JPS59225120A - 脂肪肝生成抑制剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、高分子多糖類物質ＭＰＳ−８０を有効成分と
する脂肪肝抑制剤に関するものである。

一般に、食品の構成成分の一つである多糖類は、近年、
多くの疫学調査の結果から、大腸がん、動脈硬化性疾患
など多くの疾病予防に重要な役割を果していることが明
らかとなってきた。中でも、血中コレステロール上昇を
抑制する作用が多糖類に存在することが明らかに々るに
つれ、動脈硬化性疾患の予防と治療の面から注目される
ようになった。

本発明者らは、先に、各種乳酸菌から新規高分子多糖類
物質ＭＰＳ−８０（特願昭！Ｍ−３０３９）を見出すに
至ったが、Ｍｐｓ−ｓｏが生理的に有用な高分子多糖類
であるところから、ＭＰ６’−８０が肝臓の高脂肪化を
抑制する効果を有するのではないかとの期待から鋭意研
究したところ、ＭＰＳ−８０に肝臓への脂質の蓄積を抑
制する作用が存在するととを知った。

本発明は、この知見から完成されたもので、高分子多糖
類物質ＭＰＳ−８０を有効成分とする脂肪肝抑制剤に関
するものである。

本発明においては、ＭＰＳ−８０を経口投与剤として投
与を続ければ、高脂肝症治療ならびに予防に効果的であ
る。投与量としてはＭＰＳ−８００，１〜３ｒ３ｊｉ／
ｋｇ７日程度である。

次にＭＰＳ−８０について説明する。

ＭＰＳ−８０はＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ｊｕｇｕ
ｒｔｉ　Ａｓ５１．ｐＥＲｉ　　ＢＰ−６６又は、Ｓｔ
ｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ　４
１２７　、　ＦＥＲＭ　ＢＰ−６５によって生産される
。

ＭＰＳ−８０の理化学的性質は次の通シである。

（１）元素分析 Ｃ：４２．２チ Ｈ：６．９　チ ０：５０．４　％ （２）分子量 （１）限外ｐ適法による場合。

５ｅｐｈａｒｏｓｅ　２　Ｂによる限外濾過を行なった
結果を第１図に示した。

カラムサイズ２．５　Ｘ　４０．５ｃｒｒＬ；　７ラク
シヨン５ｇ；試料２．５ｍ９（１ｍｉを負荷；展開剤０
．０５Ｍ、９ん酸緩衝１（ｐＨ６，０）；の条件ニヨ９
、本物質はほぼＶｏｉｄ　Ｖｏｌｕｍｅ付近に分画され
る。

（１１）超遠心法による場合。

０、２　Ｍシん酸緩衝液（ｐＨ７，３）に０．１チ濃度
で溶解した試料について超遠心法（設定回転数５１、２
０　ＯＲＰ　Ｍ　）によシ沈降定数を求めたところ７．
９８８　（Ｓ　：　Ｓｖｅｄｂｅｒｇ単位）であった。

（沈降は単一状態を示した。） （３）融点（分解点） 本物質は２６２℃付近で変色が始まり、２６６〜２６４
℃で黒変する。

（４）比旋光度 （ａ　）ｊ’＝＋３３．２　（Ｃ＝０．５　％　）（５
）紫外部吸収スペクトル 第２図に示す通シである。

（６）光外部吸収スペクトル 第３図に示す通シである。

（７）溶剤に対する溶解性 水に可溶、メタノール、エタノール、アセトン。

エーテルに不溶。

（８）呈色反応 （１）モーリッシュ反応　　　　　　＋（１１）　　ア
ンスロン反応　　　　　　　　−ト（ｔｉｉｌ　　シス
ティン−４渇酸反応　　　　十（１■）アニリン−塩酸
反応　　　　　−（ψ　カルバゾール−硫酸反応　　　
−（■１）エルソンーモルガン反応　　　＝（ｖｉｉ）
　　ビユレット反応　　　　　　　−（９）塩基性、酸
性、中性の別 本物質の０．１チ〜０．５％水溶液の丙は中性である。

００）物質の色 本物質の凍結乾燥物は白色繊維状である。

（１１）　　構成糖の種類 ５　％　８　Ｂ　−５２（２ｒ−１カラム）を使用し、
ＧＬＣによる構成糖の種類を調べだ。

条件：昇温１５０°Ｇ−２３０℃（６′’Ｃ／　ｍ　ｉ
　ｎ　）試料を２　Ｎ　−Ｈ２８０４で沸とう水中４時
間加水分解し、炭酸バリウムで中和後濾過した。ｐ液に
ついてアンバーライトＩＲＡ−４１０およびアンバーラ
イトｉｒｔ、−１２ｏｎで脱塩後濃縮乾固し、ＴＭＳ化
してＧＬＣにかけた。その結果、本物質の構成糖として
グルコース、ガラクトースが認められた。

（１渇　構成糖の組成比 試料を２　Ｎ　−Ｈ２ＳＯ，で沸とう水中４時間加水分
解し、炭酸バリウムで中和後濾過し、そのｐ液について
醪素法により構成糖の組成比を調べだ。その結果グルコ
ース：ガラクトース−２，２〜１．９：１であった。

（＋３）　　Ｃｌ３−　ＮＭＲスペクトル（Ｄ２０申、
ＴＭ８基準）（ｐｐｍ） 第４図に結果を示したＯ Ｉ　酵素による分解性 ０．０５Ｍ酢酸緩衝液に溶解した本物質について各種酵
素を作用させた。酵素による分解性はソモギー・ネルノ
ン法による還元糖量の増加で判定した。

使用した酵素と反応条件 ａ、　α−Ａｍｙｌａｓｅ（ベーリンガー社）ｐｌ（５
，９゜６７°Ｃ，４時間 す、　β−Ａｍｙｌａｓｅ　（）　ｐＨ４，８。

５０℃、４時間 Ｃ０β−Ｇａｌａｃｔｏｓｉｄａｓｅ　（ＩＩ　　）ｐ
ｌ（４，８＋３０°Ｇ、４時間 ｄ、　　Ａｍｙｌｏｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅ　（ＩＩ　
　）　ｐＨ４，８＋６０°Ｇ、４時間 ｅ、　α−Ｇａｌａｃｔｏｓｉｄａｓｅ　（ＩＩ　　）
ｐｔｆ４．８　＋５０℃、４時間 上記条件下ではａ　−ｅすべてにおいて、還元糖量の増
加は全く認められなかった。

（１５１ＬＤｓ。

ｄｄＹ　５　ｗ♀マウス（平均体重２１．３ｇ、１＃７
匹〉を用い、生理食塩水に溶解した試料を各種投与量で
腹腔内に１回投与して１０日間観察Ｌ−，ＬＤＩ、Ｏを
求めた。その結果ＬＤ、ｏは２００　ｍ９７に９　体重
以上であった。

次に本発明の製造例、実施例を示す。

製造例 ホエー培地（１０％ｗ／Ｙホエー粉＋０．５　’Ｉｙ　
ｗ／Ｖビール酵母エキス）１０１にＬａｃｔｏｂａｃｉ
　ｌｌｕｓＪｕｇｕｒｔｉ／ｌ６８５１　、　ＦＥＲＭ
　　ＢＰ−６６を接種し、３７℃で２４時間静置培養し
、培養終了後、遠心分離（１０，０００ｒｐｍ　、　１
５叫ｎ）にて培養上澄液９．２！を得る。この上澄液に
９９５チエチルアルコールを最終濃度として３５　’４
　（ｖ　／　ｖ　）となるように添加する。本操作によ
シ沈澱物質が認められるようになり、この沈澱物質を遠
心分離（１０，００Ｏｒｐｍ　、　５　ｍｉｎ　）　シ
、沈澱物質１８２ｇを得る。

この沈澱物質にイオン交換水を加え溶解後、不溶性物質
を遠心分離（１０，００Ｏｒｐｍ　、　１５　ｍ１ｎ）
にて除去する。本操作を計６回繰υ返すことにより８０
０１ψの粗精製物が得られる。

ここに得られた粗精製物０．０５　Ｍりん酸緩衝液（ｐ
Ｈ６，０）に溶解し、同緩衝液で十分に緩衝化しｆｃ　
シーｒ−ｆルアミノエチルセルロース（ＤＥＡＢ−セル
ロース）を充填したカラムに負荷する。同緩衝液を流し
、ＤＥＡＥ−セルロースに非吸着性物質を含む通過液を
採取する。非吸着性物質を含む溶液を凍結乾燥した後、
イオン交換水に溶解し、イオン交換水に対して１０℃で
４日間、透析チューブにて透析を行なう。透析終了後、
透析内液を凍結乾燥し、高分子多糖類物質ＭＰＳ−８０
の凍結乾燥標品５００グを得る。

実施例 製造例で得られた培養液をそのままアルコール沈澱させ
て得られた組物質１（ＭＰ８−８０をろ多含有する）を
市販のラット、マウス繁殖用飼料に１０％添加混合した
。これを飼料１とする。

対照として、ホエー蛋白質を同じ市販のラット、マウス
繁殖用飼料に１０％添加混合した。これに飼料■とする
。各群の飼料の蛋白質量、エネルギー等の内容は同じに
なるようにした。動物として、離乳直後の体重４０〜５
０ｇの高血圧自然発症ラット（８Ｈａ）雄を用いた。

実験区Ｉは、５ＨＦＬを３０匹、飼料■にて飼育した。

実験区■は、同じ（８Ｈａを６０匹飼料■にて飼育した
。両実験区共に３週間毎に１０匹ずつ脱血により層殺し
、肝臓を摘出した。肝臓中の脂質含量を測定した。実験
結果を表１．第５図及び第６図に示した。

体重増加は１両実験区において差はなかった。

肝臓中の脂質合量は実験区Ｉにおいて６〜９週齢で有意
に低かった。ＧＯＴ、ＧＰＴは両群で差はなかつ７ＩＣ
，−１ したがって、高分子多糖類ＭＰＳ−８０を含んだ飼料を
与えられたラットの方が、肝臓への脂質の蓄積が抑えら
れることが分かる。

【図面の簡単な説明】

第１図は高分子多糖類物質ＭＰＳ−８０の限外沖過によ
る展開図である。ａ・・高分子多糖類物質Ｍ　Ｐ　Ｓ　
−８０、ｂ　−Ｂｌｕｅ　Ｄｅｘｔｒａｎ第２図は高分
子多糖類物質ＭＰＳ−８０の紫外部吸収スはクトルを、
第６図は同じく赤外部吸収スペクトルを、第４図は同じ
（Ｃ”−ＮＭＲスペクトルを示す図である。 第５図は実施例における８ｌ−ｆＲの肝臓中の総脂質量
の変化を示す図で、第６図は同じく肝臓１！ｑ中の脂質
量の変化を示す図である。 Ａ　実験区Ｉ　　　　　　Ｂ・実験区■代理人　弁理士
　戸　１）親　男 第　　１　図 １０２０　　　　　　　ジ　　　　　　４０　　　　　
　　℃Ｆｒａｃｔｉｏｎ　　Ｎ。 縣　　　七　　　郵 痢　　　噌　　　何　　　箪 第　　５　　図 （ｍｇ） ０　　　　　　　　　５　　　　　　　　　６　　　　
　　　　９飼育期間　　（週） 第　　６　　図 ０　　　　　　　　ろ　　　　　　　　６９飼育期間　
　　（週）

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. （１）高分子多糖類物質ＭＰＳ１８０を有効成分とする
   脂肪肝抑制剤。