JPS6025436B2 - Water-soluble rifamycin - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は水落性リフアマィシンおよびそれらの製造方法
に関する。DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION The present invention relates to water-dropable rifamicins and methods for their production.

過去における研究は、リフアマイシンのある種の誘導体
は広く多様の生物効果を有することを示した。Studies in the past have shown that certain derivatives of rifamycin have a wide variety of biological effects.

たとえば、抗菌活性特に抗結核活性、抗ウイルス活性、
免疫抑制活性、抗白血病活性である。それらは、そのよ
うな譲導体のあるものがヒトの治療に用いられうろこと
を示唆した。生物活性を有するリフアマィシン誘導体を
うるためには、それらの製造にいくつかの方法が示唆さ
れた（ルーマニャ特許Ｎｏ．６２７７８および６２４３
７）。For example, antibacterial activity, especially antituberculous activity, antiviral activity,
It has immunosuppressive activity and anti-leukemia activity. They suggested that some such derivatives could be used in human therapy. In order to obtain biologically active rifamicin derivatives, several methods have been suggested for their production (Romanian Patent Nos. 62778 and 6243).
7).

これらの方法には共通した欠点がある。つまり、生成物
は水性媒体中の溶解性が低いかまった〈不落である。そ
れで、生物効果の評価が困難となり、経口投与後の腸よ
りの吸収に制限因子となる。それで、今日では、いくつ
かの例外を除いて、生物効果の測定に際して、ジメチル
スルホキサィドまたは洗浄剤の存在であらかじめ溶解し
ておく。These methods have common drawbacks. That is, the product is bulky with low solubility in aqueous media. This makes evaluation of biological effects difficult and becomes a limiting factor for intestinal absorption after oral administration. Therefore, today, with some exceptions, when measuring biological effects, they are predissolved in the presence of dimethyl sulfoxide or detergents.

しかし、洗浄剤およびジメチルスルホキサィドは毒性を
有し、試験に際して、明確な効果を与えないことになる
。不溶性リフアマィシン誘導体を塩溶液として調製しえ
ぬことは、今日ふつうに行なわれている。However, detergents and dimethyl sulfoxide are toxic and will not have a clear effect when tested. It is common practice today that insoluble rifamicin derivatives cannot be prepared as salt solutions.

核酸ポリメラーゼのような酸素系についての試験での制
限因子となる。ヒトに用いる時に細胞レベルで活性を示
すリフアマィシンについて酵素系にあるそのような方法
を用いえない。つまり、細胞レベルでは、種々の膜横造
に反応し、正常の細胞機能を損なわないで惨入し、しか
も病的に変型された細胞に対する阻止効果を失なわない
のである。ジメトキシスルホキサィドまたは洗浄剤の存
在で溶解したりフアマィシン誘導体の生物効果の試験で
は、正常細胞に対する効果と病的に変型された細胞に対
する効果のあいだの区別が困難である。It is a limiting factor in tests for oxygen systems such as nucleic acid polymerases. Such an enzymatic method cannot be used for rifamicin, which is active at the cellular level when used in humans. In other words, at the cellular level, it responds to various membrane structures, invades the cell without impairing normal cell functions, and does not lose its inhibitory effect on pathologically transformed cells. In testing the biological effects of famycin derivatives dissolved in the presence of dimethoxysulfoxide or detergents, it is difficult to distinguish between the effects on normal cells and on pathologically transformed cells.

溶解のための添加物は、両方の型の細胞に影響し、ジメ
トキシスルホキサィドまたは洗浄剤が存在するだけで、
正常および病的の両細胞共に、主要な代謝経路（蛋白質
、ＤＮＡおよびＲＮＡ）に影響する。そのような条件で
、同じ誘導体でも、ジメトキシスルホキサィドーこ溶解
したあとでは、溶解しない場合よりその作用が強く現わ
れるものと考えうる。Additives for lysis affect both types of cells, and only the presence of dimethoxysulfoxide or detergents
It affects major metabolic pathways (proteins, DNA and RNA) in both normal and pathological cells. Under such conditions, even if the same derivative is dimethoxysulfoxide, its effect will be stronger after it is dissolved than when it is not dissolved.

それで塩溶液に非常に僅かしか溶解しないある種のりフ
アマィシン誘導体を用いた実験結果は、誤まった結論を
導び〈可能性がある。塩溶液へのすぐれた溶解性を有す
るある種のりフアマィシン誘導体を製造することは、種
々の生物効果を試験する上での正しい条件を設定しまた
それらの治療効果を増加させるのに非常に重要である。Therefore, experimental results using certain gluefamycin derivatives that are very poorly soluble in salt solutions may lead to erroneous conclusions. The production of certain lipid amycin derivatives with good solubility in salt solutions is of great importance in setting the correct conditions for testing various biological effects and increasing their therapeutic efficacy. be.

知られているように、胆汁中に選択的に溶解してしまう
ので、リフアンピシン誘導体は、陽一肝臓の回路をまわ
り体中に長く留まるか、肝臓に対し不快で危険となる、
長時間の負荷を与え、ビリルビンおよび類似の代謝物の
胆汁中での溶解いき値を上昇させる。このような肝臓お
よび胆のうの変化はリフアンピシンで治療された患者の
多数に現われ１０％を超える治療のうまくいかない例は
、リフアマィシンのある種の可溶化された形の導入で完
全に回避されえた。本発明による可溶性リフアマィシン
誘導体の慢性毒性試験（ラットに、そのＬＤ５。As is known, since it is selectively dissolved in bile, rifampicin derivatives may circulate around the liver circuit and remain in the body for a long time, or become unpleasant and dangerous to the liver.
Prolonged loading increases the dissolution threshold of bilirubin and similar metabolites in bile. Such liver and gallbladder changes appear in a large number of patients treated with rifampicin, and more than 10% of cases of treatment failure could be completely avoided with the introduction of certain solubilized forms of rifampicin. Chronic toxicity test of soluble rifamycin derivatives according to the present invention (in rats, its LD5.

軍の１′２の量を毎日４５日間、経口投与する）は、こ
れらの誘導体が、同様の条件下で肝組織の脂肪変性を誘
発させるリフアマィシンに比較して非常に良好な肝脇耐
客性を有することを示した。ヒトの場合に、本発明の可
溶性生成物の１種で１２５人の患者を治療したところ、
肝障害の発生頻度およびその他の有害な作用をリフアン
ピシンで治療した同人数の患者の場合に比較して低くし
うろことが判った。さらに、血清レベルで得られたより
長期間の効果の持続はヒトの結核の治療に使用せねばな
らない薬用量を下げることを可能にし、また、水熔解度
の増加はこの薬剤を即座に飲むことのできる溶液の形で
投与しうるようにする。このように、本発明による可溶
性リフアマィシン生成物は前記の欠点を解消するととも
に、有利な効果をもたらす。本発明による水溶性リフア
マィシンは、一般式（１）Ｒ・Ａｎ （
１）（但し式中、Ｒは、３ーホルミルリフアマィシンＳ
Ｖのヒドラゾン、アルキルヒドラゾンおよびオキシムよ
り選択したりフアマイシンの誘導体分子を表わし、Ａは
直鎖（１〜５個の炭素原子を有する）または分枝鎖（７
個までの炭素原子を有する）の脂肪酸または芳香族酸ま
たはステロイド構造を有する酸でありうる有機酸のアル
カリ金属塩を表わし、ｎは塩分子数を表わし、１〜３の
範囲でありうる）を有する。These derivatives (administered orally at a dose of 1'2 daily for 45 days) show that these derivatives have very good hepatic tolerance compared to rifamicin, which induces steatosis of liver tissue under similar conditions. It was shown that it has In humans, 125 patients were treated with one of the soluble products of the invention;
The incidence of liver damage and other adverse effects were found to be lower than in the same number of patients treated with rifampicin. Furthermore, the longer duration of effect obtained at serum levels makes it possible to lower the drug dose that must be used for the treatment of human tuberculosis, and the increased water solubility makes it difficult to take the drug immediately. It should be possible to administer it in the form of a solution. Thus, the soluble rifamycin product according to the invention overcomes the above-mentioned disadvantages and provides advantageous effects. The water-soluble rifamicin according to the present invention has the general formula (1) R・An (
1) (wherein, R is 3-formyl rifamicin S
V is selected from hydrazones, alkylhydrazones and oximes or represents a derivative molecule of famycin, A is a straight chain (having 1 to 5 carbon atoms) or a branched chain (having 7
represents an alkali metal salt of an organic acid, which can be a fatty acid or an aromatic acid or an acid with a steroid structure, having up to 1 carbon atoms (n represents the number of salt molecules, which can range from 1 to 3); have

それらは無定型か微結晶状でオレンジ色から階赤褐色で
、ハロゲン化炭化水素に非常によく溶解し、水および低
級脂肪族アルコールに可溶で、脂肪族炭化水素に優港で
ある。それらの製造方法としては、リフアマィシン誘導
体Ｒと塩溶液Ａとを接触させ、ついで、１から８炭素原
子数の脂肪族アルコールまたは１から３炭素原子数の脂
肪族ハロゲン化炭化水素より選択した溶媒またはそれら
の混合物中で反応させる。リフアマィシン誘導体１モル
について可溶化塩を１〜３モルの割合で使用する。最終
生成物は反応塊を単に希釈するかまたは減圧で濃縮して
から希釈して分離する。希釈には、３から２の音容量の
脂肪族炭化水素または芳香族炭化水素を使用する。つい
で固型物は炉取し乾燥するか、または、油相ではけし、
しやして乾燥して砕く、または溶媒を蒸発乾こして反応
塊より単離し、生成物を砕く。つぎに１５の実施例を示
す。例１ リフアンピシンーナトリウムエチルヘキサノエート４ｃ
ｃのクロロホルムに８２３の９（１ミリモル）のＩＪフ
ァンピシンを溶解する。They are amorphous or microcrystalline, orange to reddish-brown in color, very soluble in halogenated hydrocarbons, soluble in water and lower aliphatic alcohols, and preferable to aliphatic hydrocarbons. The method for producing them includes contacting the rifamicin derivative R with a salt solution A, and then using a solvent selected from aliphatic alcohols having 1 to 8 carbon atoms or aliphatic halogenated hydrocarbons having 1 to 3 carbon atoms. react in a mixture thereof. The solubilizing salt is used in a proportion of 1 to 3 moles per mole of rifamicin derivative. The final product is separated by simply diluting the reaction mass or by concentrating it under reduced pressure and then diluting it. For dilution, aliphatic or aromatic hydrocarbons with a sonic volume of 3 to 2 are used. The solids are then taken out and dried in an oven, or crushed in an oil phase.
The product is crushed, dried and crushed, or isolated from the reaction mass by evaporating the solvent to dryness. Next, 15 examples will be shown. Example 1 Riampicin-sodium ethylhexanoate 4c
Dissolve 9 of 823 (1 mmol) of IJ fanpicin in chloroform of c.

ナトリウムヘキサノヱートの２Ｍ溶液ｌｃｃ（２ミリモ
ル）を加える。３０分してから生ずる溶液を３０ｃｃの
石油エーテル中でかくはんする。Add lcc (2 mmol) of a 2M solution of sodium hexanoate. After 30 minutes, the resulting solution is stirred in 30 cc of petroleum ether.

約１時間してから溶液を炉過し、石油エーテルで洗い乾
燥する。７３０のｏの生成物をうる。After about an hour, the solution is filtered, washed with petroleum ether and dried. Obtain 730 o of product.

７９％のりファンピシンを含有する。Contains 79% funpicin.

収率は７０％。石油エーテルに代えて、反応塊を希釈す
るのに脂肪族炭化水素または芳香族炭化水素を用いて希
釈しうる。Yield is 70%. Instead of petroleum ether, aliphatic or aromatic hydrocarbons can be used to dilute the reaction mass.

ｐＨ７のリン酸緩衝液中に１９分で１００花ｃ／ｃｃ以
上溶解する。同様の方法ではあるが０．５ｃｃのエチル
ヘキサノェート溶液（１ミリモル）を用いて、私％リフ
アンピシン含有の生成物６００のｏをうる。Dissolve more than 100 flowers c/cc in 19 minutes in pH 7 phosphate buffer. In a similar manner but using 0.5 cc of ethylhexanoate solution (1 mmol), 600 ml of product containing 1% rifampicin is obtained.

収率６１％溶解度４．５の９／ｃｃ、同様に１．５ｃｃ
のナトリウムエチルヘキサノエ−ト（３ミリモル）を用
いて、７９％リフアンピシン含有生成物７３５のｏをう
る。Yield 61% Solubility 4.5 9/cc, also 1.5cc
of sodium ethylhexanoate (3 mmol) to obtain 735 o of a product containing 79% rifampicin.

例２ リフアンピシンーナトリウムタウロコレート方法は例１
記載と同様とする。Example 2 Rifuampicin-sodium taurocholate method is Example 1
Same as stated.

５斑ｍｃ（１ミリモル）のナトリウムタウロコレートを
１０ｃｃのメタノールに含有する溶液を用いる。A solution containing 5 mc (1 mmol) of sodium taurocholate in 10 cc of methanol is used.

６０ｃｃの石油エーテルで希釈し、生ずる油状層をけし
、しやして分け減圧で乾燥して、１．１２夕の生成物を
うる。It was diluted with 60 cc of petroleum ether, and the resulting oily layer was separated and dried under reduced pressure to obtain a product of 1.12 mL.

溶解度は４１の９／ＣＣ。例３ リフアンピシンーナトリウムデソキシコレート１０ｃｃ
のメタノールに９３０のｏ（２ミリモル）のナトリウム
デソキシコレートおよび８２３の９（１ミリモル）のＩ
Ｊファンピシンを溶解する。Solubility is 9/CC of 41. Example 3 Riampicin-sodium desoxycholate 10cc
930 o (2 mmol) of sodium desoxycholate and 823 o (1 mmol) of I in methanol
Dissolve J-fampicin.

減圧で１／３容量に濃縮し、５０ｃｃ以上の石油エーテ
ルを加える。油状層を分け乾燥する。１．４夕の生成物
をうる。Concentrate to 1/3 volume under reduced pressure and add over 50 cc of petroleum ether. Separate the oily layer and dry. 1. Obtain the product from 4 hours.

４６％のりファンピシン含有である。Contains 46% funpicin.

収率は７８％で、溶解度は１００の９／ｃｃ以上。同様
にして、４１５の９（１ミリモル）のナトリウムデソキ
シコレートを用い、９２０ｎｇの生成物をうる。The yield was 78%, and the solubility was 1009/cc or higher. Similarly, using 9 of 415 (1 mmol) of sodium desoxycholate, 920 ng of product are obtained.

７２％のＩＪファンピシン含有である。Contains 72% IJ Fampicin.

収率は８０％で、生成物はｃｃ当たり３０の９の割合に
溶解する。メタノールに代える溶媒として、８以下の炭
素原子数の別のアルカノールを用いうる。例４ リフアンピシソーナトリウムベンソエート２０ｃｃのメ
タノールに２８８の９（２ミリモル）のナトリウムベン
ゾエートおよび８２３の９（１ミリモル）のＩＪファン
ピシンを溶解する。The yield is 80% and the product dissolves in a ratio of 9 parts per cc. As a solvent in place of methanol, other alkanols having up to 8 carbon atoms can be used. Example 4 Liampiciso Sodium Benzoate Dissolve 288 of 9 (2 mmol) sodium benzoate and 823 of 9 (1 mmol) of IJ fanpicin in 20 cc of methanol.

溶液は１／３容量に減圧濃縮する。５０ｃｃの石油エー
テルで沈殿させる。The solution is concentrated under reduced pressure to 1/3 volume. Precipitate with 50 cc of petroleum ether.

炉過乾燥する。９００脚の生成物をうる。８０％の収率
、リン酸緩衝液中の溶解度は４．５の９／ｃｃ。Over-dry in oven. Obtain 900 legs of product. 80% yield, solubility in phosphate buffer 4.5 9/cc.

例５リフアンピシン・−酢酸ナトリウム 方法は例４と同様で、１６４の９（２ミリモル）の酢酸
ナトリウムを４ｃｃのメタノールに溶解する。Example 5 Riampicin - Sodium Acetate The procedure is similar to Example 4, 164 9 (2 mmol) of sodium acetate is dissolved in 4 cc of methanol.

濃縮段階を省いて、７０ｃｃの石油エーテルで沈殿させ
る。油層は２時間で固化し、ついで乾燥する。８５０の
ｏの生成物をうる。Skip the concentration step and precipitate with 70 cc of petroleum ether. The oil layer solidifies in 2 hours and is then dried. 850 o of product is obtained.

収率８６％。溶解度は１３．５の９／ｃＣｏ例６ リフアンビシンーカプロン酸ナトリウム 方法は例４記載と同様である。Yield 86%. 9/cCo example 6 with solubility of 13.5 rifambicin-caproate sodium The method is similar to that described in Example 4.

１０ｃｃのメタノールに溶解した２７６雌（２ミリモル
）のナトリウムカプロェートを使用する。276 females (2 mmol) of sodium caproate dissolved in 10 cc of methanol are used.

予め濃縮しないで１００ｃｃの石油エーテルで沈殿させ
る。油状沈殿は約２時間で固化する。減圧で乾燥し、６
２０の夕の生成物をうる。収率は５６％。生成物の溶解
度はｃｃ当たり１００双９を超える。以上の例から判る
ように、リフアマィシン誘導体は塩Ａと接触さす際に溶
解するかあらかじめ溶解しておいて塩Ａで処理する。Precipitate with 100 cc of petroleum ether without prior concentration. The oily precipitate solidifies in about 2 hours. Dry under reduced pressure,
Obtain the product of 20 evenings. Yield: 56%. The solubility of the product is greater than 100 x 9 per cc. As can be seen from the above examples, the rifamicin derivative is dissolved when brought into contact with salt A, or is dissolved in advance and treated with salt A.

例 ７から１５ 他のりフアマイシン可溶型 リフアマイシン譲導体１モルについて２モルの可溶化の
ための塩 ナトリウム ２−エチルヘキサノヱートを用
いて、他の可溶型誘導体をうる。Examples 7 to 15 Other soluble derivatives of other rifamycins are obtained using 2 moles of the solubilizing salt sodium 2-ethylhexanoate per mole of rifamycin soluble derivatives.

表１に使用リフアマィシン誘導体および溶媒の容量並び
に生成物の収率および主要性質を示す。表・実施例に示
した操作法により一般式１に記載のすべて製造する。Table 1 shows the volumes of the rifamicin derivatives and solvents used, as well as the yield and main properties of the products. All of the compounds described in Formula 1 are produced by the operating methods shown in the Tables and Examples.

前記例から判るように、本発明はリフアマィシンまたは
その誘導体を１蓮の有機酸アルカリ塩と絹合せると、水
溶性が実質的に増加するという事実に基づいている。As can be seen from the above examples, the present invention is based on the fact that when rifamicin or its derivatives are combined with an alkali salt of an organic acid, the water solubility is substantially increased.

本発明はつぎのよう．な利点を有する。The invention is as follows. It has many advantages.

塩溶液に可溶の型のりファマイシン誘導体が得られ治療
および生物効果の検定に特に重要である。Forms of famycin derivatives that are soluble in salt solutions are available and are of particular interest for therapeutic and biological efficacy assays.

高収率で得られ技術的難点はない。It is obtained in high yield and there are no technical difficulties.

Claims (1)

【特許請求の範囲】 １ 一般式（I） Ｒ・Ａ＿ｎ （I） 〔但し式中、Ｒは、３−ホルミルリフアマイシンＳＶの
ヒドラゾン、アシルヒドラゾンおよびオキシムより選択
したリフアマイシン誘動体を表わし、Ａは、直鎖（炭素
原子数１ないし５個）または分枝鎖（炭素原子数７個ま
で）の脂肪酸または芳香族酸またはステロイド構造の酸
でありうる有機酸のアルカリ金属塩を表わし、ｎは塩分
子数を表わし、１ないし３の範囲でありうる〕で示され
る化学構造を有することを特徴とする水溶性リフアマイ
シン化合物。 ２ 一般式（I） Ｒ・Ａ＿ｎ （I） 〔但し式中、Ｒは、３−ホルミルリフアマイシンＳＶの
ヒドラゾン、アシルヒドラゾンおよびオキシムより選択
したリフアマイシン誘動体を表わし、Ａは、直鎖（炭素
原子数１ないし５個）または分枝鎖（炭素原子数７個ま
で）の脂肪酸または芳香族酸またはステロイド構造の酸
でありうる有機酸のアルカリ金属塩を表わし、ｎは塩分
子数を表わし、１ないし３の範囲でありうる〕を有する
水溶性リフアマイシン化合物の製造方法において、 炭
素原子数１ないし８個の脂肪族アルコールまたは炭素原
子数１ないし３個のハロゲン化脂肪族炭水素またはそれ
らの混合物より選択した溶媒中で、リフアマイシン１モ
ルに対して可溶化のための塩を１ないし３モルの割合で
使用して、リフアマイシン誘動体Ｒを有機塩Ａの溶液と
接触させ、反応塊をそのままかまたは予め減圧で濃縮し
ておいてから、脂肪族炭化水素または芳香族炭化水素を
３から２０倍容量添加して希釈し、次いで濾過して生成
物を単離し、固体生成物は乾燥するか、またはけいしや
することにより分離しそして砕くかまたは反応塊を蒸発
乾固した後に生成物を粉砕することを特徴とする方法。[Claims] 1 General formula (I) R・A_n (I) [wherein R represents a rifamycin derivative selected from hydrazone, acylhydrazone and oxime of 3-formyl rifamycin SV, and A represents an alkali metal salt of an organic acid, which can be a straight-chain (1 to 5 carbon atoms) or branched (up to 7 carbon atoms) fatty acid or aromatic acid or an acid of steroid structure; 1. A water-soluble rifamycin compound having a chemical structure represented by the number of salt molecules, which may range from 1 to 3. 2 General formula (I) R・A_n (I) [However, in the formula, R represents a rifamycin derivative selected from hydrazone, acylhydrazone and oxime of 3-formyl rifamycin SV, and A is a linear (carbon represents an alkali metal salt of an organic acid, which can be a fatty acid or an aromatic acid or an acid of steroid structure (having 1 to 5 atoms) or branched (up to 7 carbon atoms), where n represents the number of salt molecules; C1-C8 aliphatic alcohol or C1-C3 halogenated aliphatic hydrocarbon or a mixture thereof. Lifamycin derivative R is contacted with a solution of organic salt A in a selected solvent at a ratio of 1 to 3 moles of solubilizing salt per mole of rifamycin, and the reaction mass is directly reacted with the solution. Alternatively, the product may be concentrated in advance under reduced pressure, diluted by adding 3 to 20 volumes of aliphatic or aromatic hydrocarbon, and then filtered to isolate the product, and the solid product may be dried; or a process characterized in that the product is ground after separation and grinding by calcination or evaporation of the reaction mass to dryness.