JPS6036471A - 光学活性オキサゾリジノン誘導体の製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は光学活性オキサゾリジノン誘導体の製造方法に
関するものであり、更に詳しくは、（式中、Ｘは低級ア
ルキル基、Ｙは置換又は未置換アルキル基、アルケニル
基或いは置換又は未置換芳香族炭化水素基） で表わされる３−アルキル置換−５−アシロキシメチル
オキサゾリジン−２−オンラセミ体に、化合物［ｉｌを
不斉的に加水分解して、 （式中、Ｘは前記と同じ） で表わされる光学活性（−）−３−アルキル置換−５−
ヒドロキシメチルオキサゾリジン−２−オンを生成させ
る立体選択的エステラーゼ活性を有する微生物又は該微
生物より得られた酵素を作用させる事により化合物用を
生成させ、生成した化合物［１］］及び有機酸と未反応
の一般式 ０　（式中、Ｘ、Ｙは前記と同じ） で表わされる光学活性（＋）−３−アルキル置換−５−
アンロキシメチルオキサジノシン−２−オンを分離し、
次いて化合物［■１を採取する。或いは、更に採取した
化合物［月を加水分解し、 （式中、Ｘは前記と同じ） て表わされる光学活性（ト）−３−アルキル置換−５−
ヒドロキシメチルオキサゾリジン−２−オンを生成させ
、採取することを特徴とする光学活性オキサゾリジノン
誘導体（１１及び１川を製造する方法に関する。

化合物［■ｉ及び面は光学活性なβ−受容体遮断薬の重
要な中間体である。

従来、光学活性なβ−受容体遮断薬の製法としては、例
えば下記の方法が知られている。

１）β−受容体遮断薬ラセミ体を光学分割する方法（特
開昭５５−１４９２３３．米国特許第３．６５５，６６
３号）。

２）３−アルキル置換アミノ−１，２−プロパンジオー
ルラセミ体を光学分割し、この活性体から誘導していく
方法（特開昭５１−＋！、８，７１１）。

３）Ｄ−マンニトールより■）−グリセロールアセトニ
ドを経て誘導していく方法〔ジャーナル・オン・オーカ
ニツク・ケミストリー（Ｊ、　Ｏ，Ｃ，）４、１．　（
１，９）　、　３１．２１〜３１２　／１．　（１９７
６）　、ケミカル・アンド・ファーマシュテカル・ブレ
チン（Ｃ１＋ｅｍｉｃａｌ　＆　ＰｈａｒｍａｃｅｕＬ
ｉｃａｌ　Ｂｕｌｌｅｔｉｎ）２９（１２）３５９３〜
３６００（１，９８１）］。

しかしながら、■）は最終製品ラセミ体を光学分割する
点てコスト的に不利である。２）は３−アルキル置換ア
ミノ−１，２−プロパンジオールが吸湿性であり、一旦
吸湿すると結晶性が悪く、光学分割法では容易に収率良
く高純度の光学活性体を得られない。また３）はＤ−マ
ンニトールからＤ−グリセロールアセトニドに誘導する
際、多量の四節酸鉛を必要とし、工業的規模で行・うに
は廃棄物の点で問題がある。以上挙げたいずれの方法も
一長一短があった。

ところで、光学活性なβ−受容体遮断薬の合理的な合成
経路として下記のような経路が知られている（ケミカル
・アンド・ファーマシュテカル・ブレチン２９（１２）
３５９３〜３６０．０（１９８１）律Ｅ［１喜典ら、カ
ナダ特許第９６５，７８７号）。

■）−マンニトール→→Ｉ）　−クリセルアルデヒドリ
１１ 化合物間 ＊ −（−）Ｘ　−Ｎ１−ＴＣＩ−１２ＣＨＣＨ２０Ａｒｙ
　］　（式中Ｘは前記と同じ）Ｈ ・・・反応経路［Ａ］ 光学活性β−受容体遮断薬 そこで本発明者らは化合物［１１１に着目し、化合物間
の簡便な新規製造法の開発を目的として鋭意研究した。

化合物間の５位にヒドロキシメチル基があることに着目
し、化合物間のラセミ体をエステル化させ、化合物［Ｉ
］を合成し、この化合物［１１を不斉的に加水分解する
エステラーゼ活性を有する微生物又は酵素を作用させる
ことにより化合物間が容易に得られるのではないかと考
え、そのスクリーニング実験を試み、既に一部スクリー
ニングを実施し、高い不斉氷解能を有する微生物由来の
酵素を見い出している（特願昭５７−１４１５７５参照
）。

又その中でスクリーニング方法についても述べ、同様の
不斉氷解能をもつ、微生物菌体及び該微生物由来の酵素
が見つかる可能性を示唆している。

今回そのスクリーニング方法に基づき、継続実施した結
果、新たに不斉氷解能をもつ、新しい属に属する微生物
菌体及び該微生物由来の酵素を見い出し、更に簡単な分
離操作により化合物間と未反化学的方法で加水分解する
ことにより化合物［Ｉ］１を採取できることが判明し、
本発明を完成さぜるに至つブこ３つ 即ち本発明は、化合物［Ｉ］を不斉的に加水分解して化
合物間を生成させる立体選択的エステラーゼ活性を有す
る微生物又は該微生物より得られた酵素を作用させる事
により化合物［１１１を生成させ、次いで化合物間と生
成した自機酸及び未反応の化合物［１１を有機溶媒で抽
出分離する方法、或いは反応液を−１，１有機溶媒で転
溶するか又はそのまま反応液をカラマドグラフィー処理
か、分溜操作を行い分離する方法等により化合物（４］
を採取し、或いは、史に採取した化合物［１］を加水分
解し、化合物間を生成し、採取することを特徴とする光
学活性オキ−リソリノノン誘導体（↑１及び［川の製造
方法に関するものである。

本発明により、従来法と比べ高純度でかつ安価な光学活
性β−受容体遮断薬の合成かｉ’ｉＪ能となつブこ、−
１ 本発明の）、（質として用いられる一般式で表わされる
オギサゾリシノンｉｉ方導体におりる置換基Ｘとしては
低級アルキル基が用いられる。、例えはメチル基、エチ
ル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基又は［−
ブチル基等が挙りられるが、中でもイソプロピル基又は
［−ブチル基が好ましい１、一方置換基Ｙとしては、置
換又は未置換アルキル基、アルケニル基、或いは置換又
は未置換芳占族炭化水素基が挙けられる。更に詳しくは
、例えばメチル基、エヂルシ献　プロピル基、又はブチ
ルノ、（の如き未置換アルキル基：例えはクロロメチル
基、ジクロロメチル基、トリフルオロメチル基、又はβ
、１３．β　−１・リクロロエトキンメチル基の如きハ
ロゲン基、水酸基、或いはアルコキシ基で置換された置
換アルキル基；例えはアリル（Ａｌｌｙｌ）　基の如き
アルケニル基白列えばフェニルＬ　ｌ）−メチルフェニ
ル基、ｐ−クロロフェニル基、又はｐ−メトキシフェニ
ル基の如き未置換又はアルキル基、ハロゲン基、水酸基
或いはアルコキシ基で置換されたアリール（Ａｒｙ　’
　）　基；　例エバベンジル基、ｐ−メチルベンジル基
、■）−クロロベンジルＬ　ｐ−ヒドロキシベンジル基
、又はＩ〕−メトキシペンシル基の如き未置換又はアル
キル基、ハロゲン基、水酸基或いはアルコキシ基で置換
されたアラルキル基を例示することができる。

化合物山を不斉的に加水分解腰化合物用を生成させる立
体選択的エステラーゼ活性を有する微生物としてはアル
カリ土類金属又はアクロモバクタ−属に属する微生物が
挙げられ、特にアルカリゲネス°フエーカリス（Ａｌｃ
ａｌｉｇｃｎｅｓ　ｆａｅｃａｌｉｓ）ＩＦＯ１２６６
９，アクロモバクタ−・パルブルス（Ａｃｈｒｏｍｏｂ
ａｃｔｃｒ　ｐａｒｕｖｌｕｓ）　ｌ　Ｆ　０１３１８
２がある。

これら微生物の培養源は、通常資化しうる有機及び無機
の炭素源、窒素源及びビタミン・ミネラル等を適宜配合
したものを用い、培養温度は２゜〜４０℃、ｐＨ３〜１
１、好ましくはｐＨ４〜８の範囲が用いられる。又通気
撹拌により微生物の生育を促進させることもできる。、 化合物［１，１の不斉加水分解反応においては、培養の
開始時に培地中に基質即ち化合物１１１を添加し、培養
と並行して加水分解を行う方法、或いは前記のようにし
て培養液菌体を化合物［月と接触させ加水分解を行う方
法とがある。望ましくは、菌体を遠心分離等で濃縮後、
高濃度菌体液とし、このものに化合物［Ｉ］を添加する
方法が反応後の生産物の回収の立場から好ましい。

一方、前記該微生物より得られた酵素としては、例えば
前記該微生物の培養液を遠心分離して菌体を得、この菌
体をリン酸緩衝液で均一になるよう懸濁させ、次いで水
冷下、ブラウンホモンナイザーで破砕し、遠心分離して
得た無細胞抽出酵素液か或いは更にこの無細胞抽出液を
３０〜７０％の硫安分画処理を行い、塩析した両分をリ
ン酸緩衝液に溶解さ也−昼夜冷所透析して得た部分精製
酵素液が用いられ、これら酵素液に化合物（月を接触さ
せ、加水分解反応を行うことができる。或いは、又微生
物より精製した加水分解酵素、例えばリパーゼ（Ｅ、　
Ｃ，３，１，］、、　ａ、）を接触させ、加水分解反応
を行うこともできる。更にこれら微生物又は該微生物よ
り得られた酵素を用いて、例えば固定化させることによ
り、不斉加水分解反応を繰り返し行うこともてきる。

化合物［Ｉ］の反応液中での濃度は０１％から３０％程
度の高濃度まで用いることができる。

又、化合物［１の水に対する溶解度は一般に低いが、撹
拌等により、混合を行うことにより、菌体又は酵素との
接触を充分保つようにすれば、本反応にとって支障とは
ならない。

又、アセトン等の親水性溶剤や界面活性剤等を反応に支
障とならない程度加えても良い。

加水分解反応を行う際の１）Ｉ（は４〜８の範囲が好ま
しい。化合物１月を高濃度で反応させる場合、加水分解
された有機酸が次第に反応液中に蓄積し、ｐ　Ｈが低下
してくるので適当な中和剤例えばＮａＯＨ溶液等で最適
Ｉ）Ｈを保持するのか好ましい。

加水分解反応は通常１０〜５０″Ｃの範囲が用いられる
が、使用する菌株又は酵素に適した温度が採用される。

未反応の化合物旧を生成する有機酸及び化合物間から分
離し、採取する方法としては、一般的精製方法を用いれ
ば良い。

例えば、反応液より遠心分離処理によって、菌体等の不
溶性物質を除去した後、一般によく使用される有機溶媒
、例えばヘキサン、シクロヘキサン、エーテル、酢酸ブ
チル、クロロホルム、ジクロロメタン、ベンゼン又はレ
ルエン等で未反応の化合物［月を抽出、次いで減圧濃縮
することにより採取することができる。

又化合物［１］の種類例えば置換基Ｙがメチル基、エチ
ル基又はプロピル糸等の低級アルキル基の場合、前記有
機溶媒抽出分離操作では完全に分離しがたい。この場合
には、前記と同様不溶性物質を除去した後、減圧濃縮し
、そのままカラムクロマトグラフィー処理を行うか、或
いは一旦有機溶媒例えは酢酸エチル等で転溶、減圧濃縮
後、カラムクロマトグラフィー処理を行えば簡単に分離
し、化合物１月を採取することができる。カラムクロマ
トグラフィーとしては、通常よく使われるシリカゲル、
アルミナ又はフロリシル等の担体を用いることができる
。一方、又、化合物［月の種類により、化合物［ｉ］と
生成した化合物間の沸点に差がある場合には、分溜操作
により容易に分離し、化合物［１］を採取することもで
きる。

化合物田を更に加水分解し、化合物間を生成し、採取す
る方法としては、例えば化合物ＩＪＩを室温下、数日間
ｐｌ−１３〜１３の範囲に調整しながら放置しておけは
化学的に加水分解が進行し、化合物間が生成する３、又
化合物［１］を２０〜４０℃　ｐ＋−１４〜８の範囲に
調整しながら、不斉炭素を識別しない加水分解酵素例え
はリパーゼ（ステアプシン）、エステラーゼ（豚レバー
）等を作用させて、化合物Ｕ、Ｉ］を生成させることも
できる。次いで生成した化合物１田を有機溶媒例えは酢
酸エチル等で抽出し、減圧濃縮すれば化合物Ｕｌｌの結
晶物を採取することができる。

以下、実施例により、本発明を具体的に説明するが、本
発明はこれらの実施例のみに限定されるものではない。

実施例１ 下記の組成からなる栄養液体培地を調製し、２４坂ロフ
ラスコに４００　ａｔずつ分注後、１２０’に。

１５分殺菌した。

〔培地組成］　グルコース４％、イーストエキス０３％
、肉エキス０３％、ヘフトン０．３％ン、リン酸ニアン
モニウム０２％、リン酸−カリウム０．１％、（ＰＩ（
７，０） これとは別に同じ組成の培地にて前培養をしたアルカリ
ゲネス・フェーカリス　ＩＦｏ　１２６６９の種菌液１
．０　ｍｌを前記培養培地に接種し、３０’Ｃ。

２４時時間表う培養を行った。合計１０本培養し、培養
波計４ｅを得た。この培養液を遠心分離し、菌体を集め
た。この菌体を′Ｖ１／１ｏリン酸綾山液（ＰＩＴ　７
．０　）　４．００　ｍｌニ懸澗し、Ｊ４Ｌ質３−［−
ブチル−５−アセトキシメチルオキザソリシン−２−オ
ン Ｏ １１容器内で撹拌下、Ｎａ０１１溶液でＩ）　Ｈを５〜
７に調整しながら、３０°Ｃ１１８時間反応させた。

反応後、遠心分離して得た上清を酢酸エチル４００　ｙ
ｎｌで２回抽出し、減圧濃縮した。

この濃縮物をンリカケルカラムに負荷し、ヘキサン／ア
セトン（３：ｌ冶昆液て溶出される３−し−ブチル−５
−アセトキソメチルオキザソリノンー２−オン画分を集
め減圧濃縮し、溶媒を除去すると、無色の油状物Ｌ　７
．　ｌ　ｇか得られた１−１比！４光度は、［α］　＋
２１．９（Ｃ，１，０，クロロポルム）Ｉ） てあり、Ｎ　Ｍ　Ｒ測定値は以Ｆの通りであった１、Ｎ
ＭＲ（９０ＭＩＩＺ、） δＣ１）ＣＣ３１，４（９１１，ｓ、Ｃ（ＣＩＩ３）３
）２、１　（３Ｈ、ｓ　、　−Ｃ−−ＣＩＩ３１　− 〇 ３、３−３．８　（２Ｈ、ｍ　、−Ｃ１１２Ｎ−）４．
１−４．２５　（２１−ｆ、ｍ、　−ＣＩ−１２０−）
４．４−４．７　（Ｌ　Ｈ、ｍ　、　−Ｃ０２ＣＨ（０
−）ＣＨ２−）次いで、得られた（−１−）−ａ−ｔ−
フチルー５−アセトキシメチルオキザゾリジン−２−オ
ンを１０（１ｍｌの水に懸潤し、Ｎ　ａ　ＯＨ溶液を加
えてｐＨ１（１−１２に調整しながら、室温下、２に１
間加水分解反応を行った１、 酢酸エチル２００　ｙｎｆで抽出し、脱水処理後、減圧
濃縮した。この濃縮物にヘキサノを徐々に加えていくと
、無色の結晶が４１Ｆ出したし、これを（Ａコめて真空
乾燥したところ、比旋光度［αｌ　−１−２８，１１） （Ｃ，１，０，クロロホルム）を有する（１）−３−［
−ブチル−５−ヒドロキシメチルオキザゾリ／ンー２−
オン１２．０Ｚを得た。Ｎ　Ｍ　Ｒ３１１定値は以下の
通りであった。

Ｎ　ＭＲ（９０Ｍｌｌｚ） δＣＤＣｎａ　１．４（９１Ｌｓ、Ｃ（ＣＩＩａ）ａ　
）３．４−３．９５　（５１１，−Ｃ１１２Ｎ−、−Ｃ
Ｉ！２０−、−０１１　）４．３−４．６　（ＩＨ，ｍ
、　−Ｃ１１２ＣＩ−１（０−）Ｃ１１２−）実施例２ 菌株をかえて、実施例１と同様の操作を行い、表１の結
果を得た。

表１　基質　３−［−フチルー５−アセトキシメチルオ
キザゾリジンー２−オン 実施例３．４ 菌株及Ｏ・基質を３−イソプロピル−５−７セｌ−キシ
メチルオキサソリシン−２−オンにかえて、実施例１と
同様の操作を行い、表２の結果を得た。

表２　基質　３−イソプロピル−５−アセトキシメチル
オキザンリソン　２−オ ン 実施例５ 下記の組成からなる栄養液体培地を調製し、２１坂ロフ
ラスコに４００　ｍｌずつ分注後、１２０″Ｃ２１５分
殺菌した。

［培地組成」　グルコース４％、イーストエキス０３％
、肉エキス０３％、ペプトン０．８％、リン酸ニアンモ
ニウム０．２％、リン酸−カリウム０１％、（ＰＨ７，
０） これとは別に同じ組成の培地にて前培養をしたアルカリ
ゲネス・フエーカリス　ＩＦｏ　１２６６９の種菌液１
０ｍ１を前記培養培地に接種し、３０°Ｃ５２４時間振
とう培養を行った３３合１ｉ１１０本培養し、培養波計
４１を得た。この培養液を遠心分離し、菌体を集めた。

この菌体をＡ１／’　１．０　１Ｊン酸緩衝液（■司１
７．０）／１．００ノ〃ｌに懸濁し、基質３−（−ブチ
ル−５−ペンゾイロキシメチルオキザゾリンン１１０ダ をンｆ＋ｓＪ用　しブこ。

これを１ｅ容器内テ撹拌−Ｆ、ＮＸｌ０１１　溶Ｍ　で
Ｐ　Ｈヲ５〜７に調整しながら、３０　”に、４０時間
反応さゼた１、反応後、遠心分離して得た」１清をトル
エン４００ｍ１で未反応の３−ｔ−ブチル−５−ヘンソ
イロキシメチルオキザソリノン−２−オンを抽出し、減
圧濃縮した。

次に、この濃縮物を２００ｍ／のゞ’／’Ｉ　Ｏリン酸
緩衝液に懸濁し、リパーゼ（ステアブンン）２ｇを添加
、撹拌下３０°に　、　Ｎａ（ＭＩ溶１１にでｐＨを５
〜７に調整しながら加水分解反応を１８時間行った３、
次いて耐酸エチル□１００　ｍ（て抽出し、脱水処理後
減圧濃縮した１、この濃縮物にヘキサノを徐々Ｉこ加え
ていくと、無色の結晶が４１７出したし、これを１６　
’ 集めて真空１陀燥したところ、比＆光度１αｌ　−１２
８，３１） （ｃ’、ｉ、ｏ、クロロポルム）を有する（−１）　−
３−ｔ−フヂルー５−ヒドロキシメチルオキザソリシン
＝２−オン１２２ｇを得た。

実施例６−１２ 基質をかえて、実施例５と同様の操作を行い、表３の結
果を得た。

尽 看１） 実施例１３ アルカリゲネス・フエーカリス　Ｉ　Ｆ　Ｃ）１２６６
９を用いて前記実施例１と同様の培養を行い、培養液４
．００　ｍｌを得た。この培養液にＭ質３−ｔ−フチル
ー５−アセトキシメチルオキザゾ添加した。これを１４
容器内で通気撹拌ｌｚ、Ｎａ０１１溶液でｌ）　Ｈを５
〜７に調整しながら、３０°（じ、１８時間反応させた
１、以下実施例１と同様の操作を行い、比旋光度［α１
　−Ｉ２フイ（Ｃ，１，０，クロロポ■） ルム）を有する（ｌ−）　−３−ｔ−ブチル−５−ヒト
ロキシメヂルオキザソリシン−２−オン１．０２！７を
得た。

実施例】４ グルコース７％、イーストエキス０３％、肉エキス０３
％、ペプトン０゜３％、リン酸ニアンモニウム０２％、
リン酸−カリウム０１％（Ｉ’ｌ（７，０）含有する培
地ＬＯｍｌにアルカリゲネス・フェーカリスＩ　Ｆ　Ｏ
１２６６９を植菌し、３０’Ｃ，２４時間振とう培養を
行った１つ 次に前記培養培地４００ｍ１に前培養液を接種し、同時
に基質３−ｔ−ブチル−５−アセトキシメヂ４．０７を
添加し、３０°ｃ、４８時間培養及び反応を並行１−で
行った。

以下実施例１と同様の操作を行い、比が１・光度１６　
。

＋ａ＋　、−１２７，６（Ｃ、１，０、クロロポルム）
を有ｔ　７＋４＋）３−　ｔ−７’チル−５−ヒドロキ
シメチルオキサソリジン−２−オン０．８４−９を得た
。

実施例１５ アルカリゲネス・フエーカリス　Ｉ　Ｆ０１２６６９を
用いて前記実施例１と同様にして得た培養液４１を遠心
分離し、菌体を集めた。この菌体を　／１０　リン酸Ｆ
２　ｉ！Ｉｌ液（ｐＨ７、ｏ＞４ｏ。

ｍｔに懸濁し水冷しながら、フラウンホモジナイリーー
で菌体破砕し、遠心分離して無細胞抽出酵素液を得た。

この酵素液に基質３−［−ブチル−５−アセトキシメチ
ルオキサソリシン−２−オンを４．０ｇ添加し、撹拌下
、ｐｌｊをＮａＯＨ溶液て５〜７に調整しながら、３０
°ｃ、１８時間反応を行った。この反応液を減圧濃縮し
、シリカゲル力ラムに仏前し、以−１仮実施例１と同様
の操作を行い、比旋光度（αｌ　−１−４３，５（Ｃ，
Ｌ、Ｏ，クロロホルＩ） ム）を有する（＋）−３−ｔ−ブチル−５−ヒドロキシ
メチルオキサソリジン−２−オン１．］２＆を得ブこ。

実施例１６−１８ 菌株及Ｑ・基質をかえて、実施例１５と同様の操作を行
い、表４の結果を得た。、 表４ Ｘ−表３と同じ 実施例１９ アルカリゲネス　フエーカリス　ＩＩ”０　１２６ｃｉ
９を用いて＋）ｉＪ記実施例】と同様にして？！Ｊた培
養液４ｅを遠心分離し、菌体を果めた。、この菌体をＪ
　。

リン酸緩征Ｉ液（Ｐ　Ｈ７，０）　４００．ｍｔに＠陶
し、氷冷しながらフラウン・ホモ７ナイザーで破砕し、
遠心分離して無細胞抽出液を得た１、 次いて硫安分画を行い、３０〜７０　％、５濃度で１ｉ
、Δ析Ｌ　タｕＴ＋ｉ分をＭ′　’Ｊン酸緩ｔｊＭ（ｐ
Ｈ７、（１）０ ４０屑ｆに懸濁させ、−昼夜冷所で透４１ｉして部分ｔ
１１」製した酵素／ｌ’＜を０Ｊだ６、この酵素／ｌｋ
に基質３−［主フチルー５−アセ１ヘキンメチルオキザ
ソリンンー２−、ｔ　ンヲ４．０　！７　添加り、、撹
拌下、Ｎａ（−）ＩＩ　＃ｉ　＋′１ｋ　で１月１”：
；：５〜７　ｉｃ　調９１　Ｌ、　ナカラ、３０　”Ｃ
；　、　１８　時間反応を行った１、反応液は以下実施
例１と同様の操作を行い、比Ｈ’ｓ光度［α］　−）−
４，２，７’　（Ｃ、１，（１。

Ｉ） クロｌコボルＡ）を有する（１−）　−３−ｔ−ブチル
−５−ヒドロキシメチルオキサソリジン−２−オン１．
１０ｇを得た。。

実施例２０−２２ ｌｖ１株及びノー（、質をかえて、実施例１９と同様の
操作を行い、表５の結果をｔ（Ｊた。。

表５ 実施例２３ ４０ｍ１のＭ／／１ｏ　リン酸Ｆ２　別液（ｐＨ７，０
）に、リバーセ゛　■ンＬ　２　Ｇ　６　（Ｅ、　Ｃ，
３，１，１，３，。

アルノＪリゲネス２名糖産業）１０ｇ及び３−Ｌ−ブチ
ル−５−アセトキシメチルオキサゾリジン−２−オン４
．０９を添加し、ＮａＯＨ溶液でｐ　Ｈを５〜７に調整
しながら、撹拌下、３０°Ｃ２１８時間加水分解反応を
行った。この反応液は以上実施例１と同様の操作を行い
、［α］　＋４４．５（Ｃ，１，０゜クロロボルム）を
イコするＨ−ａ−ｔ−フチルー５−ヒドロキシメチルオ
キサソリシン−２−オン１．０１　ｇ　をｆ尋ブこ３、 実施例２４．−、−２６ 酵素及び基質をかえて、実施例２２と同様の操作を行い
、表６の結果を得た。

表６ ■表３と同じ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （式中、Ｘは低級アルキル基、Ｙは置換又は未置換アル
   キル基、アルケニル基或いは置換又は未置換芳香族炭化
   水素）、（） て表わされる３−アルギル置換−５−アシロキシメチル
   オキサゾリジン−２−オンラセミ体に、化合物（１１を
   不首的に加水分ｌｌ１ｌｌ′して、（式中、Ｘは前記と
   同し） で表わされる光学活性（−）−３−アルキル置換−５−
   ヒドロキシメチルオキサプリジン−２−オンを生成させ
   る立体選択的エステラーゼ活性を有する微生物又は該微
   生物より得られた酵素を作用させる事により化合物間を
   生成させ、生成した化合物間及び有機酸と未反応（式中
   、ｘ、ｙは前記と同じ） で表わされる光学活性（１）−３−アルキル置換−５−
   アシロキシメチルオキサゾリジン−２−オンを分離し、
   次いて化合物用を採取することを特徴とする光学活性（
   １）−３−アルキル置換−５−アシロキシメチルオキサ
   ゾリジン−２−オンの製造方法っ （２）化合物ｔｌ］の式中Ｘがし一フヂルノ、（又はイ
   ソプロピル基である特許請求の範囲第１項記載の製造方
   法。 （３）化合物田の式中Ｙの置換又は未置換芳香族炭化水
   素基がアリール基（Ａｒｙｌ）　、置換アリ−ル基、ア
   ラルキル基又は置換アラルキル基である特許請求の範囲
   第１項記載の製造方法。 （４）微生物がアルカリゲネス属、又はアクロモバクタ
   −属に属する特許請求の範囲第１項記載の製造方法っ （５）微生物がアルカリゲネス・フエーカリス又はアク
   ロモバクタ−・パルブルスである特許請求の範囲第１項
   又は第４項記載の製造方法。 （６）酵素が微生物菌体を破砕処理して得た無細胞抽出
   液の酵素或いは更にこの無細胞抽出液を硫安分画処理し
   て得た部分精製された酵素である特許請求の範囲第１項
   記載の製造方法。 （７）化合物［１１を添加した培地で、ｐｉ−Ｔ４〜８
   の範囲で微生物を培養し、作用させる特許請求の範囲第
   １項記載の製造方法。 （８）微生物を栄養培地で培養して得た培養液、又はこ
   の培養液から微生物菌体を分離して菌体懸濁液を調製し
   、それを化合物［１，］に作川さぜる特許請求の範囲第
   １項記載の製造方法。 （９）微生物の培養をｐｉ−Ｔ３〜１１の範囲で行い、
   培養液又は菌体懸濁液と化合物［１１との反応をＩ）Ｉ
   （４〜８の範囲で行う特許請求の範囲第８項記載の製造
   方法、。 ００）　酵素と化合物［１，］との反応を１０〜５０℃
   、ｐＨ４〜８の範囲で行う特許請求の範囲第１項又は第
   ６項記載の製造方法。 （ＩＩ）化合物［１１と生成する化合物［０及び有機酸
   を分離する方法において、有機溶媒で抽出分離する特許
   請求の範囲第１項記載の製造方法３、αの　化合物１１
   １と生成する化合物間及び有機酸を分離する方法におい
   て、反応液を一旦有機溶媒で転溶するか、又はそのまま
   反応液をカラムクロマトグラフィー処理で分離する特許
   請求の範囲第１項記載の製造方法０、 （１３化合物１月と生成する化合物間及び有機酸を分離
   する方法において、反応液を一旦有機溶媒で転溶するか
   、又はそのまま反応液を分溜操作により分離する特許請
   求の範囲第１項記載の製造方法。 ０４）一般式 （式中、Ｘは低級アルキル基、Ｙは置換又は未置換アル
   キル基、アルケニル基或いは置換又は未置換芳香族炭化
   水素基） で表わされる３−アルキル置換−５−アシロキシメチル
   オキサゾリジン−２−オンラセミ体に、化合物［Ｌ］を
   不斉的に加水分解して（式中、Ｘは前記と同じ） で表わされる光学活性（−）３−アルキル置換−５−ヒ
   ドロキシメチルオキサ゛ノリジン−２−オンを生成させ
   る立体選択的エステラーゼ活性を有する微生物又は該微
   生物より得られた酵素を作用させる事により化合物間を
   生成さぜ、生成した化合物間及び有機酸と未反応の（式
   中、Ｘ、Ｙは前記と同じ） で表わされる光学活性（ト）−３−アルキル置換−５−
   アシロキシメチルオキサゾリジン−２−オンを分離後、
   化合物［Ｉ］を採取し、次いで採取した化合物１月を加
   水分解し、 １ （式中、Ｘは前記と同じ） で表わされる光学活性（」→−３−アルキル置換−５−
   ヒドロキシメチルオキザゾリジン−２−オンを生成さぜ
   、採取することを特徴とする光学活性（１）−３−アル
   キル置換−５−ヒドロキシメチルオキザゾリジン−２−
   オンの製造方法っ ０υ　化合物１月の式中Ｘがし一ブチル基又はイソプロ
   ピル基である特許請求の範囲第１４項記載の製造方法。 （１６）化合物［１］の式中Ｙの置換又は未置換芳香族
   炭化水素基かアリール基（Ａｒｙｌ）　、置換アリール
   基、アラルキル基又は置換アラルキル基である特許請求
   の範囲第１４項記載の製造方法、３ ０′７）微生物がアルカリ土類金属又はアクロモバクタ
   −属に属する特許請求の範囲第１４項記載の製造方法、
   、 （１８）微生物がアルカリゲネス・フエーカリス又はア
   クロモバクタ−・パルフルスである特許請求の範囲第１
   ４項又は第１７項記載の製造方法。 （ｌり酵素が微生物菌体を破砕処理して得た無細胞抽出
   液の酵素、或いは更に硫安分画処理して得た部分精製さ
   れた酵素である特許請求の範囲第１４項記載の製造方法
   。 α）化合物１月を添加した培地で、ｐ＋−１４〜８の範
   囲で微生物を培養し、作用させる特許請求の範囲第１４
   項記載の製造方法。 ＣＤ　微生物を栄養培地で培養して得た培養液、又はこ
   の培養液から微生物菌体を分離して菌体懸濁液を調製し
   、それを化合物用に作用させる特許請求の範囲第１４項
   記載の製造方法、（イ）微生物の培養をｐＨ３〜１１の
   範囲で行い、培養液又は菌体＠　陶＞［Ｍと化合物［１
   １との反応をＰＨ４〜８の範囲で行う特許請求の範囲第
   ２１項記載の製造方法。 （ハ）酵素と化合物１月との反応を１０〜５０°（２、
   Ｉ）Ｉ−１４〜８の範囲で行う特許請求の範囲第１４項
   又は第１９項記載の製造方法、３鉋）化合物［１１と生
   成する化合物用及び有機酸を分離する方法において、有
   機溶媒で抽出分離する特許請求の範囲第１４項記載の製
   造方法。 （ハ）化合物［１１と生成する化合物［１１１及び有機
   酸を分離する方法において、反応液を一旦有機溶媒で転
   溶するか、又はそのまま反応液をカラムクロマトグラフ
   ィー処理で分離する特許請求の範囲第１４項記載の製造
   方法。 （ハ）化合物（月と生成する化合物［川及び有機酸を分
   離する方法において、反応液を一旦有機溶媒で転溶する
   か、又はそのまま反応液を分溜操作により分離する特許
   請求の範囲第１４項記載の製造方法。 匈　化合物１月を加水分解する方法において、ｐＴ−Ｉ
   Ｂ〜１３の範囲に保持し、化学的に加水分解反応を行う
   特許請求の範囲第１４項記載の製造方法。 （ハ）化合物［Ｉ］を加水分解する方法において、ｐＨ
   ４〜８の範囲で加水分解酵素を作用させ、酵素的に加水
   分解反応を行う特許請求の範囲第１４項記載の製造方法
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