JPS58116485A - 新規抗生物質カルバペネム誘導体およびその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 る。

本発明で提供する抗生物質とは広い抗菌スペクトルとβ
ーラクタマーゼ阻害作用を有する新規の安定なカルバペ
ネム（ｃａｒ　ｂａｐｅｎｅｒｎ）系抗生物質。

３−ヒドロキシメチルスルフイニル−ｇ−（ｌ−ヒドロ
キシスル−ニルオキシエチル）−７−オキソ−ノーアザ
ビシクロ［３．２，θ］一へブタ−２一エンーλ一カル
ボン酸である。以下にその構造式を示す。

本発明は２上述の抗生物質およびその製薬上許容される
塩を包含する。塩としては，例えば、アルカリ金属（ナ
トリウム，カリウムなど）、アルカリ土類金属（カルシ
ウム、バリウムなど）などとの塩があげられる。

放線菌が産生するカルバペネム系抗生物質は。

種々のものが知られているが、（１）式においてｃ６（
１’ｂ−８−ＣＨ＝ＣＨＮＨＣＯＣＨい、ＭＭ／７１１
０　（Ｌ＝−８−ＣＨ，−ＣＨ，−ＮＨＣＯＣＨいの３
化合物が文献的に知られている。

発明者らは９本発明に先だち、上記の母核を有ＣＨＯ）
が抗菌作用とβ−ラクタマーゼ阻害作用を有することを
見い出した（特願昭ｊ　、４；　−／７０１＞２７にＰ
Ａ−グ１７グ６−ｃ　　として記載）。

今回１本発明者らは、プルラシドマイシンＣを還元する
と、抗菌作用を有し、且つβ−ラクタマーゼ阻害作用の
対象が増大した化合物が得′られることを見い出し９本
発明を完成した。

本発明抗生物質は、（１）式においてＲが−Ｓ　−ＣＨ
，ＯＨであり、仁の点でＲがシスティノアミン誘導体で
ある既知のカルバペネム系抗生物質とは全く異なる新規
の抗生物質である。

以下に本抗生物質ナトリウム塩の物理的性状を示す。

（ａ）赤外線吸収スペクトル Ｂｒ νｍａｘ　　３３２０．２１乙０　、／７７０　、／１
，２０．／！；９０゜ｌダ００．／２３０．／コ３θ、
ｌθ６５．／θ２０゜９３ｊ、ざ９３．７７３．乙２Ｊ
、！；とｊα−′（ｂ）’Ｈ−核磁気共鳴スベクトル（
重水中、外部基準ＴＭＳ　）　（Ｊ＝Ｈｚ　） δ　１９７Ｃ３Ｈ，ｄ、Ｊ、、−乙ｊ　）、３．３７Ｃ
／Ｈ，ｄ　−ｄ　。

Ｊ＝　／　ＯＪおよびｌと３）、３．９０（／Ｈ，ｄ＝
ｄ、Ｊ＝９３および／ｉ、！；）、ｌＡ３〜４／Ｊ４Ｂ
３Ｈ，ｍ）。

弘９！；（／Ｈ，ｍ）、ＪＪｇ（／Ｈ，ｍ）ｐｐｍ次に
９本発明抗生物質の製造方法を示す。ブルラシドマイシ
ンＣ産生菌を栄養培地に好気的条件下に培養し、培養終
了後培養物からプルラシドマイシンＣおよびその塩を分
離採取し、それを還元することにより行なう。

培地組成、培地条件などは、抗生物質の生産に一般に用
いられているものを用いるとよい。培地は原則として、
炭素源、窒素源、無機塩などを含む。必要に応じて、ビ
タミン類、先駆物質、その他を加えプルラシドマイシン
Ｃの生産増加を図ってもよい。炭素源としては４例えば
、グルコース。

澱粉、テキストリン、グリセリン、糖蜜、有機酸などが
単独でまたは混合物として用いられる。窒素源としては
１例えば、大豆粉、コーンスチープリカー、肉エキス、
酵母エキス、綿実粉、ペプトン、　小麦胚芽、　硫酸ア
ンモニウム、硝酸アンモニウムなどが単独でまたは混合
物として用いられる。

無機塩としては９例えば、炭酸カルシウム、塩化ナトリ
ウム、塩化カリウム、硫酸マグネシウム。

塩化コバルト、各種リン酸塩などがあげられ、必要に応
じて培地に添加する。

培養も一般に抗生物質の製造に用いられる方法に準じて
行なえばよく、液体培養、特に大量生産を行なう場合は
、深部通気培養がよい。培地のｐＨは約１ｊ−１３が好
ましく、培養温度は約２０〜グθ℃、特に２５〜３２℃
が好ましい。培養時間は発酵の規模に大きく左右される
が、大量生産を行なう場合の培養時間は約２０〜ざ０時
間である。

培養終了後、培養物からプルラシドマイシンＣおよびそ
の塩を分離採取するには１通常の発酵生産物を分離採取
する方法を適宜用いる。例えば。

濾過、遠心分離、各種イオン交換樹脂やその他の活性吸
着剤による吸脱着やクロマトグラフィー。

各種有機溶媒による抽出などを適当に組み合オ）せると
よい。また、プルラシドマイシンＣおよびその塩の分解
を防ぐため１分離工程中に必要に応じて適当な安定剤を
使用することを考慮してもよい。

還元反応は還元剤の存在下に行なえばよく、この時用い
られる還元剤としては１例えば、水素化ホウ素リチウム
、水素化ホウ素ナトリウム、水素化ホウ素カリウム等が
挙げられるが、特に水素化ホウ素ナトリウムが好ましい
。反応は室温下で７〜２時間、ｐＨ６〜と好ましくは７
で行なう。溶媒としては、水、あるいは、メタノール、
エタノールなどのアルコール類、テトラヒドロフラン、
ジオキサンなどの水に可溶な溶媒を用いるとよい。

反応終了後、目的抗生物質を分離精製するには。

濾過、遠心分離、クロマトグラフィーなどの汎用される
方法を用いるとよい。

プルラシドマイシンＣ産生菌であるストレプトマイナス
・プルラシドマイ士ティカス（Ｓｔｒｅｐｔｏ−ｍｙｃ
ｅｓ　ｐ、Ｉｕｒａｃｉｄｏｍｙｃｅｔｉｃｕｓ）は、
／９７０年に土壌試料から分離された放線菌であり、標
準株は茨木県筑波郡谷田部町の微生物工業技術研究所に
昭和５６年を月／１日から微工研菌寄第ｊ９乙を号とし
て寄託しである。その菌学的性状は、特願昭ｊ４−／♂
θ６２１ｒに記載されている。

本発明においては、上記の菌株は勿論のこと。

ストレプトマイセス属に属し、抗生物質プルラシドマイ
シンＣを産生する全ての菌を用いることができる。

本発明抗生物質は広い抗菌スペクトルを有しており、ダ
ラム陽性菌にもダラム陰性菌にも有効であり、またエン
テロバクタ−・クロアカニ　タ２（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃ
ｔｅｒ　ｃｌｏａｃａｅ　９，２）の産生する十’７７
０スポリナーゼ型ならびにペニシリナーゼ型β−ラクタ
マーゼおよびクレブシェラ・エスピー３６３（Ｋｌｅｂ
ｓｉｅｌｌａ　Ｓｐ、３１Ｊ）の産生するペニシリナー
ゼ型β−ラクタマーゼに対して強い阻害活性を有するた
め、医薬、動物薬、消毒薬として有用である。以下に本
抗生物質の抗菌スペクトルを示す。

（以下余白） 従って本発明抗生物質は、経口的に、また非−経口的に
人または動物に投与される。汎用される賦形剤、安定化
剤、保存剤、湿潤剤、界面活性剤などを用いて９錠剤、
カプセル剤、粉剤などとして経口投与することもできる
し、注射剤、塗布剤。

半割などとして非経口で投与することもできる。

投与量は治療目的により異なるが、一般にセファロチン
の約／１０から数倍量程度９例えば皮下投与の場合成人
１日量は約０１〜３０ｇである。

なお２本抗生物質はβ−ラクタマーゼ阻止作用を有する
ため、β−ラクタム系抗生物質のβ−ラクタマーゼ生産
細菌に対する抗菌力を相乗的に増加させることもできる
。従って、公知のβ−ラクタム系抗生物質１例えば、ベ
ンジルペニシリン。

フェノキシメチルペニシリン、カルベニシリン。

アンピシリン、アモキシリンなどのペニシリン系抗生物
質、セファロリジン、セファロチン、セファソリン、セ
ファレキシン、セホキシチン、セフアセドリル、セファ
マンドール、セファピリン。

セフラジン、セファログリシン、セフテゾール。

セファトリジン、セフメタゾールなどのセファロスポリ
ン系抗生物質と併用してもよい。

次に本発明の目的化合物質の製造例を示すが。

下記実施例はなんら本発明を限定するものではない。

参考例 （ａ）発酵工程：可溶性澱粉０５％、グルコース０３％
、ポリペプトンθｊ％＋牛肉エキスθｊ％酵母エキスθ
２ｊ％９食塩０２３％、脱イオン水（ｐＨ７θ、殺菌前
）よりなる培地１００ｔｘｌを含む２１容三角フラスコ
にストレプトマイセス・プルラシドマイセテイカス　（
ＦＥＲＭ−ＰＪ−，９乙グ）の種培養スラントを接種し
、毎分／Ｉθ回転で、２ｔ’ｃ、ｇｒ時間振盪培養を行
なう。この培養液１ＯＯｔｔｔｌずつを、トマトペース
ト２．１１％、テキストリン、２．４ｇ％、乾燥酵母／
２係、塩化コバルト乙水和物θθ０θ乙チ、水（ｐＨ７
０，殺菌前）よりなる培地、２０Ａを含む３θｌ容ジャ
ーファーメンタ−に植菌し９通気量λθｌ／分、内圧０
２　ｋｇ　／　ｃｙｒ’Ｇ　。

攪拌数／３０〜３！；ＯｒＰｍで、２ｆ′Ｃ，乙Ｓ時間
培養する。

（ｂ）分離工程：上記工程で得られた培養液（ｌ乙ＯＥ
）に、塩化ベンジルジメチル−セチル・アンモニウム（
７２％　）を含む塩化メチレン（４Ｚθりを加え、活性
物質を塩化メチレン層に移行させ。

この塩化メチレン層を３チヨウ化ナトリウム水溶液（３
１）で逆抽出し、凍結乾燥すると活性物質の粗標品（乙
θｇ）を得る。この粗標品粉末（〃ｇ）を６００ｍ１の
バイオゲルＰ−２（バイオ−ラッド社製）で水を移動相
としてゲル濾過し、大腸菌に活性を示す分画を集め、凍
結乾燥すると、活性物質標品Ｃ１７７９）を得る。この
活性分画標品（ま３ｇ）を、ＱＡＥ−セファテックスＡ
−２３（ファルマシャ社製）を用いて、ｏＯｊチ塩化ア
ンモニウムを加えｐＨ７θとした食塩のグラディエンド
Ｃ００３％−０３チ）に付すと、Ｃ分画（２９θｇ／　
）　、　Ｂ分画Ｃｌ３０ｍ／）、Ａ分画（３３０ｔｔｒ
ｌ　）の順に溶出されてくる。Ｃを含む分画（約３θｍ
ｌ　）をバイオケルＰ−２のカラムで脱塩し。

活性物質を含む分画を集めてｐＨ乙％とじ、減圧濃縮後
、凍結乾燥すると、プルラシドマイシンＣナトリウム塩
の粉末（／ｊ■）を得る。

実施例 分離工程で得たプルラシドマイシンＣナトリウム塩の粉
末Ｃ１０１１ｆｌ）を００３；Ｍ’）ン酸緩衝液（ｐＨ
７０、３，１ｍｌ　）に溶解し、室温で攪拌しな力≦ら
水素化ホウ素ナトＶウムＣ１Ｏ！；６１１ｆ、ｌ／３モ
ル当量）を水（２６ｔμｌ）に溶かした溶液を加える。

７０分後、塩化ナトリウム（ｌｙ）を加えて溶解し、ｌ
θチ塩化ナトリウム水溶液で調整しｔコダイアイオンＨ
ｐ−１−２ｏｈａ　＜ｉｏｏ〜２θ０メツシュ）（三菱
化成社製）の２．０耐のカラムをこめ）は、ｉｏｓ塩化
ナトリウム水溶液で溶出し、！１ｔｎｌずつ分画する。

高速液体クロマトグラフィーで活性が検出される分画ｆ
−＃；を集め、２３；′Ｃ以下。

減圧下で３ｍｌまで濃縮し、析出した塩化ナトリウムを
枦去する。炉液をセファデックスＧ−１０Ｃｔθ〜／２
０μ）の３００清ｔのカラムにか（す、水で溶出し、脱
塩する。脱塩した分画を２！；”Ｃ以下。

減圧下で約３ｍｌまで濃縮し、凍結乾燥すると、無色の
無定形粉末＜ｒｖ）として３−ヒドロキシメチルスルフ
ィニル−乙−（／−ヒドロキシスルボニルオキシエチル
）−７−オキソ−ｌ−アザビシクロｌ１２０］−へブタ
−２−エン−２−カルボン酸を得る。

特許出願人　　塩野義製薬株式会社 手続補正書ζ自発） 〕鳳畔＼＼疫 昭和まン年Ｓ月７日 特許庁長官　殿 ／事件の表示　昭和５６年特許願第２／２４ｔ３ｊ；　
号２発明の名称 新規抗生物質カルバペネム誘導体およびその製造法３補
正をする者 事件との関係　特許出願人 住所　大阪府大阪市東区道修町３丁目１２番地名称　（
／９２）　　塩野義製薬株式会社代表者　　　吉　利　
−雄 弘代理人 住所　大阪市福島区鷺洲ｊ丁目１２番ｑ号塩野義製薬株
式会社特許部 よ補正の対象 明細書の発明の詳細な説明の欄。

６、補正の内容 （１）ＦＩＡ細書４！Ｒ３行目「システイノアミン、Ｊ
を「システアミン」に訂正する。

（２）同書同頁／１行目ｒ３！２０．２♂乙ＯＪを［３
弘３０．２９３０Ｊに訂正する。

（３）同書同頁／３行目「７７３」をｒ　７　、ｒ　ｊ
　Ｊに訂正する。

（４）同書ｌ／頁３行目「目的化合物質」を「目的化合
物」に訂正する。

（５）同書１２頁３〜弘行目「塩化ベンジルジメチル−
セチル・アンモニウム」を「ベンジルセチルジメチルア
ンモニウム＝クロライド」に訂正する。

（６）同書同頁／Ｉ−／２行目「活性物質標品」を「活
性分画標品」に訂正する。

（７）同書１３頁下から７〜乙行目「活性」を「還元体
」に訂正する。

以上

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 で示される化合物およびその製薬上許容される塩。 で示される化合物またはその塩を還元反応に付すことを
   特徴とする で示される化合物およびその製薬上許容される塩の製造
   法