JPS58212793A - Compound analogous to macbecin and its preparation - Google Patents

Abstract

PURPOSE:To prepare a compound analogous to macbecin, a novel antibiotic showing activity against Gram-positive bacteria, fungi, and protozoans, by cultivating a microorganism belonging to the genus Actinosynnema. CONSTITUTION:A microorganism such as Actinosynnema sp.No.C-33196 strain (FERM-P 166) belonging to the genus Actinosynnema, capable of producing a compound analogous to macbecin, is innoculated into a medium, cultivated under aerobic conditions at about 6.5-7.5 pH at about 20-32 deg.C for about 48-96hrs, and antibiotic C-33196E-6, E-6-R, E-7, or E-7-R shown by the formula (one of R1, R2, and R3 is methyl, the other two are H; X is 2,5-dioxo-3,6-cyclohexadiene-1,3- diyl, 2,5-dihydroxy-1,3-phenylene) or their mixture is collected from the culture.

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、マクペシン類縁化合物およびその製造法に関
する、 本発明者らは、新規な抗生物質の探索を目的として、多
数の微生物を土■などより採空し、それらが生産する抗
生物質を検索したところ、それら微生物の培養物中にグ
フム陽性細菌、真菌、原虫に対して活性を示す新規抗生
物質が生産されていることを見い出し、これを精製単離
し、その性状から、当該抗生物質がこれ迄にない新しい
抗生物質であることを認め、これらを抗生物質Ｃ−３３
１９６Σ−６、Ｉｃ−６−Ｒ，Ｅ−７およびＥ−７−Ｒ
と称することにした。またこれら化合物は、マクベシン
類縁化合物であることを見い出した。DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION The present invention relates to macpescin related compounds and methods for producing the same. The present inventors collected a large number of microorganisms from soil etc. for the purpose of searching for new antibiotics, and When we searched for antibiotics produced by these microorganisms, we discovered that a new antibiotic was produced in the cultures of these microorganisms and showed activity against Guhum-positive bacteria, fungi, and protozoa.We purified and isolated this, and investigated its properties. , recognized that the antibiotics in question are new antibiotics, and designated them as antibiotic C-33.
196Σ-6, Ic-6-R, E-7 and E-7-R
I decided to call it. It has also been found that these compounds are macbecin analogs.

これらの知見に基づいてさらに研究を重ねた結果、本発
明を完成したつ 本発明は、（１）　　一般式 （式中、Ｒ工、Ｒ２およびＲ３の一つはメチル、残示す
。）で示され、下記の特性を有する抗生物質Ｃ−３３１
９６Ｅ−６，Ｅ−６−Ｒ，Ｅ−７，１−７−Ｒまたはそ
れらの少かくとも二種以上を含む混合物： （Ａ）　　抗生物＊Ｃ−３３１９６ｂ−６：（１）旋光
、ｌｊ　：　（ａ）９　＋２５８．　ｓ°±２０°（ｃ
ｍ０、５　、　ＣＨＣｌ３　） （１）紫外部吸収スペクト／Ｌ／： λＭｅｎｕ°”２７３ｎｍ−１：２　ｎｔａ　（１４，
Ｚ’４５４±４５）ｍａｘ ”ｍａＸ３９７ｎｍ±２　ｎｍ　（Ｅ　（ｃｍ　５０．
３±５）（１）赤外部吸収スペクトμ、主要ピーク（Ｃ
）：１７２０．１７０５．　１６５０．　１ｆｉｌＯ，
’１５０５゜１３８０、１３２５．１２６５．１２１０
．１０９０゜１０４（１ （Ｂ）　　抗生物質Ｃ−３３１９６１’ニー６−Ｒ：（
１）旋光度：　Ｃａ）’ｄ　＋３７．　ｓ°±４°（ｃ
　＝０．５　＋ＭｅＯ１１） （１）紫外部吸収スペクト／Ｌ／： λｍＡｘ２５５ｎｍ±２ｎｍ　（１に３３７±３０）ｅ
ｎｕ ス””’　３０７ｎｍ±２ｎｍ　（ａ）二９１−←９）
ｍａｘ Ｉ赤外部吸収スペクトル、主要ピーク（、ｍ＝）：１７
２０、１６５０．１６００．１５３５．１４６０゜１３
ｇ０，１３２０．１０９０．１０４０．　１０１０；（
Ｃ）　　抗生物質Ｃ−３３１９６Ｅ−７：（１）旋光度
：〔α〕￥４−３７．４°（４°（ｃ＝ｏ、ｓ＋ＣＲＣ
１３） （１）紫外部吸収スペクト〜： λＭ＠０Ｈ２７４ｎｍ　　＋　　２ｎｍ　　（１４，Ｗ
　５０２±５０）ｍａｘ 、ＭｅＯＥｉ　３ｇ６ｎｍ±２ｎｍ　（Ｋｌ二５９−８
±６）１！ｌａ！ ■赤外部吸収スペクトル、主要ピーク（イ１）：１７２
５、　１６７０．　１６５０．　１６０５．　１５００
゜１３８０．１３２５，１２６０，１２０５，１１５０
゜１０９５．ｌ０３５＋ （Ｄ）　　抗生物質Ｃ−３３１９６に−７−Ｒ：（１）
旋光度：　（α）％’＋ｔｓ、　６°±２°（ｃ＝０．
５＋ＭｓＯＲ） （１）紫外部吸収スペクトｌｖ； 声０Ｈ２５０ｎＩＴ＋　±　２　ｎ　ｍ　　（Ｍ　）Ｃ
ｌ　３０５土３０）ａＸ ｅｎｕ ”Ｆｌｌａｘ　　３１５ｎｍ±２　ｎ　ｍ　（Ｅ　１ｃ
ｍ　６　Ｂ±７）Ｉ）赤外部吸収スペクトμ、主要ピー
ク（ｃａｌ−１）：１７１０、　１６４０，１６００，
１４８５，１４５５゜１３８０、１３１０．　１２５０
．　１０９０．　１０４０、および（２）アクチノシン
ネマ属に属する抗生物質Ｃ−３３１９６に−６，！ｌニ
ー６−Ｒ，Ｉ−７および／またはＥ−７−Ｒを生産する
能力を有する微生物を培地に培養し、培養物から該化合
物を採取することを特徴とする抗生物質Ｃ−３３１９６
Ｅ６＊Ｅ　　６　　Ｒ，ｌニー７および／またはＥ−７
−Ｒ（ｉＤＩｌｌｉ造法である。As a result of further research based on these findings, the present invention was completed, and the present invention is as follows: Antibiotic C-331, which has the following properties:
96E-6, E-6-R, E-7, 1-7-R or a mixture containing at least two or more thereof: (A) Antibiotic *C-33196b-6: (1) Optical rotation, lj : (a)9 +258. s°±20°(c
m0,5, CHCl3) (1) Ultraviolet absorption spectrum/L/: λMenu°"273nm-1:2 nta (14,
Z'454±45) max "max397nm±2 nm (E (cm 50.
3±5) (1) Infrared absorption spectrum μ, main peak (C
):1720.1705. 1650. 1filO,
'1505°1380, 1325.1265.1210
．． 1090°104(1 (B) Antibiotic C-331961'nee 6-R:(
1) Optical rotation: Ca)'d +37. s°±4°(c
=0.5 +MeO11) (1) Ultraviolet absorption spectrum/L/: λmAx255nm±2nm (337±30 in 1)e
nu s""' 307nm±2nm (a) 291-←9)
max I infrared absorption spectrum, main peak (, m=): 17
20, 1650.1600.1535.1460°13
g0,1320.1090.1040. 1010;(
C) Antibiotic C-33196E-7: (1) Optical rotation: [α] ¥4-37.4° (4° (c=o, s+CRC
13) (1) Ultraviolet absorption spectrum ~: λM@0H274nm + 2nm (14,W
502±50)max, MeOEi 3g6nm±2nm (Kl259-8
±6)1! la! ■Infrared absorption spectrum, main peak (I1): 172
5, 1670. 1650. 1605. 1500
゜1380.1325,1260,1205,1150
゜1095. l035+ (D) Antibiotic C-33196-7-R: (1)
Optical rotation: (α)%'+ts, 6°±2° (c=0.
5+MsOR) (1) Ultraviolet absorption spectrum lv; Voice 0H250nIT+ ± 2 nm (M)C
l 305 soil 30) aX enu ”Fllax 315nm±2 nm (E 1c
m 6 B ± 7) I) Infrared absorption spectrum μ, main peak (cal-1): 1710, 1640, 1600,
1485, 1455° 1380, 1310. 1250
．． 1090. 1040, and (2) -6 to C-33196, an antibiotic belonging to the genus Actinosynnema! Antibiotic C-33196, characterized in that a microorganism capable of producing I-6-R, I-7 and/or E-7-R is cultured in a medium, and the compound is collected from the culture.
E6*E 6 R, l knee 7 and/or E-7
-R (iDIlli manufacturing method.

本明細書においては、抗生物質Ｃ−３３１９６Ｆ−６を
Ｃ−３３１９６に−６あるいは単にＥ−６と、抗生物質
Ｃ−３３１９ｆｌ−６−ＲをＣ−３３１９６Ｅ−６−Ｒ
あるいは単にｌ−６−Ｒと抗生物質Ｃ−３３１９６に−
７をＣ−３３１９６Ｅ−７あるいは単にＥ−７と、抗生
物＊Ｃ−３３１９６Ｅ−７−ＲをＣ−３３１９６１：ｄ
いは単にＥ−７−Ｒとそれぞれ称するものとする。In this specification, the antibiotic C-33196F-6 is referred to as C-33196-6 or simply E-6, and the antibiotic C-3319fl-6-R is referred to as C-33196E-6-R.
Or simply l-6-R and antibiotic C-33196-
7 as C-33196E-7 or simply E-7, antibiotic *C-33196E-7-R as C-331961:d
or simply referred to as E-7-R.

また、抗生物質Ｃ−３３１９６Ｅ−６、Σ−６−Ｒ、Ｉ
−７およびＥ−７−Ｒを［抗生物’ｆｌｃ−３３１９６
Ｊと総称することもある。In addition, antibiotics C-33196E-6, Σ-6-R, I
-7 and E-7-R [antibiotic'flc-33196
Sometimes referred to collectively as J.

マクペンンについては、前記溝曲式（１）において、Ｒ
工、Ｒ２およびＲ３がメチμでありＸがすｉ マクペシンｌと称されている〔特開昭５３−１２１７０
４号公報、特開昭５３−１２１７０５号公報゛、テトツ
ヘドロン・レターズ（ＴｅｔｒａｈｓｄｒｏｎＬｅｔｔ
ｅｒｓ　）第２１巻第３０９頁１９８０年、テトラヘド
ロン（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ）第３７巻Ａ６．第１１
２３頁１９８１年参照〕。For Macpenn, in the groove equation (1), R
, R2 and R3 are methi μ, and it is called macpecin l [JP-A-53-12170
4, Japanese Patent Application Laid-Open No. 121705/1983, Tetrahsdron Letters
ers ) Vol. 21, p. 309, 1980, Tetrahedron Vol. 37, A6. 11th
See page 23, 1981].

本発明方法において使用される微生物は、アクチノシン
ネマ（Ａｃｔｉｎｏｓｙｎｎｅｍａ　）Ｍに属し、抗生
物質Ｃ−３３１９６Ｅ−６，１ニー６−Ｒ，Ｅ−７およ
び／またはｌ−７−Ｒを生産する能力を有する微生物で
あれば何れでもよい。その具体例としては、たとえば、
アクチノシンネマｓｐ−＾ｃ−３３１９６株（以下、１
−Ｃ−３３１９６株」と略称することもある。）が挙げ
られる。The microorganism used in the method of the present invention belongs to Actinosynnema M and has the ability to produce antibiotics C-33196E-6, 1-6-R, E-7 and/or 1-7-R. Any is fine as long as it is. As a specific example, for example,
Actinosynnema sp-^c-33196 strain (hereinafter referred to as 1
-C-33196 strain". ).

Ｃ−３３１９６株の分類学的諸性質をシャーリングおよ
びゴツトリープの方法〔インターナシ式％式％ ３ 頁〜３４０頁、１９６６年）〕に準じて検討し、２８℃
２１日間にわ九って観察した結果は下記の通シである。The taxonomic properties of strain C-33196 were examined according to the method of Schirling and Gottlieb [Internashi formula % formula % 3-340, 1966], and the
The results of the 21-day observation are as follows.

１）形態的特徴 両生菌糸は無色ないし淡黄または橙黄色を示し、寒天培
地上および液体培地中ともによく伸長し、分岐する。基
生菌糸の直径の多くはＯ’−５〜１゜２μｍであり、培
養後期に桿菌状、長稈ρ１状または分岐した菌糸状に分
断する。水閘は、種々の分　　。1) Morphological characteristics Amphibiotic hyphae are colorless to pale yellow or orange-yellow, elongate and branch well both on agar and liquid media. Most of the basal hyphae have a diameter of 0'-5 to 1.2 μm, and in the late stage of culture, they divide into rod-like, long-culm-like, or branched hyphae-like forms. There are various types of water locks.

類用培地上でよく生育し、気菌糸は共生阿糸上に発育す
るが、多くの束状体（５０〜１８（ｌｙｎＸ４００〜１
５００ｚｚｍ　）を形成し、それらの上に発育している
ようにＭＭされることが多い。気菌糸の形状の多くは屈
曲状またはに線状を示し、まれにゆるい螺旋状を示すも
のも見られる。水閘の成熟した培養を検鏡すると胞子が
連鎖状になっていると考えられるものは少なく、いわゆ
る分生子まだは胞子の形成は少ない。それらの培養表面
から採取した菌懸濁液について検鏡した所、長楕円形（
０，５〜１．２μｍ　ｘ４．８〜６．８μｍ）および楕
円形（０，８〜１．２１１ｍ　Ｘｌ、５〜４μｍ）の分
裂細胞または分節胞子様のものが多く観察され、電子顕
微鏡による観察ではその表面は平滑であった。また気菌
糸の発育は一般的に貧弱であシ多くの培地上では３〜７
日培＊までは比較的発育しているが、１０日以上培養す
ると観察されなくなることがある。It grows well on a similar medium, and aerial mycelia grow on symbiotic amycetes, but many fascicles (50-18 (lynX400-1)
500zzm) and are often MM as growing on them. Most of the aerial hyphae are curved or linear, and in rare cases, they are loosely spiral. If you examine a mature culture of water spores under a microscope, there are few cases where spores are thought to be chained, and there are few so-called conidia. When we examined the bacterial suspension collected from the culture surface under a microscope, we found that it had an oblong shape (
Many dividing cells or segmented spore-like cells (0.5-1.2 μm x 4.8-6.8 μm) and oval (0.8-1.211 m Xl, 5-4 μm) were observed, and were observed using an electron microscope. Its surface was smooth. In addition, the growth of aerial mycelia is generally poor, and on many media, 3 to 7
Although the cells are relatively grown up to a daily culture, they may no longer be observed if the cells are cultured for more than 10 days.

成熟した気菌糸を液体培地に浸すと１５〜３０分後に運
動性の細胞が遊離する。これらの運動性を有する細胞を
電子顕微鏡によって観察すると、それらの細胞周辺に長
い周毛性のべん毛が観察される。水閘は液体培地で培養
すると、その後期に時として多形態の断裂菌糸を生じる
。断裂した菌糸の中には運動性を有するもの４認められ
る。When mature aerial hyphae are immersed in a liquid medium, motile cells are released after 15 to 30 minutes. When these motile cells are observed using an electron microscope, long pericytal flagella are observed around the cells. When water spores are cultured in a liquid medium, pleomorphic fractured hyphae sometimes occur in the later stages. Four motile hyphae were observed among the torn hyphae.

２）菌体組成 本菌株を工８ＰＡＩの改変培地中で２８℃、６６〜９０
時間振壺培養して、十分生育し、静止期になった菌体を
集め洗滌した。上記菌体をビー・ベラカーラの方法〔ア
ブフィト・マイクロバイオロジー（Ａｐｐｌｉｅｄ　Ｍ
ｌａｒｏｂｌｏｌｏｇｙ　）　、　１２巻、４２１頁、
１９６４年〕およびエム・ビー・／Ｌ／Ｖパリニーの方
法〔ジャーナル・オプ・ラボラトリ−・アンド・クリ二
カμ・メデイシン（Ｊｏｕｒｎａｌｏｆ　Ｌａｂｏｒａ
ｔｏｒｙ　ａｎｄ　Ｃ１１ｎｉｃａｌ　Ｍｅｄｉｃｉｎ
ｅ　）　７１巻、９３４頁、１９６８年〕に従って菌体
細胞中のジアミノピメリン酸および糖組成を検し九結果
、前者はメソ体であることが認められ、後者については
ガフクトースに相当するスポットの存在が認められた。2) Bacterial composition This bacterial strain was incubated at 28°C at 66-90°C in a modified 8PAI medium.
The cells were cultured in a shaking bottle for a period of time, and the cells that had grown sufficiently and reached the stationary phase were collected and washed. The above bacterial cells were collected using the B. Veracara method [Abphyto Microbiology (Applied M
larobology), vol. 12, p. 421,
1964] and M.B./L/V Parigny's method [Journal of Laboratory and Clinica μ Medicine.
tory and C11nical Medicine
e) Vol. 71, p. 934, 1968], the diaminopimelic acid and sugar compositions in the bacterial cells were examined and the former was found to be meso, while the latter was found to have spots corresponding to gafctose. Admitted.

またビー・ベラカーらの方法〔アブフィト・マイクロバ
イオロジー（Ａｐｐｌｉｅｄ　Ｍｉｃｒｏ−ｂｉｏｌｏ
ｇ７　）　１７巻、２３６頁、１９６５年〕に従って細
胞壁を調製し、ジアミノピメリン酸、糖およびアミノ酸
を検すると以下の通シであった。すなわちジアミノピメ
リン酸はメソ体が検出され、糖は多量のガツクトーヌの
存在訳゛認められたが、アブビノースは検出されなかつ
九。またアミノ酸についてはグルタミン酸、アラニンは
明瞭に検出されたが、リジン、グｙｙンは極く微量しか
検出されなかった。即ち、細胞壁タイプ■に属する菌株
である。In addition, the method of B. Belaka et al. [Applied Micro-biolo
The cell wall was prepared according to the following method (G7) Vol. 17, p. 236, 1965], and diaminopimelic acid, sugars and amino acids were tested, and the results were as follows. In other words, the meso form of diaminopimelic acid was detected, and the presence of a large amount of gactone was observed in the sugar, but no abbinose was detected. Regarding amino acids, glutamic acid and alanine were clearly detected, but only trace amounts of lysine and gyny were detected. That is, it is a strain belonging to cell wall type ①.

３）分類用培地上の諸性質 本菌株は各種培地上で、いずれも比較的よく発育し、そ
の両生菌糸は培養初期無色ないし淡黄色で、その後、淡
黄褐色または黄褐色を示す。またほとんどの分類用培地
中に可溶性色素を生成しない。気菌糸社粉状で、一般に
は中程度に発育し、白色ないし黄色または淡黄褐色を示
す。これらの気菌糸は多くの培地上では侵期間（約２１
１ｉ間以上）培養すると消失した状態となシ、両生菌糸
表面が光沢を帯びて来る。本菌株の各種分類用培地上に
おける諸性状はｔＲ１表に示した通りである。3) Properties on classification media This strain grows relatively well on various media, and its amphiphilic hyphae are colorless to pale yellow at the initial stage of culture, and then turn pale yellowish brown or yellowish brown. It also does not produce soluble pigments in most sorting media. Aerial mycelia are powdery, generally medium-grown, and white to yellow or pale yellowish brown in color. These aerial mycelia have a invasive period (approximately 21
When cultured for 1 i or more, the mycelia disappear and the surface of the amphiphilic mycelia becomes glossy. The properties of this strain on various classification media are shown in the tR1 table.

第１表　Ｃ−３３１９６株の分類用培地上での諸性質イ
）シュークローズ・ナイトレート寒天培地生育（Ｇ）：
中程度、薄く発育、淡黄色（２ｃａ）”気菌糸（ＡＭ）
　：貧弱、白色 可溶性色素（ｓｐ）　：なし 口）グリセロール・ナイトレート寒天培地Ｇ：中程度、
淡黄色（２ｃａ）” λＭ：貧弱、白色 ＳＰ：なし ノ９　グルコース・アスバッギン寒天培地Ｇ：中程度、
黄色（３ｅａ）”、束状体形成ＡＭ：貧弱、淡黄色（３
ｅａ）” ＳＰ：なし →　グリセロール・アスパフギン寒天培地Ｇ：中程度、
淡黄色（２（！ＦＬ　）“１束状体形成ＡＭ：貧弱、白
色ないし淡黄色（２ｃａ）“ＳＰ：なし ホ）栄養寒天培地 Ｇ：豊富、黄色（３１ｐＬ）” ＡＭｚなし ＳＰ：なし へ）力μシウム・マレート寒天培地 Ｇ：貧弱、淡黄色（２ｃａ）” ＡＭ：貧弱、白色 ＳＰ＝なし ト）酵母エキス・麦芽エキス寒天培地 Ｇ：豊富、黄色（３１ａ）” ＡＭ：貧弱、白色 ８Ｐ：なし チ）オートミール寒天培地 Ｇ：中程度、淡い小麦色（２ｅａ）”、束状体形成ＡＭ
　：ｊｔ弱、白色 ８Ｐ：なし す）無機塩・スターチ寒天培地 Ｇ：中程度、淡黄色な旨し黄色（２ｃａまたは３ｅａ）
” ＡＭ：貧弱、淡い小麦色（２ｅａ）” ＳＰ：なし ヌ）ペプトン・酵母エキス・鉄寒天培地Ｇ：中程度、黄
色（３１ａ）” λＭ：なし ＳＰ：なし ル）チロシン寒天培地 Ｇ：中程廣、黄色（３１ａ）”、束状体形成ＡＭ：貧弱
、白色 ＳＰ：なし 傘：カッ−・ハーモニー畢マニュアル・第４版（コンテ
イナー・ノーポレーシ噌ン・オグ・アメリカ、１９５８
年発行）による色名記号４）生理的性質 本菌株の生理的性質は第２表に示しだ通りである。すな
わち生育温度範囲は１２℃ないし３５℃また寒天培地（
ＩＳＰ應２）上でよく生育する温度範囲、は１６℃ない
し３２℃である。Table 1 Properties of C-33196 strain on classification medium a) Growth on sucrose nitrate agar medium (G):
Medium, thin growth, pale yellow (2ca) "Aerial mycelium (AM)"
: Poor, white soluble pigment (sp) : None) Glycerol nitrate agar medium G: Moderate,
Pale yellow (2ca) λM: poor, white SP: none 9 Glucose-asbaggin agar medium G: moderate,
yellow (3ea)", fascicle formation AM: poor, pale yellow (3ea)
ea)” SP: None → Glycerol Aspafugin Agar G: Medium;
Pale yellow (2 (!FL) "1 fascicle formation AM: Poor, white to pale yellow (2ca)" SP: None) Nutrient agar medium G: Rich, yellow (31 pL) "No AMz SP: To none) Yeast extract/malt extract agar medium G: rich, yellow (31a) AM: poor, white 8P: None) Oatmeal agar medium G: medium, light wheat color (2ea), fascicle formation AM
:jt weak, white 8P: eggplant) Inorganic salt/starch agar medium G: medium, pale yellow delicious yellow (2ca or 3ea)
"AM: Poor, light wheat color (2ea)" SP: None peptone/yeast extract/iron agar medium G: Medium, yellow (31a) "λM: None SP: None) Tyrosine agar medium G: Medium Wide, yellow (31a)", bundle formation AM: poor, white SP: none Umbrella: Kak-Harmony Bimanual, 4th edition (Container No Poles, OG America, 1958)
4) Physiological properties The physiological properties of this strain are as shown in Table 2. In other words, the growth temperature range is 12℃ to 35℃ and agar medium (
The temperature range at which it grows well on ISP 2) is 16°C to 32°C.

第２表　Ｃ−３３１９６株の生理的性状生育温度範囲：
１２℃〜３５℃ 気菌糸着生温度：１６℃〜３２℃ ゼラチン液化：陽性 でん粉加水分解：陽性 硝酸塩還元能：陽性 ミルク・ペプトン化：陽性 ミルク・凝固：陰性 カゼイン分解能：陽性 メラニン様色素形成：陰性 チロシン分解能：陽性 キサンチン分解能：陰性 ヒポキサンチン分解能：陰性 リゾチーム耐性：陽性 食塩耐性：２優 ５）各種炭素源の利用性 アスバヲギン０．０５％、リン酸第２カリウム０．０５
％、硫酸マグネシウムＱ、０２ｇ６．硫酸第一鉄０．０
０１％、硫酸アンモニウム０．１％、寒天２％を含む基
礎培地を用いて各種炭素源の利用性を調べ、それらの結
果を第３表に示した。Table 2 Physiological properties of C-33196 strain Growth temperature range:
12°C to 35°C Aerial mycelial growth temperature: 16°C to 32°C Gelatin liquefaction: Positive starch hydrolysis: Positive nitrate reducing ability: Positive Milk/Peptonization: Positive Milk/Coagulation: Negative Casein decomposition ability: Positive Melanin-like pigment formation: Negative tyrosine resolution: Positive xanthine resolution: Negative hypoxanthine resolution: Negative Lysozyme resistance: Positive Salt tolerance: 2 Excellent 5) Utilization of various carbon sources Asbawogin 0.05%, dipotassium phosphate 0.05
%, magnesium sulfate Q, 02g6. Ferrous sulfate 0.0
The usability of various carbon sources was investigated using a basal medium containing 0.1% ammonium sulfate, 0.1% ammonium sulfate, and 2% agar, and the results are shown in Table 3.

ｔ４３表　Ｃ−３３１９６株の炭素源利用性炭　素源　
　生育　　　炭素　源　　生育Ｄ−キシローヌ　　廿　
　　トレハロース　　　什し−アヲビノース　士　　　
フフイノース　　　廿り−グ〃ノーヌ　　廿　　　メリ
ビオース　　　廿り−ガヲクトース　＋１　　１−イノ
シト−μ　±Ｄ−フヲクトース　廿　　　Ｄ−ソルビト
ール　±Ｌ−フムノーヌ　　＋　　　Ｄ−マンニド−〜
　→トＤ−マンノース　　廿　　　グリセロール　　　
＋シュークロース　　廿　　　可溶性でン粉　　　　せ
マμドース　　　　＋　　　対　照　　　　　　士ヲク
トース　　　　朴 注：４＋　豊富に生育する ＋　中程度に生育する 土　僅かに生育する ６）その他の諸性質 前述「２）菌体組成」Ｋ示した方法で菌体を集め、これ
らをジエー・マーマーらの方法〔ジャーナル・オグ・モ
レキュラー・バイオロジー（Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｍ
ｏ１ｅｃｕｌａｒ　Ｂｉｏｌｏｇｙ　）　３巻、２０８
頁、１９６１年〕に準じてＤＮＡを調製し、Ｔ）Ｎｋの
ａ−Ｃ（グアニン−シトシン）含敞を検すると約７２モ
／Ｌ’５６であった。t43 table Carbon source usability of C-33196 strain
Growth Carbon Source Growth D-xylone 廿
Trehalose - Awobinose
Fuphynose 廿ri-gu〃nonu 廿 melibiose 廿ri-gawoctose +1 1-inocyto-μ ±D-phyctose 廿 D-sorbitol ±L-humunone + D-mannide-~
→D-mannose 廿 glycerol
+ Sucrose 廿 Soluble starch Sema μ dose + Control octose Note: 4 + Grows abundantly + Grows moderately in soil Slightly grows 6) Other properties (2) Bacterial body composition mentioned above Bacterial cells were collected using the method shown in K, and these were collected using the method of J. Marmer et al. [Journal of Molecular Biology (Journal of M
o1ecular Biology) Volume 3, 208
The DNA was prepared according to the method of T)Nk, 1961], and the a-C (guanine-cytosine) content of T)Nk was about 72 mo/L'56.

本菌株の栄養菌糸をグラム染色すると陽性であった。Gram staining of the vegetative hyphae of this strain was positive.

以上述べ九〇−３３１９６株の諸性質をニス・ニー・ワ
ックスマン著、ジ・アクチノミセテス（Ｔｈｅ　Ａｏｔ
ｉｎｏｍｙｃｅｔｅｅ　　）第２巻、ザ・ウィリアムス
・アンド・ウイルキンス・カンパニー発ｆｆ、１９６１
年、アール・イー・プツファナン・アンド・エヌ・イー
・キホンヌ綱、バーシーズ・マニュアル・オプ・デター
ミネーデイプ・バクテリオロジ−（Ｂｅｒｇｅｙ”ｓ　
　Ｉ’ｊａｎｕａｌ　ｏｆ　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｖ
ｅｋｃｔｅｒｌｏｌｏｇｙ　）第８版、１９７４年およ
びその他の文献に従って検索した。As described above, the various properties of strain 90-33196 were described in The Actinomycetes (The Aot) by Nis N. Waxman.
inomycetee) Volume 2, published by The Williams & Wilkins Company, 1961
Bergey's Manual of Determined Bacteriology
I'janual of Determinative
ekcterology) 8th edition, 1974 and other literature.

本菌株は上記したように１）栄養増殖の後期に多形態の
断裂菌糸を生成し、それらの一部に運動性が認められる
。２）成熟したＸＩＷ糸より周毛性の運動性細胞が生成
する。３）気菌糸は幾つかの寒天培地上で束状体を形成
する。４）細胞壁タイプ爾に属する。その他の諸性質か
ら水閘はアクチノシンネマ属に属する菌株であることは
明らかである。従って、水閘をアクチノシンネマ（Ａｃ
ｔｉ−ｎｏｓｙｎｎｅｍａ　）　ｓｐ、　Ｉａ　Ｃ−３
３１９６と称した。As described above, this strain 1) produces pleomorphic fractured hyphae in the late stage of vegetative growth, some of which are motile; 2) Peritiliary motile cells are generated from mature XIW threads. 3) Aerial hyphae form bundles on some agar media. 4) Belongs to cell wall type II. From other properties, it is clear that the strain belongs to the genus Actinosynnema. Therefore, water locks are actinosynnematic (Ac
ti-nosynnema) sp, Ia C-3
It was called 3196.

たお、アクチノシンネマ属は放線Ｉ′ｉ！Ｖ目の１属で
あシ、菌学的性質は長谷用らにより、インターナシジナ
ル・ジャーナル・オプ・システマテイツク・バクデリオ
ロジイ（Ｉｎｔｅｒｒ＋ｐＬｔｉｏｎａｌ　Ｊｏｕｒｎ
ａｌｏｒ　Ｓｙ８ｔｅｍａｔｉｏ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ
ｏｇｙ　）　第２８巻、３０４〜３１０頁（１９７８年
）で報告され、さらに回書第３０巻、２４５頁（１９８
０年）にも掲載されている。The genus Actinosynnema has radiation I'i! It is a genus of order V, and its mycological properties were described by Hase et al. in the International Journal of Systematic Bacteriology.
alor Sy8tematio Bacteriol
ogy) Vol. 28, pp. 304-310 (1978), and further published in Circular Vol. 30, p. 245 (198
It was also published in 2000).

本菌株Ｃ−３３１９６株は、財団法人発ｍ研究所に昭和
５６年８月１１日に受託されＩｌ’０　１４１２７とし
て寄託されており、また本微生物は通商産業省工業芦術
院微生物工業技術研究所に昭和５６年８月２６日に受託
されＦＥＲＭＰ−６１３８として寄託されている。This microorganism strain C-33196 was entrusted to the Institute for Research and Development on August 11, 1981 and has been deposited as Il'0 14127. It was entrusted to the FERMP-6138 on August 26, 1981, and has been deposited as FERMP-6138.

一般に、アクチノシンネマ属菌は、その性状が変化しや
すく、自然的にまた刹異剤によって変異を起し得る。た
とえばＸ線、ガンマ−線、紫外線等の放射線の照射単胞
子分離９種々の薬剤を含有する培地上での培養、その他
の手段で変異させて得られる多くの変異株、あるいは自
然に得られる突然変異株等であっても、上記し九菌学的
性状ま九は下記に示した様な菌学的性状との比較におい
て実質的に別種とするに足らず、しかも当該抗生物質を
生産する性質を有するものはすべて本発明方法に利用し
得る。たとえば、当該抗生物質生産株を種々の変異処理
することにより、淡黄色ないし淡黄褐色または褐色の可
溶性色素を生成するもの、基生菌糸が無色のもの、赤褐
色ないし橙赤色を示すもの、黄緑色の基生菌糸または可
溶性色素を生成する本の、豊富な白色の気菌糸を生成す
るものおよび菌糸が分断し易い変異株が得られる。In general, bacteria of the genus Actinosynnema are susceptible to change in properties and can undergo mutations either naturally or by the use of different agents. For example, irradiation with radiation such as X-rays, gamma rays, and ultraviolet rays, monospore isolation, cultivation on media containing various drugs, many mutant strains obtained by mutating by other means, or naturally occurring mutants. Even if it is a mutant strain, the above-mentioned mycological properties are not enough to make it a substantially different species when compared with the mycological properties shown below, and it does not have the property of producing the antibiotic. Any of these can be used in the method of the present invention. For example, by subjecting the antibiotic-producing strain to various mutation treatments, there are strains that produce light yellow to light yellowish brown or brown soluble pigments, those whose basal hyphae are colorless, those whose basal hyphae are colorless, those whose color is reddish brown or orange-red, and those whose color is yellowish-green. In addition to those that produce basal hyphae or soluble pigments, those that produce abundant white aerial hyphae and mutant strains whose hyphae are easily fragmented are obtained.

当該抗生物質生産菌の培養に用いられる培地は該菌が利
用し得る栄養源を含゛むものなら、液状で本固状でもよ
いが、大量を処理するときには液体培地を用い石のがよ
り適当である。、培地には、当該抗生物質生産菌が同化
し得る炭素源、消化し得る窒累源、無機物質、微量栄＊
素が適宜配合される。炭素源としては、たとえばブドウ
糖、乳糖。The medium used for culturing the antibiotic-producing bacteria may be liquid or solid as long as it contains a nutrient source that the bacteria can use, but when large quantities are to be processed, a liquid medium and a stone medium are more suitable. be. The culture medium contains a carbon source that can be assimilated by the antibiotic-producing bacteria, a nitrogen source that can be digested, inorganic substances, and trace nutrients*
The ingredients are appropriately blended. Examples of carbon sources include glucose and lactose.

ンヨ糖、麦芽糖、デキストリン、でん粉、グリセリン、
マンニド−μ、ツルピトー！、油脂類（例、大豆油、フ
ード油、チキン油など）、ｎ　／＜フッインその他が、
窒素源としては、たとえば肉エキス、酵母エキス、乾燥
酵母、大豆粉、コーン・スヅーーグ・リカー、ペプトン
、綿実粉、ｑ糖蜜、尿素、アンモニウム塩類（例、硫酸
アンモニウム。sugar, maltose, dextrin, starch, glycerin,
Mannido-μ, Tsurpitou! , fats and oils (e.g., soybean oil, food oil, chicken oil, etc.),
Nitrogen sources include, for example, meat extract, yeast extract, dried yeast, soybean flour, corn sugar liquor, peptone, cottonseed flour, molasses, urea, ammonium salts (eg, ammonium sulfate).

ｍ化７：／モニウム、硝酸アンモニウム、酢酸アンモニ
ウムなど）その他が用いられる。さらにナトリウム、カ
リウム、カルＶウム、マグネシウムなどを含む塩類、鉄
、マンガン、亜鉛、コバルト。(monium, ammonium nitrate, ammonium acetate, etc.) and others are used. In addition, salts containing sodium, potassium, calcium, magnesium, etc., iron, manganese, zinc, and cobalt.

ニッケμなどの金属塩類、リン酸、ホウ酸などの塩類や
酢酸、プロピオン酸などの有機酸の塩類が適宜用いられ
る。その他、アミノ酸（例、グルタミン酸、アスバフギ
ン酸、アフニン、リジン、メチオニン、プロリンなど）
、ペプチド（例、ジペプチド、）ジペプチドなど）、ビ
タミン類（例、Ｂ工、Ｂ２．ニコチン酸、Ｂ１２．Ｃな
ど）、核酸類（′例、プリン、ピリミジン、その誘導体
など）等を含有させてもよい。もちろん培地のｐＨを調
節する目的で無機または有機の酸、アルカリ類、Ｐ術剤
等を加え、あるいは消泡の目的で油脂類９表面−活性剤
等の適量を添加してもさしつかえない。Metal salts such as Nikkei μ, salts such as phosphoric acid and boric acid, and salts of organic acids such as acetic acid and propionic acid are used as appropriate. Other amino acids (e.g. glutamic acid, asbafugic acid, afnin, lysine, methionine, proline, etc.)
, peptides (e.g., dipeptides, dipeptides, etc.), vitamins (e.g., B-acid, B2.nicotinic acid, B12.C, etc.), nucleic acids (e.g., purines, pyrimidines, derivatives thereof, etc.), etc. Good too. Of course, inorganic or organic acids, alkalis, phosphorus agents, etc. may be added for the purpose of adjusting the pH of the medium, or an appropriate amount of fats and oils 9 surface active agents may be added for the purpose of defoaming.

培養の手段は静置培養でも振盪翳養あるいは通気攪拌培
養法等の手段を用いてもよい。大域の処理には、いわゆ
る深部通気攪拌培神によるのが望ましいことはいうまで
もない。培養の条件は培地の状態９組成、菌株の種類、
培養の手段等によって一定しないのは当然であるが、そ
れらは通常約２０し〜３２℃の温度で、初発ｐＨを中性
付近に選択するのがよい。とりわけ培養中期の温度は、
約２５℃〜２８℃、また初発ｐＥｌは約６．５〜７゜５
の条件が望ましい。培養期間も前記の諸条件により一定
しないが、所望の抗生物１１ｔｇＩ４度が最大となるま
で培養するのがよい。これに要する時間は液体培地を用
いる振盪１＠養または通気攪拌培養の場合は通常約４８
〜９６時間程度である。The culturing method may be static culture, shaking culture, or aerated agitation culture. It goes without saying that it is desirable to use what is called a deep aeration agitation system for treating a large area. Culture conditions include medium condition9 composition, strain type,
It is natural that the temperature will vary depending on the culturing method, etc., but it is usually preferable to select a temperature of about 20 to 32° C. and an initial pH of around neutrality. In particular, the temperature during the middle stage of culture is
Approximately 25°C to 28°C, and the initial pEl is approximately 6.5 to 7°5
The following conditions are desirable. The culture period is also variable depending on the conditions mentioned above, but it is preferable to culture until the desired antibiotic 11tgI4 degree is reached. The time required for this is usually about 48 hours for shaking 1@culture or aerated agitation culture using a liquid medium.
~96 hours.

培！γ物中罠産生された抗生物質（″ニー３３］９６Ｅ
−６、Ｅ−６−Ｒ、Ｉ−７および／またけＥ−７−Ｒを
Ｊ下取するには、抗生物質Ｃ−３３１９６が中性脂溶性
であるので、このような微生物代Ｈ物を採取するために
通常用いられる分篩、精製の方法が適宜利用される。た
とえば、不純物との溶解度の差を利用する手段、活性炭
、非イオン性マクロボーヲス樹脂、シリカゲル、アルミ
ナ等の各種の担体を用いる吸着クロマトグラフィーなど
がそれぞれ単独又は組合わせて利用される。Cultivate! Antibiotics produced in gamma traps (″nee 33] 96E
-6, E-6-R, I-7 and/or Straddle E-7-R, since antibiotic C-33196 is neutral fat-soluble, such microorganism The sieving and purification methods normally used to collect the substance are used as appropriate. For example, means utilizing the difference in solubility with impurities, adsorption chromatography using various carriers such as activated carbon, nonionic macrobodies resin, silica gel, alumina, etc. are used alone or in combination.

抗生物質Ｃ−３３１９６は、一般に培養ｒ液によシ多く
含まれているが、菌体に含まれているとともあるので、
菌体からも抽出することができる。Antibiotic C-33196 is generally contained in large amounts in culture liquid, but it is also contained in bacterial cells, so
It can also be extracted from bacterial cells.

菌体からの抽出には、水と混和する有機溶媒９例えばメ
タノール、エタノールなどの低級アルコ−Ｐ類、アセト
ン、メチルエチルケトンなどのケトン類、又はこれらと
水と９混合液が用いられる。For extraction from the bacterial cells, an organic solvent 9 that is miscible with water, such as lower alcohol-Ps such as methanol and ethanol, ketones such as acetone and methyl ethyl ketone, or a mixture of these and water is used.

又、水と混和しない有機溶媒、たとえば、酢酸エチルな
どのエステル類を使用して抽出することもできる。更に
培養物にメタノ−μ、アセトンなど水と混和する有機溶
媒を加えて抽出することも出来る。Extraction can also be carried out using water-immiscible organic solvents, for example esters such as ethyl acetate. Furthermore, extraction can also be carried out by adding a water-miscible organic solvent such as methanol or acetone to the culture.

培養ｐ液から抗生物質Ｃ−３３１９６を採取するには、
水と混和しない有機溶媒、たとえば酢酸エチル、酢酸ブ
チルなどの脂肪酸エステ／′Ｌ／類、ゲタノーμなどの
アルコール類、クロロホルムｆｚトのハロゲン化炭化水
素類、メチルイソブチルケトンなどのケトン類による抽
出が利用されるうとの有機溶媒による抽出液を水洗、濃
縮後、ｎ−ヘキサンなどの非極性有機溶媒を加えること
にょシ、重物質を得ることができる。To collect antibiotic C-33196 from culture p fluid,
Extraction with organic solvents that are immiscible with water, such as fatty acid esters such as ethyl acetate and butyl acetate, alcohols such as Getanor, halogenated hydrocarbons such as chloroform, and ketones such as methyl isobutyl ketone is possible. Heavy substances can be obtained by washing the extract with an organic solvent to be used, concentrating it, and adding a non-polar organic solvent such as n-hexane.

その際、抗生物質Ｃ−３３１９６中、−成分が主成分と
して多量に含まれる場合には、この有機溶媒による抽出
及び濃縮の操作のみで結晶として単離されることもある
。At this time, if the antibiotic C-33196 contains a large amount of -component as a main component, it may be isolated as crystals simply by extraction and concentration using this organic solvent.

又、培養ｒ液からの抗生物質Ｃ−３３１９６の採取には
、ダイヤイオンＨｐ−ｔＯ（三菱化成株式会社？１）な
どの非イオン性マクロボーヲス樹脂による吸着、含水ア
ルコ−／Ｌ’または含水ケトン類などによる溶出も利用
できるつ 培５１液から」ユ記の如く、抽出、１縮などの操作を経
て得られる重物質が、抗生物７７　ｃ　−３３１９６の
混合物からなる場合には、各成分の分離に種々の吸着ク
ロマトグラフィーなどが利用される。In addition, to collect the antibiotic C-33196 from the culture solution, adsorption with nonionic macrobodies such as Diaion Hp-tO (Mitsubishi Kasei Corporation?1), hydrated alcohol/L' or hydrated ketones, etc. If the heavy substance obtained through extraction, condensation, etc. is a mixture of antibiotic 77c-33196, it is necessary to separate each component. Various types of adsorption chromatography are used for this purpose.

吸着剤として杜通常用いられる担体、たとえば、シリカ
ゲル、アルミナ、非イオン性マクロボーヲス樹脂等が使
用できる。As the adsorbent, commonly used carriers such as silica gel, alumina, nonionic macrobodies resin, etc. can be used.

吸着剤として、ｔ７リカゲμを用いる場合は、一般に極
性有機溶媒と非極性有機溶媒との組合わせ、例えば酢酸
エチルとｎ−ヘキサン、メタノールとクロロホルムなど
の混合溶媒による展開が利用される。即ち、初めに、非
極性溶媒で展開した後、次第に極性溶媒の比率を増して
溶出することにより、各成分が分離される。重物質が多
成分からなり、又、不純物が多い場合には、これら有機
溶媒の組合わせを変え、クロマトグツフィーを繰返すこ
とＫより、単一成分に分離される。When t7 Likage μ is used as an adsorbent, development is generally performed using a combination of a polar organic solvent and a non-polar organic solvent, for example, a mixed solvent such as ethyl acetate and n-hexane, or methanol and chloroform. That is, each component is separated by first developing it with a non-polar solvent and then eluting it by gradually increasing the proportion of a polar solvent. If the heavy substance is composed of multiple components and contains many impurities, it can be separated into single components by changing the combination of these organic solvents and repeating chromatography.

又、場合によっては、シリカゲルのような級着剤又はマ
イクロボ゛ンタバツクＣ工。（ウォータース・アソシエ
ーツ製、米国）のような逆相系の担体を用いる高速液体
クロマトグヲフイ＝本利用でなる。Also, in some cases, grade adhesives such as silica gel or micro-bottle backing C coatings may be used. High performance liquid chromatography using a reversed-phase carrier such as (manufactured by Waters Associates, USA) = this application.

抗生物質Ｃ−３３１９６は、ベンゾキノン型（Ｃ−３３
１９６Ｆ’ニー６及びＥ−７）とハイドロキノン型（Ｃ
−３３１９６Σ−Ｆ）−Ｒ及びＥ〜７−Ｒ）とからなシ
、相互変換可能であるので、精ｉｌｌを行うに当って１
よ、酸化又１よ還元によシ、ベンゾキノン型又はハイド
ロキノン型とすれば成分の種類が半減するので好都合で
ある。Antibiotic C-33196 is a benzoquinone type (C-33
196F'nee 6 and E-7) and hydroquinone type (C
-33196Σ-F)-R and E~7-R) can be mutually converted.
It is advantageous to use a benzoquinone type or a hydroquinone type for oxidation or reduction because the number of types of components can be halved.

酸化の方法としては、通常ハイドロキノンを酸化するの
に用いられる方法が利用される。たとえば、酸化剤とし
ては、塩化第二鉄、硫酸第二鉄。As the oxidation method, the method normally used for oxidizing hydroquinone is used. For example, oxidizing agents include ferric chloride and ferric sulfate.

ご艶− フェリンアン化カリ、酸化銀などが挙げられ、又、反応
溶媒としては、反応を妨げない溶媒であれば如何なるも
のでも使用可能である。例えば、酢酸エチルなどのエス
デ／Ｌ／１ｉＲ，アセＦンなどのケトン類、又は水など
が挙げられるが、或いはこれらの混合溶媒であっても良
い。更に、水及び水と混和し外い有機溶媒との二相系も
好都合に用いられるつ酸化剤の使用域は、原料化合物ｌ
七μに対し、約１〜２００モルである。反応温度は、特
に規定されないが、通常約Ｏ〜４０℃、一般には室温で
行われ、反応時間も温度にもよるが、通常、約３０秒な
いし２４時間の間で容易に反応が完了する。Examples include potassium ferrin anide, silver oxide, etc., and any solvent can be used as the reaction solvent as long as it does not interfere with the reaction. Examples include SDE/L/1iR such as ethyl acetate, ketones such as aceF, water, etc., or a mixed solvent thereof may be used. Furthermore, two-phase systems with water and water-immiscible organic solvents are also conveniently used.
It is about 1 to 200 moles per 7μ. Although the reaction temperature is not particularly limited, it is usually carried out at about 0 to 40°C, generally at room temperature, and the reaction is usually easily completed within about 30 seconds to 24 hours, depending on the reaction time and temperature.

還元の方法としては、通常ベンゾキノンを還元するのに
用いられる方法が利用される。たとえば、反応に用いら
れる還元剤としては、ハイドロサルファイトナトリウム
、酸性亜硫酸ナトリウム、水素化ホウ素ナトリウムなど
が挙げられ、又反応溶媒としては、上記の反応を阻害し
ないものであれば如何なる溶媒で本使用可能である。例
えば、酢酸エチルなどのエステル類、メタノ−／Ｉ／、
エタノール等のア〜ノーｆｉｌ類又は水などが挙げられ
るが、或いはこれらの混合溶媒であっても良い。更に、
水及び水と混和しない有機溶媒との二相系も好都合に利
用できる。還元剤の使用量は、原料化合物１モルに対し
、約１〜２００モルである。反応温度は、通常約θ〜４
０℃、一般に室温で行われ、反応時間も温度にもよるが
、約３０秒ないし２４時間で容易に反応が完了する。As the reduction method, a method normally used for reducing benzoquinone is used. For example, reducing agents used in the reaction include sodium hydrosulfite, sodium acid sulfite, sodium borohydride, etc., and as a reaction solvent, any solvent can be used as long as it does not inhibit the above reaction. It is possible. For example, esters such as ethyl acetate, methanol/I/,
Examples include anofils such as ethanol, water, etc., or a mixed solvent thereof may be used. Furthermore,
Two-phase systems with water and water-immiscible organic solvents can also be advantageously used. The amount of the reducing agent used is about 1 to 200 mol per 1 mol of the raw material compound. The reaction temperature is usually about θ~4
The reaction is carried out at 0° C., generally at room temperature, and the reaction is easily completed in about 30 seconds to 24 hours, depending on the reaction time and temperature.

シリカゲルクロマトグラフィーに当っては、一般に、ベ
ンゾキノン型で精製が行われるが、場合によっては、ハ
イドロキノン型で精製すると好都合の場合もあシ、混合
物中の不純物の量１種類に応じて適宜、酸化、還元を利
用して各成分の分間が行われるう 得られ九番成分は、いずれも酢酸エチル、メタノール、
塩化メチレン、メタノール−水等の溶媒から結晶化され
る。In silica gel chromatography, purification is generally performed using benzoquinone type, but in some cases it may be more convenient to purify using hydroquinone type. The ninth component obtained by separating each component using reduction is ethyl acetate, methanol,
It is crystallized from solvents such as methylene chloride and methanol-water.

後述の実施例２で得られた抗生物質Ｃ−３３１９６Ｅ−
６およびＥ−６−Ｈの物理化学的性状を表１に、実施例
／で得られた抗生物質Ｃ−３３１９６Ｅ−７およびＥ−
７−Ｈの物理化学的性状を表２にそれぞれ示す。Antibiotic C-33196E- obtained in Example 2 described below
The physicochemical properties of C-6 and E-6-H are shown in Table 1, and the antibiotics C-33196E-7 and E-6 obtained in Example/
The physicochemical properties of 7-H are shown in Table 2.

表２ 抗生物質Ｃ−３３１９６の各成分の少なくとも二種以上
を含む混合物の各成分の比率は特に限定されないが、た
とえば２成分系ではそのうちの１成分が９ｊ、４以上、
３成分系ではそのうちの２成分がそれぞれ＞９年以上、
４成分系ではそのうちの３成分がそれぞれ釣針−上の混
合物であってもよい。Table 2 The ratio of each component of a mixture containing at least two or more of each component of antibiotic C-33196 is not particularly limited, but for example, in a two-component system, one of the components is 9j, 4 or more,
In a three-component system, two of the components each have a lifespan of >9 years,
In a four-component system, three of the components may each be a fishhook mixture.

核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトμを表３に記載する。Nuclear magnetic resonance (NMR) spectra μ are listed in Table 3.

表３ ＠）　８：シングレット（ｓｉｎｇｌｅｔ）、ｄ　：ダ
グレット（ｄｏｕｂｌｅｔ）、ｔ　：　）リグレット（
ｔｒｉｐｌｅｔ）。Table 3 @) 8: singlet, d: doublet, t: ) regrett (
triplet).

ｍ：ｆｆルティプレット（ｍｕｌｔｉｐｌｅｔ）、ｂ　
ニブロード（ｂｒｏｐＬｄ） 上記の物理化学的性状およびＮ）ＪＲスペクトルから、
本発明の抗生物質Ｃ−３３１９″６Ｅ−６，ｉ′Ｆ、−
６−Ｒ，Ｅ−７およびＥ−７−Ｈの構造式は、一般式 （式中、Ｒ１’、Ｒ２−Ｒ３およびＸは前記と同意義を
有する。）で表わされると考えられる。また、Ｅ２】 とのように、本発明の抗生物質Ｃ−３３１９６Ｅ−６、
Ｅ−６−Ｒ，Ｅ−７およびＥ−７−Ｒは、それらの物理
化学的性状、ＮＭＲスペクｍＡ／および構造式から、新
規化合物であると考えられる。　　　ｌ抗生物′Ｊｆｔ
ｃ−３３１９６は、抗細菌作用、抗真宥作用、抗原虫作
用を有する。又、腫瘍細胞に対し殺細胞効果を示すとと
から、抗腫ＰＪ作用も期待される。更に、有用誘導体の
合成の際の原料ともケシ得る。m: ff multiplet, b
Nibrod (bropLd) From the above physicochemical properties and N) JR spectrum,
Antibiotics of the present invention C-3319″6E-6, i′F, -
The structural formulas of 6-R, E-7 and E-7-H are considered to be represented by the general formula (wherein R1', R2-R3 and X have the same meanings as above). In addition, the antibiotic C-33196E-6 of the present invention,
E-6-R, E-7, and E-7-R are considered to be new compounds based on their physicochemical properties, NMR spectra, and structural formulas. lAntibiotic'Jft
c-33196 has antibacterial, antipsychotic, and antiprotozoal effects. Furthermore, since it exhibits a cytocidal effect on tumor cells, it is also expected to have an antitumor PJ effect. In addition, poppies can also be used as raw materials for the synthesis of useful derivatives.

抗生物質Ｃ−３３１９６Ｆニー６およびＥ−７は、−天
希釈法による抗微生物検定で、バチ八・ス・−１！レウ
ス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｃｅｒｓｕｓ　）　Ｉ　Ｆ　Ｏ
３１５４おヨヒスタフイロコツカス　アウレウス（Ｓｔ
ａｐｈｙ−１ｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　　）　！
’　Ｔｌ　Ａ　　２０９　Ｆの増殖を５０〜１０（ｌｆ
／戸１’７４度で阻害した。また液体隋釈法による検定
でテトヲヒメナ・ビリフォルミス（Ｔｅｔｒａｈｙｍｅ
ｎａ　ｐｙｒｉｆｏｒｍｉｓ　）　Ｗの増殖をＥ−６は
１０μ９７ｗｅで、Ｅ−７は４０μ９／ｗ／でそれぞｈ
阻害した。したがって、抗生物質Ｃ−３３１９６は、抗
菌剤、抗原虫剤として使用することがで舞る。Antibiotics C-33196F knee 6 and E-7 were tested in an antimicrobial assay using the dilution method. Reus (Bacillus cersus) IFO
3154 Yohistaphylococcus aureus (St.
aphy-1ococcus aureus)!
' Tl A 209 F proliferation was reduced to 50-10 (lf
/ Door was blocked at 1'74 degrees. In addition, tests using the liquid dilution method revealed that Tetrahymena biliformis (Tetrahyme
na pyriformis) W was grown at 10μ97we for E-6 and 40μ9/w/h for E-7.
inhibited. Therefore, antibiotic C-33196 can be used as an antibacterial agent and an antiprotozoal agent.

また、抗生物質Ｃ−３３１９６ｇ−７−Ｒは、その急性
毒性がＬＤ　５Ｑ　４００　ｆｆｐｇ以上（マウス。Furthermore, the acute toxicity of antibiotic C-33196g-7-R is LD 5Q 400 ffpg or more (mouse).

匝腔内投与）と低毒性である。したがって、抗生物質Ｃ
−３３１９６の浮性は低いと考えられる。(intracavitary administration) and low toxicity. Therefore, antibiotic C
-33196 is considered to have low buoyancy.

抗生物質Ｃ−３３１９６は、たとえば、１０〜１００μ
９／ｌｅｌのエタノ−μ含有水溶液剤として、により用
いることができる。Antibiotic C-33196 is, for example, 10-100μ
It can be used as an aqueous solution containing 9/lel of ethanol-μ.

以下に冑流側を挙げて本発明をさらに詳しく説明する。The present invention will be explained in more detail below with reference to the jet side.

なお、以下の実施例において、バーセン）（ｌはとくに
ことわりのないかぎシ、重量／容量パーセント（Ｗ／ｖ
％）を表わす。In addition, in the following examples, weight/volume percent (W/v
%).

実施例１ 酵母エキス・麦芽エキス寒天培地に培養したアクチノシ
ンネマ８ｐ、ＩＦｔｃ−３３１９６（Ｉ　Ｆ’０１４１
２７、ＦＩＲＭ’　Ｐ−６１３８）を２００ゴ容三角フ
フスコ内のグμノーヌ２％、可溶性グンブン３９Ｉ６．
生大豆粉１９６．コーンスディーデリカー１％、ポリベ
プＦン０．５％、　ＮａＣ１０，３％、Ｃ汽ｃｏ３　　
ｏ、　ｓ＊（ｐＨ７，０’）な含む４０ｄの種培地に接
種し、２８℃、４８時間回転振盪機上で培養した。得ら
れた培ｇｅ液ｌＯｍｅを種培地５００ｍ１を含む２ｅ容
坂ロフラスコに移植し、２８ｔ３４Ｂ時間往復振借機上
で培養した。この培養液の１４を種培地１００ｅを含む
２００ｅ容ステンレススチールタンクに接種し、２８℃
９通気１００１／分、縫拌１８０回転／分で４８時間＃
ｉｔ養し、種培養液を得た。得られた種培養液の６０ｇ
をグリセロ−／Ｌ１５％、コーンヌテノー７′リカー２
９６゜乾燥酵母２％、　ＭｇＣｌ２　０．　５％、　Ｋ
）Ｔ２ＰＯ４２９≦、　ＣａＣＯ３０，１ｑ６の組成か
らなる主培地１２００ｇを含り２０００ｇ容ステンレス
スチールタンクに移植し２８℃９通気１２００ｆ／ｇ／
分、枦−ｆｔ！１ｓｏ回転／分、内圧１　ｋｙ１ｃｍ２
の条件で１１４時間培養した。得られた培養液ｌ、ｔ５
ｏ＃にハイフロスーバーセ／Ｌ／（ジョンス・マンビル
社製、米国）ヲ加え濾過し、ｐ液１，３　ｎ　Ｏｅをｐ
ＦＴ５．５とし、酢酸エチ／Ｉ／６５０ｅで抽出し九。Example 1 Actinosynnema 8p, IFtc-33196 (IF'0141) cultured on yeast extract/malt extract agar medium
27, FIRM' P-6138) in 200 cups of triangular Fufusco, 2% of Gunbun, soluble Gunbun 39I6.
Raw soybean flour 196. Corns deli liquor 1%, polyvep Fn 0.5%, NaC 10.3%, C steam co3
The cells were inoculated into a 40 d seed medium containing O, S* (pH 7,0') and cultured on a rotary shaker at 28°C for 48 hours. The obtained culture medium (lOme) was transferred to a 2e volume Sakaro flask containing 500 ml of seed medium and cultured on a reciprocating shaker for 28t34B hours. 14 of this culture was inoculated into a 200e stainless steel tank containing 100e of seed medium and heated at 28°C.
9 Ventilation 1001/min, sewing 180 revolutions/min for 48 hours #
It was cultivated to obtain a seed culture. 60g of the resulting seed culture
Glycero/L 15%, Corn Nutenoh 7' Liquor 2
96° Dry yeast 2%, MgCl2 0. 5%, K
) T2PO429≦, containing 1200g of the main medium consisting of CaCO30, 1q6, transplanted into a 2000g stainless steel tank and heated at 28°C, 9 aeration, 1200f/g/
Minute-ft! 1so rotation/min, internal pressure 1ky1cm2
The cells were cultured for 114 hours under the following conditions. Obtained culture solution l, t5
Hyflo Superverse/L/ (manufactured by Johns-Manville, USA) was added to o# and filtered, and 1.3 n Oe of p liquid was added to p.
FT5.5 and extracted with ethyl acetate/I/650e.

抽出液を薄層クロマトグラブイ−（？開溶媒：クロロホ
ルムーメタノー★（９：ｌ）で調べると、Ｅ−７（Ｒｆ
値：０．６５）およびＪｉｍ−７−Ｒ（Ｒｆ値：Ｏ，Ｉ
ｇ）の存在が認められた。When the extract was examined using thin layer chromatography (? Opening solvent: chloroform-methanol★ (9:l), it was found that E-7 (Rf
value: 0.65) and Jim-7-R (Rf value: O, I
g) was observed.

次に、目的物の単Ｒをより容易にするため、抽出液に含
まれるＥ−７−Ｒをいったん酸化してＥ−７として精製
した後、更にＥ−７を還元してＥ−７−Ｒとして分離精
製を行なった。すなわち、抽出液を水３００ｅで洗滌後
、減圧濃縮しく２８ｅ）、これに２ｍＭＡ化第二化第溶
鉄水溶液１４えて攪拌した。一時間後、酢酸エチ／ｌ’
層な水１４Ｎで２回洗い、濃縮した。油状の濃縮液にｎ
−ヘキサン５００ｇ１宛加えて４回洗滌し、残るアメ状
残査を酢酸エチル５００ぎｌに溶かし、シリカゲルＫｉ
ｅｓｅ１ｇｅｌ　６０　（メルク社製、西ドイツ）２５
０すと混合し、濃縮乾固後、シリカゲ／’（５００９）
のカラム上端に充てんした。カラムをｎ−ヘキサンで洗
った後、ｎ−ヘキサン−酢酸エチ／Ｉ／（４：１→２　
：　１−４１　：　１−１　：　２→ｌ；４→ｌ：８）
の混合溶液で順次展開すると、ｎ−ヘキサン−酢酸エチ
／Ｌ／（２：１→ｌ：１）の区分からＣ−３３１９６Ｅ
−７を含む液が溶出された。この区分を約５０胃１１で
濃縮し、さらに酢酸エチル２００　ｍｌ’９加えて希釈
し友後、２優ハイドロサμフアイトナトリウム水１２０
ｒ／を加えて擢、押した。水層をのぞ自もう一度同じ方
法で還元を繰返した後、水洗、乾燥し次いで減圧濃縮し
、２０胃１となったところで、シリカゲ／Ｌ’ｌ　Ｏｆ
を加えて再び？１ＩｐＮ乾固した。残査をシリカゲ／Ｌ
／（５０ｆ）カラムの上端に充てんし、ｎ−ヘキサンで
展開後、クロロホルム次いでクロロホルム−メタノール
（１００：１−４５０＝１→４：１）で順次展開した。Next, in order to make the single R of the target product easier, E-7-R contained in the extract was oxidized to purify E-7, and then E-7 was further reduced to E-7-R. Separation and purification was carried out as R. That is, the extract was washed with 300 e of water, concentrated under reduced pressure (28 e), and 14 aqueous 2mMA ferric oxide aqueous solution was added thereto and stirred. After one hour, ethyl acetate/l'
Washed twice with 14N cold water and concentrated. n to oily concentrate
- Add 500 g of hexane to wash 4 times, dissolve the remaining candy-like residue in 500 g of ethyl acetate, and use silica gel Ki.
ese1gel 60 (Merck, West Germany) 25
After mixing and concentrating to dryness, silikage/' (5009)
was packed at the top of the column. After washing the column with n-hexane, n-hexane-ethyl acetate/I/(4:1→2
: 1-41 : 1-1 : 2→l; 4→l: 8)
When developed sequentially with a mixed solution of n-hexane-ethyl acetate/L/(2:1→l:1), C-33196E was obtained.
A solution containing -7 was eluted. This fraction was concentrated with about 50 ml of 11 ml of ethyl acetate, diluted with 200 ml of ethyl acetate, and then diluted with 120 ml of sodium hydrosulfite water.
I added r/ and pressed it. After removing the aqueous layer and repeating the reduction in the same manner, it was washed with water, dried, and concentrated under reduced pressure.
Add again? It was dried to 1 IpN. Silkage the residue/L
/ (50f) was packed at the top of the column, developed with n-hexane, and then sequentially developed with chloroform and then chloroform-methanol (100:1-450=1→4:1).

クロロホルム−メタノ−１ｖ（４：ｘ）で溶出されたＣ
−３３１９６Ｆ−７−Ｒ区分を減圧濃縮し、更に酢酸エ
チル溶液として冷却するとＣ−３３１９６１−７−Ｒの
無色の結晶４２３ｑが得られた。C eluted with chloroform-methano-1v (4:x)
-33196F-7-R fraction was concentrated under reduced pressure and further cooled as an ethyl acetate solution to obtain colorless crystals 423q of C-331961-7-R.

ＣＣ−３３１９６Ｅ−７−Ｒ２００Ｗを酢酸エチル１０
０＠／に溶かし、２優塩化第二鉄水ｍ液１０゛〇−を用
いて酸化し、水洗機濃縮しｎ−ヘキサンを加えると、Ｃ
−３３１９６Ｅ−７の黄色粉末１８０岬が得られた。CC-33196E-7-R200W in ethyl acetate 10
0＠/, oxidize using 10゛〇- of ferric chloride aqueous solution, concentrate in a water washer, and add n-hexane.
A yellow powder of 180 capes of -33196E-7 was obtained.

実施例λ 実施例１の三角フツヌコを用いる培養によって得られた
種培養液を２ｙｌづつ２００胛ｌ容王角フツヌコ内のグ
リセロ−／Ｉ１５％、乾燥酵母２ｑ６．コーンスディー
デリカ−２％、リン酸第−アンモニウノ・３％（、ｐＨ
７，０）を含む４０ｇ／の主培地に移植し、２８℃、９
０時間回転振盪機上で培費した。−得られた培養液５１
！をハイフロス−バーセルを用いてｒ過し、得られたｒ
液のｐＨを７として、酢酸エチＩＬ’２．５１１で２回
抽出した。Example λ The seed culture solution obtained by culturing using the triangular lizard in Example 1 was mixed with 200 ml each of 15% glycero/I in the triangular lizard and 2q6. Corns delicacy 2%, tertiary ammonium phosphate 3% (, pH
Transplant into 40 g/main medium containing 7,0) and grow at 28°C, 9
Cultured on a rotary shaker for 0 hours. - Obtained culture solution 51
! The obtained r
The pH of the solution was adjusted to 7, and the mixture was extracted twice with ethyl acetate IL'2.511.

抽出液を薄層クロマトグラフィーを展開溶媒：クロロホ
ルム−メタノール（９：　１　）］で調ベルト、Ｕ−６
（Ｒｆｌ：０．４１　）およびＥ−６−Ｒ（Ｒｆｌ）￥
：０．２２）の存在が認められた。The extract was subjected to thin layer chromatography with developing solvent: chloroform-methanol (9:1).
(Rfl:0.41) and E-6-R(Rfl)￥
:0.22) was observed.

次に、目的物の単離をより容易にするため、抽出液に含
まれるｇ−６−Ｒを酸化してＥ−５とし、微生物が産生
じ九Ｅ−６と合わせて分離精製を行なった。すなわち、
酢酸エチ／Ｌ’層を水洗後ｌｅ迄濃縮し、２％塩化第二
鉄水溶液５００Ｍ！を加えて攬押し、一時間後酢酸エチ
／Ｉ／層を水洗乾燥後濃縮した。濃縮液ａ　３０　ｖｓ
ｌにシリカゲ／’１０　ｆを加えて再び濃縮乾固し、残
有をシリカゲ、ｕ（ｓｏｆ）カラムの上端に充てんした
。Next, in order to more easily isolate the target product, g-6-R contained in the extract was oxidized to E-5, and microorganisms were produced, which was then separated and purified together with 9E-6. . That is,
The ethyl acetate/L' layer was washed with water, concentrated to le, and diluted with 2% ferric chloride aqueous solution 500M! After one hour, the ethyl acetate/I/acetate layer was washed with water, dried, and concentrated. Concentrate a 30 vs
Silikage/'10 f was added to the column and concentrated to dryness again, and the residue was filled into the upper end of a Silikage/U (sof) column.

カヲＡＨ１ｎ−ヘキサン、クロロホルＪ、　、　クロロ
ホルム−メタノ−／Ｌ／（１００：１→３０：１）で順
次展開し、薄層クロマトグフフィーでｓ認し九Ｅ−５区
分を集めて濃縮すると、Ｃ−３３１９６Ｅ−６の黄色結
晶１６０ｖＦ／が得られた。Developed sequentially with Kawo AH1n-hexane, chloroform J, and chloroform-methanol/L/(100:1→30:1), confirmed by thin layer chromatography, and collected and concentrated the 9E-5 fraction. 160 vF/yellow crystals of C-33196E-6 were obtained.

この結晶母液にシリカゲ／Ｌ１５ｇを加えて濃縮乾固し
、シリカゲｙ（ｚ５ｐ）カラムの上端に充てんして、前
記と同様に展開し、溶出されたＥ−６区分を濃縮後、酢
酸エチ／’１００ｇ１！に溶解し、２％ハイドロサルフ
ァイドナトリウム５０νｒ宛で２回速元を行なった。酢
酸エチ／ｌ／ＦＲを水洗、乾燥後濃縮すると、Ｃ−３３
１９６Ｅ−６−Ｈの無色の結晶４５叩が得られた。Add 15 g of Silikage/L to this crystal mother liquor, concentrate to dryness, fill the upper end of the Silikage Y (z5p) column, develop in the same manner as above, concentrate the eluted E-6 fraction, and add ethyl acetate/' 100g1! The solution was dissolved in 2% sodium hydrosulfide at 50 νr and subjected to two batches. When ethyl acetate/l/FR is washed with water, dried and concentrated, C-33
45 colorless crystals of 196E-6-H were obtained.

受託番号変−四届 昭和５７年１１月１γ日 特許庁長官　殿 ／　事件の表示 昭和５７年特許Ｌし１第９６７１１、 発明の名称 マクベシン＆、１化合物およびその製造法３　手続をし
だ者 ｙｌ＋件との関係　　特許出願人 住所　大阪市東区道修町２丁目２７番地名（シト　　武
田薬品工早株式会社 代表者　　倉　林　育　四　部 り代理人 Ｓ　旧寄託間関の名称 ７　新寄託機関の名作 工業技術院１・１゛々生物工≦４技術４ｉ１＋究所ｇ新
受託番号 ＦＥＲＭ　　ＢＰ−１６６ タ　添付書類の目録 （１）新受託番号を証明するｐ＋而　　　　　　１通以
上Change in Accession Number - 4 Notification November 1, 1980 Director General of the Japan Patent Office/Indication of Case 1982 Patent L 1 No. 96711 Name of Invention Macbecin &, 1 Compound and Process for Producing the Same 3 Person who initiated the procedure yl+ Relationship to the matter Patent applicant address 2-27 Doshomachi, Higashi-ku, Osaka City Name of Takeda Pharmaceutical Kosaya Co., Ltd. Representative Iku Kurabayashi 4 Division Agent S Name of former depositary Seki 7 Name of new depositary institution Meisaku Kogyo Institute of Technology 1・1゛Biological Engineering≦4Technology 4i1+G Institute New Accession Number FERM BP-166 ta List of Attached Documents (1) p+to prove the new accession number 1 or more copies

Claims (1)

【特許請求の範囲】[Claims] （１）一般式 （式中、Ｒ１，Ｒ２およびＲ３０一つはメチル、残示す
、）で示され、下記Ｏ特性を有する抗生物質Ｃ−３３１
９６］ｅ−６、Ｅ−６−Ｒ，に−７、Ｅ−７−Ｒ１九は
それらの少なくとも二種以上を含む混合物： （Ａ）　　抗生物質Ｃ−３３１９６１−６゛：（１）旋
光度：〔！〕ヤ＋２５８．８°±２０＠（Ｏｍｏ、　５
　、　ＣＨＣｌ３　） （ＩＢｖ：外部吸収スペクトｆｉ／： λＭｅ”　２７ａｎｍ±２ｎｍ　（ＥｉＦ、　４５４＋
４５）茸１ｓＬＸ ＩＭｅ０ＦＩ３９７ｎｍ　＋　２ｎｍ　（Ｅｌ九５０．
３＋５）ａｘ ｌ赤外部吸収スペクト〜、主要ピーク（ｃｍ’）：１７
２０、　１７０５．　１６５０．１６１０．　１５０５
゜１３８０、　１３２５．　１２６５．　１２１０．　
１０９０゜１０４０蓚 （Ｂ）　　抗生物質Ｃ−３３１９６Ｅ−６−Ｒ：（１）
旋光度：　Ｃｏ３”、ｊ　４３７．　ｓ°±４°（ｃ　
−０−５ｅＭｅＯＨ） （１）紫外部吸収スペクト／Ｉ／ニ ス箆：ｇｌｌＩ２５５ｎ！ｌＩ±２ｎｍ　（Ｅ　ｌｔ二
３３７±３０）ｅＯＨ λｗａｘ　　３０７ｎｌｌ±ｚｎｍ　（Ｅ　ｌ急９１±
９）Ｉ赤外部吸収スペクトμ、主要ピーク（Ｃ１ｍ−１
）　：１７２０、　１６５０．　１６００．１５３５．
　１４６０゜１３８０．１３２０，１０９０，１０４０
，１０１０ｉ（Ｃ）　　抗生物質Ｃ−３３１９６Ｅ−７
：（１）旋光度：　Ｃｔｌ〕ｆ　＋３７．４°土４°（
ｏ−０，５゜ＣＦ［Ｃ１３） （１）紫外部吸収スペクト＃： ｌ歌ｇ’　２７４ｎｍ±２ｎＭ　（Ｅ　Ｌ　５０２±５
０）ｚ’ｌＡ鉾Ｈ３９６ｎｍ　’±　ｚｎｍ　　（ａ）
、；　５９．ｓ±６）（資）赤外部吸収スペクト〜、主
要ピーク（ＣＩｌｌ−”）：１７２５．１６７０，１６
５０，１６０５．１５００゜１３８０．１３２５．１２
６０．１２０５，１１５０゜１０９５、　１０３５！ （Ｄ）　　抗生物質Ｃ−３３１９６Ｅ−７−Ｒ：（Ｉ）
旋光度：　Ｃｒｔ）”、ｊ　＋ｘｓ、　６°±２°（ｃ
”０．５゜）ＪｅＯＨ） （１）紫外部吸収スペクトル： ｋＭｅＯ”　２５０ｎｍ　±２ｎｍ　（Ｅ’％３０５±
３０）ｍａｘ　　　　　　　　　　　　　　　　　　１
ｃｍＪＭｅＯＦＩ３１５ｎｌｌｌ±２ｎｍ　（Ｅ”　　
６８±７）ｍａｘ　　　　　　　　　　　　　　　　　
　１ｃｍ（Ｉ）赤外部吸収スペクト〜、主要ピーク（―
）：１７１０、　１６４０．　１６００．　１４８５．
　１４５５゜１３８０、　１３１０．１２５０．１０９
０．　１０４０゜（２）アクチノシンネマ属に属する抗
生物質Ｃ−３３１９６１−６，に−６−Ｒ，Ｅ−７およ
び／ま九はＥ−７−Ｒを生産する能力を有する微生物を
培地に培養し、培養物から該化合物を採取するととを特
徴とする抗生物質Ｃ−３３１９６Σ−６゜Ｅ−６−Ｒ、
Ｅ−７および／またけＦ−７−Ｈの製造法。(1) Antibiotic C-331 represented by the general formula (wherein R1, R2 and R30 are methyl and the rest are shown) and has the following O characteristics:
96] e-6, E-6-R, Ni-7, E-7-R19 is a mixture containing at least two of them: (A) Antibiotic C-331961-6゛: (1) Optical rotation : [! ]Y+258.8°±20@(Omo, 5
, CHCl3) (IBv: external absorption spectrum fi/: λMe” 27am±2nm (EiF, 454+
45) Mushroom 1sLX IMe0FI397nm + 2nm (El950.
3+5) ax l infrared absorption spectrum ~, main peak (cm'): 17
20, 1705. 1650.1610. 1505
゜1380, 1325. 1265. 1210.
1090゜1040 蓚(B) Antibiotic C-33196E-6-R: (1)
Optical rotation: Co3”, j 437.s°±4°(c
-0-5eMeOH) (1) Ultraviolet absorption spectrum/I/varnish: gllI255n! lI±2nm (E lt2337±30) eOH λwax 307nll±znm (E lt2337±30)
9) I infrared absorption spectrum μ, main peak (C1m-1
) :1720, 1650. 1600.1535.
1460°1380.1320,1090,1040
, 1010i (C) Antibiotic C-33196E-7
:(1) Optical rotation: Ctl〕f +37.4°Sat4°(
o-0,5゜CF [C13) (1) Ultraviolet absorption spectrum #: lg' 274nm±2nM (EL 502±5
0) z'lA Hoko H396nm '± znm (a)
,; 59. s±6) (capital) infrared absorption spectrum~, main peak (CIll-”): 1725.1670,16
50,1605.1500゜1380.1325.12
60.1205, 1150°1095, 1035! (D) Antibiotic C-33196E-7-R: (I)
Optical rotation: Crt)”, j +xs, 6°±2°(c
"0.5゜)JeOH) (1) Ultraviolet absorption spectrum: kMeO" 250nm ±2nm (E'%305±
30) max 1
cmJMeOFI315nllll±2nm (E”
68±7)max
1 cm (I) infrared absorption spectrum ~, main peak (-
):1710, 1640. 1600. 1485.
1455°1380, 1310.1250.109
0. 1040゜(2) Antibiotics belonging to the genus Actinosynnema C-331961-6, Ni-6-R, E-7 and /Maku are cultured by culturing microorganisms capable of producing E-7-R in a medium. an antibiotic C-33196Σ-6゜E-6-R, characterized in that the compound is collected from a substance;
Method for producing E-7 and/or F-7-H.