JPS6143993A - α−アミノ酸の製造法 - Google Patents
α−アミノ酸の製造法Info
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- JPS6143993A JPS6143993A JP16599884A JP16599884A JPS6143993A JP S6143993 A JPS6143993 A JP S6143993A JP 16599884 A JP16599884 A JP 16599884A JP 16599884 A JP16599884 A JP 16599884A JP S6143993 A JPS6143993 A JP S6143993A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
産 土の利 野
本発明は酵素法によるα−アミノ酸の製造法に関する。
一旦迷ｐ玉員−
従来、フェニルアラニンアンモニアリアーゼを用いて桂
皮酸及びアンモニアよりフェニルアラニンを製造するこ
とは知られている（英国特許第１４８９４６８号、特開
昭５６−２６１９７号等）。
皮酸及びアンモニアよりフェニルアラニンを製造するこ
とは知られている（英国特許第１４８９４６８号、特開
昭５６−２６１９７号等）。
又、アスパルテートアンモニアリアーゼ（＝アスパルタ
ーゼ）を用いてフマル酸及びアンモニアよりアスパラギ
ン酸を製造するに際し、固定化法によることも知られて
いる（特開昭４９−８０１６０ ）。
ーゼ）を用いてフマル酸及びアンモニアよりアスパラギ
ン酸を製造するに際し、固定化法によることも知られて
いる（特開昭４９−８０１６０ ）。
発明が解決しようとする問題点
しかしながら、上記のごとき２−エンカルボン酸とアン
モニアとを両化合物から対応するα−アミノ酸を生成す
る反応を触媒するアンモニアリアーゼの存在下に反応さ
せてα−アミノ酸を生成させるに際し、該酵素がアンモ
ニアにより失活されやすく、特に酵素が失活を強く促進
することを見出した。
モニアとを両化合物から対応するα−アミノ酸を生成す
る反応を触媒するアンモニアリアーゼの存在下に反応さ
せてα−アミノ酸を生成させるに際し、該酵素がアンモ
ニアにより失活されやすく、特に酵素が失活を強く促進
することを見出した。
問題点を解決するための 段
本発明はかかる酸素によるアンモニアリアーゼの失活を
さけるべく酸素又は空気接触を防止した条件下で酵素反
応を行わせるものである。さらに詳しくは、本発明は２
−エンカルボン酸及びアンモニアから対応するα−アミ
ノ酸を生成する反応を触媒するアンモニアリアーゼ又は
これを含有する菌体もしくはその処理物の存在下に、当
該２−エンカルボン酸と過剰のアンモニアとを水中、酸
素又は空気接触を防止した条件下で反応させることを特
徴とするα−アミノ酸の製造法に関する。
さけるべく酸素又は空気接触を防止した条件下で酵素反
応を行わせるものである。さらに詳しくは、本発明は２
−エンカルボン酸及びアンモニアから対応するα−アミ
ノ酸を生成する反応を触媒するアンモニアリアーゼ又は
これを含有する菌体もしくはその処理物の存在下に、当
該２−エンカルボン酸と過剰のアンモニアとを水中、酸
素又は空気接触を防止した条件下で反応させることを特
徴とするα−アミノ酸の製造法に関する。
次に本発明をさらに詳しく説明する。
酸素あるいは空気接触を防止した条件は反応系（水中）
および反応容器中の気体部分の酸素を酸素を含まないガ
ス、例えば酸素を除いた空気、窒素、ヘリウムなどの不
活性気体で置換することにより達成することができる。
および反応容器中の気体部分の酸素を酸素を含まないガ
ス、例えば酸素を除いた空気、窒素、ヘリウムなどの不
活性気体で置換することにより達成することができる。
この場合、ガス置換は水中に不活性ガスを吹き込むこと
などにより、水中及び気体部分に酸素が検出されなくな
るまで行うのが適当である。又、ガス置換は酵素反応の
開始前のみ行ってもよいし開始前・開始中を通して行っ
てもよい。酸素あるいは空気接触を防止した条件は又、
水中に酸化防止剤を溶解することによっても達せられる
。酸化防止剤としては亜硫酸のアルカリ金属塩（ナトリ
ウム塩、カリウム塩等）。
などにより、水中及び気体部分に酸素が検出されなくな
るまで行うのが適当である。又、ガス置換は酵素反応の
開始前のみ行ってもよいし開始前・開始中を通して行っ
てもよい。酸素あるいは空気接触を防止した条件は又、
水中に酸化防止剤を溶解することによっても達せられる
。酸化防止剤としては亜硫酸のアルカリ金属塩（ナトリ
ウム塩、カリウム塩等）。
アルカリ土類金属塩（マグネシウム塩等）もしくはアン
モニウム塩；メルカプトエタノール、グルタチオン、シ
スティン、硫化水素、ジチオスレイトールなどのＳＨ基
含有化合物；ヒドロキノンなどのヒドロキノン類；ブチ
ルクレゾール、カテコールなどのフェノール類；アスコ
ルビン酸などのレダクトン化合物などが使用可能である
。
モニウム塩；メルカプトエタノール、グルタチオン、シ
スティン、硫化水素、ジチオスレイトールなどのＳＨ基
含有化合物；ヒドロキノンなどのヒドロキノン類；ブチ
ルクレゾール、カテコールなどのフェノール類；アスコ
ルビン酸などのレダクトン化合物などが使用可能である
。
酸化防止剤の使用濃度は０．１ ｍ Ｍ〜１０ｍＭが適
当である。酸素あるいは空気接触を防止した条件は又、
酵素源として固定化菌体・酵素を使用する場合に、菌体
又は酵素と共に酸化防止剤を固定化菌体・酵素調製に際
し混入せしめることによっても達成しつる。かかる酸化
防止剤としてはトコフェロール、２．６−シーｔｅｒｔ
−ブチル−４−メチル。
当である。酸素あるいは空気接触を防止した条件は又、
酵素源として固定化菌体・酵素を使用する場合に、菌体
又は酵素と共に酸化防止剤を固定化菌体・酵素調製に際
し混入せしめることによっても達成しつる。かかる酸化
防止剤としてはトコフェロール、２．６−シーｔｅｒｔ
−ブチル−４−メチル。
フェノール、トリスノニルフェニルホスファイト。
トリフェニルホスファイト、ジステアリル−３，３′一
チオジプロピオン酸等アミン系、キノン系、フェノール
系、硫黄系、リン系の多くの化合物が使用しうる。上記
以外にも化学便覧応用編９３８頁（昭和５５年発行）の
酸化防止剤の項に掲げられた化合物を同様目的に使用し
うる。これらの酸化防止剤は担体ゲル１ｋｇ当り１〜１
０ｇ使用する。
チオジプロピオン酸等アミン系、キノン系、フェノール
系、硫黄系、リン系の多くの化合物が使用しうる。上記
以外にも化学便覧応用編９３８頁（昭和５５年発行）の
酸化防止剤の項に掲げられた化合物を同様目的に使用し
うる。これらの酸化防止剤は担体ゲル１ｋｇ当り１〜１
０ｇ使用する。
調整に際しては、酸化防止剤、及び菌体又は酵素をゲル
化液に機械的によく分散してエマルジョンとし、ついで
常法により固定化する。
化液に機械的によく分散してエマルジョンとし、ついで
常法により固定化する。
上記酸素あるいは空気接触を防止した条件は各単独のみ
でなく組み合わせてもよく、組み合わせの場合さらに効
果を高める。
でなく組み合わせてもよく、組み合わせの場合さらに効
果を高める。
２−エンカルボン酸及び対応アンモニアリアーゼの組み
合わせとしては桂皮酸とフェニルアラニンアンモニアリ
アーゼ、トランス−ｐ−クマール酸とチロシンアンモニ
アリアーゼ、フマル酸とアスパルテートアンモニアリア
ーゼ、メサコン酸とメチルアスパルテートアンモニアリ
アーゼ、トランスカフェ酸とジヒドロキシフェニルアラ
ニンアンモニアリアーゼ等が用いられる。
合わせとしては桂皮酸とフェニルアラニンアンモニアリ
アーゼ、トランス−ｐ−クマール酸とチロシンアンモニ
アリアーゼ、フマル酸とアスパルテートアンモニアリア
ーゼ、メサコン酸とメチルアスパルテートアンモニアリ
アーゼ、トランスカフェ酸とジヒドロキシフェニルアラ
ニンアンモニアリアーゼ等が用いられる。
２−エンカルボン酸の濃度としては０．０２〜３．０Ｍ
が適当である。桂皮酸の場合はこれによるフェニルアラ
ニンアンモニアリアーゼ活性の阻害をさけるため特に０
．０２〜０６２Ｍが適当である。アンモニアの使用量は
２−エンカルボン酸に対し、１．５〜２００倍モルが適
当である。
が適当である。桂皮酸の場合はこれによるフェニルアラ
ニンアンモニアリアーゼ活性の阻害をさけるため特に０
．０２〜０６２Ｍが適当である。アンモニアの使用量は
２−エンカルボン酸に対し、１．５〜２００倍モルが適
当である。
本発明においては酵素源としてアンモニアリアーゼを含
有する菌体（例えば洗浄菌体、乾燥菌体）その処理物（
例えば菌体摩砕物、菌体の自己消化物、菌体の超音波処
理物、固定化菌体、限外濾過膜に酵素を封入したもの）
又は当該酵素（粗酵素。
有する菌体（例えば洗浄菌体、乾燥菌体）その処理物（
例えば菌体摩砕物、菌体の自己消化物、菌体の超音波処
理物、固定化菌体、限外濾過膜に酵素を封入したもの）
又は当該酵素（粗酵素。
精製酵素）もしくは固定化酵素を使用しうる。
又、菌体の膜透過性の改善等のためにエタノール、。
トルエン、エチルエーテルなどの溶剤による処理（特公
昭５８−１９２７５＞、界面活性剤処理（特願昭５８−
１５１４１５）等を行ってもよく、又これら溶剤、界面
活性剤は酵素反応系に添加してもよい。界面活性剤の種
類、使用量は上記特願昭の場合と同様でよい。固定化菌
体・酵素はゲル包括法、吸着法、共有結合による固定化
法等のいずれによっても調整できる。例えばゲル包括法
ではポリアクリルアミドゲル、ポリビニルアルコールゲ
ル、寒天ゲル、カラギーナンゲル、アルギン酸ゲル等に
常法により包含させる（特公昭５６−２９５１７．５６
−１９９９４等）。酵素源の量は多い程、反応には有利
であり、又、酵素活性が酵素の種類により区々であるの
で、酵素源の使用量は一概に決められないが、通常、菌
体使用の場合、単位菌体く１■）当り、基質０．００８
〜４０ｉ ｍａｔが適当である。上記各アンモニアリア
ーゼを菌体内に含有する微生物は種々知られている。例
えばアスパルターゼではエシェリヒア・コリに属する菌
株、シトロバクタ−・フロインディ ＡＴＣＣ６７５０
、フェニルアラニンアンモニアリアーゼではロドトルラ
・ルブラＡＴＣＣ２０２５８，スポロボロマイセス・ロ
ゼウスＩＦＯ１０４０，チロシンアンモニアリアーゼで
はロドトルラ・ルブラＡＴＣＣ２０２５８，スポロボロ
マイセス・ロゼウスＩＦＯ１０４０，メチルアスパルテ
ートアンモニアリアーゼではクロストリジウム・チタノ
モルファムに属する菌株、ジヒドロキシフェニルアラニ
ンアンモニアリアーゼではロドトルラ・ルブラＩＦＯ９
０１，スポロボロマイセス・ロゼウスＩＦ０１０３７．
スポロボロマイセス・サルモニカラ−ＩＦ０１０３８．
ピチア・メンブラナエファシエンスＩＦＯ４６０，ビ
チア・ファリノサＩＦ０４６５．サツカロマイセス・リ
ポリチカＩＦＯ７１７，ビチア・ギリエルモンディＩＦ
０９６１等があげられる。
昭５８−１９２７５＞、界面活性剤処理（特願昭５８−
１５１４１５）等を行ってもよく、又これら溶剤、界面
活性剤は酵素反応系に添加してもよい。界面活性剤の種
類、使用量は上記特願昭の場合と同様でよい。固定化菌
体・酵素はゲル包括法、吸着法、共有結合による固定化
法等のいずれによっても調整できる。例えばゲル包括法
ではポリアクリルアミドゲル、ポリビニルアルコールゲ
ル、寒天ゲル、カラギーナンゲル、アルギン酸ゲル等に
常法により包含させる（特公昭５６−２９５１７．５６
−１９９９４等）。酵素源の量は多い程、反応には有利
であり、又、酵素活性が酵素の種類により区々であるの
で、酵素源の使用量は一概に決められないが、通常、菌
体使用の場合、単位菌体く１■）当り、基質０．００８
〜４０ｉ ｍａｔが適当である。上記各アンモニアリア
ーゼを菌体内に含有する微生物は種々知られている。例
えばアスパルターゼではエシェリヒア・コリに属する菌
株、シトロバクタ−・フロインディ ＡＴＣＣ６７５０
、フェニルアラニンアンモニアリアーゼではロドトルラ
・ルブラＡＴＣＣ２０２５８，スポロボロマイセス・ロ
ゼウスＩＦＯ１０４０，チロシンアンモニアリアーゼで
はロドトルラ・ルブラＡＴＣＣ２０２５８，スポロボロ
マイセス・ロゼウスＩＦＯ１０４０，メチルアスパルテ
ートアンモニアリアーゼではクロストリジウム・チタノ
モルファムに属する菌株、ジヒドロキシフェニルアラニ
ンアンモニアリアーゼではロドトルラ・ルブラＩＦＯ９
０１，スポロボロマイセス・ロゼウスＩＦ０１０３７．
スポロボロマイセス・サルモニカラ−ＩＦ０１０３８．
ピチア・メンブラナエファシエンスＩＦＯ４６０，ビ
チア・ファリノサＩＦ０４６５．サツカロマイセス・リ
ポリチカＩＦＯ７１７，ビチア・ギリエルモンディＩＦ
０９６１等があげられる。
酵素反応に際し、反応液中にＭｎ”、Ｃｏ２“。
Ｆ ｅ２２ Ｃａ”、 Ｍｇ２２ ｌｎ″“などの２価
金属イオン、特にＭｎ”、Ｚｎ”を存在させることによ
り、酵素の安定性を高め、又酵素除去効果をさらに高め
ることができる。
金属イオン、特にＭｎ”、Ｚｎ”を存在させることによ
り、酵素の安定性を高め、又酵素除去効果をさらに高め
ることができる。
具体的には酵素反応開始前、開始中の反応液にＭｎＣ１
＊ 、ＭｎＳＯ４、ＣｏＣＪ２．Ｆｅ５Ｏａ。
＊ 、ＭｎＳＯ４、ＣｏＣＪ２．Ｆｅ５Ｏａ。
ＣａＣｊ！ｚ、ＭｇＳＯ３，ＺＴＩＳＯ４、ＺｎＣＲｗ
等を添加する。これらの金属化合物は１μＭ〜５０ｍＭ
、好ましくは３μＭ〜５ｍＭの範−一し用する。
等を添加する。これらの金属化合物は１μＭ〜５０ｍＭ
、好ましくは３μＭ〜５ｍＭの範−一し用する。
酵素源は回分使用でも固定化し° ６で使用しても
よいが、通常連続使用によるメリットから固定カラム方
式が好ましい。
よいが、通常連続使用によるメリットから固定カラム方
式が好ましい。
酵素反応時のｐＨは通常ｐＨ８〜１１．特に８−１０で
行われる。本反応はアンモニア過剰下に行うので、ｐＨ
調整を要すれば塩酸、硫酸等の無機酸、酢酸、プロピオ
ン酸等の有機酸の添加により行う。反応温度は使用酵素
等によって異なるが、通常１５−４５℃が適当である。
行われる。本反応はアンモニア過剰下に行うので、ｐＨ
調整を要すれば塩酸、硫酸等の無機酸、酢酸、プロピオ
ン酸等の有機酸の添加により行う。反応温度は使用酵素
等によって異なるが、通常１５−４５℃が適当である。
反応開始後１通常１１００時間で著量のα−アミノ酸が
生成する。カラム方式の場合、さらに長時間（例えば１
０００時間）の連続反応が可能である。
生成する。カラム方式の場合、さらに長時間（例えば１
０００時間）の連続反応が可能である。
反応液からのα−アミノ酸の精製はシリカゲル。
セファデックス等によるカラムクロマトグラフィー、デ
ュオライトＡ７等のイオン交換樹脂等により行うことが
できる。
ュオライトＡ７等のイオン交換樹脂等により行うことが
できる。
次に本発明の実施例を示す。
実施例１゜
スポロボロミセス・ロゼウスＩＦＯ１０４０をコーンス
テイープリカー１５ｇ、Ｌ−フェニルアラニン２．５ｇ
およびＮ ａ Ｃ１２，５ｇを含む培地５０９ｍｌで２
８℃、１７時間振盪培養した。遠心分離して得た菌体を
０．９％（Ｗ／Ｖ）冷食塩水で洗浄の後、遠心分離して
洗浄菌体を得た。これを３％（ｗ／ｖ）カラギーナン水
溶液５Ｑｍ＋中に懸濁しＫＣｌ２％（ｗ／ｖ）水溶液中
に滴下して固定化菌体を辱た。
テイープリカー１５ｇ、Ｌ−フェニルアラニン２．５ｇ
およびＮ ａ Ｃ１２，５ｇを含む培地５０９ｍｌで２
８℃、１７時間振盪培養した。遠心分離して得た菌体を
０．９％（Ｗ／Ｖ）冷食塩水で洗浄の後、遠心分離して
洗浄菌体を得た。これを３％（ｗ／ｖ）カラギーナン水
溶液５Ｑｍ＋中に懸濁しＫＣｌ２％（ｗ／ｖ）水溶液中
に滴下して固定化菌体を辱た。
この固定化菌体を各１０ｇ、４本のカラムに分取し、第
１表に示す培地をそれぞれｌｉｌ／ｈｒの速度で通塔し
た。この結果を第２表に示す。カラムは２８℃に保温し
た。
１表に示す培地をそれぞれｌｉｌ／ｈｒの速度で通塔し
た。この結果を第２表に示す。カラムは２８℃に保温し
た。
第 １ 表 −
第 ２ 表
実施例２
０ドトルラ・ルブラΔＴＣＣ２０２５８を酵母エキス１
．０ ｇ 、ペプトン１．０ ｇ 、食塩０．５ ｇお
よびＬ−フェニルアラニン０．０５ ｇを含む培地１０
０ｍ１で２８℃、１７時間振盪培養した。該培養液５０
０ ｍｌを遠心分離して得た菌体を０．９％（Ｗ／Ｖ）
冷食塩水で洗浄の後、遠心分離して洗浄菌体を得を得た
。これをアノンＬＧ（両性異面活性剤アルキルグリシン
の商品名１日本油脂製）２％（Ｗ／Ｖ）水溶液２０１＋
１１で室温下、３０分間接触処理した。このアノンＬＧ
処理菌体を３％（Ｗ／Ｖ）カッパカラギーナン溶液５０
ｍ１中に懸濁しＫＣｌ２％（Ｗ／Ｖ）水溶液に滴下して
固定化菌体を得た。
．０ ｇ 、ペプトン１．０ ｇ 、食塩０．５ ｇお
よびＬ−フェニルアラニン０．０５ ｇを含む培地１０
０ｍ１で２８℃、１７時間振盪培養した。該培養液５０
０ ｍｌを遠心分離して得た菌体を０．９％（Ｗ／Ｖ）
冷食塩水で洗浄の後、遠心分離して洗浄菌体を得を得た
。これをアノンＬＧ（両性異面活性剤アルキルグリシン
の商品名１日本油脂製）２％（Ｗ／Ｖ）水溶液２０１＋
１１で室温下、３０分間接触処理した。このアノンＬＧ
処理菌体を３％（Ｗ／Ｖ）カッパカラギーナン溶液５０
ｍ１中に懸濁しＫＣｌ２％（Ｗ／Ｖ）水溶液に滴下して
固定化菌体を得た。
この固定化菌体各１０ｇを４本の試験管Ａ−Ｄ中に分取
した。Ａ−Ｄにはそれぞれ第３表の基質溶液を添加し、
２８℃、４８時間反応させた。反応液を除き再びそれぞ
れの基質溶液として反応を繰り返した。各回ごとの反応
液中のし一フェニルアラニンの生成量を分析した結果を
第４表に示す。
した。Ａ−Ｄにはそれぞれ第３表の基質溶液を添加し、
２８℃、４８時間反応させた。反応液を除き再びそれぞ
れの基質溶液として反応を繰り返した。各回ごとの反応
液中のし一フェニルアラニンの生成量を分析した結果を
第４表に示す。
第 ３ 表
第 ４ 表
実施例３
ニジエリシア・コリの菌体２５ｇをｐＨ７の緩衝液中で
自己消化させ、ついで濾過した濾液にｐｕ８．０に緩衝
化させたデュオライ）Ａ？樹脂ＩＱｍｌを懸濁させ、ｐ
Ｈ８，０に調整したのち、約１８時間ゆるやかに攪拌
した。樹脂を２分しカラムＡ。
自己消化させ、ついで濾過した濾液にｐｕ８．０に緩衝
化させたデュオライ）Ａ？樹脂ＩＱｍｌを懸濁させ、ｐ
Ｈ８，０に調整したのち、約１８時間ゆるやかに攪拌
した。樹脂を２分しカラムＡ。
Ｂに充填した。第５表に示す基質液をそれぞれのカラム
に５Ｖ−１（通塔容量／樹脂容量・ｈｒ）で通塔した。
に５Ｖ−１（通塔容量／樹脂容量・ｈｒ）で通塔した。
経時の流出液中のアスパラギン酸量を第６表に示た。カ
ラムは４０℃に保温した。
ラムは４０℃に保温した。
第 ６ 表
実施例４
培地中のＬ−フェニルアラニンをＬ−チロシンに代える
以外は実施例１と同様にして調製した固定化園体各１１
１ｇをＡ、Ｂ、Ｃ３本のカラムに分取し、第７表に示す
培地をそれぞれ０．５ｍｌ／ｈｒの速度で通過した。こ
の結果を第８表に示す。
以外は実施例１と同様にして調製した固定化園体各１１
１ｇをＡ、Ｂ、Ｃ３本のカラムに分取し、第７表に示す
培地をそれぞれ０．５ｍｌ／ｈｒの速度で通過した。こ
の結果を第８表に示す。
実施例５
実施例２と同様に調製したアノンＬＧ処理園体を４０ｇ
湿潤状態にて秤取し、各１０ｇを以下にのべる方法（Ａ
−Ｄ）で固定化した。Ａ、Ｂではポリビニルアルコール
（鹸化度９９．５モル％１重合度１７００）１０％溶液
各４０ｇと混合し、−２５℃で凍結した。Ｃではポリビ
ニルアルコール１０％（ｗ／ｖ）溶液４０ｇにトリスノ
ニルフェニルホスファイト（体皮化学スミライザーＴＰ
Ｓ）１００ｍｇをよく分散混合した後、Ａ、Ｂと同様に
１０ｇの菌体とよく混合したのち凍結した。凍結物を５
＋ｎｍ角状に裁断し、Ａ−Ｃ各々を１００１１１１にり
カラムに充填した。カラムＢ、Ｃには２５℃でカラムを
保温しつつ実施例２．第３表のＤ液を、カムΔには２５
℃でカラムを保温しつつ同表のＡ液を４ｍｌ／ｈｒの速
度で通塔した。
湿潤状態にて秤取し、各１０ｇを以下にのべる方法（Ａ
−Ｄ）で固定化した。Ａ、Ｂではポリビニルアルコール
（鹸化度９９．５モル％１重合度１７００）１０％溶液
各４０ｇと混合し、−２５℃で凍結した。Ｃではポリビ
ニルアルコール１０％（ｗ／ｖ）溶液４０ｇにトリスノ
ニルフェニルホスファイト（体皮化学スミライザーＴＰ
Ｓ）１００ｍｇをよく分散混合した後、Ａ、Ｂと同様に
１０ｇの菌体とよく混合したのち凍結した。凍結物を５
＋ｎｍ角状に裁断し、Ａ−Ｃ各々を１００１１１１にり
カラムに充填した。カラムＢ、Ｃには２５℃でカラムを
保温しつつ実施例２．第３表のＤ液を、カムΔには２５
℃でカラムを保温しつつ同表のＡ液を４ｍｌ／ｈｒの速
度で通塔した。
各カラムの留出液の組成を第９表に示す。
第 ９ 表
発明の効果
本発明により、アンモニアリアーゼ使用による２−エン
カルボン酸からα−アミノ酸の製造に際し、酵素活性の
持続化を図ることができる。
カルボン酸からα−アミノ酸の製造に際し、酵素活性の
持続化を図ることができる。
手続補正書
昭和５９年２月２６日
１、事件の表示
昭和５９年特許顆第１６５９９８号
２、発明の名称
α−アミノ酸の製造法
３、補正をする者
事件との関係 特許出願人
郵便番号 １００
住 所 東京都千代田区大手町−丁目６番１号名称
（１０２）協和醗酵工業株式会社明細書の発明の詳細な
説明の欄 ５、補正の内容
（１０２）協和醗酵工業株式会社明細書の発明の詳細な
説明の欄 ５、補正の内容
Claims (6)
- （１）２−エンカルボン酸及びアンモニアから対応する
α−アミノ酸を生成する反応を触媒するアンモニアリア
ーゼ又はこれを含有する菌体もしくはその処理物の存在
下に、当該２−エンカルボン酸と過剰のアンモニアとを
水中、酸素又は空気接触を防止した条件下で反応させる
ことを特徴とするα−アミノ酸の製造法。 - （２）酸素あるいは空気接触を防止した条件が反応系中
の酸素を酸素を含まないガスで置換することにより達せ
られる特許請求の範囲第１項記載の製造法。 - （３）酸素あるいは空気接触を防止した条件が水中に酸
化防止剤を溶解することにより達せられる特許請求の範
囲第１項記載の製造法。 - （４）使用する酵素源が固定化菌体又は固定化酵素であ
って、酸素あるいは空気接触を防止した条件が固定化菌
体又は固定化酵素中に酸化防止剤を包含せしめることに
より達せられる特許請求の範囲第１項記載の製造法。 - （５）２−エンカルボン酸及び対応アンモニアリアーゼ
の組み合わせが、桂皮酸とフェニルアラニンアンモニア
リアーゼ、トランス−ｐ−クマール酸とチロシンアンモ
ニアリアーゼ、フマル酸とアスパルテートアンモニアリ
アーゼ、メサコン酸とメチルアスパルテートアンモニア
リアーゼ、又はトランスカフェ酸とジヒドロキシフェニ
ルアラニンアンモニアリアーゼである特許請求の範囲第
１項記載の製造法。 - （６）水中に２価の金属イオンを存在させる特許請求の
範囲第１項記載の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP16599884A JPS6143993A (ja) | 1984-08-08 | 1984-08-08 | α−アミノ酸の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP16599884A JPS6143993A (ja) | 1984-08-08 | 1984-08-08 | α−アミノ酸の製造法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6143993A true JPS6143993A (ja) | 1986-03-03 |
Family
ID=15822972
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP16599884A Pending JPS6143993A (ja) | 1984-08-08 | 1984-08-08 | α−アミノ酸の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6143993A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0143560A2 (en) * | 1983-10-31 | 1985-06-05 | Genex Corporation | Method for stabilizing the enzymic activity of phenylalanine ammonia lyase during L-phenylalanine production |
| EP0165757A2 (en) * | 1984-06-11 | 1985-12-27 | Genex Corporation | Production of L-phenylalanine |
| US5981239A (en) * | 1997-09-24 | 1999-11-09 | Great Lakes Chemical Corp. | Synthesis of optically active phenylalanine analogs using Rhodotorula graminis |
| WO2003000915A1 (en) * | 2001-06-25 | 2003-01-03 | Showa Denko K.K. | Method for producing l-amino acids |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS60133892A (ja) * | 1983-10-31 | 1985-07-17 | ジエネツクス・コ−ポレイシヨン | Ｌ−フエニルアラニンの製造方法 |
-
1984
- 1984-08-08 JP JP16599884A patent/JPS6143993A/ja active Pending
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS60133892A (ja) * | 1983-10-31 | 1985-07-17 | ジエネツクス・コ−ポレイシヨン | Ｌ−フエニルアラニンの製造方法 |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0143560A2 (en) * | 1983-10-31 | 1985-06-05 | Genex Corporation | Method for stabilizing the enzymic activity of phenylalanine ammonia lyase during L-phenylalanine production |
| EP0143560A3 (en) * | 1983-10-31 | 1987-04-29 | Genex Corporation | Method for stabilizing the enzymic activity of phenylalanine ammonia lyase during l-phenylalanine production |
| EP0165757A2 (en) * | 1984-06-11 | 1985-12-27 | Genex Corporation | Production of L-phenylalanine |
| EP0165757A3 (en) * | 1984-06-11 | 1987-07-22 | Genex Corporation | Production of l-phenylalanine |
| US5981239A (en) * | 1997-09-24 | 1999-11-09 | Great Lakes Chemical Corp. | Synthesis of optically active phenylalanine analogs using Rhodotorula graminis |
| WO2003000915A1 (en) * | 2001-06-25 | 2003-01-03 | Showa Denko K.K. | Method for producing l-amino acids |
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