JPS585673B2 - 過酸化活性物質検出用試験組成物 - Google Patents
過酸化活性物質検出用試験組成物Info
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- JPS585673B2 JPS585673B2 JP55173921A JP17392180A JPS585673B2 JP S585673 B2 JPS585673 B2 JP S585673B2 JP 55173921 A JP55173921 A JP 55173921A JP 17392180 A JP17392180 A JP 17392180A JP S585673 B2 JPS585673 B2 JP S585673B2
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- Japan
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- test
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- peroxide active
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- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/72—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood pigments, e.g. haemoglobin, bilirubin or other porphyrins; involving occult blood
- G01N33/721—Haemoglobin
- G01N33/725—Haemoglobin using peroxidative activity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
- C12Q1/28—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase involving peroxidase
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- Y10S436/904—Oxidation - reduction indicators
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- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、一般には、診断試験の分野に関し、さらに詳
しくは、過酸化活性物質の定性的及び定量的測定に有用
な試験に関する。
しくは、過酸化活性物質の定性的及び定量的測定に有用
な試験に関する。
体液及び体分泌物中の少量の過酸化活性物質、例えば、
潜血、ヘモグロビン、ミオグロビン、白血球、バクテリ
アもしくは他の過酸化活性を有する分析対象物質等の検
出は、長い間、医療実務家にとって、多《の病態の診断
において非常に貴重な手段であると考えられてきた。
潜血、ヘモグロビン、ミオグロビン、白血球、バクテリ
アもしくは他の過酸化活性を有する分析対象物質等の検
出は、長い間、医療実務家にとって、多《の病態の診断
において非常に貴重な手段であると考えられてきた。
潜在する過酸化活性物質を検知するための方法、組成物
及び用具としては文献上各種のものが知ら？ている。
及び用具としては文献上各種のものが知ら？ている。
例えば、米国特許第２２９０４３６号（カムレット）、
同第２７９９６６０号（ニコルス及びフオナー）、同第
２８３８３７７号（フオナー）並びに同第３０１２９７
６号、同第３０９２４６３号及び同第３０９２４６４号
（アダムス及びピーターソン）一これらは全て本願譲受
人に譲渡されたものであるーには、潜血液の簡単で信頼
性のある数種の試験組成物が開示されている。
同第２７９９６６０号（ニコルス及びフオナー）、同第
２８３８３７７号（フオナー）並びに同第３０１２９７
６号、同第３０９２４６３号及び同第３０９２４６４号
（アダムス及びピーターソン）一これらは全て本願譲受
人に譲渡されたものであるーには、潜血液の簡単で信頼
性のある数種の試験組成物が開示されている。
これらの試験組成物は、血液中に存在する補欠分子族の
過酸化活性又は触媒活性に基いている。
過酸化活性又は触媒活性に基いている。
更に又、シュワルツ”Ｚｅｉｔｓｃｈｒｉｆｔ ｆｕｒ
ｇｅｒｉｃｈｔｌｉｃｈ Ｍｅｄｉｚｉｎ”（法医学
会誌）１２巻、１９２８年参照。
ｇｅｒｉｃｈｔｌｉｃｈ Ｍｅｄｉｚｉｎ”（法医学
会誌）１２巻、１９２８年参照。
米国特許第３２９０１１７号において、アダムス等によ
り、これらの潜血試験組成物の感度がキノリン又はキニ
ンのような或る種のキノリン誘導体の添加によって著し
く改良され、高められることが確認されている。
り、これらの潜血試験組成物の感度がキノリン又はキニ
ンのような或る種のキノリン誘導体の添加によって著し
く改良され、高められることが確認されている。
従来の潜血試験組成物にこれらのキノリン誘導体を添加
することにより、血液を１００万倍に稀釈した濃度に相
当する５〜５０赤血球（ＲＢＣ）／μｌを検出すること
が可能となる。
することにより、血液を１００万倍に稀釈した濃度に相
当する５〜５０赤血球（ＲＢＣ）／μｌを検出すること
が可能となる。
米国特許第３９８６８３３号には、マスト等によりキノ
リンの酸付加塩又はアダクト及びその誘導体を強化試薬
として用いることが開示されている。
リンの酸付加塩又はアダクト及びその誘導体を強化試薬
として用いることが開示されている。
更に別法として、米国特許第３８５３４７２号にはキノ
リンの縮合多環式誘導体、例えばペンゾキノリン類及び
ピリドキノリン類等を同様な感？を有する強化剤もしく
は活性化剤として用いることが開示されている。
リンの縮合多環式誘導体、例えばペンゾキノリン類及び
ピリドキノリン類等を同様な感？を有する強化剤もしく
は活性化剤として用いることが開示されている。
又、米国特許第３９７５１６１号には、スボボダ等によ
り、イソキノリンを増感剤として用いることが開示され
ている。
り、イソキノリンを増感剤として用いることが開示され
ている。
キノリン族化合物以外の化合物にも同様に有効なものが
知られている。
知られている。
米国特許第３９１７４５２号において、リッタースドル
フ等は、ビニルピリジン化合物を増感剤として用いてい
る。
フ等は、ビニルピリジン化合物を増感剤として用いてい
る。
又、米国特許第４０６３８９４号において、小川等は置
換チアゾール化合物をこの目的に用いている。
換チアゾール化合物をこの目的に用いている。
本発明によれば、過酸化活性物質を検出するための試験
組成物並びにそれを使用した試験具及び試験方法が提供
される。
組成物並びにそれを使用した試験具及び試験方法が提供
される。
本発明の試験組成物は、過酸化活性物質の存在下に酸化
されて色変化を起こすことのできる指示薬、該指示薬を
酸化する酸化剤及び増感剤を含んでなる。
されて色変化を起こすことのできる指示薬、該指示薬を
酸化する酸化剤及び増感剤を含んでなる。
本発明において用いられる増感剤は、４−アザフルオレ
ンである。
ンである。
以下の説明において、判りやすくするために特殊の用語
が用いられるが、これらは具体的説明のために選ばれた
実施態様を説明するためのものであるにすぎず、何等、
本発明を限定するものではない。
が用いられるが、これらは具体的説明のために選ばれた
実施態様を説明するためのものであるにすぎず、何等、
本発明を限定するものではない。
前記増感剤を包含させることによって改良された本発明
の試験組成物には、更に、指示薬及び酸化剤が含まれて
おり、錠剤の形状で調製されるか或は吸着体のような担
体に含有せしめることができる。
の試験組成物には、更に、指示薬及び酸化剤が含まれて
おり、錠剤の形状で調製されるか或は吸着体のような担
体に含有せしめることができる。
指示薬は、過酸化活性物質の存在下に酸化されて色変化
を起こすことのできるものであればよく、公知の各種試
薬が挙げられる。
を起こすことのできるものであればよく、公知の各種試
薬が挙げられる。
例えば、３３′・５・５′−テトラメチルベンジジン、
０−｝リジン、ｏ一トルイジン、ｐ−｝リイジン、０−
フエニレンジアミン、Ｎ−Ｎ′−シメチル−ｐ−７エニ
レンシアミン、Ｎ−Ｎ’−ジエチルーｐ−フエニレンジ
アミン、ベンジジン、ｐ−アニシジン、ジアニシジン、
０−クレゾール、ｍ−クレゾール、ｐ−クレゾール、α
−ナフトール、β−ナフトール、カテコール、クアヤコ
ール、ヒロガロール、又は異項環アジン系化合物、例え
ば、ビス−（Ｎ−エチルーキノールー２−オン）一アジ
ン又は（Ｎ−メチルベンゾチアソール−２−オン）一（
１−エチル−３−フエニルー５−メストリアゾールー２
−オン）一アジン等がある。
０−｝リジン、ｏ一トルイジン、ｐ−｝リイジン、０−
フエニレンジアミン、Ｎ−Ｎ′−シメチル−ｐ−７エニ
レンシアミン、Ｎ−Ｎ’−ジエチルーｐ−フエニレンジ
アミン、ベンジジン、ｐ−アニシジン、ジアニシジン、
０−クレゾール、ｍ−クレゾール、ｐ−クレゾール、α
−ナフトール、β−ナフトール、カテコール、クアヤコ
ール、ヒロガロール、又は異項環アジン系化合物、例え
ば、ビス−（Ｎ−エチルーキノールー２−オン）一アジ
ン又は（Ｎ−メチルベンゾチアソール−２−オン）一（
１−エチル−３−フエニルー５−メストリアゾールー２
−オン）一アジン等がある。
酸化剤の具体例としては、クメンヒドロパーオキシド、
ジイソプロビルベンゼンヒドロパーオキシト、ハラメン
タンヒドロパーオキシド、２・５−ジメチルヘキサン−
２・５−ジヒドロパーオキシド及び指示薬を有効に酸化
することのできる公知の酸化剤を挙げることができる。
ジイソプロビルベンゼンヒドロパーオキシト、ハラメン
タンヒドロパーオキシド、２・５−ジメチルヘキサン−
２・５−ジヒドロパーオキシド及び指示薬を有効に酸化
することのできる公知の酸化剤を挙げることができる。
好ましい実施態様において、本発明の改良された試験組
成物は担体に担持又は包含され、浸漬読取り試験具とし
て利用される。
成物は担体に担持又は包含され、浸漬読取り試験具とし
て利用される。
この試験具は公知の各種方法により製造することができ
、例えば吸収性担体材料を試験組成物の溶液に浸漬した
後、浸漬マトリックスを乾燥することによって、マトリ
ックスに密着させて各成分が微細に分散されて緊密に混
合したものを含有せしめることができる。
、例えば吸収性担体材料を試験組成物の溶液に浸漬した
後、浸漬マトリックスを乾燥することによって、マトリ
ックスに密着させて各成分が微細に分散されて緊密に混
合したものを含有せしめることができる。
浸漬溶液中の増感剤の濃度範囲は通常約０．０ ５ Ｐ
／１００ｍｌ〜約１．０２／１００ｍ１好ましくは約０
．１？／１００ｍｌ〜約０．５？／１００ｍｌである。
／１００ｍｌ〜約１．０２／１００ｍ１好ましくは約０
．１？／１００ｍｌ〜約０．５？／１００ｍｌである。
担体という用語は被験生理溶液その他の液体中に不溶性
でその構造状態を保つ基材（マトリックス）を言う。
でその構造状態を保つ基材（マトリックス）を言う。
具体例としては、紙、セルロース、木材、合成樹脂フリ
ース、ガラス繊維、不織布及び織布、各種有機重合体（
例、ポリプロピレン）、その他フイルム形成体として当
業者に公知の有機材料が挙げられる。
ース、ガラス繊維、不織布及び織布、各種有機重合体（
例、ポリプロピレン）、その他フイルム形成体として当
業者に公知の有機材料が挙げられる。
又、担体は、通常の担体材料を含有するプレス成形又は
鋳造成形された錠剤の形をとることもできる。
鋳造成形された錠剤の形をとることもできる。
担体を、例えばポリスチレン製の支持又はハンドル部材
に適当に付着することにより取り扱いを便利にすること
もできる。
に適当に付着することにより取り扱いを便利にすること
もできる。
本発明に係る試験具は試験試料中に瞬間的に浸漬するこ
とにより、或は試験試料を担体マトリックス内に注入す
ることにより使用することができ、過酸化活性物質が存
在する場合には、検知可能な色変化が起る。
とにより、或は試験試料を担体マトリックス内に注入す
ることにより使用することができ、過酸化活性物質が存
在する場合には、検知可能な色変化が起る。
担体の容積は担体により吸収され試験組成物と接触する
試料の量を制限する役割を果たす。
試料の量を制限する役割を果たす。
余剰の試料は、担体の洗滌又は吸い取りを行うことによ
って試料の量を実際に担体マトリックス内に入った担体
の容積に迄制限することができる。
って試料の量を実際に担体マトリックス内に入った担体
の容積に迄制限することができる。
試験具の用法は試料が血漿、血清又はその他の体液の場
合も全く同一でよい。
合も全く同一でよい。
処理担体マトリックスの形態の試験具は、使用前に相当
期間保存されることかあるので、試薬として空気中で容
易に自動酸化されないものを選ぶのがよい。
期間保存されることかあるので、試薬として空気中で容
易に自動酸化されないものを選ぶのがよい。
又、試験具を日光に曝さないようにしておくのがよく、
場合によっては試験器具を撥水性の包装内に封入してお
き、使用直前に取り出して使うようにすることが望まし
い。
場合によっては試験器具を撥水性の包装内に封入してお
き、使用直前に取り出して使うようにすることが望まし
い。
試料中に存在する過酸化活性物質との反応により生成し
た色の反射率の読取りは、市販の分光光度計により行う
ことができる。
た色の反射率の読取りは、市販の分光光度計により行う
ことができる。
例えば、ベツクマンＤＫ−２型分光光度計（ベツクマン
・インスツルメント社製、カリホルニア州、フラートン
）又は分光色度計ＳＣＦ−１（イスラエル電気光学工業
社製、米国販売元：ブルーマー・リサーチ・コーポレー
ション、ニューヨーク州、ロングアイランド、プレイン
ウエル）。
・インスツルメント社製、カリホルニア州、フラートン
）又は分光色度計ＳＣＦ−１（イスラエル電気光学工業
社製、米国販売元：ブルーマー・リサーチ・コーポレー
ション、ニューヨーク州、ロングアイランド、プレイン
ウエル）。
以下、実施例により更に詳細に本発明を説明する。
実施例１
本実施例において、本発明による増感剤と公知の増感剤
６−メトキシキノリンとの比較試験を行った。
６−メトキシキノリンとの比較試験を行った。
下記要領に従って、三種の浸漬溶液を調製した１．以下
に示す化合物を、この順番で４１．６７ｍｌの蒸留水に
添加した。
に示す化合物を、この順番で４１．６７ｍｌの蒸留水に
添加した。
各成分が溶け終った後に次の成分を添加した。
クエン酸ナトリウム １．７８ｆクエン酸
２．３１２ホウ酸トリエタノール
アミン ５．５６Ｐヴエルセン（ｖｅｒｓｅｎｅ）
０．０５５Ｆメチルスルホン
５．５６Ｐラウリル硫酸ナトリウム ０．８３３
Ｐ次に、この溶液に４１．６７ｍｌのＮ−Ｎ−ジメチル
ホルムアミドを添加した後下記化合物を添加した。
２．３１２ホウ酸トリエタノール
アミン ５．５６Ｐヴエルセン（ｖｅｒｓｅｎｅ）
０．０５５Ｆメチルスルホン
５．５６Ｐラウリル硫酸ナトリウム ０．８３３
Ｐ次に、この溶液に４１．６７ｍｌのＮ−Ｎ−ジメチル
ホルムアミドを添加した後下記化合物を添加した。
６−メトキシキノリン ０．３３３？クメンヒド
ロパーオキシド ｌ．６６７ｆＯ−トリジン
０．４４４Ｐ２．６−メトキシキノリンを用
いなかった他は１と同じ。
ロパーオキシド ｌ．６６７ｆＯ−トリジン
０．４４４Ｐ２．６−メトキシキノリンを用
いなかった他は１と同じ。
３．６−メトキシキノリンの代りに０．１７５ｆの４−
アザフルオレンを用いた他は１と同じ。
アザフルオレンを用いた他は１と同じ。
１０インチ（２５．４ｃｍ）ｘ４インチ（９．１Ｃｍ）
の紙片（イートン＆ダイクマンＮｏ．２３７）を第１の
溶液に飽和するまで浸漬し、９５〜９７℃で１１分間乾
燥させた。
の紙片（イートン＆ダイクマンＮｏ．２３７）を第１の
溶液に飽和するまで浸漬し、９５〜９７℃で１１分間乾
燥させた。
同じ紙片をそれぞれ残りの各溶液に浸漬した。
これらを次に０．２インチ×０．２インチ（約０．５Ｃ
ｍｘＯ．５Ｃｍ）の紙片に切断してプラスチック製把手
に取り付けた。
ｍｘＯ．５Ｃｍ）の紙片に切断してプラスチック製把手
に取り付けた。
ヘモグロビンの溶液を調製し、上記のようにして得られ
た試験具の試験を調製直後及び６０℃で１週間強制保存
後に行った。
た試験具の試験を調製直後及び６０℃で１週間強制保存
後に行った。
表１に、尿中の最小検出可能ヘモグロビン濃度をｍ９／
ｄｌで示した。
ｄｌで示した。
上記結果より判るように、本発明において用いられる化
合物は、潜血のような過酸化活性物質の検出において増
感剤として有効である。
合物は、潜血のような過酸化活性物質の検出において増
感剤として有効である。
尚、上記説明は特殊な例について行われたものであるが
、本発明はこれらに限定されるものではなく、その範囲
内で各種の変更を行うことができる。
、本発明はこれらに限定されるものではなく、その範囲
内で各種の変更を行うことができる。
Claims (1)
- １ 過酸化活性物質の存在下に酸化されて色変化を起こ
すことのできる指示薬、該指示薬を酸化する酸化剤、及
び４−アザフルオレンを含んでなることを特徴とする過
酸化活性物質検出用試験組成物。
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US06/104,665 US4251223A (en) | 1979-12-17 | 1979-12-17 | Sensitizers for peroxidative activity tests |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5694263A JPS5694263A (en) | 1981-07-30 |
| JPS585673B2 true JPS585673B2 (ja) | 1983-02-01 |
Family
ID=22301711
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP55173921A Expired JPS585673B2 (ja) | 1979-12-17 | 1980-12-11 | 過酸化活性物質検出用試験組成物 |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4251223A (ja) |
| EP (1) | EP0030682B1 (ja) |
| JP (1) | JPS585673B2 (ja) |
| AU (1) | AU520047B2 (ja) |
| CA (1) | CA1141636A (ja) |
| DE (1) | DE3067483D1 (ja) |
| DK (1) | DK533280A (ja) |
| ES (1) | ES497804A0 (ja) |
| FI (1) | FI803906L (ja) |
| NO (1) | NO803568L (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6231102Y2 (ja) * | 1983-09-02 | 1987-08-10 |
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| DE2926271A1 (de) * | 1979-06-29 | 1981-01-08 | Behringwerke Ag | Mittel zum nachweis peroxidatisch wirksamer substanzen |
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