JPS60154162A - 遊離ビリルビンの定量方法 - Google Patents
遊離ビリルビンの定量方法Info
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- JPS60154162A JPS60154162A JP1067684A JP1067684A JPS60154162A JP S60154162 A JPS60154162 A JP S60154162A JP 1067684 A JP1067684 A JP 1067684A JP 1067684 A JP1067684 A JP 1067684A JP S60154162 A JPS60154162 A JP S60154162A
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- JP
- Japan
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- bilirubin
- specimen
- reagent
- oxidase
- absorbance
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- Pending
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-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
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- Chemical & Material Sciences (AREA)
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- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
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- Genetics & Genomics (AREA)
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- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は遊離ビリルビンの定量方法、更に詳しくは定量
試薬としてビリルビンオキシダーゼを使用した、ビリル
ビンのうち、遊離ビリルビンの分別定量が可能な遊離ビ
リルビンの定置方法に関する。
試薬としてビリルビンオキシダーゼを使用した、ビリル
ビンのうち、遊離ビリルビンの分別定量が可能な遊離ビ
リルビンの定置方法に関する。
ビリルビンは、胆汁色素の主成分をなすもので、血清中
には抱合ビリルビン及び遊離ビ□リルビンが存在する。
には抱合ビリルビン及び遊離ビ□リルビンが存在する。
そして、血清中の抱合ビリルビンの増加からは、肝ミク
ロゾームにおける抱合から十二指腸までのビリルビン連
設経路のどこかに障害をきたしたことを、また血清中の
遊離ビリルビンの増加からは、種々の原因による溶血性
貧血が生じていること等を知ることができ、抱合及び遊
離ビリルビンを分別定量するととは臨床的に極めて重要
である。
ロゾームにおける抱合から十二指腸までのビリルビン連
設経路のどこかに障害をきたしたことを、また血清中の
遊離ビリルビンの増加からは、種々の原因による溶血性
貧血が生じていること等を知ることができ、抱合及び遊
離ビリルビンを分別定量するととは臨床的に極めて重要
である。
従来、遊離ビリルビンの定量は、例えば通常のジアゾ化
法によシ総ビリルビン量を測定し、これから例えば前記
ジアゾ化法において使用しないで測定した抱合ビリルビ
ン量を差し引くことによシ行なわれてきた。然し、ジア
ゾ化法は■呈色が弱く、正常値付近の濃度では測定に大
量の検体を必要とする、■検体に混濁が生じやすく、定
量値にバラツキが太きい、■反応が十分平衡に達したと
みなせるまでに長時間型するため、反応のエンド・？イ
ンドが不明確となシ、定量値が不正確になシ易い等の欠
点を有していた。
法によシ総ビリルビン量を測定し、これから例えば前記
ジアゾ化法において使用しないで測定した抱合ビリルビ
ン量を差し引くことによシ行なわれてきた。然し、ジア
ゾ化法は■呈色が弱く、正常値付近の濃度では測定に大
量の検体を必要とする、■検体に混濁が生じやすく、定
量値にバラツキが太きい、■反応が十分平衡に達したと
みなせるまでに長時間型するため、反応のエンド・？イ
ンドが不明確となシ、定量値が不正確になシ易い等の欠
点を有していた。
本発明者は、斯かる実情において、上記欠点のない遊離
ビリルビンを直接定量する方法を開発すべく、ビリルビ
ンに特異的に作用し、これを酸化してレリベルゾンに変
える酵素として知うれるビリルビンオキシダーゼを使用
して遊離ビリルビンの分別定量を種々試みたところ、抱
合ビリルビン及び遊離ビリルビンを含有する水性検体に
ビリルビンオキシダーゼの特定の溶液からなる試薬をビ
リルビンオキシダーゼの最終濃度が一定の濃度範囲とな
るように作用せしめると、ビリルビンオキシダーゼは単
時間内には主として遊離ビリルビンとのみ反応すること
を見出し、本発明を完成 し ブこ。
ビリルビンを直接定量する方法を開発すべく、ビリルビ
ンに特異的に作用し、これを酸化してレリベルゾンに変
える酵素として知うれるビリルビンオキシダーゼを使用
して遊離ビリルビンの分別定量を種々試みたところ、抱
合ビリルビン及び遊離ビリルビンを含有する水性検体に
ビリルビンオキシダーゼの特定の溶液からなる試薬をビ
リルビンオキシダーゼの最終濃度が一定の濃度範囲とな
るように作用せしめると、ビリルビンオキシダーゼは単
時間内には主として遊離ビリルビンとのみ反応すること
を見出し、本発明を完成 し ブこ。
すなわち、本発明は水性検体に、ビリルビンオキシダー
ゼ及び陰イオン界面活性剤を含有するｐＨ１３以上のア
ルカリ性緩衝液からなる試薬を、ビリルビンｌ ｍｙに
対しビリルビンオキシダーゼがｏ、ｏｏｉ〜０．０１
［１になるように作用せしめ、その吸光度ｆｃ測測定る
ことを特徴とする、微量の検体で簡単かつ迅速に、しか
も正確かつ再現性よく遊離ビリルビンを特異的に定量で
きる定量方法を提供するものである。
ゼ及び陰イオン界面活性剤を含有するｐＨ１３以上のア
ルカリ性緩衝液からなる試薬を、ビリルビンｌ ｍｙに
対しビリルビンオキシダーゼがｏ、ｏｏｉ〜０．０１
［１になるように作用せしめ、その吸光度ｆｃ測測定る
ことを特徴とする、微量の検体で簡単かつ迅速に、しか
も正確かつ再現性よく遊離ビリルビンを特異的に定量で
きる定量方法を提供するものである。
本発明の測定原理は次の如くである。水性液体中のビリ
ルビンの極大吸収は、通常４４０〜４７Ｑｎｍの範囲に
あるが、ビリベルシンはこの波長領域には吸収がほとん
どない。また、本発明試薬を作用せしめると、ビリルビ
ンオキシダーゼは単時間内には抱合ビリルビンとはほと
んど反応しない。従って、ビリルビンを含有する検体と
、これに本発明試薬を作用せしめたものの４４０〜４７
０ｎｍにおける吸光度の差を測定すれば、遊離ビリルビ
ンのみを定量することができる。
ルビンの極大吸収は、通常４４０〜４７Ｑｎｍの範囲に
あるが、ビリベルシンはこの波長領域には吸収がほとん
どない。また、本発明試薬を作用せしめると、ビリルビ
ンオキシダーゼは単時間内には抱合ビリルビンとはほと
んど反応しない。従って、ビリルビンを含有する検体と
、これに本発明試薬を作用せしめたものの４４０〜４７
０ｎｍにおける吸光度の差を測定すれば、遊離ビリルビ
ンのみを定量することができる。
検体は、血清、血しよう、尿等の水性のものであればよ
く、特に限定されない。検体は、遊離ビリルビン含量に
もよるが、通例は少量でよく、ヒト血清中の平常値付近
（０〜０．６Ｑ／ｄｌ）であっても２０〜１００μ！程
度あれば定量可能である。なお、検体中の抱合ビリルビ
ン量が少ない程精度よく定量できる。
く、特に限定されない。検体は、遊離ビリルビン含量に
もよるが、通例は少量でよく、ヒト血清中の平常値付近
（０〜０．６Ｑ／ｄｌ）であっても２０〜１００μ！程
度あれば定量可能である。なお、検体中の抱合ビリルビ
ン量が少ない程精度よく定量できる。
ビリルビンオキシダーゼは、検体中のビリルビン１■に
対しｏ、ｏ ｏ ｉ〜０．０１Ｕになる量、一般には最
終濃度が０．０１〜０．０５Ｕ ／１ｎｌ！となるよう
に使用される。ビリルビンオキシダーゼの量がこの範囲
外にある場合、ビリルビンオキシダーゼの抱合及び遊離
ビリルビンに対する反応性に顕著な差がなくなシ好まし
くな−。
対しｏ、ｏ ｏ ｉ〜０．０１Ｕになる量、一般には最
終濃度が０．０１〜０．０５Ｕ ／１ｎｌ！となるよう
に使用される。ビリルビンオキシダーゼの量がこの範囲
外にある場合、ビリルビンオキシダーゼの抱合及び遊離
ビリルビンに対する反応性に顕著な差がなくなシ好まし
くな−。
本発明に使用する陰イオン界面活性剤としては、例えば
アルキル硫酸塩及びアルキルアリル硫酸塩が挙げられ、
ドデシル硫酸ナトリウム（８Ｄ８）、コール酸ナトリグ
ム、ドデシルベンゼンスルホンｆ！ｌ−） Ｉ） ウＡ
（８ＤＢＥｌ）等が挙げられる。陰イオン界面活性剤
は、最終濃度が０．０１〜５．０重量ｑｂ（以下、襲で
示す）となるように使用するのが好まし１〇 本発明に使用するアルカリ性緩衝液はｐＴｌが８以上で
あシ、好ましくはｐＨ８〜１０のもので、例えはゾエチ
ルノ々ルビツール酸ナトリウム・塩酸緩衝液、トリスヒ
ト１０キシアミノメタン・塩酸緩衝液等が挙けられる。
アルキル硫酸塩及びアルキルアリル硫酸塩が挙げられ、
ドデシル硫酸ナトリウム（８Ｄ８）、コール酸ナトリグ
ム、ドデシルベンゼンスルホンｆ！ｌ−） Ｉ） ウＡ
（８ＤＢＥｌ）等が挙げられる。陰イオン界面活性剤
は、最終濃度が０．０１〜５．０重量ｑｂ（以下、襲で
示す）となるように使用するのが好まし１〇 本発明に使用するアルカリ性緩衝液はｐＴｌが８以上で
あシ、好ましくはｐＨ８〜１０のもので、例えはゾエチ
ルノ々ルビツール酸ナトリウム・塩酸緩衝液、トリスヒ
ト１０キシアミノメタン・塩酸緩衝液等が挙けられる。
１本発明試薬には、上記必須成分の＃１かに、 １乳
糖、アラニン、グリシン、牛アルブミン、シフロブ今ス
トリン等の安定化剤、窒化ソ−〆等を適宜添加配合する
ことができる。また、検体の混濁を防ぐため、使用した
陰イオン界面活性剤と構造が類似でクラフト点のよシ高
い界面活性剤、例えばｓｐｓに対しては８Ｄ ＢＳ等を
併用するのが好ましい。
糖、アラニン、グリシン、牛アルブミン、シフロブ今ス
トリン等の安定化剤、窒化ソ−〆等を適宜添加配合する
ことができる。また、検体の混濁を防ぐため、使用した
陰イオン界面活性剤と構造が類似でクラフト点のよシ高
い界面活性剤、例えばｓｐｓに対しては８Ｄ ＢＳ等を
併用するのが好ましい。
本発明試薬は、その使用にあた９、１試薬として用いて
も、また２試薬に分けて使用時混合して使用することも
できる。本発明に使用される隘イオン界面活性剤、例え
は８Ｄ８は蛋白質変成作用があるため、８Ｄ８とビリル
ビンオキシダーゼを共存させた場合、本発明試薬の保存
可能な期間は冷暗所で３日程度であるが、８Ｄ８とビリ
ルビンオキシダーゼを別の試薬に配合した場合、冷暗所
で１箇月は安定に保存できる。従って、２試薬に分けて
使用するのがよシ好ましい。測定は２５〜４０℃で行な
うのが好ましい。
も、また２試薬に分けて使用時混合して使用することも
できる。本発明に使用される隘イオン界面活性剤、例え
は８Ｄ８は蛋白質変成作用があるため、８Ｄ８とビリル
ビンオキシダーゼを共存させた場合、本発明試薬の保存
可能な期間は冷暗所で３日程度であるが、８Ｄ８とビリ
ルビンオキシダーゼを別の試薬に配合した場合、冷暗所
で１箇月は安定に保存できる。従って、２試薬に分けて
使用するのがよシ好ましい。測定は２５〜４０℃で行な
うのが好ましい。
本発明試薬を用いて検体中の遊離ビリルビンのみを定量
するには、検体を２分し、一方の検体に本発明試薬を加
え、３７℃で反応させ、反応がエンド・？インドに達し
たら、仁の液の４５０ ｎｍにおける吸光度（ＯＤｓ）
を測定する。通例、エンド・？インドに達するのに要す
る時間（ｔｅ）は５〜２０分程度である。
するには、検体を２分し、一方の検体に本発明試薬を加
え、３７℃で反応させ、反応がエンド・？インドに達し
たら、仁の液の４５０ ｎｍにおける吸光度（ＯＤｓ）
を測定する。通例、エンド・？インドに達するのに要す
る時間（ｔｅ）は５〜２０分程度である。
吸光度の測定は、エンド・？インドが確認できたら直ち
に測定するのが好ましい。さもないト、ビリルビンオキ
シダーゼの抱合ビリルビンとの反応が進み、その影響を
無視できなくなシ、遊離ビリルビンの定量値が不正確な
ものになる。また、一方の検体にはビリルビンオキシダ
ーゼを含有しない以外は上記と同じ組成の試薬を加え、
３７℃に保ち、ｔｅ分経過後の４５０ｎｍにおける吸光
度（ＯＤＢ）を測定する。次に吸光度差＝ ０ＤＳ−０
’ＤＢを計算し、遊離ビリルビン標準液を用いて上記と
同温度で得た検量線を利用すれば、検体中の遊離ビリル
ビン量を定量することができる。遊離ビリルビンの標準
液としては日商ビリルビン標準液、ビリルビンコントロ
ール（ディト社製）等が挙げられる。
に測定するのが好ましい。さもないト、ビリルビンオキ
シダーゼの抱合ビリルビンとの反応が進み、その影響を
無視できなくなシ、遊離ビリルビンの定量値が不正確な
ものになる。また、一方の検体にはビリルビンオキシダ
ーゼを含有しない以外は上記と同じ組成の試薬を加え、
３７℃に保ち、ｔｅ分経過後の４５０ｎｍにおける吸光
度（ＯＤＢ）を測定する。次に吸光度差＝ ０ＤＳ−０
’ＤＢを計算し、遊離ビリルビン標準液を用いて上記と
同温度で得た検量線を利用すれば、検体中の遊離ビリル
ビン量を定量することができる。遊離ビリルビンの標準
液としては日商ビリルビン標準液、ビリルビンコントロ
ール（ディト社製）等が挙げられる。
本発明の定量方法を用いて、抱合ビリルビンを定量する
には、先に本発明者が別途出願した方法に従って、あら
かじめ検体中の総ビリルビン値をめておき、これから本
発明方法によりめた遊離ビリルビン量を差し引けばよい
。
には、先に本発明者が別途出願した方法に従って、あら
かじめ検体中の総ビリルビン値をめておき、これから本
発明方法によりめた遊離ビリルビン量を差し引けばよい
。
次に実施例を挙けて本発明を説明する。
実施例１
下記の第１試薬、第２試薬を用い、標準液又は高遊離ビ
リルビン血清を５段階希釈した液を各々検体として遊離
ビリルビン濃度を測定し、希釈倍率と定量された遊離ビ
リルビン濃度の間の直線性を調べた。
リルビン血清を５段階希釈した液を各々検体として遊離
ビリルビン濃度を測定し、希釈倍率と定量された遊離ビ
リルビン濃度の間の直線性を調べた。
（試薬組成）
第１試薬：
０．０５Ｍ５Ｍジエチル／ζルビツールトリウム・塩酸
緩衝液（ｐＨ８，１）、ｏ、１ｓｓｐ８．０．１％５Ｄ
ＢＢ含有。
緩衝液（ｐＨ８，１）、ｏ、１ｓｓｐ８．０．１％５Ｄ
ＢＢ含有。
第２試薬：
０．００５ Ｍ炭酸緩衝液（Ｎａ、Ｃｏ、 ＋ＮＩＬＨ
ＣＯ３）（ｐＨ９，５）、ビリルビンオキシダーゼ〔凍
結乾燥品（日水製薬株式会社製） ） ０．０２５Ｕ／
ｄ、乳糖、アラニン含有。
ＣＯ３）（ｐＨ９，５）、ビリルビンオキシダーゼ〔凍
結乾燥品（日水製薬株式会社製） ） ０．０２５Ｕ／
ｄ、乳糖、アラニン含有。
（測定方法および結果）
検体２０μｌに、第１試薬５００μｌを加え、３７℃で
５分間反応させる。５分後に吸光度を測定する（ＯＤ′
Ｂ）。次に、当該反応液に第２試薬１００μｌを加え、
３７℃で５分間反応させ、吸光度を測定する（ＯＤ’ｓ
）。吸光度差” ＯＤ’Ｂ −ＯＤ’Ｂをめ、標準液（
ビリルビン既知濃度）での吸光度差と比較してビリルビ
ン濃度をめた。なお、測定には、日立７０５（日立製作
成製）を使用し測定波長は主波長４５０ｎｍ、副波長５
４６ ｎｍの２波長で行なった。
５分間反応させる。５分後に吸光度を測定する（ＯＤ′
Ｂ）。次に、当該反応液に第２試薬１００μｌを加え、
３７℃で５分間反応させ、吸光度を測定する（ＯＤ’ｓ
）。吸光度差” ＯＤ’Ｂ −ＯＤ’Ｂをめ、標準液（
ビリルビン既知濃度）での吸光度差と比較してビリルビ
ン濃度をめた。なお、測定には、日立７０５（日立製作
成製）を使用し測定波長は主波長４５０ｎｍ、副波長５
４６ ｎｍの２波長で行なった。
その結果、第１図に示す如く、約１８１１１ｉ’／ｄＡ
’までの直線性が明らかとなった。また、種々の濃度（
０，３ＮＦ！／ｄｌ 、 ５．５■／ｄＪ ）の検体を
繰シ返し測定して再現性を調べたところ、いずれの場合
も再現性は良好であった。
’までの直線性が明らかとなった。また、種々の濃度（
０，３ＮＦ！／ｄｌ 、 ５．５■／ｄＪ ）の検体を
繰シ返し測定して再現性を調べたところ、いずれの場合
も再現性は良好であった。
実施例２
実施例１と同じ試薬を用い、同様の方法によシ、生血清
中の遊離ビリルビンを定量した。
中の遊離ビリルビンを定量した。
一方、同じ検体の総ビリルビン量を、下記組成の試薬を
用いた別途出願の方法により定量し、抱合ビリルビン量
（＝総ビリルビン量−遊離ビリルビン量）をめた。また
、同じ検体の抱合ビリルビン量をジアゾ仕法、すなわち
ミハエルツレ変法によるアルカリアゾビリルビンブルー
比色定量法〔［ビリルビンキツ）−Ｋｌ（日本商事株式
会社製）〕で定量し、本発明方法とジアゾ化法による結
果の相開関係を調へた。結果を第２図に示す。
用いた別途出願の方法により定量し、抱合ビリルビン量
（＝総ビリルビン量−遊離ビリルビン量）をめた。また
、同じ検体の抱合ビリルビン量をジアゾ仕法、すなわち
ミハエルツレ変法によるアルカリアゾビリルビンブルー
比色定量法〔［ビリルビンキツ）−Ｋｌ（日本商事株式
会社製）〕で定量し、本発明方法とジアゾ化法による結
果の相開関係を調へた。結果を第２図に示す。
（試薬組成）
第１試薬＝４゜
０．０５Ｍゾエテルパルビツール酸ナトリウム・塩酸緩
衝液’（ｐＨ８，１）、０．１％ＳＤＳ、 ０．１％５
Ｄ８Ｂ含有。
衝液’（ｐＨ８，１）、０．１％ＳＤＳ、 ０．１％５
Ｄ８Ｂ含有。
第２試薬：
０．００５ Ｍ炭酸緩衝液（’Ｎｌ！Ｌ２ ＣＯ３＋
ＮＥＬＨｏｏＢ ）（ｐＨ９，５）、ビリルビンオキシ
ダーゼ〔凍結乾燥品（日水製薬株式会社製） ） ０．
８ Ｕ／ｄ、乳糖、アラニン含有。
ＮＥＬＨｏｏＢ ）（ｐＨ９，５）、ビリルビンオキシ
ダーゼ〔凍結乾燥品（日水製薬株式会社製） ） ０．
８ Ｕ／ｄ、乳糖、アラニン含有。
第２図から、相関係数０．９４７４、回帰式ｙ＝ｏ、７
７５ｅ＋０．８ （ｙｃ ：ジアゾ化法、ｖ：水元。
７５ｅ＋０．８ （ｙｃ ：ジアゾ化法、ｖ：水元。
明方法）であシ、良好な相関関係があることがわかる。
従って、本発明方法はジアゾ化法の代わシに充分用いら
れることが明らかとなった。
れることが明らかとなった。
第１図は希釈倍率と定量された遊離ビリルビン濃度の関
係を示す図面、第２図は本発明方法に基づいて定量され
た抱合ビリルビン濃度とジアゾ化法によシ定量された抱
合ビリルビン濃度の相関を示す図面である。 以上 （ （ｍｇ／ｄｌｌ ） 第１図 第２図 （ｍｇ／１１ｅ） （ｍｑｙｌ＋ｅ） 〕歿列１ビ リ ル ビ／己゛′冒実
係を示す図面、第２図は本発明方法に基づいて定量され
た抱合ビリルビン濃度とジアゾ化法によシ定量された抱
合ビリルビン濃度の相関を示す図面である。 以上 （ （ｍｇ／ｄｌｌ ） 第１図 第２図 （ｍｇ／１１ｅ） （ｍｑｙｌ＋ｅ） 〕歿列１ビ リ ル ビ／己゛′冒実
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、水性検体に、ビリルビンオキシダーゼ及び陰イオン
界面活性剤を含有するｐＨ３以上のアルカリ性緩衝液か
らなる試薬を、ビリルビン１ Ｆ＋９に対しビリルビン
オキシダーゼが０．００１〜ｏ、ｏ ｉ ｏになるよう
に作用せしめ、その吸光度を測定することを特徴とする
遊離ビリルビンの定量方法。 λ 陰イオン界面活性剤がアルキル硫酸塩又は／及ヒア
ルキルアリルスルホネートである特許請求の範囲第１項
記載の遊離ビリルビンの定量方法。 シ 陰イオン界面活性剤がドデシル硫酸ナトリウムであ
る特許請求の範囲第１項記載の遊離ビリルビンの定量方
法。 く 陰イオン界面活性剤がドデシル硫酸ナトリウム及び
ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウムである特許請求
の範囲第１項記載の遊離ビリルビンの定量方法。 ５、アルカリ性緩衝液がゾエチルｊルビツール酸ナトリ
ウム・塩酸緩衝液である特許請求の範囲第１項記載の遊
離ビリルビンの定量方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1067684A JPS60154162A (ja) | 1984-01-24 | 1984-01-24 | 遊離ビリルビンの定量方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1067684A JPS60154162A (ja) | 1984-01-24 | 1984-01-24 | 遊離ビリルビンの定量方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60154162A true JPS60154162A (ja) | 1985-08-13 |
Family
ID=11756860
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1067684A Pending JPS60154162A (ja) | 1984-01-24 | 1984-01-24 | 遊離ビリルビンの定量方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60154162A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6352060A (ja) * | 1986-04-16 | 1988-03-05 | Kyowa Medetsukusu Kk | 間接ビリルビンの定量法及び定量用キツト |
| EP0387784A2 (en) * | 1989-03-13 | 1990-09-19 | Unitika Ltd. | Quantitative determination of bilirubin and a reagent therefor |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5917999A (ja) * | 1982-07-23 | 1984-01-30 | Amano Pharmaceut Co Ltd | ビリルビンの定量法及びその定量用試薬組成物 |
-
1984
- 1984-01-24 JP JP1067684A patent/JPS60154162A/ja active Pending
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5917999A (ja) * | 1982-07-23 | 1984-01-30 | Amano Pharmaceut Co Ltd | ビリルビンの定量法及びその定量用試薬組成物 |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6352060A (ja) * | 1986-04-16 | 1988-03-05 | Kyowa Medetsukusu Kk | 間接ビリルビンの定量法及び定量用キツト |
| EP0387784A2 (en) * | 1989-03-13 | 1990-09-19 | Unitika Ltd. | Quantitative determination of bilirubin and a reagent therefor |
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