JPS5823791A - ポルフイリン類の分離方法及びそれに用いる樹脂吸着剤 - Google Patents
ポルフイリン類の分離方法及びそれに用いる樹脂吸着剤Info
- Publication number
- JPS5823791A JPS5823791A JP56121359A JP12135981A JPS5823791A JP S5823791 A JPS5823791 A JP S5823791A JP 56121359 A JP56121359 A JP 56121359A JP 12135981 A JP12135981 A JP 12135981A JP S5823791 A JPS5823791 A JP S5823791A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- porphyrins
- porphyrin
- styrene
- resin
- divinylbenzene
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 150000004032 porphyrins Chemical class 0.000 title claims abstract description 119
- 229920005989 resin Polymers 0.000 title claims abstract description 32
- 239000011347 resin Substances 0.000 title claims abstract description 32
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 title description 13
- 238000000926 separation method Methods 0.000 title description 13
- MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 1,2-Divinylbenzene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1C=C MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 45
- PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N Styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1 PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 42
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims abstract description 17
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 claims abstract description 11
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 7
- 239000011260 aqueous acid Substances 0.000 claims abstract description 7
- 229920006026 co-polymeric resin Polymers 0.000 claims abstract description 6
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 54
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 32
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 29
- -1 alkenyl ester Chemical class 0.000 claims description 26
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 25
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 15
- 125000002843 carboxylic acid group Chemical group 0.000 claims description 11
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 6
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 5
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 241000186063 Arthrobacter Species 0.000 claims description 3
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 claims description 3
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 claims description 3
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 claims 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 claims 1
- 150000003440 styrenes Chemical class 0.000 claims 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 abstract description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 7
- 229920005646 polycarboxylate Polymers 0.000 abstract 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 14
- 235000010633 broth Nutrition 0.000 description 10
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 10
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- KVNYFPKFSJIPBJ-UHFFFAOYSA-N 1,2-diethylbenzene Chemical compound CCC1=CC=CC=C1CC KVNYFPKFSJIPBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 5
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000007334 copolymerization reaction Methods 0.000 description 4
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 3
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 3
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 3
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 3
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- FYGHSUNMUKGBRK-UHFFFAOYSA-N 1,2,3-trimethylbenzene Chemical compound CC1=CC=CC(C)=C1C FYGHSUNMUKGBRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OZAIFHULBGXAKX-UHFFFAOYSA-N 2-(2-cyanopropan-2-yldiazenyl)-2-methylpropanenitrile Chemical compound N#CC(C)(C)N=NC(C)(C)C#N OZAIFHULBGXAKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KAKZBPTYRLMSJV-UHFFFAOYSA-N Butadiene Chemical group C=CC=C KAKZBPTYRLMSJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 2
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 2
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 2
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N butyl alcohol Substances CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- ULDHMXUKGWMISQ-UHFFFAOYSA-N carvone Chemical compound CC(=C)C1CC=C(C)C(=O)C1 ULDHMXUKGWMISQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- QXYJCZRRLLQGCR-UHFFFAOYSA-N dioxomolybdenum Chemical compound O=[Mo]=O QXYJCZRRLLQGCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- PHTQWCKDNZKARW-UHFFFAOYSA-N isoamylol Chemical compound CC(C)CCO PHTQWCKDNZKARW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 2
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 2
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 2
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 239000003505 polymerization initiator Substances 0.000 description 2
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 2
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 2
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 2
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 238000010557 suspension polymerization reaction Methods 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- CHRJZRDFSQHIFI-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.C=CC1=CC=CC=C1C=C CHRJZRDFSQHIFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HUNCSWANZMJLPM-UHFFFAOYSA-N 5-methyltryptophan Chemical compound CC1=CC=C2NC=C(CC(N)C(O)=O)C2=C1 HUNCSWANZMJLPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GMVPRGQOIOIIMI-DODZYUBVSA-N 7-[(1R,2R,3R)-3-hydroxy-2-[(3S)-3-hydroxyoct-1-enyl]-5-oxocyclopentyl]heptanoic acid Chemical compound CCCCC[C@H](O)C=C[C@H]1[C@H](O)CC(=O)[C@@H]1CCCCCCC(O)=O GMVPRGQOIOIIMI-DODZYUBVSA-N 0.000 description 1
- KYARBIJYVGJZLB-UHFFFAOYSA-N 7-amino-4-hydroxy-2-naphthalenesulfonic acid Chemical compound OC1=CC(S(O)(=O)=O)=CC2=CC(N)=CC=C21 KYARBIJYVGJZLB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004342 Benzoyl peroxide Substances 0.000 description 1
- OMPJBNCRMGITSC-UHFFFAOYSA-N Benzoylperoxide Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(=O)OOC(=O)C1=CC=CC=C1 OMPJBNCRMGITSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000186146 Brevibacterium Species 0.000 description 1
- 239000005973 Carvone Substances 0.000 description 1
- 108010089792 Hemeproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000008015 Hemeproteins Human genes 0.000 description 1
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 1
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 1
- LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N L-cystine Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CSSC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- 239000004158 L-cystine Substances 0.000 description 1
- 235000019393 L-cystine Nutrition 0.000 description 1
- YIVJZNGAASQVEM-UHFFFAOYSA-N Lauroyl peroxide Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)OOC(=O)CCCCCCCCCCC YIVJZNGAASQVEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001474791 Proboscis Species 0.000 description 1
- 241000220317 Rosa Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N Tin Chemical compound [Sn] ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 241001080519 Zera Species 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OGCFZIHWMWIVPA-UHFFFAOYSA-N [Mo].C=CC1=CC=CC=C1 Chemical compound [Mo].C=CC1=CC=CC=C1 OGCFZIHWMWIVPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 1
- 238000005377 adsorption chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000004996 alkyl benzenes Chemical class 0.000 description 1
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N ammonia Natural products N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 150000004945 aromatic hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 238000003287 bathing Methods 0.000 description 1
- 239000000440 bentonite Substances 0.000 description 1
- 229910000278 bentonite Inorganic materials 0.000 description 1
- SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N bentoquatam Chemical compound O.O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019400 benzoyl peroxide Nutrition 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- MPMBRWOOISTHJV-UHFFFAOYSA-N but-1-enylbenzene Chemical compound CCC=CC1=CC=CC=C1 MPMBRWOOISTHJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WGKPFDMDSUJKFQ-UHFFFAOYSA-L calcium azane dihydroxide Chemical compound N.[OH-].[Ca+2].[OH-] WGKPFDMDSUJKFQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 1
- 238000005660 chlorination reaction Methods 0.000 description 1
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004927 clay Substances 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 150000001879 copper Chemical class 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 229920006037 cross link polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 229960003067 cystine Drugs 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000007599 discharging Methods 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000006203 ethylation Effects 0.000 description 1
- 238000006200 ethylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000007863 gel particle Substances 0.000 description 1
- 239000003292 glue Substances 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 238000012686 granular polymerization Methods 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 239000011261 inert gas Substances 0.000 description 1
- 230000003908 liver function Effects 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 150000002696 manganese Chemical class 0.000 description 1
- 229940099596 manganese sulfate Drugs 0.000 description 1
- 239000011702 manganese sulphate Substances 0.000 description 1
- 235000007079 manganese sulphate Nutrition 0.000 description 1
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 150000002751 molybdenum Chemical class 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 1
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 229920005559 polyacrylic rubber Polymers 0.000 description 1
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 239000003531 protein hydrolysate Substances 0.000 description 1
- 239000010453 quartz Substances 0.000 description 1
- 239000007870 radical polymerization initiator Substances 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N silicon dioxide Inorganic materials O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000010959 steel Substances 0.000 description 1
- 125000000020 sulfo group Chemical group O=S(=O)([*])O[H] 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- IWXIJAJPTFEKPL-UHFFFAOYSA-H tricalcium trisulfate Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O IWXIJAJPTFEKPL-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L zinc sulfate Chemical compound [Zn+2].[O-]S([O-])(=O)=O NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960001763 zinc sulfate Drugs 0.000 description 1
- 229910000368 zinc sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/18—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing at least two hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system, e.g. rifamycin
- C12P17/182—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring heteroatoms in the condensed system
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/22—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof comprising organic material
- B01J20/26—Synthetic macromolecular compounds
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、少なくとも二種のポルフィリン類を含有する
培養ずみプロスから、たとえばメチル化、エチル化の如
きエステル化操作を必要とすることeLK、fiポルフ
ィリン傾をフリーのカルボン酸の形で、高収量且つ高純
度をもって分離回収できるポルフィリン類の分離方法に
関し、とくに、簡単で且つ容易な吸庸−溶出操作及び装
置をもって、満足すべき早い吸着及び溶出速度で且つ優
れた吸着剤耐久性及び優れた吸宥剤再便用耐久性で、九
とえば90嘩を越える顕著に尚い回収率及び選択性をも
って、高純度の精製ポルフィリンを高収量で分離し回収
できるポルフィリン類の分離方法に関する6本発明は父
、上記方法に実施に用いるのに適した共重合体樹脂吸着
剤にも関する。
培養ずみプロスから、たとえばメチル化、エチル化の如
きエステル化操作を必要とすることeLK、fiポルフ
ィリン傾をフリーのカルボン酸の形で、高収量且つ高純
度をもって分離回収できるポルフィリン類の分離方法に
関し、とくに、簡単で且つ容易な吸庸−溶出操作及び装
置をもって、満足すべき早い吸着及び溶出速度で且つ優
れた吸着剤耐久性及び優れた吸宥剤再便用耐久性で、九
とえば90嘩を越える顕著に尚い回収率及び選択性をも
って、高純度の精製ポルフィリンを高収量で分離し回収
できるポルフィリン類の分離方法に関する6本発明は父
、上記方法に実施に用いるのに適した共重合体樹脂吸着
剤にも関する。
ポルフィリン類は、各種の生物の組織内に広く存在して
おシ、生体内の酸素の運搬、生体内の鍍化逮元反応の触
媒などの生理学的作用に関連するヘムタンパクの構成成
分として重決な化合物であり、その医業的用途に関して
も、例えば肝愼能改嵜など1器に対するa14節作用、
その他の興味ある生理学的活性を有する物質として注目
される活性物質である。
おシ、生体内の酸素の運搬、生体内の鍍化逮元反応の触
媒などの生理学的作用に関連するヘムタンパクの構成成
分として重決な化合物であり、その医業的用途に関して
も、例えば肝愼能改嵜など1器に対するa14節作用、
その他の興味ある生理学的活性を有する物質として注目
される活性物質である。
ポルフィリン類は、血液中の血色素からの抽出、或はポ
ルフィリン類生家性徴生吻の培養などによって製造され
るのが一般的であるが、共存する他の生体組織成分から
、或は該培養物から、ポルフィリン類の単離を効率よく
行なうことは、必ずしも容易ではない。
ルフィリン類生家性徴生吻の培養などによって製造され
るのが一般的であるが、共存する他の生体組織成分から
、或は該培養物から、ポルフィリン類の単離を効率よく
行なうことは、必ずしも容易ではない。
特に微生物1体を包含して生体内でポルフィリンが生産
される際に、各種のポルフィリン類が2種類以上生産さ
れる場合があシ、これらを効率よ〈分離回収できる且つ
又工業的実施に適し念容易な手段の一発が−11まれで
いる。。
される際に、各種のポルフィリン類が2種類以上生産さ
れる場合があシ、これらを効率よ〈分離回収できる且つ
又工業的実施に適し念容易な手段の一発が−11まれで
いる。。
従来、ポルフィリンを分離回収する手段はいくつか知ら
れている。たとえば、咋凍−酢酸エチルの如き溶媒を用
いて溶媒抽出し、ついで抽出されたポルフィリンをメチ
ルエステル化し、次いで、アルiナの如き吸着剤を用匹
て吸着クロマトグラフィ一手段に賦する方法(J、 C
hrorsαtag、、 5(1961)!77〜29
9 HBiochgスJ、。
れている。たとえば、咋凍−酢酸エチルの如き溶媒を用
いて溶媒抽出し、ついで抽出されたポルフィリンをメチ
ルエステル化し、次いで、アルiナの如き吸着剤を用匹
て吸着クロマトグラフィ一手段に賦する方法(J、 C
hrorsαtag、、 5(1961)!77〜29
9 HBiochgスJ、。
62 (1956)フ8〕、−に、芳・香族炭化水素に
溶解し、沸騰させた後冷却し、結晶を析出させる方法〔
日特公昭和52−37042号〕などが知られている。
溶解し、沸騰させた後冷却し、結晶を析出させる方法〔
日特公昭和52−37042号〕などが知られている。
これら従来提案においては、いずれもエステル化の操作
が必要である賭点があり、更に、二種以上のポルフィリ
ン類を含有する混合物から各ポルフィリンを分離する手
段としては、分離効率、操作などの点で工業的実施に不
向きである。
が必要である賭点があり、更に、二種以上のポルフィリ
ン類を含有する混合物から各ポルフィリンを分離する手
段としては、分離効率、操作などの点で工業的実施に不
向きである。
他の提案として、アニオン交換樹脂全利用し7、ポルフ
ィリン類をフリーの酸の形で+1fmする方法〔日本展
芸化宇会誌第50巻41〜47(1976)〕が提案さ
れているが、回収率が低い問題があり工業上有利な方法
とはいえない。
ィリン類をフリーの酸の形で+1fmする方法〔日本展
芸化宇会誌第50巻41〜47(1976)〕が提案さ
れているが、回収率が低い問題があり工業上有利な方法
とはいえない。
本発明者等は、上述の如き従来広の欠陥を克服できるポ
ルフィリン類の分離方法を開発すべく研究を行ってきた
。
ルフィリン類の分離方法を開発すべく研究を行ってきた
。
その結果、下記(1)〜Ov)、
(1)少なくとも二項のポルフィリンg41に含有する
培養ずみブロスの液相部のpHを約2−5〜約4に調節
して、形成された葭ボルツイリン類含有固形分を採取し
、 (it) 該固形分の水性酸溶液を調製して、その不
溶物を除去した溶液相のpHを約6〜約8に調節し、 (i)tapHrJ4mし九溶液を、ジビニルベンゼン
、スチレンもしくはその官能性誘導体及び式のアルケニ
ル基をボし、nは2もしくFiaを示す、で表わされる
ベンゼン多価カルボン酸アルケニルエステルより導かれ
た共ぼ合体樹脂であって且つその衣i檀が約’l00y
//を以上の樹脂と接ぺさせて、該樹脂に該ボルフイリ
:yAを吸着させ、 (1v)次いで、浴出剤により溶出させて各ポルフィリ
ン画分を取得すること、 によって、簡単で且つ尋易なe、4−溶出操作及び装置
をもって、満足すべき早い吸着及び1#出速度で且つ優
れた吸着剤耐久性及び優れた吸着剤再便用耐久性で、た
とえば90チを越える顕著に高い回収率及び選択性をも
って、高純度の4製ポルフイリンを高収緻で分離し回収
できることを発見した。
培養ずみブロスの液相部のpHを約2−5〜約4に調節
して、形成された葭ボルツイリン類含有固形分を採取し
、 (it) 該固形分の水性酸溶液を調製して、その不
溶物を除去した溶液相のpHを約6〜約8に調節し、 (i)tapHrJ4mし九溶液を、ジビニルベンゼン
、スチレンもしくはその官能性誘導体及び式のアルケニ
ル基をボし、nは2もしくFiaを示す、で表わされる
ベンゼン多価カルボン酸アルケニルエステルより導かれ
た共ぼ合体樹脂であって且つその衣i檀が約’l00y
//を以上の樹脂と接ぺさせて、該樹脂に該ボルフイリ
:yAを吸着させ、 (1v)次いで、浴出剤により溶出させて各ポルフィリ
ン画分を取得すること、 によって、簡単で且つ尋易なe、4−溶出操作及び装置
をもって、満足すべき早い吸着及び1#出速度で且つ優
れた吸着剤耐久性及び優れた吸着剤再便用耐久性で、た
とえば90チを越える顕著に高い回収率及び選択性をも
って、高純度の4製ポルフイリンを高収緻で分離し回収
できることを発見した。
本発明者等の研究によれば、アースロノ(フタ−・ヒア
リナス(FERM−Pss 12 s ; ATCC3
1263冨DSM−86’l>やアースロノ(イタ−・
バラセンス(ATCC13346i 1FO12139
)、更には、それらの変異ないし変櫨劇の如含ポルフィ
リン生産菌は、カルボン酸基を、夫々、4個、5個、6
個、7個もしくは81固有するフリーの酸の形のボルフ
イリ/@を2棟乃至5橿含有する培養ブロスを形成する
能力をゼするが、前記(1)及び(i)の手股t−経て
得られるpH調節された溶液中のこれらカルボン酸基含
有ポルフィリン類に対して、これらを高い吸着型をもっ
て選択的に吸着する能力に優れ、且つその溶出に際して
は、活性分画区分中のポルフィリン楕襄度が充分に嵩い
という選択的溶出能乃至高度なポルフィリン分離能を示
し、斯くて、付加的な追加及び/父は予備精襄手IRt
必要とすることなしに、吸着−溶出の1覇単且つ容易な
操作及び装置dによって90%をこえる高回収率で、精
製ポルフィリンを分離採取するのが可能となることが発
見された。
リナス(FERM−Pss 12 s ; ATCC3
1263冨DSM−86’l>やアースロノ(イタ−・
バラセンス(ATCC13346i 1FO12139
)、更には、それらの変異ないし変櫨劇の如含ポルフィ
リン生産菌は、カルボン酸基を、夫々、4個、5個、6
個、7個もしくは81固有するフリーの酸の形のボルフ
イリ/@を2棟乃至5橿含有する培養ブロスを形成する
能力をゼするが、前記(1)及び(i)の手股t−経て
得られるpH調節された溶液中のこれらカルボン酸基含
有ポルフィリン類に対して、これらを高い吸着型をもっ
て選択的に吸着する能力に優れ、且つその溶出に際して
は、活性分画区分中のポルフィリン楕襄度が充分に嵩い
という選択的溶出能乃至高度なポルフィリン分離能を示
し、斯くて、付加的な追加及び/父は予備精襄手IRt
必要とすることなしに、吸着−溶出の1覇単且つ容易な
操作及び装置dによって90%をこえる高回収率で、精
製ポルフィリンを分離採取するのが可能となることが発
見された。
更に父、前記(1)及び(i)の手攻で得られるpHA
節さしfe、溶液中のカルボン酸≠言有コブロボルフイ
リン類に対して、満足すべき吸着−溶出流速を示し、反
復操作においても目づまシ元生のトラブルを回避して、
優れた耐久性を示し、挾雑成分を富むポルフィリン類含
有固形分中のポルフィリンの精製及び分離の1栗的実施
を極めて有利にできることを発見し念。
節さしfe、溶液中のカルボン酸≠言有コブロボルフイ
リン類に対して、満足すべき吸着−溶出流速を示し、反
復操作においても目づまシ元生のトラブルを回避して、
優れた耐久性を示し、挾雑成分を富むポルフィリン類含
有固形分中のポルフィリンの精製及び分離の1栗的実施
を極めて有利にできることを発見し念。
従って、本発明の目的は、少なくと本二攬のポルフィリ
ン@を含有する培養ずみブロスから含有される各ポルフ
ィリンを高純度状態で且つ各別に分譲採取できるポルフ
ィリン類の分離方法を提供するにある。
ン@を含有する培養ずみブロスから含有される各ポルフ
ィリンを高純度状態で且つ各別に分譲採取できるポルフ
ィリン類の分離方法を提供するにある。
本発明の他の目的は、上記方法の実施に利用するのに適
したポルフィリン類分離用技層剤を提供するにある。
したポルフィリン類分離用技層剤を提供するにある。
本発明の上記鎖目的及びさらに多くの曲の目的ならびに
利点は、以下の記載から一層明らかとなるであろう。
利点は、以下の記載から一層明らかとなるであろう。
本発明方法によって分離処理されるポルフィリン含有ブ
ロスは、少なくとも二種のポルフィリン類を含有する培
養ずみのブロスであれば、どのような培養ブロスであっ
てもよい。本発明においてポルフィリン類とνま、ウロ
ポルフィリン■〜〜、コブロボルフイリンI−IV、お
よびこれらの部分エステル化物、部分脱炭酸化物、など
を包含する呼称であり、側鎖としてのカルボン酸基r、
夫々、4個〜8個の範囲の任意の個数で有するポルフィ
リンを少なくとも2檀含Mする培養ずみのブロスが利用
できる。
ロスは、少なくとも二種のポルフィリン類を含有する培
養ずみのブロスであれば、どのような培養ブロスであっ
てもよい。本発明においてポルフィリン類とνま、ウロ
ポルフィリン■〜〜、コブロボルフイリンI−IV、お
よびこれらの部分エステル化物、部分脱炭酸化物、など
を包含する呼称であり、側鎖としてのカルボン酸基r、
夫々、4個〜8個の範囲の任意の個数で有するポルフィ
リンを少なくとも2檀含Mする培養ずみのブロスが利用
できる。
この工うな少なくとも二種のポルフィリン類を含有する
ブロス會形成するポルフィリン生産菌は珈々知られてお
り、列えば、%開昭52−7479号(%m昭50−8
3165号)、特開昭53−109929号(%頒昭5
2−22730号)、特開昭56−68398号(特願
昭54−143198号)−1特開昭56−!7859
5号(特願昭54−153648号)などに公知のポル
フィリン生tSが利用できる。これら公知のポルフィリ
ン生産菌の中でも、アースロパクター属に属するポルフ
ィリン生産tit”培養することにより形成された培養
ずみブロスが、高artにvi故橿のポルフィリン類を
含有するブロスである点でより好ましい。
ブロス會形成するポルフィリン生産菌は珈々知られてお
り、列えば、%開昭52−7479号(%m昭50−8
3165号)、特開昭53−109929号(%頒昭5
2−22730号)、特開昭56−68398号(特願
昭54−143198号)−1特開昭56−!7859
5号(特願昭54−153648号)などに公知のポル
フィリン生tSが利用できる。これら公知のポルフィリ
ン生産菌の中でも、アースロパクター属に属するポルフ
ィリン生産tit”培養することにより形成された培養
ずみブロスが、高artにvi故橿のポルフィリン類を
含有するブロスである点でより好ましい。
このような好ましい公知ポルフィリン生産菌の例として
は、上記例示の特開昭公報に開示されたアースロバフタ
−・ヒアリナス(ArthrobαotoデhyaLi
nsa ) (FERM−Pg 3125 HATCC
31263;DS&−867)、アースロノくフタ−・
バラセンス(Artkrobactor paacen
a 〕(ATCC1B34611F012139)、こ
れらの変異ないし変種菌、九とえば、アースロノ(フタ
−・ヒアリナスの5メチル−DL−トリプトファン抵抗
株(FEEM−Pss 256 )、アースロバフタ−
・ヒアリナスのコブロボルフイリン■抵抗株(FERM
−Psszs*)、アースロパクター・バラセンスのL
−)リブドアアン抵抗株(FERM−PAN 25丁)
などを例示することができる。
は、上記例示の特開昭公報に開示されたアースロバフタ
−・ヒアリナス(ArthrobαotoデhyaLi
nsa ) (FERM−Pg 3125 HATCC
31263;DS&−867)、アースロノくフタ−・
バラセンス(Artkrobactor paacen
a 〕(ATCC1B34611F012139)、こ
れらの変異ないし変種菌、九とえば、アースロノ(フタ
−・ヒアリナスの5メチル−DL−トリプトファン抵抗
株(FEEM−Pss 256 )、アースロバフタ−
・ヒアリナスのコブロボルフイリン■抵抗株(FERM
−Psszs*)、アースロパクター・バラセンスのL
−)リブドアアン抵抗株(FERM−PAN 25丁)
などを例示することができる。
他の公知ポルフィリン生産菌の例としては、アースロバ
フタ−・クレメ9ス(Arthrobaetorare
tneua ’) (FERN−Pg312 @ )、
アースロバフタ−・レジノサス(Argkrobαat
eデデ##イー引■ss )(FERM−Pg3131
)、アースロパクター・イソプpパノ四フイラ(Aデ
throbaa@or1ampropasalophi
la ) (Fk: RM −Ps 3 1 29
)、アースロバフタ−・フラビダス(Arthro−h
aetar /Jgvjdsa ) (FERM
−Ps 3 1 3 G :)、ブレビバクテリウム・
エバネウス(Brewibaata−risvs ab
mrnaxa 〕(FERM−PA3128 )、プレ
ビバクテリウム−ラクチカラー(Brgwibα−at
erim 1getittelor )(FERN
−P雇3127)などを例示することができる。そして
これらポルフィリン生産菌の菌学的特徴については、前
記特開昭公報などに詳細に記載されている。
フタ−・クレメ9ス(Arthrobaetorare
tneua ’) (FERN−Pg312 @ )、
アースロバフタ−・レジノサス(Argkrobαat
eデデ##イー引■ss )(FERM−Pg3131
)、アースロパクター・イソプpパノ四フイラ(Aデ
throbaa@or1ampropasalophi
la ) (Fk: RM −Ps 3 1 29
)、アースロバフタ−・フラビダス(Arthro−h
aetar /Jgvjdsa ) (FERM
−Ps 3 1 3 G :)、ブレビバクテリウム・
エバネウス(Brewibaata−risvs ab
mrnaxa 〕(FERM−PA3128 )、プレ
ビバクテリウム−ラクチカラー(Brgwibα−at
erim 1getittelor )(FERN
−P雇3127)などを例示することができる。そして
これらポルフィリン生産菌の菌学的特徴については、前
記特開昭公報などに詳細に記載されている。
又、上記例示の如きポルフィリン生産菌を培養して、ポ
ルフィリン類含有ブロスを形成する手法、培養条件など
くついても前記特開昭公報に詳細に開示されてお夛、本
発明における原料培養ずみプロスの形成に利用できる。
ルフィリン類含有ブロスを形成する手法、培養条件など
くついても前記特開昭公報に詳細に開示されてお夛、本
発明における原料培養ずみプロスの形成に利用できる。
以下に、要約して該原料培養ずみプロスの形成に関して
述べる。
述べる。
上記プロスを形成するための培養は、例工ば、適当な炭
素源、窒素源、ミネラル源などを含有する培地を用いて
、前記例示の如き公知菌株に公知の至適pR榮件、至適
温度条件付近の適当な培養条件を選択して行うことがで
きる。
素源、窒素源、ミネラル源などを含有する培地を用いて
、前記例示の如き公知菌株に公知の至適pR榮件、至適
温度条件付近の適当な培養条件を選択して行うことがで
きる。
例えば、本発明方法の実施にとくに適した上記5種類の
ポルフィリン類(カルボン酸基を、夫々、4個、S個、
6個、71固及び8個有するポルフィリン類の混合物)
を含有する原料プロスを得るKは、アースロバフタ−属
に属するポルフィリン生産菌、好ましくはアースロバフ
タ−・ヒアリナス、アースロパクター・バラセンス及び
それらの変異ないし変種菌よりえらばれたi11株を、
例えば;温度約!O℃〜約40℃、jH約4〜約甑5の
如き培養条件下で培養する培養条件を例示することがで
きる。培養時間は適宜に選択でき、例えば約2日〜約S
日の如き培養時間を例示することができる。
ポルフィリン類(カルボン酸基を、夫々、4個、S個、
6個、71固及び8個有するポルフィリン類の混合物)
を含有する原料プロスを得るKは、アースロバフタ−属
に属するポルフィリン生産菌、好ましくはアースロバフ
タ−・ヒアリナス、アースロパクター・バラセンス及び
それらの変異ないし変種菌よりえらばれたi11株を、
例えば;温度約!O℃〜約40℃、jH約4〜約甑5の
如き培養条件下で培養する培養条件を例示することがで
きる。培養時間は適宜に選択でき、例えば約2日〜約S
日の如き培養時間を例示することができる。
上記窒素源の例としては、たとえば、コーン・スチープ
・リカー、酔母エキス、肉エキス、ペプトン、アばノ酸
類、蛋白水解吻、フィツシュミール、アンモニウム4拳
、硝#I塩類、尿素、などをあげることができ、これら
Vi凌数檜併用して利用することができる。又、炭素源
の例としては、たとえば、#lft4、アルコール類、
ふすま、などを例示でき、これらも複数極利用すること
ができる。
・リカー、酔母エキス、肉エキス、ペプトン、アばノ酸
類、蛋白水解吻、フィツシュミール、アンモニウム4拳
、硝#I塩類、尿素、などをあげることができ、これら
Vi凌数檜併用して利用することができる。又、炭素源
の例としては、たとえば、#lft4、アルコール類、
ふすま、などを例示でき、これらも複数極利用すること
ができる。
さらに%ミネラル源の一]としては、リン酸塩類、マグ
ネシウム塩類、亜鉛4類、カルシウム塩類、マンガン塩
類、モリブデン塩類、銅塩類などを例示することができ
、これらもa数種利用することができる。
ネシウム塩類、亜鉛4類、カルシウム塩類、マンガン塩
類、モリブデン塩類、銅塩類などを例示することができ
、これらもa数種利用することができる。
本発明方法によれは、(1)たとえば上述のようにして
得ることのできる少なくとも二層のポルフィリン類を含
有する培養ずみプロスの液相部のjH1約1約zs〜、
好tしくは約28〜約&8Ktj4節して、形成された
該ポルフィリンgJ4官有固形分を採取する。
得ることのできる少なくとも二層のポルフィリン類を含
有する培養ずみプロスの液相部のjH1約1約zs〜、
好tしくは約28〜約&8Ktj4節して、形成された
該ポルフィリンgJ4官有固形分を採取する。
上記液相部のpHa4節によって、譲敏相邪に含有され
た少なくとも二種のポルフィリンat含有する混合固形
分が形成できる。このポルフィリン類含有固形分は、通
常、沈殿吻の形で形成され、該固形分を任意の固−液分
離手段、たと、tは、傾斜、遠心分離、−過などの手段
を利用して採取することができる。
た少なくとも二種のポルフィリンat含有する混合固形
分が形成できる。このポルフィリン類含有固形分は、通
常、沈殿吻の形で形成され、該固形分を任意の固−液分
離手段、たと、tは、傾斜、遠心分離、−過などの手段
を利用して採取することができる。
上記操作(1)に於て、pH’tA節に利用する酸性吻
質の例としては、硫酸、塩酸、硝酸、リン酸などの如き
無機fiR類、及びギ酸、酢酸、シュウ酸、乳酸などの
如き有機酸類を例示することかで睡る。
質の例としては、硫酸、塩酸、硝酸、リン酸などの如き
無機fiR類、及びギ酸、酢酸、シュウ酸、乳酸などの
如き有機酸類を例示することかで睡る。
上述のようにして採取できるポルフィリン類含有固形分
は、液相部中和包含され得る炭素源、窒素源、ミネラル
類その他の挾雑成分から可成シ良好に選択的に分電され
九少なくとも二種のボル7イリy類から成る固形分とし
て取得することができる。
は、液相部中和包含され得る炭素源、窒素源、ミネラル
類その他の挾雑成分から可成シ良好に選択的に分電され
九少なくとも二種のボル7イリy類から成る固形分とし
て取得することができる。
本発明方法によれば、(ii)上述のようにして採取し
九該固形分の水性酸溶液を調製して、その不溶物を除去
した溶液相のpH金約6〜約8、好ましくは約7±a5
付近KAtJする。
九該固形分の水性酸溶液を調製して、その不溶物を除去
した溶液相のpH金約6〜約8、好ましくは約7±a5
付近KAtJする。
上記操作(ii)における水性酸溶液の調製は、九とえ
ば、操作(:)で採取したポルフィリン類含有固形分を
、水性酸溶液に再溶解することによりfJ!4製するこ
とができる。利用する酸の例としては、塩酸、硫酸、硝
酸、リン酸などの如き無機酸類、及びギ酸、酢酸、クエ
ウ酸、乳酸などの如き有機酸類を例示することができる
。又、酸の傾度としては約1ないし約4規定の濃度の液
を用いることができるが、好ましくは約2規定前後の#
度がよい。
ば、操作(:)で採取したポルフィリン類含有固形分を
、水性酸溶液に再溶解することによりfJ!4製するこ
とができる。利用する酸の例としては、塩酸、硫酸、硝
酸、リン酸などの如き無機酸類、及びギ酸、酢酸、クエ
ウ酸、乳酸などの如き有機酸類を例示することができる
。又、酸の傾度としては約1ないし約4規定の濃度の液
を用いることができるが、好ましくは約2規定前後の#
度がよい。
上述のようKして得ることのできるポルフィリン類含有
IjI形分の水性酸溶液からの不溶物の除去は、任意の
同一液分離手段、九とえば、傾斜、遠心分離、−過など
の手段を利用して行うことができる。このようにして、
不溶物を除去して得ることのできる溶液相のpEの調節
は、適当なアルカリ性物質を用いて行うことができる。
IjI形分の水性酸溶液からの不溶物の除去は、任意の
同一液分離手段、九とえば、傾斜、遠心分離、−過など
の手段を利用して行うことができる。このようにして、
不溶物を除去して得ることのできる溶液相のpEの調節
は、適当なアルカリ性物質を用いて行うことができる。
このpH調節に利用するアルカリ性物藏の列としては、
水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、アンモニア水、炭
酸ナトリウム、炭酸カリウムなど全例示することができ
る。
水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、アンモニア水、炭
酸ナトリウム、炭酸カリウムなど全例示することができ
る。
本発明方法によれば、(i)上述のようにして得られた
該pHlI4節した溶液を、ジビニルベンゼン、スチレ
ンもしくはその官能性誘導体及び式ルケニル基を示し、
鴨は意もしくt−inを示す、で表わされるベンゼン多
価カルボン酸アルケニルエステルより導かれた共重合体
樹脂(以下、DST樹脂と略記することがある)であっ
て且つその表面積が約フ00y//f以上の樹脂と接触
させて、σ樹脂にポルフィリン類を吸着させる。
該pHlI4節した溶液を、ジビニルベンゼン、スチレ
ンもしくはその官能性誘導体及び式ルケニル基を示し、
鴨は意もしくt−inを示す、で表わされるベンゼン多
価カルボン酸アルケニルエステルより導かれた共重合体
樹脂(以下、DST樹脂と略記することがある)であっ
て且つその表面積が約フ00y//f以上の樹脂と接触
させて、σ樹脂にポルフィリン類を吸着させる。
上記操作(i)は、該表[Iil積が約700i/P以
上のDST樹脂吸麿剤と上記pH調節した溶液とを、光
分に淡触させることのでさる任、よの手段で行うことが
できる。列えば、該吸、d剤を該ポルフィリン頑含M液
とを混合し、所望により、攪拌して両者を接触させるバ
ッチ方式が採用できるし、父、適当なカラムに該吸涜削
を充てんし、この充てん層中を該ポルフィリンm’i含
有する上6己pH調節した溶液を通過せしめるカラムク
ロマトグラフィ一方式を採用することもできる。
上のDST樹脂吸麿剤と上記pH調節した溶液とを、光
分に淡触させることのでさる任、よの手段で行うことが
できる。列えば、該吸、d剤を該ポルフィリン頑含M液
とを混合し、所望により、攪拌して両者を接触させるバ
ッチ方式が採用できるし、父、適当なカラムに該吸涜削
を充てんし、この充てん層中を該ポルフィリンm’i含
有する上6己pH調節した溶液を通過せしめるカラムク
ロマトグラフィ一方式を採用することもできる。
本発明方法によれば、Ov)上述のようにしてポルフィ
リン類を吸着させた表ml積が約700yy//f以上
のDST#脂から、溶出剤により溶出させて、原料プロ
スの液相部に含有されていた少なくとも二種のポルフィ
リン類を、各ポルフィリン画分に分−取得して、各ポル
フィリン成分を高純1&關収率で分離し、取得すること
ができる。
リン類を吸着させた表ml積が約700yy//f以上
のDST#脂から、溶出剤により溶出させて、原料プロ
スの液相部に含有されていた少なくとも二種のポルフィ
リン類を、各ポルフィリン画分に分−取得して、各ポル
フィリン成分を高純1&關収率で分離し、取得すること
ができる。
利用する溶出剤としては、低級アルコールの水溶液が好
ましく利用できる。約10〜約4(l濃度の低級アルコ
ール類水溶液の利用が好ましく、この際、pH約7〜約
12のpH条件を満是する低級アルコール類水溶液とし
て利用するのがよい。
ましく利用できる。約10〜約4(l濃度の低級アルコ
ール類水溶液の利用が好ましく、この際、pH約7〜約
12のpH条件を満是する低級アルコール類水溶液とし
て利用するのがよい。
このような低級アルコールの例としては、メタノール、
エタノール、イソプロパツールなどの如きアルコール類
を例示することができる。またpH条件の調節には、例
えば、水敏化ナトリウム、水酸化カリウム、アンモニア
水酸化カルシウムの如きアルカリ性物質を利用すること
ができる。
エタノール、イソプロパツールなどの如きアルコール類
を例示することができる。またpH条件の調節には、例
えば、水敏化ナトリウム、水酸化カリウム、アンモニア
水酸化カルシウムの如きアルカリ性物質を利用すること
ができる。
溶出操作は、室温で行うことができ、とくに加温もしく
は冷却の必要はない0例えば、約lO〜約60℃の如き
浴出温度を例示することができる。
は冷却の必要はない0例えば、約lO〜約60℃の如き
浴出温度を例示することができる。
上述のようにして得ることのできる各ポルフイリンー分
は、操作(i)におけると同様に、そのpEを約′L5
〜約4にfllてポルフィリフ画分固形物として析出さ
せ、固形分の形で採取することができる。
は、操作(i)におけると同様に、そのpEを約′L5
〜約4にfllてポルフィリフ画分固形物として析出さ
せ、固形分の形で採取することができる。
上記操作(iv)に於て、ポルフィリン類及び挾雑成分
の溶出パターンの一態様を示すと、溶出剤による溶出操
作によって、まず、挾雑物實である不純物が溶出し、次
いで8個のカルボン酸基を有するポルフィリンが溶出し
てくる。次いで71固のカルボン酸基を有するポルフィ
リンが俗出し、順次、61固、5個、4個と、順次によ
り少ないカルボン酸基を有するポルフィリンの順で溶出
してくる。
の溶出パターンの一態様を示すと、溶出剤による溶出操
作によって、まず、挾雑物實である不純物が溶出し、次
いで8個のカルボン酸基を有するポルフィリンが溶出し
てくる。次いで71固のカルボン酸基を有するポルフィ
リンが俗出し、順次、61固、5個、4個と、順次によ
り少ないカルボン酸基を有するポルフィリンの順で溶出
してくる。
そして残りの挾雑祷質はカラムに吸着し九ままとなって
いる。
いる。
本発明方法によれば、上述のようにして、少なくとも二
種のポルフィリン類を含有する培養ず与プロスの液相部
から各ポルフィリン画分を、高収率且つ高純度をもって
容易な操作で且つ間単な装置をもって、顕著に優れ九回
収率及び選択性をもって分離することができる。
種のポルフィリン類を含有する培養ず与プロスの液相部
から各ポルフィリン画分を、高収率且つ高純度をもって
容易な操作で且つ間単な装置をもって、顕著に優れ九回
収率及び選択性をもって分離することができる。
本発明は又、上述した本発明方法の実権に利用するのに
適したポルフィリン類分離用吸智剤にも関する。該吸着
剤は、上述したようにしてプロスからみちびかれたボル
フイリy類含有水性溶・改を包含して、少なくとも二種
のポルフィリン類を含有する水性溶液から各ポルフィリ
ンを分離するのに1広く利用でき且つ卓越し九分離性能
を示す。
適したポルフィリン類分離用吸智剤にも関する。該吸着
剤は、上述したようにしてプロスからみちびかれたボル
フイリy類含有水性溶・改を包含して、少なくとも二種
のポルフィリン類を含有する水性溶液から各ポルフィリ
ンを分離するのに1広く利用でき且つ卓越し九分離性能
を示す。
とくに適した該吸着剤に於ては、前記DST樹脂におい
て、該樹脂の表面積が約700yy//f以上であり、
該樹脂のスチレンもしくはその官能性誘導体成分含有量
が、該ジビニルベンゼン及び該スチレンもしくはその前
舵性誘導体の合計量に基いて約30〜約80重量嘔であ
り、且つ該ベンゼン多価カルボン酸アルケニルエステル
成分含有量が、該ジビニルベンゼン、該スチレンもしく
はその官能性誘導体及び護ベンゼン多価カルボン酸アル
ケニルエステルの合計量に暴いて約αl〜約30 f@
−である。
て、該樹脂の表面積が約700yy//f以上であり、
該樹脂のスチレンもしくはその官能性誘導体成分含有量
が、該ジビニルベンゼン及び該スチレンもしくはその前
舵性誘導体の合計量に基いて約30〜約80重量嘔であ
り、且つ該ベンゼン多価カルボン酸アルケニルエステル
成分含有量が、該ジビニルベンゼン、該スチレンもしく
はその官能性誘導体及び護ベンゼン多価カルボン酸アル
ケニルエステルの合計量に暴いて約αl〜約30 f@
−である。
本発明方法で用いる前arc D S T樹脂は、たと
えば、アンバーライトXAD系樹脂(ローム・アンド・
ハース社製品:スチレンージビニルベンゼン樹脂)が極
性表rkJを持たないのに対して、前記式/酸アルケニ
ルエステルに由来する適度な慣性表面全吸着剤表面に有
し、従来樹脂に比して、ポルフィリン類に対する吸!M
に於て約5〜lO倍の顕著に優れたポルフィリン吸着能
を示し、更に、その吸着及び溶出時の選択性においても
優れた性能を発揮し、その上、吸着及び溶出速度が早く
、且つ優れた吸着剤耐久性及び吸着剤再使用耐久性を示
す等、ポルフィリン類の分離用吸着剤とじて卓越した諸
性能を有する。
えば、アンバーライトXAD系樹脂(ローム・アンド・
ハース社製品:スチレンージビニルベンゼン樹脂)が極
性表rkJを持たないのに対して、前記式/酸アルケニ
ルエステルに由来する適度な慣性表面全吸着剤表面に有
し、従来樹脂に比して、ポルフィリン類に対する吸!M
に於て約5〜lO倍の顕著に優れたポルフィリン吸着能
を示し、更に、その吸着及び溶出時の選択性においても
優れた性能を発揮し、その上、吸着及び溶出速度が早く
、且つ優れた吸着剤耐久性及び吸着剤再使用耐久性を示
す等、ポルフィリン類の分離用吸着剤とじて卓越した諸
性能を有する。
斯くて、本発明によれば、ジビニルベンゼン、スチレン
もしくはその官能性誘導体及び式アルケニル基金示し、
籠は2もしくFi3を示す、〕で表わされるベンゼン多
価カルボン酸アルケニルエステルより導かれた共重合体
樹脂であって、該樹脂の表面積が約700m’/f以上
であり、好ましくは、該樹脂のスチレンもしくはその官
能性誘導体成分含Vtが、該ジビニルベンゼン及び該ス
チレンもしくはその官能性誘導体の合計量に基いて約3
0〜約80直tSであり、且つ好ましくは、該ベンゼン
多価カルボン酸アルケニルエステル成分含有量が、該ジ
ビニルベンゼン、該スチレンもしくはその官能性誘導体
及び該ベンゼン多価カルボン酸アルケニルエステルの合
計量に基いて約α1〜約30重1に%であって、少なく
とも二種のポルフィリン類含M水性溶赦から各ポルフィ
リンを分離するのに使用することを特徴とするポルフィ
リン類分離用吸着剤が提供できる。
もしくはその官能性誘導体及び式アルケニル基金示し、
籠は2もしくFi3を示す、〕で表わされるベンゼン多
価カルボン酸アルケニルエステルより導かれた共重合体
樹脂であって、該樹脂の表面積が約700m’/f以上
であり、好ましくは、該樹脂のスチレンもしくはその官
能性誘導体成分含Vtが、該ジビニルベンゼン及び該ス
チレンもしくはその官能性誘導体の合計量に基いて約3
0〜約80直tSであり、且つ好ましくは、該ベンゼン
多価カルボン酸アルケニルエステル成分含有量が、該ジ
ビニルベンゼン、該スチレンもしくはその官能性誘導体
及び該ベンゼン多価カルボン酸アルケニルエステルの合
計量に基いて約α1〜約30重1に%であって、少なく
とも二種のポルフィリン類含M水性溶赦から各ポルフィ
リンを分離するのに使用することを特徴とするポルフィ
リン類分離用吸着剤が提供できる。
本発明のポルフィリン填梢製が雌用吸着剤の形状は自由
に選択でき、例えば、粉状、粒状、等の形状であること
ができる。その表面f3itは約TOO靜/f以上、好
筐しくに約800 nl/ 1以上、例えば約700〜
約L2001d/y、好ましくは約800〜約1.20
0 m’/ f 程蜜である。
に選択でき、例えば、粉状、粒状、等の形状であること
ができる。その表面f3itは約TOO靜/f以上、好
筐しくに約800 nl/ 1以上、例えば約700〜
約L2001d/y、好ましくは約800〜約1.20
0 m’/ f 程蜜である。
ここで言う表rxi横は以下の方法により測定決定する
ものである。
ものである。
すなわち!M脂を筒内へ充てんし、得られた樹脂光てん
筒内へ、それぞれの分子鎖長が確認されている10種類
のポリスチレンのクロロホルム溶液およびスチレンのり
aロホルム溶液を流通させ、それぞれの溶出体積1測定
する。
筒内へ、それぞれの分子鎖長が確認されている10種類
のポリスチレンのクロロホルム溶液およびスチレンのり
aロホルム溶液を流通させ、それぞれの溶出体積1測定
する。
それぞれのポリスチレンは浴出ピークの分子鎖長が10
4A(オングストローム)から10”Aまでの範囲にあ
り、かつ、分子鎖長分布がきわめて狭いものである。
4A(オングストローム)から10”Aまでの範囲にあ
り、かつ、分子鎖長分布がきわめて狭いものである。
分子鎖長(A)および溶出体積F(CC)と筒内圧充て
んした樹脂114’ (f )を用いて次式により表面
積(S−rrl/f)を得る。
んした樹脂114’ (f )を用いて次式により表面
積(S−rrl/f)を得る。
−(1)Vi (oc/r)=(Vtyr−Vn)/W
(2)S4(i/f)=8−17<−to’/(m+w
)i =x l 5 Vi:mAznAの孔容積、 V惰:、常Aのポリスチレンの溶出体m、V%:%Aの
ポリスチレンの溶出体積、S(:惰A〜gtAの表面積
、 惰および覚:分子la長 上記スチレン系単量体及びベンゼン多価カルボン酸アル
ケニルエステル単量体は、夫々、a数穐利用することも
できる。これらの使用tは適宜に選択できるが、好まし
くは、区スチレy系成分含有量が、ジビニルベンゼン及
びスチレンモジくはその官能性誘導体の合、tttに基
いて約30〜約80選着優、より好ましくは約45〜約
70者薯lf、dベン4フ4価カルボン酸アルケニルエ
ステル含有tが、ジビニルベンゼン、該スチレン系成分
及び該アルケニルエステルの合計被に着いて約αl〜約
30重量−1より好ましくは約1〜約10直量嘩である
。1兼的に普通に入手されるジビニルベンゼンは、m−
11t、(f:v−ジビニルベンゼンが約40〜約70
1f%、o−、m−およびアーエチルスチレンが約30
〜約60電量−程、!含有されており、これを上記ジビ
ニルベンゼン及びスチレン系単量体として、そのまま使
用することもできる。
(2)S4(i/f)=8−17<−to’/(m+w
)i =x l 5 Vi:mAznAの孔容積、 V惰:、常Aのポリスチレンの溶出体m、V%:%Aの
ポリスチレンの溶出体積、S(:惰A〜gtAの表面積
、 惰および覚:分子la長 上記スチレン系単量体及びベンゼン多価カルボン酸アル
ケニルエステル単量体は、夫々、a数穐利用することも
できる。これらの使用tは適宜に選択できるが、好まし
くは、区スチレy系成分含有量が、ジビニルベンゼン及
びスチレンモジくはその官能性誘導体の合、tttに基
いて約30〜約80選着優、より好ましくは約45〜約
70者薯lf、dベン4フ4価カルボン酸アルケニルエ
ステル含有tが、ジビニルベンゼン、該スチレン系成分
及び該アルケニルエステルの合計被に着いて約αl〜約
30重量−1より好ましくは約1〜約10直量嘩である
。1兼的に普通に入手されるジビニルベンゼンは、m−
11t、(f:v−ジビニルベンゼンが約40〜約70
1f%、o−、m−およびアーエチルスチレンが約30
〜約60電量−程、!含有されており、これを上記ジビ
ニルベンゼン及びスチレン系単量体として、そのまま使
用することもできる。
共(合反応は、それ自体公知の手法に従って行うことが
でき、闇えば、ジビニルベンゼン、スチレンもしくはそ
の官能性誘導体及びベンゼン多面カルボン酸アルケニル
エステルとを、水性媒体中で懸濁共重合することKよっ
て製造できる。重合開始剤としては、上ml率を体に可
溶性の公知ラジカル重合開始剤が利用でき、例えば、ベ
ンゾイルパーオキサイド、ラウロイルパーオキサイド、
tart−ブチルパーアセテート、tart−ブチルパ
ーピバレート、アゾビスイソブチロニトリルなどを例示
できる。その使用瀘は適宜に選択でき、たとえば約へ1
〜約10重11襲、よシ好ましくは約45〜約70iI
%の如き使用11例示できる。
でき、闇えば、ジビニルベンゼン、スチレンもしくはそ
の官能性誘導体及びベンゼン多面カルボン酸アルケニル
エステルとを、水性媒体中で懸濁共重合することKよっ
て製造できる。重合開始剤としては、上ml率を体に可
溶性の公知ラジカル重合開始剤が利用でき、例えば、ベ
ンゾイルパーオキサイド、ラウロイルパーオキサイド、
tart−ブチルパーアセテート、tart−ブチルパ
ーピバレート、アゾビスイソブチロニトリルなどを例示
できる。その使用瀘は適宜に選択でき、たとえば約へ1
〜約10重11襲、よシ好ましくは約45〜約70iI
%の如き使用11例示できる。
懸濁共重合において、粒状の重合刃を得るためには、分
散剤を用、いることが好ましい。分散剤としては、嬢溶
性塩類、例えば硫酸パリクム、炭酸カルシウムめるいは
シん酸三カルシウムなど、難溶性S機化合物、例えばベ
ントナイトあるいは粘土など、もしくは天然および合成
水m性高分子、例えばデンプン、メチルセルロース、ゼ
ラf7、ポリビニルアルコール、部分ケン化ポリビニル
アルコールあるいはポリアクリルば塙などが使用できる
。分散剤の1は、適宜に選択で酋るが、モノマー混合#
に対して約o、 t−約1011−一、より好ましくは
約α5〜約71%%のμ口き量を例示できる。
散剤を用、いることが好ましい。分散剤としては、嬢溶
性塩類、例えば硫酸パリクム、炭酸カルシウムめるいは
シん酸三カルシウムなど、難溶性S機化合物、例えばベ
ントナイトあるいは粘土など、もしくは天然および合成
水m性高分子、例えばデンプン、メチルセルロース、ゼ
ラf7、ポリビニルアルコール、部分ケン化ポリビニル
アルコールあるいはポリアクリルば塙などが使用できる
。分散剤の1は、適宜に選択で酋るが、モノマー混合#
に対して約o、 t−約1011−一、より好ましくは
約α5〜約71%%のμ口き量を例示できる。
また分散剤に加えて分、次女定則を便用することができ
る0分献安廻剤としては、例えば; ドブフルベンゼン
スルホン酸ソーダその曲の各種界面活性剤を使用するこ
とができる。これら分散剤、あるいはこれに加えて分数
安定剤を使用することにより、懸濁重合において溶媒と
重合成分とが部分的に合体してゲルが大きくなることを
防ぎ、均一なジビニルベンゼン/スチレン系単着体/ベ
ンゼン多価カルボン酸アルケニルエステル共重合体を製
造することができる。また、ゲル粒子の粒径分布が改轡
され、ポルフィリン分離能の優れ次吸7d剤樹脂を得る
ことができる。
る0分献安廻剤としては、例えば; ドブフルベンゼン
スルホン酸ソーダその曲の各種界面活性剤を使用するこ
とができる。これら分散剤、あるいはこれに加えて分数
安定剤を使用することにより、懸濁重合において溶媒と
重合成分とが部分的に合体してゲルが大きくなることを
防ぎ、均一なジビニルベンゼン/スチレン系単着体/ベ
ンゼン多価カルボン酸アルケニルエステル共重合体を製
造することができる。また、ゲル粒子の粒径分布が改轡
され、ポルフィリン分離能の優れ次吸7d剤樹脂を得る
ことができる。
更に、多量の1水を媒体左する懸濁共重合に除しソ、所
望により、ジビニルベンゼン及びベンゼン多価カルボン
酸アルケニルエステルの少なくとも一方の単量体に対し
て良溶媒となるような溶媒を併用し九混合溶媒系を利用
することができる。このような良溶媒の例としては、ジ
ビニルベンゼンに対する良溶媒としてジエチルベンゼン
、トリメチルベンゼン、メチルイソプロピルベンゼンナ
トの如きアルキル置換ベンゼン類が、またベンゼン多価
カルボン酸アルケニルエステルに対するIL溶媒として
tart−イソアミルアルコール、tart−ブチルア
ルコールなどの脂肪族アルコール類を例示することがで
きる0例えば、溶媒としてt#デt−4ノアはルアルコ
ールとジエチルベンゼンとの混合物を用いた場合、こn
らの溶媒は一方のモノマーに対しては良溶媒として慟〈
一方、もう一方の七ツマ−に対しては貧俗媒として働く
ため、それぞれが形成される樹脂粒子にマクロレテイキ
ュラー構造を均等に付与し、全体の多孔性を高めるのに
役立つ。このため、本発明吸曾剤樹脂の膨潤度を押える
のに有効に作用すると共に、該樹脂によりすぐれたポル
フィリン分離能を与えるのに役立つ。
望により、ジビニルベンゼン及びベンゼン多価カルボン
酸アルケニルエステルの少なくとも一方の単量体に対し
て良溶媒となるような溶媒を併用し九混合溶媒系を利用
することができる。このような良溶媒の例としては、ジ
ビニルベンゼンに対する良溶媒としてジエチルベンゼン
、トリメチルベンゼン、メチルイソプロピルベンゼンナ
トの如きアルキル置換ベンゼン類が、またベンゼン多価
カルボン酸アルケニルエステルに対するIL溶媒として
tart−イソアミルアルコール、tart−ブチルア
ルコールなどの脂肪族アルコール類を例示することがで
きる0例えば、溶媒としてt#デt−4ノアはルアルコ
ールとジエチルベンゼンとの混合物を用いた場合、こn
らの溶媒は一方のモノマーに対しては良溶媒として慟〈
一方、もう一方の七ツマ−に対しては貧俗媒として働く
ため、それぞれが形成される樹脂粒子にマクロレテイキ
ュラー構造を均等に付与し、全体の多孔性を高めるのに
役立つ。このため、本発明吸曾剤樹脂の膨潤度を押える
のに有効に作用すると共に、該樹脂によりすぐれたポル
フィリン分離能を与えるのに役立つ。
l@濁共這合は、通常、不活性ガス、調えばチッ素のず
囲気下で行うことが好ましく、重合温度、時間は、重合
開始剤の11#4などにより適宜に1択できるが、例え
ば約5〜約10’C1好tL<は約50〜約100℃橿
変及び例えば約5〜約10時關程度である。
囲気下で行うことが好ましく、重合温度、時間は、重合
開始剤の11#4などにより適宜に1択できるが、例え
ば約5〜約10’C1好tL<は約50〜約100℃橿
変及び例えば約5〜約10時關程度である。
以下、実施例により、不発明吸着列を用いて、本発明方
法によりポルフィリンfA ’v jfl If!分離
する数例を示す。
法によりポルフィリンfA ’v jfl If!分離
する数例を示す。
実施例1
150jの攪拌槽中に、工業用ジビニルペンゼア(Nf
約ssl、残部はエチルビニルベンゼン)toll、1
.2.4ベンゼントリカルボ/酸トリグロペニルエステ
ルIKf、ジエチルベンゼン&0〜、イソアミルアルコ
ール3−、ペンソイルパーオ中サイド5oKII、水1
OOI、りん酸三カル7つ744KJIオよびドデフル
ベンゼンスルフォ7dll−ダ6fを仕込み、攪拌しな
がら90℃で8時間懸濁重合して粒状の架橋重合体を得
た。
約ssl、残部はエチルビニルベンゼン)toll、1
.2.4ベンゼントリカルボ/酸トリグロペニルエステ
ルIKf、ジエチルベンゼン&0〜、イソアミルアルコ
ール3−、ペンソイルパーオ中サイド5oKII、水1
OOI、りん酸三カル7つ744KJIオよびドデフル
ベンゼンスルフォ7dll−ダ6fを仕込み、攪拌しな
がら90℃で8時間懸濁重合して粒状の架橋重合体を得
た。
生成した粒状電合体を口過後、筒内でメタノール、クロ
ロホルム洗浄し、再び口過した後6〇−80℃で減圧乾
燥して、白色不透明な粒状重合体&3〜e4た。
ロホルム洗浄し、再び口過した後6〇−80℃で減圧乾
燥して、白色不透明な粒状重合体&3〜e4た。
生成物を分級して得た区分!0−25^の1性を測定し
たところ、表面積874i/f、ボア容積tycc/l
であった。
たところ、表面積874i/f、ボア容積tycc/l
であった。
この樹脂は1〒40cm−”のカルボニル基にモトづく
赤外吸収があり、1,2.4ベンゼントリカルボン酸ト
リプロペニルエステルが有効にポリマー中に共重合して
くみこまれたことを示している。
赤外吸収があり、1,2.4ベンゼントリカルボン酸ト
リプロペニルエステルが有効にポリマー中に共重合して
くみこまれたことを示している。
他方、ポルフィリン類生産菌アースロバクター・ヒアリ
ナス(微工研蘭寄第3125号)菌株を、イオン交僕純
水1jあたりイソプロピルアルコールtoy、酵母エキ
スLO?、ペプトン&Of1硫酸アンモニウムSat、
リン酸−カリウムα4f、リン酸二ナトリウム15F、
硫酸!グネシウム&Of、硫酸マンガン1017.硫酸
亜鉛10ダ、硫酸鋼!OOμf、二酸化モリブデン10
μf。
ナス(微工研蘭寄第3125号)菌株を、イオン交僕純
水1jあたりイソプロピルアルコールtoy、酵母エキ
スLO?、ペプトン&Of1硫酸アンモニウムSat、
リン酸−カリウムα4f、リン酸二ナトリウム15F、
硫酸!グネシウム&Of、硫酸マンガン1017.硫酸
亜鉛10ダ、硫酸鋼!OOμf、二酸化モリブデン10
μf。
炭酸カルシウムLotおよびL−シスチンα2fを含有
する殺菌した培地250MIt−収容した50〇−三角
フラスコに植菌して30℃で3日間振とう培養した。以
後2〜3日毎にイングロピルアルコールを添加し、培養
17日間で1jの培養液当り85dのイソプロピルアル
コールt−S加した。
する殺菌した培地250MIt−収容した50〇−三角
フラスコに植菌して30℃で3日間振とう培養した。以
後2〜3日毎にイングロピルアルコールを添加し、培養
17日間で1jの培養液当り85dのイソプロピルアル
コールt−S加した。
このときの培養液に蓄積した8カルボン醸ポルフイリン
の濃度tx260ap/I、Tカルボン酸ポルフィリン
80W/1.6カルボン虐ポルフイリン31)IP/j
、5カルボン酸ポルフイリン219/I、4力ルボン酸
ポルフイリン300j%ll/jであった。
の濃度tx260ap/I、Tカルボン酸ポルフィリン
80W/1.6カルボン虐ポルフイリン31)IP/j
、5カルボン酸ポルフイリン219/I、4力ルボン酸
ポルフイリン300j%ll/jであった。
このように培養し之培養液1j?1aOOOGで10分
間遠心分離して菌体等の不溶分を除去し、液相部を得た
。この液相部のplft−16に調幣し沈殿物を1,0
OOGで10分間遠心分離により分離した。得られた沈
殿物を5QQdの2規定塩酸に溶解し、ろ過により不溶
物を除いたあと、水酸化ナトリウムでpH7とした。得
られた溶液を3Iの上記樹脂粒子が充てんされたカラム
に上昇流法で一分間に200117の流速で泥し、ポル
フィリン類を吸着せしめる。連続してpHx2の10チ
メタノール水溶液を流し、8カルボン酸ポルフイリン、
7カルポン酸ポルフイリン、6カルボン酸ポルフイリン
の順序で浴出したそれぞれの両分400dを分画する。
間遠心分離して菌体等の不溶分を除去し、液相部を得た
。この液相部のplft−16に調幣し沈殿物を1,0
OOGで10分間遠心分離により分離した。得られた沈
殿物を5QQdの2規定塩酸に溶解し、ろ過により不溶
物を除いたあと、水酸化ナトリウムでpH7とした。得
られた溶液を3Iの上記樹脂粒子が充てんされたカラム
に上昇流法で一分間に200117の流速で泥し、ポル
フィリン類を吸着せしめる。連続してpHx2の10チ
メタノール水溶液を流し、8カルボン酸ポルフイリン、
7カルポン酸ポルフイリン、6カルボン酸ポルフイリン
の順序で浴出したそれぞれの両分400dを分画する。
次いで、pH7の10チメfi/−ル水溶液を流し、5
カルボン酸ポルフイリン、4カルボン酸ポルフイリンの
順序で溶出したそれぞれの一分を前者について400m
、後者について2jを分画する。それぞれ分取した両分
を塩酸でpH’&2とし、生成した沈殿をろ過して集め
念。得られたポルフィリン固形物は、8カルボン酸ポル
フイリン240ff、?カルボン酸ポルフィリン?1M
g、6カルボン酸ポルフイリン271v。
カルボン酸ポルフイリン、4カルボン酸ポルフイリンの
順序で溶出したそれぞれの一分を前者について400m
、後者について2jを分画する。それぞれ分取した両分
を塩酸でpH’&2とし、生成した沈殿をろ過して集め
念。得られたポルフィリン固形物は、8カルボン酸ポル
フイリン240ff、?カルボン酸ポルフィリン?1M
g、6カルボン酸ポルフイリン271v。
5カルボン酸ポルフイリン19#、4カルボン酸ポルフ
イリン290Ivであり、回収率はそれぞれ12%、8
9嘩、90係、90%、97チであった。
イリン290Ivであり、回収率はそれぞれ12%、8
9嘩、90係、90%、97チであった。
実施例2
ポルフィリン類生並菌アースロノ(フタ−・)くツセン
ス1株(ZF012139)を実施例1と同様にして培
養した結果、培養液中に蓄積したポルフィリン類の濃度
は、8カルボン酸ポルフイ1ノン200v/j、?カル
ボン酸ポルフイリy77ダ/1.6カルボン噴ポルフイ
リン279/j、5カルボン酸ポルフイリン16Q71
.4カルボン1ポルフイリン230ダ/ノであり実翔例
1と同様の操作で分離回収したところ、回収率はそれぞ
れ93191%、88Is、87%、94%であったO 特許出願6 日本石油株式会社 r−=’−代 理 人
弁理士 小田島 平 吉1;−第1頁の続き 0発 明 者 佐藤鉄夫 横浜市港北区高田町477の27
ス1株(ZF012139)を実施例1と同様にして培
養した結果、培養液中に蓄積したポルフィリン類の濃度
は、8カルボン酸ポルフイ1ノン200v/j、?カル
ボン酸ポルフイリy77ダ/1.6カルボン噴ポルフイ
リン279/j、5カルボン酸ポルフイリン16Q71
.4カルボン1ポルフイリン230ダ/ノであり実翔例
1と同様の操作で分離回収したところ、回収率はそれぞ
れ93191%、88Is、87%、94%であったO 特許出願6 日本石油株式会社 r−=’−代 理 人
弁理士 小田島 平 吉1;−第1頁の続き 0発 明 者 佐藤鉄夫 横浜市港北区高田町477の27
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 L(1)少なくとも二種のポルフィリン類を含有する培
養ずみプロスの液相部のpHを約λ5、〜約4KyI4
)iシて、形成された該ポルフィリン類含有固形分を採
取し、 (ii)該固形分の水性酸溶液f:調製して、その不溶
物を除去したf4液相のpHを約6〜約8に調節し、 (―)該pHI4節した溶液を、ジビニルベンゼン、ス
チレン本しくけその官能性誘導体及びのアルケニル基を
示し、nFi2もしくは3を示す、で表わされるベンゼ
ン多唾カルボン酸アルケニルエステルより導かれた共重
合体樹脂であって且つその表面積が約70OFF//f
以上の樹脂と接触させて、訳樹脂KrJポルフィリン類
を吸増させ、 (1v)次いで、溶出剤により溶出させて各ポルフィリ
ン画分を取得すること、 を特徴とするポルフィリン類の分離方法。 2 該ポルフィリン類が、カル・ボン酸基を、夫々、4
個、5個、642!、71固もしくVilN固有するフ
リーの酸の形のポルフィリン類の少なくとも二種を含有
する混合物であることを特徴とする特許請求の範囲第1
項記載の方法。 & 咳培譬ずみプロスが、゛アースロバフタ−属に属す
るポルフィリン生産菌を培養することにより形成された
培養ずみプロスであることをITj徴とする特許請求の
範囲@1項もしくは第2項記−の方法。 4 faポルフィリン生生産水、アースロパクター量ヒ
アリナス、アースロバフタ−・パラセンス及びそれらの
変異ないしR1菌よりなる群からえらばれた該生産菌で
あることを特徴とする特許6★求の#囲第1項紀械の方
法。 & a溶出剤が低級アルコールの水性溶液である特許請
求の範囲第1項記載の方法。 & 該共重合本樹脂のスチレンもしくはその官能性誘
導体成分含有酸が、該ジビニルベンゼン及び該スチレン
もしくはその官能性誘導体の合計量に基いて約30〜約
80fi量係であり、且つ該ベンゼン多価カルボン酸ア
ルケニルエステル成分含有量が、該ジビニルベンゼン、
狽スチレンモジくはその官能性誘導体及び該ベンゼン多
価カルボン酸アルケニルエステルの合計量に氷いて約α
1〜約30重量%である特許請求の範囲第1項記載の方
法。 7、 ジビニルベンゼン、スチレンもしくハそのRdC
,〜C16のアルケニル基を示し、nは2もしく#i3
を示す、〕で表わされるベンゼン多価カルボン酸アルケ
ニルエステルより導かれた共重合本樹脂であって、該樹
脂の表面積が約?OOW?/f以上であり、該樹脂のス
チレンもしくはその官能性誘導体成分含有量が、該ジビ
ニルベンゼン及び該スチレンもしくはその官能性誘導体
の合計量に基いて約30〜約80重量嘩であり、且つ該
ベンゼン゛多価カルボン酸アルケニルエステル成分含有
量が、該ジビニルベンゼン、該スチレンモジくはその官
能性誘導体及び該ベンゼン多価カルボン酸アルケニルエ
ステλの合計量に基いて約α1〜約30重量嘩であり、
少なくとも二橿のポルフィリン類含有水性溶液から各ポ
ルフィリンを分離するのに使用することを特徴とするポ
ルフィリン類分離用吸層剤。
Priority Applications (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP56121359A JPS5823791A (ja) | 1981-08-04 | 1981-08-04 | ポルフイリン類の分離方法及びそれに用いる樹脂吸着剤 |
US06/404,054 US4436663A (en) | 1981-08-04 | 1982-08-02 | Process for separating porphyrins |
EP82107011A EP0071966A3 (en) | 1981-08-04 | 1982-08-03 | Process for separating porphyrins and resin adsorbent used therefor |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP56121359A JPS5823791A (ja) | 1981-08-04 | 1981-08-04 | ポルフイリン類の分離方法及びそれに用いる樹脂吸着剤 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS5823791A true JPS5823791A (ja) | 1983-02-12 |
Family
ID=14809302
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP56121359A Pending JPS5823791A (ja) | 1981-08-04 | 1981-08-04 | ポルフイリン類の分離方法及びそれに用いる樹脂吸着剤 |
Country Status (3)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4436663A (ja) |
EP (1) | EP0071966A3 (ja) |
JP (1) | JPS5823791A (ja) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE68920126T2 (de) * | 1988-11-23 | 1995-05-11 | Cytec Tech Corp | Poröse Polymerperlen und Verfahren. |
US5286887A (en) * | 1991-09-24 | 1994-02-15 | Regents Of The University Of California | Polymers of macrocyclic metal chelators and methods for the preparation and use thereof |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5668398A (en) * | 1979-11-07 | 1981-06-09 | Nippon Oil Co Ltd | Prduction of uroporphyrin 3 |
JPS5678595A (en) * | 1979-11-29 | 1981-06-27 | Nippon Oil Co Ltd | Preparation of coproporphyrin 3 |
JPS56134994A (en) * | 1980-03-25 | 1981-10-22 | Nippon Oil Co Ltd | Separating and recovering method of porphyrin |
US4383110A (en) * | 1980-11-29 | 1983-05-10 | Nippon Oil Company, Ltd. | Process for purifying and separating vitamin B12 |
-
1981
- 1981-08-04 JP JP56121359A patent/JPS5823791A/ja active Pending
-
1982
- 1982-08-02 US US06/404,054 patent/US4436663A/en not_active Expired - Fee Related
- 1982-08-03 EP EP82107011A patent/EP0071966A3/en not_active Withdrawn
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP0071966A3 (en) | 1984-08-22 |
EP0071966A2 (en) | 1983-02-16 |
US4436663A (en) | 1984-03-13 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US3531463A (en) | Enrichment and/or separation of an organic compound by adsorption processes | |
JPH044305B2 (ja) | ||
EP0778084B1 (en) | Absorbent, process for producing the same, and method of treating fruit juice | |
JPH0626667B2 (ja) | サイクロデキストリン吸着材及びその用途 | |
CN108636367A (zh) | 一种吸附PPCPs的磁性壳聚糖复合材料及制备方法 | |
JPS5823791A (ja) | ポルフイリン類の分離方法及びそれに用いる樹脂吸着剤 | |
CN110845645B (zh) | 一种功能基化后交联树脂及其制备方法和应用 | |
US4198396A (en) | Dissolution of gallstones | |
JPS59187793A (ja) | タイロシンを精製する改良方法 | |
US4383110A (en) | Process for purifying and separating vitamin B12 | |
JP3992497B2 (ja) | 高純度アカルボース製造方法 | |
JP2001026567A (ja) | シキミ酸の精製方法 | |
Dutta et al. | Adsorption equilibrium of 7-aminodeacetoxy cephalosporanic acid–cephalexin mixture onto activated carbon and polymeric resins | |
US5731395A (en) | Functional group-containing porous resin and a process for its preparation | |
JPS6143092B2 (ja) | ||
JPS6045937B2 (ja) | 蛋白質の吸着剤 | |
JPS6324519B2 (ja) | ||
JP3509423B2 (ja) | 吸着剤、その製造方法及び果汁の処理方法 | |
JP2543698B2 (ja) | ビリルビン吸着剤 | |
JPH1059863A (ja) | アンチトロンビンiiiの分離精製方法 | |
JPH0566379B2 (ja) | ||
JPH058189B2 (ja) | ||
GB2118566A (en) | Anthocyanin colorant from grape pomace | |
RU2096464C1 (ru) | Способ получения цитохрома с | |
KR0142013B1 (ko) | 합성 흡착제의 제조방법 |