JPS5917983A - アミラ−ゼg3の製造法 - Google Patents
アミラ−ゼg3の製造法Info
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- JPS5917983A JPS5917983A JP12701182A JP12701182A JPS5917983A JP S5917983 A JPS5917983 A JP S5917983A JP 12701182 A JP12701182 A JP 12701182A JP 12701182 A JP12701182 A JP 12701182A JP S5917983 A JPS5917983 A JP S5917983A
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- amylase
- starch
- maltotriose
- producing
- enzyme
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、澱粉をマルトトリオースを主成分とする糖化
物に分解するアミラーゼの製造方法に関するものである
。
物に分解するアミラーゼの製造方法に関するものである
。
従来、アミラーゼとしては澱粉を、その非還元生木端か
らグルコース単位に分解するグルコアミラーゼ、マルト
ース単位に分解するβ−アミラーゼや澱粉をその内部組
から切断するα−アミラーゼが知られ、グルコースやマ
ルトースの工業的製造に便用さnている。
らグルコース単位に分解するグルコアミラーゼ、マルト
ース単位に分解するβ−アミラーゼや澱粉をその内部組
から切断するα−アミラーゼが知られ、グルコースやマ
ルトースの工業的製造に便用さnている。
そして最近は、より分子型の大きい、例えば、マルトト
リオース(03人マルトテトラオース(Gやマルトペン
タオース(US)、マルトヘキサオース(Gりなどのオ
リゴ糖製造技術の開発が要望されている。これらのオリ
ゴ糖は食品の増撤剤、賦形剤、包接剤など食品、医薬及
び工業製品に広く製造できるものと考えられているが、
末だ製法は確立されていないと云っても過昌°ではない
。
リオース(03人マルトテトラオース(Gやマルトペン
タオース(US)、マルトヘキサオース(Gりなどのオ
リゴ糖製造技術の開発が要望されている。これらのオリ
ゴ糖は食品の増撤剤、賦形剤、包接剤など食品、医薬及
び工業製品に広く製造できるものと考えられているが、
末だ製法は確立されていないと云っても過昌°ではない
。
本発明者は、谷檀オリゴ糖の製法を開発することを目的
として、澱粉よりこれらオリゴ糖を特異的に生産するア
ミラーゼの探索を行ってきた結果バチルス属の微生物が
澱粉をマルトトリオースを主成分とする糖化物に分解す
るアミラーゼを生産することを認めた。
として、澱粉よりこれらオリゴ糖を特異的に生産するア
ミラーゼの探索を行ってきた結果バチルス属の微生物が
澱粉をマルトトリオースを主成分とする糖化物に分解す
るアミラーゼを生産することを認めた。
軟扮からマル) トIJ 、1−スを特異的に生成する
アミラーゼとしては、8treptomycas gr
iaeua の生産するN−A 468酵素(特公昭5
7−6915 、特開昭110049 、澱粉化学、第
23巻、第3号、第175〜181貞(1979))が
知られている。しかしこの酵素は、β−アミラーゼと同
様に澱粉をマルトトリあると報告されている。
アミラーゼとしては、8treptomycas gr
iaeua の生産するN−A 468酵素(特公昭5
7−6915 、特開昭110049 、澱粉化学、第
23巻、第3号、第175〜181貞(1979))が
知られている。しかしこの酵素は、β−アミラーゼと同
様に澱粉をマルトトリあると報告されている。
しかるに、本発明の酵ふは分解生成糖がα−糖であるこ
とがらα−アミラーゼの一柚であり、澱粉を最終的には
法度反応が殆んど消失するまで、生としてマルトトリオ
ースを含む分解物に分解するアミラーゼであり、ボテl
扮抛化物の糖組成の一例は第1表に示す通りである。
とがらα−アミラーゼの一柚であり、澱粉を最終的には
法度反応が殆んど消失するまで、生としてマルトトリオ
ースを含む分解物に分解するアミラーゼであり、ボテl
扮抛化物の糖組成の一例は第1表に示す通りである。
第1衣
この他、酵素の最適温度、熱安廻性、pH安疋性、分子
輩なとの酵素的性質においても著しい差異が認められる
ものである。また、従来、知られている多くのα−アミ
ラーゼは澱粉分解物の−っとしてマルトトリオースを生
成するか、マルトトリオースのみを将兵的に大鼠生成す
るものではない。
輩なとの酵素的性質においても著しい差異が認められる
ものである。また、従来、知られている多くのα−アミ
ラーゼは澱粉分解物の−っとしてマルトトリオースを生
成するか、マルトトリオースのみを将兵的に大鼠生成す
るものではない。
本発つ」のアミラーゼは、第1表がら明らがなように、
マルトトリオースを6096以上の高収量で生産すると
いう、極めて特徴のあるアミラーゼであって、本光明者
はこの酵素をアミラーゼG3と10名した。以下に本酵
素の酵素的性質を記載する。 アミラーゼG3の酵素的
性質 (1)作用;澱粉、アミロース、アミロペクチン、デキ
ストリン、グリコーゲ/などのグル力/をマルト) I
Jオースを主成分とする分解物に分解する。生成糖はα
−型であって、不酵素はα−アミラーゼの一棟と考えら
れるものである。hm及びllk化でん粉からのマルト
トリオースの収量は約50〜約65%である。
マルトトリオースを6096以上の高収量で生産すると
いう、極めて特徴のあるアミラーゼであって、本光明者
はこの酵素をアミラーゼG3と10名した。以下に本酵
素の酵素的性質を記載する。 アミラーゼG3の酵素的
性質 (1)作用;澱粉、アミロース、アミロペクチン、デキ
ストリン、グリコーゲ/などのグル力/をマルト) I
Jオースを主成分とする分解物に分解する。生成糖はα
−型であって、不酵素はα−アミラーゼの一棟と考えら
れるものである。hm及びllk化でん粉からのマルト
トリオースの収量は約50〜約65%である。
(2) 作用温度範囲及び最遇作用温度;約70シま
で作用し、最逸作用温反は約50℃である(196澱粉
濃度、最適作用pHで30分間反応、第1図(bl J (31作用pJJl範囲及び最適作用pH; pH約4
〜約11の範囲に作用し、最適作用pHは6〜7、(第
1図tal J (4)熱安定11; 0.05 fvl トリス緩m1
ll!I< pH7,0ン9の存在ドで加熱した場合、
50′シ、10分間の加熱で約70%失活し、60C1
10分間の加熱で90%以上失活する(第1図(C1の
白抜き丸) 151 pH女定性; 0.I M緩衝液の下で、室
温(25’C)で3時間放置後、残イI活沙をmlり定
した。その結果、pH約6〜約9の範囲で女ボであった
(第1図(d)) +61 女足化;カルシウムイオンの存在下で熱安定
性の増加が認められた(W第1図tc]の黒丸1(1)
1111害剤:不酵素は5X10−3MのHgC12、
AgN03、Cu5O4、Zn5O4、Fe50 +の
存在下で、それぞれ約98%、約80%、約97%、約
95%、約60%阻害された。
で作用し、最逸作用温反は約50℃である(196澱粉
濃度、最適作用pHで30分間反応、第1図(bl J (31作用pJJl範囲及び最適作用pH; pH約4
〜約11の範囲に作用し、最適作用pHは6〜7、(第
1図tal J (4)熱安定11; 0.05 fvl トリス緩m1
ll!I< pH7,0ン9の存在ドで加熱した場合、
50′シ、10分間の加熱で約70%失活し、60C1
10分間の加熱で90%以上失活する(第1図(C1の
白抜き丸) 151 pH女定性; 0.I M緩衝液の下で、室
温(25’C)で3時間放置後、残イI活沙をmlり定
した。その結果、pH約6〜約9の範囲で女ボであった
(第1図(d)) +61 女足化;カルシウムイオンの存在下で熱安定
性の増加が認められた(W第1図tc]の黒丸1(1)
1111害剤:不酵素は5X10−3MのHgC12、
AgN03、Cu5O4、Zn5O4、Fe50 +の
存在下で、それぞれ約98%、約80%、約97%、約
95%、約60%阻害された。
+81 精製方法;本酵素は液体培養物の遠心上澄液
から、硫安分画、DgAE−セファロースカラムクロマ
トグラフィー(KCI濃度O〜0,2Mでグラジェント
溶出)、次いでセファデックスG−100カラムクロマ
トグラフイー及び同カラムによる再クロマトグラフィー
により、クロマト的及び電気泳動的にはゾ均一にまで精
製された。
から、硫安分画、DgAE−セファロースカラムクロマ
トグラフィー(KCI濃度O〜0,2Mでグラジェント
溶出)、次いでセファデックスG−100カラムクロマ
トグラフイー及び同カラムによる再クロマトグラフィー
により、クロマト的及び電気泳動的にはゾ均一にまで精
製された。
(9)分子坩;セファデックスG−100を用いるゲル
r過法により測定された本酵素の分子量−は約2500
0であった。
r過法により測定された本酵素の分子量−は約2500
0であった。
doi 力価測定法; 0.I M IJ 7酸緩衝
液に溶解させた1%iiJ溶性澱粉液(pH7,0)
0.5−に通亙の酵素を加え、水で全M1rn1.とし
、40゛Cで反応させる。この条件で1時間に1mgの
グルコースに相当する還ノじ力を生成する酵素量を1単
位とした。
液に溶解させた1%iiJ溶性澱粉液(pH7,0)
0.5−に通亙の酵素を加え、水で全M1rn1.とし
、40゛Cで反応させる。この条件で1時間に1mgの
グルコースに相当する還ノじ力を生成する酵素量を1単
位とした。
不酔糸を生産するfypr指、+として、パシルス・Y
T−1004を挙げる。本命生物の菌学的14L賀は下
記にノ」(ず辿りであり、1取工1tll菌肖第585
4 s3として工業技術院畝生物工業技術研兇J9rに
奇iLされている。
T−1004を挙げる。本命生物の菌学的14L賀は下
記にノ」(ず辿りであり、1取工1tll菌肖第585
4 s3として工業技術院畝生物工業技術研兇J9rに
奇iLされている。
(1) 形態;短桿菌、大きさ、1110.5〜0.
711X1.7〜2.4μ、単桿菌、非運動性、グラム
隘姓又はダラム バリアプル (2)胞子;胞子、がt細胞のふくらみはあっても非常
に小さい、球形〜楕円形の胞子を形j戊するt3+
ゼラチン; ゆ−ンくりl皮孔する。
711X1.7〜2.4μ、単桿菌、非運動性、グラム
隘姓又はダラム バリアプル (2)胞子;胞子、がt細胞のふくらみはあっても非常
に小さい、球形〜楕円形の胞子を形j戊するt3+
ゼラチン; ゆ−ンくりl皮孔する。
(4)肉汁基天;生向良好、衣面スノ・−ス、黄色を化
・ひる。
・ひる。
(5)グルコース肉汁基天;肉汁寒天よりも生育不良、
淡黄色 (6) グルコース硝酸寒天;生育わずか(7)肉汁
:少し混濁、沈降する。
淡黄色 (6) グルコース硝酸寒天;生育わずか(7)肉汁
:少し混濁、沈降する。
(8)良塩肉汁;食場の存在は生育を促進する。
10%錠塩でも生育する。
(9)クエン酸球大−生向わずか
け0) チロシン寒天;生青艮好、黄色、チロシナーゼ
1勢注 Uυ グルコース−アスパラギン寒天;生育わずかu7
J インドール;生成しない。
1勢注 Uυ グルコース−アスパラギン寒天;生育わずかu7
J インドール;生成しない。
uJミルク;ゆっくりと凝固、ペプトン化圓 ポテト;
生育わずか u51 アセチルメチルカルビノール;生成する。
生育わずか u51 アセチルメチルカルビノール;生成する。
ullilI・、硫化水素;生成する。
L171 (IFj酸塩の還)し;1裟性q81
ウレアーゼ;生成しない。
ウレアーゼ;生成しない。
(191カタラーゼ;生成する。
■) 澱粉の加水分解;陽性
(211炭水化物の利用;D−グルコース、D−7ラク
トース、D−マンノース、D−ガラクト−ろ、D−キノ
ロース、L−アラヒノース、ツユ−クロース、ラクトー
ス、マルトース、澱粉グリコーゲンなどから生成するが
カスの生成はなし。
トース、D−マンノース、D−ガラクト−ろ、D−キノ
ロース、L−アラヒノース、ツユ−クロース、ラクトー
ス、マルトース、澱粉グリコーゲンなどから生成するが
カスの生成はなし。
(支)生前ri、A度;最超生育温度38〜46C1最
商生+41i+1″id斐約 50゛し。
商生+41i+1″id斐約 50゛し。
以上の菌学的諸匪買について、Bergey’s Ma
nualof Determinative I3ac
teriologyの第7jJ1(及び第8版(’l’
be Williams &、Wilkins’ Co
r川t用sly、 1957年及び]9974年を参照
し同定した結果、本国はバシルス ズブチリス(Bac
illus 5ubLilis )の友柚の一]!■と
角えるのが女当と思われた。
nualof Determinative I3ac
teriologyの第7jJ1(及び第8版(’l’
be Williams &、Wilkins’ Co
r川t用sly、 1957年及び]9974年を参照
し同定した結果、本国はバシルス ズブチリス(Bac
illus 5ubLilis )の友柚の一]!■と
角えるのが女当と思われた。
本菌株はアミラーゼG3の他にα−1,6−グルコシダ
ーゼ(プルラナーゼ)を同時に生A!aする口し力があ
り、この酵素がアミロペクチンの分岐結合であるα−1
,6−グルコシド結合を分解するため、澱粉やアミロペ
クチ7などの分岐結合のある&[に対し、アミラーゼG
3と共同して作用し澱粉からマルトトリオースを収量よ
く生産するのに重要な役割をしている。例えば、本菌の
生産するα−1,6−グルコシダーゼと同時に反応を行
った場合、マルトトリオースの収量は基質の種類によっ
てもことなるが、通常10〜25%増加する。
ーゼ(プルラナーゼ)を同時に生A!aする口し力があ
り、この酵素がアミロペクチンの分岐結合であるα−1
,6−グルコシド結合を分解するため、澱粉やアミロペ
クチ7などの分岐結合のある&[に対し、アミラーゼG
3と共同して作用し澱粉からマルトトリオースを収量よ
く生産するのに重要な役割をしている。例えば、本菌の
生産するα−1,6−グルコシダーゼと同時に反応を行
った場合、マルトトリオースの収量は基質の種類によっ
てもことなるが、通常10〜25%増加する。
本菌の生産するα−1,6−グルコシダーゼの酵素1′
す性質は下記に示す辿りである。
す性質は下記に示す辿りである。
(1)作用ニブルランに存在するα−1,6−グルコシ
ド結合を分解し、マルトトリオースを生成する。また、
澱粉、アミロペクチン、グリコーゲン又はその派生物の
α−1,6−グルコシド結合を分解する。
ド結合を分解し、マルトトリオースを生成する。また、
澱粉、アミロペクチン、グリコーゲン又はその派生物の
α−1,6−グルコシド結合を分解する。
(2)作用温度鴨聞及び最適作用温度;約70’Cまで
作用し、最適作用温度は約60℃(1%プルラン、0.
05 M )リス級価液のもとて30分間反応) t、3+ 11;用pH郵囲及び最81′に用pi−
i; pH約4〜約10の範囲に作用し、最通作用pi
−1は6〜7にある(1%プルラン、0.05 M緩衝
液の下で40シて反応) (4)熱安定性; 0.05 M h +7 x緩4i
iitk(pH7,0)のもとで、各温度で10分間加
熱後、残イr活性を測定した。その結果、50 C,1
0分間の加熱では殆んど失活ぜず、60 ’U、10分
間の加熱で約70%失活した。
作用し、最適作用温度は約60℃(1%プルラン、0.
05 M )リス級価液のもとて30分間反応) t、3+ 11;用pH郵囲及び最81′に用pi−
i; pH約4〜約10の範囲に作用し、最通作用pi
−1は6〜7にある(1%プルラン、0.05 M緩衝
液の下で40シて反応) (4)熱安定性; 0.05 M h +7 x緩4i
iitk(pH7,0)のもとで、各温度で10分間加
熱後、残イr活性を測定した。その結果、50 C,1
0分間の加熱では殆んど失活ぜず、60 ’U、10分
間の加熱で約70%失活した。
(5)pH女定性、 pH約5〜約10で安定(0,1
〜1緩働液の下で室温(25℃)で放置後、残存存活性
をJlり定J tt3) tin害剤;本酵素let 5X10−
’ (7)HgOl 1、AgN03CuSO4などに
より、それぞれ約98%、約 98%、約87%阻害さ
れた。
〜1緩働液の下で室温(25℃)で放置後、残存存活性
をJlり定J tt3) tin害剤;本酵素let 5X10−
’ (7)HgOl 1、AgN03CuSO4などに
より、それぞれ約98%、約 98%、約87%阻害さ
れた。
m 女定化;カルシウムイオンの存在は本酵素の熱表疋
性を増加する。
性を増加する。
由1指製方法;本酵素は液体培食物の上澄液からm’A
F分画、1)EAR−セノアロースカラムクロマトグラ
フイー(KCI O,〜0.5Mでグラジェント溶出入
その後セファデックスG−200カラムクロマトグラ
フイーによりクロマト的且つ電気泳動的にはり均一まで
精製することができる。
F分画、1)EAR−セノアロースカラムクロマトグラ
フイー(KCI O,〜0.5Mでグラジェント溶出入
その後セファデックスG−200カラムクロマトグラ
フイーによりクロマト的且つ電気泳動的にはり均一まで
精製することができる。
(9)分子蓋:セソアデックスa −200ゲル濾過法
により6+11定された分子血は約55万であった。
により6+11定された分子血は約55万であった。
(101力価測定法; 0.I M !Iン酸緩衝液に
溶解させた1%プルラン液(pH7,0) 0.5ml
に適量の酵素を加え、水で全M 1 nlとし。
溶解させた1%プルラン液(pH7,0) 0.5ml
に適量の酵素を加え、水で全M 1 nlとし。
40 Cで反応させる。この条件で1時間に1 #l、
のマルトトリオースに相当する還元力を生成する酵素鼠
を1単位と した。
のマルトトリオースに相当する還元力を生成する酵素鼠
を1単位と した。
本発明によるアミラーゼG3生産のための培貢は、屋索
源としてペプトン、肉エキス、酵母エキス、カゼイン、
コーン・ステイブ・リカー、大豆粕など通常に用いられ
る(1機窒索諒が使用されまた、炭素源としては誠粉、
゛デキストリン、マルトース、クルコース、シュークロ
ースなどが使用され、そして、これに袖垣する栄養鯨と
して無像電蓄ゐ覧、リン酸塩、マグネンウム塩と各44
1!金属塩を宮む培地が使用される。培養はpH約5〜
9゜nA度26〜55(で好気的に行なわれる。
源としてペプトン、肉エキス、酵母エキス、カゼイン、
コーン・ステイブ・リカー、大豆粕など通常に用いられ
る(1機窒索諒が使用されまた、炭素源としては誠粉、
゛デキストリン、マルトース、クルコース、シュークロ
ースなどが使用され、そして、これに袖垣する栄養鯨と
して無像電蓄ゐ覧、リン酸塩、マグネンウム塩と各44
1!金属塩を宮む培地が使用される。培養はpH約5〜
9゜nA度26〜55(で好気的に行なわれる。
アミラーゼG3及びプルラナーゼは菌体外に生産される
酵素であるので、培養終了後、p過又は遠心分離して除
菌し、」ニバを液を回収する。そして、必要に応じ、濃
縮し、硫安、硫酸すトリウム1などによる塩折によ・る
か、又はアセト/、インプロパツール、エタノール、メ
タノールなどの41機俗Allを加えて、酵素を沈澱物
として収得、乾燥、保存する。
酵素であるので、培養終了後、p過又は遠心分離して除
菌し、」ニバを液を回収する。そして、必要に応じ、濃
縮し、硫安、硫酸すトリウム1などによる塩折によ・る
か、又はアセト/、インプロパツール、エタノール、メ
タノールなどの41機俗Allを加えて、酵素を沈澱物
として収得、乾燥、保存する。
本酵素による澱粉の糖化は、通常5〜40%の液化澱粉
の下で、p)15.5〜8、温度40〜60゛Cで行な
われる。
の下で、p)15.5〜8、温度40〜60゛Cで行な
われる。
以下に実施例により本発明の詳細な説明する。
実施例1
20〇−容三角フラスコに、K tHPo 40.3%
、Mg5O4,7H200,1%、魚肉エキス3%、可
溶性澱粉1%、硫酸マンガ15X10−5Mからなる液
体培地を入れ、常法により殺菌後、バシルス属菌株(微
工研菌寄第5854号)を接種し、30゛0で2日間振
盪培資した。培女俊、辿心分離機で除菌し、得られた上
澄液について、生産されたアミラーゼG3を測定した結
果、培地−当り80.9単位であった。そして、同時に
生産されたプルラナーゼは培地−当り11.5単位であ
った。
、Mg5O4,7H200,1%、魚肉エキス3%、可
溶性澱粉1%、硫酸マンガ15X10−5Mからなる液
体培地を入れ、常法により殺菌後、バシルス属菌株(微
工研菌寄第5854号)を接種し、30゛0で2日間振
盪培資した。培女俊、辿心分離機で除菌し、得られた上
澄液について、生産されたアミラーゼG3を測定した結
果、培地−当り80.9単位であった。そして、同時に
生産されたプルラナーゼは培地−当り11.5単位であ
った。
培養上澄液に硫安を6026飽和になるように加えて、
沈澱区分を集め、乾燥保存した。
沈澱区分を集め、乾燥保存した。
本酵素剤にはアミラーゼG3の他にプルラナーゼが存在
しているので、アミラーゼG3は次の操作で精製した。
しているので、アミラーゼG3は次の操作で精製した。
61j記酵素剤を水に溶解後、遠心分離した上澄液につ
いて、蒸留水に則して透析後、2.5X10” 3 M
トリス緩衝液で緩衝化したDEAE−セソアロース力ラ
ムに吸着後、同緩衝液で洗滌後、同緩衝液を含むKCI
溶液、で0〜0.5Mまでリニヤ−グラジェントにより
溶出した。この結果、プルラナーゼを含まないアミラー
ゼG3を得ることができた。
いて、蒸留水に則して透析後、2.5X10” 3 M
トリス緩衝液で緩衝化したDEAE−セソアロース力ラ
ムに吸着後、同緩衝液で洗滌後、同緩衝液を含むKCI
溶液、で0〜0.5Mまでリニヤ−グラジェントにより
溶出した。この結果、プルラナーゼを含まないアミラー
ゼG3を得ることができた。
硫安沈澱物からの収量は約30%であった。
該精製酵素液3.3.単位をDB 4.3の液化澱粉溶
液(固形分50■)に加え、塩化カルシウムを5X10
−3M添加し、全ijk 1 mtとして50℃で反応
させた。得られた糖化物の一部をペーパークロマトグラ
フ法により3重展開(溶媒;ピリジ//n−ブタノール
/水=476/B)後、各糖凶分を切抜き、水で抽出後
、フェノール−硫酸法により定電した。その結果、グル
コース2.8 %、マルトース12.1%、マルトトリ
オース55.3%、マルトテトラオース4.4%、その
他のオリゴ糖25.4%であった。
液(固形分50■)に加え、塩化カルシウムを5X10
−3M添加し、全ijk 1 mtとして50℃で反応
させた。得られた糖化物の一部をペーパークロマトグラ
フ法により3重展開(溶媒;ピリジ//n−ブタノール
/水=476/B)後、各糖凶分を切抜き、水で抽出後
、フェノール−硫酸法により定電した。その結果、グル
コース2.8 %、マルトース12.1%、マルトトリ
オース55.3%、マルトテトラオース4.4%、その
他のオリゴ糖25.4%であった。
実施例 2
実施例1において、培地としてK t HPO40,3
%、Mg5Os、7H】OO,1%、魚肉エキス3%、
iJ溶性緻粉2%、MnC1! 2.5810−6
M、 CaC111xlO−” M、 ZnSO41X
IO−4M、 CuSO45xlO−’Mを含む液体培
地を使用し、30Cで4日間振盪培養した。その結果、
生産されたアミラーゼG3は培地−当り152.4単位
であった。又、同時に生産されたプルラナーゼは培地−
当り17.3単位であった。
%、Mg5Os、7H】OO,1%、魚肉エキス3%、
iJ溶性緻粉2%、MnC1! 2.5810−6
M、 CaC111xlO−” M、 ZnSO41X
IO−4M、 CuSO45xlO−’Mを含む液体培
地を使用し、30Cで4日間振盪培養した。その結果、
生産されたアミラーゼG3は培地−当り152.4単位
であった。又、同時に生産されたプルラナーゼは培地−
当り17.3単位であった。
第1図1al、tbl、IcIとtdlは、ソレソレハ
シルス鵜アミラーゼG3の駄適pH,最J!!温反、熱
安定延性とpH安定性をボしている。 第2図181、tL+l、telとtdlは、それぞれ
ノくシルス属α−1,6−グルコシダーゼの最適pH1
最適温反、***定性とpH安定性を示している。 ヤ2 (a) H (c) 速度 温度 手続補正書(白k) 昭和 58年+ 月 77日 特許庁長官殿 一1− 1、事件の表示 昭和 57 年特許願第 /zr1
011 号2、発明の名称 アミラーセG3の製造法 3、補正を1−る者 事件との関係、特許出願人 住 所 東京都千代田区霞が関IV目3番1シン氏
名 (114)工業技術院長 石 坂 誠 −6補正
により増DI+する発明の数 な し7、補正の対象 次の字句を挿入する。 を削除し、次の文章を挿入する。 rpH約4〜約10の広いpH範囲に作用し、pH5付
近とpH7〜7.5付近に作用極大が認められる。 (196プルラン、0.05 M緩衝液(酢酸緩衝液p
H3,5〜5.5、リン酸緩衝液pH5,5〜10)の
下での字句を挿入する。 句を挿入する。 (8)第2図≠を別紙のとおり訂正する。 肯28
シルス鵜アミラーゼG3の駄適pH,最J!!温反、熱
安定延性とpH安定性をボしている。 第2図181、tL+l、telとtdlは、それぞれ
ノくシルス属α−1,6−グルコシダーゼの最適pH1
最適温反、***定性とpH安定性を示している。 ヤ2 (a) H (c) 速度 温度 手続補正書(白k) 昭和 58年+ 月 77日 特許庁長官殿 一1− 1、事件の表示 昭和 57 年特許願第 /zr1
011 号2、発明の名称 アミラーセG3の製造法 3、補正を1−る者 事件との関係、特許出願人 住 所 東京都千代田区霞が関IV目3番1シン氏
名 (114)工業技術院長 石 坂 誠 −6補正
により増DI+する発明の数 な し7、補正の対象 次の字句を挿入する。 を削除し、次の文章を挿入する。 rpH約4〜約10の広いpH範囲に作用し、pH5付
近とpH7〜7.5付近に作用極大が認められる。 (196プルラン、0.05 M緩衝液(酢酸緩衝液p
H3,5〜5.5、リン酸緩衝液pH5,5〜10)の
下での字句を挿入する。 句を挿入する。 (8)第2図≠を別紙のとおり訂正する。 肯28
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 l)バシルス鵬に属しアミラーゼG3を生産する微生物
を培養し、培養物からアミラーゼG3を採取することを
特徴とするバシルス属アミラーゼG3の製造孝法。 2)ハシルス属に鵬し、アミラーゼG3とα−IJ3−
グルコシダーゼを同時に生産する微生物を培養し、培養
物からアミラーゼG3とα−1,6−グルコシダーゼを
採取することを特徴とするバシルス縞アミラーゼG3と
α−1,6−グルコシダーゼの製造方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP12701182A JPS6015315B2 (ja) | 1982-07-21 | 1982-07-21 | アミラ−ゼg3の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP12701182A JPS6015315B2 (ja) | 1982-07-21 | 1982-07-21 | アミラ−ゼg3の製造法 |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP10147783A Division JPS6027513B2 (ja) | 1983-06-07 | 1983-06-07 | 耐熱性α−1,6−グルコシダ−ゼAの製造法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS5917983A true JPS5917983A (ja) | 1984-01-30 |
JPS6015315B2 JPS6015315B2 (ja) | 1985-04-18 |
Family
ID=14949471
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP12701182A Expired JPS6015315B2 (ja) | 1982-07-21 | 1982-07-21 | アミラ−ゼg3の製造法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS6015315B2 (ja) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0184116A2 (de) * | 1984-12-04 | 1986-06-11 | Siemens Aktiengesellschaft | Piezokeramik |
JP2019041722A (ja) * | 2017-09-06 | 2019-03-22 | 公立大学法人大阪府立大学 | デンプン分解酵素、それをコードする核酸、及びその利用 |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS61154920U (ja) * | 1985-03-15 | 1986-09-26 | ||
JPH0431059Y2 (ja) * | 1986-03-04 | 1992-07-27 | ||
JPS63264057A (ja) * | 1987-04-21 | 1988-10-31 | 岡 静枝 | 排尿袋 |
JP3456756B2 (ja) | 1994-05-30 | 2003-10-14 | 天野エンザイム株式会社 | パン類の品質改良組成物およびそれを用いたパン類の製造法 |
-
1982
- 1982-07-21 JP JP12701182A patent/JPS6015315B2/ja not_active Expired
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0184116A2 (de) * | 1984-12-04 | 1986-06-11 | Siemens Aktiengesellschaft | Piezokeramik |
EP0184116A3 (en) * | 1984-12-04 | 1986-11-20 | Siemens Aktiengesellschaft Berlin Und Munchen | Piezoceramic material |
JP2019041722A (ja) * | 2017-09-06 | 2019-03-22 | 公立大学法人大阪府立大学 | デンプン分解酵素、それをコードする核酸、及びその利用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPS6015315B2 (ja) | 1985-04-18 |
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