JPH11512396A

JPH11512396A - 化合物および方法

Info

Publication number: JPH11512396A
Application number: JP9511420A
Authority: JP
Inventors: デインズ，ロバート・エイ
Original assignee: SmithKline Beecham Corp
Current assignee: SmithKline Beecham Corp
Priority date: 1995-09-05
Filing date: 1996-09-05
Publication date: 1999-10-26
Also published as: EP0851759A1; EP0851759A4; WO1997009046A1

Abstract

(57)【要約】本発明は、カルシトニン遺伝子関連ペプチド（「ＣＧＲＰ」）受容体のリガンド、特に拮抗物質であるキニンおよびキニジン化合物に関する。加えて、本発明は、哺乳動物における頭痛、特に偏頭痛、非インスリン依存性糖尿病、心臓血管系疾患、慢性炎症、内毒素ショック、関節炎、アレルギー性鼻炎および喘息を含むがそれらに限定はされないＣＧＲＰを媒介とする病的状態の、キニンおよびキニジンＣＧＲＰ受容体拮抗物質を用いることによる治療および予防に関する。

Description

【発明の詳細な説明】化合物および方法発明の分野本発明は、カルシトニン遺伝子関連ペプチド(Calcitonin Gene-Related Pep-t ide(以下「ＣＧＲＰ」))受容体のリガンド、特に拮抗物質であるキニンおよびキニジン化合物に関する。さらに、本発明は、哺乳類、好ましくは人間における頭痛、特に偏頭痛、非インスリン依存性糖尿病（以下「ＮＩＤＤＭ」）、心臓血管系疾患、慢性炎症、内毒素ショック、関節炎、アレルギー性鼻炎および喘息を含むがそれらに限定はされない、ＣＧＲＰを媒介とする病的状態の、ＣＧＲＰ受容体リガンド、特にキニンおよびキニジン拮抗物質を用いた治療および予防に関する。発明の背景ＣＧＲＰは、中枢神経系および末梢神経系の神経末端に貯蔵され、そこから放出される３７個のアミノ酸からなるポリペプチドである(グッドマン(Goodman)ら、ライフ・サイエンス(Life Sci.)、３８巻、２１６９−２１７２ページ(１９８６))。ＣＧＲＰは、免疫組織化学法およびラジオイムノアッセイ法により心臓、末梢血管、脳血管および腎臓を支配する神経内で検出されている(ヤマモト(Yama moto)ら、プログレッシブ・ニュウロバイオロジー(Prog.Neurobiol.)、３３巻、３３５−３８６ページ(１９８９))。ＣＧＲＰは、様々な組織で確認されている特異的細胞表面受容体に結合することにより、その生物学的反応を媒介することが示されている。生化学的研究の証拠により、ＣＧＲＰ受容体はＧ−蛋白質結合受容体のファミリーに属することが示唆されている。ＣＧＲＰ受容体の筋肉、腺、上皮および神経細胞への広範な分布は、末梢血管および脳血管の拡張(ブレイン(Brain)ら、ネイチャー(Nature)、３１３巻、５４−５６ページ(１９８５))、心拍数増加(シグリスト(Sigrist)ら、エンドクリノロジー(Endocrinology)、１１９巻、３８１−３８９ページ(１９８６))、カルシウム代謝の調節(グルンディッツ(Grunditz)ら、エンドクリノロジー(Endocrinology) 、１１９巻、２３１３−２３２４ページ(１９８６))、腸管運動の低下(ファージアス(Fargeas)ら、ペプタイズ(Peptides)、６巻、１１６７−１１７１ページ(１９８５))、グルコース代謝の調節、例えばインスリン分泌およびインスリン感受性の低下(ハーマンセン(Hermansen)ら、ペプタイズ(Pep-tides)、２７巻、１４９−１５７ページ（１９９０）およびモリナ(Molina)ら、ダイアビーティス（Di abetes）、３９巻、２６０−２６５ページ(１９９０))、食欲減退および成長ホルモン増加の低減(タネンバウム(Tannenbaum)ら、エンドクリノロジー(Endocrin ology)、１１６巻、２６８５−２６８７ページ(１９８５))を含むその広範な生物学的活性と一致する。ＣＧＲＰは心臓血管、中枢神経、胃腸、呼吸および内分泌系に多数の効果を及ぼすため、ＣＧＲＰ受容体機構の限定的および選択的阻害は、ＣＧＲＰに媒介される広範な種類の病的状態の新たな予防および治療方法につながることが、今回判明した。特に活性ＣＧＲＰ受容体拮抗物質の開発は、哺乳類、好ましくは人間における頭痛、特に偏頭痛，ＮＩＤＤＭ、心臓血管系疾患、慢性炎症、内毒素ショック、関節炎、アレルギー性鼻炎および喘息を含むがそれらに限定はされない、ＣＧＲＰを媒介とする様々な病的状態の治療に役立つことが期待されるであろう。驚くべきことに、ある種の非ペプチド化合物、特に化学式（Ｉ）および化学式（ＩＡ）のキニンおよびキニジン化合物は、その幾つかはマラリアの治療に有用であることが以前に示されている(米国特許第３、６６３、５５２号、１９７２年５月１６日発行；およびヤードリー(Yardley)ら、ジャーナル・オブ・メディカル・ケミストリー(J．Med．Chem.)、１４巻、１号、６２−６５ページ(１９７１))が、ＣＧＲＰ受容体の拮抗物質としても機能し、従って、ＣＧＲＰ受容体機構の阻害が予防または治療方法として挙げられる病的状態の治療に有用であることが、今回判明した。発明の概要１の態様において、本発明は、治療を必要としている哺乳類に有効量の式（Ｉ）：［式中、Ｒ¹は水素、ヒドロキシ、ＣＯ₂Ｒ⁴またはＯＲ⁴；Ｒ²はフェニル、αまたはβナフチル、ハロフェニル、ジハロフェニル、ＣＦ₃ −フェニルまたは所望により置換されていてもよいフェノキシフェニル；Ｒ³は水素、Ｃ１ないしＣ４アルキルまたはＣ２ないしＣ４アルケン；Ｒ⁴はＣ１ないしＣ４アルキル；およびＲ⁵は水素またはヒドロキシを意味する］で示されるキニンまたはキニジン化合物、またはそれらの医薬的に活性な塩を投与することよりなる哺乳動物、好ましくは人間における頭痛、特に偏頭痛，ＮＩＤＤＭ、心臓血管系疾患、慢性炎症、内毒素ショック、関節炎、アレルギー性鼻炎および喘息を含むがそれらに限定はされない、ＣＧＲＰを媒介とする様々な病的状態を治療する方法に関するものである。もう１つの態様において、本発明は、式（ＩＡ）：［式中、Ｒ¹はヒドロキシまたはＣＯ₂Ｒ⁴；Ｒ²はフェニル、アルファまたはベータナフチル、ハロフェニル、ジハロフェニル、ＣＦ₃−フェニルまたは所望により置換されていてもよいフェノキシフェニル；Ｒ³は水素、Ｃ１ないしＣ４アルキルまたはＣ２ないしＣ４アルケン；Ｒ⁴はＣ１ないしＣ４アルキル；およびＲ⁵は水素またはヒドロキシを意味する］で表される一連の新規化合物またはそれらの医薬的に活性な塩に関するもので、該化合物もまた上記のＣＧＲＰを媒介とする病的状態の治療に有用である。さらにもう１つの態様において、本発明は、式（Ｉ）または式（ＩＡ）の化合物およびそれらの医薬上許容される担体を含む医薬組成物に関するものである。特に、本発明の医薬組成物は、哺乳動物、好ましくは人間における頭痛、特に偏頭痛、ＮＩＤＤＭ、心臓血管系疾患、慢性炎症、内毒素ショック、関節炎、アレルギー性鼻炎および喘息を含むがそれらに限定はされない、ＣＧＲＰを媒介とする病的状態の治療に用いられる。発明の詳細な説明式（Ｉ）のキニンまたはキニジン化合物は、ＣＧＲＰ受容体のリガンドであり、特にそれらの拮抗物質であることが今回判明した。また、式（Ｉ）の受容体リガンド、またはそれらの医薬上許容される塩を用いた治療によるＣＧＲＰ受容体機構の選択的阻害は、哺乳動物、好ましくは人間における頭痛、特に偏頭痛、ＮＩＤＤＭ、心臓血管系疾患、慢性炎症、内毒素ショック、関節炎、アレルギー性鼻炎および喘息を含むがそれらに限定はされない様々な病的状態の新たな治療および予防方法につながることも今回判明した。本明細書で用いられる「アルキル」なる語は、全ての場合において、鎖の長さが限定されていない限り、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ− ブチル，ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル等を含むがそれらに限定はされない１個ないし６個の炭素原子の直鎖または分岐鎖の基を意味する。本明細書で用いられる「アルケン」なる語は、全ての場合において、鎖の長さが限定されていない限り、エチレン、プロピレン等を含むがそれらに限定はされない２個ないし６個の炭素原子の直鎖または分岐鎖の基を意味する。本明細書で用いられる「ハロ」または「ハロゲン」なる語は、全ての場合において相互に変換して用いられ、塩素、フッ素、ヨウ素および臭素の元素から誘導された基を意味する。本明細書で用いられる「αまたはβナフチル」なる語は、全ての場合において、Ｒ²位におけるキノリン環へのナフチル基の結合位置を示すものである。本明細書で用いる「ハロフェニル」なる語は、全ての場合において、前記定義にあてはまるハロゲン基によって置換されたフェニル基を意味する。適当には、ハロゲン基は、フェニルが結合しているキノリン核に対して、オルト、メタまたはパラ位のフェニル基上に位置させることができる。本明細書で用いる「ＣＦ₃−フェニル」なる語は、全ての場合において、トリフルオロメチル（−ＣＦ₃）基によって置換されたフェニル基を意味する。適当には、トリフルオロメチル基は、フェニルが結合しているキノリン核に対してオルト、メタまたはパラ位のフェニル基上に位置させることができる。本明細書で用いる「ジハロフェニル」なる語は、全ての場合において、前記定義にあてはまるハロゲン基２個によって置換されたフェニル基部位を意味する。適当には、１個のハロゲン基は、フェニルが結合しているキノリン核に対してオルト、メタまたはパラ位のフェニル基上に位置させることができる。さらに、２個のハロゲン基は同一でも、異なるものでもよい。本明細書で用いる「フェノキシフェニル」なる語は、全ての場合において、「フェニル−酸素−フェニル」の式で表される部位を意味する。適当には、フェノキシフェニル部位の１個のフェニル環は、キノリン核に対してオルト、メタまたはパラ位に結合する。本明細書で用いる「所望により置換されていてもよい」なる語は、全ての場合において、アルキル、ハロゲン、ニトロまたはトリフルオロメチルを含む１個ないし３個の種々の官能基によって置換されていてもされていなくてもよいことを意味する。任意の置換基は、キノリン核に対して、オルト、メタまたはパラ位に位置させることができると理解されよう。好ましくは、任意の置換基は、キノリン核に対してメタまたはパラ位に位置する。本明細書で用いる「ＣＧＲＰを媒介とする病的状態」なる語は、全ての場合において、カルシトニン遺伝子関連ペプチドによって媒介（または変調）されるいずれの病的状態も意味する。当業者に理解されるように、医薬上許容される塩には、塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩、二リン酸塩、臭化水素酸塩および硝酸塩のごとき有機酸の塩またはリンゴ酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、メタンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、パルミチン酸塩、サリチル酸塩およびステアリン酸塩のごとき有機酸の塩が含まれるがそれらに限定はされるものではない。式（Ｉ）の化合物につき様々な具体例は以下の通りである。Ｒ¹は適当には水素、ヒドロキシ，ＣＯ₂Ｒ⁴またはＯＲ⁴である。Ｒ¹は好ましくはヒドロキシまたはＯＲ⁴であり、より好ましくはヒドロキシまたはメトキシである。Ｒ²は適当にはフェニル、αまたはβナフチル、ハロフェニル、ジハロフェニル、ＣＦ₃−フェニルまたは所望により置換されていてもよいフェノキシフェニルである。Ｒ²は好ましくはハロフェニルまたはフェノキシフェニルである。Ｒ³は適当には水素、Ｃ１−Ｃ４アルキルまたはＣ２−Ｃ４アルケンである。Ｒ³は好ましくは水素、メチルまたはＣ２アルケンである。Ｒ⁴は適当にはＣ１ないしＣ４アルキルである。Ｒ⁵は適当には水素またはヒドロキシである。Ｒ⁵は好ましくはヒドロキシである。通常の命名法に従えば、式（Ｉ）または式（ＩＡ）のキニン化合物と、式（Ｉ）または式（ＩＡ）のキニジン化合物の違いは、キニンまたはキニジン分子のＣ８位およびＣ９位の立体化学であることが理解されるであろう。本明細書で用いられるナンバリングシステムは以下の通りである：本発明の化合物は、１以上の不整炭素原子を含み、ラセミ体および光学活性体として存在し得る。これら全ての化合物は、本発明の範囲内にある。特に、式（Ｉ）または式（ＩＡ）の化合物のＣ８位およびＣ９位は、不整中心を含み得ることが理解されるであろう。不整中心は、ＲおよびＳ立体配置のいずれの組合せ、例えば、（Ｒ、Ｒ）、（Ｒ、Ｓ）、（Ｓ、Ｓ）、（Ｓ、Ｒ）であってもよい。本発明の好ましい化合物には以下の化合物がある：２’−(４−クロロフェニル)キニン；２’−(４−トリフルオロメチルフェニル)キニン；２’−(３−トリフルオロメチルフェニル)キニン；２’−(４−クロロフェニル)−１０，１１−ジヒドロキニン；２’−フェニル−１０，１１−ジヒドロキニン；２’−(４−クロロフェニル)キニジン；２’−(４−クロロフェニル)−１０，１１−ジヒドロキニジン；２’−(４−クロロフェニル)−１０，１１−ジヒドロシンコニジン；２’−(４−クロロフェニル)−６’−ヒドロキシ−１０，１１−ジヒドロシンコニジン；２’−(４−クロロフェニル)−１０，１１−ジヒドロ−６’−メトキシカルボニルシンコニジン；および２’−(１−ナフチル)−１０，１１−ジヒドロキニン。医薬組成物の製剤化本発明の医薬的に有効な化合物（およびその医薬上許容される塩）は、頭痛、特に偏頭痛，ＮＩＤＤＭ、心臓血管系疾患、慢性炎症、内毒素ショック、関節炎、アレルギー性鼻炎および喘息の治療に十分な量の式（Ｉ）または式（ＩＡ）の化合物（「有効成分」）を、当業者によく知られた通常の方法で、標準的医薬担体または希釈剤と組み合わせることにより調製した、通常の剤形で投与される。これらの方法では、望ましい製剤に適するよう、成分を混合、造粒、圧縮または溶解することがある。使用される医薬担体は、例えば、固体であっても液体であってもよい。代表的な固体担体には、ラクトース、白土、ショ糖、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アラビアガム、ステアリン酸マグネシウム等がある。代表的な液体担体には、シロップ、落花生油、オリーブ油、水等がある。同様に、担体または希釈剤は、モノステアリン酸グリセリンやジステアリン酸グリセリンのごとき当業者によく知られた遅延物質を単独でまたはロウと共に含有してもよい。広範な種類の剤形が使用できる。従って、もし固体担体を用いれば製剤は錠剤化でき、粉末またはペレット、あるいはトローチまたはロゼンジの形態でハードゼラチンカプセルに充填する。固体担体の量は、様々であろうが、好ましくは、約２５ｍｇないし約１０００ｍｇとなろう。液体担体を用いる場合は、製剤はシロップ、乳剤、ソフトゼラチンカプセル剤、アンプルのごとき無菌で注射可能な液体または非水溶性の懸濁剤の形態となろう。有効成分はまた、ＣＧＲＰを媒介とする病的状態の治療を必要とする哺乳類に局所投与することもできる。従って、有効成分は、頭痛、とくに偏頭痛，ＮＩＤＤＭ、心臓血管系疾患、慢性炎症、内毒素ショック、関節炎、アレルギー性鼻炎、および喘息を含むがそれらに限定はされないＣＧＲＰを媒介とする病的状態の予防および治療のために局所投与され得る。局所投与で治療効果に必要な有効成分の量は、勿論、選択される化合物、治療される病的状態の性質および重症度、および治療される哺乳動物により変化し、最終的には、医師の裁量による。局所投与における有効成分の適当な用量は、１ .５ｍｇないし５００ｍｇで、最も好ましい用量は、１ｍｇないし１００ｍｇ、例えば毎日２または３回投与される５ないし２５ｍｇである。局所投与とは、非全身投与を意味し、有効成分を表皮や口腔に外用することや、耳、眼および鼻にかかる化合物を点滴注入することを含み、ここに、著しい量の該化合物は血流に入らない。全身投与とは、経口、静脈内、腹腔内および筋肉内投与を意味する。有効成分は、未加工の化学薬品として投与することもできるが、医薬製剤として与えることが好ましい。有効成分は、局所投与では、０.００１％ないし１０％ｗ／ｗ、例えば製剤の１重量％ないし２重量％を含み得るが、製剤の１０％ｗ／ｗもと多くを含むことができ、しかしながら、好ましくは、５％ｗ／ｗを超えず、より好ましくは０.１％ないし１％ｗ／ｗを含むことができる。本発明の、動物および人間の医療に用いる局所用製剤は、１種以上の許容される担体および所望により他の治療有効成分とともに有効成分を含有し得る。担体は、製剤の他の成分と適合性があり、その受容者に害を及ぼさないという意味で「許容される」ものでなければならない。局所投与に適した製剤には、リニメント剤、ローション、クリーム、パスタ剤または泥膏のごとき皮膚を通して炎症箇所に浸透させるのに適した液体または半液体の製剤および眼、耳または鼻への投与に適した滴剤が含まれる。本発明による滴剤は、滅菌した水溶液、油性溶液または懸濁液を含み、殺菌剤および／または殺真菌剤および／または他の適当な防腐剤および好ましくは界面活性剤を含む適当な水溶液またはアルコール溶液に有効成分を溶解させることにより調製できる。次いで、得られた溶液を、ろ過により清澄化し、適当な容器に移し、次いでこれを密閉し、３０分間９８−１００℃でオートクレーブ処理するかあるいはその状態に保つことにより滅菌する。別法として、溶液を濾過により滅菌し、無菌的な手法により容器に移すこともできる。滴剤に含ませるのに適した殺菌剤および殺真菌剤の例には、例えば、硝酸フェニル水銀または酢酸フェニル水銀（０.００２％）、塩化ベンザルコニウム（０.０１％）、および酢酸クロルヘキシジン（０.０１％）がある。油性溶液の調製に適した溶剤には、グリセロール、希釈アルコールおよびプロピレングリコールが含まれる。本発明によるローションは、皮膚または眼への使用に適したものを含む。眼用ローションは、所望により殺菌剤を含有してもよい滅菌水溶液を含んでもよく、滴剤の調製法と同様の方法で調製し得る。皮膚に使用するためのローションまたはリニメントは、アルコールやアセトンのような乾燥を促し皮膚を冷却する剤および／またはグリセロールのごとき保湿剤またはひまし油や落花生油のごとき油も含有し得る。本発明によるクリーム、軟膏およびパスタ剤は、有効成分を外用するための半固体製剤である。それらは、細かく砕いたまたは粉状の有効成分を、単独に、または水性または非水性の液体中の溶液または懸濁液にて、適当な機械を用いて油脂性または非油脂性の基剤と混合するみとにより作成し得る。基剤には、硬質、軟質または液状パラフィン、グリセロール、蜜蝋、金属セッケンのごとき炭化水素；粘漿剤；アーモンド油、トウモロコシ油、落花生油、ひまし油またはオリーブ油のごとき天然起源の油；羊毛脂またはその誘導体、またはプロピレングリコールのごときアルコールを加えたステアリン酸またはオレイン酸のごとき脂肪酸が含まれる。製剤は、陰イオン、陽イオンまたはソルビタンエステルやポリオキシエチレン誘導体のような非イオン界面活性剤のごとき適当な界面活性剤を含有し得る。天然ガム、セルロース誘導体、またはケイ酸質シリカのような無機物質のごとき懸濁化剤、およびラノリンのごとき他の成分も含有され得る。有効成分は吸入投与することもできる。「吸入」とは、鼻および口からの吸入投与を意味する。このような投与に適した剤形、例えばエロゾール剤または計量吸入剤は、通常の手法を用いて調製できる。吸入投与する有効成分の１日量は、１日当たり約０.１ｍｇないし約１００ｍｇ、好ましくは、１日当たり約１ｍｇないし約１０ｍｇである。１つの態様において、本発明は哺乳動物、好ましくは人間における頭痛、特に偏頭痛、ＮＩＤＤＭ、心臓血管系疾患、慢性炎症、内毒素ショック、関節炎、アレルギー性鼻炎および喘息を、該哺乳類に有効量のＣＧＲＰ受容体リガンド、特に化学式（Ｉ）で表される拮抗物質を投与することにより治療する方法に関するものである。「治療」なる語は、予防的または治療的療法を意味する。該式（Ｉ）の化合物は、式（Ｉ）の化合物と通常の医薬上許容される担体または希釈剤を、公知の技術に従って組み合わせることにより調製した通常の剤形を用いて、該哺乳類に投与できる。医薬上許容される担体または希釈剤の形態および性質が、組み合わせる有効成分の量、投与経路および他のよく知られた変数により規定されることは、当業者には理解されるであろう。式（Ｉ）の化合物は、頭痛、特に偏頭痛、ＮＩＤＤＭ、心臓血管系疾患、慢性炎症、内毒素ショック、関節炎、アレルギー性鼻炎および喘息の治療を必要としている哺乳類に、これらの病的状態に関連した症状を軽減するに十分な量にて投与される。投与経路は、経口でも非経口でもよい。本明細書で用いられる非経口とは、静脈内、筋肉内、皮下、直腸内、膣内または腹腔内投与を含む。一般に、皮下および筋肉内への非経口投与が好ましい。非経口投与の用量としては、１日当たり約３０ｍｇないし約３００ｍｇの有効成分を投与するのが好ましく、経口投与の場合は１日当たり約１００ｍｇないし約２０００ｍｇの有効成分を投与するのが好ましい。式（Ｉ）の化合物の個々の投与の最適な量および投与頻度は、治療する症状の性質および程度、投与の形態、経路および部位、ならびに治療すべき特定の哺乳動物に応じて決定され、さらにそのような至適条件は通常の手法で決定されるということは、当業者に理解されるであろう。さらに当業者は通常の治療方針決定試験を用いて、最適な治療方針、すなわち定められた日数の間の、式（Ｉ）の化合物の１回投与量および１日投与回数を決定できることも、当業者には明かであろう。調製の方法反応図式１（実施例７）試薬（ａ）ＢＢｒ₃、ＣＨ₂Ｃｌ₂、-７８℃→室温（「ｒｔ」）；（ｂ）Ｈ₂、１０％Ｐｄ／Ｃ、ＭｅＯＨ；（ｃ）４ＮＨＣｌ／ジオキサン２’−(４−クロロフェニル)−１０，１１−ジヒドロシンコニジン（３）およびその二塩酸塩（４、実施例７）の調製は反応図式１に示すように進めた。２’−（４−クロロフェニル）キニン（１）（ヤードリー(Yardley)ら、ジャーナル・オブ・メディシナル・ケミストリー(J．Med．Chem.)、１９７１年、１４巻、６２−６５ページ）に従って合成）で出発し、ＣＨ₂Ｃｌ₂のような不活性溶媒中でＢＢｒ₃で処理すると、６’位のメチルエーテルが開裂し、フェノール化合物２が得られる。標準的な接触水素化法を用いて１０位および１１位の二重結合を還元すると、飽和類似体３が生ずる。もし必要ならば、ジオキサンのごとき有機溶媒中で塩化水素と処理することにより化合物３を二塩酸塩４に変換することができる。反応図式２（実施例８）試薬（ａ）ＮａＨ、ＰｈＮ(Ｔｆ)₂、０℃→室温、ＴＨＦ；（ｂ）５％Ｐｄ(ＯＡｃ)₂ 、５％１，３−ビス（ジフェニルホスフィノ）プロパン（「ｄｐｐｐ」）、ＣＯ、ＭｅＯＨ、Ｅｔ₃Ｎ、ＤＭＳＯ、７０℃;（ｃ）Ｈ₂、１０％Ｐｄ／Ｃ、ＭｅＯＨ;（ｄ）４ＮＨＣｌ／ジオキサン２’−（４−クロロフェニル）−１０，１１−ジヒドロ−６’−メトキシカルボニルシンコニジン（７）およびその二塩酸塩（８、実施例８）の調製を反応図式２に示す。前記の６’−ヒドロキシシンコニジン２で出発し、ＴＨＦのごとき乾燥非プロトン性溶媒中で、ＮａＨおよびＮ−フェニルトリフルオロメタンスルホンイミド（ＰｈＮ（Ｔｆ）₂）を用いて６’−ヒドロキシル基はトリフルオルメタンスルホネート５に変換される。次いで、５０ないし１００℃の高温下でＭｅＯＨおよび一酸化炭素を用いて、この中間生成物をパラジウムを触媒としたカルボニル化反応に付す。この反応は、ジメチルスルホキシド（「ＤＭＳＯ」）のごとき極性非プロトン性溶媒中、トリエチルアミンのごとき立体障害アミンの存在下で行う。得られたメチルエステル６を標準的な接触水素化条件下で水素化して１０位および１１位の二重結合を還元し、飽和化合物７が得られる。所望ならば、ジオキサンのごとき有機溶媒中で塩化水素で処理することにより化合物７を二塩酸塩８に変換することができる。反応図式３（実施例９）試薬（ａ）３％（ＣＨＣｌ₃）Ｐｄ₂（ジベンジリデンアセトン）₃、ＰＰｈ₃、１−ナフチルボロニック酸、エタノール、炭酸ナトリウム水溶液、ベンゼン、還流、２０時間；（ｂ）４規定塩酸／ジオキサン２’−アリールキニン誘導体の別の調製法を２’−（１−ナフチル）−１０，１１−ジヒドロキニンジヒドロクロリド（１１）を例に図３に示す（例９）。この方法は、アリールボロニック酸とオチアイ(Ochiai)ら、薬学雑誌(Yakugaku Zasshi)１９５１年、７１巻、２６０−２６２ページに従って合成した２’−クロロ−１０，１１−ジヒドロキニン（９）をパラジウムを触媒としてカップリングさせるものである。アリールボロニック酸は、購入することも、対応するハロゲン化アリールから通常の方法で調製することもできる。１−ナフチル誘導体１０を例に示すように、１−ナフチルボロニック酸は、適当なパラジウム（０）触媒(Pd⁰-catalyst)の存在下、水溶性エタノールのごときアルコール性溶剤中で、炭酸ナトリウムを塩基として用い、反応溶液が緩やかな還流にて維持される温度にて９とカップリングされる。所望ならば、ジオキサンのごとき有機溶媒中で塩化水素で処理することにより化合物１０を二塩酸塩１１に変換することができる。当業者は、２’−（４−トリフルオロメチル−フェニル）キニンおよび２’− （３−トリフルオロメチルフェニル）キニンが、適当な対応する試薬および出発物質を用いることにより、反応図式３に描かれたのと類似の方法で合成されることを認識するであろう。反応図式４（実施例１０）試薬（ａ）マグネシウムモノペルオキシフタレート、ＥｔＯＨ；（ｂ）ＳＯ₂(ガス) 、ＣＨＣｌ₃；（ｃ）４−クロロフェノール、塩化トシル、トリエチルアミン、ＣＨ₂Ｃｌ₂、０℃→室温２’−（４−クロロフェノキシ）−１０，１１−ジヒドロキニン（１５、実施例１０）の調製は反応図式４に示すように進行した。市販されているアルドリッチ(Aldrich)の１０，１１−ジヒドロキニン（１２）で出発し、強ペルオキシ酸で処理すると、両方の窒素原子が酸化され、ジ−Ｎ−オキシドが得られる。この変換は、無水エタノール中でマグネシウムモノペルオキシフタレートを用いて達成するのが好ましい。次に、トリアルキルアミンオキシドの選択的還元によって、ジ−Ｎ−オキシド１３をアリールＮ−オキシド(以下 ar-N-オキシドという)に変換できる。これは、亜硫酸ガスのごとき緩やかな還元剤を用いることにより達成される。従ってクロロホルムのごとき非プロトン性溶剤中でこのような方法で１３を処理することによりａｒＮ−オキシド１４が得られる。次いで、最後の変換は、アルコール存在下、ＣＨ₂Ｃｌ₂中でａｒＮ−オキシドを塩化トシルおよびトリメチルアミンで処理することにより達成される。この例では、フェノールが用いられている。特殊な例として、もし４−クロロフェノールを用いれば、フェノキシエーテル１５が得られる。実施例１２’−（４−クロロフェニル）キニン二塩酸塩の調製（ａ）２’−（４−クロロフェニル）キニン標記化合物は、ヤードリー(Yardley)らに対して１９７４年６月１８日に発行された米国特許第３、６６３、５５２号、実施例１１（１４欄２９行）およびヤードリー(Yardley)ら、ジャーナル・オブ・メディシナル・ケミストリー(J．Med ．Chem.)、１９７１年、１４巻、６２−６５ページの例１８における実験の開示に従って調製した。特に、キニジンａｒＮ−オキシドの代わりにキニンａｒＮ− オキシドを、ベンゼンの代わりにトルエンを、ＫＯＨの代わりにＮａＯＨを、Ｋ₂ ＣＯ₃の代わりにＮａ₂ＳＯ₄で置き換え、そしてグリニャール試薬として臭化４ −クロロフェニルマグネシウムを用いる以外は２’−メチルキニジン（６５ページ記載）の調製方法に従った。また、メタノールから再結晶する代わりに、粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、メタノール：酢酸エチル：水酸化アンモニウムが５：９５：０.５および１０：９０：０.５）により精製した。ＭＳ(ＥＳ)ｍ/ｅ４３５．２［Ｍ＋Ｈ］⁺ （ｂ）２’−（４−クロロフェニル）キニジン二塩酸塩実施例１（ａ）の化合物（６６ｍｇ、０．１５ミリモル）の４ＮＨＣｌ／ジオキサン中溶液を室温にて３０分間撹拌した。溶媒を真空下で除去し、得られた黄色油をジエチルエーテルでトリチュレートし、白濁した黄色の懸濁液を得た。ジエチルエーテルを濾過により除去した後、黄色い残渣を真空下で２０時間乾燥して、標記化合物（５５ｍｇ、６９％）を黄色粉末として得た。元素分析（Ｃ₂₆ Ｈ₂₉Ｏ₂Ｎ₂Ｃｌ₃・２／３Ｈ₂Ｏとして）計算値：Ｃ，６０．０７；Ｈ，５．８８；Ｎ，５．３９実測値：Ｃ，６０．０７；Ｈ，５．８８；Ｎ，５．３９実施２２’−（４−クロロフェニル）−１０、１１−ジヒドロキニン二塩酸塩の調製（ａ）２’−（４−クロロフェニル）−１０、１１−ジヒドロキニン：標記化合物は、ヤードリー(Yardley)らに対して１９７４年６月１８日に発行された米国特許第３、６６３、５５２号、実施例１１（１４欄３４行）およびヤードリー(Yardley)ら、ジャーナル・オブ・メディシナル・ケミストリー(J．Med ．Chem.)、１９７１年、１４巻、６２−６５ページにおける実験の開示に従って調製した。特に、２’−(４−クロロフェニル)キニジンの代わりに実施例１(ａ) の化合物で置き換える以外は２’−（４−クロロフェニル）ジヒドロキニジン（６５ページ記載）の調製方法に従った。また、ジエチルエーテルから再結晶する代わりに、粗生成物はフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、メタノール：酢酸エチル：水酸化アンモニウムが５：９５：０.５および１０：９０：０.５）により精製した。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ４３７．２［Ｍ＋Ｈ］⁺ （ｂ）２’−（４−クロロフェニル）−１０、１１−ジヒドロキニン二塩酸塩：実施例２（ａ）の化合物（９６ｍｇ、０．２２ミリモル）を４ＮＨＣｌ／ジオキサン中溶液を室温にて３０分間撹拌した。溶媒を真空下で除去し、得られた黄色いオイルをジエチルエーテルでトリチュレートし、白濁した黄色の懸濁液を得た。ジエチルエーテルを濾過により除去した後、黄色い残渣をメタノールに溶解し、これを真空下で濃縮した。得られた黄色い固体を水（ＨＰＬＣグレード）に懸濁し、凍結乾燥して、標記化合物（９２ｍｇ、８２％）がアモルファス状の黄色固体として得られた。元素分析（Ｃ₂₆Ｈ₃₁Ｏ₂Ｎ₂Ｃｌ₃・１Ｈ₂Ｏとして）計算値：Ｃ，５９．１５；Ｈ，６．３０；Ｎ，５．３１実測値：Ｃ，５８．９３；Ｈ，６．１５；Ｎ，５．０４実施例３２’−フェニル−１０、１１−ジヒドロキニン二塩酸塩の調製（ａ）２’−フェニル−１０、１１−ジヒドロキニン：標記化合物は、ヤードリー(Yardley)らに対して１９７４年６月１８日に発行された米国特許第３、６６３、５５２号、およびヤードリー(Yardley)ら、ジャーナル・オブ・メディシナル・ケミストリー(J．Med．Chem.)、１９７１年、１４巻、６２−６５ページにおける実験の開示に従って調製した。特に、キニジンａｒＮ−オキシドの代わりにキニンａｒＮ−オキシドで、ベンゼンの代わりにテトラヒドロフランで置き換え、そしてグリニャール試薬として臭化フェニルマグネシウムを用いる以外は２’−アリールジヒドロキニジン（６５ページ記載）の一般的調製方法に従った。また再結晶する代わりに、粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、メタノール：塩化メチレン：ギ酸が１０：９０：３）により精製した。¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ８．０５− ８．０９（ｍ，３Ｈ）、７．９６（ｓ，１Ｈ）、７．４１−７．４９(ｍ，３Ｈ) 、７．３３（ｄｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．１７（ｄ，Ｊ＝７Ｈｚ，１Ｈ）、５．５７（ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ，１Ｈ）、３．８８（ｓ，３Ｈ）、３．４０−３．５３（ｍ，１Ｈ）、３．２０−３．４０（ｍ，１Ｈ）、３．０５−３．１１（ｄｄ，Ｊ＝２５Ｈｚ，２Ｈ）、２．６０−２．７５（ｍ，１Ｈ）、２．３５−２．４５（ｍ，１Ｈ）、１．８０−２．２５（ｍ，１Ｈ）、１．６５−１．８５（ｍ，２Ｈ）、１．３０−１．５５（ｍ，２Ｈ）、１．１５−１．３０（ｍ，２Ｈ）、０．７９（ｔ，Ｊ＝１９Ｈｚ，３Ｈ）（ｂ）２’−フェニル−１０、１１−ジヒドロキニン二塩酸塩実施例３（ａ）の化合物（８５ｍｇ、０．２ミリモル）の乾燥した塩化メチレン（５ｍＬ）中溶液を、４ＮＨＣｌ／ジオキサン（０．５ｍＬ）で処理した。溶媒を減圧下で除去し、得られた残渣を真空下で２０時間乾燥して、標記化合物（９６ｍｇ、９２％）をカナリア色固体として得た。元素分析（Ｃ₂₆Ｈ₃₂Ｏ₃Ｎ₂ Ｃｌ₃・１．５Ｈ₂Ｏとして）計算値：Ｃ，６０．２３；Ｈ，６．８０；Ｎ，５．４０実測値：Ｃ，６０．５９；Ｈ，６．８６；Ｎ，５．０２実施例４２’−（４−クロロフェニル）キニジン二塩酸塩の調製（ａ）２’−（４−クロロフェニル）キニジン標記化合物は、ヤードリー(Yardley)らに対して１９７４年６月１８日に発行された米国特許第３、６６３、５５２号、実施例４およびヤードリー(Yardley) ら、ジャーナル・オブ・メディシナル・ケミストリー(J．Med．Chem.)、１９７１年、１４巻、６２−６５ページの例９における実験の開示に従って調製した。特に、ベンゼンの代わりにトルエンで、水酸化カリウムの代わりに水酸化ナトリウムで、炭酸カリウムの代わりに硫酸ナトリウムで、そしてグリニャール試薬としで臭化４−クロルフェニルマグネシウムを用いる以外は２’−メチルキニジン（６５ページ記載）の調製方法に従った。またメタノールから再結晶する代わりに、粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、メタノール：酢酸エチル：水酸化アンモニウムが５：９５：０．５および１０：９０：０．５）により精製した。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ４３５［Ｍ＋Ｈ］⁺ （ｂ）２’−（４−クロロフェニル）キニジン二塩酸塩２’−（４−クロロフェニル）キニンの代わりに実施例４（ａ）の化合物（２８ｍｇ，０．００６５ミリモル）で置き換える以外は、実施例１（ｂ）の手法に従い、標記化合物（２８ｍｇ、９８％）を黄色固体として調製した。元素分析（Ｃ₂₆Ｈ₂₉Ｏ₂Ｎ₂Ｃｌ₃・１Ｈ₂Ｏとして）計算値：Ｃ，５９．２７；Ｈ，５．９３；Ｎ，５．３２実測値：Ｃ，５９．５５；Ｈ，５．９５；Ｎ，５．０１実施例５２’−（４−クロロフェニル）−１０、１１−ジヒドロキニジン二塩酸塩の調製（ａ）２’−（４−クロロフェニル）−１０、１１−ジヒドロキニジン標記化合物は、ヤードリー(Yardley)らに対して１９７４年６月１８日に発行された米国特許第３、６６３、５５２号、実施例１１（１４欄、７行目）およびヤードリー(Yard- ley)ら、ジャーナル・オブ・メディシナル・ケミストリー(J ．Med．Chem.)、１９７１年、１４巻、６２−６５ページの例１３における実験の開示に従って調製した。特に、標記化合物（６５ページ記載）の調製手法に従った。ジエチルエーテルから再結晶する代わりに、粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、メタノール：酢酸エチル：水酸化アンモニウムが５：９５：０．５および１０：９０：０．５）により精製した。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ４３７．２［Ｍ＋Ｈ］⁺ （ｂ）２’−（４−クロロフェニル）−１０、１１−ジヒドロキニジン二塩酸塩：２’−（４−クロロフェニル）−１０、１１−ジヒドロキニンの代わりに実施例５（ａ）の化合物（８２ｍｇ，０．１８８ミリモル）で置き換える以外は、実施例２（ｂ）の手法に従って、標記化合物（２８ｍｇ、９８％）をアモルファス状の黄色固体として調製した。元素分析（Ｃ₂₆Ｈ₂₉Ｏ₂Ｎ₂Ｃｌ・１7/8ＨＣｌとして）計算値：Ｃ，６２．１３；Ｈ，６．１８；Ｎ，５．５７実測値：Ｃ，６２．１６；Ｈ，６．１６；Ｎ，５．６３実施例６２’−（４−クロロフェニル）−１０、１１−ジヒドロシンコニジン二塩酸塩の調製（ａ）２’−（４−クロロフェニル）−１０、１１−ジヒドロシンコニジン標記化合物は、ヤードリー(Yardley)らに対して１９７４年６月１８日に発行された米国特許第３、６６３、５５２号、実施例１１（１４欄４６行）およびヤードリー(Yardley)ら、ジャーナル・オブ・メディシナル・ケミストリー(J．Med ．Chem.)、１９７１年、１４巻、６２−６５ページにおける実験の開示に従って調製した。特に、キニジンａｒ−Ｎ−オキシドの代わりにシンコニジンａｒ−Ｎ −オキシドで、ベンゼンの代わりにトルエンで、水酸化カリウムの代わりに水酸化ナトリウムで、炭酸カリウムの代わりに硫酸ナトリウムで置き換え、そしてグリニャール試薬として臭化４−クロルフェニルマグネシウムを用いる以外は２’ −アリールジヒドロキニジン（６５ページ記載）の調製方法に従った。また再結晶する代わりに、粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ、メタノール：塩化メチレン：ギ酸が３：９７：１、５：９５：１および１０：９０：１）により精製した。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ４０７．２［Ｍ＋Ｈ］⁺ （ｂ）２’−（４−クロロフェニル）−１０、１１−ジヒドロシンコニジン二塩酸塩：２’−（４−クロロフェニル）−１０、１１−ジヒドロキニンの代わりに実施例６（ａ）の化合物（６３ｍｇ，０．１６ミリモル）で置き換える以外は、実施例２（ｂ）の手法に従って、標記化合物（６３ｍｇ、７８％）を淡黄色固体として調製した。元素分析（Ｃ₂₆Ｈ₂₉ＯＮ₂Ｃｌ₃・１3/4Ｈ₂Ｏとして）計算値：Ｃ，５８．７２；Ｈ，６．４１；Ｎ，５．４８実測値：Ｃ，５８．７２；Ｈ，６．１８；Ｎ，５．３３実施例７２’−（４−クロロフェニル）−６’−ヒドロキシ−１０、１１−ジヒドロシンコニジン二塩酸塩の調製（ａ）２’−（４−クロロフェニル）−６’−ヒドロキシシンコニジン実施例２（ａ）の化合物（２５０ｍｇ，０．５７ミリモル）を乾燥した塩化メチレン（２．７ｍＬ）に溶解し、ドライアイス／アセトン浴中で−７８℃に冷却した。ＢＢｒ₃（２．１ｍＬ、２．３ミリモル、塩化メチレン中１．１Ｍ溶液）を１０分間にわたって撹拌溶液に滴下した。−７８℃にて１時間撹拌した後、反応混合液を徐々に室温まで温め、さらに２０時間撹拌した。水を注意深く加えて、過剰なＢＢｒ₃を分解させ、１０％水酸化ナトリウムを用いて反応混合液を塩基性（ｐＨ１１−１２）にした。反応混合液を塩化メチレン（２×）で抽出し、有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、真空下で濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、メタノール：酢酸エチル：水酸化アンモニウムが５：９５：１および１０：９０：１）によって精製した。標記化合物を含む画分を真空下で濃縮し、得られた油を塩化メチレンに溶解し、水洗した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し真空下で濃縮して標記化合物（１１６ｍｇ、４８％）をオレンジがかった黄色粉末として得られた。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ４２１．２［Ｍ＋Ｈ］⁺ 。（ｂ）２’−（４−クロロフェニル）−６’−ヒドロキシ−１０、１１−ジヒドロシンコニジン実施例７（ａ）の化合物（１１５ｍｇ，０．２７ミリモル）の乾燥したメタノール（１．３ｍＬ）中溶液に１０％Ｐｄ／Ｃ（１２ｍｇ）を加えた。得られた混合物を、水素雰囲気下（二重壁バルーン圧）で２時間撹拌した。反応混合物を、塩化メチレンで希釈し、セライト(Celite)を通して濾過した。濾液は真空下で濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、メタノール：酢酸エチル：水酸化アンモニウムが５：９５：１、１０：９０：１または１５：８５：１）により精製した。標記化合物を含む画分を真空下で濃縮し、得られた油は塩化メチレンに溶解し、水洗した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し真空下で濃縮して標記化合物（９７ｍｇ、８５％）を淡オレンジ色の固体として得た。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ４２３．６［Ｍ＋Ｈ］⁺。（ｃ）２’−（４−クロロフェニル）−６’−ヒドロキシ−１０、１１−ジヒドロシンコニジン二塩酸塩：２’−（４−クロロフェニル）キニンの代わりに実施例７（ｂ）の化合物で置き換える以外は、実施例１（ｂ）の手法に従い、標記化合物を黄色固体として調製した。元素分析（Ｃ₂₅Ｈ₂₇ＯＮ₂Ｃｌ・２1/2ＨＣｌ・1/4Ｈ₂Ｏ）計算値：Ｃ，５７．９０；Ｈ，５．８３；Ｎ，５．４０実測値：Ｃ，５７．７４；Ｈ，５．４３；Ｎ，５．２９実施例８２’−（４−クロロフェニル）−１０、１１−ジヒドロ−６’−メトキシカルボニルシンコニジン二塩酸塩の調製（ａ）２’−（４−クロロフェニル）−１０、１１−ジヒドロ−６’−トリフルオロメチルスルホニルシンコニジン：実施例７（ｂ）の化合物（４６ｍｇ，０．１１ミリモル）の乾燥したテトラヒドロフラン（０．５ｍＬ）中冷却（０℃）溶液にＮａＨ（６ｍｇ）を加えた。反応混合液を５分間撹拌した後、Ｎ−フェニルトリフルオロメタンスルホンイミド（５９ｍｇ，０．１７ミリモル）を加え、得られた混合溶液を０℃にて２時間撹拌し、室温にてさらに２時間撹拌した。反応混合液を塩化メチレンで希釈し、１０％塩酸、水および食塩水で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、真空下で濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、メタノール：塩化メチレンが１：９９および３：９７）により精製して標記化合物（４３ｍｇ、７２％）をオフホワイトの固体として得られた。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ５５５［Ｍ＋Ｈ］⁺。（ｂ）２’−（４−クロロフェニル）−１０、１１−ジヒドロ−６’−メトキシカルボニルシンコニジン：実施例８（ａ）の化合物（４３ｍｇ，０．０８ミリモル）、酢酸パラジウム（１ｍｇ，５ミリモル％）、１，３−ビス（ジフェニルホスフィノ）プロパン（１．６ｍｇ，５ミリモル％）、トリエチルアミン（０．０３ｍＬ）およびメタノール（０．４ｍＬ）の乾燥したジメチルスルホキシド（０．５ｍＬ）中混合物に一酸化炭素を５分間パージし、一酸化炭素気流下(二重壁バルーン圧)、７０℃にて２０時間撹拌した。反応混合液を塩化メチレンで希釈し、１０％塩酸、水および食塩水で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、真空下で濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、メタノール：酢酸エチル：水酸化アンモニウムが３：９７：１、および５：９５：１）により精製した。標記化合物を含む画分を真空下で濃縮し、得られた油を塩化メチレンに溶解し、水洗した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、真空下で濃縮して標記化合物（１５ｍｇ、４０％）を無色固体として得られた。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ４６５．２［Ｍ＋Ｈ］⁺ 。（ｃ）２’−（４−クロロフェニル）−１０、１１−ジヒドロ−６’−メトキシカルボニルシンコニジン二塩酸塩：２’−（４−クロロフェニル）−１０，１１−ジヒドロキニンの代わりに実施例８（ｂ）の化合物で置き換える以外は、実施例２（ｂ）の手法に従い、標記化合物がアモルファス状の薄黄色固体として調製された。元素分析（Ｃ₂₇Ｈ₃₁Ｏ₃ Ｎ₂Ｃｌ₃・１3/8Ｈ₂Ｏとして）計算値：Ｃ，５７．６３；Ｈ，６．０５；Ｎ，４．９８実測値：Ｃ，５７．８３；Ｈ，５．６６；Ｎ，４．８５実施例９２’−（１−ナフチル）−１０、１１−ジヒドロキニン二塩酸塩の調製（ａ）２’−クロロ−１０、１１−ジヒドロキニン標記化合物はオチアイ(Ochiai)ら、薬学雑誌、１９５１年、７１巻、２６０− ２６２ページにおける実験の開示に従って調製した。特に、標記化合物（２６１ページ記載）の調製についての実験方法に従った。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ３６１．２［Ｍ＋Ｈ］⁺。（ｂ）２’−（１−ナフチル）−１０，１１−ジヒドロキニントリス（ジベンジリデンアセトン）二パラジウムのクロロホルム付加物（２７ｍｇ，０．０２６ミリモル）のベンゼン（２．１ｍＬ）中溶液を、水分および酸素を除いたフラスコ内で、トリフェニルホスフィン（２８ｍｇ，０．１０ミリモル）で処浬した。１５分間撹拌後、実施例９（ａ）の化合物（３１０ｍｇ，０．８５ミリモル）および１−ナフチルボロニック酸（１６０ｍｇ，０．９４ミリモル）を溶液に加えた。次いで、エタノール（０．２９ｍＬ）および２Ｍの炭酸ナトリウム水溶液（０．９５ｍＬ）を加えた。得られた溶液を、緩やかな還流下で２０時間撹拌した。反応溶液を水および塩化メチレンで希釈した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、真空下で濃縮し、クロマトトロン(Chromatotron)(塩化メチレンおよび９６：４：１の塩化メチレン：メタノール：ぎ酸)により精製した。標記化合物を含む画分を真空下で濃縮し、得られた油を塩化メチレンに溶解し、炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、真空下で濃縮して表題化合物（３０１ｍｇ、８５％）をガラス質の発泡体として得た。¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ₃）δ８．０５−８．２０（ｍ，２Ｈ）、７．７８−７．９６（ｍ，３Ｈ）、７．６８（ｄ，Ｊ＝１７Ｈｚ，１Ｈ）、７．３２−７．６０（ｍ，３Ｈ）、７．２０−７．３０（ｍ，２Ｈ）、５．６５（ｓ，１Ｈ）、３．８７（ｓ，３Ｈ）、３．４０−３．６０（ｍ，２Ｈ）、３．１５ −３．２０（ｍ，１Ｈ）、３．０５−３．１１（ｄｄ，Ｊ＝２５Ｈｚ，２Ｈ）、２．６０−２．７５（ｍ，１Ｈ）、２．３５−２．４５（ｍ，１Ｈ）、１．８０ −２．２５（ｍ，１Ｈ）、１．６５−１．８５（ｍ，２Ｈ）、１．３０−１．５５（ｍ，２Ｈ）、１．１５−１．３０（ｍ，２Ｈ）、０．７９（ｔ，Ｊ＝１９Ｈｚ，３Ｈ）（ｃ）２’−（１−ナフチル）−１０，１１−ジヒドロキニン二塩酸塩２’−(４−フェニル)−１０，１１−ジヒドロキニンの代わりに実施例９(ｂ) の化合物（３０１ｍｇ，０．６７ミリモル）で置き換える以外は実施例３（ｂ）の手法に従い、標記化合物（３３７ｍｇ，９６％）を黄色結晶性固体として調製した。元素分析（Ｃ₃₀Ｈ₃₄Ｏ₂Ｎ₂Ｃｌ₂・１1/2Ｈ₂Ｏとして）計算値：Ｃ，６５．２１；Ｈ，６．７５；Ｎ，５．０７実測値：Ｃ，６５．６;Ｈ，６．６９; Ｎ，４．６６実施例１０２’−（４−クロロフェノキシ）−１０、１１−ジヒドロキニンの調製（ａ）１０、１１−ジヒドロキニンａｒＮ−オキシド１０、１１−ジヒドロキニン（ヒドロキニン、アルドリッチ(Aldrich)；１０ｇ，０．０３０モル）を無水エタノール（１００ｍＬ）に溶かし、マグネシウムモノペルオキシフタレート（３５ｇ，０．０５７モル）を２回に分けて加えて処理した。反応混合液を室温にて２４時間撹拌した。エタノールを真空下で除去し、残渣をＣＨＣｌ₃（１００ｍＬ）および水（１００ｍＬ）で処理した。生成物をＣＨＣｌ₃に抽出し、合わせた有機層を炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液および食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過および蒸発により１０、１１−ジヒドロキニンジ−Ｎ−オキシドが淡黄色の発泡体として得られ、さらに精製することなく用いた。前記で得られた粗ジ−Ｎ−オキシドをＣＨＣｌ₃（１００ｍＬ）に溶解し、氷 −水浴に入れた。溶液に亜硫酸ガスを４０分間通じ、次いで反応フラスコに蓋をし、室温にて１８時間撹拌した。反応溶液を炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液に注意深く注いだ。生成物をＣＨＣｌ₃で抽出し、合わせた有機層を炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液および食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。濾過および蒸発により暗黄色の発泡体が得られた。粗生成物は、熱酢酸エチル−メタノール混合溶液に溶解した。冷却しても結晶化は起こらなかった。次に溶液を無水ジエチルエーテルに注ぎ放置した。非結晶性沈澱物を収集し、乾燥して、１０、１１−ジヒドロキニンａｒＮ−オキシド（４ｇ，４０％，２工程）が約９０％の純度で得られた。ＭＳ(ＥＳ)ｍ／ｅ３４３．２[Ｍ＋Ｈ]⁺ （ｂ）２’−（４−クロロフェノキシ）−１０，１１−ジヒドロキニン：１０，１１−ジヒドロキニンａｒＮ−オキシド（５１ｍｇ，０．１５ミリモル）をＣＨ₂Ｃｌ₂（０．５ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却し、４−クロルフェノール（２０ｍｇ，０．３０ミリモル）および塩化トシル（３６ｍｇ，０．１９ミリモル）で処理した。トリエチルアミン（０．０５ｍＬ，０．３６ミリモル）を反応溶液に徐々に加え、０℃にて２０分間撹拌を続け、続いて室温にてさらに１８時間撹拌した。反応溶液をＣＨＣｌ₃で希釈し、５％の炭酸ナトリウムおよび食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。粗生成物は、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、メタノール：酢酸エチル：水酸化アンモニウムが５：９４：１、７：９２：１および１０：８９：１）により精製した。所望の画分の蒸発により無色油が得られた。該油を無水メタノールで処理して標記化合物が無色固体（２２ｍｇ，３２％）として得られた。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｅ４５３．２［Ｍ＋Ｈ］⁺。ＣＧＲＰ受容体に対する化合物の影響テスト化合物を、ヒトの神経芽細胞腫細胞（ＳＫ−Ｎ−ＭＣ）における[¹²⁵Ｉ ]ＣＧＲＰ（アマーシャム(Amesham)、シカゴ(Chicago)、イリノイ州(ＩＬ)から入手）結合阻害およびＣＧＲＰを媒介とするｃＡＭＰの形成阻害作用につき検定した。ＳＫ−Ｎ−ＭＣ細胞はアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション(Ameri can Type Culture Collection)((ロックビル(Rockville)、メリーランド州(MD)) から入手し、ウシ胎児血清(１０％)を含む最小必須培地(「ＭＥＭ」)で増殖させた。細胞をＴ−１５０フラスコまたはコスターマルチウェルプレート(Costar mu ltiwell plates)（２４ウェル）中で増殖させ、湿度９０％、５％ＣＯ₂および９５％空気の雰囲気のインキュベーター内で温度を３７℃に維持した。［¹²⁵Ｉ］ＣＧＲＰ結合アッセイ：ＳＫ−Ｎ−ＭＣ細胞を５ｍＭトリス−塩酸（ｐＨ７．４）、１０ｍＭＥＤＴＡナトリウム中でホモゲナイズし、ホモジネートを４８０００ｇで２０分間、４℃にて遠心分離した。ペレットを２０ｍＭＮａ−ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７.４）、１０ｍＭＭｇＣｌ₂に再懸濁し、前記のごとき再度遠心分離した。膜ペレットを同じ緩衝液に再懸濁し、−７０℃にて凍結保存した。蛋白質濃度は、ウシ血清アルブミンを標準としてピアス（Pierce）ＢＣＡ法により測定した。［¹²⁵Ｉ］ＣＧＲＰ受容体結合アッセイは、２０ｍＭＮａ−ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７.４）、１０ｍＭＭｇＣｌ₂、０.０５％ＢＳＡおよび０．１ｍｇ／ｍＬのバシトラシンを含む緩衝液を用いて行った。膜（５０μｇ蛋白質／ｍＬ）を全容量５００μＬ中、様々な濃度（１、１０、３０、６０および１００ｕＭ）のテスト化合物および４０ｐＭの［¹²⁵Ｉ］ＣＧＲＰと共に２５℃で６０分間インキュベートした。２ｍＬの０．９％氷冷塩化ナトリウム加えて反応を停止させた後、予め０．５％ポリエチレンイミン（ＰＥＩ）に浸したスカトロン・フィルターメーツ(Skatron Filtermates)を通して急速ろ過を行った。フィルターを２ｍＬの０．９％冷塩化ナトリウムで２回洗浄し、ガンマカウンターで放射能を計測した。結合データは全てコンピュータープログラムのリガンド２（ＬＩＧＡＮＤ２）によって解析した。ＣＧＲＰを媒介とするｃＡＭＰ形成コスター・マルチウェル・プレート（２４ウェル）中で増殖させたＳＫ−Ｎ− ＭＣ細胞を１ｍＬのリン酸緩衝溶液で、次いで０．５ｍＭイソブチルメチルキサンチンを補足した新鮮な緩衝液４５０μＬで洗浄した。様々な濃度のテスト化合物（１０μＬ）をウェルに加え、室温にて３０分間インキュベートした。次に、５０μＬの１０ｎＭｈＣＧＲＰを加え１０分間３７℃にてインキュベートした。５０μＬの１００％氷冷トリクロロ酢酸を各ウェルに加えることによってインキュベーションを停止させ、ナムビ（Nambi）ら、ジェイ・ピー・イー・ティー（ＪＰＥＴ）、１９８６、２３７、１４３により説明されているごとくにＲＩＡによってｃＡＭＰを測定した。本発明の化合物は、ＣＧＲＰ受容体リガンド、特にその拮抗物質として、結合活性を示し、０．００１ないし１００μＭの範囲のＩＣ₅₀値を有する。本発明の化合物につき構造／活性相関は、未だ確立されていない。しかしながら、本明細書中の開示情報があれば、当業者は既存の検査法を用いて式（Ｉ）のいずれの化合物がＣＧＲＰ受容体のリガンドであり、いずれが０．００１ないし１００μＭの範囲のＩＣ₅₀値でＣＧＲＰ受容体と結合するのかを決定することができる。前記の記載は、その好ましい具体例を含め、本発明を完全に開示するものである。本明細書中に開示された特定の具体例の修飾および改良は、以下の請求の範囲内にある。当業者は、前記の記載をふまえれば、さらなる推敲なしに本発明を最大限に活用できると考えられる。従って、いかなる実施例も単なる例示であり決して本発明の範囲を限定するものではないと解釈されるべきである。本発明の具体例の中で独占的な所有権または特権が請求されるものを以下に定義する。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号ＦＩＡ６１Ｋ 31/00 ６２６Ａ６１Ｋ 31/00 ６２６Ａ６２９６２９６３７６３７ 31/49 31/49

Claims

【特許請求の範囲】１．有効量の式：［式中、Ｒ¹は水素、ヒドロキシ、ＣＯ₂Ｒ⁴またはＯＲ⁴；Ｒ²はフェニル、αまたはβナフチル、ハロフェニル、ジハロフェニル、ＣＦ₃ −フェニルまたは所望により置換されていてもよいフェノキシフェニル；Ｒ³は水素、Ｃ１ないしＣ４アルキルまたはＣ２ないしＣ４アルケン；Ｒ⁴はＣ１ないしＣ４アルキル；およびＲ⁵は水素またはヒドロキシを意味する］で示される化合物またはその医薬上許容される塩を治療を必要とする哺乳動物に投与することを特徴とする哺乳動物においてＣＧＲＰを媒介とする病的状態を治療する方法。２．式（Ｉ）の該化合物が、２’−(４−クロロフェニル)キニン；２’−(４−トリフルオロメチルフェニル)キニン；２’−(３−トリフルオロメチルフェニル)キニン；２’−(４−クロロフェニル)−１０，１１−ジヒドロキニン；２’−フェニル−１０，１１−ジヒドロキニン；２’−(４−クロロフェニル)キニジン；２’−(４−クロロフェニル)−１０，１１−ジヒドロキニジン；２’−(４−クロロフェニル)−１０，１１−ジヒドロシンコニジン；２’−(４−クロロフェニル)−６’−ヒドロキシ−１０，１１−ジヒドロシンコニジン；２’−(４−クロロフェニル)−１０，１１−ジヒドロ−６’−メトキシカルボニルシンコニジン；および２’−(１−ナフチル)−１０，１１−ジヒドロキニンから選択される請求項１記載の方法。３．式（ＩＡ）：［式中、Ｒ¹はヒドロキシまたはＣＯ₂Ｒ⁴；Ｒ²はフェニル、アルファまたはベータナフチル、ハロフェニル、ジハロフェニル、ＣＦ₃−フェニルまたは所望により置換されていてもよいフェノキシフェニル；Ｒ³は水素、Ｃ１ないしＣ４アルキルまたはＣ２ないしＣ４アルケン；Ｒ⁴はＣ１ないしＣ４アルキル；およびＲ⁵は水素またはヒドロキシを意味する］で示される化合物またはその医薬上許容される塩。