JPH1160495A - Medicine for preventing disease for immune system immature animal - Google Patents

Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To obtain a medicine for preventing diseases for immune system immature animals, capable of reducing seriousness of diseases contracted after maturation, and of enhancing treatment effect against diseases contracted after maturation. SOLUTION: This medicine is obtained by including a compound selected from the group comprising (1) a protein polysaccharide obtained by drying mycelium, fruiting body, or culture broth of a basidiomycete belonging to the genus Coriolus, (2) a protein polysaccharide obtained by extracting protein polysaccharide (1) with hot water, condensing the obtained extract to dryness, (3) a protein polysaccharide obtained by extracting protein polysaccharide (1) with an alkali solution, neutralizing the obtained extract, removing substances having a molecular weight of 5,000 or smaller, followed by the condensation of the resultant solution to dryness, (4) a preparation from a bacterium belonging to, for example, the genus Diplococcus, and (5) a polysaccharide extracted from a fruiting body of a mushroom Lentinus edodes, as an active ingredient.

Description

【発明の詳細な説明】DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

【０００１】[0001]

【発明の属する技術分野】本発明は、免疫系未成熟期に
ある動物用（例えば、ヒトを含む哺乳動物用、鳥類用、
又は養殖水生動物用など）の疾病予防剤に関する。TECHNICAL FIELD The present invention relates to animals for the immature stage of the immune system (for example, mammals including humans, birds,
Or for cultured aquatic animals).

【０００２】[0002]

【従来の技術】ヒトの各種疾病（例えば、癌又は感染
症）に対する従来の治療又は予防方法では、患者が或る
疾病に罹患したことが判明した後に治療を実施するか、
あるいは、或る疾病に罹患する可能性の高い個体、すな
わち、ハイリスク個体に対して予防を施すことが一般的
である。例えば、ヒト癌治療には、手術や放射線療法、
薬物療法などが用いられているが、これらの治療効果は
決して充分なものではなく、中高年のガン死はいまだに
社会的問題である。最近では、これら治療法の副作用が
問題視され、患者の生活の質（ＱＯＬ）をいかにして保
つかということも重要視されている。同じく、ヒト感染
症治療には化学療法剤やワクチンなどが用いられて成果
をあげてきたものの、最近では、メチシリン耐性黄色ぶ
どう球菌（ＭＲＳＡ）のような薬剤耐性微生物による院
内感染症や腸管出血性大腸菌Ｏ−１５７感染症など、従
来の一般治療では対処が難しいものが現れ、社会的問題
になっている。加えて、このような癌や感染症のような
成人病に対しては、多種にわたる薬剤が用いられ、この
ことが医療財政を逼迫させている一つの原因でもある。
抜本的な治療のみならず予防法も含めた新たな治療法が
待望されている。BACKGROUND OF THE INVENTION Conventional treatment or prevention of various human diseases (e.g., cancer or infectious diseases) involves treating the patient after it is determined that the patient has the disease,
Alternatively, prevention is generally performed on individuals who are likely to suffer from a certain disease, that is, high-risk individuals. For example, human cancer treatment includes surgery, radiation therapy,
Although drug therapy and the like have been used, their therapeutic effects have never been sufficient, and middle-aged and elderly cancer deaths are still a social problem. Recently, the side effects of these treatments have been regarded as a problem, and how to maintain the quality of life (QOL) of patients has also been emphasized. Similarly, although chemotherapeutic agents and vaccines have been used successfully in the treatment of human infectious diseases, recently hospital-acquired infections and intestinal hemorrhagic diseases caused by drug-resistant microorganisms such as methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) have been successful. Some difficulties to cope with conventional general treatment, such as Escherichia coli O-157 infection, have emerged and have become a social problem. In addition, a wide variety of drugs are used for such adult diseases, such as cancer and infectious diseases, which is one of the factors that is constraining medical finances.
There is a long-awaited need for new treatments including not only radical treatments but also preventive measures.

【０００３】また、家畜・家禽産業や養殖業において
は、多頭（又は多羽）飼育環境によるストレスや環境汚
染等により、治療の難しい病気や、消化器又は呼吸器感
染症などの日和見感染症が発生しやすく、最終的に敗血
症などに罹り、死亡する確率が高い。なかでも、生体防
御機構が未熟な幼児期個体や、生体防御機構が低下して
いる個体での死亡率は極めて高い。これに対処するため
に、各種の抗生物質や抗菌剤が用いられてきたが、薬剤
耐性の増大や、豚、牛、家禽、又は魚類などから得られ
る加工食品等の生産物中への薬剤或いはその代謝物等の
残留問題が発生し社会的問題となり、これら薬剤の使用
が法的に制限され、さらに前記検査が厳しく随時行われ
るようになった。即ち、これらの薬剤の使用中は勿論の
こと、使用後一定期間は動物を出荷することができない
ようにもなった。そのため、経済的損失は大きく、家
畜、家禽、又は養殖水生動物等の生産性が低下するな
ど、経営上重大な問題を生じている。[0003] In the livestock and poultry industries and the aquaculture industry, illnesses that are difficult to treat and opportunistic infections such as gastrointestinal or respiratory infections are caused by stress or environmental pollution caused by a multi-headed (or multi-bird) breeding environment. It is easy to occur and eventually has a high probability of suffering from sepsis and death. Above all, the mortality rate is extremely high in infants whose biological defense mechanism is immature or in individuals whose biological defense mechanism is reduced. To cope with this, various antibiotics and antibacterial agents have been used, but drug resistance has been increased, and drugs or products in products such as processed foods obtained from pigs, cattle, poultry, fish, etc. have been used. Residual problems such as metabolites have arisen and have become social problems, the use of these drugs has been legally restricted, and the above-mentioned tests have been conducted strictly as needed. That is, animals cannot be shipped for a certain period after use, as well as during use of these drugs. As a result, the economic loss is large, and there is a serious problem in management such as a decrease in productivity of livestock, poultry, cultured aquatic animals, and the like.

【０００４】一方、犬科又は猫科動物を中心とした愛が
ん動物に対する関心が高まり、これらの動物が人間生活
の中の一部として取り扱われるようになっている。これ
ら愛がん動物が同じく癌や感染症等の疾病を煩ったと
き、対処療法としてとられている治療法は、抗生物質を
中心とした化学療法が適用されているにとどまってい
る。また、一般の細菌感染に加えて、ウイルス感染につ
いても注目されはじめていて、例えばイヌパルボウイル
スは、現在も多くの幼犬が感染しており、重篤な好中球
減少症が発現して死に至る病として、集中治療が必要で
ある場合も少なくない。猫においても猫免疫欠乏ウイル
ス、又は猫白血病ウイルス等による感染により多くの猫
が易感染状態に陥っており、こうした愛がん動物に対す
る予防を含めた抜本的な対応策が望まれている。[0004] On the other hand, interest in carnivore animals, mainly dogs and cats, has increased, and these animals have been treated as part of human life. When these benign animals also suffer from diseases such as cancer and infectious diseases, the only remedies used are chemotherapy mainly using antibiotics. In addition to general bacterial infections, attention has also been focused on viral infections.For example, canine parvovirus is still infected in many puppies, causing severe neutropenia and death. In many cases, intensive care is necessary as a leading disease. In cats, many cats are easily infected due to infection with feline immunodeficiency virus, feline leukemia virus, and the like, and drastic countermeasures including prevention for such beloved cancer animals are desired.

【０００５】[0005]

【発明が解決しようとする課題】本発明者は、種々の予
防方法を鋭意研究したところ、新生児期の個体に対して
或る種の予防処置を施しておくと、新生児期のみなら
ず、その個体が成熟した後に罹病しても、その疾病の重
篤度が軽減されることを見出した。更に、新生児期にお
いて前記の予防処置を施された個体では、成熟後に罹病
した疾病に対する治療効果が向上することも見出した。
新生児期における予防処置が、成熟後の疾病の重篤度や
治療効果に有利な影響を与えることは、従来全く知られ
ておらず、前記の予防処置は新規な治療手段を提供する
ものであり、本発明は、こうした知見に基づくものであ
る。The present inventors have conducted intensive studies on various preventive methods. As a result, if a certain preventive treatment is applied to a neonatal individual, not only the neonatal period but also the neonatal period can be prevented. It has been found that even if an individual becomes ill after maturity, the severity of the disease is reduced. Furthermore, it has been found that in the individual who has been subjected to the above-mentioned preventive treatment in the neonatal period, the therapeutic effect on the disease afflicted after maturation is improved.
It has never been known that preventive treatment in the neonatal period has an advantageous effect on the severity and therapeutic effect of a disease after maturation, and the preventive treatment described above provides a novel therapeutic means. The present invention is based on these findings.

【０００６】[0006]

【課題を解決するための手段】本発明は、（１）カワラ
タケ属に属する担子菌の菌糸体、子実体、又は培養物
を、含水率が１０重量％以下になるまで９５〜１１５℃
で乾燥することにより得ることができ、タンパク質含量
が１０〜２０％であるタンパク多糖体、（２）前記タン
パク多糖体（１）を熱水により抽出し、得られた抽出液
を濃縮し、更に脱溶媒することにより得ることができ、
タンパク質含量が２０〜３０％であるタンパク多糖体、
（３）前記タンパク多糖体（１）をアルカリ溶液により
抽出し、得られた抽出液を中和し、分子量５０００以下
の物質を除去し、濃縮し、乾燥することにより得ること
ができ、タンパク質含量が１８〜３８％であるタンパク
多糖体、（４）ディプロコッカス属、ストレプトコッカ
ス属、又はラクトバシリウス属に属する微生物からの調
製物、及び（５）シイタケの子実体から抽出することに
より得ることができる多糖体からなる群から選んだ化合
物を有効成分として含有することを特徴とする、免疫系
未成熟期にある動物（以下、「免疫系未成熟動物」と称
することがある）用の疾病予防剤に関する。According to the present invention, there is provided (1) a method wherein a mycelium, a fruiting body, or a culture of basidiomycete belonging to the genus Kawatake is grown at 95 to 115 ° C. until the water content becomes 10% by weight or less.
And (2) extracting the protein polysaccharide (1) with hot water, concentrating the obtained extract, Can be obtained by removing the solvent,
A protein polysaccharide having a protein content of 20 to 30%,
(3) The protein polysaccharide (1) can be obtained by extracting the protein polysaccharide (1) with an alkaline solution, neutralizing the obtained extract, removing substances having a molecular weight of 5,000 or less, concentrating, and drying. From 18 to 38%, (4) a preparation from a microorganism belonging to the genus Diprococcus, Streptococcus, or Lactobacillus, and (5) an extract obtained from fruiting bodies of shiitake mushrooms. Disease prevention for animals in the immature stage of the immune system (hereinafter sometimes referred to as "immune system immature animals"), characterized by containing as an active ingredient a compound selected from the group consisting of polysaccharides that can be obtained. Agent.

【０００７】本明細書において、「疾病予防」には、免
疫系未成熟期状態の動物に本発明の疾病予防剤を投与し
ておけば、その後、非投与状態が続いて、その疾病予防
剤自体が生体内には存在しなくなる期間が長期間に亘っ
ても、（１）その個体が成熟した後に、各種疾病に罹患
することを防ぐこと、（２）その個体が成熟した後に、
仮に疾病に罹患した場合であっても、疾病の重篤度を軽
減することができること、及び（３）その個体が成熟し
た後に、仮に疾病に罹患した場合であっても、疾病に対
する治療が容易になることなどが含まれる。[0007] In the present specification, the term "disease prevention" means that if the disease preventive agent of the present invention is administered to an animal in the immature stage of the immune system, then the disease preventive agent continues to be in a non-administered state. Even if the period during which the substance itself does not exist in the living body is long, (1) preventing the individual from suffering from various diseases after maturation, (2) after the individual has matured,
Even if the disease occurs, the severity of the disease can be reduced, and (3) after the individual has matured, the disease can be easily treated even if the disease occurs. And so on.

【０００８】[0008]

【発明の実施の形態】以下、本発明について詳細に説明
する。本発明において有効成分として用いることのでき
る化合物は、 （１）サルノコシカケ科（Ｂａｓｉｄｉｏｍｙｃｅｔｅ
ｓ）のカワラタケ属（Ｃｏｒｉｏｌｕｓ ｖｅｒｓｉｃ
ｏｌｏｒ）に属する担子菌の菌糸体、子実体、又は培養
物を、含水率が１０重量％以下になるまで９５〜１１５
℃で乾燥することにより得ることができ、タンパク質含
量が１０〜２０％であるタンパク多糖体（以下、タンパ
ク多糖体ＴＴ−１と称することがある）； （２）前記タンパク多糖体（１）〔すなわち、タンパク
多糖体ＴＴ−１〕を熱水により抽出し、得られた抽出液
を濃縮し、更に脱溶媒することにより得ることができ、
タンパク質含量が２０〜３０％であるタンパク多糖体
（以下、タンパク多糖体ＴＴ−２と称することがあ
る）； （３）前記タンパク多糖体（１）〔すなわち、タンパク
多糖体ＴＴ−１〕をアルカリ溶液により抽出し、得られ
た抽出液を中和し、分子量５０００以下の物質を除去
し、濃縮・乾燥することにより得ることができ、タンパ
ク質含量が１８〜３８％（特には３０〜３８％）である
タンパク多糖体（以下、タンパク多糖体ＴＴ−３と称す
ることがある）； （４）ディプロコッカス属（Ｄｉｐｌｏｃｏｃｃｕ
ｓ）、ストレプトコッカス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃ
ｕｓ）、又はラクトバシリウス属（Ｌａｃｔｏｂａｃｉ
ｌｌｕｓ）に属する微生物（特には菌体）からの調製
物；又は （５）シイタケの子実体から抽出することにより得るこ
とができる多糖体；である。BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION Hereinafter, the present invention will be described in detail. Compounds that can be used as an active ingredient in the present invention include: (1) Basidiomycetate
s) (Coriolus versic)
color), the mycelium, the fruiting body, or the culture of the basidiomycete belonging to the range of 95 to 115 until the water content becomes 10% by weight or less.
Protein polysaccharide which can be obtained by drying at a temperature of 10 ° C. and has a protein content of 10 to 20% (hereinafter sometimes referred to as protein polysaccharide TT-1); (2) the protein polysaccharide (1) [ That is, protein polysaccharide TT-1] can be obtained by extracting with hot water, concentrating the obtained extract, and further removing the solvent.
A protein polysaccharide having a protein content of 20 to 30% (hereinafter sometimes referred to as a protein polysaccharide TT-2); (3) the protein polysaccharide (1) [that is, the protein polysaccharide TT-1] It can be obtained by extracting with a solution, neutralizing the obtained extract, removing substances having a molecular weight of 5,000 or less, concentrating and drying, and having a protein content of 18 to 38% (particularly 30 to 38%). (Hereinafter sometimes referred to as protein polysaccharide TT-3); (4) Diplococcus genus (Diplococcus)
s), Streptococcus sp.
us) or Lactobacillus sp.
(5) a polysaccharide that can be obtained by extraction from the fruiting body of shiitake mushroom.

【０００９】本発明の有効成分として用いることのでき
るタンパク多糖類ＴＴ−１は、カワラタケ属に属する天
然の担子菌、又はカワラタケ属に属する担子菌の人工培
養によって得た菌糸体、培養物、若しくは子実体を、含
水率が１０重量％以下になるまで９５〜１１５℃で乾燥
することによって得ることができ、好ましくは、水性液
体培地を用いてカワラタケ属に属する担子菌の深部培養
を行い、得られる培養混合物、すなわち、菌体と培地と
培養生成物との混合物であるブロス（ｂｒｏｔｈ）を、
含水率が１０重量％以下になるまで９５〜１１５℃で乾
燥処理することによって得ることができる。[0009] The protein polysaccharide TT-1 which can be used as the active ingredient of the present invention is a mycelium, a culture, or a natural basidiomycete belonging to the genus Kawatatake or an artificial culture of a basidiomycete belonging to the genus Kawatatake. The fruiting body can be obtained by drying at 95 to 115 ° C. until the water content becomes 10% by weight or less. Preferably, the fruiting body is subjected to deep culture of basidiomycete belonging to the genus Agaricus using an aqueous liquid medium. The resulting culture mixture, ie, broth, which is a mixture of cells, medium and culture product,
It can be obtained by drying at 95 to 115 ° C. until the water content becomes 10% by weight or less.

【００１０】天然の担子菌を原料とする場合には、その
まま前記の乾燥処理を行うこともできるが、前処理とし
て、例えば、蒸留水、生理食塩水、又は各種緩衝液など
で洗浄することもできる。前記の乾燥処理によって得ら
れた乾燥物を、場合により、細粉化することもできる。When a natural basidiomycete is used as a raw material, the above-mentioned drying treatment can be carried out as it is, but as a pretreatment, for example, washing with distilled water, physiological saline, or various buffer solutions or the like is also possible. it can. The dried product obtained by the above-mentioned drying treatment may be pulverized, if necessary.

【００１１】前記「人工培養」は、例えば、カワラタケ
属に属する担子菌が着生している腐朽植物体の一部、あ
るいはその植物体上に発生している子実体の組織、又は
胞子を適当な寒天培地に移植し、数週間培養し、この培
養操作を更に２〜３回繰り返し行って、雑菌の混入が無
いのを確認した後、これを母菌として液体培地又は固形
培地に接種して培養を行う。液体培地における培養に
は、例えば、静置、振盪、通気、又は通気撹拌培養等の
いずれの方法を用いることもでき、固形培地としては、
例えば、寒天、ゼラチン、澱粉、鋸屑、木材、パルプ、
海綿、合成樹脂、ゴム、又は砂粒等を挙げることがで
き、それらを適宜組み合わせることもできる。前記の担
子菌を培養するための培地は、固体培地又は液体培地の
何れでも使用可能であるが、液体培地の方が取り扱い及
び生産性の点から非常に便利である。[0011] The above-mentioned "artificial culture" refers to, for example, a method in which a part of a decaying plant on which a basidiomycete belonging to the genus Coriolus has grown, or a fruiting body tissue or a spore that has developed on the plant. After transplanting to an agar medium, culturing for several weeks, repeating this culturing operation two or three more times, and confirming that there is no contamination of various bacteria, inoculating this into a liquid medium or a solid medium as a mother bacterium. Perform culture. For culturing in a liquid medium, for example, any method such as standing, shaking, aeration, or aeration stirring culture can be used.
For example, agar, gelatin, starch, sawdust, wood, pulp,
Examples include sponge, synthetic resin, rubber, and sand particles, which can be appropriately combined. As a medium for culturing the basidiomycete, either a solid medium or a liquid medium can be used, but a liquid medium is much more convenient in terms of handling and productivity.

【００１２】純粋な母菌からの培養用の培地としては、
通常の培養に用いられる処方を用いることができるが、
前記担子菌の発育に必要な諸栄養素を一定の割合で与え
ることが必要である。すなわち、炭素源としては、糖
質、例えば、グルコースなどを使用することができ、窒
素源としては、通常の天然物由来の酵母、酵母エキス、
アンモニウム塩類、若しくは尿素などをはじめとする有
機又は無機の窒素含有物を使用することができる。ま
た、各種アミノ酸あるいはその塩の混合物、具体的には
アスパラギン酸、スレオニン、セリン、グルタミン酸、
グリシン、アラニン、シスチン、バリン、メチオニン、
イソロイシン、ロイシン、チロシン、フェニルアラニ
ン、リジン、ヒスチジン、アルギニン、プロリン、トリ
プトファン、ヒドロキシプロリンなどのアミノ酸又はそ
れらの塩を所定の割合で混合することによって与えるこ
ともできる。[0012] As a culture medium for culture from a pure parent bacterium,
Although the formulation used for normal culture can be used,
Various nutrients necessary for the growth of the basidiomycete need to be given at a constant rate. That is, as a carbon source, a saccharide, for example, glucose or the like can be used, and as a nitrogen source, ordinary natural product-derived yeast, yeast extract,
Organic or inorganic nitrogen-containing substances such as ammonium salts or urea can be used. In addition, a mixture of various amino acids or salts thereof, specifically, aspartic acid, threonine, serine, glutamic acid,
Glycine, alanine, cystine, valine, methionine,
It can also be provided by mixing amino acids such as isoleucine, leucine, tyrosine, phenylalanine, lysine, histidine, arginine, proline, tryptophan, hydroxyproline or salts thereof in a predetermined ratio.

【００１３】その他の無機塩類としては、例えば、リン
酸塩、マグネシウム塩、鉄塩、又はその他の無機塩類を
使用することができる。この他に生長に必要なビタミ
ン、又は核酸等を適宜添加することができる。培養の初
発ｐＨは約２〜７であり、２０〜３３℃において通常２
〜２０日間、好ましくは２〜７日間培養を行う。通気撹
拌培養を行う場合には、通気量０．１〜２．０リットル
／リットル（培地）／分、撹拌速度３０〜８００ｒｐｍ
の範囲で実施するのが適当である。As the other inorganic salts, for example, phosphates, magnesium salts, iron salts or other inorganic salts can be used. In addition, vitamins or nucleic acids necessary for growth can be appropriately added. The initial pH of the culture is about 2-7, usually 2-20 at 20-33 ° C.
Culture is performed for up to 20 days, preferably for 2 to 7 days. When performing aeration and agitation culture, the aeration amount is 0.1 to 2.0 liter / liter (medium) / minute, and the agitation speed is 30 to 800 rpm.
It is appropriate to carry out within the range.

【００１４】前記の「深部培養法」とは、通気と撹拌と
を行いながら液中で培養する方法を意味し、菌体の増殖
は液体培地の表面ではなく、液層の深部において主とし
て行われる。この際の通気量は、一般には、０．１〜
２．０リットル／リットル（培地）／分であり、撹拌速
度は、一般には、３０〜８００ｒｐｍの範囲である。約
７日間の培養期間で、目的とするタンパク多糖体が充分
に産生される。この培養物の乾燥は、９５℃〜１００℃
で、水分含有率が約１０重量％以下になるまで実施す
る。この乾燥処理に用いる乾燥手段は特に限定されるこ
とはなく、例えば、ドラムドライアー、フラッシュドラ
イアー、又はザンバイ等の一般的な乾燥手段を使用する
ことができる。なお、含水率が１０重量％以下に達した
ことは、任意の方法で確認することができる。例えば、
得られたタンパク多糖体１０ｍｇ〜５００ｍｇをアンハ
イドレートソルベント（三菱化学，日本）に加え、カー
ルフィッシャー装置を用いて含水率を確認することがで
きる。The above-mentioned "submerged culture method" means a method of culturing in a liquid while aerating and stirring, and the growth of cells is mainly carried out in the deep part of the liquid layer, not on the surface of the liquid medium. . The ventilation rate at this time is generally 0.1 to
2.0 liters / liter (medium) / minute and the agitation speed is generally in the range of 30-800 rpm. In a culture period of about 7 days, the desired protein polysaccharide is sufficiently produced. The culture is dried at 95 ° C to 100 ° C.
Until the water content becomes about 10% by weight or less. The drying means used for this drying treatment is not particularly limited, and for example, a general drying means such as a drum dryer, a flash dryer, or a Zamby can be used. The fact that the water content has reached 10% by weight or less can be confirmed by any method. For example,
10 mg to 500 mg of the obtained protein polysaccharide is added to an unhydrate solvent (Mitsubishi Chemical, Japan), and the water content can be confirmed using a Karl Fischer apparatus.

【００１５】本発明の有効成分として用いることのでき
るタンパク多糖体ＴＴ−２は、前記のようにして得られ
たタンパク多糖体ＴＴ−１を、熱水（例えば、８０℃〜
９８℃の熱水）により、一段階又は多段階にわたって抽
出し、得られた抽出液を濃縮し、更に脱溶媒することに
よって得ることができる。前記のタンパク多糖体ＴＴ−
１を、親油性有機溶媒（例えば、ｎ−ヘキサン、ベンゼ
ン、石油エーテル、クロロホルム、又は四塩化炭素等）
で処理して脱脂してから、抽出工程を行うこともでき
る。The protein polysaccharide TT-2 that can be used as the active ingredient of the present invention is obtained by converting the protein polysaccharide TT-1 obtained as described above into hot water (for example, 80 ° C.
(98 ° C. hot water) for one or more steps, and the resulting extract is concentrated and further desolvated. The protein polysaccharide TT-
1 is a lipophilic organic solvent (eg, n-hexane, benzene, petroleum ether, chloroform, carbon tetrachloride, etc.)
And then degreased, followed by an extraction step.

【００１６】抽出処理は撹拌下に行なうことも、又は撹
拌せずに行なうこともできる。前記濃縮方法としては、
例えば、遠心分離法、又はロータリーエバポレーターを
用いる方法などを挙げることができる。また、前記脱溶
媒方法としては、例えば、凍結乾燥法などを挙げること
ができる。The extraction can be carried out with or without stirring. As the concentration method,
For example, a centrifugal separation method, a method using a rotary evaporator, and the like can be given. Examples of the desolvation method include a freeze-drying method.

【００１７】本発明の有効成分として用いることのでき
るタンパク多糖体ＴＴ−３は、前記のようにして得られ
たタンパク多糖体ＴＴ−１を、アルカリ溶液により抽出
し、得られた抽出液を中和し、分子量５０００以下の物
質を除去し、更に、濃縮し、乾燥することによって得る
ことができる。The protein polysaccharide TT-3 that can be used as the active ingredient of the present invention is obtained by extracting the protein polysaccharide TT-1 obtained as described above with an alkaline solution, and extracting the resulting extract with a medium. And removing the substance having a molecular weight of 5,000 or less, further concentrating and drying.

【００１８】タンパク多糖体ＴＴ−３を調製するための
前記抽出処理では、特に限定するものではないが、０．
０１Ｎ〜２Ｎのアルカリ水溶液を、タンパク多糖体ＴＴ
−１（乾燥重量）に対して５〜２００倍の量で使用する
のが好ましい。０．０１Ｎ〜２Ｎの濃度範囲のアルカリ
水溶液を用いて前記タンパク多糖体ＴＴ−１を抽出する
場合には、好ましくは５０℃〜１００℃、より好ましく
は８０℃〜９８℃の温度下で２０分〜１０時間程度の処
理で、充分に目的を達成することができる。また、前記
抽出操作は１回でもよいが、必要に応じ数回（２回〜１
０回、好ましくは３〜８回）反復して行なうこともでき
る。In the above-mentioned extraction treatment for preparing the protein polysaccharide TT-3, although not particularly limited, the extraction treatment is not limited to 0.1.
01N to 2N aqueous alkaline solution was converted to protein polysaccharide TT
It is preferable to use 5-200 times the amount of -1 (dry weight). When the protein polysaccharide TT-1 is extracted using an alkaline aqueous solution having a concentration range of 0.01N to 2N, it is preferably at 50 ° C to 100 ° C, more preferably at 80 ° C to 98 ° C for 20 minutes. The purpose can be sufficiently achieved by the treatment for about 10 to 10 hours. Further, the extraction operation may be performed once, but may be performed several times (two times to one
(0 times, preferably 3 to 8 times).

【００１９】更には、最初の抽出工程を希アルカリ水溶
液により行い、続いて、アルカリ濃度を段階的に高めた
水溶液を順々に用いて、抽出工程を多段階的に行なうこ
ともできる（すなわち、複数回抽出処理又は多段的抽出
処理）。前記の複数回抽出処理の一部の抽出操作におい
て、同一濃度の抽出液による抽出を反復することもでき
る。抽出操作を複数回反復した際には、抽出の回数にか
かわらず、上記温度下での加熱時間の合計は２０時間以
下であることが、有効成分の分解を防止するうえから好
ましい。Further, it is also possible to carry out the first extraction step with a dilute aqueous alkali solution, and then to carry out the extraction step in multiple steps by using successively aqueous solutions having a stepwise increase in alkali concentration (that is, the extraction step is carried out in multiple steps). Extraction processing or multi-stage extraction processing). In a part of the extraction operation of the above-mentioned multiple extraction processing, extraction with the same concentration of the extract may be repeated. When the extraction operation is repeated a plurality of times, the total heating time at the above temperature is preferably 20 hours or less, regardless of the number of extractions, from the viewpoint of preventing the decomposition of the active ingredient.

【００２０】使用することのできるアルカリとしては、
例えば、アルカリ金属又はアルカリ土類金属の水酸化
物、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム若しく
は水酸化カルシウム、あるいはアンモニア水などを挙げ
ることができるが、特に水酸化ナトリウムが好ましい。As the alkali which can be used,
For example, an alkali metal or alkaline earth metal hydroxide, for example, sodium hydroxide, potassium hydroxide or calcium hydroxide, or aqueous ammonia can be used, and sodium hydroxide is particularly preferable.

【００２１】このようにして得られる抽出液を、常法通
り、例えば、鉱酸（例えば、希塩酸）により中和した
後、得られた中和抽出液を次の低分子除去処理工程にか
けることができる。この場合、各抽出操作毎に中和抽出
液を低分子除去処理することもできるが、また、各中和
抽出液を一緒に合わせてから低分子除去処理することも
できる。After neutralizing the thus obtained extract with, for example, a mineral acid (for example, dilute hydrochloric acid), the obtained neutralized extract is subjected to the next low molecular weight removal treatment step. Can be. In this case, the neutralized extract may be subjected to the low-molecular-weight removal treatment for each extraction operation, or the neutralized extracts may be combined together and then subjected to the low-molecular-weight removal treatment.

【００２２】タンパク多糖体ＴＴ−３を調製するための
前記低分子除去処理は、特に限定されるものではない
が、例えば、透析、限外濾過、ゲル濾過、イオン交換樹
脂処理、硫酸アンモニウムなどによる塩析、及び有機溶
媒による沈殿処理などの１種又は２種以上の方法の適用
によって行なうことができる。これらの内、特に効果的
に適用することができる方法は、限外濾過処理である。The low molecular weight removal treatment for preparing the protein polysaccharide TT-3 is not particularly limited, and examples thereof include dialysis, ultrafiltration, gel filtration, ion exchange resin treatment, and salting with ammonium sulfate. It can be carried out by applying one or more methods such as precipitation and precipitation treatment with an organic solvent. Among them, a particularly effective method is an ultrafiltration treatment.

【００２３】限外濾過法において用いることのできる膜
は、分画分子量５０００〜１５０００表示の膜であり、
標準物質としてチトクロームｃ（分子量１３０００）に
対して阻止率９８〜１００％以上を有するものが有効で
ある。また、上記膜を用いて分子量５０００以下の低分
子を中和抽出液から除去するための操作条件に関して
は、例えば、装置の形状、又は中和抽出液の処理量など
により、適宜調整することができる。限外濾過の場合に
は、圧力は好ましくは０．５〜５ｋｇ／ｃｍ² 、より好
ましくは１〜４ｋｇ／ｃｍ² であり、操作温度は、膜の
性状により異なるが、通常５〜７０℃で行うことが一般
的である。The membrane that can be used in the ultrafiltration method is a membrane having a molecular weight cut-off of 5000 to 15,000.
A standard substance having an inhibition rate of 98 to 100% or more with respect to cytochrome c (molecular weight 13,000) is effective. The operating conditions for removing low-molecular-weight molecules having a molecular weight of 5,000 or less from the neutralized extract using the above-mentioned membrane can be appropriately adjusted according to, for example, the shape of the apparatus or the throughput of the neutralized extract. it can. In the case of ultrafiltration, the pressure is preferably 0.5 to 5 kg / cm ² , more preferably 1 to 4 kg / cm ² , and the operating temperature varies depending on the properties of the membrane. It is common to do.

【００２４】前記低分子除去処理によって前記中和抽出
液から分子量５０００以下の低分子物質を除去した後
に、濃縮処理を常法（例えば、限外ろ過、逆浸透法、又
はゲルクロマトグラフィー）により実施し、更に乾燥処
理を常法（例えば、噴霧乾燥又は凍結乾燥）により実施
することができる。After the low-molecular substance having a molecular weight of 5,000 or less is removed from the neutralized extract by the low-molecular removal treatment, the concentration treatment is carried out by a conventional method (eg, ultrafiltration, reverse osmosis, or gel chromatography). Further, the drying treatment can be carried out by a conventional method (for example, spray drying or freeze drying).

【００２５】本発明の有効成分として用いることのでき
る、カワラタケ属に属する担子菌由来のタンパク多糖体
ＴＴ−３の代表例は、一般名でＰＳＫと呼称されている
ものであって、クレスチンという商品名で三共株式会社
から市販されている。ＰＳＫは、すでに臨床的に用いら
れており、癌患者の生存期間を延長させる効果のあるこ
とが実証されている［Ｎａｋａｚａｔｏ，Ｈ．，ｅｔ
ａｌ．，Ｔｈｅ Ｌａｎｃｅｔ，３４３，１１２２−１
１２６（１９９４）］。A typical example of the protein polysaccharide TT-3 derived from Basidiomycetes belonging to the genus Kawatake, which can be used as the active ingredient of the present invention, is a product commonly called PSK and a product called krestin. It is commercially available from Sankyo Corporation under its name. PSK has already been used clinically and has been demonstrated to have a prolonging effect on the survival of cancer patients [Nakazato, H. et al. , Et
al. , The Lancet, 343, 1122-1.
126 (1994)].

【００２６】ＰＳＫは、カワラタケPSK is Kawatake mushroom

【外１】 ＣＭ−１０１株［ＦＥＲＭ−Ｐ２４１２（ＡＴＣＣ ２
０５４７）］の菌糸体から得られるタンパク多糖体であ
って、その主要画分の糖部分はα及びβ−Ｄ−グルカン
で、このグルカン部分の構造は、１→３、１→４、及び
１→６結合を含む分枝構造であり、主な構成単糖は、グ
ルコースやマンノースである。また、ＰＳＫは約１８〜
３８％のタンパク質を含む。タンパク質の構成アミノ酸
は、アスパラギン酸やグルタミン酸等の酸性アミノ酸
と、バリンやロイシン等の中性アミノ酸が多く、リジン
やアルギニン等の塩基性アミノ酸は少ない。水に可溶で
あるが、メチルアルコール、ピリジン、クロロホルム、
ベンゼン、又はヘキサンには殆ど溶けない。約１２０℃
から徐々に分解する。[Outside 1] CM-101 strain [FERM-P2412 (ATCC 2
0547)], wherein the sugar fraction of the main fraction is α and β-D-glucan, and the structure of the glucan moiety is 1 → 3, 1 → 4, and 1 → It has a branched structure containing 6 bonds, and the main constituent monosaccharides are glucose and mannose. Also, PSK is about 18 ~
Contains 38% protein. As constituent amino acids of proteins, there are many acidic amino acids such as aspartic acid and glutamic acid, neutral amino acids such as valine and leucine, and few basic amino acids such as lysine and arginine. Although soluble in water, methyl alcohol, pyridine, chloroform,
Almost insoluble in benzene or hexane. About 120 ° C
Decomposes slowly from.

【００２７】なお、本発明におけるタンパク多糖体ＴＴ
−１、タンパク多糖体ＴＴ−２、及びタンパク多糖体Ｔ
Ｔ−３の出発原料に関しては、前記のカワラタケ菌ＣＭ
−１０１株のみならず、カワラタケ属に属する他のカワ
ラタケ菌株（例えば、ＦＥＲＭ−Ｐ Ｎｏ．２４１３〜
２４２６）、ニクスバタケ［Ｃｏｒｉｏｌｕｓ ｃｏｎ
ｓｏｒｓ（Ｂｅｒｋ．）Ｉｍａｚ．］、ヤキフタケThe protein polysaccharide TT of the present invention
-1, protein polysaccharide TT-2, and protein polysaccharide T
Regarding the starting material of T-3, the above-mentioned Kawatake mushroom CM
-101 strain as well as other Kawatake mushroom strains belonging to the genus Kawatake (for example, FERM-P No. 2413-
2426), Nix bamboo [Coriolus con
sors (Berk.) Imaz. ]

【外２】 ミノタケ［Ｃｏｒｉｏｌｕｓ ｂｉｆｏｒｍｉｓ（Ｋｌ
ｏｔｚ．）Ｐａｔ．］、アラゲカワラタケ[Outside 2] Minotake [Coriolus biformis (Kl
otz. ) Pat. ], Arakawakawatake

【外３】 サカズキカワラタケ［Ｃｏｒｉｏｌｕｓ ｃｏｎｃｈｉ
ｆｅｒ（Ｓｃｈｗ．）Ｐａｔ．］、又はハカワラタケ
［Ｃｏｒｉｏｌｕｓ ｐａｒｇａｍｅｎｕｓ（Ｆｒ．）
Ｐａｔ．］等の担子菌株も使用可能である。[Outside 3] Sakazuki Kawaratake [Coriolus conchi
fer (Schw.) Pat. ] Or Hakawataketake [Coriolus paragamenus (Fr.)
Pat. ] Can also be used.

【００２８】本発明において有効成分として用いること
のできるタンパク多糖体ＴＴ−１、タンパク多糖体ＴＴ
−２、及びタンパク多糖体ＴＴ−３のタンパク質含量
は、それぞれ、１０〜２０％、２０〜３０％、及び１８
〜３８％（好ましくは３０〜３８％）である。タンパク
多糖体ＴＴ−３の分子量は、超遠心法又はゲルクロマト
グラフィーを用いた分子量測定法によれば、５０００〜
３０００００である。The protein polysaccharide TT-1 and the protein polysaccharide TT which can be used as an active ingredient in the present invention
-2 and protein content of protein polysaccharide TT-3 are 10-20%, 20-30%, and 18%, respectively.
To 38% (preferably 30 to 38%). According to the molecular weight measurement method using ultracentrifugation or gel chromatography, the molecular weight of the protein polysaccharide TT-3 is 5,000 to 5,000.
300,000.

【００２９】本発明において有効成分として用いること
のできる、ディプロコッカス属［Ｄｉｐｌｏｃｏｃｃｕ
ｓ；真性細菌目（Ｅｕｂａｃｔｅｒｉａｌｅｓ）に属す
る］、ストレプトコッカス属［Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃ
ｕｓ；真性細菌目ストレプトコッカス科（Ｓｔｒｅｐｔ
ｏｃｏｃｃａｃｅａｅ）に属する］、又はラクトバシリ
ウス属［Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ；真性細菌目乳酸
桿菌科（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌａｃｅａｅ）に属す
る］に属する微生物（特には菌体）からの調製物は、特
に限定されるものではないが、その代表例は一般名でＯ
Ｋ−４３２と呼称されているものであって、ピシバニー
ルという商品名で中外製薬株式会社から市販されてい
る。ＯＫ−４３２は、すでに臨床において用いられてお
り、宿主の抗腫瘍免疫能を賦活することによって、化学
療法との併用により、胃癌（手術例）患者、原発性肺癌
患者等の生存期間を延長させることが認められている。
ＯＫ−４３２は、ストレプトコッカス・ピオゲネス（Ｓ
ｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ）（Ａ群
３型）Ｓｕ株をベンジルペニシリンの存在下、一定条件
で処理し、凍結乾燥した菌体製剤である。The genus Diprococcus which can be used as an active ingredient in the present invention
s; belongs to the order Eubacteriales], Streptococcus [Streptococcus]
us; Streptococcus sp.
occocaceae) or a microorganism belonging to the genus Lactobacillus [Lactobacillus; belonging to the genus Lactobacillaceae] (especially cells), but is not particularly limited thereto. A typical example is O
It is called K-432 and is commercially available from Chugai Pharmaceutical Co., Ltd. under the trade name Picibanil. OK-432 has already been used in the clinic and prolongs the survival time of gastric cancer (operative cases) patients, primary lung cancer patients, etc., by activating the antitumor immunity of the host, and in combination with chemotherapy. It has been recognized that.
OK-432 is available from Streptococcus pyogenes (S
treptococcus pyogenes (group A, type 3) is a lyophilized bacterial cell preparation obtained by treating the Su strain under certain conditions in the presence of benzylpenicillin.

【００３０】ＯＫ−４３２の雌性マウス及び雄性マウス
におけるＬＤ₅₀値は、それぞれ、静脈内投与で２４５Ｋ
Ｅ（Ｋｌｉｎｉｓｃｈｅ Ｅｉｎｈｅｉｔ；１ＫＥ＝
０．１ｍｇ）／ｋｇ及び２５５ＫＥ／ｋｇであり、腹腔
内投与で１２５０ＫＥ／ｋｇ及び１４００ＫＥ／ｋｇで
あり、経口投与で５０００ＫＥ／ｋｇ及び５１００ＫＥ
／ｋｇである。ＯＫ−４３２の雌性ラット及び雄性ラッ
トにおけるＬＤ₅₀値は、それぞれ、静脈内投与で２５０
ＫＥ／ｋｇ及び２６０ＫＥ／ｋｇであり、皮下投与で４
３１０ＫＥ／ｋｇ及び４０６０ＫＥ／ｋｇであり、腹腔
内投与で１７５０ＫＥ／ｋｇ及び１６００ＫＥ／ｋｇで
あり、経口投与で２００００ＫＥ／ｋｇ以上及び２００
００ＫＥ／ｋｇ以上である。ＯＫ−４３２は、腹腔内や
皮下に移植された種々の実験腫瘍や自然発生腫瘍に至る
まで、多くの系で抗腫瘍実験が行われ、静脈内、皮下、
腹腔内、又は腫瘍内投与によって種々の効果が見いださ
れている。The LD ₅₀ value of OK-432 in female and male mice was 245 K
E (Kliniche Einheit; 1KE =
0.1 mg) / kg and 255 KE / kg, 1250 KE / kg and 1400 KE / kg by intraperitoneal administration, and 5000 KE / kg and 5100 KE by oral administration.
/ Kg. The LD ₅₀ values of OK-432 in female and male rats were 250 mg respectively after intravenous administration.
KE / kg and 260 KE / kg, 4
310 KE / kg and 4060 KE / kg, 1750 KE / kg and 1600 KE / kg by intraperitoneal administration, and 20,000 KE / kg or more and 200 ppm by oral administration.
00KE / kg or more. OK-432 has been tested in many systems, including various experimental tumors and spontaneous tumors implanted intraperitoneally or subcutaneously.
Various effects have been found by intraperitoneal or intratumoral administration.

【００３１】本発明において有効成分として用いること
のできる、シイタケの子実体から抽出することにより得
ることができる多糖体は、特に限定されるものではない
が、その代表例として、レンチナンを挙げることができ
る。レンチナンは、レンチナン＜味の素＞という商品名
で日本ヘキスト・マリオン・ルセル株式会社から、ある
いは、レンチナン＜山之内＞という商品名で山之内製薬
株式会社から、それぞれ市販されている。レンチナン
は、シイタケの子実体より抽出して得た抗腫瘍性多糖体
の精製物で、臨床で用いられ、手術不能又は再発胃癌患
者に対して、化学療法剤との併用により生存期間の延長
が認められている。レンチナンは、β−（１→３）結合
を主鎖とする高分子グルカンであり、白色ないし淡黄灰
白色の粉末である。The polysaccharide which can be used as an active ingredient in the present invention and which can be obtained by extracting from shiitake mushroom fruit bodies is not particularly limited, but a typical example thereof is lentinan. it can. Lentinan is commercially available under the trade name Lentinan <Ajinomoto> from Hoechst Marion Roussel Co., Ltd. Japan or under the trade name Lentinan <Yamanouchi> from Yamanouchi Pharmaceutical Co., Ltd. Lentinan is a purified antitumor polysaccharide extracted from the fruit body of shiitake mushroom, and is used clinically to prolong the survival of patients with inoperable or recurrent gastric cancer by using chemotherapeutic agents. It recognized. Lentinan is a high-molecular glucan having a β- (1 → 3) bond as a main chain, and is a white to pale yellow-gray-white powder.

【００３２】レンチナンの雌性マウス及び雄性マウスに
おけるＬＤ₅₀値は、静脈内投与で２５０〜５００ｍｇ／
ｋｇであり、皮下投与で２５００ｍｇ／ｋｇ以上であ
る。レンチナンの雌性ラット及び雄性ラットにおけるＬ
Ｄ₅₀値は、静脈内投与で２５０〜５００ｍｇ／ｋｇであ
り、皮下投与で２５００ｍｇ／ｋｇ以上であり、腹腔内
投与２５００ｍｇ／ｋｇ以上である。レンチナンは、マ
ウス、ラット、モルモットを用いた動物実験で、同系又
は自家腫瘍に対し単独投与又は化学療法剤との併用投与
で腫瘍増殖抑制作用及び延命効果が見いだされている。The LD ₅₀ value of lentinan in female and male mice was 250-500 mg / intravenously.
kg, and 2,500 mg / kg or more by subcutaneous administration. Lentinan in female and male rats
D ₅₀ values are 250 to 500 mg / kg intravenous administration, a subcutaneous dose 2500 mg / kg or more, intraperitoneal administration 2500 mg / kg or more. In animal experiments using mice, rats, and guinea pigs, lentinan has been found to inhibit tumor growth and prolong life of syngeneic or autologous tumors when administered alone or in combination with chemotherapeutic agents.

【００３３】本発明においては、前記化合物のいずれ
か、あるいは、それらの組合せを、それ単独で、又は好
ましくは製剤学的若しくは獣医学的に許容することので
きる通常の担体と共に、免疫系未成熟期にある動物に投
与することができる。本発明を適用することのできる前
記動物には、ヒト、及び非ヒト動物が含まれる。本明細
書において、「非ヒト動物」とは、ヒトを除く動物を意
味し、これに限定されるものではないが、例えば、飼育
動物などを挙げることができる。In the present invention, any one of the above compounds, or a combination thereof, alone or, preferably, together with a conventional pharmaceutically or veterinarily acceptable carrier, is used to prepare the immature immune system. Can be administered to animals that are in the mid-stage. The animals to which the present invention can be applied include humans and non-human animals. As used herein, the term "non-human animal" refers to an animal other than a human, and is not limited thereto, and includes, for example, domestic animals.

【００３４】前記飼育動物とは、食用、愛玩用、又は実
験用などの目的を問わず、一般に人間が飼育することの
可能な動物を意味し、例えば、哺乳動物（例えば、ウ
シ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、
マウス、ハムスターフェレット、又はラットなど）、鳥
類（例えば、ニワトリ、ウズラ、ガチョウ、ブロイラー
産卵鶏又はアヒルなど）、又は養殖水生動物［例えば、
海水魚（例えば、ウナギ、ブリ、ハマチ、ヒラメ、ギン
ザケ、クロダイ、マアジ、シマアジ、トラフグ又はマダ
イなど）、淡水魚（例えば、コイ、アユ、イワナ又はニ
ジマスなど）、甲殻類（例えば、クルマエビ、ウシエ
ビ、又はテナガエビなど）、又は貝類（例えば、カキ、
又はホタテ貝など）］などを挙げることができる。The breeding animal means an animal that can be generally bred by humans for any purpose such as food, pets, or experiments, and includes, for example, mammals (eg, cows, pigs, sheep). , Goats, horses, dogs, cats, rabbits,
A mouse, a hamster ferret, or a rat, etc.), a bird (eg, a chicken, a quail, a goose, a broiler hen or a duck), or a cultured aquatic animal [eg,
Saltwater fish (e.g., eel, yellowtail, hamachi, flounder, coho salmon, black porgy, porgy, mackerel, swordfish, tiger pufferfish or red sea bream), freshwater fish (e.g., carp, sweetfish, char, or rainbow trout), crustaceans (e.g., prawn, prawn, Or shrimp, etc.) or shellfish (eg, oysters,
Or scallops)]].

【００３５】本発明においては、前記化合物を、免疫系
未成熟期にある動物に投与する。本明細書において「免
疫系未成熟期」とは、免疫学的に成熟していない状態で
ある期間を意味する。ヒトにおいては、免疫系未成熟期
には、これに限定されるわけではないが、例えば、新生
児期、幼児期、又は小児期などが含まれる。なお、本明
細書において、ヒトの新生児期とは、生直後から１か月
までの期間を意味し、ヒトの幼児期とは、生後１か月〜
１２カ月までの期間を意味し、ヒトの小児期とは、生後
１年〜１３才までの期間を意味するものとする。本発明
の免疫系未成熟動物用の疾病予防剤は、好ましくは新生
児期及び／又は幼児期、より好ましくは新生児期に投与
する。非ヒト動物の免疫系未成熟期は、前記のヒトの新
生児期、幼児期、又は小児期に相当する時期であり、個
々の非ヒト動物において適宜決定することができる。例
えば、ヒトを除く哺乳動物においては、これに限定され
るわけではないが、免疫系未成熟期は、例えば、ウシや
ブタでは、生後から３カ月までの期間である。In the present invention, the compound is administered to an animal in the immature stage of the immune system. As used herein, the term “immature stage of the immune system” means a period during which the subject is not immunologically mature. In humans, the immature phase of the immune system includes, but is not limited to, neonatal, infant, or childhood. In the present specification, the human neonatal period means a period from immediately after birth to one month, and the human infant period is from one month after birth.
A period of up to 12 months and a childhood of a human shall mean a period from 1 year to 13 years of age. The disease preventive agent for an immature animal of the immune system of the present invention is preferably administered during the neonatal period and / or the infant period, more preferably during the neonatal period. The immature period of the immune system of a non-human animal is a period corresponding to the above-mentioned human neonatal period, infant period, or childhood period, and can be appropriately determined in individual non-human animals. For example, in mammals other than humans, the immature stage of the immune system is, for example, the period from birth to three months after birth in cattle and pigs.

【００３６】本発明の免疫系未成熟動物用の疾病予防剤
は、前記化合物を含有し、所望により、製剤学的若しく
は獣医学的に許容することのできる通常の担体を含有す
ることができる。投与剤型としては、特に限定がなく、
例えば、散剤、細粒剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、懸
濁液、エマルジョン剤、シロップ剤、エキス剤、若しく
は丸剤等の経口剤、又は注射剤、外用液剤、軟膏剤、坐
剤、局所投与のクリーム、若しくは点眼薬などの非経口
剤を挙げることができる。The disease preventive agent for an immature animal of the immune system of the present invention contains the above-mentioned compound and, if desired, can contain a usual carrier which is pharmaceutically or veterinarily acceptable. There is no particular limitation on the dosage form,
For example, oral preparations such as powders, fine granules, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, extracts, or pills, or injections, external solutions, ointments, suppositories, Parenteral preparations such as topically applied creams or eye drops can be mentioned.

【００３７】これらのうち経口剤は、例えば、ゼラチ
ン、アルギン酸ナトリウム、澱粉、コーンスターチ、白
糖、乳糖、ぶどう糖、マンニット、カルボキシメチルセ
ルロース、デキストリン、ポリビニルピロリドン、結晶
セルロース、大豆レシチン、ショ糖、脂肪酸エステル、
タルク、ステアリン酸マグネシウム、ポリエチレングリ
コール、ケイ酸マグネシウム、無水ケイ酸、又は合成ケ
イ酸アルミニウムなどの賦形剤、結合剤、崩壊剤、界面
活性剤、滑沢剤、流動性促進剤、希釈剤、保存剤、着色
剤、香料、矯味剤、安定化剤、保湿剤、防腐剤、又は酸
化防止剤等を用いて、常法に従って製造することができ
る。例えば、ＰＳＫ１重量部と乳糖９９重量部とを混合
して充填したカプセル剤などである。Of these, oral preparations include, for example, gelatin, sodium alginate, starch, corn starch, sucrose, lactose, glucose, mannitol, carboxymethylcellulose, dextrin, polyvinylpyrrolidone, crystalline cellulose, soy lecithin, sucrose, fatty acid esters,
Excipients such as talc, magnesium stearate, polyethylene glycol, magnesium silicate, silicic acid, or synthetic aluminum silicate, binders, disintegrants, surfactants, lubricants, glidants, diluents, It can be produced by a conventional method using a preservative, a coloring agent, a flavor, a flavoring agent, a stabilizer, a humectant, a preservative, an antioxidant and the like. For example, capsules filled with 1 part by weight of PSK and 99 parts by weight of lactose are filled.

【００３８】非経口投与方法としては、注射（皮下、動
・静脈内、筋肉内等）、又は直腸投与等が例示される。
これらのなかで、注射剤が最も好適に用いられる。例え
ば、注射剤の調製においては、有効成分としての、前記
化合物の他に、例えば、生理食塩水若しくはリンゲル液
等の水溶性溶剤、植物油若しくは脂肪酸エステル等の非
水溶性溶剤、ブドウ糖若しくは塩化ナトリウム等の等張
化剤、溶解補助剤、安定化剤、防腐剤、懸濁化剤、又は
乳化剤等を任意に用いることができる。具体的に一例を
示すと、ＰＳＫ１０ｍｇとマンニトール５０ｍｇとを蒸
留水に溶解して１０ｍｌとし、常法で除菌した後、２ｍ
ｌづつを注射用小瓶に分注し、又はそのまま凍結乾燥し
て注射剤とする。使用に際して、生理食塩水で希釈して
注射液とする。Examples of parenteral administration include injection (subcutaneous, intravenous / intravenous, intramuscular, etc.) or rectal administration.
Of these, injections are most preferably used. For example, in the preparation of an injection, in addition to the compound as an active ingredient, for example, a water-soluble solvent such as physiological saline or Ringer's solution, a water-insoluble solvent such as vegetable oil or a fatty acid ester, glucose or sodium chloride An isotonic agent, a solubilizer, a stabilizer, a preservative, a suspending agent, an emulsifier, or the like can be optionally used. As an example, 10 mg of PSK and 50 mg of mannitol are dissolved in distilled water to make 10 ml.
Each is dispensed into a small vial for injection, or lyophilized to prepare an injection. At the time of use, it is diluted with physiological saline to make an injection solution.

【００３９】また、本発明の免疫系未成熟動物用の疾病
予防剤は、徐放性ポリマーなどを用いた徐放性製剤の手
法を用いて投与してもよい。例えば、本発明の免疫系未
成熟動物用の疾病予防剤をエチレンビニル酢酸ポリマー
のペレットに取り込ませて、このペレットを治療すべき
組織中に外科的に移植することができる。The disease preventive agent for an immature animal having an immune system of the present invention may be administered by using a sustained-release preparation technique using a sustained-release polymer or the like. For example, the disease preventive agent for an immature animal of the immune system of the present invention can be incorporated into a pellet of ethylene vinyl acetate polymer, and the pellet can be surgically implanted into a tissue to be treated.

【００４０】本発明の免疫系未成熟動物用の疾病予防剤
は、これに限定されるものではないが、０．０１〜９９
重量％、好ましくは０．１〜８０重量％の量で含有する
ことができる。本発明の免疫系未成熟動物用の疾病予防
剤を用いる場合の投与量は、投与対象である動物の種
類、年齢、性別、若しくは体重、予防すべき疾病の種
類、又は投与方法などにより異なり、前記化合物量とし
て通常１匹（又は１人）当り１ｍｇ〜５０ｇ程度を、１
日１〜４回程度にわけて、経口的に又は非経口的に投与
する。更に、形態も医薬品に限定されるものではなく、
種々の形態、例えば、機能性食品や健康食品、又は飼料
として飲食物の形で与えることも可能である。The disease preventive agent for the immature animal of the immune system according to the present invention is not limited thereto, but may be 0.01 to 99.
%, Preferably 0.1 to 80% by weight. The dose when using the disease preventive agent for an immature animal of the present invention depends on the type of animal to be administered, age, sex, or weight, the type of disease to be prevented, or the administration method, The amount of the compound is usually about 1 mg to 50 g per animal (or one person).
It is orally or parenterally administered once to four times a day. Furthermore, the form is not limited to pharmaceuticals,
It can also be provided in various forms, for example, as a functional food or health food, or as a food or drink.

【００４１】本発明による免疫系未成熟動物用の疾病予
防剤を非ヒト動物に投与する方法は、ヒトに投与する方
法と本質的に異なるものではない。本発明による免疫系
未成熟動物用の疾病予防剤を飼料として与える場合に
は、通常の飼料と粉粉混合をおこなって、混餌として与
えることができる。The method of administering the disease preventive agent for an immature animal of the immune system to a non-human animal according to the present invention is not essentially different from the method of administering it to a human. When the disease preventive agent for immune system immature animals according to the present invention is given as a feed, it can be fed as a mixed feed by mixing powder and powder with a normal feed.

【００４２】本発明の有効成分である、前記化合物を、
免疫系未成熟期にある動物に投与すると、成熟個体にお
いて発生する可能性のある各種疾病を予防することがで
きる。また、本発明の有効成分である前記化合物を、免
疫系未成熟期にある動物に投与すると、成熟後に罹病し
た疾病の重篤度を軽減したり、成熟後に罹病した疾病に
対する他の医薬の治療効果を向上させることができる。
前記疾病としては、例えば、腫瘍（特に癌）、感染症、
自己免疫疾患、糖尿病、高血圧、ネフローゼ、又は関節
リューマチなどを挙げることができる。The compound, which is an active ingredient of the present invention, is
When administered to an animal in the premature stage of the immune system, various diseases that can occur in a mature individual can be prevented. Further, when the compound, which is an active ingredient of the present invention, is administered to an animal in an immature period of the immune system, the severity of the disease affected after maturation can be reduced, or the treatment of another medicament against the disease affected after maturation can be reduced. The effect can be improved.
Examples of the disease include tumors (particularly cancer), infectious diseases,
Autoimmune diseases, diabetes, hypertension, nephrosis, rheumatoid arthritis and the like can be mentioned.

【００４３】例えば、本発明の有効成分である化合物
を、免疫系未成熟期にある動物に投与することによっ
て、前記動物に予防措置を施しておくと、成熟後に発生
する癌を予防する（癌の発生率を低下させる）ことがで
きるだけでなく、成熟後に癌が発生したとしても、癌の
重篤度を軽減することができ、更に、癌に対する治療効
果、例えば、抗癌剤（例えば、ＢＲＭ、化学療法剤な
ど）の投与による治療効果などを向上させることができ
る。前記ＢＲＭとしては、例えば、ＰＳＫ、ＯＫ−４３
２、レンチナン、インターフェロン類、腫瘍壊死因子、
及びその関連物質などを挙げることができる。For example, if a compound that is an active ingredient of the present invention is administered to an animal in the immature stage of the immune system and precautionary measures are taken against the animal, cancer occurring after maturation can be prevented (cancer). Not only can reduce the incidence of cancer), but also can reduce the severity of the cancer, even if the cancer develops after maturation, and further have a therapeutic effect on the cancer, such as an anticancer agent (eg, BRM, chemical Therapeutic agent etc.) can improve the therapeutic effect. As the BRM, for example, PSK, OK-43
2. Lentinan, interferons, tumor necrosis factor,
And its related substances.

【００４４】[0044]

【実施例】以下、実施例によって本発明を具体的に説明
するが、これらは本発明の範囲を限定するものではな
い。EXAMPLES The present invention will be described below in more detail with reference to examples, but these examples do not limit the scope of the present invention.

【実施例１】本実施例では、タンパク多糖体ＴＴ−１を
調製した。縦型ファーメンター（容量＝２ｍ³ ）に培地
（組成：１０％グルコース，１．５％酵母エキス，及び
０．１％ＫＨ₂ ＰＯ₄ ・７Ｈ₂ ０）１６００リットルを
仕込み、これに、予め振とう培養によって得られたカワ
ラタケ（ＦＥＲＭ Ｐ２４１２，ＡＴＣＣ２０５４７）
の母菌スラリー２０リットルを接種し、培地１リットル
当たりの通気量０．５リットル／分、及び攪拌速度１５
０ｒｐｍの条件下で２６℃にて７日間培養した。培養終
了後、静置して菌体と上清とに分離し、続いて、上清を
除去してから、ファーメンターから培養物スラリー（ブ
ロス）５００リットルを取り出し、ダブルドラム型ドラ
ムドライヤーを用いて１１０℃にて乾燥し、含水率が１
０重量％以下になるまで乾燥することによって、タンパ
ク多糖体ＴＴ−１（２５ｋｇ）を得た。なお、含水率
は、カールフィッシャー装置を用いて確認した。Example 1 In this example, protein polysaccharide TT-1 was prepared. Vertical fermenter (volume = 2m ³⁾ to the medium: charging (composition 10% glucose, 1.5% yeast extract, and _{0.1% KH 2 PO 4 · 7H} 2 0) 1600 liters to pre-vibration Kawatake mushroom (FERM P2412, ATCC 20547) obtained by freeze-culture
Of the mother bacterium slurry was inoculated, the aeration rate per liter of medium was 0.5 liter / min, and the stirring speed was 15
The cells were cultured at 26 rpm at 0 rpm for 7 days. After completion of the culture, the culture was allowed to stand and separated into bacterial cells and supernatant. Subsequently, after removing the supernatant, 500 liters of the culture slurry (broth) was taken out of the fermenter, and was used with a double drum type drum dryer. And dried at 110 ° C.
By drying to 0% by weight or less, protein polysaccharide TT-1 (25 kg) was obtained. The water content was confirmed using a Karl Fischer device.

【００４５】[0045]

【実施例２】本実施例では、タンパク多糖体ＴＴ−２を
調製した。実施例１で得られたタンパク多糖体ＴＴ−１
（１００ｇ）に熱水１リットルを加え、９４〜９６℃で
３時間抽出した後、冷却し、遠心分離機を用いて不溶物
（未抽出物）を沈殿させ、上清を分離することによって
抽出液２５０ｍｌを得た。この濃縮液を、ロータリーエ
バポレーターを用いて約５０ｍｌまで濃縮した後、凍結
乾燥を行うことによりタンパク多糖体ＴＴ−２（３．２
ｇ）を得た。Example 2 In this example, a protein polysaccharide TT-2 was prepared. Protein polysaccharide TT-1 obtained in Example 1
(100 g), 1 liter of hot water was added thereto, and extracted at 94 to 96 ° C. for 3 hours, then cooled, insoluble matter (unextracted matter) was precipitated using a centrifugal separator, and extracted by separating the supernatant. 250 ml of liquid was obtained. This concentrated solution was concentrated to about 50 ml using a rotary evaporator, and then lyophilized to obtain a protein polysaccharide TT-2 (3.2).
g) was obtained.

【００４６】[0046]

【実施例３】本実施例では、癌細胞、すなわち、マウス
大腸癌細胞株Ｃｏｌｏｎ２６（九州大学生体防御医学研
究所より分与）を皮下移植したマウスにおける抗腫瘍性
の増強作用を確認した。生後４８時間以内（生後０時間
〜４８時間；以下同様）のマウス（ＢＡＬＢ／ｃ；雄
性）を各群１０匹ずつの実験群２群［実験群（１）及び
実験群（２）］並びに対照群２群［対照群（１）及び対
照群（２）］の計４群に分けた。実験群（１）のマウス
に対しては、生後４８時間以内にＰＳＫ（商品名クレス
チン、三共株式会社、日本）１０ｍｇ／ｋｇを腹腔内に
１回投与し、続いて、生後８週間後にマウス大腸癌細胞
株Ｃｏｌｏｎ２６（１×１０⁶ 個）を皮下に移植し、更
に、移植翌日後からＰＳＫ１０ｍｇ／ｋｇを腹腔内に、
合計１０回隔日投与した。実験群（２）のマウスに対し
ては、実験群（１）のマウスと同様に、生後４８時間以
内に、ＰＳＫ１０ｍｇ／ｋｇを腹腔内に１回投与し、続
いて、生後８週間後にマウス大腸癌細胞株Ｃｏｌｏｎ２
６（１×１０⁶ 個）を皮下に移植した。その後、移植翌
日から生理食塩水０．２ｍｌ／匹を腹腔内に、合計１０
回隔日投与した。Example 3 In this example, the effect of enhancing antitumor activity in mice subcutaneously transplanted with cancer cells, that is, mouse colon cancer cell line Colon 26 (provided by Kyushu University Institute of Biodefense and Medicine) was confirmed. Two experimental groups [Experimental group (1) and experimental group (2)] of mice (BALB / c; male) within 48 hours after birth (0 to 48 hours after birth; the same applies hereinafter) and 10 mice per group It was divided into a total of 4 groups, 2 groups [control group (1) and control group (2)]. For the mice in the experimental group (1), 10 mg / kg of PSK (trade name Krestin, Sankyo, Japan) was intraperitoneally administered once within 48 hours after birth, and then 8 weeks after birth, The cancer cell line Colon 26 (1 × 10 ⁶ cells) was transplanted subcutaneously, and 10 mg / kg of PSK was intraperitoneally injected the day after the transplantation.
A total of 10 doses were administered every other day. The mice in the experimental group (2) were administered with PSK 10 mg / kg once intraperitoneally within 48 hours after birth, as in the mice in the experimental group (1). Cancer cell line Colon2
6 (1 × 10 ⁶ ) were implanted subcutaneously. Thereafter, from the day after the transplantation, 0.2 ml / animal of physiological saline was intraperitoneally injected for a total of 10 ml.
Administered on alternate days.

【００４７】対照群（１）のマウスに対しては、生後４
８時間以内に生理食塩水０．２ｍｌ／匹を腹腔内に１回
投与し、続いて、生後８週間後にマウス大腸癌細胞株Ｃ
ｏｌｏｎ２６（１×１０⁶ 個）を皮下に移植し、更に、
移植翌日からＰＳＫ１０ｍｇ／ｋｇを腹腔内に、合計１
０回隔日投与した。対照群（２）のマウスに対しては、
対照群（１）のマウスと同様に、生後４８時間以内に、
生理食塩水０．２ｍｌ／匹を腹腔内に１回投与し、続い
て、生後８週間後にマウス大腸癌細胞株Ｃｏｌｏｎ２６
（１×１０⁶ 個）を皮下に移植した。そして、移植翌日
より、生理食塩水０．２ｍｌ／匹を腹腔内に、合計１０
回隔日投与した。For the mice of the control group (1), 4
Within 8 hours, 0.2 ml / animal of saline was intraperitoneally administered once, followed by mouse colon cancer cell line C 8 weeks after birth
olon26 (1 × 10 ⁶ ) was implanted subcutaneously,
From the day after transplantation, PSK 10 mg / kg was intraperitoneally administered for a total of 1 mg / kg.
It was administered 0 times every other day. For control group (2) mice,
As in the control group (1), within 48 hours after birth,
A saline solution of 0.2 ml / animal was intraperitoneally administered once, followed by a colon cancer cell line Colon 26 at 8 weeks after birth.
(1 × 10 ⁶ ) were implanted subcutaneously. From the day after the transplantation, 0.2 ml / animal of physiological saline was intraperitoneally injected for a total of 10 ml / mouse.
Administered on alternate days.

【００４８】各群におけるＰＳＫ及び／又は生理食塩水
の投与時期、並びにマウスの平均生存日数の結果を図１
に示す。図１において、「新生児期の予防剤投与」欄に
は、生後４８時間以内の投与物質が、本発明による予防
剤の有効成分であるＰＳＫ、又は生理食塩水（コントロ
ール）のいずれであるかを示し、「成育期の抗癌剤投
与」欄には、生後８週間後からの投与物質が、ＢＲＭと
してのＰＳＫ、又は生理食塩水（コントロール）のいず
れであるかを示す。FIG. 1 shows the results of the administration timing of PSK and / or physiological saline in each group and the average survival days of mice.
Shown in In FIG. 1, the column of “Administration of prophylactic agent in neonatal period” indicates whether the substance to be administered within 48 hours after birth is PSK, which is an active ingredient of the prophylactic agent according to the present invention, or physiological saline (control). The column “Administration of anticancer agent during growth” shows whether the substance to be administered from 8 weeks after birth is PSK as BRM or physiological saline (control).

【００４９】平均生存日数では、４群の間に明らかな差
異が認められた。すなわち、平均生存日数は、実験群
（１）で３８．７日±３．９日、実験群（２）で３５．
６日±２．１日であり、対照群（１）の３１．０日±
１．４日、又は対照群（２）の２５．１日±３．４日と
比べて、明確に延長した。なお、ＰＳＫ投与による異常
所見は、一切認められなかった。以上の結果から、新生
児期マウスへのＰＳＫの投与が、腫瘍移植後のＰＳＫ投
与効果の増強、及び腫瘍移植後の生存期間延長に有効で
あることが判明した。In the mean survival days, a clear difference was observed between the four groups. That is, the average survival days were 38.7 days ± 3.9 days in the experimental group (1) and 35.90 days in the experimental group (2).
6 days ± 2.1 days, 31.0 days ± of control group (1)
This was clearly prolonged by 1.4 days, or 25.1 days ± 3.4 days in the control group (2). No abnormal findings due to PSK administration were observed. From the above results, it was found that administration of PSK to neonatal mice was effective in enhancing the effect of administering PSK after tumor transplantation and prolonging the survival period after tumor transplantation.

【００５０】[0050]

【実施例４】本実施例では、実施例３で使用したマウス
大腸癌細胞株Ｃｏｌｏｎ２６を、脾門脈内に移植したマ
ウスにおける該物質の抗腫瘍性の増強作用を確認した。
すなわち、生後４８時間以内のマウス（ＢＡＬＢ／ｃ；
雄性）を各群１０匹ずつの実験群２群［実験群（３）及
び実験群（４）］並びに対照群２群［対照群（３）及び
対照群（４）］の計４群に分けた。実験群（３）のマウ
スに対しては、生後４８時間以内にＰＳＫ（商品名、ク
レスチン、三共株式会社、日本）１０ｍｇ／ｋｇを腹腔
内に１回投与し、続いて、生後８週間後にマウス大腸癌
細胞株Ｃｏｌｏｎ２６（１×１０⁵ 個）を脾門脈内に移
植し、更に、生後８週間後からＰＳＫ１０ｍｇ／ｋｇを
腹腔内に、合計１０回隔日投与した。実験群（４）のマ
ウスに対しては、実験群（３）のマウスと同様に、生後
４８時間以内に、ＰＳＫ１０ｍｇ／ｋｇを腹腔内に１回
投与し、続いて、生後８週間後にマウス大腸癌細胞株Ｃ
ｏｌｏｎ２６（１×１０⁵ 個）を脾門脈内に移植した。
その後、生後８週間後から生理食塩水０．２ｍｌ／匹を
腹腔内に、合計１０回隔日投与した。Example 4 In this example, the antitumor activity of the mouse colon cancer cell line Colon 26 used in Example 3 was confirmed in mice transplanted into the splenic portal vein.
That is, mice within 48 hours after birth (BALB / c;
Male) were divided into four groups: 10 experimental groups each, 2 experimental groups [Experiment group (3) and experimental group (4)] and 2 control groups [Control group (3) and control group (4)]. Was. For the mice in the experimental group (3), 10 mg / kg of PSK (trade name, Krestin, Sankyo Co., Ltd., Japan) was intraperitoneally administered once within 48 hours after birth, and then 8 weeks after birth Colon cancer cell line Colon 26 (1 × 10 ⁵ ) was transplanted into the splenic portal vein, and PSK 10 mg / kg was intraperitoneally administered 8 weeks after birth, a total of 10 times every other day. For the mice in the experimental group (4), 10 mg / kg of PSK was administered intraperitoneally once within 48 hours after birth, similarly to the mice in the experimental group (3), and then, 8 weeks after birth, the mouse colon Cancer cell line C
olon26 (1 × 10 ⁵ ) was implanted into the splenic portal vein.
Then, 8 weeks after birth, physiological saline (0.2 ml / animal) was intraperitoneally administered a total of 10 times every other day.

【００５１】対照群（３）のマウスに対しては、生後４
８時間以内に生理食塩水０．２ｍｌ／匹を腹腔内に１回
投与し、続いて、生後８週間後にマウス大腸癌細胞株Ｃ
ｏｌｏｎ２６（１×１０⁵ 個）を脾門脈内に移植し、更
に、移植翌日後からＰＳＫ１０ｍｇ／ｋｇを腹腔内に、
合計１０回隔日投与した。対照群（４）のマウスに対し
ては、対照群（３）のマウスと同様に、生後０時間〜４
８時間以内に、生理食塩水０．２ｍｌ／匹を腹腔内に１
回投与し、続いて、生後８週間後にマウス大腸癌細胞株
Ｃｏｌｏｎ２６（１×１０⁵ 個）を脾門脈内に移植し
た。その後、移植翌日から生理食塩水０．２ｍｌ／匹を
腹腔内に、合計１０回隔日投与した。For the mice in the control group (3), 4
Within 8 hours, 0.2 ml / animal of saline was intraperitoneally administered once, followed by mouse colon cancer cell line C 8 weeks after birth
olon26 (1 × 10 ⁵ ) was transplanted into the splenic portal vein, and PSK 10 mg / kg was intraperitoneally injected the day after the transplantation.
A total of 10 doses were administered every other day. As for the mice in the control group (4), as in the mice in the control group (3), 0 hours to 4 hours after birth.
Within 8 hours, intraperitoneally 0.2 ml of saline / animal
Eight weeks after birth, 8 weeks after birth, mouse colon cancer cell line Colon 26 (1 × 10 ⁵ cells) was transplanted into the splenic portal vein. Thereafter, from the day after transplantation, physiological saline (0.2 ml / animal) was intraperitoneally administered a total of 10 times every other day.

【００５２】各群におけるＰＳＫ及び／又は生理食塩水
の投与時期、並びに肝転移結節数の結果を図２に示し、
各群におけるＰＳＫ及び／又は生理食塩水の投与時期、
並びにマウスの平均生存日数の結果を図３に示す。図２
及び図３において、「新生児期の予防剤投与」欄には、
生後０時間〜４８時間以内の投与物質が、本発明による
予防剤の有効成分であるＰＳＫ、又は生理食塩水（コン
トロール）のいずれであるかを示し、「成育期の抗癌剤
投与」欄には、生後８週間後からの投与物質が、ＢＲＭ
としてのＰＳＫ、又は生理食塩水（コントロール）のい
ずれであるかを示す。FIG. 2 shows the timing of administration of PSK and / or physiological saline and the number of liver metastasis nodules in each group.
The timing of administration of PSK and / or saline in each group,
In addition, the results of the average survival days of the mice are shown in FIG. FIG.
And in FIG. 3, the “prophylactic agent administration in the neonatal period” column includes
Indicates whether the administered substance within 0 to 48 hours after birth is PSK, which is an active ingredient of the preventive agent according to the present invention, or physiological saline (control). The substance administered from 8 weeks after birth is BRM
Is PSK or physiological saline (control).

【００５３】図２に示すように、肝転移結節数は、実験
群（３）で５０個±２３個、実験群（４）で８３個±５
１個であり、対照群（３）の１６１個±５０個、又は対
照群（４）の２２２個±９５個と比べて、明らかな減少
がみられた。As shown in FIG. 2, the number of liver metastasis nodules was 50 ± 23 in the experimental group (3) and 83 ± 5 in the experimental group (4).
There was a clear decrease compared to 161 ± 50 in the control group (3) or 222 ± 95 in the control group (4).

【００５４】また、図３に示すように、平均生存日数
は、実験群（３）で３７．９日±３．２日、実験群
（４）で３５．５日±３．８日であり、対照群（３）の
３０．７日±２．８日、又は対照群（４）の２６．２日
±３．８日と比べて、明らかな延長がみられた。以上の
結果から、新生児期マウスへのＰＳＫの投与が、腫瘍移
植後のＰＳＫ投与効果の増強、及び腫瘍移植後の生存期
間延長に有効であることが判明した。As shown in FIG. 3, the average survival days were 37.9 ± 3.2 days in the experimental group (3) and 35.5 ± 3.8 days in the experimental group (4). In comparison with the control group (3), 30.7 days ± 2.8 days, or the control group (4), 26.2 days ± 3.8 days, a clear prolongation was observed. From the above results, it was found that administration of PSK to neonatal mice was effective in enhancing the effect of administering PSK after tumor transplantation and prolonging the survival period after tumor transplantation.

【００５５】[0055]

【実施例５】生後４８時間以内の雄性Ｆ３４４ラット
に、ＯＫ−４３２（商品名＝ピシバニール；中外製薬，
日本）１ＫＥ、又はＰＳＫ（商品名＝クレスチン；三共
株式会社，日本）１０ｍｇ／ｋｇを腹腔内投与し、前記
ラットが８週齢になった時点で、化学発ガン剤である
１，２ージメチルヒドラジン２塩酸塩（アルドリッチ
社、米国）２０ｍｇ／ｋｇを、３日間隔で３回皮下投与
した。最終投与翌日から、再度、ＯＫ−４３２（１Ｋ
Ｅ）又はＰＳＫ１０ｍｇ／ｋｇを隔日投与で４週間、腹
腔内投与し、１２週目にラットをと殺し、腸管部の前癌
病変（Ａｂｂｅｒｒａｎｔ ｃｒｙｐｔ）を観察した。
なお、対照群の処理手順は、実施例３と同様に行なっ
た。Example 5 OK-432 (trade name = Picibanil; Chugai Pharmaceutical Co., Ltd.) was administered to male F344 rats within 48 hours of birth.
Japan) 1KE or PSK (trade name: Krestin; Sankyo Co., Japan) 10 mg / kg was intraperitoneally administered, and when the rat became 8 weeks old, 1,2-dimethyl which is a chemical carcinogen was administered. Hydrazine dihydrochloride (Aldrich, USA) 20 mg / kg was administered subcutaneously three times at 3 day intervals. From the day after the last administration, OK-432 (1K
E) Or 10 mg / kg of PSK was intraperitoneally administered every other day for 4 weeks, and the rats were sacrificed on the 12th week, and precancerous lesions (Aberrant crypt) in the intestinal tract were observed.
The processing procedure for the control group was the same as in Example 3.

【００５６】その結果、新生児期において前記薬剤を投
与した群では、前癌病変形成数の減少が見られ、前癌病
変の改善がみられた。このことから、新生児期ラットへ
のこれらの薬剤の投与が、化学発ガン剤処理後の該物質
の効果の増強、及び生存期間延長に有効なことが判明し
た。As a result, in the group to which the above-mentioned drug was administered during the neonatal period, the number of precancerous lesions formed decreased, and the precancerous lesions were improved. This indicates that administration of these drugs to neonatal rats is effective in enhancing the effect of the substance after treatment with a chemical carcinogen and prolonging the survival time.

【００５７】[0057]

【実施例６】本実施例における対照群の処理手順は、実
施例３と同様に行なった。生後４８時間以内のＢＡＬＢ
／ｃ雄マウスに、ＰＳＫ（商品名＝クレスチン；三共株
式会社，日本）１０ｍｇ／ｋｇを腹腔内に、又は前記実
施例２で調製したタンパク多糖体ＴＴ−２（１０ｍｇ／
ｋｇ）を皮下投与した。前記マウスが８週齢となった時
点で、前記タンパク多糖体を同投与量で、再度７日間連
日で腹腔内、又は経口投与した。最終投与から２４時間
後に緑膿菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎ
ｏｓａＩＡＭ５１４）１×１０⁸ 個を静脈内感染させ、
抗生物質である硫酸コリマイシンを３日間静脈内投与
し、その後の生存期間を観察した。なお、硫酸コリマイ
シンの投与量は、常用量（すなわち、飼料１ｋｇ当たり
硫酸コリマイシン１５ｇ）から換算して、３８０ｍｇ／
ｋｇ（常用量とほぼ同量）、１９０ｍｇ／ｋｇ（常用量
の約１／２量）、及び９５ｍｇ／ｋｇ（常用量の約１／
４量）とし、対照群には硫酸コリマイシンを投与しなか
った。Example 6 The procedure of the control group in this example was the same as in Example 3. BALB within 48 hours after birth
/ C male mice were intraperitoneally injected with 10 mg / kg of PSK (trade name = Krestin; Sankyo Co., Japan) or the protein polysaccharide TT-2 (10 mg / kg) prepared in Example 2 above.
kg) was administered subcutaneously. When the mouse became 8 weeks old, the protein polysaccharide was again intraperitoneally or orally administered at the same dose for seven consecutive days. 24 hours after the last administration, Pseudomonas aerugin
osaIAM514) 1 × 10 ⁸ were infected intravenously,
Colimycin sulfate, an antibiotic, was administered intravenously for 3 days, and the subsequent survival time was observed. The dose of colimycin sulfate was 380 mg / kg in terms of a normal dose (that is, 15 g of colimycin sulfate per kg of feed).
kg (about the same amount as the normal dose), 190 mg / kg (about 1/2 the amount of the normal dose), and 95 mg / kg (about 1 / the normal dose).
4 volume), and the control group did not receive colimycin sulfate.

【００５８】その結果、新生児期における上記ＰＳＫ又
はタンパク多糖体ＴＴ−２の投与により、８週齢時点に
おけるこれらタンパク多糖体を投与したことにより、感
染後の抗生物質の低用量における効果発現がみられ、ま
た、生存期間に有為な延長がみられた。As a result, administration of the above-mentioned PSK or protein polysaccharide TT-2 during the neonatal period and administration of these protein polysaccharides at the age of 8 weeks showed a low-dose antibiotic effect after infection. And significant prolongation of survival.

【００５９】[0059]

【実施例７】生後４８時間以内のチャンキー種のブロイ
ラーに、前記実施例２で調製したタンパク多糖体ＴＴ−
２（１０ｍｇ／ｋｇ）を腹腔に、あるいは、レンチナン
（商品名＝レンチナン＜味の素＞；日本ヘキスト・マリ
オン・ルセル株式会社，日本）１ｍｇ／ｋｇを腹腔内投
与した後、通常の環境で飼育した。前記ブロイラーが８
週齢になった時点で飼育環境を変え、ストレスの罹る汚
染空気環境下で飼育し、感染症発生の頻度、及び抗生物
質であるペニシリンの使用量を調べた。なお、対照群の
処理手順は、実施例３と同様に行なった。その結果、新
生児個体へのタンパク多糖体ＴＴ−２及びレンチナンの
投与が、成熟個体の呼吸器及び消化器感染症発生の頻度
を減少させ、また、感染症にかかった場合でも、抗生物
質の使用量が減少することが判明した。Example 7 The protein polysaccharide TT- prepared in Example 2 was added to chunky broilers within 48 hours of birth.
2 (10 mg / kg) was intraperitoneally administered or 1 mg / kg of lentinan (trade name = lentinan <Ajinomoto>; Nippon Hoechst Marion Roussel Co., Ltd., Japan), and then raised in a normal environment. The broiler is 8
At the age of one week, the breeding environment was changed, bred in a stressed contaminated air environment, and the frequency of infectious disease occurrence and the amount of antibiotic penicillin used were examined. The processing procedure for the control group was the same as in Example 3. As a result, administration of the protein polysaccharide TT-2 and lentinan to neonatal individuals reduces the frequency of respiratory and gastrointestinal infections in adult individuals, and the use of antibiotics, even when infected, The amount was found to decrease.

【００６０】[0060]

【実施例８】生後４８時間以内の雌性子豚（ＬＷＤ）
に、ＰＳＫ（商品名＝クレスチン；三共株式会社，日
本）１０ｍｇ／ｋｇを腹腔に、あるいは、前記実施例２
で調製したタンパク多糖体ＴＴ−２（１０００ｍｇ／ｋ
ｇ）を経口で、連日７日間投与した後、通常の環境で飼
育した。前記豚が８週齢となった時点で、飼育環境を変
え、ストレスの罹る汚染空気環境下で飼育し、感染症発
生の頻度、及び抗生物質であるペニシリンの使用量を調
べた。なお、対照群の処理手順は、実施例３と同様に行
なった。その結果、新生児期個体のこれらタンパク多糖
体の投与が、成熟個体の呼吸器及び消化器感染症発生の
頻度を減少させ、また、感染症にかかった場合でも、抗
生物質の使用量が減少することが判明した。Example 8 Female piglets within 48 hours of birth (LWD)
In addition, 10 mg / kg of PSK (trade name = Krestin; Sankyo Co., Ltd., Japan) was intraperitoneally or in Example 2 described above.
Protein polysaccharide TT-2 (1000 mg / k
g) was orally administered for 7 consecutive days and then raised in a normal environment. When the pigs became 8 weeks of age, the breeding environment was changed and the pigs were bred in a stressed contaminated air environment, and the frequency of occurrence of infectious diseases and the amount of antibiotic penicillin used were examined. The processing procedure for the control group was the same as in Example 3. As a result, administration of these protein polysaccharides in neonatal individuals reduces the frequency of respiratory and gastrointestinal infections in mature individuals, and reduces the use of antibiotics, even if they become infected. It has been found.

【００６１】[0061]

【実施例９】前記実施例１で調製したタンパク多糖体Ｔ
Ｔ−１又は前記実施例２で調製したタンパク多糖体ＴＴ
−２を、１００ｍｇ／ｋｌとなるように添加した水槽内
で、生後４８時間以内のアユを２４時間処置した後、通
常の環境で飼育した。前記アユが３カ月齢に達した時点
で、環境を変え、感染症の多発する水槽で飼育し、感染
症発生の頻度及び抗生物質であるアンピシリンの使用量
を調べた。なお、対照群の処理手順は、実施例３と同様
に行なった。その結果、新生児期個体への処置が、感染
症発生の頻度を減少させ、また、感染症にかかった場合
でも、抗生物質の使用量が減少することが判明した。Example 9 Protein polysaccharide T prepared in Example 1
T-1 or the protein polysaccharide TT prepared in Example 2 above
-2 was treated in an aquarium containing 100 mg / kl of ayu within 48 hours of birth for 24 hours, and then raised in a normal environment. When the ayu reached the age of 3 months, the environment was changed and the animals were reared in a water tank where infectious diseases frequently occur, and the frequency of occurrence of infectious diseases and the amount of antibiotic ampicillin used were examined. The processing procedure for the control group was the same as in Example 3. As a result, it was found that treatment of neonatal individuals reduced the frequency of the occurrence of infectious diseases, and that the amount of antibiotics used was reduced even in cases of infectious diseases.

【００６２】[0062]

【発明の効果】以上詳述したように、本発明の有効成分
である化合物は、免疫系未成熟期にある動物に投与する
と、成熟個体において発生する可能性のある各種疾病
（例えば、癌、感染症、自己免疫疾患、糖尿病、高血
圧、腎炎などの成人病、喘息、関節リューマチなど）を
予防する活性を有する。従って、本発明における免疫系
未成熟動物用の疾病予防剤を、免疫系未成熟期にある動
物に投与することにより、成熟個体において発生する可
能性のある各種疾病を予防することができる。As described in detail above, the compound which is an active ingredient of the present invention, when administered to an animal in the immature stage of the immune system, can develop various diseases (eg, cancer, It has activity to prevent infectious diseases, autoimmune diseases, diabetes, hypertension, adult diseases such as nephritis, asthma, rheumatoid arthritis, etc.). Therefore, by administering the disease preventive agent for an immature animal with an immune system according to the present invention to an animal in the immature stage of the immune system, various diseases that may occur in an adult individual can be prevented.

【図面の簡単な説明】[Brief description of the drawings]

【図１】癌細胞を皮下移植したマウスにおける、本発明
による疾病予防剤の抗腫瘍性の増強作用（平均生存日数
の延長）を示すグラフである。FIG. 1 is a graph showing the antitumor enhancing effect of the disease preventive agent according to the present invention (increase in the average survival days) in mice into which cancer cells have been subcutaneously transplanted.

【図２】癌細胞を脾門脈内移植したマウスにおける、本
発明による疾病予防剤の抗腫瘍性の増強作用（肝転移結
節数の減少）を示すグラフである。FIG. 2 is a graph showing the antitumor enhancing effect of the disease preventive agent of the present invention (reduction in the number of liver metastasis nodules) in mice into which cancer cells have been transplanted into the splenic portal vein.

【図３】癌細胞を脾門脈内移植したマウスにおける、本
発明による疾病予防剤の抗腫瘍性の増強作用（平均生存
日数の延長）を示すグラフである。FIG. 3 is a graph showing the antitumor enhancing effect of the disease preventive agent according to the present invention (extending the average survival days) in mice into which cancer cells have been transplanted into the splenic portal vein.

Claims (19)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項１】 （１）カワラタケ属に属する担子菌の菌
糸体、子実体、又は培養物を、含水率が１０重量％以下
になるまで９５〜１１５℃で乾燥することにより得るこ
とができ、タンパク質含量が１０〜２０％であるタンパ
ク多糖体、（２）前記タンパク多糖体（１）を熱水によ
り抽出し、得られた抽出液を濃縮し、更に脱溶媒するこ
とにより得ることができ、タンパク質含量が２０〜３０
％であるタンパク多糖体、（３）前記タンパク多糖体
（１）をアルカリ溶液により抽出し、得られた抽出液を
中和し、分子量５０００以下の物質を除去し、濃縮し、
乾燥することにより得ることができ、タンパク質含量が
１８〜３８％であるタンパク多糖体、（４）ディプロコ
ッカス属、ストレプトコッカス属、又はラクトバシリウ
ス属に属する微生物からの調製物、及び（５）シイタケ
の子実体から抽出することにより得ることができる多糖
体からなる群から選んだ化合物を有効成分として含有す
ることを特徴とする、免疫系未成熟期にある動物用の疾
病予防剤。(1) A mycelium, a fruiting body, or a culture of a basidiomycete belonging to the genus Agaricus can be obtained by drying at 95 to 115 ° C. until the water content becomes 10% by weight or less, A protein polysaccharide having a protein content of 10 to 20%, (2) can be obtained by extracting the protein polysaccharide (1) with hot water, concentrating the obtained extract, and further removing the solvent; 20-30 protein content
% Of the protein polysaccharide, (3) extracting the protein polysaccharide (1) with an alkaline solution, neutralizing the resulting extract, removing substances having a molecular weight of 5,000 or less, and concentrating the extract.
A protein polysaccharide that can be obtained by drying and has a protein content of 18 to 38%, (4) a preparation from a microorganism belonging to the genus Diprococcus, Streptococcus, or Lactobacillus, and (5) shiitake mushroom A disease preventive agent for animals in the immature stage of the immune system, which comprises, as an active ingredient, a compound selected from the group consisting of polysaccharides obtainable by extracting from the fruiting body of an animal. 【請求項２】 カワラタケ属に属する担子菌がカワラタ
ケである、請求項１に記載の免疫系未成熟動物用の疾病
予防剤。2. The agent according to claim 1, wherein the basidiomycete belonging to the genus Kawatake is Kawatake. 【請求項３】 前記タンパク多糖体（３）がＰＳＫであ
る、請求項１に記載の免疫系未成熟動物用の疾病予防
剤。3. The agent for preventing a disease according to claim 1, wherein the protein polysaccharide (3) is PSK. 【請求項４】 ストレプトコッカス属に属する微生物か
らの調製物がＯＫ−４３２である、請求項１に記載の免
疫系未成熟動物用の疾病予防剤。4. The method according to claim 1, wherein the preparation from a microorganism belonging to the genus Streptococcus is OK-432. 【請求項５】 シイタケの子実体から抽出することによ
り得ることができる多糖体がレンチナンである、請求項
１に記載の免疫系未成熟動物用の疾病予防剤。5. The method according to claim 1, wherein the polysaccharide that can be obtained by extracting the fruit body of Lentinula edodes is lentinan. 【請求項６】 疾病が感染症である、請求項１〜５のい
ずれか一項に記載の免疫系未成熟動物用の疾病予防剤。6. The disease preventive agent for an immature immune system animal according to claim 1, wherein the disease is an infectious disease. 【請求項７】 疾病が腫瘍である、請求項１〜５のいず
れか一項に記載の免疫系未成熟動物用の疾病予防剤。7. The disease preventive agent for an immature animal with an immune system according to claim 1, wherein the disease is a tumor. 【請求項８】 請求項１に記載のタンパク多糖体
（１）、タンパク多糖体（２）、又はタンパク多糖体
（３）を有効成分として含有することを特徴とする、免
疫系未成熟期にあるヒト用の疾病予防用機能性食品。8. An immune system comprising the protein polysaccharide (1), the protein polysaccharide (2), or the protein polysaccharide (3) according to claim 1 as an active ingredient. A functional food for human disease prevention. 【請求項９】 カワラタケ属に属する担子菌がカワラタ
ケである、請求項８に記載の免疫系未成熟ヒト用の疾病
予防用機能性食品。9. The functional food for disease prevention for immature humans of the immune system according to claim 8, wherein the basidiomycete belonging to the genus Kawatake is Kawatake. 【請求項１０】 前記タンパク多糖体（３）がＰＳＫで
ある、請求項８に記載の免疫系未成熟ヒト用の疾病予防
用機能性食品。10. The functional food for preventing disease according to claim 8, wherein the protein polysaccharide (3) is PSK. 【請求項１１】 疾病が感染症である、請求項８〜１０
のいずれか一項に記載の免疫系未成熟ヒト用の疾病予防
用機能性食品。11. The method according to claim 8, wherein the disease is an infectious disease.
The functional food for disease prevention for immature humans of the immune system according to any one of the above. 【請求項１２】 疾病が腫瘍である、請求項８〜１０の
いずれか一項に記載の免疫系未成熟ヒト用の疾病予防用
機能性食品。12. The functional food for preventing disease of an immature human having an immune system according to any one of claims 8 to 10, wherein the disease is a tumor. 【請求項１３】 請求項１に記載のタンパク多糖体
（１）、タンパク多糖体（２）、又はタンパク多糖体
（３）を有効成分として含有することを特徴とする、免
疫系未成熟期にある非ヒト動物用の疾病予防用飼料。13. An immune system comprising the protein polysaccharide (1), the protein polysaccharide (2), or the protein polysaccharide (3) according to claim 1 as an active ingredient. Disease control feed for some non-human animals. 【請求項１４】 カワラタケ属に属する担子菌がカワラ
タケである、請求項１３に記載の免疫系未成熟非ヒト動
物用の疾病予防用飼料。14. The feed for disease prevention for an immature non-human animal of the immune system according to claim 13, wherein the basidiomycete belonging to the genus Kawatake is Kawatake. 【請求項１５】 前記タンパク多糖体（３）がＰＳＫで
ある、請求項１３に記載の免疫系未成熟非ヒト動物用の
疾病予防用飼料。15. The feed for disease prevention for an immature non-human animal of the immune system according to claim 13, wherein the protein polysaccharide (3) is PSK. 【請求項１６】 疾病が感染症である、請求項１３〜１
５のいずれか一項に記載の免疫系未成熟非ヒト動物用の
疾病予防用飼料。16. The disease according to claim 13, wherein the disease is an infectious disease.
6. The disease-preventive feed for an immature non-human animal having an immune system according to any one of 5 above. 【請求項１７】 疾病が腫瘍である、請求項１３〜１５
のいずれか一項に記載の免疫系未成熟非ヒト動物用の疾
病予防用飼料。17. The method according to claim 13, wherein the disease is a tumor.
The feed for disease prevention for an immature non-human animal having an immune system according to any one of the above. 【請求項１８】 カワラタケ属に属する担子菌の菌糸
体、子実体、又は培養物を、含水率が１０重量％以下に
なるまで９５〜１１５℃で乾燥することにより得ること
ができ、タンパク質含量が１０〜２０％であることを特
徴とする、タンパク多糖体。18. A mycelium, a fruiting body, or a culture of a Basidiomycete belonging to the genus Coriolus can be obtained by drying at 95 to 115 ° C. until the water content becomes 10% by weight or less, and the protein content is reduced. A protein polysaccharide, which is 10 to 20%. 【請求項１９】 請求項１８に記載のタンパク多糖体を
熱水により抽出し、得られた抽出液を濃縮し、更に脱溶
媒することにより得ることができ、タンパク質含量が２
０〜３０％であることを特徴とする、タンパク多糖体。19. The protein polysaccharide according to claim 18 can be obtained by extracting the protein polysaccharide with hot water, concentrating the obtained extract, and further removing the solvent, and having a protein content of 2%.
A protein polysaccharide, which is 0 to 30%.