JPS61268177A - ヒト肝癌由来の変異細胞株huGK−14 - Google Patents
ヒト肝癌由来の変異細胞株huGK−14Info
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- JPS61268177A JPS61268177A JP60292427A JP29242785A JPS61268177A JP S61268177 A JPS61268177 A JP S61268177A JP 60292427 A JP60292427 A JP 60292427A JP 29242785 A JP29242785 A JP 29242785A JP S61268177 A JPS61268177 A JP S61268177A
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- Japan
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- medium
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/01—Preparation of mutants without inserting foreign genetic material therein; Screening processes therefor
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- Genetics & Genomics (AREA)
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- Chemical & Material Sciences (AREA)
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- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
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- Microbiology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
産業上の利用分野
本発明は、B型肝炎つィルス表面抗M (HBsAg)
を著量産生しかつ無血清培養することのできるヒト肝癌
由来の変異株huGK−14に関する。
を著量産生しかつ無血清培養することのできるヒト肝癌
由来の変異株huGK−14に関する。
従来の技術
B型肝炎ウィルス(以下HBVという)の表面抗原はB
lumbargらにより、1964年オーストラリア原
住民の血清から発見された。
lumbargらにより、1964年オーストラリア原
住民の血清から発見された。
さらにこのHBVの表面抗原は感染性のあるHBVのD
ane粒子の外被膜として発見されるに至り、HBVの
表面抗原)(BsAgと定義された。
ane粒子の外被膜として発見されるに至り、HBVの
表面抗原)(BsAgと定義された。
表面抗原HBsAgの発見により、HBVの存在と病気
との関連について研究が進み、HBVはヒトのB型肝炎
を起すウィルスとして、知られる様になった。
との関連について研究が進み、HBVはヒトのB型肝炎
を起すウィルスとして、知られる様になった。
このHBVは感染力が強く、母親から子供への感染が顕
著であるが、輸血を要する患者や医療従事者で血液に接
触する機会の多い外科系医師、看護婦、検査技師等にも
しばしば感染する。 HBVに感染すると、急性およ
び慢性肝炎になったり、慢性肝炎から肝硬変、肝癌へと
進行したりするので、大きな医学上の問題となっている
。
著であるが、輸血を要する患者や医療従事者で血液に接
触する機会の多い外科系医師、看護婦、検査技師等にも
しばしば感染する。 HBVに感染すると、急性およ
び慢性肝炎になったり、慢性肝炎から肝硬変、肝癌へと
進行したりするので、大きな医学上の問題となっている
。
HBVに対する研究は進み、HBVに於いてはII B
s A gのほかに内部抗原(HBcAg)更にe抗
原(HBeAg)があり、また感染者に於いては、これ
等に対するHBs抗体、HBe抗体と言った抗体をもっ
ことも知られた。
s A gのほかに内部抗原(HBcAg)更にe抗
原(HBeAg)があり、また感染者に於いては、これ
等に対するHBs抗体、HBe抗体と言った抗体をもっ
ことも知られた。
今日、HBsAgがHBVの感染を予防し得ることが知
られている。
られている。
既に、キャリヤー(不顕性感染者)の血液を原料とした
HBeAgから成るワクチンの研究がなされ、実用化の
段階に達しようとしている。通常、キャリヤーの血液の
中には、粒子状のHBsAgおよび42n履の直径を有
するDane粒子とHBsAgに対する抗体も見い出さ
れる。
HBeAgから成るワクチンの研究がなされ、実用化の
段階に達しようとしている。通常、キャリヤーの血液の
中には、粒子状のHBsAgおよび42n履の直径を有
するDane粒子とHBsAgに対する抗体も見い出さ
れる。
llBsAgはHBVの抗原であって免疫原性をもつ、
即ちHBs抗体の産生を誘発しうると言われている。
即ちHBs抗体の産生を誘発しうると言われている。
HBsAgは約116−25nの範囲の直径を有する球
状あるいは管状粒子であり、いわゆるIt’22nm粒
子」の形態をなし、HBVの感染者の血液中にしばしば
見い出される。
状あるいは管状粒子であり、いわゆるIt’22nm粒
子」の形態をなし、HBVの感染者の血液中にしばしば
見い出される。
又HBsAgの22nm粒子は非感染性のウィルス外被
のみから成っており、Dane粒子とは明確に区別され
る。
のみから成っており、Dane粒子とは明確に区別され
る。
従ってHBsAgの22nm粒子に対する抗体は、 H
BV感染に対して予防効果を有することになり、この非
感染性の小型粒子をワクチンとして有効使用することが
可能となる。
BV感染に対して予防効果を有することになり、この非
感染性の小型粒子をワクチンとして有効使用することが
可能となる。
発明が解決しようとする問題点
実際には、キャリヤーの血液からHBsAgの小型粒子
のみを分けて回収し、それをホルマリンと熱で不活化し
てワクチンとして使用する。しかしながら、この場合、
総てキャリヤーの血液を原料とするため、原料の確保が
不安定で、その供給量に制約があることから、ヒト血液
を原料としないHBsAgの製造法の研究が精力的にな
される様になった。即ち、第2世代のワクチンとして、
遺伝子工学の手法で、大腸菌や酵母にHBVの遺伝子を
組み込んでHBsAgを生産する試み(特開昭58−1
09427)や、第三世代のワクチンとして、抗原決定
基に関係するアミノ酸配列を基に化学的に合成したペプ
チドによるワクチンの開発が試みられている。
のみを分けて回収し、それをホルマリンと熱で不活化し
てワクチンとして使用する。しかしながら、この場合、
総てキャリヤーの血液を原料とするため、原料の確保が
不安定で、その供給量に制約があることから、ヒト血液
を原料としないHBsAgの製造法の研究が精力的にな
される様になった。即ち、第2世代のワクチンとして、
遺伝子工学の手法で、大腸菌や酵母にHBVの遺伝子を
組み込んでHBsAgを生産する試み(特開昭58−1
09427)や、第三世代のワクチンとして、抗原決定
基に関係するアミノ酸配列を基に化学的に合成したペプ
チドによるワクチンの開発が試みられている。
又、細胞培養によりHBsAgを生産させる方法につい
ても報告(特開昭56−150020)されている。し
かし、これ等の公知の)lBsAg生産のための細胞培
養はすべて牛脂児血清の添加によって行なわれており、
その生産量は小量に過ぎない。
ても報告(特開昭56−150020)されている。し
かし、これ等の公知の)lBsAg生産のための細胞培
養はすべて牛脂児血清の添加によって行なわれており、
その生産量は小量に過ぎない。
又、宿主として大腸菌や酵母を用いた場合、生産される
HBsAgは免疫原性が低いとの報告もある。
HBsAgは免疫原性が低いとの報告もある。
動物細胞の培養には、通常、培地中に動物の血清、特に
牛脂児血清の添加が必要とされている。
牛脂児血清の添加が必要とされている。
ところが、血清の添加によって有用物質の回収精製が困
難になり、その操作に於いて、多大のコストを必要とす
ることになる。更には、添加する血清そのものが高価で
あることから、有用物質の工業生産に大きな障害となっ
ている。
難になり、その操作に於いて、多大のコストを必要とす
ることになる。更には、添加する血清そのものが高価で
あることから、有用物質の工業生産に大きな障害となっ
ている。
これは、HBsAgの生産においても、同様であり、H
BsAgが無血清培地で生産することが可能となれば、
培地の価格に於いて不利な点をなくし、回収精製も容易
であり、HBsAgの生産に於ける画期的方法となるも
のである。
BsAgが無血清培地で生産することが可能となれば、
培地の価格に於いて不利な点をなくし、回収精製も容易
であり、HBsAgの生産に於ける画期的方法となるも
のである。
問題点を解決するための手段
本発明者らは、B型肝炎に対する予防ワクチンとして有
効な抗原を大量に生産すべく研究を行ったところ、ヒト
肝癌細胞株の中から、adr型HBVのDNAの一部が
組込まれており、HBsAgを著量生産する変異細胞株
huGK−14をクローニングすることに成功した。h
uGK−14は、先に小泡らによって樹立されたヒト肝
癌細胞株huSP(特許出願昭58−148774)を
HB s A gの産生量の高いコロニーのセレクトを
繰り返し、さらに数多くのクローニングの結果、huS
Pと比べて極めてHBsAg産生量が高く、かつhuS
Pが高い血清要求性細胞株であるのに対して無血清でも
培養できる性質を得たものである。
効な抗原を大量に生産すべく研究を行ったところ、ヒト
肝癌細胞株の中から、adr型HBVのDNAの一部が
組込まれており、HBsAgを著量生産する変異細胞株
huGK−14をクローニングすることに成功した。h
uGK−14は、先に小泡らによって樹立されたヒト肝
癌細胞株huSP(特許出願昭58−148774)を
HB s A gの産生量の高いコロニーのセレクトを
繰り返し、さらに数多くのクローニングの結果、huS
Pと比べて極めてHBsAg産生量が高く、かつhuS
Pが高い血清要求性細胞株であるのに対して無血清でも
培養できる性質を得たものである。
本発明のhuGK−14は一196℃にほぼ永久的に凍
結保存が可能であって、財団法人癌研究会癌研究所に登
録保管されており、頒布可能な状態にある。
結保存が可能であって、財団法人癌研究会癌研究所に登
録保管されており、頒布可能な状態にある。
次にhuGK−14の細胞学的性質を示す。
(1)ヒト肝癌細胞由来変異株である。
(2)染色体モード数は51である。
(3) adr型B肝炎ウィルス表面抗原をコードする
遺伝子を含むDNAフラグメントが、染色体ハプロイド
当たり約8ケ所組み込まれている。
遺伝子を含むDNAフラグメントが、染色体ハプロイド
当たり約8ケ所組み込まれている。
(4) adr型B型肝炎、ウィルス表面抗原を著量産
生する。
生する。
(5)細胞は不正円形で上皮性である。
(6)接着型の細胞である。
(7)生育温度は36.5±1℃が適している。
(8)抗原の産生量は、細胞密度が飽和状態に達した後
急激に増加する。
急激に増加する。
(9)細胞の増殖はDM−160基礎培地に10%以上
の血清を添加したものが適当であるが、無地溝培地のウ
ィリアムスE基礎培地でも良好な***増殖を示す。
の血清を添加したものが適当であるが、無地溝培地のウ
ィリアムスE基礎培地でも良好な***増殖を示す。
(10)抗原産生の培地としてはウィリアムスE基礎培
地が最も適しており、培地交換のみで長期にわたり産生
物回収が可能である。
地が最も適しており、培地交換のみで長期にわたり産生
物回収が可能である。
(11)デキサメサゾン添加により、adr型B型肝炎
ウィルス表面抗原の産生量を増加させることができる。
ウィルス表面抗原の産生量を増加させることができる。
ちなみにヒト肝癌由来細胞株huSPは、53歳の日本
人の男性の肝癌組織より分離されたhuH−1細胞系(
日本癌学会総会第37回120頁1978年参照)から
樹立された細胞株であり、その細胞学的な性質は次の通
りである。
人の男性の肝癌組織より分離されたhuH−1細胞系(
日本癌学会総会第37回120頁1978年参照)から
樹立された細胞株であり、その細胞学的な性質は次の通
りである。
■)細胞由来:ヒト肝細胞癌組織。
2)細胞の形態:上皮性細胞。
3)染色体数:染色体モードは69゜
4)細胞の増殖温度:32〜42℃。
5)凍結保存ニー70℃限界なく継代培養可能。
6) 血性要求性:血性要求性が高い(牛胎児血清10
%要求する)。
%要求する)。
?) HBウィルスDNA :染色体ハプロイド当た
り約9ケ所に組込まれている。
り約9ケ所に組込まれている。
8) HBウィルスの遊離:認められない。
9) HBsAgの遊離:培養時に培養液中へ多量に
分泌する。
分泌する。
これら2つの細胞株(huGK −14とhuSP)に
は明らかに変異がみられる。
は明らかに変異がみられる。
huGK −14細胞株の培養は、細胞増殖期と抗原生
産期に特徴的に分けられる。即ち細胞***増殖状態にあ
る時(細胞増殖期)のHBsAg産生量は少なく、細胞
密度が飽和状態に達した後(抗原生産期)HBsAg産
生量は急激に増加する(図1参照)。
産期に特徴的に分けられる。即ち細胞***増殖状態にあ
る時(細胞増殖期)のHBsAg産生量は少なく、細胞
密度が飽和状態に達した後(抗原生産期)HBsAg産
生量は急激に増加する(図1参照)。
(イ)細胞増殖用の培地として適性をみるために。
幾つかの代表的な培地での細胞増殖とそれに血清添加し
た場合の増殖を調べた。結果を図2に示す。
た場合の増殖を調べた。結果を図2に示す。
細胞の増殖には、10%牛脂児血清(Fe2)添加Dト
160培地(極東製薬(株))が適当であるが、無血清
のウィリアムスE基礎培地でも良好な増殖を示す。
160培地(極東製薬(株))が適当であるが、無血清
のウィリアムスE基礎培地でも良好な増殖を示す。
(ロ)抗原用の培地としての適性をみるために。
DM−160培地とウィリアムスE培地についてデキサ
メサゾンを添加した場合と添加しない場合のHBsAg
産生量をみた。結果を表1に示す。
メサゾンを添加した場合と添加しない場合のHBsAg
産生量をみた。結果を表1に示す。
表1
培地 HBsAg産生量(n
g/mQ)デキサメサゾン(−) DM−16099
0ウイリアムスE 1340 デキサメサゾン(+) DM−1601370ウイリ
アムスE 2400 抗原生産期の培地としては血清を添加しないウィリアム
スE培地(GIBCO社)が最適である。またデキサメ
サゾンは、HBsAgの産生促進物質として有効である
。デキサメサゾンの添加量は10−’M〜10−5Mの
範囲で良いが104M程度が好ましい。
g/mQ)デキサメサゾン(−) DM−16099
0ウイリアムスE 1340 デキサメサゾン(+) DM−1601370ウイリ
アムスE 2400 抗原生産期の培地としては血清を添加しないウィリアム
スE培地(GIBCO社)が最適である。またデキサメ
サゾンは、HBsAgの産生促進物質として有効である
。デキサメサゾンの添加量は10−’M〜10−5Mの
範囲で良いが104M程度が好ましい。
(イ)、(ロ)の結果から細胞増殖の各フェーズのHB
sAg産生量を測定するためにデキサメサゾン10−’
Mを添加したウィリアムスE基礎培地で細胞の増殖と)
IBsAg産生量の関係をみた。結果を図1に示す。H
BsAgは細胞密度が飽和状態に達した後急激に増加し
ている。
sAg産生量を測定するためにデキサメサゾン10−’
Mを添加したウィリアムスE基礎培地で細胞の増殖と)
IBsAg産生量の関係をみた。結果を図1に示す。H
BsAgは細胞密度が飽和状態に達した後急激に増加し
ている。
培地中に分泌されたI(BsAgの定量は、EIA法(
「酵素免疫測定法」医学書院1982年第2版第1刷石
川英治gP41−P43)に使用する市販のHBsAg
測定キット(米国ダイナボット社)によって測定するこ
とができる。培地の回収は抗原生産期に入ってから、6
日間隔で5回以上可能であり、回収した培地のHBsA
gは2400ng/mQ程度の含有量がある。
「酵素免疫測定法」医学書院1982年第2版第1刷石
川英治gP41−P43)に使用する市販のHBsAg
測定キット(米国ダイナボット社)によって測定するこ
とができる。培地の回収は抗原生産期に入ってから、6
日間隔で5回以上可能であり、回収した培地のHBsA
gは2400ng/mQ程度の含有量がある。
培養後、口過して得られた培養口演を用いた1(BsA
gの精製法としては、限外口過膜により10乃至30倍
濃縮後、硫安塩析ないしは超遠心分離を行ない、その後
、塩化セシウムによる平衡遠心法。
gの精製法としては、限外口過膜により10乃至30倍
濃縮後、硫安塩析ないしは超遠心分離を行ない、その後
、塩化セシウムによる平衡遠心法。
庶糖濃度勾配遠心法を組み合わせる方法等がある。
血清添加培地では、血清蛋白質が多い為、前記の膜濃縮
が困難であるとともに、その後の各超遠心工程を数回繰
返すと言う煩雑な精製工程を必要とするが、本発明の細
胞株huGK−14の無血清培養で得られたHBsAg
の標品は、血清添加培地のそれと比較して簡単に調整さ
れ、かつ満足のいく精製標品である。
が困難であるとともに、その後の各超遠心工程を数回繰
返すと言う煩雑な精製工程を必要とするが、本発明の細
胞株huGK−14の無血清培養で得られたHBsAg
の標品は、血清添加培地のそれと比較して簡単に調整さ
れ、かつ満足のいく精製標品である。
この様に、本発明の細胞株huGK−14を用いると。
極めて安価な培地で、極めて容易に精製できるHBsA
gの大量生産が可能であり、得られたHBsAgは、ワ
クチン原料として極めて有用であり、又HBV感染診断
剤の原料としても有用である。
gの大量生産が可能であり、得られたHBsAgは、ワ
クチン原料として極めて有用であり、又HBV感染診断
剤の原料としても有用である。
実施例1 huGK−14の無血清培養細胞株huG
K−14完全無血清培養で、硫酸カナマイシン60μg
/rnn、接着因子ファイプロネクチンを添加したウィ
リアムスE培地(Flow社)を使用し、5%炭酸ガス
を含む空気、37℃で完全無血清培地にて培養した。容
器は24穴プレート(1mQ/ウェル)をもちい、接種
密度は2〜3 X 10’ cells/aJとした。
K−14完全無血清培養で、硫酸カナマイシン60μg
/rnn、接着因子ファイプロネクチンを添加したウィ
リアムスE培地(Flow社)を使用し、5%炭酸ガス
を含む空気、37℃で完全無血清培地にて培養した。容
器は24穴プレート(1mQ/ウェル)をもちい、接種
密度は2〜3 X 10’ cells/aJとした。
細胞密度の飽和状態時点で常法通りトリプシン処理し、
細胞を新たなプレートに接種し、完全無血清培地で培養
を継続する。以後2日間隔で培地交換をしながら14日
〜16日の単位で継代培養を繰り返す。
細胞を新たなプレートに接種し、完全無血清培地で培養
を継続する。以後2日間隔で培地交換をしながら14日
〜16日の単位で継代培養を繰り返す。
その結果を第3図に示す。無血清培地でも細胞密度は1
.2〜2.0X10’ cells/a#に達し、継代
培養も少なくとも5代は可能である。
.2〜2.0X10’ cells/a#に達し、継代
培養も少なくとも5代は可能である。
また継代数が増加しても、細胞増殖が認められた。
実施例2 HBsAg生産
培地としては、デキサメサゾン(Sigma社)10−
’M。
’M。
硫酸カナマイシン60μgIQ、接着因子ファイプロネ
クチンを添加したウィリアムスE基礎培地(Flo%1
社)を使用した。5%炭酸ガスを含む空気、37℃、培
地交換を2〜3日毎の条件で培養した。
クチンを添加したウィリアムスE基礎培地(Flo%1
社)を使用した。5%炭酸ガスを含む空気、37℃、培
地交換を2〜3日毎の条件で培養した。
容器24穴プレート(1mQ/ウェル)をもちい、接種
密度は、2.5申10’cells/a#とした。増殖
・回収は同一培地で行なった。13日で細胞密度は飽和
状態になり、この時点で新たに培地を交換し以降30日
間(6日間毎に培地回収を5回)のHBsAgの生産回
収を行なった。結果を表2に示す。回収した培地中のH
B s A gはEIAで測定した。
密度は、2.5申10’cells/a#とした。増殖
・回収は同一培地で行なった。13日で細胞密度は飽和
状態になり、この時点で新たに培地を交換し以降30日
間(6日間毎に培地回収を5回)のHBsAgの生産回
収を行なった。結果を表2に示す。回収した培地中のH
B s A gはEIAで測定した。
表2
回収回数 培養日数 培養液中の)HBsAg
量(ng/ml2)1回目 6日後
2,4002 12日後
2,7603 18日後
2,5804 24日後
2,3905 30日後
2,420
量(ng/ml2)1回目 6日後
2,4002 12日後
2,7603 18日後
2,5804 24日後
2,3905 30日後
2,420
図1は、huGK −14培養時の細胞増殖期と抗原生
産期とを示す。図2は、DM−160培地とウィリアム
スE培地について各々血清を添加する場合としない場合
についてのhuGK −14の増殖曲線を示す。図3は
、無血清のウィリアムスE培地を用い、細胞株huGK
−14を5代継代培養した時の増殖曲線を示す。 図面の浄書(内容(こ変更なし) 図 1 焙養IIM (日数) 図面の浄書r内容に変更なし) 図 2 A−−Fe210°ムDM 鱒1蚤日数 (日) 図3 y昔姿日委父(gン 手続補正書(方式) %式% 1、事件の表示 特願昭60−292427 2、発明の名称 ヒト肝癌由来の変異細胞株huGK−143、補正をす
る者 事件との関係 特許出願人 住 所 東京都豊島区上池袋1丁目37番1号名称
財団法人癌研究会 代表者 安 西 浩 4、代 理 人 住 所 〒105東京都港区虎ノ門−丁目19番14
号5、補正命令の日付 6、補正の対象 明細書及び図面 7.補正の内容 (1)明細書全文を別紙の通り補正する。(内容に変更
なし)(2)図1及び図2を別紙の通り補正する。(内
容に変更なし)
産期とを示す。図2は、DM−160培地とウィリアム
スE培地について各々血清を添加する場合としない場合
についてのhuGK −14の増殖曲線を示す。図3は
、無血清のウィリアムスE培地を用い、細胞株huGK
−14を5代継代培養した時の増殖曲線を示す。 図面の浄書(内容(こ変更なし) 図 1 焙養IIM (日数) 図面の浄書r内容に変更なし) 図 2 A−−Fe210°ムDM 鱒1蚤日数 (日) 図3 y昔姿日委父(gン 手続補正書(方式) %式% 1、事件の表示 特願昭60−292427 2、発明の名称 ヒト肝癌由来の変異細胞株huGK−143、補正をす
る者 事件との関係 特許出願人 住 所 東京都豊島区上池袋1丁目37番1号名称
財団法人癌研究会 代表者 安 西 浩 4、代 理 人 住 所 〒105東京都港区虎ノ門−丁目19番14
号5、補正命令の日付 6、補正の対象 明細書及び図面 7.補正の内容 (1)明細書全文を別紙の通り補正する。(内容に変更
なし)(2)図1及び図2を別紙の通り補正する。(内
容に変更なし)
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 下記の細胞学的性質を有する変異細胞株huGK−(1
)ヒト肝癌細胞由来変異株である。 (2)染色体モード数は51である。 (3)adr型B肝炎ウィルス表面抗原をコードする遺
伝子を含むDNAフラグメントが、染色体ハプロイド当
たり約8ケ所組み込まれている。 (4)adr型B型肝炎ウィルス表面抗原を著量産生す
る。 (5)細胞は不正円形で上皮性である。 (6)接着型の細胞である。 (7)生育温度は36.5±1℃が適している。 (8)抗原の産生量は、細胞密度が飽和状態に達した後
急激に増加する。 (9)細胞の増殖はDM−160基礎培地に10%の血
清を添加したものが適当であるが、無血清のウィリアム
スE基礎培地でも良好な***増殖を示す。 (10)細胞密度が飽和状態に達した後の維持培地とし
てはウィリアムスE基礎培地が最も適しており、培地交
換のみで長期にわたり産生量回収が可能である。 (11)デキサメサゾン添加により、adr型B型肝炎
ウィルス表面抗原の産生量を増加させることができる。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP27459384 | 1984-12-28 | ||
JP59-274593 | 1984-12-28 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS61268177A true JPS61268177A (ja) | 1986-11-27 |
JPH0534949B2 JPH0534949B2 (ja) | 1993-05-25 |
Family
ID=17543899
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP60292427A Granted JPS61268177A (ja) | 1984-12-28 | 1985-12-27 | ヒト肝癌由来の変異細胞株huGK−14 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS61268177A (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH02302669A (ja) * | 1989-05-17 | 1990-12-14 | Shinotesuto:Kk | B型肝炎ウイルス抗体検出システム |
-
1985
- 1985-12-27 JP JP60292427A patent/JPS61268177A/ja active Granted
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH02302669A (ja) * | 1989-05-17 | 1990-12-14 | Shinotesuto:Kk | B型肝炎ウイルス抗体検出システム |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPH0534949B2 (ja) | 1993-05-25 |
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