JPS6016596A - アントラセン誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はアシドラセン訪導体及びその塩に関する。

本発明のアントラｔ、７Ｎ導体は新規化合物であシ、下
記一般式［Ｉ）で表わされる。

〔式中Ｒ１は水酸基、ｎは０又は１、Ｒ２はカルボ十シ
ル基又は４ａ位炭素原子に結合してラクトン環を形成す
る基及び４０位炭素原子と１０位炭素原子との間の結合
は単結合又は二重結合を示す。

但しｎが０の場合Ｒ２はカルボ＋シル基であり、４ａ位
炭素原子と１０位炭素原子との間の結合は二重結合を示
す。またｎが１の場合Ｒ２は４０位炭素原子に結合して
ラクトシ環を形成する基であル、４ａ位炭素原子と１０
位炭素原子との間の結合は単結合を示す。〕 上記一般式〔■〕で表わされる本発明化合物は、具体的
には、下記２種の構造で示される各化合物を包含する。

以下これらを夫々「化合物Ｉａ」及び「化合物ＩｂＪと
呼ぶ。

化合物１ａ 化合物Ｉｂ 従来より血栓症の治療には、血栓溶解剤が広く使用され
ているが、血液中は血栓溶解酵素であるづラス三シの活
性を阻害する蛋白（以下これをづラスミンイシしビター
という）が多量に存在しており、該プラスミンイシしビ
ターによるづラスミシの活性阻害によシ、血栓溶解剤の
効果が減弱され、充分な治療効果の期待され力いことが
よく見られる。本発明者らは兼てより鋭意研究を重ねて
きたが、その過程において上記血中のプラス三ンイシし
ビターであるアルファ２・マイクロクロプリシ及びアル
ファ２・プラス三ジインヒビターの活性、即ちプラス五
シの活性を阻害する作用、に強く拮抗する作用を有する
物質が、ストレづトミｔス属に属する微生物の培養によ
シ採取されることを見い出し、該物質の単離、同定に成
功した。

本発明は上記知見によシ完成されたものであり、前記一
般式〔■〕で表わされるアントラセシ誘導体及びその塩
に係るものである。

本発明のアシトラセシ誘導体及びその塩は、プラスミシ
インしビターの活性を阻害する作用（Ａｎｔｉ−ｐｌａ
ｓｍｉｎ　１ｎｈｉｂｉｔｏｒ作用、以下［ＡＰＩＪ作
用という）を有し、プラスミシイシしビター阻害剤とし
て、血栓症の治療及び予防に有用である。

殊に本発明化合物は、これを公知の血栓溶解剤例えばつ
０＋ナーゼ等と組み合せ用いることによシ、２等血栓溶
解剤本来の効果を充分に発揮させ得るものである。また
本発明化合物は、上記の優れたＡＰＩ作用の他、抗菌作
用や抗白血病作用等の生理活性作用をも有しており、２
等作用を利用する医薬品等として有効なものである。本
発明化合物の有する上記生理活性作用は、後述する薬理
試駆によシ明らかである。

以下本発明化合物の製造方法につき詳述する。

本発明化合物は、ストレづトミセス属に属する微生物の
培養により得られる。本発明化合物を製造するために好
適な上記微生物としては例えば本発明者らが新たに土壌
より入手したストレづトミセス・リシリエシシス　０Ｆ
Ｒ−１０５６（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｒｉｓｈｉ
ｒｉｅｎｓｉｓ　ＯＦＲ−１０５６）が挙げられる。

該菌の菌学的及び生理学的性質は次の通りである。

（ム）形態学的性質 各種寒天培地上で２８℃、２週間培養した結果、気菌糸
は単純分枝をなし、胞子鎖は坏旋状をなす。

胞子は１０個以上の連鎖をなしておシ、その形態は卵型
〜円筒型で０．５〜０．７　Ｘ　Ｏ，７〜１．３μｍの
大きさをしている。胞子の表面構造は平滑状をなしてい
る。鞭毛胞子及び胞子撰は認められ々い。

（Ｂ）　各種培地上における生育状態 各種培地上、２８℃、２週間後の生育状態を下記第１表
に示す。表中の各記号は次のことを表わすものとする。

Ｇ：生育状態　ＡＭ：気菌糸 ８Ｍ二基生菌糸　Ｒ：裏面 ＳＰ：可溶性色素 また表中で色調の記載は、カラー・バー七ニー豐マニュ
アル（Ｃｏ１ｏｕｒ　ｌ１ａｒｎｔｏｎｙ　Ｍａｎｎｕ
ａｌ　ｅ　Ｃｏｎ　−１ａｉｎｅｒ　Ｃｏｒｐｏｒａｔ
ｉｏｎ　ｏｆ　Ａｍｅｒｉｃａ　、　Ｃｉｃａｇｏ　）
によった。

第　ｌ　表 （０）　生理学的性質 ■　生育温度範囲 １６〜３８℃（至適生育温度２８〜３６℃）■　生育ｐ
Ｈ範囲 ６〜９　（至適生育ｐＨ６〜８） ■　ゼラチンの液化（グルコース・ぺづトリゼラチン培
地上） 陽性 ■　スターチの加水分解（スターチ無機塩寒天培地上） 陽性 ■　脱脂牛乳の凝固・ペプトン化 ■　メラニ：、１様色素の生成 陽性（ペプトン・イースト・鉄寒天培地上） 縦隔性（テロシ′Ｊ寒天培地上、トリづトリ・イースト
エ＋ス培地中） ■　硝酸還元作用 陰性 ■　セルロース分解能 陰性 に）炭素源の利用性（Ｊリドハム・づドリーづ寒天培地
上） Ｌ−アラビノース　＋ Ｄ−＋シ０−ス　＋ Ｄ−グルコース　士 Ｄ−ワラクトース　＋ シュクロース　士 イノシトール　＋ Ｌ−ラムノース　＋ ラフィノース　＋ Ｄ−マンニット　− 以上を要約すると、本菌株０ＦＲ−１０５６は、ストレ
づト三セス属に属する菌株であシ、インターナショナル
・ストレプトミセス・づ０．；ニット（略称ｚｓｐ）の
方法によれば胞子形成菌糸の形態はセクショシ・スパイ
ラルｆｉ　（５ｐｉｒａｌｅｓ　）に属し、胞子表面構
造は平滑状で成熟した気菌糸の色は灰色系統（Ｇｒａｙ
　ｃｏｌｏｒ　５ｔｔｒｉｅｓ　）である。基生菌糸の
色は淡黄色〜薄茶色であるが、チロシン寒天及びシュラ
０−ス・硝酸塩寒天培地においては特徴的な茶色を示す
。メラニン様色素の生産が認められ、その他の可溶性色
素はシュラ０−ス・硝酸塩寒天培地の茶色が特徴的であ
る。炭素源はＤ−マンニットを利用しないがその他の炭
素源は利用する。

以上の性状及び生理的性質を■［バーシーズ・マニュア
ル・才づ・ディターミネイティブーバクテリオロジー（
Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ　Ｍａｎｕａｌ　ｏｆ　Ｄｅｔｅｒｍ
ｉｎａｔｉｖｅＢａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ　）　Ｊ　、
第８版（１９７４年）：■ワックスマン（Ｓ−Ａ、　Ｗ
ａｋｓｍａｎ　）著［ジ・アクチノミセーテス（Ｔｈｅ
　Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ　）　ｊ第２巻（１９６
１年）並びに■シャーリ：Ｊ　’ｊ　（Ｅ、Ｅ、　Ｓｈ
ｉｒｌｉｎｇ　）及びゴドリーづ（Ｄ、　ｃｏｔｔｔｉ
ｅｂ　）にょるＩＳＰの報告である「インターナショナ
ル・ジャーナル・オづ・システマティック・バクテリオ
０ジー（Ｉｎｔｅｒ−ｎａｔｉｏｐｒａｌ　Ｊｏｕｒｎ
ａｌ　ｏｆ　Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ：　Ｂａｃｔｅｒｉ
ｏｌｏｇｙ　）　Ｊ第１８巻、第６９〜１８９頁（１９
６８年）、同第１８巻、第２７９〜３９２頁（１９６８
年）、同第１９巻、第３９１〜５１２頁（１９６９年）
及び同第２２巻、第２６５〜３９４頁（１９７２年）で
検索したところ、ストレづトミｔス・リシリエシシス（
ＳｔｒｔＪｙｔｏｍｙｒ：ｅｓ　ｒｉｓｈｉｒｉｅｎｓ
ｉｓ　）　Ｃ上記文献■第７６４．７６７頁（１９７４
年）及び上記文献■第２２巻筒３４４．３４５頁〕が最
も近緑な菌種として挙げられる。即ち、数巻の開放型線
旋状の胞子鎖と弁状〜円筒状の平滑型胞子を形成する形
態的特徴、灰色系の気菌糸を着生する点、メラニン様色
素を生成する点及び糖の利用性に関して両者は完全に一
致した。またその他の生理的性質においても両者はよく
一致している。相違する主な点としては、シュラ０−ス
・硝酸塩寒天培地で０ＦＲ−１０５６株は茶色の色素を
生成するがストレづト三セス・リシリエシシスは色素を
生成しない。

以上の通り本菌株は、若干の相違点はあるが基本的性状
においてストＶづト三セス・リシリエンシスと一致する
ので該ストレづトミセス・リシリエシシスと同定するの
が妥当であると考えられる。

従って本発明者らは本菌株をストしづトミセス・リシリ
エシシス　ＯＦ　Ｒ−１０５６（Ｓｔｒｅｐｆｏｍｙｃ
ｅｓｒｉｓｈｉｒｉｅｎｓｉｓ　ＯＦ　Ｒ−１０５６）
と命名した。該菌株は、工業技術院微生物工業技術研究
所に、微工研菌寄第７０８２号（ＦＥＲＭ　／’−７０
８９）として寄託されている。

本発明化合物は、上記０ＦＲ−１０５６株を利用して有
利に製造できる。また一般に放線菌は自然に又は人工的
にその性状が変異しゃすいものであり、本発明化合物は
０ＦＲ−１０５６株の変異株を利用しても製造すること
ができ、更に上記に限らずストレプトミセス属に属する
公知の各種菌を利用することによっても製造することが
できる。

上記ストレづトミセス属に属する微生物による本発明化
合物の製造は、より詳細には、まず上記微生物を通常の
栄養物及び添加物を含有する適当な培地で好気条件下に
培養する。培養基としては通常用いられる窒素源例えば
大豆粉、綿実粉、肉工十ス、ぺづトシ、酵母工十ス、乾
燥酵母、］−シスチづリカー、カゼイシ加水分解物等及
び炭素源例えばづドウ糖、ジリセリシ、麦芽糖、デシづ
シ、乳糖、ショ糖、糖蜜等をいずれも使用できる。

また培地に添加される添加物も通常の無機塩例えば塩化
ナトリウム、塩化カリウム、硫酸マタネシウム、燐酸塩
等でよく、更に鉄、マシガシ、亜鉛等の重金属塩を微量
添加できることも一般の培地と同様である。

培養方法としては深部培養法、固体培養法、表面培養法
等があるが、好ましくは振盪培養、通気攪拌培養など好
気的液体深部培養法によるのがよい。又培養は、１５〜
４６℃、好ましくは２０〜３５℃にてｌ−１０日、好ま
しくは２〜７日間行なわれる。次に上記培養液を濾過あ
るいは遠心分離し、培養ｒ液より本発明化合物を採取す
る。

採取法は特に制限されず生産された本発明化合物の理化
学的性状を利用した公知の各種方法がいずれも採用でき
る。例えば不純物との溶解度の差、通常の吸着剤例えば
活性炭、「アンバーライトＸＡＤ−２」（米国、ローム
　アシド　ハース社製）、シリカゲル、イオシ交換樹脂
、セファデックス（ファルマシア　ファイシ　ケミカル
ス社製）等に対する吸着親和力の差、二液相間の分配率
の差等を利用する方法及び２等方法の組み合せによれば
よい。好ましい採取法としては、よシ具体的には、培養
Ｆ液のｐＨを調整し、抽出液にて抽出しこの抽出液を濃
縮後、カラムク０マドクラフイーに付し、各分画に分け
、この各々の分画に関してプラスミシイシヒビターの活
性阻害作用の強い分画を濃縮後ゲル濾過を行ない、さら
に逆相の高速液体り０マドグラフイーを行々い活性分画
を単離することにより、本発明の化合物１ａを収得でき
る。また本発明の化合物１ｂは、上記カラムク０マドシ
ラフイーによる分画につき、バチルスズづチリス（Ｂａ
ｃｉｌｌｕｓ　５ｕｂｔｉｌｉｓ　）に強い抗菌活性を
有する分画を濃縮し、結晶化することにより収得できる
。上記において用いる抽出液としては、一般に使用され
ているもの、例えばｎ−づタノール等のアルコール類や
エーテル類を有利に利用できる。

本発明化合物は、通常医薬として許容される塩基性化合
物と容易に塩を形成させることができる。

塩基性化合物としては、例えば水酸化ナトリウム、水酸
化リチウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、炭酸
ナトリウム、炭酸リチウム、炭酸カリウム等の水酸化物
及び炭酸化物及びアン七ニア、エチルアミシ、ジエチル
アミン等のアミシ類を例示できる。

上記により得られる本発明化合物及びその塩は、そのま
まで又はこれらを有効成分として慣用の製剤担体と共に
、人及び動物に投与することができる。その際投与経路
及び投与単位形態は、特に制限されず、例えば錠剤、顆
粒剤、経口用溶液等の経口剤や注射剤等の非経口剤等と
して、経口的にもしくは非経口的に投与できる。有効成
分の投与量は、投与経路、投与単位形態、所望の薬理効
果等に応じて適宜決定される。通常１日当り体重１Ｋｆ
当シの有効成分投与量は、約０．１〜５０！とすればよ
く、これは１日１回乃至３回に分けて投与できる。また
単位形態中に配合される有効成分量は約１〜５００■と
するのが適当である。上記の投与単位形態は、常法に従
い容易に製造され、その際用い得る担体も通常のもので
よい。例えば錠剤は、有効成分を、ゼラチン、澱粉、乳
糖、ステアリシ酸マグネシウム、滑石、アラビアゴム等
の賦形剤と混合して賦形される。カづセル剤は有効成分
を不活性の製剤充填剤もしくは希釈剤と混合し、硬質ｔ
ラチシカづセル、軟質力づセル等に充填される。また注
射等の非経口投与用薬剤は有効成分を滅菌した液状担体
に溶解又は懸濁して製造される。好ましい担体は水又は
塩水である。

以下本発明のアシトラセ、７銹導体の製造例を実施例と
して挙げる。

実施例　ｌ グルコース０．５％、デシづン１Ｌ　「ポリペづト：Ｊ
Ｓ」（大玉栄養化学■社製）　０．５　％、酵母工十ス
（大玉栄養化学■社製）　０．５　％、硫酸マグネシウ
ム・７水塩０．０５％、リン酸−カリウム０．０２％、
リシ酸二ナトリウム０．０５％、硫酸第一鉄・７水塩Ｉ
Ｗｔｆ／ｌ、塩化マシカン・４水塩１１’ｌｉ／を及び
硫酸亜鉛・７水塩ｌ■／ｌから成り、ｐ　Ｈ７，０の液
体培地２０１を、ジャーファーメジター（関東理化社製
）に入れ、ｌ’２１’ｃで１５分間滅菌後、これにスト
レづトミセス・リシリエシシス０ＦＲ−１０５６株を植
菌し、培養温度２８℃、通気量１　ｔ／を培地・分、攪
拌数３００回転／分で９６時間培養した。

得られた培養液を連続遠心分離機（日立社製）にかけ、
培養ｐ液（約１８ｔ）を得る。この培養Ｆ液（１ｓｔ）
に４規定の塩酸２５＋１１１を加えｐＨ３〜４としｎ−
づタノール（１０ｔｘ２）で抽出カゲル６０．７０〜２
３０メツシユ）のカうムク０マドに伺ル、展開液をクロ
０ボルム５００ｍ１゜次いでりｏｏホルム：メタノール
＝ＩＯ：１１０００１ｎｌ、りＯＤホルム：Ｊり）−ル
＝２　：　１７００ｍ１りＯＤホＪＬ、ム：メタ／−ｊ
ｂ＝１　：　１３０　Ｑｍ、と順次展開し、ＡＩ−扁１
２５の各２０ｍ７０分画を得る。

Ａ５０〜屋６５の分画はバチルス　ズづチリス（Ｂａｃ
ｉｌｌｕｓ　５ｕｂｔｉｌｉｓ　）　に対して強い抗菌
活性がみられる。Ａｉ　８０−　Ａ　１００の分画は強
いＡＰＩ作用がみられた。

後記ノフラクションをエバポレーターで濃縮シ残渣２２
を得る。この残渣２ｔをメタノールに溶角了し、セファ
ヂ゛ソクスＬＨ２０（２，５ｘ　５０ｃｒｎ。

ファルマシア社製）のタルク０マドクラフイーに付す。

メタノールで展開しＡ　Ｉ　＝　Ａ　ｌ　００までの各
１０＋ａ／の分画を得る。このうち＆　４１−Ａ　５５
の活性分画を濃縮し、残渣６００ｙを得る。この残渣６
００■を少量のメタノールに溶解し、逆相　”高速液体
クロマトグラフィー（ＬＳ４１０ＫＧｌ　１ｎｃｈ　ｘ
　３０　ｏｎ　東洋曹達工業■社製）に付し、アセトニ
トリル：水：酢酸＝５５０：４５０：０．２で展開し、
活性分画を凍結乾燥して黄色粉末状の本発明化合物（化
合物Ｉａ）１００■を得る。

また前述のバチルス　ズブチリス（Ｅａｃｉｌｌｕｓｓ
ｕｂｔｉｌｉｓ　）　に抗菌活性を示す分画を濃縮し、
残渣３１を得る。この残渣３ｆを少量の酢酸エチルに溶
解し、４℃に放置すると粗結晶９０■を得る。

これを酢酸エチルにて再結晶して無色プリズム成品の本
発明化合物（化合物１ｂ）５５■を得る。

得られた各化合物の性状は次の通りである。

化合物Ｉａ： 外　観：黄色粉末状晶 融　点：２８０℃以上 比旋光度：〔α〕２０″＝＋１２．８゜（Ｃ＝　０．４
４８・、エタノール） 元素分析値： ＣＩＩ 実測値　６７．６１　６．５８ 計算値　６７．７４　６．４５ 紫外線吸収スペクトル： λｚｔｏｎ＝２１３　（ｔ＝２２３００）ｎｚａχ ２６４　（ε＝２５３００　） ３０５（ｓｈ）（！＝４４００　） ３７０　（ε＝２５００　） 赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ錠） 第１図に示す。主なピークは次の通シである。

νｍａｒ　３４００．２９５０，２８７５、！６７５．
１６２５．１６００，１５７５．１４５０゜１３８０．
１２８０．１２４５．１１８０゜１１０５．１０８０．
１０００，７９５ｃｒｎ−１ＨＭＲ（ＣＤ３０Ｄ　中、
２００　ＭＥ　ｇ）第２図に示す。主なピークは次の通
りである。

δｐｐ、ｎ＝　０．７０　（３Ｈ，ｄ　、　Ｊ＝６．６
　）０．８１　（３Ｈ，ｄ　、　Ｊ＝　６．６　）０．
９＋　、１．３８．１．４５．１．７３　（各ｘＨ，ｍ
）１．３１　（３Ｈ、ｂｄ　）、２．３４ＣＩＨ，ｎｔ
）３．０６　（Ｉ　Ｈ、ｂｐｎ　）、６．８９　（ＩＨ
，ｄ　。

Ｊ　＝　７．４　）、７．２４　（ＩＩＩ　、　ｔ　、
　／＝　７．４　）７．４１　（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝７Ａ＞ ８．３７　（ＩＨ，ｓ　）、８−４１　（ＩＨ，ｓ　）
高速液体り０マドクラフイー 保持時間　１３分１２秒 カラム：　Ｌ８４１０ＫＧ　（Ｉ　１ｎｃｈφｘ　３０
　ａｒ＋）東洋曹達工業■社製 溶　媒：　ＣＨ３ＣＮ：Ｈ２Ｏ：　ＣＨ３ＣＯ０Ｈ＝５
５０　：　４５０　：　０．２　Ｖ／Ｖ流速：　９　ｍ
ｌ　／　ｍｉｎ 検出光：２５４ｎｍ 薄層りＯマドグラフィー Ｒｆ　＝　０．３５　（シリカゲＪＬ、ＣｌＩＣｌ３：
　ＣＨ３０Ｈ：Ｈ２０＝６５：２３：４） ０．０９　（シリカゲル　クロロホルム：エタノール＝
ＩＯ：ｌ） 分子量（質量分析スペクトルによる）：　７２ 化合物［Ｉａ〕の七ツメチル体の質量分析結果 〔Ｍ＋〕＝３８６（Ｃ２２Ｈ２６ｏ６）化合物〔Ｉａ〕
のジメチル体の質量分析結果〔Ｍ＋〕＝４ｏｏ（Ｃ２３
Ｈ２８ｏ６）分子式：Ｃ２１Ｈ２４ｏ６ 溶解性： メタノール、エタノール、づタノール、アセトシ、酢酸
エチル、ジメチルホルボ＋シト、ジメチルホルムアミド
に可溶、りＯＤボルム、ベシ′ｌ！シに難溶、水、エー
テル、へ十サシに不溶。

呈色反応： 塩化第二鉄　士 ２．４−ＤＮＰ　± バニリン硫酸　十 ニジヒドリン反応　− ドラーゲンドルフ反応　− 上記各種機器分析データー及びその他の分析結果より、
化合物１ａは、前記式〔Ｉａ〕で表わされるものである
ことが確認され、その立体構造は次の通りであると推定
される。

化合物Ｉｂ： 外　観：無色プリズム成品 融　点：１２２〜１２４℃（分解） 比旋光度：〔α〕ｆｉ”＝−４１１’ （Ｃ＝１．０４、エタノール） 紫外線吸収スペクトル： λ”０Ｈ＝　２０７　ｎｎｔ　（ε＝　１９５００　）
ｎｔ（ＩＸ ２２３　（ε＝　１３８００＞ ３１９　（ε＝　１６８００　） 赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ錠）： 第３図に示す。主なピークは次の通りである。

シ、、、ｘ３５１０．３３２０．２９６０．２８６０．
１７４０．１６８０．１６１０．１５７５．１４６５．
１４１５．１３５０．１３００．１２８０．１２２５．
１１９０．１１７０．１０９０．１０４０．１０２５．
１０１０．９７５．９５５．８９０．８３５．８００．
７６０．７１５．６９０．６５０．６０５．５６０．５
１０．４９０　ｃｍ−” ＮＭＲ（アセトシーｄ６中、４００　ＭＨｚ　）　：第
４図に示す。主ｆｘピークは次の通りである。

δｐｐｒｎ＝　０−８５　（３Ｈ，ｄ　、　Ｊ＝　６．
４　）０．８６　（３Ｈ，ｄ　、　Ｊ＝６．４　）１．
２２　（３Ｈ、ｄ　、　Ｊ＝７．６　＞１．６〜１．７
５　（３Ｈ、ｍ　）、２．６１　（ＩＨ，ｍ）２．８４
　（ｌＨ，ｑ　、　Ｊ＝７．６　）３−０７　、３．８
５　（ｂｓ　、　Ｄ２０添加により消失）５．６１　（
ＩＨ，ｓ　）、７．０６ＣＩＨ，ｄｄ、Ｊ＝１．４　、
７＝７．９　） ７．０８　（ｌＨ，ｄｄｄ　、　／＝　１．４　、７＝
８．０　。

／＝０．４） ７．２６　（ＩＨ，ｄｄ　、　／＝７．９　、７＝８．
０　）７．５６　（ｌＨ、ｄ　、　／＝０．４　）薄層
り０マドクラフイー Ｒｆ　＝　０．８２　（シリカゲル　りＯＯホルム：メ
タノール：水＝６５：２３：４） ０．４１　（シリカゲル　ベンゼン：酢酸エチル＝Ｉ：
ｌ） ０．３１　（シリカゲル　り００ホルム：エタノール＝
＋ｏ：１ 分子量（質量分析スペクトルによる）：　８８ ＣＭ＋−１１２０−Ｃｏ２）　＝　３２６分子式：Ｃ２
１Ｈ２４０７ 溶解性： メタノール、エタノール、づタノール、アセトシ、酢酸
エチル、ジメチルスルホ十シト、ジメチルホルムアミド
に可溶、り００ホルム、ベンゼンに難溶、水、エーテル
、へ牛す、／に不溶 呈色反応： 塩化第二鉄　十 ２．４−ＤＮＰ　＋ バニリン硫酸　十 ニシヒドリシ　− ドラーゲンドルフ　− 上記より化合物Ｉｂは、前記〔Ｉｂ〕で表わされるもの
であることが確認される。またその立体構造は、次の通
ルであると推定される。

以下本発明化合物を用いた製剤例を挙げる。

製剤例　１ 本発明化合物（化合物Ｉａ）の　５００　ｍｙナトリウ
ム塩 ブドウ糖　２５０■ 注射用蒸留水　適　全 注射用蒸留水に本発明物質のナトリウム塩及びブドウ糖
を溶解させた後、５ＷＬｌのアシづルに注入する。窒素
で置換後１２１’ｃで１５分間加圧滅菌を行い、注射剤
を得る。

以下本発明化合物につき、之等がプラスミシイシしビタ
ーの活性阻害作用を有することを明らかにする薬理試験
につき詳述する。

〔薬理試験−■〕

この試験は血中プラスミシイシヒビターとして、アルフ
ァー２・マクログ０プリンを用いて行なった。

アルファー２・マクログ０プリンは、人血漿よシ、リシ
デルネヒト（Ｈ，Ｒｉｎｄｅｒｋｎｅｃｈｔ　）らの方
法［Ｂｉｏｃｌｚｅｍ、　Ｍｅｄ−＋　１４＋　１６２
　（１９７５）　）により精製したものを、また酵素と
してはトリづシン（シグマ社製、タイづ■）を用いた。

アルファー２・マクロタｏづリン１３μｔを、０．１Ｍ
塩化ナトリウムを含有する０、　０５　Ｍべ０ナール緩
衝液（ｐＨ８，０）中で、各種濃度の本発明化合物（１
０％メタノール水溶液Ｋ　６２．５〜１０００μｆ７ｍ
ｌ　となるように溶解）０．１−と混合し、反応液を０
．４ｍｌとし、９７℃で５分間保持後、トリづシン溶液
（０，０２Ｍ塩化カルシウムを含有した上記緩衝液に１
５μ？／ｍｌとなるように溶解）０．１ｍｌを添加する
。反応液を３７℃で２分間保持後、上記緩衝液に溶解し
た２チ硫ｒ１″２’−５０タミン（シグマ社製、クレー
ドＸ）溶液０．５ｍｌを加え、３７℃で３０分間放置し
、更に１８チトリク０ル酢酸水溶液３　ｍｌを加えて反
応を停止させる。

約１時間放置後、遠心分離する。上清０．０５ｍ１を取
り、これに１．５　Ｎ水酸化ナトリウムに溶解した０、
０１チ８−ヒト０＋シ＋ノリン溶液４ｍｌを加え、更に
Ｏ，１％づロムコハク酸イミド水溶液１罰を加えて呈色
させ、５００　ｎｍにおける吸光度を測定する。

アルファー２・マクＤジ０プリン活性阻害率（＠は次式
により算出される。

−Ｂ 阻害率（チ）　＝　−ｘ　ｌｏ　。

−Ｂ Ａ：アルファ−２・マクログ０プリン及び本発明化合物
を含まない場合の吸光度 Ｂ：本発明化合物を含まず、アルファー２・マク０！５
＋］プリン単独を含む場合の吸光度Ｃ：アルファ−２・
マクロり０づリン及び本発明化合物を含む場合の吸光度 上記によりめた本発明化合物のアルファー２・マクロタ
０づリンに対する阻害率が５０％となる本発明化合物の
濃度（５０％阻害濃度）をめた結果を下記第２表に示し
た。

第２表 〔薬理試験−■〕 アルファー２・つラスミシイシヒピターは人血漿より、
ウイマ：＊　（Ｂ、　Ｗｉｍａｎ　）らの方法１：　Ｅ
ｕｒ。

Ｊ、Ｂｉｏｃｈｔｍ、、７８．１９　（１９７７））に
より精製したものを、また牛づラスミシは、牛血漿よシ
タυチ（Ｄ、　Ｇ、　Ｄｅｕｔｃｈ　）らの方法［５ｃ
ｉｅｎｃｅ　＋　１７０　＋１０９５　（１９７０））
により精製した牛づうスミノーゲ′Ｊｌカゼイシ単位／
ｍｌに３００単位／ｄのつ０＋ナーゼを３分間作用させ
ることにより得た。

アルファー２・づラス三シイシヒビター３μＶを含む０
．０９　Ｍ塩化ナトリウム含有０．０６Ｍトリス塩酸緩
衝液（ｐＨ７，４）　０．６プに、１０％メタノールに
溶解した各種濃度の本発明化合物Ｑ、１ｍｌを加え、３
７℃で５分間加温する。次に２５チグリｔリシ含有０．
１Ｍリシ酸ナナトリウム緩衝液ｐＨ７，４）に溶解した
０、２５力ゼイシ単位／ｍｌの牛づラス、ｌニジ溶液０
．２ｍｌを加え、３７℃３０秒間加温した後、基質とし
て濃度３ｍＭのＳ−２２５１水溶液ＣＨ−Ｄ−バリル−
Ｌ−０イシルーＬ−リジ°ンーＰ−ニトロアニリド・二
塩酸塩、第一化学社製）Ｑ、１ｍ／’を加え、更に３７
℃で３分間反応させる。反応を０．１ｍ／の５０チ酢酸
水溶液を加えることにより停止させる。反応液の４０５
ｎｍＶＣおける吸光度を測定し、次式によりアルファー
２・づラスミシイシヒビター活性阻害率（％）を計算す
る。

阻害率（％、Ｃ−Ｂ＋Ａ−Ｄ −Ｂ Ａ：アルファ−２・プラス′Ｅ、、フイシヒじター及び
本発明化合物を含まなＩ／−１場合の吸光度Ｂ：本発明
化合物を含まずアルファー２・プラス三シイシしビター
単独を含む場合の吸光度 Ｃ：　アＩｌｌ　’：７アー２・プラスミシイυヒシタ
−及び本発明化合物を含む場合の吸光度 Ｄ：アルファ−２・プラスミシイシヒじターを含まず本
発明化合物単独を含む場合の吸光度 上記方法よりめた本発明化合物のアルファー２・プラス
三ンイシヒじターに対する阻害率が５０％となる本発明
化合物の濃度（５０チ阻害濃度）は下記第３表のごとく
であった。

第　３　表 〔薬理試験−■〕 本発明化合物を用いて、化学療法学会標準法に準じて、
その抗菌活性を検討した。接種菌量１０６個／ｄでの最
ホ発育阻止濃度（ｍｉｎｉｎｔｕｍｉｎｈｉｂｉｔｏｒ
ｙ　ｃｏｎｃｅｎｔｔｑａｔｉｏｎ　ＭＩＣ）を下記第
４表に示す。

第４表 化合物１ａ　化合物１ｂ 尚ＭＩＣの単位はμｆ／ゴである。

〔薬理試験−■〕

マウス白血病Ｐ３８８０イヶミア（Ｌｅｕｋｅｍｉａ　
）を用いて、化合物Ｉｂの抗腫瘍効果を以下の通り検討
した。即ち体重２５ｆ前後のＢＤＩ？、ｔ＆性ママウス
７匹づつの各群に分けＰ２Ｓ５［１イヶミアｌ×１０６
個を全マウスに腹腔内移植する。整値２臼目より化合物
１ｂを０．５チＣＭＣ（カルボ士ジメチルセルロース）
に各種濃度となるように溶解したものと、対照として０
−５％ＣＭＣ５ｍ１／ｈを毎日７日間連日腹腔内投与す
る。マウスが死亡するまでの日数を経時的に観察し、生
４日数中央値をめ、この中央値より下式に従い延命率（
％ＩＬＳ　）を算出する〔斉藤ら、制ガシ化学療法、ガ
シ免疫療法の効果判定基準と制刀υ剤開発、７’１９〜
２０参照〕 結果を下表第５表に示す。

第　５　表 上記第５表より明らかなように、化合物１ｂは延命効果
を有することが判る。

【図面の簡単な説明】

第１図及び第３図は、本発明化合物の赤外線吸収スペク
トル分析図であり、第２図及び第４図は本発明化合物の
核磁気共鳴スペクトル分析図である。 （以　上） 第　３ １４

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 ■　一般式 〔式中Ｒ１は水酸基、ガは０又はｌ、Ｒ２はカルボ牛シ
   ル基又は４ａ位炭素原子に結合してラクトン環を形成す
   る基及び４ａ位炭素原子と１０位炭素原子との間の結合
   は単結合又は二重結合を示す。但しｎが０の場合Ｒ２は
   カルボ牛シル基であり、４０位炭素原子と１０位炭素原
   子との間の結合は二重結合を示す。またｎが１の場合Ｒ
   ２は４０位炭素原子に結合してラクトン環を形成する基
   であり、４ａ位炭素原子と１０位炭素原子との間の結合
   は単結合を示す。〕 で表わされるアントラｔ、７誘導体及びその塩。