）、（３）　、（４）および（５）を均一に溶解し
たものを添加し、撹拌可溶化した後、濾過して製品の化
粧水を調製した。

実施例２の製品は使用時にべとつきを感じることがなく
、肌をしっとりとさせるものであった。

実施例３ 下記の処方により化粧水を調製した。

（１）９５％エタノール　　　　　　　　８．０％（２
）グリセリン　　　　　　　　　３．０％（３）プロピ
レングリフール　　　　　３．０％（４）キトサンオリ
ゴＭＯ番５％ （重合度２〜３） （５）し−アルギニン　　　　　　　　０．８２％（６
）　　ＥＤＴＡジナトリウム　　　　　　　０．０１％
（７）ポリオキシエチレン（２０） オレイルアルコールエーテル　　０．８％（８）香ａ　
　　　　　　　Ｏ，１％ （９）メチルパラベン　　　　　　　　０．１％（１０
）ＨＪ製氷　　　　　　　　　　　残り（２）、（３）
　、（５）、（６）および（１０）を均一に溶解したも
のに（４）を添加し、よく撹拌した後、これに（１）、
（７）、（８）、（９）を均一に溶解したものを添加し
、撹拌可溶化した後濾過して製品の化粧水を調製した。

実施例３の製品はなめらかな使用感触をもち肌に潤いを
与えるものであった。

実施例４ 下記の処方によりヘアークリームをｗＩ製した、（１）
セタノール　　　　　　　　　　　２．０％（２）ワセ
リン　　　　　　　　　　　　２．０％（３）スクワラ
ン　　　　　　　　　　８．０％（４）ポリオキシエチ
レン（２５） オレイルアルコールエーテル　　２．０％（５）グリセ
リンモノステアレート　　１．５％（６）プロピレング
リコール　　　　　５．０％（７）キトサンオリゴ塘 （重合度４〜５、酢酸塩）１．０％ （８）Ｌ−リジン　　　　　　　　　　ｌ・７％（９）
キサンチンガム　　　　　　　　０．１％（１０）香料
　　　　　　　０．１％ （Ｉ＋）プロピルパラベン　　　　　　　０．１％（１
２）精製水　　　　　　　　　　　　残り（６）　Ｎ　
　（８）　Ｎ　　（＋２）を７０℃で均一に溶解し、（
７）および（９）を加え、よく撹拌溶解させ水相を調製
し、別に（１）〜（５）　　（１０）（！ｌ）を７０°
Ｃで均一に溶解し、これを上記水相に加え、ホモミキサ
ーにて乳化処理した後、よくかきまぜながら冷却して製
品のへアークリームを調製した。

実施例４の製品はべたつかず、髪をしっとりとさせるも
のであった。

実施例５ 下記の処方によりクリームリンスを調製した。

（１）セタノール　　　　　　　　　　　２．０％（２
）グリセリンモノステアレート３．０％（３）ポリエチ
レングリコール １５００　　　　　２．０％ （４）ポリオキシグリセリン モノバルミテート１．０９６ （５）ポリオキシグリセリン トリイソステアレート　　　　　１．０％（６）香料　
　　　　　　０．３％ （７）メチルパラベン　　　　　　　　０．１％（８）
キトサンオリゴ着　　　　　　　３．０％（重合度４〜
５、塩酸塩） （９）トリメチルステアリル　　゛ アンモニウムクロリド　　　　　５．０％（１０）　ク
エン酸　　　　　　　　　　　！、０９６（１１）精製
水　　　　　　　　　　　残り（８）〜（１１）を７０
°Ｃで均一溶解し、水相を調製し、また、（１）〜（７
）を７０°Ｃで均一溶解して、油相を調製し、水相に油
槽を添加しホモミキサーで均一に乳化し、乳化後よくか
きまぜながら冷却して、製品のクリームリンスを調製し
た。

実施例５の製品は使用感触がなめらかで、髪に潤いを与
えるものであった。

実施例６ 下記の処方により口紅を調製した。

（１）ヒマシ油　　　　　　　　　　　５０％（２）イ
ソステアリン酸 ジグリセライド　　　　　　　　１０％（３）キャンデ
リラロウ　　　　　　　　８％（４）固形パラフィン　
　　　　　　　ｔｏ％（５）　　ＰＯＥ　　（２０）　
ＰＯＰ　　（２０）２テトラデシルオクタデシル エーテル　　　　　　　　　　　　４％（６）赤色２０
２号　　　　　　　　　　１．５％（７）酸化チタン　
　　　　　　　　　　１％（８）赤酸化鉄　　　　　　
　　　　　　ｓ、５９６（９）黄酸化鉄　　　　　　　
　　　　　１％（１０）精製水　　　　　　　　　　　
　１０％（１１）キトサンオリゴ塘 （重合度３〜４、乳酸塩）３９６ （１）〜（５）を８０℃で均一に溶解し、（６）〜（９
）を加えて分散し、さらに（ｌＯ）と（１１）を加えて
乳化し、撹拌を続けながら成型容器に充填し、冷却して
口紅を調製した。

実施例６の製品は使用時にべたつかず唇をしっとりさせ
るものであった。

実施例７ 下記の処方により固形ファンデーションを調製した。

（１）マカデミアナツツオイル　　　　２５９６（２）
ワセリン　　　　　　　　　　　　５９６（３）セレシ
ン　　　　　　　　　　　５９６（４）　　ＰＯＥ　　
（１０）　　ＰＯＰ　　（１５）２ドデシルヘキサデシ
ル エーテル　　　　　　　　　　　　４％（５ンカオリン
　　　　　　　　　　　　１５％（６）マイカ　　　　
　　　　　　　　２０％（７）酸化チタン　　　　　　
　　　　８％（８）赤酸化鉄　　　　　　　　　　　１
％（９）黄酸化鉄　　　　　　　　　　　３％（ｌＯ）
バラオキシ安息香酸メチル　　　Ｏ，１９６（１１）香
料　　　　　　　０・１％ （１２）精製水　　　　　　　　　　　１０００％（１
３）キトサンオリゴｗ！３％ （１）〜（４）を８０℃で均一に溶解し、（５）〜（ｌ
Ｏ）を加えて分散し、さらに（１２）と（１３）をくわ
えて乳化し、撹拌を続けながら（１１）を添加した後、
容器に流し込み冷却して固形ファンデーションを調製し
た。

実施例７の製品は使用時にべたつきを感することがなく
肌をしっとりとさせるものであった。

〔発明の効果〕

化粧料にキトサンオリゴ蔚を配合することにより、化粧
料にべとつきを与えることなく、高い保湿性およびなめ
らかな使用感覚を与えることができ、化粧料を使用した
皮膚や毛髪などに温和で良好な潤いと保湿性を与え、ま
たその皮膚や毛髪などを柔軟にし、さらにしっとりとさ
せることができる。

【図面の簡単な説明】

第１図は、バチルスＮｏ、７−Ｍにより生産されたキト
サナーゼにおける温度と比活性の関係を示す図表、第２
図は、バチルス１１ｈ７−Ｈにより生産されたキトサナ
ーゼにおけるｐＨと比活性の関係を示す図表、第３図は
、バチルスｔｋ　７−　Ｈにより生産されたキトサナー
ゼにおける温度と比活性の関係を示す図表、第４図は、
バチルスＮ１７−　Ｈにより生産されたキトサナーゼに
おけるｐＨと比活性の関係を示す図表、第５図は、バチ
ルス１ｔｌｏ、７−Ｈにより生産されたキトサナーゼの
電気泳動法による分子量を示す図表、そして第６図は、
バチルス１！ｌＬ７−　Ｍにより生産されたキトサナー
ゼのゲル濾過法による分子量を示す図表であり、第７図
は、参考例２で得たキトサンオリゴ普のＤ−グルコサミ
ンの重合度分布を示す図表、そして第８図は、参考例３
で得たキトサンオリゴ塘のＤ−グルコサミンの重合度分
布を示す図表である。

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. （１）キトサンオリゴ糖を配合することを特徴とする化
   粧料。
2. （２）キトサンオリゴ糖が、Ｄ−グルコサミンの重合度
   が２〜８のキトサンオリゴ糖であることを特徴とする特
   許請求の範囲第１項に記載の化粧料。
3. （３）キトサンオリゴ糖が、キトサンを、バチルス属に
   属する微生物により生産され、ｐＨ５〜１１の領域にお
   いて安定なキトサナーゼにより分解して得られたもので
   あることを特徴とする特許請求の範囲第１項または第２
   項に記載の化粧料。
4. （４）バチルス属に属する微生物が、バチルスＮｏ．７
   −Ｍ（微工研菌寄第８１３９号）であることを特徴とす
   る特許請求の範囲第３項に記載の化粧料。