JPS5854799B2 - グリコシルビタミンの製造方法 - Google Patents
グリコシルビタミンの製造方法Info
- Publication number
- JPS5854799B2 JPS5854799B2 JP5991980A JP5991980A JPS5854799B2 JP S5854799 B2 JPS5854799 B2 JP S5854799B2 JP 5991980 A JP5991980 A JP 5991980A JP 5991980 A JP5991980 A JP 5991980A JP S5854799 B2 JPS5854799 B2 JP S5854799B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- glycosyl
- vitamins
- water
- vitamin
- glycoside
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、水溶性糖類を多量に含有しているグリコジル
ビタミン水溶液を多孔性合成吸着剤に接触せしめて多孔
性合成吸着剤にグリコジルビタミンを吸着させ、その多
孔性合成吸着剤からグリコジルビタミンを溶出採取する
ことを特徴とするグリコジルビタミンの製造方法に関す
るものである。
ビタミン水溶液を多孔性合成吸着剤に接触せしめて多孔
性合成吸着剤にグリコジルビタミンを吸着させ、その多
孔性合成吸着剤からグリコジルビタミンを溶出採取する
ことを特徴とするグリコジルビタミンの製造方法に関す
るものである。
グリコジルビタミンは、ビタミンに糖が結合した水溶性
の大きいビタミンであって、例えば、ビタミンとグリコ
シド結合を有する糖類とを含有する水溶液に糖転移酵素
を反応させて製造されるグリコジルビタミンＢ２（別名
リボフラビニルグリコシド）、グリコジルビタミンＰ（
別名ルチングリコシド、エスクリングリコシド）などが
ある。
の大きいビタミンであって、例えば、ビタミンとグリコ
シド結合を有する糖類とを含有する水溶液に糖転移酵素
を反応させて製造されるグリコジルビタミンＢ２（別名
リボフラビニルグリコシド）、グリコジルビタミンＰ（
別名ルチングリコシド、エスクリングリコシド）などが
ある。
しかしながら、このようにして調製されるグリコジルビ
タミン含有反応物には、グリコジルビタミンと共に反応
時に基質（糖供与体）として使用したグリコシド結合を
有する糖類およびその分解物などの水溶性糖類が多量に
共存している。
タミン含有反応物には、グリコジルビタミンと共に反応
時に基質（糖供与体）として使用したグリコシド結合を
有する糖類およびその分解物などの水溶性糖類が多量に
共存している。
このようなグリコジルビタミン含有反応物から水溶性糖
類を分離、除去して、高純度のグリコジルビタミンを製
造する方法としては、例えば、特公昭４８−１９９５７
号公報に開示されているハイドロサルファイド還元沈澱
法によるグリコジルビタミンＢ、の製造方法、或は特公
昭５４−３２０７３号公報に開示されている塩基性酢酸
鉛沈澱法によるグリコジルビタミンＰの製造方法などあ
る。
類を分離、除去して、高純度のグリコジルビタミンを製
造する方法としては、例えば、特公昭４８−１９９５７
号公報に開示されているハイドロサルファイド還元沈澱
法によるグリコジルビタミンＢ、の製造方法、或は特公
昭５４−３２０７３号公報に開示されている塩基性酢酸
鉛沈澱法によるグリコジルビタミンＰの製造方法などあ
る。
しかしながら、これらの方法は、倒れも多量の薬品を消
費するだけでなく、操作も繁雑で、工業的な実施は困難
であった。
費するだけでなく、操作も繁雑で、工業的な実施は困難
であった。
本発明者は、水溶性糖類を多量に含有しているグリコジ
ルビタミン水溶液から、グリコジルビタミンを容易に採
取することを目的に鋭意検討した。
ルビタミン水溶液から、グリコジルビタミンを容易に採
取することを目的に鋭意検討した。
その結果、多孔性スチレン−ジビニルベンゼン重合樹脂
のような多孔性合成吸着剤が、多量に共存する水溶性糖
類を吸着せずにグリコジルビタミンを選択的に吸着する
ことを見いだすと共に、グリコジルビタミンを吸着した
多孔性合成吸着剤に有機溶媒を接触せしめることによっ
てグリコジルビタミンを容易に溶出し採取できることを
確認して本発明を完成した。
のような多孔性合成吸着剤が、多量に共存する水溶性糖
類を吸着せずにグリコジルビタミンを選択的に吸着する
ことを見いだすと共に、グリコジルビタミンを吸着した
多孔性合成吸着剤に有機溶媒を接触せしめることによっ
てグリコジルビタミンを容易に溶出し採取できることを
確認して本発明を完成した。
ただし、本発明は、グリコジルビタミンのうち、特公昭
４８−３８１５８号公報記載のアスコルビン酸グリコシ
ドの採取には有効でなかった。
４８−３８１５８号公報記載のアスコルビン酸グリコシ
ドの採取には有効でなかった。
本発明で言うグリコジルビタミンＢ２とは、ビタミンＢ
２に糖が結合した物質であって、例えば、リボフラビニ
ルグルコシド、リボフラビニルマルトシド、リボフラビ
ニルイソマルトシド、リボフラビニルガラクトシドなど
を言う。
２に糖が結合した物質であって、例えば、リボフラビニ
ルグルコシド、リボフラビニルマルトシド、リボフラビ
ニルイソマルトシド、リボフラビニルガラクトシドなど
を言う。
また、グリコジルビタミンＰとは、ビタミンＰに糖が結
合した物質であって、例えば、ルチングルコシド、ルチ
ンマルトシド、エスクリングルコシド、エスクリンマル
トシド、エスクリンマルトトリオシドなどを言う。
合した物質であって、例えば、ルチングルコシド、ルチ
ンマルトシド、エスクリングルコシド、エスクリンマル
トシド、エスクリンマルトトリオシドなどを言う。
本発明で言う多孔性合成吸着剤とは、多孔性で広い吸着
表面積を有し、かつ非イオン性のスチレンージビニルベ
ンゼ共重合体、フェノールーホル？１Ｊン樹脂、アクリ
レート樹脂、メタアクリレート樹脂などの合成樹脂であ
り、例えば、市販されているＲｏｈｍ＆Ｈａａｓ社製造
の商品名ア社製−ライトＸＡＤ−１、アンパライトＸＡ
Ｄ−２、アンバーライトＸＡＤ−４、アンバーライトＸ
ＡＤ−７、アンバーライトＸＡＤ−８，アンバーライト
ＸＡＤ−９、アンバーライトＸＡＤ−１１、アンバーラ
イトＸＡＤ−１２、三菱化戒工業株式会社製造の商品名
ダイヤイオンＨＰ−１０１ダイヤイオンＨＰ−２０、ダ
イヤイオンＨＰ−３０，ダイヤイオンＨＰ−４０，ダイ
ヤイオンＨＰ−５０、ＩＭＡＣＴＩ社製造の商品名イマ
クテイ５ｙｎ−４２、イマクテイ５ｙｎ−４４、イマク
テイＳｙｎ −４６などがある。
表面積を有し、かつ非イオン性のスチレンージビニルベ
ンゼ共重合体、フェノールーホル？１Ｊン樹脂、アクリ
レート樹脂、メタアクリレート樹脂などの合成樹脂であ
り、例えば、市販されているＲｏｈｍ＆Ｈａａｓ社製造
の商品名ア社製−ライトＸＡＤ−１、アンパライトＸＡ
Ｄ−２、アンバーライトＸＡＤ−４、アンバーライトＸ
ＡＤ−７、アンバーライトＸＡＤ−８，アンバーライト
ＸＡＤ−９、アンバーライトＸＡＤ−１１、アンバーラ
イトＸＡＤ−１２、三菱化戒工業株式会社製造の商品名
ダイヤイオンＨＰ−１０１ダイヤイオンＨＰ−２０、ダ
イヤイオンＨＰ−３０，ダイヤイオンＨＰ−４０，ダイ
ヤイオンＨＰ−５０、ＩＭＡＣＴＩ社製造の商品名イマ
クテイ５ｙｎ−４２、イマクテイ５ｙｎ−４４、イマク
テイＳｙｎ −４６などがある。
また、本発明において、これら多孔性合成吸着剤を接触
させる方法としては、バッチ法によってもよいが、大量
生産する場合には多孔性合成吸着剤を充填したカラムに
通液する連続法が適している。
させる方法としては、バッチ法によってもよいが、大量
生産する場合には多孔性合成吸着剤を充填したカラムに
通液する連続法が適している。
本発明を具体的に述べれば、例えば、特公昭５２−２８
８４４号公報、特公昭５４−３２０７３号公報などに開
示されているように、ビタミンＢ２、ビタミンＰなどの
ビタミンとグリコシド結合を有する糖類とを含有する水
溶液にシクロデキストリングルカノトランスフェラーゼ
（Ｅ、Ｃ，２，４，１゜１９）、α−アミラーゼ（Ｅ、
Ｃ，３，２，１，１）、α−グルコシダーゼ（Ｅ、Ｃ，
３，２，１，２０）などの糖転移酵素を反応させグリコ
ジルビタミンを生成し、必要に応じてその反応液を、例
えばケイ酸アルミン酸マグネシウム、アルミン酸マグネ
シウムなどで処理して反応液中の蛋白質などの夾雑物を
吸着、除去したり、強酸性イオン交換樹脂（Ｈ型）およ
び弱塩基性イオン交換樹脂（ＯＨ型）で処理して脱塩す
る。
８４４号公報、特公昭５４−３２０７３号公報などに開
示されているように、ビタミンＢ２、ビタミンＰなどの
ビタミンとグリコシド結合を有する糖類とを含有する水
溶液にシクロデキストリングルカノトランスフェラーゼ
（Ｅ、Ｃ，２，４，１゜１９）、α−アミラーゼ（Ｅ、
Ｃ，３，２，１，１）、α−グルコシダーゼ（Ｅ、Ｃ，
３，２，１，２０）などの糖転移酵素を反応させグリコ
ジルビタミンを生成し、必要に応じてその反応液を、例
えばケイ酸アルミン酸マグネシウム、アルミン酸マグネ
シウムなどで処理して反応液中の蛋白質などの夾雑物を
吸着、除去したり、強酸性イオン交換樹脂（Ｈ型）およ
び弱塩基性イオン交換樹脂（ＯＨ型）で処理して脱塩す
る。
このようにして調製されたグリコジルビタミンを含有す
る水溶液を、多孔性合成吸着剤を充填したカラムに通液
すると、グリコジルビタミンおよび未反応のビタミンが
兄事に吸着されるのに対し、多量に共存する水溶性糖類
は吸着されることなくそのまま流出する。
る水溶液を、多孔性合成吸着剤を充填したカラムに通液
すると、グリコジルビタミンおよび未反応のビタミンが
兄事に吸着されるのに対し、多量に共存する水溶性糖類
は吸着されることなくそのまま流出する。
次いで、このグリコジルビタミンおよび未反応のビタミ
ンを吸着した多孔性合成吸着剤を希アルカリ水、水など
で洗浄した後、比較的少量の有機溶媒、または有機溶媒
と水との混合液、例えば、メタノール水、エタノール水
などを通液すれば、水溶性糖類と分離され、まづグリコ
ジルビタミンが溶出し、通液量を増すか有機溶媒濃度を
高めるかすれば未反応のビタミンが溶出してくる。
ンを吸着した多孔性合成吸着剤を希アルカリ水、水など
で洗浄した後、比較的少量の有機溶媒、または有機溶媒
と水との混合液、例えば、メタノール水、エタノール水
などを通液すれば、水溶性糖類と分離され、まづグリコ
ジルビタミンが溶出し、通液量を増すか有機溶媒濃度を
高めるかすれば未反応のビタミンが溶出してくる。
このグリコシルビタミン高含有溶出液を蒸溜して、先ず
有機溶媒を溜置した後、適当な濃度にまで濃縮してグリ
コジルビタミンを主成分とするシラツブ状製品が得られ
る。
有機溶媒を溜置した後、適当な濃度にまで濃縮してグリ
コジルビタミンを主成分とするシラツブ状製品が得られ
る。
さらに、このシラツブ状のグリコジルビタミン製品を乾
燥し、粉末化することによってグリコジルビタミンを主
成分とする粉末製品が得られる。
燥し、粉末化することによってグリコジルビタミンを主
成分とする粉末製品が得られる。
この有機溶媒によるグリコジルビタミン及び未反応ビタ
ミンの溶出操作は、同時に使用した多孔性合成吸着剤の
再生操作にもなるので、この多孔性合成吸着剤の繰り返
し使用を可能にする。
ミンの溶出操作は、同時に使用した多孔性合成吸着剤の
再生操作にもなるので、この多孔性合成吸着剤の繰り返
し使用を可能にする。
また、本発明による時は、水溶性糖類だけでなく、塩類
などの夾雑物も同時に除去することができる特徴をも有
する。
などの夾雑物も同時に除去することができる特徴をも有
する。
このようにして得た本発明により製造されたグリコジル
ビタミンは、 （１）水溶性がきわめて大きい。
ビタミンは、 （１）水溶性がきわめて大きい。
（２）耐光性、安定性が大きい。
（３）苦味が少ない。
（４）体内の酵素により糖とビタミンとに加水分解され
、ビタミンとしての生理活性を示す。
、ビタミンとしての生理活性を示す。
などの特徴を有していることから、例えば、飲食品、飼
料、餌料の強化用ビタミン剤として、また化粧品配合剤
として、さらにはうがい薬、点眼薬、点鼻薬、内服薬、
注射薬など医薬品の配合剤などとして有利に利用するこ
とができる。
料、餌料の強化用ビタミン剤として、また化粧品配合剤
として、さらにはうがい薬、点眼薬、点鼻薬、内服薬、
注射薬など医薬品の配合剤などとして有利に利用するこ
とができる。
特に、グリコジルビタミンＢ２の場合には、水溶性の黄
色食用色素としても利用することができ、さらには水溶
性の食用配合色素、例えば、グリコジルビタミンＢ２と
水溶性の食用色素青色１号とを配合して、従来得られな
かった水溶性の食用緑色色素を容易に調製するなど、他
の水溶性食用色素と容易に配合することができる。
色食用色素としても利用することができ、さらには水溶
性の食用配合色素、例えば、グリコジルビタミンＢ２と
水溶性の食用色素青色１号とを配合して、従来得られな
かった水溶性の食用緑色色素を容易に調製するなど、他
の水溶性食用色素と容易に配合することができる。
次に、２〜３の実施例について述べる。
実施例 １
（１−１） 転移酵素（シクロデキストリングルカノ
トランスフェラーゼ）の調整 バチルス ステアロサーモフィラス （Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉ
ｌｕｓ）ＦＥＲＭ−ＰＡ２２２２を、ソリュブルスター
チ２ ｗ ／ ｖ ％、硝酸アンモニウム１ ｗ ／
ｖ ％、リン酸２カリウム０．１ ｗ／ ｖ ％、硫酸
マグネシウム・７水塩０．０５ｗ／ｖ％、コーンステイ
ープリカー０．５ ｗ ／ ｖ係、炭酸カルシウム１
ｗ ／ ｖ係、水からなる殺菌した液体培地１０１に植
菌して、５０℃で３日間通気攪拌培養した。
トランスフェラーゼ）の調整 バチルス ステアロサーモフィラス （Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉ
ｌｕｓ）ＦＥＲＭ−ＰＡ２２２２を、ソリュブルスター
チ２ ｗ ／ ｖ ％、硝酸アンモニウム１ ｗ ／
ｖ ％、リン酸２カリウム０．１ ｗ／ ｖ ％、硫酸
マグネシウム・７水塩０．０５ｗ／ｖ％、コーンステイ
ープリカー０．５ ｗ ／ ｖ係、炭酸カルシウム１
ｗ ／ ｖ係、水からなる殺菌した液体培地１０１に植
菌して、５０℃で３日間通気攪拌培養した。
得られた培養液を遠心分離して、その上清を硫安０．７
飽和で塩析し、シクロデキストリングルカノトランスフ
ェラーゼ（Ｅ、Ｃ，２，４，１，１９）の活性約ｓｏ、
ｏｏｏ単位を有する粗酵素標品を得た。
飽和で塩析し、シクロデキストリングルカノトランスフ
ェラーゼ（Ｅ、Ｃ，２，４，１，１９）の活性約ｓｏ、
ｏｏｏ単位を有する粗酵素標品を得た。
ここで言う活性１単位とは、ｐＨ５，５，０，０２Ｍの
酢酸緩衝液および２Ｘ１０−３Ｍの塩化カルシウムを含
む０．３ ｗ ／ ｖ ％のソリュブルスターチ溶液５
ｒＩｌｌに適当に希釈した酵素液（ａ当り約１〜２単位
）０．２ｒＩＬｌを加え、４０℃で１０分間反応させた
後、その反応液０．５ ｍｌをとり、 ０．０２Ｎ−硫
酸水溶液１５ｍに混合して反応を停止させ、さらにこの
反応停止液に０．ＩＮヨウ素ヨウ化カリウム溶液０．２
ｍｌを加えて発色させ、次いで６６０ ｎｍにおける
吸光度を測定して、４０℃で１０分間反応させることに
よりソリュブルスターチ１５ηのヨウ素呈色を完全に消
失させる酵素量を言う。
酢酸緩衝液および２Ｘ１０−３Ｍの塩化カルシウムを含
む０．３ ｗ ／ ｖ ％のソリュブルスターチ溶液５
ｒＩｌｌに適当に希釈した酵素液（ａ当り約１〜２単位
）０．２ｒＩＬｌを加え、４０℃で１０分間反応させた
後、その反応液０．５ ｍｌをとり、 ０．０２Ｎ−硫
酸水溶液１５ｍに混合して反応を停止させ、さらにこの
反応停止液に０．ＩＮヨウ素ヨウ化カリウム溶液０．２
ｍｌを加えて発色させ、次いで６６０ ｎｍにおける
吸光度を測定して、４０℃で１０分間反応させることに
よりソリュブルスターチ１５ηのヨウ素呈色を完全に消
失させる酵素量を言う。
１−２） グリコジルビタミンＢ２の製造リボフラビン
２．５ｇ、Ｄ、Ｅ、 １８のデキストリン５００ｇを１
，６００ｍ１の水に加熱溶解した後、温度を６０℃に冷
却し、次いで実施例（１−１）で調整した粗シクロデキ
ストリングルカノトランスフェラーゼ標品１，０００単
位を加え、ｐｉ−１６，０、温度６０℃に保ちつつ２０
時間反応させた。
２．５ｇ、Ｄ、Ｅ、 １８のデキストリン５００ｇを１
，６００ｍ１の水に加熱溶解した後、温度を６０℃に冷
却し、次いで実施例（１−１）で調整した粗シクロデキ
ストリングルカノトランスフェラーゼ標品１，０００単
位を加え、ｐｉ−１６，０、温度６０℃に保ちつつ２０
時間反応させた。
反応液をペーパークロマトグラフィーで分析したところ
、リボフラビンの６５係がリボフラビニルグリコシド（
グリコジルビタミンＢ２）に転換していた。
、リボフラビンの６５係がリボフラビニルグリコシド（
グリコジルビタミンＢ２）に転換していた。
この反応液を温度９５℃に１０分間保って酵素を失活さ
せた後、室温にまで冷却し、これにケイ酸アルミン酸マ
グネシウム顆粒（富士化学工業株式会社製造の商品名ラ
イシリン）１ｇを加えて、時々攪拌しつつ３０分間保っ
た後、吸引済過して酵素標品由来の蛋白質などの夾雑物
を吸着除去した。
せた後、室温にまで冷却し、これにケイ酸アルミン酸マ
グネシウム顆粒（富士化学工業株式会社製造の商品名ラ
イシリン）１ｇを加えて、時々攪拌しつつ３０分間保っ
た後、吸引済過して酵素標品由来の蛋白質などの夾雑物
を吸着除去した。
得られた済液を多孔性合成吸着剤（Ｒｏｈｍ＆Ｈａ ａ
ｓ社製造の商品名アンバーライ）ＸＡＤ−７）５１を
充填したカラス製カラムにＳＶ２で通液した。
ｓ社製造の商品名アンバーライ）ＸＡＤ−７）５１を
充填したカラス製カラムにＳＶ２で通液した。
その結果、溶液中のリボフラビニルグリコシドおよび未
反応のりボフラビンは、その多孔性合成吸着剤に吸着し
、デキストリン、オリゴ糖、塩類などは吸着することな
く流出した。
反応のりボフラビンは、その多孔性合成吸着剤に吸着し
、デキストリン、オリゴ糖、塩類などは吸着することな
く流出した。
次いで、このリボフラビニルグリコシドおよび未反応の
りボフラビンを吸着した多孔性合成吸着剤を水３０Ｊで
洗浄した後、５０ ｖ ／ ｖ ％のメタノール１０１
を通液し、リボフラビニルグリコシドおよびリボフラビ
ンを溶出した。
りボフラビンを吸着した多孔性合成吸着剤を水３０Ｊで
洗浄した後、５０ ｖ ／ ｖ ％のメタノール１０１
を通液し、リボフラビニルグリコシドおよびリボフラビ
ンを溶出した。
この溶出液を減圧蒸溜してメタノールを除き、さらに濃
縮した後、減圧乾燥し粉末化して粉末状橙黄色のグリコ
ジルビタミンＢ２製品約３．５ｇを得た。
縮した後、減圧乾燥し粉末化して粉末状橙黄色のグリコ
ジルビタミンＢ２製品約３．５ｇを得た。
本島は、多量のリボフラビニルグリコシドを含有してい
るので冷水にもきわめて容易に溶け、しかも耐火性に優
れ、苦味も少ないので、各種飲食品、化粧品、医薬品な
どへのビタミンＢ２強化剤、さらには水溶性の食用着色
料などとして好適に利用し得る。
るので冷水にもきわめて容易に溶け、しかも耐火性に優
れ、苦味も少ないので、各種飲食品、化粧品、医薬品な
どへのビタミンＢ２強化剤、さらには水溶性の食用着色
料などとして好適に利用し得る。
実施例 ２
（２−１） 転移酵素（α−グルコシダーゼ）の調整
７／Ｌ／ ドース４ ｗ ／ ｖ ％、リン酸１カリウ
ム０、１ ｗ／ ｖ ％、硝酸アンモニウム０．１ｗ／
ｖ％、硫酸マグネシウム０．０５ ｗ ／ ｖ ％、塩
化カリウム０．０５ｗ／ｖ％、ポリペプトン０．２ｗ／
ｖ％、炭酸カルシウム１ ｗ ／ ｖ％（別に乾熱滅菌
して植菌時に無菌的に添加し７た）および水からなる液
体培地５００ｒＩＬｌにムコール ジャバニカス（Ｍｕ
ｃｏｒ ｊａｖａｎｉｃｕｓ）Ｉ ＦＯ４５７０を温度
３０℃で４４時間振盪培養した。
ム０、１ ｗ／ ｖ ％、硝酸アンモニウム０．１ｗ／
ｖ％、硫酸マグネシウム０．０５ ｗ ／ ｖ ％、塩
化カリウム０．０５ｗ／ｖ％、ポリペプトン０．２ｗ／
ｖ％、炭酸カルシウム１ ｗ ／ ｖ％（別に乾熱滅菌
して植菌時に無菌的に添加し７た）および水からなる液
体培地５００ｒＩＬｌにムコール ジャバニカス（Ｍｕ
ｃｏｒ ｊａｖａｎｉｃｕｓ）Ｉ ＦＯ４５７０を温度
３０℃で４４時間振盪培養した。
培養終了後、菌体を採取し、その湿菌体４８ｇに対し０
．５Ｍ酢酸緩衝液（ｐＨ５，３）に溶解した４Ｍ尿素液
５００ｍ１を加え、温度３０℃で４０時間静置した後、
遠心分離した。
．５Ｍ酢酸緩衝液（ｐＨ５，３）に溶解した４Ｍ尿素液
５００ｍ１を加え、温度３０℃で４０時間静置した後、
遠心分離した。
この上澄液を流水中で一夜透析した後、硫安０．９飽和
とし、温度４℃で一夜放置して生成した塩析物を沢取し
、０．０１Ｍ酢酸緩衝液（ＰＨ５，３） ５０ｍｌに懸
濁溶解した後、遠心分離して上澄液を粗α−グルコシダ
ーゼ標品とした。
とし、温度４℃で一夜放置して生成した塩析物を沢取し
、０．０１Ｍ酢酸緩衝液（ＰＨ５，３） ５０ｍｌに懸
濁溶解した後、遠心分離して上澄液を粗α−グルコシダ
ーゼ標品とした。
（２−２） グリコジルビタミンＢ２の製造リボフラ
ビン１ｇ、Ｄ、Ｅ、１０のデキストリン１００ｇを９５
０ｒｆＬｌの水に加熱溶解した後、温度５０℃に冷却し
、次いで実施例（２−１）で調整した粗α−グルコシダ
ーゼ標品４０．ｄを加え、ｐＨ８，９、温度５０℃に保
ちつつ４００時間反応せた。
ビン１ｇ、Ｄ、Ｅ、１０のデキストリン１００ｇを９５
０ｒｆＬｌの水に加熱溶解した後、温度５０℃に冷却し
、次いで実施例（２−１）で調整した粗α−グルコシダ
ーゼ標品４０．ｄを加え、ｐＨ８，９、温度５０℃に保
ちつつ４００時間反応せた。
反応液をペーパークロマトグラフィーで分析したところ
、リボフラビンの８８％がリボフラビニルグリコシド（
グリコジルビタミンＢ２）に転換していた。
、リボフラビンの８８％がリボフラビニルグリコシド（
グリコジルビタミンＢ２）に転換していた。
この反応液を温度９５℃に１０分間保ってα−グルコシ
ダーゼを失活させた後、実施例（１−２）と同様にケイ
酸アルミン酸マグネシウムで処理して酵素標品由来の蛋
白質などの夾雑物を吸着、除去した。
ダーゼを失活させた後、実施例（１−２）と同様にケイ
酸アルミン酸マグネシウムで処理して酵素標品由来の蛋
白質などの夾雑物を吸着、除去した。
得られた済液を多孔性合成吸着剤（三菱化成工業株式会
社製造の商品名ダイヤイオンＨＰ−２０）２／を充填し
たステンレス製カラムにＳＶ２で通液した。
社製造の商品名ダイヤイオンＨＰ−２０）２／を充填し
たステンレス製カラムにＳＶ２で通液した。
その結果、溶液中のリボフラビニルグリコシドおよび未
反応のりボフラビンは、その多孔性合成吸着剤に吸着し
、デキストリン、オリゴ糖、グルコースなどの水溶性糖
類および塩類などは、吸着することなく流出した。
反応のりボフラビンは、その多孔性合成吸着剤に吸着し
、デキストリン、オリゴ糖、グルコースなどの水溶性糖
類および塩類などは、吸着することなく流出した。
次いで、このリボフラビニルグリコシドおよび未反応の
りボフラビンを吸着した多孔性合成吸着剤を水ｌＯ１で
洗浄した後、２０ ｖ ／ ｖ ％のエタノール５１を
通液し、リボフラビニルグリコシドおよびリボフラビン
を溶出した。
りボフラビンを吸着した多孔性合成吸着剤を水ｌＯ１で
洗浄した後、２０ ｖ ／ ｖ ％のエタノール５１を
通液し、リボフラビニルグリコシドおよびリボフラビン
を溶出した。
この溶出液を実施例（１−２）の場合と同様に減圧蒸溜
してエタノールを除き、さらに濃縮、乾燥、粉末化して
粉末状橙黄色のグリコジルビタミンＢ２製品約１．１を
得た。
してエタノールを除き、さらに濃縮、乾燥、粉末化して
粉末状橙黄色のグリコジルビタミンＢ２製品約１．１を
得た。
本品は、実施例（１−２）で得た製品と同様に、各種飲
食品、化粧品、医薬品などへのビタミンＢ２強化剤、さ
らには水溶性の食用着色料などとして好適に利用し得る
。
食品、化粧品、医薬品などへのビタミンＢ２強化剤、さ
らには水溶性の食用着色料などとして好適に利用し得る
。
実施例 ３
グリコジルビタミンＢ２の製造
リボフラビン２ｇ、ラクトースＩｏｎを０．２Ｍリン酸
塩緩衝液（１）Ｈ６，８） ９００ｍに加熱溶解した後
、温度３０℃に冷却し、これに転移酵素液２．０００ｍ
１にュートリショナル バイオケミカルズ社製のβ−ガ
ラクトシダーゼ２．０００ｒＩＬｌを含む）を混合して
、これを温度３０’Ｃで１６時間反応させた。
塩緩衝液（１）Ｈ６，８） ９００ｍに加熱溶解した後
、温度３０℃に冷却し、これに転移酵素液２．０００ｍ
１にュートリショナル バイオケミカルズ社製のβ−ガ
ラクトシダーゼ２．０００ｒＩＬｌを含む）を混合して
、これを温度３０’Ｃで１６時間反応させた。
反応液をペーパークロマトグラフィーで分析したところ
、リボフラビンの２３係がリボフラビニルグリコシド（
グリコジルビタミンＢ、）に転換していた。
、リボフラビンの２３係がリボフラビニルグリコシド（
グリコジルビタミンＢ、）に転換していた。
この反応液を１，０００Ｍに濃縮した後、終末２係とな
るように過塩素酸を加え、遠心分離して蛋白質を除去し
た。
るように過塩素酸を加え、遠心分離して蛋白質を除去し
た。
その上澄をＩＮ−カセイソーダ液にてｐＨ５，０に中和
して２００ｍＡ’まで濃縮し、次いで徐々に攪拌しつつ
冷却し最終４℃にまで下げ１６時間保った。
して２００ｍＡ’まで濃縮し、次いで徐々に攪拌しつつ
冷却し最終４℃にまで下げ１６時間保った。
この溶液中に晶出したリボフラビンを遠心分離して除去
し、得られた上澄をイオン交換樹脂アンバーライ）ＩＲ
−２００（Ｈ型）およびアンバーライトＩＲ−６８（Ｏ
Ｈ型）をそれぞれ２００ａずつ用いてイオン交換し脱塩
した。
し、得られた上澄をイオン交換樹脂アンバーライ）ＩＲ
−２００（Ｈ型）およびアンバーライトＩＲ−６８（Ｏ
Ｈ型）をそれぞれ２００ａずつ用いてイオン交換し脱塩
した。
この脱塩液を多孔性合成吸着剤（ＩＭＡＣＴＩ社製造の
商品名イマクテイ５ｙｎ−４２）２１を充填したカラム
にＳＶ２で通液し、リボフラビニルグリコシドおよび溶
解残留するりボフラビンを吸着させ、ラクトース、グル
コース、ガラクトースなどの水溶性糖類と分離した後、
実施例（２−２）と同様にエタノール水にてリボフラビ
ニルグリコシドとりボフラビンとを溶出し、濃縮、乾燥
、粉末化して粉末状橙黄色のグリコジルビタミンＢ２製
品約ｏ、ｓｇを得た。
商品名イマクテイ５ｙｎ−４２）２１を充填したカラム
にＳＶ２で通液し、リボフラビニルグリコシドおよび溶
解残留するりボフラビンを吸着させ、ラクトース、グル
コース、ガラクトースなどの水溶性糖類と分離した後、
実施例（２−２）と同様にエタノール水にてリボフラビ
ニルグリコシドとりボフラビンとを溶出し、濃縮、乾燥
、粉末化して粉末状橙黄色のグリコジルビタミンＢ２製
品約ｏ、ｓｇを得た。
本品は、実施例（１−２）で得た製品と同様に、各種飲
食物、化粧品、医薬品などへのビタミンＢ２強化剤、さ
らには水溶性の食用着色料などとして好適に利用し得る
。
食物、化粧品、医薬品などへのビタミンＢ２強化剤、さ
らには水溶性の食用着色料などとして好適に利用し得る
。
実施例 ４
グリコジルビタミンＰの製造
ルチン２ｇ％Ｄ、Ｅ、 １８のデキストリン３００ｇを
１，８００ｒｒＬｌの水に加熱溶解した後、温度６０℃
に冷却し、これに実施例（１−１）の方法で調整した粗
シクロデキストリングルカノトランスフェラーゼ標品１
，０００単位を加えて、ｐＨ６，０、温度６０℃に保ち
つつ１６時間反応させた。
１，８００ｒｒＬｌの水に加熱溶解した後、温度６０℃
に冷却し、これに実施例（１−１）の方法で調整した粗
シクロデキストリングルカノトランスフェラーゼ標品１
，０００単位を加えて、ｐＨ６，０、温度６０℃に保ち
つつ１６時間反応させた。
反応液をペーパークロマトグラフィーで分析したところ
、ルチンの９３％がルチングリコシド（グリコジルビタ
ミンＰ）に転換していた。
、ルチンの９３％がルチングリコシド（グリコジルビタ
ミンＰ）に転換していた。
この反応液を実施例（１−２）と同様に加熱して酵素を
失活させた後、アルミン酸マグネシウム粉末（北海道曹
達株式会社製造の商品名吸着剤Ｍ−５１１）１ｇを加え
て攪拌しつつ２０分間保った後、済過して酵素標品由来
の蛋白質などの夾雑物を吸着除去した。
失活させた後、アルミン酸マグネシウム粉末（北海道曹
達株式会社製造の商品名吸着剤Ｍ−５１１）１ｇを加え
て攪拌しつつ２０分間保った後、済過して酵素標品由来
の蛋白質などの夾雑物を吸着除去した。
得られた析液を多孔性合成吸着剤ＣＲｏｈｒｒｚ＆Ｈａ
ａｓ社製造の商品名アンバーライ）ＸＡＤ−２）４１を
充填したガラス製カラムにＳＶ３で通液した。
ａｓ社製造の商品名アンバーライ）ＸＡＤ−２）４１を
充填したガラス製カラムにＳＶ３で通液した。
その結果、溶液中のルチングリコシドおよび未反応のル
チンは、その多孔性合成吸着剤に吸着し、デキストリン
、オリゴ糖、塩類などは吸着することなく流出した。
チンは、その多孔性合成吸着剤に吸着し、デキストリン
、オリゴ糖、塩類などは吸着することなく流出した。
次いで、このルチングリコシドおよび未反応のルチンを
吸着した多孔性合成吸着剤を水２０１で洗浄した後、３
０ ｖ ／ ｖ優のエタノール８１を通液してルチング
リコシドおよびルチンを溶出し、さらに実施例（１−２
）の場合と同様に濃縮、乾燥、粉末化して粉末状のグリ
コシドビタミンＰ製品約４ｇを得た。
吸着した多孔性合成吸着剤を水２０１で洗浄した後、３
０ ｖ ／ ｖ優のエタノール８１を通液してルチング
リコシドおよびルチンを溶出し、さらに実施例（１−２
）の場合と同様に濃縮、乾燥、粉末化して粉末状のグリ
コシドビタミンＰ製品約４ｇを得た。
本品は、多量のルチングリコシドを含有しているので、
冷水にもきわめて容易に溶け、しかも安定性に優れてお
り、苦味も少ないので各種飲食品、化粧品、医薬品など
へのビタミンＰ強化剤、さらには日焼は止め化粧品など
への配合剤として好適に利用し得る。
冷水にもきわめて容易に溶け、しかも安定性に優れてお
り、苦味も少ないので各種飲食品、化粧品、医薬品など
へのビタミンＰ強化剤、さらには日焼は止め化粧品など
への配合剤として好適に利用し得る。
実施例 ５
グリコジルビタミンＰの製造
エスクリン３ ｇ、 Ｄ、Ｅ、 ２０のデキストリフ４
００ｇを２，０ＯＯｒｒＬｌの水に加熱溶解した後、温
度６０℃に冷却し、次いで実施例（１−１）の方法で調
整した粗シクロデキストリングルカノトランスフェラー
ゼ標品１，０００単位を加えて、−６，０、温度６０℃
に保ちつつ２０時間反応させた。
００ｇを２，０ＯＯｒｒＬｌの水に加熱溶解した後、温
度６０℃に冷却し、次いで実施例（１−１）の方法で調
整した粗シクロデキストリングルカノトランスフェラー
ゼ標品１，０００単位を加えて、−６，０、温度６０℃
に保ちつつ２０時間反応させた。
反応液をペーパークロマトグラフィーで分析したところ
、エスクリンの９１％がエスクリングリコシド（グリコ
ジルビタミンｐ）に転換していた。
、エスクリンの９１％がエスクリングリコシド（グリコ
ジルビタミンｐ）に転換していた。
この反応液を実施例（１−２）と同様に加熱して酵素を
失活させ、ケイ酸アルミン酸マグネシウム顆粒（富士化
学工業株式会社製造の商品名ノイシリン）２ｇを加えて
攪拌しつつ３０分間保った後、濾過して酵素標品由来の
蛋白質などの夾雑物を吸着除去した。
失活させ、ケイ酸アルミン酸マグネシウム顆粒（富士化
学工業株式会社製造の商品名ノイシリン）２ｇを加えて
攪拌しつつ３０分間保った後、濾過して酵素標品由来の
蛋白質などの夾雑物を吸着除去した。
得られたＥ液を多孔性合成吸着剤（三菱化成工業株式会
社製造の商品名ダイヤイオンＨＰ−５０）４１を充填し
たカラムにＳＶ２で通液した。
社製造の商品名ダイヤイオンＨＰ−５０）４１を充填し
たカラムにＳＶ２で通液した。
その結果、溶液中のエスクリングリコシドおよび未反応
のエスクリンは多孔性合成吸着剤に吸着し、デキストリ
ン、オ′リゴ糖などの水溶性糖類、および塩類などは吸
着することなく流出した。
のエスクリンは多孔性合成吸着剤に吸着し、デキストリ
ン、オ′リゴ糖などの水溶性糖類、および塩類などは吸
着することなく流出した。
次いで、実施例４と同様にエスクリングリコシドおよび
エスクリンを吸着した多孔性合成吸着剤から、エスクリ
ングリコシドおよびエスクリンを溶出し、濃縮、乾燥、
粉末化して粉末状のグリコシドビタミンＰ製品約５ｇを
得た。
エスクリンを吸着した多孔性合成吸着剤から、エスクリ
ングリコシドおよびエスクリンを溶出し、濃縮、乾燥、
粉末化して粉末状のグリコシドビタミンＰ製品約５ｇを
得た。
本品は、多量のルチングリコシドを含有しているので、
冷水にもきわめて容易に溶け、しかも安定性に優れてお
り、苦味も少ないので各種飲食品、化粧品、医薬品など
へのビタミンＰ強化剤、さらには日焼は止め化粧品など
への配合剤などとして好適に利用し得る。
冷水にもきわめて容易に溶け、しかも安定性に優れてお
り、苦味も少ないので各種飲食品、化粧品、医薬品など
へのビタミンＰ強化剤、さらには日焼は止め化粧品など
への配合剤などとして好適に利用し得る。
Claims (1)
- １ 水溶性糖類を含有しているグリコジルビタミン水溶
液を多孔性合成吸着剤に接触せしめて多孔性合成吸着剤
にグリコジルビタミンを吸着させ、その多孔性合成吸着
剤からグリコジルビタミンを溶出採取することを特徴と
するグリコジルビタミンの製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5991980A JPS5854799B2 (ja) | 1980-05-08 | 1980-05-08 | グリコシルビタミンの製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5991980A JPS5854799B2 (ja) | 1980-05-08 | 1980-05-08 | グリコシルビタミンの製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS56156299A JPS56156299A (en) | 1981-12-02 |
| JPS5854799B2 true JPS5854799B2 (ja) | 1983-12-06 |
Family
ID=13127016
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5991980A Expired JPS5854799B2 (ja) | 1980-05-08 | 1980-05-08 | グリコシルビタミンの製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5854799B2 (ja) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DK0387042T3 (da) * | 1989-03-08 | 1995-04-03 | Hayashibara Biochem Lab | Fremstilling og anvendelser af alpha-glycosyl-rutin |
| JP2832848B2 (ja) * | 1989-10-21 | 1998-12-09 | 株式会社林原生物化学研究所 | 結晶２―Ｏ―α―Ｄ―グルコピラノシル―Ｌ―アスコルビン酸とその製造方法並びに用途 |
| JP2926432B2 (ja) * | 1990-06-11 | 1999-07-28 | 株式会社林原生物化学研究所 | 養毛剤 |
| FR2723846B1 (fr) * | 1994-08-24 | 1997-06-13 | Hi Pharmtech | Forme pharmaceutique solide pour l'administration d'une substance active liquide liposoluble |
| EP1731134B1 (en) * | 2004-03-17 | 2015-10-07 | Hayashibara Co., Ltd. | Functional powders |
-
1980
- 1980-05-08 JP JP5991980A patent/JPS5854799B2/ja not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS56156299A (en) | 1981-12-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR0184244B1 (ko) | 알파-글리코실헤스페리딘을함유시킨화장품 | |
| JP3134233B2 (ja) | α−グリコシル ケルセチンとその製造方法並びに用途 | |
| KR100203759B1 (ko) | 신규의 알파-글리코실 나린진 및 그 제조방법과 용도 | |
| JPS59120073A (ja) | 甘味料及びその製造法 | |
| JPS5854799B2 (ja) | グリコシルビタミンの製造方法 | |
| JP3549436B2 (ja) | α−グリコシルヘスペリジンとその製造方法並びに用途 | |
| JPH0556957B2 (ja) | ||
| JPH0710898A (ja) | 水難溶性フラボノイドの改質方法 | |
| JP3163502B2 (ja) | α−グリコシル フラボン類とその製造方法並びに用途 | |
| JP3177892B2 (ja) | α―グリコシルルチンの製造法とその用途 | |
| JPS5933360B2 (ja) | α−グリコシルステビオ−ル配糖体の製造方法 | |
| JPH0349692A (ja) | Ｎ―アセチルラクトサミンの製造法 | |
| JPS59148794A (ja) | 高純度グルコオリゴ糖の製造方法 | |
| JPS5848155B2 (ja) | 甘味物の製造方法 | |
| JP3194191B2 (ja) | 組成物 | |
| JP4051482B2 (ja) | α−グリコシルヘスペリジンを含んでなる医薬組成物 | |
| JPS6030695A (ja) | 吸湿性良好なイソマルト−スを主成分として含有する非発酵性糖の製造法 | |
| JP2002088095A (ja) | ２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物の製造方法 | |
| JPS6147495A (ja) | マルトペンタオ−ス結晶とその製造方法 | |
| US4632917A (en) | Pseudooligosaccharides with an α-glucosidase-inhibiting action, their use and pharmaceutical products | |
| US3033758A (en) | Preparation of levans | |
| JPS5911190A (ja) | 新規なオリゴ糖、その製造法及びオリゴ糖を活性成分とするビフイドバクテリウム菌の増殖促進剤 | |
| JPH0566943B2 (ja) | ||
| KR0162726B1 (ko) | 프락토올리고당 혼합액에서 프락토올리고당의 분리방법 | |
| JP2620605B2 (ja) | オリゴ糖の製造法 |