JPS5878597A - ヘテロ多糖s−194 - Google Patents
ヘテロ多糖s−194Info
- Publication number
- JPS5878597A JPS5878597A JP57183815A JP18381582A JPS5878597A JP S5878597 A JPS5878597 A JP S5878597A JP 57183815 A JP57183815 A JP 57183815A JP 18381582 A JP18381582 A JP 18381582A JP S5878597 A JPS5878597 A JP S5878597A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- culture
- heteropolysaccharide
- medium
- nutrient medium
- glucose
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
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Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N25/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators, characterised by their forms, or by their non-active ingredients or by their methods of application, e.g. seed treatment or sequential application; Substances for reducing the noxious effect of the active ingredients to organisms other than pests
- A01N25/08—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators, characterised by their forms, or by their non-active ingredients or by their methods of application, e.g. seed treatment or sequential application; Substances for reducing the noxious effect of the active ingredients to organisms other than pests containing solids as carriers or diluents
- A01N25/10—Macromolecular compounds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
- C05F—ORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
- C05F11/00—Other organic fertilisers
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/005—Glycopeptides, glycoproteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/05—Alcaligenes
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/829—Alcaligenes
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- Emulsifying, Dispersing, Foam-Producing Or Wetting Agents (AREA)
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- General Preparation And Processing Of Foods (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
ヘテロ多糖(het’eropolysacchari
des )がある種の舅生物によシ生産されることが知
られている。これらのへテロ多糖のいくつかはl水性コ
ロイドとして機能し、その粘度及び流動学的性°質によ
り、水性系の濃化剤として使われてきた。
des )がある種の舅生物によシ生産されることが知
られている。これらのへテロ多糖のいくつかはl水性コ
ロイドとして機能し、その粘度及び流動学的性°質によ
り、水性系の濃化剤として使われてきた。
他の技術の分野と同様に、濃化、懸濁及び/もしくは安
定剤として有用な性質を有する新規へテロ多糖を発見す
る目的の研究が行われてきた。本発明の目的は新しいア
ルカリ土類金属菌(Alcaligenes 5tra
in)から生産される新規へテロ多糖を与えることであ
る。また、この新規化合物の製造法を与えることも目的
である。さらに、濃化または懸濁または安定剤と己て新
規へテロ多糖を含有する組成物を与えることも目的であ
る。本発明の他の目的は本発明の以下の記載から明らか
になるだろう。
定剤として有用な性質を有する新規へテロ多糖を発見す
る目的の研究が行われてきた。本発明の目的は新しいア
ルカリ土類金属菌(Alcaligenes 5tra
in)から生産される新規へテロ多糖を与えることであ
る。また、この新規化合物の製造法を与えることも目的
である。さらに、濃化または懸濁または安定剤と己て新
規へテロ多糖を含有する組成物を与えることも目的であ
る。本発明の他の目的は本発明の以下の記載から明らか
になるだろう。
本発明は選ばれた炭素源上の微生物の作用により製造さ
れる新規へテロ多糖に関する。
れる新規へテロ多糖に関する。
さらに、本発明は制御された条件下選ばれた炭素源及び
培養培地成分の細菌培養によシ製造されるヘテロ多糖の
新規製造法に関する。
培養培地成分の細菌培養によシ製造されるヘテロ多糖の
新規製造法に関する。
本発明のへテロ多糖は主に炭水化物からなる高分子量多
糖である。時々「樹脂」と呼ばれるが、ヘテロ多糖とい
う語がより正確かつ明確であると信する。本発明の以下
の記載においては、ヘテロ多糖S−194もしくは単に
S−194と呼ぶ。
糖である。時々「樹脂」と呼ばれるが、ヘテロ多糖とい
う語がより正確かつ明確であると信する。本発明の以下
の記載においては、ヘテロ多糖S−194もしくは単に
S−194と呼ぶ。
この新規化合物は、アルカリ土類金属
(Alcaligenes )の微生物の適当な栄養培
地での培養により回収できる量製造される。ヘテロ多糖
製造に用いられるこの種の微生物の拘束されない水久烹
託は1981年9月17日、受託番号ATOO3196
1でアメリカン・タイプやカルチャー・コレクション(
American Type C!ulture Co
11ection)に行われている。
地での培養により回収できる量製造される。ヘテロ多糖
製造に用いられるこの種の微生物の拘束されない水久烹
託は1981年9月17日、受託番号ATOO3196
1でアメリカン・タイプやカルチャー・コレクション(
American Type C!ulture Co
11ection)に行われている。
微生物はコロラド州デンバー近くのロンキー山脈中グレ
ーシア ベーシン(GlacierBasin )地区
の水たまりから単離した。微生物は30”Q、4日培養
のY M (Difco )寒天平板上から樹脂状のコ
ロニーとして釣菌した。
ーシア ベーシン(GlacierBasin )地区
の水たまりから単離した。微生物は30”Q、4日培養
のY M (Difco )寒天平板上から樹脂状のコ
ロニーとして釣菌した。
単離菌は肉汁寒天上で培養を行い純粋にした。
ATOO31961菌の菌学的研究により、該菌がBe
rgey’s Mannalにおけるアルカリ土類金属
のいすにも相当しないことが示された。
rgey’s Mannalにおけるアルカリ土類金属
のいすにも相当しないことが示された。
YMマフラス種菌は新しいNA平板上から出発し、30
℃で回転振盪機上に置く。約24時間後、この種苗を炭
素源として氷解澱粉3優を用いたB−1フラスコに接種
する。
℃で回転振盪機上に置く。約24時間後、この種苗を炭
素源として氷解澱粉3優を用いたB−1フラスコに接種
する。
このフラスコもまた30℃で!!盪機上に置く。
約72時間後、フラスコは粘稠な培養液状態を示し、9
911PAの2倍量を添加することにより繊維質の沈澱
が観察された。
911PAの2倍量を添加することにより繊維質の沈澱
が観察された。
別のYMマフラス種菌は上記の方法で調製され、24時
間で種々の培地とグルコース3優を含むフラスコ5本に
接種するために用いた。これらのフラスコは30℃で約
72時間振盪培養し、pH1粘度、多糖の収率、生成物
の粘度を測定した。結果は表1.に」す。
間で種々の培地とグルコース3優を含むフラスコ5本に
接種するために用いた。これらのフラスコは30℃で約
72時間振盪培養し、pH1粘度、多糖の収率、生成物
の粘度を測定した。結果は表1.に」す。
E−1培地はリン酸二カルシウム5.!i’、i酸マグ
ネシウム0.1,9.、硝酸アンモニウム0.9.!i
’、ブロモソイ(Promosoy) 100 Cセン
トラル・ンーヤΦチェマーシイeディビイジョン(Ce
ntral 5oya Chemurgy Divis
ion)により市販されている大豆粉の酵素氷解物〕0
.5g、グルコース30g、水道水1tを含む。E−1
培地のpHは約7.6から7.8である。
ネシウム0.1,9.、硝酸アンモニウム0.9.!i
’、ブロモソイ(Promosoy) 100 Cセン
トラル・ンーヤΦチェマーシイeディビイジョン(Ce
ntral 5oya Chemurgy Divis
ion)により市販されている大豆粉の酵素氷解物〕0
.5g、グルコース30g、水道水1tを含む。E−1
培地のpHは約7.6から7.8である。
111+
閾 闇 閣 闇
最終培地における濃度(ppm)
)jaBO40,05B+3
Mnα2 ”4 H200,5Mn ”FeSO40,
5Fe+2 0uct2. 0.01
Cu+2ZnC1!2
Q、02 Zn+2Co(J2 ” 6H200
,01Co”NaMoO4・2H200,01Mo+6
フラスコの振盪培養で製造したS−194は以下の特徴
的な性質を示す。データは室温で得たものである。
5Fe+2 0uct2. 0.01
Cu+2ZnC1!2
Q、02 Zn+2Co(J2 ” 6H200
,01Co”NaMoO4・2H200,01Mo+6
フラスコの振盪培養で製造したS−194は以下の特徴
的な性質を示す。データは室温で得たものである。
1、粘度と剪断ン
1、 1.04060 rpm、 166
0cP 1820cPスピン3 ■ 6rp”+ 11.800cPスピ
ン3 ct 2、塩及び染料適合性: A、塩 1、 0aα2 (飽和) 適合2、
ポリリン酸アンモニウム 適合3、60優N
H4N o、 適合4、 14A
j12 (SO4)3・18H20適合5、 140a
(lt2 @ 2H20適合6.1憾にα
適合*得07.られた溶液について沈澱ま
たはゲル化の観察を行つ7’C;いずれも 観察きれなかった。
0cP 1820cPスピン3 ■ 6rp”+ 11.800cPスピ
ン3 ct 2、塩及び染料適合性: A、塩 1、 0aα2 (飽和) 適合2、
ポリリン酸アンモニウム 適合3、60優N
H4N o、 適合4、 14A
j12 (SO4)3・18H20適合5、 140a
(lt2 @ 2H20適合6.1憾にα
適合*得07.られた溶液について沈澱ま
たはゲル化の観察を行つ7’C;いずれも 観察きれなかった。
B、染料
C,ポリリン酸アンモニウム溶液における粘度
初期値 24時間後 係変化率910cP
720cP −203、手ざわり
/流動性: 平滑かつ連続的流れニゲル化なし:ゴムのような手ざわ
シ 4、作業収率41 (working yield v
alue ) :、62ダイン/c1/11標準水道水
中1憾溶液*標準水道水は脱イオン水に0.014 C
aC4及びQ、1INaαを含むものである。
720cP −203、手ざわり
/流動性: 平滑かつ連続的流れニゲル化なし:ゴムのような手ざわ
シ 4、作業収率41 (working yield v
alue ) :、62ダイン/c1/11標準水道水
中1憾溶液*標準水道水は脱イオン水に0.014 C
aC4及びQ、1INaαを含むものである。
ヘテロ多糖S−194は、微生物ATOO31961菌
を接種し制御した条件下で適当な水性栄養培地の好気性
培養を行うことによシ生産される。培地は炭素1.窒素
源及び無恢塩類を含む。
を接種し制御した条件下で適当な水性栄養培地の好気性
培養を行うことによシ生産される。培地は炭素1.窒素
源及び無恢塩類を含む。
一般的に、炭水化物(例えば、グルコースフルクトース
、マルトース、砂糖、キシロース、マンニトール等)は
栄養培地中単独でまたは同化炭素源を組み合せて使用す
ることができる。培地で使用する炭水化物または炭水化
物類の正確な量は一部分培地の他の成分によるが、一般
的に炭水化物の量は培地重量をたり通常約2壬から5優
の間で変化する。これらの炭素源類は培地中で絹み合せ
ることができる。一般的に、多くの蛋白質性物質は培養
工程中窒素源として用いることができる。
、マルトース、砂糖、キシロース、マンニトール等)は
栄養培地中単独でまたは同化炭素源を組み合せて使用す
ることができる。培地で使用する炭水化物または炭水化
物類の正確な量は一部分培地の他の成分によるが、一般
的に炭水化物の量は培地重量をたり通常約2壬から5優
の間で変化する。これらの炭素源類は培地中で絹み合せ
ることができる。一般的に、多くの蛋白質性物質は培養
工程中窒素源として用いることができる。
適当な窒素源は、例えば、酵母氷解物、生酵母、大豆粉
、綿実粉、カゼイン氷解物、コーンスチープリカー、発
酵性残渣の可溶性粉、トマトペースト#を含む。単独で
もしくは組み合せて用いられる窒素源は好適には水性培
地重量あたり約0.05から0.2優までの#!、囲の
量で用いられる。プロモンイ(Promosoy)10
0は0.005から0.4幅の範囲で使用することがで
きる。
、綿実粉、カゼイン氷解物、コーンスチープリカー、発
酵性残渣の可溶性粉、トマトペースト#を含む。単独で
もしくは組み合せて用いられる窒素源は好適には水性培
地重量あたり約0.05から0.2優までの#!、囲の
量で用いられる。プロモンイ(Promosoy)10
0は0.005から0.4幅の範囲で使用することがで
きる。
培養培地中に加えられる栄養無機塩類はナトリウム、カ
リウム、アンモニウム、カルシウム、リン酸、硫酸、塩
素、炭酸及び同様のイオンを生じさせることができる通
常の塩類である。また、コバルト、マン刀ン、鉄、マグ
ネシウムのような微量金属も含む。
リウム、アンモニウム、カルシウム、リン酸、硫酸、塩
素、炭酸及び同様のイオンを生じさせることができる通
常の塩類である。また、コバルト、マン刀ン、鉄、マグ
ネシウムのような微量金属も含む。
冥施例中に記載した培地は使用することができる広範囲
の培地の単なる実例にすぎず、限定するものではないこ
とに注意されたい。
の培地の単なる実例にすぎず、限定するものではないこ
とに注意されたい。
別法の培地として、S−194は低Ca++条件下、即
、脱イオン水または実質的にca++イオンが存在しな
い他の水性系(換言すれば、最終培養液における14多
糖あたり約4 ppmCa濃度より少ない)においても
生育できる。
、脱イオン水または実質的にca++イオンが存在しな
い他の水性系(換言すれば、最終培養液における14多
糖あたり約4 ppmCa濃度より少ない)においても
生育できる。
培養は約25°Cから35°Cの範囲の温度で行われる
が、最蓮の結果としては約28℃から32℃までの温度
で培養を行うのが好ましい。A T OC31’961
菌を生育させ多糖S−194に生育させる栄養培地のp
Hは約6がらiまで変化させることができる。
が、最蓮の結果としては約28℃から32℃までの温度
で培養を行うのが好ましい。A T OC31’961
菌を生育させ多糖S−194に生育させる栄養培地のp
Hは約6がらiまで変化させることができる。
多糖S−194は表面及び液体いずれの培養法において
も生産されるが、液体培養を行うのが好ま、しい。
も生産されるが、液体培養を行うのが好ま、しい。
小規模の培養は菌を適当な栄養培地に接種、生産培地に
移行後、約30 ”Qの恒温で数日間振盪培養を行うこ
とにより便利に行われる。
移行後、約30 ”Qの恒温で数日間振盪培養を行うこ
とにより便利に行われる。
培養は1段もしくは数段の種菌段階を経た後滅菌した培
地を入れたフラスコで始められる。種菌段階の栄養培地
は炭素及び窒素源の適当な組合せのいずれにおいてもで
きる。種菌のフラスコは約30″Oの恒温室で1〜2日
、または、光分生育するまで振盪し、得られた生育のあ
る量は第2段の種菌段階もしくは生産培地のいずれかの
接種に使用される。もし使用するならば、中間段階の種
菌のフラスコは要は同様の方法によシ展開される:即、
最終の種菌段階からのフラスコ内容物の一部をたフラス
コは恒温で数日振盪し、培養終了時にフラスコ内容物を
インプロパツールのような適当なアルコールの2−3倍
量またはOHMの組成(85:15のアルコール:水足
沸点混合物)のアルコールにより沈澱させて回収する。
地を入れたフラスコで始められる。種菌段階の栄養培地
は炭素及び窒素源の適当な組合せのいずれにおいてもで
きる。種菌のフラスコは約30″Oの恒温室で1〜2日
、または、光分生育するまで振盪し、得られた生育のあ
る量は第2段の種菌段階もしくは生産培地のいずれかの
接種に使用される。もし使用するならば、中間段階の種
菌のフラスコは要は同様の方法によシ展開される:即、
最終の種菌段階からのフラスコ内容物の一部をたフラス
コは恒温で数日振盪し、培養終了時にフラスコ内容物を
インプロパツールのような適当なアルコールの2−3倍
量またはOHMの組成(85:15のアルコール:水足
沸点混合物)のアルコールにより沈澱させて回収する。
大規模の場合、攪拌機及び培養培地に通気する装置を備
えた適当なタンクで培養を行うことが好適である。この
方法によれば、栄養培地をタンクで調合し約121℃の
温度まで加熱し滅菌す゛る。冷却後、滅菌した培地に生
産培地に前もって生育させた種菌を接種し、栄養培地を
攪拌及び/もしくは通気し約30℃の温度に維持しなが
ら、培養を例えば2日から4日間の期間、行わせる。こ
のS −194の製造法は特に大量の製造に適している
。
えた適当なタンクで培養を行うことが好適である。この
方法によれば、栄養培地をタンクで調合し約121℃の
温度まで加熱し滅菌す゛る。冷却後、滅菌した培地に生
産培地に前もって生育させた種菌を接種し、栄養培地を
攪拌及び/もしくは通気し約30℃の温度に維持しなが
ら、培養を例えば2日から4日間の期間、行わせる。こ
のS −194の製造法は特に大量の製造に適している
。
ATOO31961菌は広範囲の培地条件で生育するこ
とができるが、以下・の好適な条件を推薦する。
とができるが、以下・の好適な条件を推薦する。
この菌は゛YM寒天上で維持しなければならない。肉汁
寒天は使用すべきではない。多糖を生産しない変種が観
察された。この変種は肉汁寒天上野性種から区別するこ
とはできない。しかし、7M寒天上では容易に識別でき
る。
寒天は使用すべきではない。多糖を生産しない変種が観
察された。この変種は肉汁寒天上野性種から区別するこ
とはできない。しかし、7M寒天上では容易に識別でき
る。
YM萼天上、3日培養後、コロニーは1.5−2mの大
きさに達する。典型的な野性種のコロニーは黄色、円形
、金縁、半レンズ状不透明、光沢を有している。コロニ
ーは固く弾性がある。変種のコロニーは盛り上がり(し
かし半レンズ状では彦い)、固いというより柔かいまた
は粘質状である。
きさに達する。典型的な野性種のコロニーは黄色、円形
、金縁、半レンズ状不透明、光沢を有している。コロニ
ーは固く弾性がある。変種のコロニーは盛り上がり(し
かし半レンズ状では彦い)、固いというより柔かいまた
は粘質状である。
凶は3日から4日ごとに移植する。その中で、生育の密
集している場所よシも疎な単一コロニーをさらに選んで
生育させるために釣菌する。
集している場所よシも疎な単一コロニーをさらに選んで
生育させるために釣菌する。
2、種菌の調整
新鮮YM寒天平板(48−72時間)1−YMもしくは
YM+0.25憾に、2 HP o4 フラスコから
出発するために用いる。これらのフラスコは30℃で振
盪培養し、24時間後新しいYM’もしくはYM+0.
25優に2 HP o、 フラスコに移植する(1−
51接種)。30℃で24−30時間振盪後、これらの
フラスコの′2本を下記の種菌培地3Li含む1ガロン
培養槽に接種するために用いる。
YM+0.25憾に、2 HP o4 フラスコから
出発するために用いる。これらのフラスコは30℃で振
盪培養し、24時間後新しいYM’もしくはYM+0.
25優に2 HP o、 フラスコに移植する(1−
51接種)。30℃で24−30時間振盪後、これらの
フラスコの′2本を下記の種菌培地3Li含む1ガロン
培養槽に接種するために用いる。
グルコース 30憾
に2 HP Oa O,5係ブロモ
ソイ(Promosoy)100 0.24Mg5O
,−7H200,011 NH4No30.09憾 消泡剤 0.1−0.05424−3
0時間で5−10係の接種量を最終培養槽に接種するた
めに用いる。この培養は以下の消泡剤でも適している。
ソイ(Promosoy)100 0.24Mg5O
,−7H200,011 NH4No30.09憾 消泡剤 0.1−0.05424−3
0時間で5−10係の接種量を最終培養槽に接種するた
めに用いる。この培養は以下の消泡剤でも適している。
K−60/Ba1mb 0.011SAG47
1 0.05優 −FOA200
0.054DOW 0 0.0
5幅プロフロ油(Proflo 0il)
0.1043.7OL培養槽培地 最終培養槽培地はリン酸一度がより低いことを除けば種
菌培地と同様である: グルコ、−ス 30優 に2 HPO40,054 ブロモソイ(Promogoy)100 0.20
4MgSO4・7 H,OO,014 NH4NO,0,09係 消泡剤 0.01−0.05憾p)
Iは35優KOHによシロ、 5−7.0に制御する。
1 0.05優 −FOA200
0.054DOW 0 0.0
5幅プロフロ油(Proflo 0il)
0.1043.7OL培養槽培地 最終培養槽培地はリン酸一度がより低いことを除けば種
菌培地と同様である: グルコ、−ス 30優 に2 HPO40,054 ブロモソイ(Promogoy)100 0.20
4MgSO4・7 H,OO,014 NH4NO,0,09係 消泡剤 0.01−0.05憾p)
Iは35優KOHによシロ、 5−7.0に制御する。
培養は30℃で行う。60−72時間の培養時間で、培
養液粘度がBrookfield LVF粘度計、スピ
ンドルNa4.60rpm、室温の条件で測定すると3
400−4900 cP である。3憾グルコースの
変換効率は44−594である。
養液粘度がBrookfield LVF粘度計、スピ
ンドルNa4.60rpm、室温の条件で測定すると3
400−4900 cP である。3憾グルコースの
変換効率は44−594である。
フラスコ実験によシNa2HPO4に直き換えることが
できないことが示された。ナトリウムまたはその他に対
して敏感な微生物はカリウムに対する限定された要求を
有する。また最近のフラスコ実験によればより高濃度の
フロモソイ゛(Promosoy) 100、即ち、0
.4憾がよシ高収量の多糖収率をもたらすことが示され
た。
できないことが示された。ナトリウムまたはその他に対
して敏感な微生物はカリウムに対する限定された要求を
有する。また最近のフラスコ実験によればより高濃度の
フロモソイ゛(Promosoy) 100、即ち、0
.4憾がよシ高収量の多糖収率をもたらすことが示され
た。
4、回収
培養終了後、ヘテロ多糖S−194はへテロ多糖に対し
て溶解力が少なくかつ反応し々い溶媒で培養液と混合可
能な溶媒で処理することにより回収できる。この方法で
ヘテロ多糖は溶液から沈澱する。使用する溶媒の量は一
般的に培養液量の約2から約3倍量の範囲である。使用
できる種々の溶媒はア七トン及び、メタノール、エタノ
ール、イソプロパツール、n−ブタノール、aec−ブ
タノール1第3ブタノール、インブタノール、n−7ミ
ルアルコールのような低級アルカノール類である。イソ
プロパツールが好適である。回収前に最終培養液のpH
をH2S o、で6.5−6.8に調整する。典型的に
は、培養液を短時間(例えば、約10から15分)約7
5℃の温度に加熱し、約30℃からそれ以下に冷却後溶
媒を加える。培養液からヘテロ多糖を沈澱させるために
、使用するアルコール濃度55−56憾が必、要である
。固体は濾過等により液体から分離して回収し、昇温し
て乾燥させる。
て溶解力が少なくかつ反応し々い溶媒で培養液と混合可
能な溶媒で処理することにより回収できる。この方法で
ヘテロ多糖は溶液から沈澱する。使用する溶媒の量は一
般的に培養液量の約2から約3倍量の範囲である。使用
できる種々の溶媒はア七トン及び、メタノール、エタノ
ール、イソプロパツール、n−ブタノール、aec−ブ
タノール1第3ブタノール、インブタノール、n−7ミ
ルアルコールのような低級アルカノール類である。イソ
プロパツールが好適である。回収前に最終培養液のpH
をH2S o、で6.5−6.8に調整する。典型的に
は、培養液を短時間(例えば、約10から15分)約7
5℃の温度に加熱し、約30℃からそれ以下に冷却後溶
媒を加える。培養液からヘテロ多糖を沈澱させるために
、使用するアルコール濃度55−56憾が必、要である
。固体は濾過等により液体から分離して回収し、昇温し
て乾燥させる。
5、乾燥
生成物は55℃で1時間以上強制通風トレイ乾燥機で乾
燥させる。
燥させる。
診j口多糖S−194
ATOO31961菌によって生産されるヘテロ多糖は
主に炭水化物、約10優の〇−アセチル基、約10憾の
蛋白質から成り、実質的にピルビン酸を含まない。
主に炭水化物、約10優の〇−アセチル基、約10憾の
蛋白質から成り、実質的にピルビン酸を含まない。
多糖S−194の炭水化物部分は約9憾のグルクロン酸
(多糖重量を基に)とおよそのモル比が4=1の中性糖
、グルコースとラム一ノースを含む。
(多糖重量を基に)とおよそのモル比が4=1の中性糖
、グルコースとラム一ノースを含む。
コロイド滴定(DIMDAO/スルホン酸法)及び電位
差滴定共に多糖が酸性(多糖I当たり陰性基0.5−0
.7ミリ当蓋)であることを示している。
差滴定共に多糖が酸性(多糖I当たり陰性基0.5−0
.7ミリ当蓋)であることを示している。
9−114のアセチル含量は多糖S −194の0.2
1水性溶液をアルカリ性ヒドロキシルアミン試薬続いて
酸性塩化第2鉄試薬と処理することにより決定した〔ニ
ス・ヘストリン(S、 Heatrin)、J−Bto
l* Chem−1180”%249−261頁、19
49年〕。
1水性溶液をアルカリ性ヒドロキシルアミン試薬続いて
酸性塩化第2鉄試薬と処理することにより決定した〔ニ
ス・ヘストリン(S、 Heatrin)、J−Bto
l* Chem−1180”%249−261頁、19
49年〕。
S−194,20■を2 N H2SO,,1−で10
0″C4時間加水分解した。冷却後、3■/−のキシロ
ース、0.5−を内部標準として加えた。試料に飽和B
a (OH)2’ 3 、ml k加え中和、さらに
コンゴーレッド2摘を加え、色が赤くなるまでBa (
OH)2 を加えた。同体00゜を加え過剰のヒドロ
キシルイオンを中和した。
0″C4時間加水分解した。冷却後、3■/−のキシロ
ース、0.5−を内部標準として加えた。試料に飽和B
a (OH)2’ 3 、ml k加え中和、さらに
コンゴーレッド2摘を加え、色が赤くなるまでBa (
OH)2 を加えた。同体00゜を加え過剰のヒドロ
キシルイオンを中和した。
遠心(2000rpm、30分)後、すべての試料の上
清液を濃縮した。乾燥試料をヒドロキシルイオンHα塩
(蕉燥ピリジン中401119/mg)0.1−に誘導
体とし90°045分加熱した。冷却した試料に再蒸留
した無水酢酸0、1−を加え、試料90℃45分加熱し
た。
清液を濃縮した。乾燥試料をヒドロキシルイオンHα塩
(蕉燥ピリジン中401119/mg)0.1−に誘導
体とし90°045分加熱した。冷却した試料に再蒸留
した無水酢酸0、1−を加え、試料90℃45分加熱し
た。
糖をそのアルドノニトリル誘導体としてガ長クロマトグ
ラフィー 6 / X 2■内径ガラスカラム、100
/120メツシユ5upelcoport上3%5P−
2330で分離した。糖は標準試料と比較′して同定、
定量した〔ジヱー・ケー・ベアー゛ド(J* K、 B
a1rd 、エム・ジエー・ホルロイド(M* J、
Ho1royde) 、デー・シー・エルウ、ツド(D
、 Cm Rllwood ) 、Carbohyd
r。
ラフィー 6 / X 2■内径ガラスカラム、100
/120メツシユ5upelcoport上3%5P−
2330で分離した。糖は標準試料と比較′して同定、
定量した〔ジヱー・ケー・ベアー゛ド(J* K、 B
a1rd 、エム・ジエー・ホルロイド(M* J、
Ho1royde) 、デー・シー・エルウ、ツド(D
、 Cm Rllwood ) 、Carbohyd
r。
Reaa、 27巻、464’−467頁、1973年
〕1中性糖の決定は表2参照。
〕1中性糖の決定は表2参照。
表 2
S−194における全中性糖
糖 重量幅
ラムノース 20−21
グルコース 73−77
マンノース
リボース
アラビノース 微量
〈54(全量で)
多糖の種々の中性糖はまたピリジン:酢酸エチル:水(
2:5:5)の上層を溶媒とし′%II/hatm!n
Hn 1クロマトグラフイ一用PMを使用する下降法
ペーパークロマトグラフィーによっても特徴づけされた
。クロマトグラムは硝酸銀浸漬試薬及び酸性フタル酸ア
ニリン噴霧試薬で染色した。構成糖は糖の標準品との同
時クロマトグラフィー及びフタル酸アニリン試薬による
特異的呈色反応により同定した。
2:5:5)の上層を溶媒とし′%II/hatm!n
Hn 1クロマトグラフイ一用PMを使用する下降法
ペーパークロマトグラフィーによっても特徴づけされた
。クロマトグラムは硝酸銀浸漬試薬及び酸性フタル酸ア
ニリン噴霧試薬で染色した。構成糖は糖の標準品との同
時クロマトグラフィー及びフタル酸アニリン試薬による
特異的呈色反応により同定した。
多糖のグルクロン酸含量は17%塩酸による脱炭酸、標
準水酸化ナトリウム中への遊離二酸化炭素を捕促し逆滴
定を行い決定した〔ビー・エルeブラウニング(B、L
。
準水酸化ナトリウム中への遊離二酸化炭素を捕促し逆滴
定を行い決定した〔ビー・エルeブラウニング(B、L
。
Browning ) 、木材化学方法(Metho’
di of、−Wood Chemistry)第2巻
、632−633頁、1967年〕。脱炭酸法はS−1
94の3種の異なった試料で8.8.8.9.9.24
の値を与えた。
di of、−Wood Chemistry)第2巻
、632−633頁、1967年〕。脱炭酸法はS−1
94の3種の異なった試料で8.8.8.9.9.24
の値を与えた。
F紙電気泳動は上記酸加水分解中和物に存在するウロン
酸の分離及び試験的な同定に使用した。この試料及び既
知ウロン酸標準品の一定量をOamag電気泳動用濾紙
N168−011に塗布し、電気泳動f Oamag
Model HVE電気泳動装置を用いpH2,7緩衝
液中で2.0時間行った。り、ロマトグラムは風乾後、
分離したウロン酸の位置を求めるために硝酸銀浸漬試薬
で染色した。この方法によりグルクロン酸及びマンニュ
ロン酸標品の相対移動度を有する2つのウロン酸のスポ
ットが見られ、後者のスポットは酸水解抵抗性ウロン酸
含有三糖類を示している。
酸の分離及び試験的な同定に使用した。この試料及び既
知ウロン酸標準品の一定量をOamag電気泳動用濾紙
N168−011に塗布し、電気泳動f Oamag
Model HVE電気泳動装置を用いpH2,7緩衝
液中で2.0時間行った。り、ロマトグラムは風乾後、
分離したウロン酸の位置を求めるために硝酸銀浸漬試薬
で染色した。この方法によりグルクロン酸及びマンニュ
ロン酸標品の相対移動度を有する2つのウロン酸のスポ
ットが見られ、後者のスポットは酸水解抵抗性ウロン酸
含有三糖類を示している。
S−194本来の赤外吸収スペクトルは乾燥した物質を
KBr錠剤で測定した。ヘテロ多糖はヒドロキシル、メ
チル、エステル残基金示すそれぞれ、3400 cm−
” % 2900twr−”、1725m−1の吸収を
示した。− 培養後、S−194の試料を透析、凍結乾燥した。試料
はサンフォード(5anford )とコンラド(0o
nrad)、生化学(Biochemiatry)、5
巻、1508−1517頁、1966年にアセチル化し
たアルジトールのような糖のメチルエーテル誘導体はガ
スクロマトグラフィーで分離した。グルコース及びラム
ノースのO−メチル誘導体の相対量は表3に示した。
KBr錠剤で測定した。ヘテロ多糖はヒドロキシル、メ
チル、エステル残基金示すそれぞれ、3400 cm−
” % 2900twr−”、1725m−1の吸収を
示した。− 培養後、S−194の試料を透析、凍結乾燥した。試料
はサンフォード(5anford )とコンラド(0o
nrad)、生化学(Biochemiatry)、5
巻、1508−1517頁、1966年にアセチル化し
たアルジトールのような糖のメチルエーテル誘導体はガ
スクロマトグラフィーで分離した。グルコース及びラム
ノースのO−メチル誘導体の相対量は表3に示した。
表 3
メチル化S−194の加水分解−物中00−メチル化糖
の相対量 メチル化糖 結合 およそのモル比2g
3 Me2ラムノース 1,4 12t
3+4.6Me4グルコース 末端 12.3
14 Me3グルコース l、6 1213
@6 Me3グルコース 1,4 12.4
Me2グルコース 1,3.6 1従
って、S7−194は大部公表3の5種の糖が等モル量
と大部分が末端に結合していないグルクロン酸から成る
6種の構成糖のくシ返し単位からなる。
の相対量 メチル化糖 結合 およそのモル比2g
3 Me2ラムノース 1,4 12t
3+4.6Me4グルコース 末端 12.3
14 Me3グルコース l、6 1213
@6 Me3グルコース 1,4 12.4
Me2グルコース 1,3.6 1従
って、S7−194は大部公表3の5種の糖が等モル量
と大部分が末端に結合していないグルクロン酸から成る
6種の構成糖のくシ返し単位からなる。
4種の異なった試料によって決定したヘテロ多糖S−1
94は以下の特徴的な性質を有する: 表 4 S−194の溶液め性質 試料随 試 験 BD867 BD1103
BD1104 BD11051幅粘度/ S TW (
cP) 730 900 1120 1
190wyv(ダイン/1−d) 3
6.0 37 48 50pH安定
性 2−12 2−12 2−1
2 2−12a、海水 319.3
− − −b、飽和Oaα2” 2H
zO30,9−−−d、標準塩水 35
0.2 − −多糖S−194は水に
低濃度で溶解すると水性媒体に粘度を与える。これは濃
化剤、懸濁剤、゛乳化剤、安定剤、潤滑剤、薄膜形成剤
、結合剤として、特に水性系で有用である。S−194
は高い粘度作業収率価(warkingyield v
olue 、 WYV)、優秀な熱、剪断、酵素安定性
を有する。塩水における良好な粘度、pH2,o −1
2,0の範囲にわたる変わらない粘度を示す。また、熱
硝酸アンモニウム組成物中でのかなシ良好な濃化効率を
有する。ガール(guar) 、ヒドロキシプロピル化
ガール、もしくはヒドロキシエチルセルロースと合せた
S−194の水性溶液は相乗的な粘性を示し、それぞれ
各々一種類の多糖溶液と比較すると増加している。特に
、下記の応用もしくは生成物において使用される:粘着
剤、壁結合用セメント、速乾性化合物、カン密閉、ボイ
ラー用化合物(boiler compounds)、
ラテックスクリーミング(1atex creamin
g) 、溶接棒融剤(fluxes) 、硬質はんだ用
糊(brazing paste )、陶器製の光渭剤
及び押出成形用、クリーナ及び光沢剤、乳液(ラテック
ス1アスフアルト、シリコン)、銀の回収、種子の被覆
、殺虫剤または除草剤の噴霧制御、流動、性(flow
able)殺虫剤及び除草剤、タバコの結合剤、水性イ
ンク、安定な泡沫、皮革の仕上げ、織物の捺染及び仕上
げ、ウェットエンドペーパ(wet−end pape
r )添加剤、(wet−end paper )保持
及び形成助剤、抗粘着化合物(anti−stick、
compouuds)、型出し剤、液体樹脂、スラリ
状及び包装爆発物、石油及び水用井戸掘削泥、石油用(
workove’r)及び完成液、石油用、刺激液、化
粧品、薬学用懸濁液及び乳液。
94は以下の特徴的な性質を有する: 表 4 S−194の溶液め性質 試料随 試 験 BD867 BD1103
BD1104 BD11051幅粘度/ S TW (
cP) 730 900 1120 1
190wyv(ダイン/1−d) 3
6.0 37 48 50pH安定
性 2−12 2−12 2−1
2 2−12a、海水 319.3
− − −b、飽和Oaα2” 2H
zO30,9−−−d、標準塩水 35
0.2 − −多糖S−194は水に
低濃度で溶解すると水性媒体に粘度を与える。これは濃
化剤、懸濁剤、゛乳化剤、安定剤、潤滑剤、薄膜形成剤
、結合剤として、特に水性系で有用である。S−194
は高い粘度作業収率価(warkingyield v
olue 、 WYV)、優秀な熱、剪断、酵素安定性
を有する。塩水における良好な粘度、pH2,o −1
2,0の範囲にわたる変わらない粘度を示す。また、熱
硝酸アンモニウム組成物中でのかなシ良好な濃化効率を
有する。ガール(guar) 、ヒドロキシプロピル化
ガール、もしくはヒドロキシエチルセルロースと合せた
S−194の水性溶液は相乗的な粘性を示し、それぞれ
各々一種類の多糖溶液と比較すると増加している。特に
、下記の応用もしくは生成物において使用される:粘着
剤、壁結合用セメント、速乾性化合物、カン密閉、ボイ
ラー用化合物(boiler compounds)、
ラテックスクリーミング(1atex creamin
g) 、溶接棒融剤(fluxes) 、硬質はんだ用
糊(brazing paste )、陶器製の光渭剤
及び押出成形用、クリーナ及び光沢剤、乳液(ラテック
ス1アスフアルト、シリコン)、銀の回収、種子の被覆
、殺虫剤または除草剤の噴霧制御、流動、性(flow
able)殺虫剤及び除草剤、タバコの結合剤、水性イ
ンク、安定な泡沫、皮革の仕上げ、織物の捺染及び仕上
げ、ウェットエンドペーパ(wet−end pape
r )添加剤、(wet−end paper )保持
及び形成助剤、抗粘着化合物(anti−stick、
compouuds)、型出し剤、液体樹脂、スラリ
状及び包装爆発物、石油及び水用井戸掘削泥、石油用(
workove’r)及び完成液、石油用、刺激液、化
粧品、薬学用懸濁液及び乳液。
またこの多糖は、ゼリー及び他の高濃度糖含有系、クエ
ン酸を基にした飲料水を含む飲料、アイスクリーム及び
ヨーグルトを含む乳製品、サラダドレツシン・グ、(d
ry mix )、糖衣、あんかけ剤、シロップ、プデ
ィング、粉のような食品、カン詰及びレトルト食品、パ
ン用の増量剤のような食品関係忙おける利用もある。
ン酸を基にした飲料水を含む飲料、アイスクリーム及び
ヨーグルトを含む乳製品、サラダドレツシン・グ、(d
ry mix )、糖衣、あんかけ剤、シロップ、プデ
ィング、粉のような食品、カン詰及びレトルト食品、パ
ン用の増量剤のような食品関係忙おける利用もある。
S −494の本来の応用は懸濁液肥料である。懸濁液
製造に用いられる物質は窒素、リン酸、カリウムを種々
の割合で含有するすべての型の肥料に共通のものである
。窒素性物質ハアンモニア、アンモニウム塩、尿素、及
び、通前UAN溶液と呼ばれる尿素/硝酸アンモニウム
混液を含む。リン酸の源はリン酸及び窒素源としても使
われるリン酸アンモニウムを含む。最も通常使用される
塩類はlo−34−0と11−37−0のような液体ポ
リリン酸アンモニウムであシ、他の等級のものも使用さ
れる。近年リン酸モノアンモニウA(MAP)及びリン
酸ジアンモニウム(DAP)のようなオルトリン酸アン
モニウムが使用に供される機会が増えた。尿素/ポリリ
ン酸アンモニウム、28−28−0、のような特別な組
合せも使用される。カリウム源は主に塩化カリウムの不
純物を含む等級のものであるが、硫酸及び硝酸塩も使用
される。
製造に用いられる物質は窒素、リン酸、カリウムを種々
の割合で含有するすべての型の肥料に共通のものである
。窒素性物質ハアンモニア、アンモニウム塩、尿素、及
び、通前UAN溶液と呼ばれる尿素/硝酸アンモニウム
混液を含む。リン酸の源はリン酸及び窒素源としても使
われるリン酸アンモニウムを含む。最も通常使用される
塩類はlo−34−0と11−37−0のような液体ポ
リリン酸アンモニウムであシ、他の等級のものも使用さ
れる。近年リン酸モノアンモニウA(MAP)及びリン
酸ジアンモニウム(DAP)のようなオルトリン酸アン
モニウムが使用に供される機会が増えた。尿素/ポリリ
ン酸アンモニウム、28−28−0、のような特別な組
合せも使用される。カリウム源は主に塩化カリウムの不
純物を含む等級のものであるが、硫酸及び硝酸塩も使用
される。
今日まで市販使用されてきた唯一の懸濁液安定剤はクレ
ー〔アタパルジャイト (attapulgite )またはベントナイト〕で
あった。クレ、−はいくつかの欠点を有している:粘度
はしばしばUAN溶液によシ影響され、高度な剪断混合
が完全水利及びクレー粒子の膨潤に必要であり、深刻な
塵埃問題が大量に使用されるとしばしば生じる。クレー
はまたクレー表面に殺虫剤を吸着しある種の殺虫剤を不
活性化する。(guar) 、セルロース誘導体、キサ
ンタンガムのような通常の多糖及び濃化剤は通常高濃度
のポリリン酸またはオルトリン酸アンモニウムと両立し
がたい。
ー〔アタパルジャイト (attapulgite )またはベントナイト〕で
あった。クレ、−はいくつかの欠点を有している:粘度
はしばしばUAN溶液によシ影響され、高度な剪断混合
が完全水利及びクレー粒子の膨潤に必要であり、深刻な
塵埃問題が大量に使用されるとしばしば生じる。クレー
はまたクレー表面に殺虫剤を吸着しある種の殺虫剤を不
活性化する。(guar) 、セルロース誘導体、キサ
ンタンガムのような通常の多糖及び濃化剤は通常高濃度
のポリリン酸またはオルトリン酸アンモニウムと両立し
がたい。
多糖S−194は広範囲のリン酸アンモニウム塩と矛盾
を生ぜず、良好な懸濁液を製造する固有の流動学的性質
を有し、吸収により殺虫剤を不活性化することなく、使
用される量゛が少なくクレーに伴って起きた塵埃問題を
緩和する。
を生ぜず、良好な懸濁液を製造する固有の流動学的性質
を有し、吸収により殺虫剤を不活性化することなく、使
用される量゛が少なくクレーに伴って起きた塵埃問題を
緩和する。
懸濁液肥料におけるS−194の使用はまず利用できる
水または水/UAN組成物・で9S−19゛4溶液の製
造、次にリン酸アンモニウムの添加、塩化カリウムと続
くことを含む。
水または水/UAN組成物・で9S−19゛4溶液の製
造、次にリン酸アンモニウムの添加、塩化カリウムと続
くことを含む。
S−194はまた28−0−0または32−〇−0のよ
うな尿素/硝酸アンモニウム溶液に直接溶解する。ある
混合段階の製品の製造において、すでにクレーを含み、
窒素溶液で稀釈された基剤懸濁成金しばしば(uran
)溶液と混合する。これは塩を懸濁させるためのクレー
が不光分であることによる。S −194で粘度を付加
したUAN溶液の使用はクレー系における粘度損失をも
防ぐのに有効である。
うな尿素/硝酸アンモニウム溶液に直接溶解する。ある
混合段階の製品の製造において、すでにクレーを含み、
窒素溶液で稀釈された基剤懸濁成金しばしば(uran
)溶液と混合する。これは塩を懸濁させるためのクレー
が不光分であることによる。S −194で粘度を付加
したUAN溶液の使用はクレー系における粘度損失をも
防ぐのに有効である。
懸濁液肥料におけるS−194の使用m度は0.5−5
.0ボンド/トン、好適には1.0−30ボンド゛/ト
ン(0,05−0,15憾)である。粘性尿素/硝酸ア
ンモニウム溶液の製造においては、好適な範囲は重量あ
たり0.15壬かう0.54までであるが、重量あた。
.0ボンド/トン、好適には1.0−30ボンド゛/ト
ン(0,05−0,15憾)である。粘性尿素/硝酸ア
ンモニウム溶液の製造においては、好適な範囲は重量あ
たり0.15壬かう0.54までであるが、重量あた。
90.05憾から1.01 tでで使用することができ
る。
る。
S−194は低濃度での高粘度、低剪断率、優秀な剪断
安定性のため流動性(flowable)殺虫剤の懸濁
液において特に有効である。流動物(flowable
s )の製造時、よシ効果的な生成物でよ、多安定な懸
濁液を製造するため殺虫剤を小さ、な粒径に砕くするこ
とがよく行われ、工程中、ボールミル、サントミル、ア
トリター(attriters ) t?使用して粒子
に砕き高い剪断性を与える。濃化剤の剪断破壊を回避す
るために製粉工程の終わりに近い時点で濃化剤を加える
ことがよく行われる。S−194は剪断安定性があるの
で貴重な工程時間を減するため最初に加えてもよい。
安定性のため流動性(flowable)殺虫剤の懸濁
液において特に有効である。流動物(flowable
s )の製造時、よシ効果的な生成物でよ、多安定な懸
濁液を製造するため殺虫剤を小さ、な粒径に砕くするこ
とがよく行われ、工程中、ボールミル、サントミル、ア
トリター(attriters ) t?使用して粒子
に砕き高い剪断性を与える。濃化剤の剪断破壊を回避す
るために製粉工程の終わりに近い時点で濃化剤を加える
ことがよく行われる。S−194は剪断安定性があるの
で貴重な工程時間を減するため最初に加えてもよい。
本発明はさらに参考のため以下に実施例を挙げるが、例
を示すものであって限定を意図するものではない。
を示すものであって限定を意図するものではない。
実施例l
S−194の製造 ′□ ・
YM培地100d?含む最初の種菌フラスコに新しいN
A平板上の菌(アルカリゲネス30℃で24時間振盪培
養後、その1噛を新しいY’Mフラスコ数本に移植する
。同じ培養時間後、これらのフラスコ中から2本を下記
の培地3tf含む5を培養槽に接種したニゲルコース
3.0憾 に2HPO4o、g o優 ブロモソイ100 0.20係Mg5Oi
@7H200,01優 NH,No30.094 SAG471消泡剤 0.07優温度は3
0℃に保ち、1t/分の割合で通気した。攪拌は400
rpmで出発し、それ以後良好な混合を確保するため
増加させた。24時間後この種菌駒2.5tを下記の培
地20tを含む30を培養槽に接種したニ ゲルコース 3.0 係 に、HP o、 ・パ°・ 0.05憾ブロ
モソイ 100 0.20憾Mg5O,・7
H,OO,04優 NH4NO30,09憾 5AG471消泡剤 0.054温度を30
℃に保ち、培養中10t/分の割合で通気した。p)l
は251 KOH添加にょシ自動的に6.7以上に制御
した。攪拌は最初300 rpmに設定し良好な混合を
確保するため必要時に最大700 rpmまで増加させ
た。
A平板上の菌(アルカリゲネス30℃で24時間振盪培
養後、その1噛を新しいY’Mフラスコ数本に移植する
。同じ培養時間後、これらのフラスコ中から2本を下記
の培地3tf含む5を培養槽に接種したニゲルコース
3.0憾 に2HPO4o、g o優 ブロモソイ100 0.20係Mg5Oi
@7H200,01優 NH,No30.094 SAG471消泡剤 0.07優温度は3
0℃に保ち、1t/分の割合で通気した。攪拌は400
rpmで出発し、それ以後良好な混合を確保するため
増加させた。24時間後この種菌駒2.5tを下記の培
地20tを含む30を培養槽に接種したニ ゲルコース 3.0 係 に、HP o、 ・パ°・ 0.05憾ブロ
モソイ 100 0.20憾Mg5O,・7
H,OO,04優 NH4NO30,09憾 5AG471消泡剤 0.054温度を30
℃に保ち、培養中10t/分の割合で通気した。p)l
は251 KOH添加にょシ自動的に6.7以上に制御
した。攪拌は最初300 rpmに設定し良好な混合を
確保するため必要時に最大700 rpmまで増加させ
た。
この培養で得られた結果を以下に示す。
時 間 pH培養液粘度1 多糖収率 残糖分66時間
6.75 1200cP O,8441,048
9時間 7.44 2300cP 1.284
0.11* Brookfield VLF 、 5p
in Nα4.60rpm培養液を約75℃に10’−
15分加熱し室温まで冷却した。培養液に3倍量の99
係イソプロパツールを加えた。繊維性物質として沈澱し
た多糖を篩で回収した。強制通風トレイ乾燥機で55℃
、約45分乾燥後、繊維を粉にひき、B’D−9’47
としてヘテロ多糖S−194を同定した。
6.75 1200cP O,8441,048
9時間 7.44 2300cP 1.284
0.11* Brookfield VLF 、 5p
in Nα4.60rpm培養液を約75℃に10’−
15分加熱し室温まで冷却した。培養液に3倍量の99
係イソプロパツールを加えた。繊維性物質として沈澱し
た多糖を篩で回収した。強制通風トレイ乾燥機で55℃
、約45分乾燥後、繊維を粉にひき、B’D−9’47
としてヘテロ多糖S−194を同定した。
実施例2
S−194の分類
A、形態学的観察
1 コロニーの形態
肉汁寒天上に大変小さなコロニーが1日培養で出現し、
3日培養するとコロニーの直径は約1mに達した。コロ
ニーは黄色色素を産生(非拡散性)、円形、金縁、半レ
ンズ状、不透明で光沢を有していた。弾力のある構造は
観察されなかった。
3日培養するとコロニーの直径は約1mに達した。コロ
ニーは黄色色素を産生(非拡散性)、円形、金縁、半レ
ンズ状、不透明で光沢を有していた。弾力のある構造は
観察されなかった。
YM寒天上では小さなコロニーが1日で出現し、3日培
養するとその直径は1.5−2.0調に達した。コロニ
ーは黄色色素を産生(非拡散性)、円形、金縁、レンズ
状、不透明で光沢を有していた。コロニーの構造は大変
弾力性があシ、コロニーを白金線で押すとしばしばほぼ
コロニー全部が移動した。長期間培養していると同心円
が出現した。
養するとその直径は1.5−2.0調に達した。コロニ
ーは黄色色素を産生(非拡散性)、円形、金縁、レンズ
状、不透明で光沢を有していた。コロニーの構造は大変
弾力性があシ、コロニーを白金線で押すとしばしばほぼ
コロニー全部が移動した。長期間培養していると同心円
が出現した。
2、細胞の形態
菌はダラム陰性、桿菌で混合型鞭毛を有して運動性を有
す、即ち、細胞は単極性及び周鞭毛を有す。カプセル、
胞子及びポリ−β−ヒドロキシブチレート粒子(PHB
)の蓄積は認められなかった。抗酸性染色は陰性であっ
た。
す、即ち、細胞は単極性及び周鞭毛を有す。カプセル、
胞子及びポリ−β−ヒドロキシブチレート粒子(PHB
)の蓄積は認められなかった。抗酸性染色は陰性であっ
た。
肉汁寒天上、細胞の大きさは0.5−0.6 Xl、5
−2.0μm1細胞は直線状で先細型であった。
−2.0μm1細胞は直線状で先細型であった。
YM寒天上では、細胞は肉汁寒天上での大きさより大き
かった。細胞の大きさは0.5−〇、6 X 2.0−
4.0μmで、細胞の大半は直線状でよシ円い末端であ
った。ある種のものは曲線状であった。細胞は位相差顕
微鏡下大変屈折している濃いゼラチン状基質の中で柵状
の配列をしているのがよく観察された。ヴオルチン様物
質がしばしば見られた。
かった。細胞の大きさは0.5−〇、6 X 2.0−
4.0μmで、細胞の大半は直線状でよシ円い末端であ
った。ある種のものは曲線状であった。細胞は位相差顕
微鏡下大変屈折している濃いゼラチン状基質の中で柵状
の配列をしているのがよく観察された。ヴオルチン様物
質がしばしば見られた。
3、液体培養での生育
菌の生育は表面のみに限定されていた。肉汁及びYM液
体培地での試験管培養では共に厚膜状菌膜が形成された
二YM培地では特に厚い菌膜が観察された。
体培地での試験管培養では共に厚膜状菌膜が形成された
二YM培地では特に厚い菌膜が観察された。
B、生理学的及び生化学的試験
以下は使用した生理学的及び生化学試験の結果の総括で
あシ、表2−1に試験結果を挙げる。チトクロームオキ
シタ゛−ゼ及びカタラーゼは共に陽性であった。微生物
はグルコースを酸化的に利用し、発酵性はなかった。嫌
気的生育は観察されなかった。微生物は4から37℃の
間の温度で生育可能で、40℃ではできなかった。60
℃30分の培養後には残存菌は観察されなかつ、た。耐
Naαの最大濃度は1.54であった。微生物はptl
6及び8のいずれでも生育し、4及び10においては
生育しなかった。
あシ、表2−1に試験結果を挙げる。チトクロームオキ
シタ゛−ゼ及びカタラーゼは共に陽性であった。微生物
はグルコースを酸化的に利用し、発酵性はなかった。嫌
気的生育は観察されなかった。微生物は4から37℃の
間の温度で生育可能で、40℃ではできなかった。60
℃30分の培養後には残存菌は観察されなかつ、た。耐
Naαの最大濃度は1.54であった。微生物はptl
6及び8のいずれでも生育し、4及び10においては
生育しなかった。
TSIS大寒では、生育は斜面上に観察され、酸及びア
ルカリ反応いずれも観察されず、穿刺部での生育は認め
られなかった。はとんどすべての標準的微生物学的試゛
験は陰性であった。硝酸塩及び亜硝酸塩は還元されなか
った。リドマスミルクでは、変化は観察されなかった。
ルカリ反応いずれも観察されず、穿刺部での生育は認め
られなかった。はとんどすべての標準的微生物学的試゛
験は陰性であった。硝酸塩及び亜硝酸塩は還元されなか
った。リドマスミルクでは、変化は観察されなかった。
微生物は、澱粉、ゼラチン(弱い)、エスクリン(es
culin )、Tween 80は加水分解するが、
カゼイン及びペクチンは水解しない。
culin )、Tween 80は加水分解するが、
カゼイン及びペクチンは水解しない。
微生物はL−7ラビノース、フルクトース、ガラクトー
ス、D−グルコース、ラクトース、マルトース、マンノ
ース、メリビオース、砂糖から酸化的に酸を生成した。
ス、D−グルコース、ラクトース、マルトース、マンノ
ース、メリビオース、砂糖から酸化的に酸を生成した。
微生物は0.02及び0.14のトリフェニルテトラゾ
リウムクロリドに対し耐性であった。
リウムクロリドに対し耐性であった。
C0i 栄養試験
全部で129基質について試験を行い、その中から以下
の23基質が微生物の炭素源及びエネルギーとして利用
された。
の23基質が微生物の炭素源及びエネルギーとして利用
された。
D−キシロース サリシン
し−アラビノース コハク酸
り−グルコース フマール酸
D−マンノース L−リンゴ酸り−ガラクトー
ス DL−乳酸 D−フルクトース ピルビン酸 砂m p−ヒドロキシ安息香酸
トレハロース L−α−アラニン マルトース DL−インロイシン セ°ロビオース L−グルタミン酸 ラクトース L−チロシン イヌリン 微生物は脂肪識、アルコール、ポリアルコール類は利用
できなかった。
ス DL−乳酸 D−フルクトース ピルビン酸 砂m p−ヒドロキシ安息香酸
トレハロース L−α−アラニン マルトース DL−インロイシン セ°ロビオース L−グルタミン酸 ラクトース L−チロシン イヌリン 微生物は脂肪識、アルコール、ポリアルコール類は利用
できなかった。
D、抗生物質感受性試験 ′
微生物はカルベニシリン、100A、9;クロルテトラ
サイクリン、5μI;エクスロマイシン、15μg;ゲ
ンタミシン、10μI:カナマイシン、30μgに対し
感受性があった。微生物は以下の抗生物質に対しても感
受性を有していたが、抵抗性コロニーが出現した。それ
らはコリスチン、10μI;ノボビオシン、30μg:
ボリミキシンB、300単位:テトラサイクリン、30
μgであった。微生物はペニシリン、10単位;ストレ
プトマイシン、10μIに対し抵抗性であった。
サイクリン、5μI;エクスロマイシン、15μg;ゲ
ンタミシン、10μI:カナマイシン、30μgに対し
感受性があった。微生物は以下の抗生物質に対しても感
受性を有していたが、抵抗性コロニーが出現した。それ
らはコリスチン、10μI;ノボビオシン、30μg:
ボリミキシンB、300単位:テトラサイクリン、30
μgであった。微生物はペニシリン、10単位;ストレ
プトマイシン、10μIに対し抵抗性であった。
E、同定
S−194菌はダラム陰性桿菌で、混合型鞭毛で運動性
を有しているが、細胞の大部分は単極毛の鞭毛であった
。
を有しているが、細胞の大部分は単極毛の鞭毛であった
。
微生物は絶対好気性で、そのチトクロームオキシダーガ
試験は陽性であった。Bergey’sManual
of Determirative Bacterio
logy 。
試験は陽性であった。Bergey’sManual
of Determirative Bacterio
logy 。
Buchanan and Gibbons編、Wil
liams 4Wilkins Company 、ボ
ルチモア、第8版(1974年)によれば、該微生物は
アルカリ土類金属の一員に属しており、現在この属はそ
の帰属が判然としていない。この観点から、該微生物が
アルカリ土類金属の一員であると結論することが適正で
ある。
liams 4Wilkins Company 、ボ
ルチモア、第8版(1974年)によれば、該微生物は
アルカリ土類金属の一員に属しており、現在この属はそ
の帰属が判然としていない。この観点から、該微生物が
アルカリ土類金属の一員であると結論することが適正で
ある。
S−194
試 験 結 果チトクローム
オキシダーゼ 十カタラーゼ
+嫌気性生育
一種々の炭水化物からの酸の生成 アドニトール −L−7ラビノ
ース +ダルシトール
−エタノール
−フルクトース
+ガラクトース +D−グ
ルコース +イノシトール
−表 2−1 菌の生理学的及び生化学試験の結果 状 験 結 果各fiNaα
濃度での生育 0.54(W/V) +1.5憾
十3.0係
−6,04− 7,5係 −
10,0係 一種々のp
Hにおける生育 pH4− pH6+ ph・8 +pHlo
−pH12− インドール試験 −メチルレッ
ド(MR)試験 −試 験
結 果 イヌリン − ラクトース + マルトース + マンニトール − マンノース + メリビオース + α−メチルグルコシド − ラフイノース − ラムノース − サリシン − ソルビトール − 砂糖 十 トレハロース −D−キシロース
− 続き) 試 験 結 果
フオゲスープロスカウエル(VP)試験
−シモンズ クエン酸試験
−硝―塩還元
−亜硝酸塩還元
−リドマスミルク
変化なしアルキニンジヒドロラーゼ(ADH)試験
−リジンデカルボキシラーゼ(L’DC)
試験 −オルニチンデカルボキシラーゼ(o
pc)試験 −ペプトンからのアンモニア生成
−フェニルアラニンデアミナーゼ
(PAD)試販 −H2S生成
士ウレアーゼ試験
−ホスファターゼ試験
−卵黄試験
−表 2 (わ 試 験 結 果TSI寒天
上の生育: 斜 面 変化なし穿 刺
生育せずガス生成
−H2生成
一種々の温度における生育: 4℃ +30″0
+37°C+ 40℃ −43℃
−45°C− 50℃ −60℃、30
分における残存菌 −ニー1 しき−) 試 験 結
果澱粉加水分解能
十ゼラチン加水分解能
+/±カゼイン加水分解能
−エスクリン(Escul in)加水分解能
十Tween80 加水分解能
十ペクチン加水分解能
−3−ケトラクトースの生成
−フンゴーレッドの吸収
−トリフェニルテトラゾリ
ウムクロリドに対する生育二〇・02憾
や0.104
+実施例3 ’[JAN32懸濁液肥料組成物 S−1940,25係含有の粘性なUAN32溶液は下
記の組成を用いて製造した:S−194
0.25係水 22
.75尿素 36.0硝酸アン
モニウム 41.0 肥料は粘性なUAN32溶液に単にリン酸ニアンモニウ
ム及び塩化カリウムの乾燥粉末を加えることにより製造
した。
オキシダーゼ 十カタラーゼ
+嫌気性生育
一種々の炭水化物からの酸の生成 アドニトール −L−7ラビノ
ース +ダルシトール
−エタノール
−フルクトース
+ガラクトース +D−グ
ルコース +イノシトール
−表 2−1 菌の生理学的及び生化学試験の結果 状 験 結 果各fiNaα
濃度での生育 0.54(W/V) +1.5憾
十3.0係
−6,04− 7,5係 −
10,0係 一種々のp
Hにおける生育 pH4− pH6+ ph・8 +pHlo
−pH12− インドール試験 −メチルレッ
ド(MR)試験 −試 験
結 果 イヌリン − ラクトース + マルトース + マンニトール − マンノース + メリビオース + α−メチルグルコシド − ラフイノース − ラムノース − サリシン − ソルビトール − 砂糖 十 トレハロース −D−キシロース
− 続き) 試 験 結 果
フオゲスープロスカウエル(VP)試験
−シモンズ クエン酸試験
−硝―塩還元
−亜硝酸塩還元
−リドマスミルク
変化なしアルキニンジヒドロラーゼ(ADH)試験
−リジンデカルボキシラーゼ(L’DC)
試験 −オルニチンデカルボキシラーゼ(o
pc)試験 −ペプトンからのアンモニア生成
−フェニルアラニンデアミナーゼ
(PAD)試販 −H2S生成
士ウレアーゼ試験
−ホスファターゼ試験
−卵黄試験
−表 2 (わ 試 験 結 果TSI寒天
上の生育: 斜 面 変化なし穿 刺
生育せずガス生成
−H2生成
一種々の温度における生育: 4℃ +30″0
+37°C+ 40℃ −43℃
−45°C− 50℃ −60℃、30
分における残存菌 −ニー1 しき−) 試 験 結
果澱粉加水分解能
十ゼラチン加水分解能
+/±カゼイン加水分解能
−エスクリン(Escul in)加水分解能
十Tween80 加水分解能
十ペクチン加水分解能
−3−ケトラクトースの生成
−フンゴーレッドの吸収
−トリフェニルテトラゾリ
ウムクロリドに対する生育二〇・02憾
や0.104
+実施例3 ’[JAN32懸濁液肥料組成物 S−1940,25係含有の粘性なUAN32溶液は下
記の組成を用いて製造した:S−194
0.25係水 22
.75尿素 36.0硝酸アン
モニウム 41.0 肥料は粘性なUAN32溶液に単にリン酸ニアンモニウ
ム及び塩化カリウムの乾燥粉末を加えることにより製造
した。
N−P−に分析
15−10−10 14−0−28 18−6−12粘
性UAN32 34.65優 43.75憾
48.9優水 27.5
11.1 18.7リン酸ニアンモニウム
21.75 − 13.05塩化カ
リウム 16.1 45.15 1
9.358−194 0.15係含有の粘性なUAN3
2溶液は以下の組成を用いて製造した:S−194
0.15幅水
22.85尿素 3
6.0 硝酸アンモニウム 41.0 肥料は粘性なUAN32溶液に単に1〇−34−0ポリ
リン酸及び塩化カリウムを混合して製造した。
性UAN32 34.65優 43.75憾
48.9優水 27.5
11.1 18.7リン酸ニアンモニウム
21.75 − 13.05塩化カ
リウム 16.1 45.15 1
9.358−194 0.15係含有の粘性なUAN3
2溶液は以下の組成を用いて製造した:S−194
0.15幅水
22.85尿素 3
6.0 硝酸アンモニウム 41.0 肥料は粘性なUAN32溶液に単に1〇−34−0ポリ
リン酸及び塩化カリウムを混合して製造した。
N−P−に分析
成 分 10−5−30 10−10−20
12−8−24粘性UAN32 30.5係
25.2係 34.54水
6.4 13.1 3.2P A
P 14.7 29.4 23.6
にα 48.4 32.3 38.7
15−10−15 18−9−9 43.1憾 54.9憾 3.3 4.1 29.4 26.5 24.2 14.5 懸濁液はすべての組成物において光分良好であり、市販
装置による空中散布により改善される。
12−8−24粘性UAN32 30.5係
25.2係 34.54水
6.4 13.1 3.2P A
P 14.7 29.4 23.6
にα 48.4 32.3 38.7
15−10−15 18−9−9 43.1憾 54.9憾 3.3 4.1 29.4 26.5 24.2 14.5 懸濁液はすべての組成物において光分良好であり、市販
装置による空中散布により改善される。
実施例4゜
ポリリン酸アンモニウム、10−34−0゜組成物
懸濁液はまず利用できる水にS−194を溶解し、UA
N溶液を添加、次に10−34−〇を加えて製造された
。最後ににαを加えた。
N溶液を添加、次に10−34−〇を加えて製造された
。最後ににαを加えた。
N−P−に分析
成 分 10−5−30 10−10−20
12−6−248−194 0.1優
0.1係 0.1嗟水 6.3
13.0 6.9UAN28
30.5 25.2 36.610−3
4−0 14.7 29.5 17.7
にα 48.4 32.3 3
8.7成分 12−12−1215−15−102O−
4−8S−1940,110,15係 0.1
54水 14.9 11.15
7.85UAN28 30.3
43,1 63.310−34−
0 35.3 29.4 1
1.8にα 19.4 1
6,2 12.9上記組成物はすべて良好
な懸濁液となった実施例5 28−28−0組成物 懸濁液はまず利用できる水にS−194t−溶解し、U
AN溶液を添加、次に28−28−〇を加えて製造され
た。最後ににαを加えた。
12−6−248−194 0.1優
0.1係 0.1嗟水 6.3
13.0 6.9UAN28
30.5 25.2 36.610−3
4−0 14.7 29.5 17.7
にα 48.4 32.3 3
8.7成分 12−12−1215−15−102O−
4−8S−1940,110,15係 0.1
54水 14.9 11.15
7.85UAN28 30.3
43,1 63.310−34−
0 35.3 29.4 1
1.8にα 19.4 1
6,2 12.9上記組成物はすべて良好
な懸濁液となった実施例5 28−28−0組成物 懸濁液はまず利用できる水にS−194t−溶解し、U
AN溶液を添加、次に28−28−〇を加えて製造され
た。最後ににαを加えた。
N−P−に分析
成分 15−13−1310−10−1015−10
−15”S−1940,1憾 0.11 0
.1憾水 23.8
42.1 22.128−28−0
46.4 58.6 35.7NH40H(
28憾NH3) 8.7 4.3
−−にα 21.0 0
24.2成分 10−10−10’ 15−15
−15”S−1940,110,1優 水 32.0 2
2.028−28−0 35.7
53.6NH4a−+(2s優1H3)−−−一
にα 32.2
24.3”p)IFi濃NH4OHで6.5とした。
−15”S−1940,1憾 0.11 0
.1憾水 23.8
42.1 22.128−28−0
46.4 58.6 35.7NH40H(
28憾NH3) 8.7 4.3
−−にα 21.0 0
24.2成分 10−10−10’ 15−15
−15”S−1940,110,1優 水 32.0 2
2.028−28−0 35.7
53.6NH4a−+(2s優1H3)−−−一
にα 32.2
24.3”p)IFi濃NH4OHで6.5とした。
上記すべての組成物は良好な懸濁液となった。
実施例6
流動性(flowable )殺虫剤
S−194の剪断安定性を証明するために、ガラスピー
ズを摩砕手段として用い高剪断が特に破壊的であるダイ
ノミル型(Dyne−Mil 1Type )KDL−
Pilot (Chicago Boiler Co、
)で0.254溶液を破砕した。S−194の4試料の
粘度を流動剤における濃化剤として最も普通に使用され
ているキサンタムガムと比較する。
ズを摩砕手段として用い高剪断が特に破壊的であるダイ
ノミル型(Dyne−Mil 1Type )KDL−
Pilot (Chicago Boiler Co、
)で0.254溶液を破砕した。S−194の4試料の
粘度を流動剤における濃化剤として最も普通に使用され
ているキサンタムガムと比較する。
多糖の剪断安定剤
ダイノミル摩砕
試 料 初期粘度* 5分 1o分(
1)キサンタンガム 1300 800
550(2)S−194(1) 950 1
160 1050(3)S−194(2)
1450 3720 3920(4)S−194(
3) 750 2850 3150(5)
S−194(4) 1200 1750
1750*ブルツクフイ一ルドLVT粘度計、スピン
ドルNa2.3 、rpm 流動性(flowable)硫黄組成物もまた以下の組
成に従って製造し、懸濁液の剪断安定性を証明するため
に5分ダイノミル(Dyno −Mill)で破砕した
。低剪断率の粘度を濃化剤として同濃度のキサンタンガ
ムと比較した。
1)キサンタンガム 1300 800
550(2)S−194(1) 950 1
160 1050(3)S−194(2)
1450 3720 3920(4)S−194(
3) 750 2850 3150(5)
S−194(4) 1200 1750
1750*ブルツクフイ一ルドLVT粘度計、スピン
ドルNa2.3 、rpm 流動性(flowable)硫黄組成物もまた以下の組
成に従って製造し、懸濁液の剪断安定性を証明するため
に5分ダイノミル(Dyno −Mill)で破砕した
。低剪断率の粘度を濃化剤として同濃度のキサンタンガ
ムと比較した。
硫黄流動剤(Flowable)
硫黄、工業用(technical)
52.01Morwat BRl、5 (n−ブチルナフタレンスルホン酸ナトリウム、Pe
t roe、hemicals Co5y Inc、
)Morwet D −425R2,0 (ナツタじンホルムアルデヒドナトリウム濃縮物)エチ
レングリコール 5.
OIgepal Co−630R1,0 (ノニルフェノキシポリ(エチレンオキシ)エタノール
。
52.01Morwat BRl、5 (n−ブチルナフタレンスルホン酸ナトリウム、Pe
t roe、hemicals Co5y Inc、
)Morwet D −425R2,0 (ナツタじンホルムアルデヒドナトリウム濃縮物)エチ
レングリコール 5.
OIgepal Co−630R1,0 (ノニルフェノキシポリ(エチレンオキシ)エタノール
。
G A F Oorp 、)
Dow Corning Antifoam A
O,2濃化剤
0・16水
38.14界面
活性剤、分散剤、グリコール、消泡剤を水に分散させ、
次に硫黄粉末、濃化剤を分散させた。懸濁液は5分間ダ
イノミA (])yn。
O,2濃化剤
0・16水
38.14界面
活性剤、分散剤、グリコール、消泡剤を水に分散させ、
次に硫黄粉末、濃化剤を分散させた。懸濁液は5分間ダ
イノミA (])yn。
−Mill)で摩砕した。粘度はブルックフィールドL
VT、スピンドル?4IIL3.3 rpm¥1−用い
て剪断の前後に測定した。
VT、スピンドル?4IIL3.3 rpm¥1−用い
て剪断の前後に測定した。
表6−2
殺虫剤組成物の安定性
濃化剤 摩砕前 摩砕後キサンタン
カム 4100cP 2400cPS−1
?4 2800cP 3400cP上
記で製造した懸濁液は室温及び50℃で3ケ月間良好な
流動性と安定性を有していた。
カム 4100cP 2400cPS−1
?4 2800cP 3400cP上
記で製造した懸濁液は室温及び50℃で3ケ月間良好な
流動性と安定性を有していた。
実施例7
粘度の相乗性
(guar’)、 HP−guar、 HEO,S −
194の0.5係溶液を製造した。これらの溶液の1:
l混合物もまた製造した。粘度を決定し結果をグラフに
作図、これから予想粘度を求めた。予想と観測粘度の比
較はS −194が3つすべての多糖と相乗作用がある
ことを示している。
194の0.5係溶液を製造した。これらの溶液の1:
l混合物もまた製造した。粘度を決定し結果をグラフに
作図、これから予想粘度を求めた。予想と観測粘度の比
較はS −194が3つすべての多糖と相乗作用がある
ことを示している。
0.5壬S−194337
0,54ガール(Guar)
112S−194/ガール(Guar)(50150)
395 1900.5%HP−ガJル(Gu
ar) 295(Jaquar H
P−80) S−194/HP−ガール(Guar)
520 310(50150) Q、54HEO[セロサイズ(C!ellosize)
110QP−15M] S−194/HBO(50150) 40
7 190出願人 : メルク エンド カムパ
ニーイン二一ボレ一テツド
112S−194/ガール(Guar)(50150)
395 1900.5%HP−ガJル(Gu
ar) 295(Jaquar H
P−80) S−194/HP−ガール(Guar)
520 310(50150) Q、54HEO[セロサイズ(C!ellosize)
110QP−15M] S−194/HBO(50150) 40
7 190出願人 : メルク エンド カムパ
ニーイン二一ボレ一テツド
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1、 アル々リゲネス属(Alcaligenea )
微生、物、ATOC!31961の生物学的純粋な培養
物。 2、 フルカリゲネス属(Alcaligenes )
if’生物ATCO31961含有培養物が同化炭素
源の液中通気培養によシヘテロ多糖S−194を回収で
きる量で生産することのできる当該做生物含有培養物。 3、微生物ATOC31961を同化炭素源含有水性栄
養培地上での液中通気培養により生育させることを特徴
とする、ヘテロ多糖S−194を回収するととからなる
ヘテロ多糖S−194製造法。 4、 同化炭素が炭水化物である特許請求の範囲第3項
記載の方法。 5、炭水化物がグルコース24−5%である特許請求の
範囲第3項記載の方法。 6 栄養培地がグJL :I−23,04、K2 HP
040、 O−54、大豆粉の酵素消化物0.2優、
NH4NO30,09%、MgS’04 ” 7 H2
00,01係からなり pH範囲が6.5から7.0で
あり、培地温度が30℃である特許請求の範囲第3項記
載の方法。 7、 栄養培地が実質上Oa+を含まない特許請求の範
囲第3項記載の方法。 8.0−アセチル基約104、グルクロン酸約9憾、蛋
白質約10係からなり、中性糖グルコースとラムノース
のモル比がおよそ4:1であり、主として炭水化物であ
るヘテロ多糖S−194゜ 9、微生物ATOO31961菌を同化炭素源含有水性
栄養培地上での液中通気培養によシ生育させ、該へテロ
多糖を回収するこ−とからなる方法によシ製造される特
許請求の範囲第8項記載のへテロ多糖。 10、実質上Ca イオンを含まない培養培地上で製造
される特許請求の範囲第8項記載のへテロ多糖。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US313440 | 1981-10-21 | ||
US06/313,440 US4401760A (en) | 1981-10-21 | 1981-10-21 | Heteropolysaccharide S-194 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS5878597A true JPS5878597A (ja) | 1983-05-12 |
JPH0428722B2 JPH0428722B2 (ja) | 1992-05-15 |
Family
ID=23215699
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP57183815A Granted JPS5878597A (ja) | 1981-10-21 | 1982-10-21 | ヘテロ多糖s−194 |
Country Status (8)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4401760A (ja) |
EP (1) | EP0077680B1 (ja) |
JP (1) | JPS5878597A (ja) |
AU (1) | AU551405B2 (ja) |
CA (1) | CA1185909A (ja) |
DE (1) | DE3273806D1 (ja) |
FI (1) | FI73238C (ja) |
HK (1) | HK38890A (ja) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS6434926A (en) * | 1987-07-20 | 1989-02-06 | Merck Sharp & Dohme | Local drug and/or cosmetic composition containing ramsan rubber |
JPH02111703A (ja) * | 1988-10-19 | 1990-04-24 | Dai Ichi Kogyo Seiyaku Co Ltd | 懸濁状農薬製剤 |
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US4592760A (en) * | 1985-01-22 | 1986-06-03 | Merck & Co., Inc. | Coal slurry |
US5166335A (en) * | 1985-06-28 | 1992-11-24 | Merck & Co., Inc. | Heteropolysaccharide S-184 |
US5175278A (en) * | 1985-06-28 | 1992-12-29 | Merck & Co., Inc. | Heteropolysaccharide S-657 |
IL79165A0 (en) * | 1985-06-28 | 1986-09-30 | Merck & Co Inc | Heteropolysaccharide s-657 and its preparation |
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NL1009379C2 (nl) * | 1998-06-11 | 1999-12-15 | Cooperatie Cosun U A | Dispergeermiddel. |
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CN103146571B (zh) * | 2013-04-01 | 2014-08-27 | 南京工业大学 | 一种发酵生产鼠李糖胶的柱式固定化反应器及其工艺 |
CN103194382A (zh) * | 2013-04-01 | 2013-07-10 | 南京工业大学 | 一种搅拌式与气升式联用生物反应器及其在鼠李糖胶制备中的应用 |
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DE2351520C2 (de) * | 1972-10-16 | 1982-10-21 | Takeda Chemical Industries, Ltd., Osaka | Verfahren zur Konzentrierung von Suspensionen von thermisch gelierbaren Polysacchariden |
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1981
- 1981-10-21 US US06/313,440 patent/US4401760A/en not_active Expired - Lifetime
-
1982
- 1982-10-12 CA CA000413231A patent/CA1185909A/en not_active Expired
- 1982-10-14 FI FI823510A patent/FI73238C/fi not_active IP Right Cessation
- 1982-10-18 DE DE8282305533T patent/DE3273806D1/de not_active Expired
- 1982-10-18 EP EP82305533A patent/EP0077680B1/en not_active Expired
- 1982-10-18 AU AU89448/82A patent/AU551405B2/en not_active Expired
- 1982-10-21 JP JP57183815A patent/JPS5878597A/ja active Granted
-
1990
- 1990-05-17 HK HK388/90A patent/HK38890A/xx not_active IP Right Cessation
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Also Published As
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FI823510L (fi) | 1983-04-22 |
US4401760A (en) | 1983-08-30 |
DE3273806D1 (en) | 1986-11-20 |
HK38890A (en) | 1990-05-25 |
EP0077680A2 (en) | 1983-04-27 |
JPH0428722B2 (ja) | 1992-05-15 |
CA1185909A (en) | 1985-04-23 |
AU551405B2 (en) | 1986-05-01 |
FI823510A0 (fi) | 1982-10-14 |
FI73238B (fi) | 1987-05-29 |
EP0077680A3 (en) | 1983-06-29 |
FI73238C (fi) | 1987-09-10 |
EP0077680B1 (en) | 1986-10-15 |
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