JPS62245942A - 粒子解析装置 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は、フローサイトメータ等において、フローセル
と測光光学系との７ライメントを正確に実施し得る粒子
解析装置に関するものである。

［従来の技術］ フローサイトメータ等に用いられる従来の粒子解析装置
では、フローセルの中央部の例えば２００　ＪＬｍＸ　
２００　ｐｍの微少な断面を有する流通部内を、シース
液に包まれて通過する検体粒子に照射光を照射し、その
結果生ずる前方及び側方散乱光により、検体粒子の形状
・大きさ・屈折率等の粒子的性質を得ることが可能であ
る。

従来の装置における光軸の調整は、検体粒子を含むサン
プル液をシース液と共に流すことにより、その散乱光成
いは蛍光の信号を観察しながら行っている。従って、そ
のアライメント状態が判然としない欠点がある。

［発明の目的］ 本発明の目的は、上述の従来例の欠点を除去し、視覚的
にモニタ上に表示されたアライメント状態、或いは投影
パターンを観察することにより確実な光軸調整を可能に
する粒子解析装置を提供することにある。

［発明の概要］ 上述の目的を達成するための本発明の要旨は、流体中の
検体粒子に光を第１の方向から照射し、得られる散乱光
・蛍光を測光用対物レンズを介して測光して、検体粒子
の解析を行う装置において、検体粒子を前記第１の方向
と直交する第２のう 方向？徽射する光学系と、前記第２の方向から照射され
た検体粒子の投影像を前記測光用対物レンズを通過後に
光分割器を介して分割型光検出器に形成する光学系とを
有することを特徴とする粒子解析装置である。

［発明の実施例］ 本発明を図示の実施例に基づいて詳細に説明する。

第１図は光学系の構成図である。フローセル１の流通部
ｌａ内を高速層流となったシース液に包まれて、流体力
学的焦点合わせが行われたサンプル液が通過し、この流
れと直交する方向にレーザー光源２が配置されている。

このレーザー光源２から照射されたレーザービームＬを
流通部１ａに導くために、光軸Ｏ１上に結像レンズ３が
配置されており、更に検体粒子からの前方散乱光を１１
１１１定するために、フローセルｌを挟んで結像レンズ
３と反対側の光軸０１上にストッパ４、集光レンズ５、
光検出器６が順次に配列されている。

また、検体粒子の流れの方向と光軸０１にそれぞれ直交
する方向である光軸ｏ２上に、フローセルｌ側から集光
レンズ７、光分割ミラー８、絞り９、集光レンズ１０．
波長選択特性を有するグイクロイックミラー１１．１２
及び反射ミラー１３が順次に配列されている。光分割ミ
ラー８の反射側の絞り９と共役な位置には、所謂ＣＣＤ
等の分割型光検出器１４が配置されている。また、グイ
クロイックミラー１０の反射方向には集光レンズ１５、
光検出器１６が、グイクロイックミラー１２の反射方向
には集光レンズ１７．光検出器１８が、更に反射ミラー
１３の反射方向には集光レンズ１９．光検出器２ｏが配
列されている。そして、光軸０２上におけるフローセル
１を挟んだ集光レンズ７の反対側には、集光レンズ２１
、スリット２２、光源２３が配置されている。

結像レンズ３を介してフローセルｌの流通部ｌａに集光
されたレーザービームＬは検体粒子によって散乱され、
その前方散乱光は集光レンズ４を介して光検出器６に入
射し、主に検体粒子の大きさに関する情報が得られる。

また、検体粒子からの９０’散乱光及び蛍光は、集光レ
ンズ７を経て集光レンズ１０により平行光とされ、例え
ば検体粒子の性状によってそれぞれの波長領域光ごとに
グイクロイックミラー１１．１２及び反射ミラー１３で
反射され、それぞれ集光レンズ１５．１７．１９を介シ
テ光検出器１６．１８．２ｏに入射し、主に検体粒子の
形状に関する情報が得られる。なお、図面には省略しで
あるが各光検出器１６．１８．２０の前にはバリアフィ
ルタを設けて、波長望域光を選択的に通過させることが
よく行われる。

側方に側方散乱光・蛍光を取り出すための光学系におい
ては、サンプル流と絞り９は光学的に共役な関係にある
ことが望ましい、それは、検体粒子以外の蛍光等を拾わ
ないためにも重要である。

従って、フローセル１を交換した場合や、サンプル流が
必ずしもフローセルｌの中心を流れていない場合には、
上述の共役関係を満足するための７ライメントを行う必
要が生ずる。

このアライメントを行うためには、レーザー光源ｌから
のレーザービームＬをカットした状態で、光源２３、ス
リット２２、集光レンズ２１から成る照明光学系によっ
てフローセルｌを照明し、集光レンズ７、光分割ミラー
８を用いて分割型光検出器１４ヘサンプル流を投影する
。

第２図はフローセルｌと分割型光検出器１４の相対的な
関係を示し、分割型光検出器１４上には流通部１ａの内
壁１ｂとサンプル流Ｓが投影される。いま、サンプル流
Ｓが光源２３の光を吸収する性質を有していれば、第３
図に示すような分布の出力信号波形が得られ、その中央
部にはサンプル流Ｓの吸収帯Ｂが現われる。予め、分割
型光検出器１４の成るビット位ｍＮと絞り９が光学的に
一致するようにしておけば、７０−セル１と側方散乱φ
蛍光光学系を相対的に動かすことにより、ビット位１α
Ｎの位置で第３図に示すような信号波形が極値をとるよ
うに合わせることによりアライメントを行うことができ
る。

この場合に、光源２３の波長領域を赤外光として、光分
割ミラー８はこの波長領域光を分割型光検出器１４の方
へ反射し、慴域外の光を通すグイクロイックミラーとす
れば、レーザービームＬをカットせずに測光と観察を同
時に効率的に行うことができる・ ［発明の効果］ 以上説明したように本発明に係る粒子解析装置は、フロ
ーセルに照射した光による投影像を光検出器で把えるこ
とにより、アライメント状態を容易に観察し得るので、
アライメン］・を）Ｉｔ！’ｔ　’ｌｉに実施すること
ができる。

【図面の簡単な説明】

図面は本発明に係る粒子解析装置の実施例を示すもので
あり、第１図は光学的構成図、第２図はブローセルと分
割型光検出器との関係図、第３図は分割型光検出器から
の出力信号波形図である。 符号ｌはフローセル、１ａは流通部、２はレーザー光源
、３は結像レンズ、５．７．１０．２１は集光レンズ、
６は光検出器、８は光分割ミラー、９は絞り、１１．１
２はグイクロイックミラー、１３は反射ミラー、１４は
分割型光検出器、１Ｂ、１８．２０は光検出器、２２は
スリット、２３は光源である。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、流体中の検体粒子に光を第１の方向から照射し、得
   られる散乱光・蛍光を測光用対物レンズを介して測光し
   て、検体粒子の解析を行う装置において、検体粒子を前
   記第１の方向と直交する第２の方向から照射する光学系
   と、前記第２の方向から照射された検体粒子の投影像を
   前記測光用対物レンズを通過後に光分割器を介して分割
   型光検出器に形成する光学系とを有することを特徴とす
   る粒子解析装置。 ２、前記光分割器は測光波長領域外の光を前記分割型光
   検出器に導くようにした特許請求の範囲第１項に記載の
   粒子解析装置。 ３、前記測光用対物レンズに関して、検体粒子と共役な
   位置に絞りを配置し、該絞りと前記分割型光検出器は光
   学的に前記光分割器を介して等価な位置に配置するよう
   にした特許請求の範囲第１項に記載の粒子解析装置。