JPH11180876A - Separation of plasma or serum - Google Patents
Separation of plasma or serumInfo
- Publication number
- JPH11180876A JPH11180876A JP9355077A JP35507797A JPH11180876A JP H11180876 A JPH11180876 A JP H11180876A JP 9355077 A JP9355077 A JP 9355077A JP 35507797 A JP35507797 A JP 35507797A JP H11180876 A JPH11180876 A JP H11180876A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- blood
- serum
- plasma
- separation
- separation element
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Withdrawn
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- External Artificial Organs (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
【０００１】[0001]
【発明の属する技術分野】本発明は、血漿または血清の
分離方法に関する。さらに詳しくは、臨床検査等に用い
られる際、少量の血液でも迅速かつ効率的に純度の高い
血漿または血清を得ることが可能で、かつ操作性も簡便
で安全性が高い血漿または血清を分離する方法に関す
る。[0001] The present invention relates to a method for separating plasma or serum. More specifically, when used for clinical tests, etc., it is possible to quickly and efficiently obtain high-purity plasma or serum even with a small amount of blood, and to separate plasma or serum with high operability and high safety. About the method.
【０００２】[0002]
【従来の技術】血液中の成分を測定する、いわゆる生化
学検査は、各種疾患の診断・経過観察に広く利用され、
臨床検査として重要な位置を占めている。その分析技術
は近年著しく進歩し、各種自動分析器の開発により、多
数の検体が精度良く迅速に分析できるようになった。し
かし、生化学検査の多くの分野では赤血球等の血球の存
在が検査を妨害するため、あらかじめ血液から血清また
は血漿を分離し、使用されている。そのため、検査に先
立ち、患者や被験者から採取した血液を一旦凝固させた
後、遠心分離し、血清を得るという過程を経る必要があ
る。凝固・遠心分離の操作は時間がかかり、臨床検査の
短時間化を妨げるばかりでなく、大型の遠心分離器が必
要であるため、比較的大きな病院を除いては、臨床検査
を外部の検査業者に依頼しているところが多く、検査結
果を入手するまでに数日要している。また、血液から血
清または血漿を分離する作業は、未だほとんど人手に頼
っているため、作業者は血液に触れることにより、感染
等の危険にもさらされている。2. Description of the Related Art Biochemical tests for measuring components in blood are widely used for diagnosis and follow-up of various diseases.
It occupies an important position as a clinical test. The analysis technology has been remarkably advanced in recent years, and the development of various automatic analyzers has made it possible to analyze a large number of samples quickly and accurately. However, in many fields of biochemical tests, the presence of blood cells such as red blood cells interferes with the test, so that serum or plasma is separated from blood in advance and used. Therefore, prior to the test, it is necessary to undergo a process of once coagulating blood collected from a patient or a subject and then centrifuging to obtain serum. Coagulation and centrifugation are time-consuming, hindering the shortening of clinical tests, and require large centrifuges. And it takes several days to get the test results. In addition, since the operation of separating serum or plasma from blood still relies almost entirely on humans, workers are at risk of infection and the like by touching blood.
【０００３】上記の問題を解決する手段として、一般に
ドライケミストリーと呼ばれる技術が知られている。こ
れは、ガラス繊維などの極細繊維フィルターからなる血
清分離層と、その下層に位置する反応層とから成り立つ
小型プレートに、微量の血液を滴下すると血清分離層に
て血清が分離され、その下層の反応層にて反応、発色
し、これを分光光度計にて測定する。このドライケミス
トリーは、液状の発色試薬を使わず、遠心分離による面
倒な血清採取も必要としない簡便な方法であるが、測定
できる項目が試薬を用いる一般の生化学分析や免疫分析
に比べ数が限られていること、一つのプレートに一つの
検査項目を用いるため、複数の項目を検査するために多
数のプレートを用いなければならず、簡便である割には
時間的メリットが少ないこと、高価であることなどから
広く普及するには至っていない。As a means for solving the above problem, a technique generally called dry chemistry is known. This is because, when a small amount of blood is dropped on a small plate composed of a serum separation layer consisting of an ultrafine fiber filter such as glass fiber and a reaction layer located below, a serum is separated by the serum separation layer, and the lower layer Reaction and color development occur in the reaction layer, which is measured with a spectrophotometer. This dry chemistry is a simple method that does not use a liquid coloring reagent and does not require cumbersome serum collection by centrifugation.However, the number of measurable items is smaller than that of general biochemical analysis or immunoassay using reagents. Limited, because one inspection item is used for one plate, a large number of plates must be used to inspect multiple items. Therefore, it has not been widely used.
【０００４】血清または血漿を遠心分離を使わずに得る
方法としては、特開昭５３−７２６９１号に一端が閉塞
された細かいチューブ状フィルター素子を濾材として、
血液から血漿を分離する方法や、特開昭６０−１１１６
６号に中空繊維束を用いた濾過カートリッジを使用し、
血液から血漿を分離する方法が提案されている。しかし
ながら、前者の方法ではタンパク質の透過率が悪い上
に、血球がフィルター表面に付着するため、血漿の濾過
に極めて長時間を要し、また、逆に濾過速度を速くする
ために濾過圧を高くすると、赤血球の溶血を生じる等の
問題がある。また、後者の中空繊維束を用いた濾過カー
トリッジを使用した方法では、血漿分離作業の準備とし
てプライミングによる前処理、つまり生理食塩水等で中
空糸膜を濡らす等の作業を行うことが必要で、得られる
血漿が希釈されてしまったり、血漿分離の作業そのもの
より準備の作業に手間がかかるという問題点を有する。
また、これらの膜分離による方法は、血球と血漿・血清
の分子サイズの違いによる分離法であるために、血液中
の蛋白質など比較的分子量の大きな物質は膜を十分に通
過できず、得られた血漿中の各蛋白の組成は、正確に元
の血液中の蛋白質の組成を反映しない問題がある。さら
に、膜の孔径を大きくし過ぎると赤血球が目詰まりを起
こし、溶血する問題があり実用化には至っていない。[0004] As a method for obtaining serum or plasma without using centrifugation, Japanese Patent Application Laid-Open No. 53-72691 discloses a method in which a fine tubular filter element having one end closed is used as a filter material.
A method for separating plasma from blood,
No. 6 using a filtration cartridge using a hollow fiber bundle,
Methods for separating plasma from blood have been proposed. However, in the former method, in addition to poor protein permeability, blood cells adhere to the filter surface, so that it takes an extremely long time to filter the plasma, and conversely, the filtration pressure is increased to increase the filtration speed. Then, there is a problem that hemolysis of red blood cells occurs. Further, in the latter method using a filtration cartridge using a hollow fiber bundle, it is necessary to perform pretreatment by priming as preparation for plasma separation work, that is, work such as wetting the hollow fiber membrane with physiological saline or the like, There is a problem that the obtained plasma is diluted, and preparation work is more troublesome than plasma separation work itself.
In addition, since these membrane separation methods are based on the difference in molecular size between blood cells and plasma / serum, substances of relatively high molecular weight, such as proteins in blood, cannot be sufficiently passed through the membrane, and are obtained. There is a problem that the composition of each protein in the plasma does not accurately reflect the composition of the protein in the original blood. Further, if the pore size of the membrane is too large, erythrocytes are clogged, causing a problem of hemolysis, which has not been put to practical use.
【０００５】上記とは別に繊維状フィルターを用い、臨
床検査用血清または血漿分離技術が種々提案されてい
る。特開昭６１−３８６０８には、体積濾過効果を用い
た繊維質からなる固液分離器具が開示されている。特開
平４−２０８８５６には、ポリアクリルエステル誘導体
とポリエチレングリコールを含有するガラス繊維と、レ
クチン含浸層からなる血清または血漿成分の分離回収方
法が開示されている。また、特開平５−１９６６２０に
は、特開平４−２０８８５６で示された分離フィルター
を用いた血清・血漿分離器具が開示されている。これら
の方法および器具は、遠心分離を用いずに臨床検査用の
血清または血漿を採取できるものの、得られる血清・血
漿の量が１００μｌ前後と少ない。採取できる血漿また
は血清の量を多くするためには、フィルターの容量を大
きくし、使用する血液を多くするする必要が有り、実用
にはいたっていない。[0005] Apart from the above, various techniques for separating serum or plasma for clinical tests using a fibrous filter have been proposed. Japanese Patent Application Laid-Open No. 61-38608 discloses a solid-liquid separation device made of fibrous material using a volume filtration effect. Japanese Patent Application Laid-Open No. 4-208856 discloses a method for separating and recovering serum or plasma components comprising a glass fiber containing a polyacrylester derivative and polyethylene glycol, and a lectin-impregnated layer. Further, Japanese Patent Application Laid-Open No. 5-196620 discloses a serum / plasma separating device using a separation filter disclosed in Japanese Patent Application Laid-Open No. 4-208856. Although these methods and instruments can collect serum or plasma for clinical tests without using centrifugation, the amount of serum and plasma obtained is as small as about 100 μl. In order to increase the amount of plasma or serum that can be collected, it is necessary to increase the capacity of the filter and increase the amount of blood used, which is not practical.
【０００６】また、特開平９−１４３０８１にはメルト
ブロー法で得られたポリエステル製極細繊維を用いた血
漿・血清分離フィルターが開示されている。このフィル
ターは、繊維間隙を示す平均動水半径と、血液流路径
（Ｌ）と血液流路長（Ｄ）の比（Ｌ／Ｄ）、さらに繊維
径、充填率を最適化することにより、得られる血漿・血
清量が数百μＬで、分離に必要な時間も１分以内で短い
ことと、フィルター素材と血液成分の相互作用が少なく
得られた血漿・血清中の濃度が分離前の血液と変わらな
いといった特徴を有する。また、特願平８−３４８７４
６には３次元多孔質体を用いた、血漿・血清分離フィル
ターが開示されている。このフィルターは、特開平９−
１４３０８１のポリエステル製極細繊維の代わりに、３
次元多孔質体を用いることで、フィルターの組立性を改
善している。しかしながら、凝固遠心分離を組み合わせ
た方法は血液５ｍＬから最大２ｍＬ程度の血清が得られ
るのに対し、これらの技術は、５〜１０ｍＬの血液から
得られる血清は最大１ｍＬ前後と少なく、被験者のダメ
ージを小さくする観点から、より効率的に採取できる方
法が望まれている。[0006] Japanese Patent Application Laid-Open No. 9-143081 discloses a plasma / serum separation filter using polyester ultrafine fibers obtained by a melt blow method. This filter is obtained by optimizing the average hydraulic radius indicating the fiber gap, the ratio (L / D) of the blood flow path diameter (L) and the blood flow path length (D), and further optimizing the fiber diameter and the filling rate. The amount of plasma and serum obtained is several hundred μL, the time required for separation is less than 1 minute, and the interaction between the filter material and blood components is small. It has the feature of not changing. Also, Japanese Patent Application No. 8-34874
No. 6 discloses a plasma / serum separation filter using a three-dimensional porous body. This filter is disclosed in
Instead of 143081 polyester microfiber, 3
By using a three-dimensional porous body, filter assemblability is improved. However, while the method combining coagulation and centrifugation can obtain a maximum of about 2 mL of serum from 5 mL of blood, these techniques can reduce the amount of serum obtained from 5 to 10 mL of blood to about 1 mL, which is less than 1 mL. From the viewpoint of reducing the size, there is a demand for a method capable of more efficiently collecting.
【０００７】[0007]
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、血液
中と同一の成分組成を有する血漿・血清成分を、血液中
の血球を損傷することなく、簡便・迅速・安全かつ効率
的に血液から分離するための方法を提供することにあ
る。ここで、分離素子とは、容器内に充填し、血液分離
を行う材料を指し、容器内に分離素子を組み込んだ組立
体をフィルターと定義する。本発明者らは鋭意検討を加
えた結果、血液を分離素子へ供給後、流体を用いて血液
を押し出すことにより、飛躍的に分離効率が向上するこ
とを見出し上記目的を達成した。以下に本発明を詳細に
説明する。SUMMARY OF THE INVENTION It is an object of the present invention to provide a simple, rapid, safe and efficient method for converting plasma / serum components having the same composition as those in blood without damaging blood cells in the blood. To provide a method for separation from Here, the separation element refers to a material that is filled in a container and performs blood separation, and an assembly in which the separation element is incorporated in the container is defined as a filter. As a result of extensive studies, the present inventors have found that by supplying blood to the separation element and then using the fluid to extrude the blood, the separation efficiency is dramatically improved, thereby achieving the above object. Hereinafter, the present invention will be described in detail.
【０００８】[0008]
【課題を解決するための手段】すなわち、本発明は下記
の（１）乃至（４）の血漿または血清の分離方法を提供
するものである。 （１）入口と出口を有する容器に分離素子を装着し、出
入口間に圧力差を与え、血液を該分離素子内で移動さ
せ、血漿または血清と血球の該分離素子中の移動速度差
を利用して、血漿または血清を分離採取する血漿または
血清の分離方法において、血液を該分離素子に供給した
後、流体で血液を押しだすことを特徴とする血漿または
血清の分離方法。 （２）流体が、赤血球を溶血させないことを特徴とする
上記（１）記載の血漿または血清の分離方法。 （３）流体の浸透圧が赤血球を溶血させない範囲にある
ことを特徴とする上記（１）または（２）記載の血漿ま
たは血清の分離方法。 （４）分離素子に供給する血液量が、分離素子中の空隙
体積の２０％以上１５０％以下である上記（１）乃至
（３）のいずれかに記載の血漿または血清の分離方法。That is, the present invention provides the following (1) to (4) methods for separating plasma or serum. (1) A separation element is mounted on a container having an inlet and an outlet, a pressure difference is applied between the inlet and the outlet, blood is moved in the separation element, and a difference in the moving speed of plasma or serum and blood cells in the separation element is used. A plasma or serum separation method for separating and collecting plasma or serum, wherein the blood is supplied to the separation element, and then the blood is pushed out with a fluid. (2) The method for separating plasma or serum according to the above (1), wherein the fluid does not lyse red blood cells. (3) The method for separating plasma or serum according to (1) or (2), wherein the osmotic pressure of the fluid is in a range that does not cause hemolysis of red blood cells. (4) The method for separating plasma or serum according to any one of the above (1) to (3), wherein the amount of blood supplied to the separation element is 20% to 150% of the void volume in the separation element.
【０００９】[0009]
【発明実施の形態】本発明による、血漿または血清採取
の原理は特開昭６１−３８６０８、特開平４−２０８８
５６、特開平９−１４３０８１や特願平８−３４８７４
６に既に開示されているとおりである。すなわち、血液
の出入口を有する容器内の分離素子に血液を供給し、出
入口間に圧力差を生じさせることにより該血液を該分離
素子内を移動させ、血漿または血清と血球との移動速度
の差を利用して、血漿または血清を分離採取することが
できる。本発明者らは、この技術についてさらに深く検
討を行った。すなわち、分離素子に供給された血液は、
分離素子内で血漿または血清の液性成分と血球成分の移
動速度差により分離が行われる。しかしながら、分離、
採取される血漿または血清は、多くても分離素子空隙体
積の半分程度であり、遅れて分離素子に供給された血液
は、単に前に供給された血液を押し出す媒体としての役
目をはたしているに過ぎない。そこで、分離、採取に寄
与する血液を分離素子に供給後、別の流体で分離素子内
部の血液を押し出すことにより、血漿または血清を分離
採取するために要する血液量を大幅に下げることが出来
ることを見出し本発明に至った。DESCRIPTION OF THE PREFERRED EMBODIMENTS The principle of plasma or serum collection according to the present invention is described in JP-A-61-38608 and JP-A-4-2088.
56, Japanese Patent Application Laid-Open No. 9-143081, and Japanese Patent Application No. 8-34874.
6 has already been disclosed. That is, blood is supplied to a separation element in a container having a blood inlet / outlet, and the blood is moved in the separation element by generating a pressure difference between the inlet / outlet, and the difference in the moving speed between blood plasma or serum and blood cells. Can be used to separate and collect plasma or serum. The present inventors have further studied this technique in more detail. That is, the blood supplied to the separation element
Separation is performed in the separation element by the difference in the moving speed of the liquid component of blood plasma or serum and the blood cell component. However, separation,
The collected plasma or serum is at most about half of the separation element void volume, and the blood supplied to the separation element with a delay serves merely as a medium for pushing out the previously supplied blood. Absent. Therefore, after supplying blood that contributes to separation and collection to the separation element, the amount of blood required to separate and collect plasma or serum can be significantly reduced by pushing out the blood inside the separation element with another fluid. And led to the present invention.
【００１０】本発明において、血液を押し出すために用
いる流体は、気体または液体を用いる事ができるが、流
体と血液が接触した際に、血液を溶血させないことが望
ましい。血液が溶血すると、得られた血漿または血清の
臨床検査値が本来の値から外れてしまったり、溶血の発
生とともに血液が凝固し、分離素子が目詰まりを起こし
やすくなり、最悪の場合血漿または血清を得られない事
が有り好ましくない。In the present invention, the fluid used to push out the blood may be a gas or a liquid, but it is desirable that the blood does not lyse when the fluid comes into contact with the blood. When blood is hemolyzed, the clinical test value of the obtained plasma or serum deviates from the original value, or blood coagulates with the occurrence of hemolysis, the separation element is easily clogged, and in the worst case plasma or serum It is not preferable because it cannot be obtained.
【００１１】本発明において、流体に液体を用いる場合
は、該液体の浸透圧が血液を溶血させない範囲にあるこ
とが好ましい。血液の浸透圧は、血液の種類や動物差に
より異なるので、液体の浸透圧の範囲を限定する事はで
きないが、例えばヒト血液を分離する場合は生理食塩水
が挙げられる。また、本発明において、血液を押し出す
ために用いる液体は、血液と混合しにくいものを用いる
事が望ましく、例えば、ポリエチレングリコールやポリ
ビニルピロリドンを必要に応じ他の溶質（例えば無機塩
類など）と組み合わせ、濃度を調節し、血液の浸透圧に
合わせた液体は、粘度が高く血液と混じりにくく好まし
い。また、血液を溶血させたり、凝固させず、血液とほ
とんど混じり合わないヘキサンや流動パラフィン等も好
適に用いる事が出来る。In the present invention, when a liquid is used as the fluid, it is preferable that the osmotic pressure of the liquid is in a range that does not cause hemolysis of blood. Since the osmotic pressure of blood differs depending on the type of blood and animal differences, the range of osmotic pressure of liquid cannot be limited. For example, when human blood is separated, physiological saline is used. In the present invention, it is desirable to use a liquid that is difficult to mix with blood as a liquid used to extrude blood. For example, polyethylene glycol or polyvinylpyrrolidone is combined with other solutes (for example, inorganic salts and the like) as necessary, A liquid whose concentration is adjusted and adjusted to the osmotic pressure of blood is preferable because it has high viscosity and hardly mixes with blood. In addition, hexane or liquid paraffin, which does not cause hemolysis or coagulation of the blood and hardly mixes with the blood, can be suitably used.
【００１２】本発明において、分離素子に供給する血液
量は、分離素子空隙体積に対し、２０％以上１５０％以
下とすることが好ましく、より好ましくは３０％以上１
２０％以下であり、さらに好ましくは４０％以上１００
％以下である。分離素子に供給する血液量が、分離素子
空隙体積の２０％未満の場合は、得られる血漿または血
清中に押し出すために用いる流体が混合してしまうこと
があり、好ましくない。また、血液量が１５０％を超え
ると、血液が全て、分離素子内に送液された時点で、出
口から該血液体積の５０％の透過液が流出し、、血球の
流出がはじまってしまい、別の流体で血液を押し出す事
により、使用する血液量を少なくする効果が得られず好
ましくない。In the present invention, the amount of blood supplied to the separation element is preferably 20% or more and 150% or less, more preferably 30% or more and 1% or less, with respect to the separation element void volume.
20% or less, more preferably 40% to 100%
% Or less. If the amount of blood supplied to the separation element is less than 20% of the space volume of the separation element, the fluid used to extrude into the obtained plasma or serum may be undesirably mixed. Further, when the blood volume exceeds 150%, at the time when all the blood has been sent into the separation element, a permeate of 50% of the blood volume flows out from the outlet, and the outflow of blood cells starts, Extruding the blood with another fluid is not preferable because the effect of reducing the amount of blood used cannot be obtained.
【００１３】本発明のフィルターに装着される分離素子
の素材や形状は特開昭６１−３８６０８、特開平４−２
０８８５６、特開平９−１４３０８１や特願平８−３４
８７４６に開示されている既存技術をそのまま応用する
ことにより好適に達成できる。本発明において分離素子
形状は血液流路径（Ｄ）に対する血液流路長（Ｌ）の比
（Ｌ／Ｄ）が、０．１５から６とすることが好ましく、
より好ましくは０．２５から４であり、特に好ましくは
０．５〜２である。ここで、血液流路径（Ｄ）とは、分
離素子の血液入口部の面積の円相当直径をいう。血液流
路長とは、分離素子と血液とが接触するところから、血
液（血漿または血清）が、分離素子と離れるところまで
の長さをいう。血液流路の長さ方向で、血液流路径が異
なる場合でも、本発明においては、血液流路径（Ｄ）は
分離素子の入口部の面積の円相当直径と定義する。The material and shape of the separation element mounted on the filter of the present invention are described in JP-A-61-38608 and JP-A-4-2608.
08856, Japanese Patent Application Laid-Open No. 9-143081, and Japanese Patent Application No. 8-34.
It can be suitably achieved by applying the existing technology disclosed in 8746 as it is. In the present invention, the ratio (L / D) of the blood flow path length (L) to the blood flow path diameter (D) is preferably from 0.15 to 6 in the separation element shape,
It is more preferably from 0.25 to 4, and particularly preferably from 0.5 to 2. Here, the blood flow path diameter (D) refers to a circle-equivalent diameter of the area of the blood inlet portion of the separation element. The blood channel length refers to the length from the point where the separation element contacts the blood to the point where the blood (plasma or serum) separates from the separation element. Even in the case where the blood flow path diameter differs in the length direction of the blood flow path, in the present invention, the blood flow path diameter (D) is defined as a circle equivalent diameter of the area of the inlet of the separation element.
【００１４】Ｌ／Ｄが０．１５より小さい場合には、血
液流路長に対して流路径が大きいため、血液中の各成分
の移動速度の横方向にムラを生じるため、血球成分と血
漿または血清成分との分離が不十分となり好ましくな
い。Ｌ／Ｄが６より大きい場合には、分離効率は高まる
が、移動距離が長くなるために血液が流れる際の圧力損
失が高まり、赤血球の溶血を生じやすく、またフィルタ
ーの入口部分面積が小さいので、フィルターに供給され
た血液の内、分離された血漿または血清採取に寄与する
血液の比率が低下し、分離効率が低下してしまうので好
ましくない。なお、分離素子外表面は、厳密には小さな
凹凸を有するが、上記面積はこの凹凸を無視して、平面
として算出する。また、凹凸以外に、分離素子外表面加
工などにより形成された大きな凹凸を有する場合は、上
記面積は、凹凸部を平均化した平面として算出する。When L / D is smaller than 0.15, the flow path diameter is larger than the blood flow path length, so that the moving speed of each component in the blood becomes uneven in the horizontal direction. Alternatively, the separation from serum components is insufficient, which is not preferable. When L / D is greater than 6, the separation efficiency is increased, but the pressure loss at the time of blood flow is increased due to the longer moving distance, the erythrocytes are easily lysed, and the area at the inlet of the filter is small. In addition, the ratio of the blood that contributes to the collection of the separated plasma or serum in the blood supplied to the filter decreases, and the separation efficiency decreases, which is not preferable. The separation element outer surface has strictly small irregularities, but the area is calculated as a plane ignoring the irregularities. In addition, when there are large irregularities formed by processing the outer surface of the separation element in addition to the irregularities, the area is calculated as a plane in which the irregularities are averaged.
【００１５】本発明において、血液流路長は５ｍｍ以上
とすることが好ましい。血液流路長が５ｍｍ未満である
と血球と血漿または血清との間の移動距離に充分な差が
生じず、両者の分離が不十分になるので好ましくない。
血液流路長は長いほど、血球と血漿または血清との分離
効率は高くなるが、他方で圧力損失は大きくなる、また
は、必要な分離素子量や血液量が増加するという問題が
生じる。従って、必要とする血漿または血清量、用いる
血液量、フィルターの大きさの限界等により、血液流路
長は決定されるが、理論上の上限値は存在しない。より
好ましい血液流路長は１０〜５０ｍｍ程度である。In the present invention, the blood flow path length is preferably 5 mm or more. If the blood flow path length is less than 5 mm, there is no sufficient difference in the movement distance between the blood cells and the plasma or serum, and the separation between the two becomes insufficient.
The longer the blood channel length, the higher the separation efficiency between blood cells and plasma or serum, but on the other hand, there is a problem that the pressure loss increases or the required amount of separation elements or blood volume increases. Therefore, the blood flow path length is determined by the required amount of plasma or serum, the amount of blood used, the size of the filter, and the like, but there is no theoretical upper limit. A more preferred blood flow path length is about 10 to 50 mm.
【００１６】また、本発明の分離素子の形状および血液
の流動方向は、シリンダー状や直方体状で片方の端面か
ら、他の端面へ流動させたり、円錐状で底面から頂点へ
流動させたり、円盤状や扇形状で外周面から中心へ流動
させること等が挙げられる、特にこれに限定するもので
はないが、円盤状で外周部から中心へ移動させること
が、使用する血液量を少なくできかつ、組立も容易であ
り好ましい。The shape of the separation element and the direction of blood flow in the present invention may be cylindrical or rectangular parallelepiped, from one end face to the other end face, conical flow from the bottom face to the top, or a disk. Such as flowing from the outer peripheral surface to the center in a shape or fan shape, and the like, but is not particularly limited to this, moving from the outer peripheral portion to the center in a disk shape can reduce the amount of blood used, and Assembly is easy and preferable.
【００１７】また、本発明の分離素子として極細繊維や
多孔質体を用いることができる。本発明において、分離
素子に極細繊維を用いる場合、素材は特に限定されない
が、ガラス、セルロース、ポリエステルやポリプロピレ
ン、ポリアミド、またはポリエチレン等が挙げられる
が、血液と接触するときに、血漿または血清の成分を吸
着したり、逆に血漿または血清中に素材の一部が溶出す
ることがないポリエステルやポリプロピレン、ポリアミ
ド、またはポリエチレンが好ましい。極細繊維を得る方
法は特に限定するものでなく、任意の既知の方法が用い
られ得るが、例えばポリエステルやポリプロピレン、ポ
リアミド、ポリエチレンではメルトブロー法が挙げられ
る。Further, as the separation element of the present invention, an ultrafine fiber or a porous body can be used. In the present invention, when ultrafine fibers are used for the separation element, the material is not particularly limited, and examples thereof include glass, cellulose, polyester, polypropylene, polyamide, and polyethylene. Polyester, polypropylene, polyamide, or polyethylene, which does not adsorb DNA or conversely elute a part of the material into plasma or serum, is preferable. The method for obtaining the ultrafine fibers is not particularly limited, and any known method can be used. For example, for polyester, polypropylene, polyamide, and polyethylene, a melt blow method is used.
【００１８】極細繊維の平均繊維直径は、０．５〜３．
５μｍが好ましく、０．５から２．５μｍであればより
好ましく、０．５〜２．０μｍであれば特に好ましい。
上記において、極細繊維の平均繊維直径とは、極細繊維
集合体を２０００倍の電子顕微鏡で撮影した写真中より
ランダムに選択した５０本の極細繊維の径をノギスまた
はスケールルーペで計測して求めた値の平均値である。
平均繊維直径が３．５μｍを超える場合には、極細繊維
集合体の単位体積当たりの繊維長が短くなるため、単位
体積当たりの繊維間の交絡箇所が少なくなり、繊維間隔
も大きくなる。その結果、赤血球が繊維に接触した際の
変形の度合いが小さくなり、また、繊維間隔の通過抵抗
が小さくなるので、血漿または血清と血球との分離効率
が低下する。平均繊維直径が０．５μｍ以下の極細繊維
は入手することが困難であり、さらに極細繊維集合体の
繊維間隔が小さくなりすぎて、血球が目詰まりを起こし
やすくなり、また極細繊維集合体の圧力損失が大きくな
るため赤血球の溶血が起こりやすくなる。なお、この範
囲においては、繊維径が小さいほど繊維集合体の単位体
積当たりの繊維の本数が多くなり、繊維間隔が狭くな
り、繊維表面積が大きくなるので、血球の透過抵抗が大
きくなり、血球と血漿または血清との分離効率が向上す
るので、極細繊維の平均繊維直径は０．５〜２．５μｍ
であればより好ましく、０．５〜２．０μｍであれば特
に好ましい。The average fiber diameter of the ultrafine fibers is 0.5-3.
It is preferably 5 μm, more preferably 0.5 to 2.5 μm, and particularly preferably 0.5 to 2.0 μm.
In the above, the average fiber diameter of the microfibers was determined by measuring the diameter of 50 microfibers randomly selected from a photograph of the microfiber assembly taken with a 2000 × electron microscope using a caliper or a scale loupe. This is the average of the values.
When the average fiber diameter exceeds 3.5 μm, the fiber length per unit volume of the ultrafine fiber aggregate becomes short, so that the number of entangled portions between fibers per unit volume decreases and the fiber interval also increases. As a result, the degree of deformation when the red blood cells come into contact with the fibers is reduced, and the passage resistance between the fibers is reduced, so that the efficiency of separating blood cells from plasma or serum is reduced. It is difficult to obtain ultrafine fibers having an average fiber diameter of 0.5 μm or less, and the fiber interval of the ultrafine fiber aggregate is too small, blood cells are easily clogged, and the pressure of the ultrafine fiber aggregate is increased. Red blood cells are more likely to lyse due to increased loss. In this range, the smaller the fiber diameter, the larger the number of fibers per unit volume of the fiber assembly, the smaller the fiber spacing, the larger the fiber surface area, so the permeation resistance of blood cells increases, Since the efficiency of separation from plasma or serum is improved, the average fiber diameter of the ultrafine fibers is 0.5 to 2.5 μm.
Is more preferable, and 0.5 to 2.0 μm is particularly preferable.
【００１９】本発明に用いられる極細繊維集合体の平均
動水半径は、０．５〜３．０μｍであることが好まし
く、より好ましくは０．５〜２．５μｍ、さらに好まし
くは０．５〜２．０μｍである。ここで、平均動水半径
とは、極細繊維の集合体の間隙が非円形の場合、直径に
代わる概念として表され、以下のように定義される。 平均動水半径＝管路の断面積／管の周の長さ ＝管中の流体の容積／液体に接する管の内表面積 ＝極細繊維集合体の間隙体積／極細繊維の表面積 本発明において、動水半径は式(1) により求めることが
できる。 ＤＨ＝Ｒ×（ρ−ｒｍ）／４ｒｍ (1) ＤＨ：装着された極細繊維集合体の平均動水半径 Ｒ：極細繊維の平均繊維直径（μｍ） ρ：極細繊維の密度（ｇ／ｃｍ3 ） ｒｍ：装着された極細繊維の集合体の平均嵩密度（ｇ／
ｃｍ3 ） 式(1) に示されるように装着された極細繊維の集合体の
動水半径ＤＨは、同じ素材の極細繊維を用いた場合（つ
まり、ρが一定の場合）、Ｒおよびｒｍにより決定され
る。The average hydrodynamic radius of the ultrafine fiber aggregate used in the present invention is preferably 0.5 to 3.0 μm, more preferably 0.5 to 2.5 μm, and still more preferably 0.5 to 2.5 μm. 2.0 μm. Here, the average hydraulic radius is expressed as a concept instead of the diameter when the gap of the aggregate of the ultrafine fibers is non-circular, and is defined as follows. Average hydraulic radius = Cross-sectional area of pipe line / Length of pipe circumference = Volume of fluid in pipe / Internal surface area of pipe in contact with liquid = Pore volume of microfiber aggregate / Surface area of microfiber The water radius can be obtained by equation (1). DH = R × (ρ−rm) / 4rm (1) DH: Average hydraulic radius of the attached microfiber assembly R: Average fiber diameter of microfiber (μm) ρ: Density of microfiber (g / cm 3) ) Rm: average bulk density (g / g) of the aggregate of the attached ultrafine fibers
cm 3 ) The hydrodynamic radius DH of the aggregate of microfibers mounted as shown in equation (1) is determined by R and rm when microfibers of the same material are used (that is, when ρ is constant). It is determined.
【００２０】上記平均動水半径が３．０μｍを超える場
合には、血球が繊維間隙を通過し易くなり、その結果血
球と血漿または血清との移動速度差が小さくなり、血漿
または血清が分離できなかったり、分離採取量が少なく
なるので好ましくない。平均動水半径が０．５μｍ未満
の場合、フィルター内の繊維間隙が狭くなりすぎて血球
成分が目詰まりを起こしやすく、さらに目詰まりを起こ
すと赤血球膜が破れ溶血を起こすことがあり好ましくな
い。なお、平均動水半径０．５〜３．０μｍの範囲にお
いては、平均動水半径が小さいほど血漿または血清の透
過性に影響を与えることが無く、血球成分の通過抵抗が
大きくなり分離効率が高くなる。従って、０．５〜２．
８μｍが好ましく、特に好ましくは０．５〜２．０μｍ
である。When the average hydraulic radius exceeds 3.0 μm, the blood cells easily pass through the fiber gap, and as a result, the difference in the moving speed between the blood cells and the plasma or serum becomes small, and the plasma or serum cannot be separated. It is not preferable because it does not exist or the amount of separated and collected sample is reduced. If the average hydraulic radius is less than 0.5 μm, the fiber gap in the filter becomes too narrow and blood cell components are likely to be clogged. If clogging occurs, the erythrocyte membrane may be broken and hemolysis may occur, which is not preferable. In the range of the average hydraulic radius of 0.5 to 3.0 μm, the smaller the average hydraulic radius is, the smaller the average hydraulic radius does not affect the permeability of plasma or serum, the larger the resistance to passage of blood cell components, and the higher the separation efficiency. Get higher. Therefore, 0.5-2.
8 μm is preferred, particularly preferably 0.5 to 2.0 μm
It is.
【００２１】なお、極細繊維の形態としては、例えば、
綿状、不織布上、編布、織布等が挙げられるが、これら
を適宜、分離素子の形状に成形加工することにより用い
ることが可能であるが、不織布を単独または複数枚積層
して用いることが、取扱性の面から好ましい。As the form of the ultrafine fiber, for example,
Cotton-like, non-woven fabric, knitted fabric, woven fabric and the like can be mentioned, and these can be used by appropriately forming and processing into the shape of a separation element. However, it is preferable from the viewpoint of handleability.
【００２２】本発明の分離素子として多孔質体を用いる
場合の素材は特に限定されるものではないが、その材料
としては、例えばセルロース、セルロースアセテート、
ポリウレタン、ポリアクリロニトリル、ポリビニルアセ
タール、ポリビニルホルマール、ポリエステル、ポリア
ミド、ポリスチレン、ポリスルホン、ポリフッ化ビニ
ル、ポリフッ化ビニリデン、ポリトリフルオロクロロビ
ニル、フッ化ビニリデン−テトラフルオロエチレン共重
合体、フッ化ビニリデン−ヘキサフルオロプロピレン共
重合体、テトラフルオロエチレン−プロピレン共重合
体、テトラフルオロエチレンーエチレン共重合体等が挙
げられ、好ましくはセルロース、ポリビニルホルマール
である。これらは、１種でも２種以上でも用いることが
できる。The material used when the porous element is used as the separation element of the present invention is not particularly limited. Examples of the material include cellulose, cellulose acetate, and the like.
Polyurethane, polyacrylonitrile, polyvinyl acetal, polyvinyl formal, polyester, polyamide, polystyrene, polysulfone, polyvinyl fluoride, polyvinylidene fluoride, polytrifluorochlorovinyl, vinylidene fluoride-tetrafluoroethylene copolymer, vinylidene fluoride-hexafluoro Examples thereof include a propylene copolymer, a tetrafluoroethylene-propylene copolymer, and a tetrafluoroethylene-ethylene copolymer, and preferred are cellulose and polyvinyl formal. These can be used alone or in combination of two or more.
【００２３】本発明に用いられる多孔質体の平均孔径
は、５〜５０μｍであること必要であり、好ましくは８
〜３０μｍ、より好ましくは１０〜２０μｍである。分
離素子の上層、下層で平均孔径が異なっても、範囲は５
〜５０μｍが必要であり、８〜３０μｍが好ましく、１
０〜２０μｍがさらに好ましい。平均孔径が５０μｍを
超える場合には、赤血球の細孔内の通過抵抗（即ち変形
と細孔壁との摩擦）が減少し、赤血球と血漿・血清成分
との移動速度差が充分生じず、分離が不十分となるので
好ましくない。平均孔径が５μｍ未満の場合には、血液
の流路が狭くなりすぎて、血球成分が目詰まりを生じ易
く、またフィルターの圧力損失が大きくなり、溶血が生
じることがあるので好ましくない。The average pore size of the porous material used in the present invention needs to be 5 to 50 μm, preferably 8 to 50 μm.
It is preferably from 30 to 30 µm, more preferably from 10 to 20 µm. Even if the average pore size differs between the upper and lower layers of the separation element, the range is 5
５０50 μm is required, preferably 8-30 μm,
0-20 μm is more preferred. If the average pore size exceeds 50 μm, the resistance of red blood cells to pass through the pores (that is, the friction between the deformation and the pore wall) decreases, and there is not a sufficient difference in the moving speed between the red blood cells and the plasma / serum components. Is not preferable because of insufficient. If the average pore size is less than 5 μm, the blood flow path becomes too narrow, and blood cell components are likely to be clogged, and the pressure loss of the filter is increased, which is not preferable.
【００２４】本発明でいう平均孔径とは、多孔質体の表
面または、任意の断面の細孔径の平均である。平均孔径
は、多孔質体を血液の流れ方向に対して垂直方向に切断
し、断面を電子顕微鏡により撮影し、断面状に分布して
いる細孔の直径をランダムにそれぞれ１００個以上測定
したときの、相加平均により求める。細孔断面の形が円
形でない場合は、画像処理等により細孔断面積を求め、
それに相当する円の相当径とする。この場合径とは全て
直径を意味する。The average pore diameter in the present invention is the average of the pore diameters on the surface of a porous body or an arbitrary cross section. The average pore diameter is obtained by cutting the porous body in a direction perpendicular to the blood flow direction, photographing the cross section with an electron microscope, and randomly measuring 100 or more diameters of the pores distributed in the cross section. Is calculated by arithmetic mean. If the shape of the pore cross section is not circular, determine the pore cross section by image processing, etc.
The equivalent diameter of the circle corresponding to it is used. In this case, the diameter means all the diameter.
【００２５】本発明のフィルターに用いる多孔質体の空
孔率は２０％〜９５％であることが好ましく、より好ま
しくは３０％〜９０％である。空孔率が２０％を未満で
あると、フィルター自体の嵩が大きくなり、また血液の
通過抵抗が大きくなり易い傾向がある。空孔率が９５％
より大きい場合は、フィルターの強度が低下して、組立
性が低下し易い傾向がある。空孔率とは、多孔質体体積
に占める多孔質体内空孔体積の比率（％）を意味する。 空孔率は、（１−ｒm／ρ）×１００ （％）、 ｒm：多孔質体嵩密度、 ρ：多孔質体材料の密度 として計算する。The porosity of the porous material used in the filter of the present invention is preferably from 20% to 95%, more preferably from 30% to 90%. If the porosity is less than 20%, the bulk of the filter itself tends to be large, and the blood passage resistance tends to be large. 95% porosity
If it is larger, the strength of the filter is reduced, and the assemblability tends to be reduced. The porosity means the ratio (%) of the volume of pores in the porous body to the volume of the porous body. The porosity is calculated as (1-rm / ρ) × 100 (%), rm: bulk density of the porous material, and ρ: density of the porous material.
【００２６】本発明に適用される血液は、特に限定され
るものではなく、血液成分を含むものは全て本発明に用
いることができる。すなわち、血液の由来は、ヒト、
牛、ヤギ、イヌ、ウサギ等、何でもよく、血液をそのま
ま用いても、抗凝固剤や赤血球凝集剤等の添加剤を加え
て用いても良い。また通常、血液に添加剤を加えずに放
置したり、凝固剤を添加した場合には、血液中のフィブ
リノーゲンがフィブリンに変化し、血液の凝固が進行す
るが、これらの凝固性血液をそのまま用いても、遠心分
離等の処理を行った後に用いても、化学的な処理を加え
て用いても良い。The blood applied to the present invention is not particularly limited, and any blood containing blood components can be used in the present invention. That is, the origin of blood is human,
Cows, goats, dogs, rabbits, etc. may be used, and blood may be used as it is, or an additive such as an anticoagulant or a hemagglutinating agent may be used. Usually, when blood is left without adding additives or when a coagulant is added, fibrinogen in blood changes to fibrin and blood coagulation proceeds, but these coagulable blood is used as it is. Alternatively, it may be used after performing a process such as centrifugation, or may be used after adding a chemical process.
【００２７】分離素子の表面に親水化剤を固定すること
も、本発明に好適に用いられる。親水化剤の固定は、物
理的または化学的に行われ得る。親水化剤を分離素子に
固定化することにより、分離素子と血液との親和性が高
まる。従って、血液を血球と血漿または血清とに分離す
る際、圧力損失が低下し、分離速度が早められ得る。親
水化剤の種類は、特に限定されない。Fixing a hydrophilizing agent on the surface of the separation element is also suitably used in the present invention. Immobilization of the hydrophilizing agent can be performed physically or chemically. By fixing the hydrophilizing agent to the separation element, the affinity between the separation element and blood is increased. Therefore, when separating blood into blood cells and plasma or serum, the pressure loss can be reduced and the separation speed can be increased. The type of the hydrophilizing agent is not particularly limited.
【００２８】[0028]
【発明の効果】本発明における血球成分と血漿・血清成
分の分離機構は、両成分の分離素子中の移動速度差を利
用しており、従来の比重差を利用した遠心分離や、サイ
ズの差を利用した膜分離や吸着現象とは根本的に異な
る。分離素子中の移動速度は、血漿・血清成分の方が血
球成分より速いため、分離素子に血液を供給し、圧力差
を生じさせると、透過液側に、最初に血漿・血清成分が
到達しその後血球成分が到達するので、この差を利用す
ることにより血液から血漿・血清を得ることができる。
ここで分離、採取される血漿または血清は、多くても分
離素子空隙体積の半分程度であり、遅れて分離素子に供
給された血液は、単に前に供給した血液を押し出す媒体
としての役目をはたしているに過ぎない。そこで、分
離、採取に寄与する血液を分離素子に供給後、別の流体
で分離素子内部の血液を押し出すことにより、血漿また
は血清を分離採取するために要する血液量を大幅に下げ
ることが出来る。According to the present invention, the separation mechanism of the blood cell component and the plasma / serum component in the present invention utilizes the difference in moving speed of the two components in the separation element. It is fundamentally different from membrane separation and adsorption phenomenon utilizing Since the plasma and serum components move faster in the separation element than the blood cell components, when blood is supplied to the separation element and a pressure difference is created, the plasma and serum components first reach the permeate side. Since the blood cell component subsequently arrives, plasma / serum can be obtained from the blood by utilizing this difference.
Here, the plasma or serum to be separated and collected is at most about half the void volume of the separation element, and the blood supplied to the separation element with a delay serves only as a medium for pushing out the previously supplied blood. It's just that. Thus, after supplying blood that contributes to separation and collection to the separation element, the blood inside the separation element is pushed out with another fluid, so that the amount of blood required to separate and collect plasma or serum can be significantly reduced.
【００２９】[0029]
【実施例】以下、実施例・比較例を挙げて本発明を具体
的に説明するが、本発明はこれらに何等限定されるもの
ではない。 〔実施例１〕図１に示すような血漿・血清分離フィルタ
ーを作製した。すなわち、入口として容器の上面端部に
直径２．０ｍｍの孔、出口として底面中央部に直径２．
０ｍｍの孔を有し、容器内部の直径３０．０ｍｍ、内部
の高さ７．０ｍｍの、ポリカーボネート製の円盤状容器
に、分離素子としてメルトブロー法により得られた平均
繊維直径 １．８μｍのポリエチレンテレフタレート極
細繊維不織布（目付４３．９ｇ／ｍ2 ）を直径２９．５
ｍｍの円形に切断したものを４８枚積層し（１．４４
ｇ）、容器の内周部表面との間に、０．２５ｍｍの隙間
を設けて充填した。ポリエチレンテレフタレートの密度
は１．３８ｇ／ｃｍ3 であり、充填率は０．３０ｇ／ｃ
ｍ3 、平均動水半径は１．６２μｍ、容器の血液入口部
断面積は７ｍｍ×２９．５ｍｍ×π＝６４８．４ｍｍ2
であり、円相当直径は２８．７４ｍｍ、血液流路長さは
１４．７５ｍｍであるのでＬ／Ｄは０．５１である。極
細繊維分離素子の空隙体積は３．７４ｍｌである。血漿
・血清分離フィルターをペリスターポンプに接続し、抗
凝固剤としてＡＣＤ液を加え、ヘマトクリット４１％に
調節した牛血液を、１０ｍｌ／ｍｉｎの流量で送液し
た。血液を２ｍｌ流した後、回路を切り替え、生理食塩
水を同一の流量で送液した。フィルター容器中心部に設
けられた透過液出口よりまずフィルター外へ分離された
血清の流出が始まり、０．５０ｍＬの血清を採取した段
階で、遅れて浸透してきた血球の流出が始まった。得ら
れた血清の総タンパク質濃度は6.5g/dl であり、同じウ
シ血液を凝固後遠心分離した血清の総タンパク質濃度6.
5g/dl と同一であった。 〔比較例１〕実施例１と同じ血漿・血清分離フィルター
を用いた。実施例１と同様に牛血液をフィルターに供給
した。ここでは、血清の回収が終るまで（血球の流出が
始まるまで）血液を送液した。その結果、０．５０ｍｌ
の血清を採取するまでに送液した血液量は６．０ｍｌで
あった。これは分離素子の空隙体積に、フィルターの空
間体積および、フィルターとポンプをつなぐラインおよ
び流出した血清の体積を加算したものである。すなわ
ち、実施例１に比べ、血清０．５ｍｌを採取するために
必要な血液量は倍となった。臨床検査においては、使用
する採血する血液量は出来るだけ少ないことが好まし
く、その点では比較例１は実施例１と比べて劣ってい
た。 〔比較例２〕実施例１と同じ血漿・血清分離フィルター
を用いた。実施例１と同様に牛血液をフィルターに供給
した。ここでは、血液を０．５ｍｌ（分離素子空隙体積
の１３．３％）供給した後、血清の回収が終るまで（血
球の流出が始まるまで）生理食塩水を送液した。その結
果、０．３３ｍｌの血清を採取し、血球の流出が始まっ
た。得られた血清の総タンパク質濃度は4.8g/dl であ
り、同じウシ血液を凝固後遠心分離して得られた血清に
比べ濃度が低下していた。これは、始めに供給した血液
量が少なく、分離素子内で始めに供給した血液と後から
供給した生理食塩水が混合し、得られた血清が生理食塩
水で希釈されたためと考えられた。EXAMPLES Hereinafter, the present invention will be described specifically with reference to Examples and Comparative Examples, but the present invention is not limited thereto. Example 1 A plasma / serum separation filter as shown in FIG. 1 was prepared. That is, a hole having a diameter of 2.0 mm is formed at the upper end of the container as an inlet, and a hole having a diameter of 2. mm is formed at the center of the bottom as an outlet.
Polyethylene terephthalate having an average fiber diameter of 1.8 μm and having a mean fiber diameter of 1.8 μm obtained as a separation element by a melt-blowing method in a polycarbonate disc-shaped container having a hole of 0 mm, an inner diameter of 30.0 mm, and an inner height of 7.0 mm. Extra-fine fiber non-woven fabric (having a basis weight of 43.9 g / m 2 ) has a diameter of 29.5
Forty-eight mm-cut circular pieces are laminated (1.44).
g), the space was filled with a gap of 0.25 mm between the inner peripheral surface of the container and the inner peripheral surface. The density of polyethylene terephthalate is 1.38 g / cm 3 and the filling rate is 0.30 g / c.
m 3 , the average hydraulic radius is 1.62 μm, and the blood inlet cross-sectional area of the container is 7 mm × 29.5 mm × π = 648.4 mm 2
And the circle equivalent diameter is 28.74 mm and the blood flow path length is 14.75 mm, so the L / D is 0.51. The void volume of the microfiber separation element is 3.74 ml. The plasma / serum separation filter was connected to a peristaltic pump, an ACD solution was added as an anticoagulant, and bovine blood adjusted to a hematocrit of 41% was sent at a flow rate of 10 ml / min. After flowing 2 ml of blood, the circuit was switched and physiological saline was sent at the same flow rate. From the permeate outlet provided at the center of the filter container, the separated serum began to flow out of the filter, and at the stage when 0.50 mL of serum was collected, the blood cells that had permeated late started to flow out. The total serum protein concentration of the obtained serum was 6.5 g / dl.
It was the same as 5g / dl. Comparative Example 1 The same plasma / serum separation filter as in Example 1 was used. Bovine blood was supplied to the filter in the same manner as in Example 1. Here, blood was sent until the collection of serum was completed (until the outflow of blood cells started). As a result, 0.50 ml
The volume of blood fed until the serum was collected was 6.0 ml. This is obtained by adding the space volume of the filter, the line connecting the filter and the pump, and the volume of the serum flowing out to the void volume of the separation element. That is, the amount of blood required to collect 0.5 ml of serum was doubled as compared with Example 1. In a clinical test, it is preferable that the amount of blood to be collected is as small as possible. In that respect, Comparative Example 1 was inferior to Example 1. Comparative Example 2 The same plasma / serum separation filter as in Example 1 was used. Bovine blood was supplied to the filter in the same manner as in Example 1. Here, after supplying 0.5 ml of blood (13.3% of the gap volume of the separation element), physiological saline was fed until the collection of serum was completed (until the outflow of blood cells started). As a result, 0.33 ml of serum was collected, and the outflow of blood cells started. The total serum protein concentration of the obtained serum was 4.8 g / dl, which was lower than that of serum obtained by coagulating the same bovine blood and centrifuging it. This was thought to be because the amount of blood supplied initially was small, the blood supplied initially and physiological saline supplied later were mixed in the separation element, and the obtained serum was diluted with physiological saline.
【図１】 本発明において使用する円盤状血漿または血
清分離フィルターの模式図の立体断面図（1a) 、および
平面断面図（1b) である。FIG. 1 is a three-dimensional sectional view (1a) and a plan sectional view (1b) of a schematic diagram of a disc-shaped plasma or serum separation filter used in the present invention.
１ 血液から血漿または血清を分離するフィルターの血
液入口 ２ 血液から血漿または血清を分離するフィルターの透
過液出口 ３ 分離素子 ４ 血液から血漿または血清を分離するフィルターの容
器部分 ５ 分離素子外周部と容器内側との隙間Reference Signs List 1 blood inlet of filter for separating plasma or serum from blood 2 permeate outlet of filter for separating plasma or serum from blood 3 separation element 4 container part of filter for separating plasma or serum from blood 5 separation element outer peripheral part and container Gap with the inside
Claims (4)
着し、出入口間に圧力差を与え、血液を該分離素子内で
移動させ、血漿または血清と血球の該分離素子中の移動
速度差を利用して、血漿または血清を分離採取する血漿
または血清の分離方法において、血液を該分離素子に供
給した後、流体で血液を押しだすことを特徴とする血漿
または血清の分離方法。1. A separation element is mounted on a container having an inlet and an outlet, a pressure difference is applied between an inlet and an outlet, blood is moved in the separation element, and a difference in moving speed of plasma or serum and blood cells in the separation element. A method for separating plasma or serum, wherein blood is supplied to the separation element, and then the blood is extruded with a fluid.
徴とする請求項１記載の血漿または血清の分離方法。2. The method according to claim 1, wherein the fluid does not lyse red blood cells.
囲にあることを特徴とする請求項１又は２記載の血漿ま
たは血清の分離方法。3. The method for separating plasma or serum according to claim 1, wherein the osmotic pressure of the fluid is within a range that does not cause hemolysis of red blood cells.
中の空隙体積の２０％以上１５０％以下である請求項１
乃至３のいずれかに記載の血漿または血清の分離方法。4. The method according to claim 1, wherein an amount of blood to be sent to the separation element is 20% or more and 150% or less of a void volume in the separation element.
4. The method for separating plasma or serum according to any one of claims 3 to 3.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9355077A JPH11180876A (en) | 1997-12-24 | 1997-12-24 | Separation of plasma or serum |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9355077A JPH11180876A (en) | 1997-12-24 | 1997-12-24 | Separation of plasma or serum |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH11180876A true JPH11180876A (en) | 1999-07-06 |
Family
ID=18441810
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9355077A Withdrawn JPH11180876A (en) | 1997-12-24 | 1997-12-24 | Separation of plasma or serum |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH11180876A (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007304016A (en) * | 2006-05-12 | 2007-11-22 | Sekisui Chem Co Ltd | Blood separation apparatus |
| US7727764B2 (en) | 2006-12-28 | 2010-06-01 | Puthalath Koroth Raghuprasad | Non-isopycnic cell purification using percoll |
| JP2010227582A (en) * | 2003-05-21 | 2010-10-14 | Jms Co Ltd | Serum preparing device |
-
1997
- 1997-12-24 JP JP9355077A patent/JPH11180876A/en not_active Withdrawn
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2010227582A (en) * | 2003-05-21 | 2010-10-14 | Jms Co Ltd | Serum preparing device |
| JP2007304016A (en) * | 2006-05-12 | 2007-11-22 | Sekisui Chem Co Ltd | Blood separation apparatus |
| US7727764B2 (en) | 2006-12-28 | 2010-06-01 | Puthalath Koroth Raghuprasad | Non-isopycnic cell purification using percoll |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US6241886B1 (en) | Plasma separation filter | |
| US7993847B2 (en) | Plasma or serum separation membrane and filter apparatus including the plasma or serum separation membrane | |
| JP4885134B2 (en) | Blood separation device and method for separating liquid component fraction from whole blood | |
| KR100446030B1 (en) | Blood filtration device | |
| EP0269240B1 (en) | Blood separation device under low pressure conditions | |
| JP3903098B2 (en) | Blood filtration method | |
| JP3685283B2 (en) | Plasma collection tool | |
| US10843111B2 (en) | Process of separating blood plasma/serum from whole blood | |
| US20210380928A1 (en) | Cell separation filter, filtering device, and manufacturing method for cell separation filter | |
| JPH11237378A (en) | Method for separating serum from whole blood | |
| US20010035375A1 (en) | Filter for arrayable micro-centrifuge | |
| JP3870468B2 (en) | Plasma or serum separation filter | |
| JP3644169B2 (en) | Plasma or serum separation filter and plasma or serum separation method | |
| JP4006551B2 (en) | Plasma or serum separation filter | |
| JP4078460B2 (en) | Plasma separation filter, plasma separation method and plasma separation apparatus using the same | |
| US6328167B1 (en) | Blood filter cartridge | |
| US6375856B1 (en) | Method of recovering blood filtration residues | |
| JPH11180876A (en) | Separation of plasma or serum | |
| JPH11285607A (en) | Blood plasma and serum separating filter | |
| JPS6011166A (en) | Sampling method of blood plasma for clinical inspection | |
| JP3932639B2 (en) | Plasma or serum separation filter | |
| US20020185429A1 (en) | Filter for arrayable micro-centrifuge | |
| JP3722255B2 (en) | Plasma or serum separation filter | |
| CN103805504B (en) | Membrane type separating chips | |
| EP4335535A1 (en) | Membrane for separation of body fluids |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20041222 |
|
| A761 | Written withdrawal of application |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A761 Effective date: 20080416 |