JPS5995051A - 白血球および血小板除去装置 - Google Patents
白血球および血小板除去装置Info
- Publication number
- JPS5995051A JPS5995051A JP58204243A JP20424383A JPS5995051A JP S5995051 A JPS5995051 A JP S5995051A JP 58204243 A JP58204243 A JP 58204243A JP 20424383 A JP20424383 A JP 20424383A JP S5995051 A JPS5995051 A JP S5995051A
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- Japan
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- blood
- adsorbent
- column
- red blood
- blood cells
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は血液中から白血球・白小板を除去して赤血球を
分画・精製する装置に関するもので、特に成分輸血ある
いは生化学検査において、白血球・血小板を含まない赤
血球を得るための血液の分画・精製装置を提供すること
を目的とするものである。
分画・精製する装置に関するもので、特に成分輸血ある
いは生化学検査において、白血球・血小板を含まない赤
血球を得るための血液の分画・精製装置を提供すること
を目的とするものである。
従来、輸血においては全血を用いる場合が多かったが、
最近は医療の進歩に併っていわゆる成分輸血と呼ばれる
必要な成分だけを輸血する治療法が国内外において進め
られている。然るに赤血球の成分輸血において、ＨＬ−
Ａ型抗原を有する白血球および血小板抗原を有する血小
板を完全罠除去する優れた方法がないために、必ずしも
赤血球輸血が頻繁に行なわれているとは限らない。また
、赤血球の生化学的機能試験においても他の血球成分の
混在は良い結果をもたらさない。
最近は医療の進歩に併っていわゆる成分輸血と呼ばれる
必要な成分だけを輸血する治療法が国内外において進め
られている。然るに赤血球の成分輸血において、ＨＬ−
Ａ型抗原を有する白血球および血小板抗原を有する血小
板を完全罠除去する優れた方法がないために、必ずしも
赤血球輸血が頻繁に行なわれているとは限らない。また
、赤血球の生化学的機能試験においても他の血球成分の
混在は良い結果をもたらさない。
輸血を目的とした赤血球の分画法の公知技術としては次
のような方法がある。すなわち、（１）到立遠心分離法
、（２）生理食塩水洗浄法、（３）デキストランまたは
ＨＥＳによる赤血球沈降法、（４）ナイロンカラム通過
法、（５）解凍赤血球浮遊液の調製〔ブラッド コンポ
ーネント テエラピー、アメリカンアソシエーション
オプ ブラッド バンクス刊。
のような方法がある。すなわち、（１）到立遠心分離法
、（２）生理食塩水洗浄法、（３）デキストランまたは
ＨＥＳによる赤血球沈降法、（４）ナイロンカラム通過
法、（５）解凍赤血球浮遊液の調製〔ブラッド コンポ
ーネント テエラピー、アメリカンアソシエーション
オプ ブラッド バンクス刊。
ツウエンティース センチェリーフレスＵ、 ８． Ａ
（Ｂｌｏｏｄ Ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ Ｔｈｅｒａｐｙ
、 ＡｍｅｒｉｃａｎＡｓ５ｏｃｉａｔｉｏｎ ｏｆ
Ｂｌｏｏｄ Ｂａｎｋｓ 、 Ｔｗｅｎｔｙｔｈ Ｃｅ
ｎｔｕｒｙＰｒｅｓｓ Ｕ、 Ｓ、 Ａ ） 、 ９−
１３頁１９６９年；日本赤十字崩液センター業務規準
昭和５０年；血液成分輸血時代要覧 大阪赤十字センタ
ー刊 昭和５０年〕があり、この中で（３）は白血球除
去赤血球「日歩」として実際に行なわれているが、いず
れも赤血球の回収および白血球・血小板の除去に関して
は満足されるものではない。また上記（４）の如き吸着
体をカラムにつめて行なう方法として木綿および木綿糸
を用いる方法〔フレミング（Ｆｌｅｍｉｎｇ ） ＋ブ
リティッシュ ジャーナル オプ エキスペリメンタル
パソロジー（１３ｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ
ＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＰａｔｈａｌｏｇ）’）、
７巻２８１頁、 １９２６年；デイペンホルスト（ｐｉ
ｅｐｅｎｈｏｒｓｔ ）ら、ボックスサイクニス（Ｖｏ
ｘ ３ａｕｇ、） 、 ２３巻 ３０Ｂ −３２０頁、
１９７２年〕。
（Ｂｌｏｏｄ Ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ Ｔｈｅｒａｐｙ
、 ＡｍｅｒｉｃａｎＡｓ５ｏｃｉａｔｉｏｎ ｏｆ
Ｂｌｏｏｄ Ｂａｎｋｓ 、 Ｔｗｅｎｔｙｔｈ Ｃｅ
ｎｔｕｒｙＰｒｅｓｓ Ｕ、 Ｓ、 Ａ ） 、 ９−
１３頁１９６９年；日本赤十字崩液センター業務規準
昭和５０年；血液成分輸血時代要覧 大阪赤十字センタ
ー刊 昭和５０年〕があり、この中で（３）は白血球除
去赤血球「日歩」として実際に行なわれているが、いず
れも赤血球の回収および白血球・血小板の除去に関して
は満足されるものではない。また上記（４）の如き吸着
体をカラムにつめて行なう方法として木綿および木綿糸
を用いる方法〔フレミング（Ｆｌｅｍｉｎｇ ） ＋ブ
リティッシュ ジャーナル オプ エキスペリメンタル
パソロジー（１３ｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ
ＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＰａｔｈａｌｏｇ）’）、
７巻２８１頁、 １９２６年；デイペンホルスト（ｐｉ
ｅｐｅｎｈｏｒｓｔ ）ら、ボックスサイクニス（Ｖｏ
ｘ ３ａｕｇ、） 、 ２３巻 ３０Ｂ −３２０頁、
１９７２年〕。
ダヌロン繊維を用いる方法〔ラング７エルダー（Ｌａｎ
ｇｆｅｌｄｅｒ ）ら、ボックス サイグイニス（Ｖｏ
ｘ３ａｎｇ、） ＋ １９巻５７頁、 １９７０年〕が
あるが、血小板や白血球の中のリンパ球の分離が良好で
ないし、血液量に対し吸着体の量が多く赤血球の回収が
充分行なわれない。
ｇｆｅｌｄｅｒ ）ら、ボックス サイグイニス（Ｖｏ
ｘ３ａｎｇ、） ＋ １９巻５７頁、 １９７０年〕が
あるが、血小板や白血球の中のリンパ球の分離が良好で
ないし、血液量に対し吸着体の量が多く赤血球の回収が
充分行なわれない。
中量ら〔ネイチャー ニュー バイオロジー（Ｎａｔｕ
ｒｅ Ｎｅｗ Ｂｉｏｌｏｇｙ ） 、 ２４６巻 ９
４頁、 １９７３年〕はヘパリン加全通から陽イオン交
換セルロースや陽イオン交換セファデックスを用いて赤
血球を純化しているが、イオン交換体が高価であり又マ
グネシウムイオンが不可決であること、そして血液量に
対し吸着体の量が多い等の欠点があり実用的でない。一
方ライト（Ｗｒｉｇｈｔ ） ［ザランセット（Ｔｈｅ
Ｌａｎｃｅｔ ） ＋ １巻４頁、 １９２６年〕は
ろ紙に白血球が吸着することをみとめているが、ガルビ
ン（Ｇａｒｖｉｎ ） （ジャーナル オプ エキスベ
リメンタル メデイシｙ （Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｅ
ｘｐｅｒｌｍｅｎｔａｌＭｅｄｉａｉｎｅ ） ｓ １
１４巻５１頁、 １９６１年〕はろ紙に対する吸着はさ
ほど大きくないとしている０本発明者は上記の事情を鑑
み鋭意研究した結果、ヒト全血、赤血球流層および哺乳
動物の血液からセルロース粉末、結晶セルロース、陰イ
オン交換セルロースに殆んど完全に白血球・血小板を付
着せしめて赤血球を高純度、かつ高収率で回収すること
に成功し本発明を完成するに至った〇そして本発明の目
的を達する構成は、カラムと該カラム内に吸着体を有す
る血液の分画・精製装置において、前記カラムは血液流
入口と血液流出口を有し、カラム内にはセルロース粉末
、結晶セルロース、陰イオン交換セルロースのうち少な
くともひとつからなる吸着体を充填し、さらに、該吸着
体を支持するメツシュが設けられていることを特徴とす
る血液の分画・精製装着。
ｒｅ Ｎｅｗ Ｂｉｏｌｏｇｙ ） 、 ２４６巻 ９
４頁、 １９７３年〕はヘパリン加全通から陽イオン交
換セルロースや陽イオン交換セファデックスを用いて赤
血球を純化しているが、イオン交換体が高価であり又マ
グネシウムイオンが不可決であること、そして血液量に
対し吸着体の量が多い等の欠点があり実用的でない。一
方ライト（Ｗｒｉｇｈｔ ） ［ザランセット（Ｔｈｅ
Ｌａｎｃｅｔ ） ＋ １巻４頁、 １９２６年〕は
ろ紙に白血球が吸着することをみとめているが、ガルビ
ン（Ｇａｒｖｉｎ ） （ジャーナル オプ エキスベ
リメンタル メデイシｙ （Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｅ
ｘｐｅｒｌｍｅｎｔａｌＭｅｄｉａｉｎｅ ） ｓ １
１４巻５１頁、 １９６１年〕はろ紙に対する吸着はさ
ほど大きくないとしている０本発明者は上記の事情を鑑
み鋭意研究した結果、ヒト全血、赤血球流層および哺乳
動物の血液からセルロース粉末、結晶セルロース、陰イ
オン交換セルロースに殆んど完全に白血球・血小板を付
着せしめて赤血球を高純度、かつ高収率で回収すること
に成功し本発明を完成するに至った〇そして本発明の目
的を達する構成は、カラムと該カラム内に吸着体を有す
る血液の分画・精製装置において、前記カラムは血液流
入口と血液流出口を有し、カラム内にはセルロース粉末
、結晶セルロース、陰イオン交換セルロースのうち少な
くともひとつからなる吸着体を充填し、さらに、該吸着
体を支持するメツシュが設けられていることを特徴とす
る血液の分画・精製装着。
本発明の実施において用いる血液としては、ヒト新鮮血
にヘパリン、 ＡＣＤ 、 ＣＰＤ等の適当な抗凝固剤
を加えたものおよび赤血球流層（日歩）であるが、必ず
しもこれに限定されるものではなく赤血球が浮遊した製
剤ならなんでもよい。赤血球流層を用いる場合は、生理
食塩水又は等張のバッファーを１／３〜１／２容加えて
用いる。
にヘパリン、 ＡＣＤ 、 ＣＰＤ等の適当な抗凝固剤
を加えたものおよび赤血球流層（日歩）であるが、必ず
しもこれに限定されるものではなく赤血球が浮遊した製
剤ならなんでもよい。赤血球流層を用いる場合は、生理
食塩水又は等張のバッファーを１／３〜１／２容加えて
用いる。
また、本発明の実施において用いる吸着体としては、セ
ルロース粉末、結晶セルロース、陰イオン交換セルロー
スであシ、例えば山陽国策パルプ製ＫＣフロック、東洋
ろ紙製ろ紙粉末、旭化成工業製アビセル、ジエチルアミ
ノエチルセルロースなどを挙げることができる。ジエチ
ルアミノエチルセルロースの如き陰イオン交換体はＯＨ
−型で用いてもよく、予じめＣＩ−型として用いてもよ
いが安定性を考慮して塩型の方が好ましい。
ルロース粉末、結晶セルロース、陰イオン交換セルロー
スであシ、例えば山陽国策パルプ製ＫＣフロック、東洋
ろ紙製ろ紙粉末、旭化成工業製アビセル、ジエチルアミ
ノエチルセルロースなどを挙げることができる。ジエチ
ルアミノエチルセルロースの如き陰イオン交換体はＯＨ
−型で用いてもよく、予じめＣＩ−型として用いてもよ
いが安定性を考慮して塩型の方が好ましい。
これらの吸着体は生理食塩水で予じめ洗浄して用いる。
本発明の実施において前記吸着体をポリプロピレン製等
の硬質ブ２スナックでできたカラムに２５ミクロン程度
のオープニングを有するメツシュ、例えばナイロンメツ
シュで支持する吸着体のカラムへの充填は、生理食塩水
ＫＷＩＡ濁した吸着体を流しこみ、場合によシ加圧して
２〜６ｔｄ／１９の割でつめる。吸着体の量は、血液１
００−に対して１０〜５０−の範囲である。吸着体に血
液を通したあとの洗浄は、赤血球の回収率をあげるため
に行なった方がよく、洗浄液は生理食塩水で行なう。
の硬質ブ２スナックでできたカラムに２５ミクロン程度
のオープニングを有するメツシュ、例えばナイロンメツ
シュで支持する吸着体のカラムへの充填は、生理食塩水
ＫＷＩＡ濁した吸着体を流しこみ、場合によシ加圧して
２〜６ｔｄ／１９の割でつめる。吸着体の量は、血液１
００−に対して１０〜５０−の範囲である。吸着体に血
液を通したあとの洗浄は、赤血球の回収率をあげるため
に行なった方がよく、洗浄液は生理食塩水で行なう。
洗浄の生理食塩水の量は吸着体１−に対し１〜３−が適
当である０カラムを通過せしめる時間は５〜１２０分の
範囲で、流速が遅い場合はＩＶ４／−以下の力で加圧し
て溶出を早めてもよい〇以下の実施例１〜５に示される
ように、本発明の方法によってヒト全血、赤血球流層お
よび哺乳動物の血液から赤血球を分画した結果、赤血球
の回収率は９５％以上白崩球、血小板の除去率は９９チ
以上という結果が得られた。回収された赤血球を走査型
電子顕微鏡で観察すると吸着体に接触する前と全く同一
の円盤状を示し、パーパート法で浸透圧脆弱性とみると
吸着体接触前後で全く変化は ゛なかった。又、吸着体
に接触させたものとさせなかったものとを４℃で１週間
保存後、アデノシン−トリリン酸、２．３−ジホスホグ
リセン酸の定量を打力った結果、定量値に全く差はみと
められなかった。
当である０カラムを通過せしめる時間は５〜１２０分の
範囲で、流速が遅い場合はＩＶ４／−以下の力で加圧し
て溶出を早めてもよい〇以下の実施例１〜５に示される
ように、本発明の方法によってヒト全血、赤血球流層お
よび哺乳動物の血液から赤血球を分画した結果、赤血球
の回収率は９５％以上白崩球、血小板の除去率は９９チ
以上という結果が得られた。回収された赤血球を走査型
電子顕微鏡で観察すると吸着体に接触する前と全く同一
の円盤状を示し、パーパート法で浸透圧脆弱性とみると
吸着体接触前後で全く変化は ゛なかった。又、吸着体
に接触させたものとさせなかったものとを４℃で１週間
保存後、アデノシン−トリリン酸、２．３−ジホスホグ
リセン酸の定量を打力った結果、定量値に全く差はみと
められなかった。
本発明の方法を実施するための装置としては、第１図に
示すような装置があり、吸着体５を充填し吸着体５をナ
イロンメツシュ４で支持したカラム３に血液バッグ１を
連結して用いる。ヒト全血あるいは赤血球流層等の血液
製剤は中空針７から導管２を通って吸着体５が充填され
たカラム３に導かれ白血球・血小板は吸着体５に付着す
る。そしてこの吸着体５に付着しない赤血球は導管２を
通って血液バッグ１に回収される。また、この装置はオ
ートクレーブで１１５℃１５分処理して無菌化が可能で
ある。この加熱処理で変化をうけるものはｍイオン交換
体のジエチルアミノエチルセルロースで他のセルロース
はこの処理で伺ら影響をうけない。
示すような装置があり、吸着体５を充填し吸着体５をナ
イロンメツシュ４で支持したカラム３に血液バッグ１を
連結して用いる。ヒト全血あるいは赤血球流層等の血液
製剤は中空針７から導管２を通って吸着体５が充填され
たカラム３に導かれ白血球・血小板は吸着体５に付着す
る。そしてこの吸着体５に付着しない赤血球は導管２を
通って血液バッグ１に回収される。また、この装置はオ
ートクレーブで１１５℃１５分処理して無菌化が可能で
ある。この加熱処理で変化をうけるものはｍイオン交換
体のジエチルアミノエチルセルロースで他のセルロース
はこの処理で伺ら影響をうけない。
以上説明したように、本発明の装置は低摩な吸着剤を用
いて、ヒト全血あるいは赤血球流層から組織抗原を含む
白血球・血小板が完全に除かれた成分輸血用の赤血球の
調製が簡単、かつ経済的にできるようにし、臨床検査用
の純粋な赤血球の調製を容易圧する等の効果を生せしめ
るものである。
いて、ヒト全血あるいは赤血球流層から組織抗原を含む
白血球・血小板が完全に除かれた成分輸血用の赤血球の
調製が簡単、かつ経済的にできるようにし、臨床検査用
の純粋な赤血球の調製を容易圧する等の効果を生せしめ
るものである。
以下、実施例をもって本発明を具体的に説明するＯ
実施例Ｉ
ＫＣ−フロックＷ−５０（Ｓ）（山陽国策パルプ株式会
社製） ０．５ Ｆを生理食塩水約５＋ｄＫ懸濁して、
これを内容積１０−の２５ミクロンのオープニングを有
するナイロンメツシュ２枚をしいたポリプロピレン製カ
ラムにつめる０加圧して吸着体の容積を２．５−にする
。ヘパリン１０ ＩＵ／−を含むヒト新鮮全血６．０−
を流す。更に生理食塩水２．０−を流し合計約８−の両
分を得る。所用時間約３０分。吸着体を含ま表いカラム
に血液を流しくブランク）同様に処理したもの、および
全血６−に生理食塩水２−を加えたものを同時に血球数
を比較した０ 実施例２ ＫＣ−フロックＷ −５０（Ｓ） ０．５ ｆを実施例
１と同様にカラムにつめ、赤血球流層（日光）４．０ｄ
Ｋ生理食塩水２．０ｍｌを加えて流す０以上実施例１と
同様に処理し、血球カウントした０ 実施例３ ＫＣフロックｗ −５０（Ｓ） ０．５ ｔを実施例１
と同様にカラムにつめ兎新鮮血にヘパリン１０ ＩＵ／
−を加えたもの６．０−を流す０以下実施例１と同様に
処理し、血球をカウントした。
社製） ０．５ Ｆを生理食塩水約５＋ｄＫ懸濁して、
これを内容積１０−の２５ミクロンのオープニングを有
するナイロンメツシュ２枚をしいたポリプロピレン製カ
ラムにつめる０加圧して吸着体の容積を２．５−にする
。ヘパリン１０ ＩＵ／−を含むヒト新鮮全血６．０−
を流す。更に生理食塩水２．０−を流し合計約８−の両
分を得る。所用時間約３０分。吸着体を含ま表いカラム
に血液を流しくブランク）同様に処理したもの、および
全血６−に生理食塩水２−を加えたものを同時に血球数
を比較した０ 実施例２ ＫＣ−フロックＷ −５０（Ｓ） ０．５ ｆを実施例
１と同様にカラムにつめ、赤血球流層（日光）４．０ｄ
Ｋ生理食塩水２．０ｍｌを加えて流す０以上実施例１と
同様に処理し、血球カウントした０ 実施例３ ＫＣフロックｗ −５０（Ｓ） ０．５ ｔを実施例１
と同様にカラムにつめ兎新鮮血にヘパリン１０ ＩＵ／
−を加えたもの６．０−を流す０以下実施例１と同様に
処理し、血球をカウントした。
１０−
実施例４
アビセルｐＴ（１０１（旭化成工業株式会社製）０．５
ｆを生理食塩水約５ ｍＡＫｌ！ｉＩｉ濁して、実施例
１と同様にカラムにつめ吸着体の容積を１．０−とする
。これに赤血球流層（日歩）４．０−に生理食塩水２．
０−を加えて流す。以下実施例１と同様に処理し血球を
カウントした。
ｆを生理食塩水約５ ｍＡＫｌ！ｉＩｉ濁して、実施例
１と同様にカラムにつめ吸着体の容積を１．０−とする
。これに赤血球流層（日歩）４．０−に生理食塩水２．
０−を加えて流す。以下実施例１と同様に処理し血球を
カウントした。
実施例５
ジエチルアミノエチルセルロース（Ｃ１−ｇ ）（東京
化成工業株式会社製をＣ１−型として精製乾燥したもの
）０．５Ｆを生理食塩水約５−に懸濁し実施例１と同様
にカラムにつめ、赤血球流層（日歩）４．０−に生理食
塩水２．０−を加えて流す。以下実施例１と同様に処理
し血球をカウントした。
化成工業株式会社製をＣ１−型として精製乾燥したもの
）０．５Ｆを生理食塩水約５−に懸濁し実施例１と同様
にカラムにつめ、赤血球流層（日歩）４．０−に生理食
塩水２．０−を加えて流す。以下実施例１と同様に処理
し血球をカウントした。
第１図は本発明の装置の１実施例を示す図である。
１・・・血液バッグ、２・・・導管、３・・・カラム、
４・・・ナイロンメツシュ、５・・・吸着体、６・・・
分岐管、７・・・中空針〇 出願人 テルモ株式会社
４・・・ナイロンメツシュ、５・・・吸着体、６・・・
分岐管、７・・・中空針〇 出願人 テルモ株式会社
Claims (1)
- （１）カラムと該カラム内に吸着体を有する血液の分画
・精製装置において、前記カラムは血液流入口と血液流
出口を有し、カラム内にはセルロース粉末、結晶セルロ
ース、陰イオン交換セルロースのうち少なくともひとつ
からなる吸着体を充欄し、さらに、該吸着体を支持する
メツシュが設けられていることを特徴とする血液の分画
・精製装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58204243A JPS5995051A (ja) | 1983-10-31 | 1983-10-31 | 白血球および血小板除去装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58204243A JPS5995051A (ja) | 1983-10-31 | 1983-10-31 | 白血球および血小板除去装置 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5995051A true JPS5995051A (ja) | 1984-05-31 |
| JPH0326170B2 JPH0326170B2 (ja) | 1991-04-10 |
Family
ID=16487216
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP58204243A Granted JPS5995051A (ja) | 1983-10-31 | 1983-10-31 | 白血球および血小板除去装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5995051A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2014126014A1 (ja) | 2013-02-12 | 2014-08-21 | 東レ株式会社 | 血液浄化カラム |
-
1983
- 1983-10-31 JP JP58204243A patent/JPS5995051A/ja active Granted
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2014126014A1 (ja) | 2013-02-12 | 2014-08-21 | 東レ株式会社 | 血液浄化カラム |
| KR20150118085A (ko) | 2013-02-12 | 2015-10-21 | 도레이 카부시키가이샤 | 혈액 정화 컬럼 |
| US10213543B2 (en) | 2013-02-12 | 2019-02-26 | Toray Industries, Inc. | Blood purification column |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0326170B2 (ja) | 1991-04-10 |
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