JPH10501340A - Improved siphon to improve measurement accuracy - Google Patents

Improved siphon to improve measurement accuracy

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Publication number
JPH10501340A
JPH10501340A JP8501264A JP50126495A JPH10501340A JP H10501340 A JPH10501340 A JP H10501340A JP 8501264 A JP8501264 A JP 8501264A JP 50126495 A JP50126495 A JP 50126495A JP H10501340 A JPH10501340 A JP H10501340A
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JP
Japan
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chamber
rotor
siphon
liquid
inlet
Prior art date
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Pending
Application number
JP8501264A
Other languages
Japanese (ja)
Inventor
− シル,アンヌ アール. コプ
ティー. シェムブリ,キャロル
Original Assignee
アバクシス,インコーポレイテッド
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Filing date
Publication date
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Publication of JPH10501340A publication Critical patent/JPH10501340A/en
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    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/01Arrangements or apparatus for facilitating the optical investigation
    • G01N21/03Cuvette constructions
    • G01N21/07Centrifugal type cuvettes

Abstract

(57)【要約】 この発明は、ロータの中の室に予め測定した量の液体を送り出すための遠心力ロータを提供する。特に、このロータは、予め測定した量の液体をこのロータの第1室と第2室(136)の間に送り出すためのサイホン(134)を含む。この発明のサイホン(134)は、この第1室上のこのサイホンの入口(138)が第2室(136)上のサイホン出口(139)の半径方向に外にあるように設計されている。この第1室は、このサイホン出口(139)の半径方向位置と同じ高さへ注ぐ。 SUMMARY OF THE INVENTION The present invention provides a centrifugal rotor for delivering a pre-measured amount of liquid to a chamber within the rotor. In particular, the rotor includes a siphon (134) for pumping a pre-measured amount of liquid between the first and second chambers (136) of the rotor. The siphon (134) of the present invention is designed such that the inlet (138) of the siphon on the first chamber is radially outside the siphon outlet (139) on the second chamber (136). The first chamber pours to the same height as the radial position of the siphon outlet (139).

Description

【発明の詳細な説明】 測定精度を改善するための改良サイホン この出願は、参考までにここに援用する、出願中の米国特許出願第08/11 5,162号の一部継続出願である。 発明の背景 この発明は、一般的に生物学的液体を分析するための装置および方法に関する 。特に、それは、このロータの中の室へ正確な量の液体を送り出せるようにする サイホンを有する、改良された遠心式ロータの設計および使用法に関する。 血漿およびその他の生物学的液体の生物学的試験は、しばしば、多種多様な光 学的試験または検定で分析するためにこれらの液体を所定の量に迅速に分ける必 要がある。この材料の干渉するおそれのある細胞質の成分を試験する前に他の液 体から分離することも、しばしば望ましい。そのような測定および分離工程は、 従来典型的には、例えば、細胞質成分から血漿を分離するために、遠心分離を使 い、その後、手動的または自動的に所定量の血漿を別々の試験溜めにピペットで 移すことによって行っていた。そのような手順は、多大な労力を要し、時間のか かるものである。その結果、より効率的に試験するのに適した多数のアリコート (aliquot)を得るための自動化したシステムおよび方法が種々提案されている。 生物学的液体の分析における主な進歩は、遠心式ロータを使うことであった。 これらのロータは、生物学的液体の量を測定し、細胞質成分を除去し、この液体 を、例えば光学的試験により、分析するために適当な希釈剤と混ぜるように設計 されている。典型的には、これらのロータは、複数の別々の量の試料を別々のキ ュベット(cuvette)に入れ、その中でこの試料を光学的に分析する。 正確で一貫性のある結果を保証するために、そのようなロータは、正確に測定 した量の液体をこのロータの種々の室へ送り出す必要がある。これは、しばしば 、このロータを動作中に迅速に加速したり減速したりし、またはその他の方法で 混乱させる環境で行わなければならない。この混乱は、しばしば、不正確な測定 量を送り出すことにつながることがある。この発明は、これらおよびその他の要 求 に対応する。 背景技術の説明 米国特許第4,894,204号および第5,160,702号は、ロータの 中の室間で液体を移転するためのサイホンを開示している。米国特許第4,24 4,916号は、中央レセプタクルの半径方向に外に配置された複数のキュベッ トを含むロータを開示している。各キュベットは、ダクトによってこの中央レセ プタクル(receptacle)に接続され、別の空気逃げオリフィスを含む。米国特許第 4,314,968号は、ロータの外周に配置されたセル(cell)を有するロータ に関する。各セルは、このセルに導入された液体を除去するための外周オリフィ スを含む。米国特許第4,902,479号は、長い、半径方向に伸びたキュベ ットを含む多キュベットロータを開示している。長いキュベットの各々は、第1 成分を受けるための第1室および第2成分を受けるための第2室を含む。この第 1室と第2室の間の仕切り構造が所定時間以前のこれらの成分の混合を防止する 。このロータが十分な速度で回転すると混合が起きる。米国特許第4,963, 498号は、光学的分析をするために液体を汲み上げ混合するための毛細管、室 、およびオリフィス(orifice)に依存する装置を開示している。米国特許第5, 077,013号は、半径方向に内に配置された保持室に接続された外周キュベ ットを含むロータを開示している。 発明の概要 この発明は、予め測定した量の液体、典型的には血漿のような生物学的試料を ロータの中の第1室と第2室の間に送り出すためのサイホンを含む遠心式ロータ を提供する。この発明のサイホンは、この第1室の中の液体の半径方向に最内点 より半径方向に内方にあるエルボ(elbow)を有する。ロータが回転しても、液体 がこのエルボを通過して流れることはない。ロータが止まってから、毛管力がこ のエルボのすぐ周りの液体を引くことによってこのサイホンを”プライミング” する即ち呼び液体を差す。ロータが再始動すると、計量室の中の液体の高さがサ イホンの出口と同じ半径方向距離になるまで、遠心力が残りの液体を計量室から 受け入れ室へ引き出す。この発明のサイホンは、第1室の上のこのサイホンの入 口が第2室の上のサイホン出口より半径方向に外にあるように設計されている。 この発明のサイホンの入口と出口のこの配置は、多くの利点を生ずる。例えば 、このサイホンの入口は、液体が第2室に移された後の、第1室の中にある液体 のメニスカスの最終位置より常に半径方向に外に位置する。それで、このメニス カスが最小になるので、液体が異なってメニスカスの形状が異なることに関連す る測定の不正確さが最小になる。その上、当業者には、サイホンの中の液体のつ ながりは安定しているが、もし、ロータを混乱させると、容易に損なわれるので 、全てのサイホンが半安定であることが分かるだろう。遠心力で、この液体のつ ながりが壊れたとき、サイホンの中の液体は、半径方向に最外点へ流れるだろう 。従来技術のサイホンでは、この点がサイホン出口である。それで、未測定量の 液体を受け入れ室へ送り出す可能性がある。この発明のサイホンでは、サイホン の半径方向に最外点がサイホン入口である。この設計では、液体のつながりが壊 れたとき、その液体が第1室の中へ流れ戻るので、この未測定量の液体を送り出 す問題が避けられる。 この発明のサイホンによって接続された室を使って、液体の計量、試料からの 固形成分の分離、試料と希釈剤の混合等いくつもの機能を果たすことができる。 好適実施例においては、予め測定した量の血漿を希釈剤と混ぜるために、このサ イホンが血漿計量室を混合室に接続する。 その上、この発明のロータは、分配リングを、生物学的試料の光学的分析のた めの試薬を含むキュベットに接続する、無修正入口チャンネルを含む。これらの 入口チャンネルは、ロータが回転すると、液体がこの入口チャンネルを通ってキ ュベットに入るので、ガスがこの入口チャンネルを通って逃げるような大きさに なっている。ここで云う”無修正入口チャンネル”は、他の方法では抽気されな いガスをキュベットから逃がすための通路を作るために修正する(例えば、断面 形状、表面組織等を変えることによって)ことをしない、典型的には矩形断面の 単純な入口チャンネルを指す。 図面の簡単な説明 第1A図−第1F図は、この発明のロータの平面図で、このロータが回転する ときのこのロータの室およびチャンネルを通る液体の流れを示す。 好適実施例の説明 この発明は、分析用ロータの室に液体を送り出すための方法および装置を提供 する。この発明のロータには、このロータの中の所望の室へ計量した量の液体を 正確に送り出すことを保証するサイホンがある。 この発明のロータは、どんな液体、典型的には全血または血漿のような生物学 的試料の分析にも適している。それは、他の多数の生物学的液体、例えば、尿、 痰、***、唾液、眼球レンズ液、脳液、髄液、羊水にも有用である。試験できる 他の液体には、組織培養媒体、食品および工業用化学薬品、環境試料等がある。 このロータは、典型的には、生物学的試料(例えば、全血)から細胞成分を分 離し、液体試料(例えば、血漿)の正確な量を測定し、この試料を適当な希釈剤 と混ぜ、そしてこの希釈した試料を光学的分析用のキュベットへ送り出すことが できる室を備える。これらのキュベットへ送り出された液体は、これらのキュベ ットの中で反応、例えば、一つ以上の分析物を検出するための分析手続きの一部 を形成する試薬との反応を受ける。この試料は、ロータの中にある間に、先の反 応とは関係なく、更に光学的に分析してもよい。 この発明の装置には、従来の市販の実験室用遠心機に取り付けることができる ロータ本体を有する分析用ロータがあり、その遠心機は、カリフォルニア州フラ ートン市のベックマン・インスツルメント社スピンコ事業部;ペンシルバニア州 ピッツバーグ市のフィシャー・サイエンティフイック;カリフォルニア州サンフ ランシスコ市のVWRサイエンティフイック等の業者から入手可能である。一般 的に、この遠心式ロータは、遠心機が備える垂直駆動軸に取り付けるのに適した レセプタクルまたはその他の結合装置がある。このレセプタクルまたは結合装置 の特定の設計は、この遠心機の性質に依り、それでこの発明の遠心式ロータを現 在入手可能なまたは将来入手可能になるかも知れない全ての種類または大抵の種 類の遠心機に使うために改作してもよいことが分かるだろう。 このロータ本体には、以下に更に詳しく説明するように、複数の室、相互連絡 通路、およびベント(vent)の間の所望の幾何学的様式または関係を維持する構造 物がある。この発明のロータに使用するのに適した種々の専門化した室およびチ ャンネルは、参考までにここに援用する米国特許第5,061,381号および 第5,122,284号並びに米国特許出願第07/678,762号および第 07/783,041号に開示されている。 通常、この本体は、むくの母材にチャンネルおよび通路を空間または空洞とし て作った実質的にむくの板または円板である。そのようなむくの板は、複数の別 別に作った層を一緒に複合構造物として貼り合わせ、室および水平通路を一般的 に隣接する層の間に作っても都合がよい。垂直通路は、これらの層を通して作っ てもよい。個々の層は、射出成形、機械加工、またはそれらの組み合わせによっ て作ってもよく、通常、典型的には適当な接着剤を使って、または超音波溶接に よって互いに接合する。最終包括容積(final enclosed volumes)は、これらの 層を一緒にするときに作る。 勿論、この遠心式ロータは、管、容器、室等のような、複数の個々の部品を適 当な枠組に配置して作ることもできる。しかし、そのような個々の部品の組立体 は、一般的に、実質的にむくの板の中に作ったものより、製造が困難で、従って 望ましくない。 このロータ本体は、多種類の材料から作ってもよく、二つ以上の材料を含んで も随意である。通常これらの材料は、種々の内部室および通路の中の生物学的液 体、細胞成分、および試薬の存在および分布が観察できるように、透明である。 随意ではあるが、分析室、例えば、キュベット、またはその他の試験溜めがこの ロータに作られている範囲で、これらのキュベットの内容物を分光分析的に、蛍 光分析的に、または他の光学的評価器具が観察できるように、このロータに適当 な光路が作られているのが望ましい。貫通する特別な光路が作られている適当な キュベットの構成は、参考までにここに援用する米国特許第5,173,193 号に開示されている。この好適実施例においては、このロータが、少なくとも光 路を形成する領域で、適当な光学的性質を有するアクリル樹脂でできている。 この発明の装置および方法は、血漿およびその他の試料に有益にまたは必ず実 施される、多種多様な分析手続きおよび検定を実施するために適している。これ らの分析手続きは、特定の成分(分析物)の存在および/または量、または試料 の特性に関係するかもしれない、ある検出可能な変化を起こすために、この試料 を一つ以上の試薬と組み合わせることを要求するかも知れない。例えば、この試 料が、従来の分光光度計、蛍光光度計、光検出器等で測定できる、色、蛍光、ル ミネッセンス等が変化する結果となる、反応またはその他の変化を受けるかも知 れない。ある場合、免疫学的検定およびその他の特定の結合検定を無セル液体収 集室で、またはこの収集室に結合されたキュベットで行うかも知れない。一般的 に、そのような検定手続きは、均質であるべきで、分離工程を要してはならない 。しかし、他の場合には、免疫学的反応工程が起きてから、この収集室またはも う一つの試験溜め若しくはキュベットから試料(例えば、血漿)を分離するため の手段を設けることによって、異質の検定システムを収容することができるかも 知れない。当業者は、試料を分析する手段がこの発明の重要な面ではないことが 分かるだろう。多くの分析法のどれでも、分析する特定の試料および検出する成 分に依って、この発明のロータで使うように適合させることができる。 血液分析の場合、典型的には従来の血液検定を行う。行うことができる検定の 例には、グルコース、乳酸デヒドロゲナーゼ、血清グルタミン酸−オキザロ酢酸 トランスアミナーゼ(SGOT)、血清グルタミン酸−ピルビン酸トランスアミ ナーゼ(SGPT)、血液尿素態窒素(BUN)、全タンパク質、アルカリ度、 フォスファターゼ、ビリルビン、カルシュウム、塩化物、ナトリウム、カリウム 、マグネシウム等を検出するように設計されたものがある。この表は、網羅的で はなく、単にこの発明の装置および方法を使って実行できる検定の例として示す だけである。通常、これらの試験は、血液および血漿を一つ以上の試薬と組み合 わせることを要し、それが血漿に、光学的に検出可能な、通常光度計で検出可能 な、変化を生ずる。必要なこれらの試薬は、よく知られ、特許文献および科学文 献に豊富に記載されている。 これらの試薬は、安定性を増すために、凍結乾燥した形で用意するのが好まし い。理想的には、それらを、参考までにここに援用する米国特許出願第07/7 47,179号に記載されているように、凍結乾燥した試薬球の形で用意する。 さて、第1A図−第1F図を参照すると、この発明のチャンネルを含む分析用 ロータを見ることができる。第1A図は、血液試料102をロータ本体100に 入れてからの、血液適用室104内のこの試料の位置を示す。室106の中の希 釈剤容器が、参考までにここに援用する、出願中の、共に譲渡された米国特許出 願第07/873,327号に記載されているように、このロータを遠心機のス ピンドルに取り付けると開く。 第1B図は、このロータを4,000rpmで回転した後の希釈剤108と血 液試料102の位置を示す。血液試料102が血液適用室104を出始めて、血 漿計量室110に入る。同時に、希釈剤108が希釈剤容器から保持室112に 注ぐ。この希釈剤は、直ちにチャンネル116を通って、希釈剤計量室114に 入り始める。 第1C図は、ロータ100が回転し続けたときの、これらの液体の位置を示す 。ここで、血液試料102が血液適用室104を空にして、血漿計量室110か らオーバフロー室118に溢れ出て、そこからヘモグロビン・キュベット120 および余剰血液捨て場122へ流れる。一方、希釈剤108は、希釈剤計量室1 14を満たし、余分がチャンネル124を通って希釈剤だけのキュベット126 および余剰希釈剤捨て場127へ流れる。 第1D図は、この1回目の回転の終局のこれらの液体の位置を示す。血液試料 102が細胞128と血漿130に分けられている。希釈剤だけのキュベット1 26は、満たされ、所定の量の希釈剤が希釈剤計量室114に残っている。次に 、ロータ100が止まり、希釈剤計量室114からのサイホン132、並びに血 漿計量室110からのサイホン134が、上述のように、プライミングされる。 サイホン134がこの発明のサイホンである。それは、入口138で血漿計量室 110に接続されている。入口138は、サイホン出口139より半径方向に外 に位置し、その出口を通ってこのサイホン134が混合室136に通じる。 第1E図は、このロータの2回目の回転中のこれらの液体の位置を示す。希釈 剤計量室114が、サイホン132を通って混合室136に通じる。所定の量の 血漿130を計量しながら混合室136に供給し、二つの液体を混合し、それに よって希釈した血漿131ができる。混合室136へ送り出される血漿130の 量は、サイホン134上の出口139の位置によって決まる。この図で分かるよ うに、血漿計量室110内の血漿の最終高さ133は、出口139と同じ半径方 向位置にある。それで、混合室136へ送り出される血漿の量は、血漿計量室1 10のオーバフロー室への出口129と血漿の最終高さ133の間の容積によっ て決まる。血漿と希釈剤を混合室136で混ぜてから、ロータが再び止まり、出 口サイホン140がプライミングされる。 第1F図は、このロータの3回目の回転中に回転しているときの希釈した血漿 131の位置を示す。この図は、希釈した血漿131が分配リング142および 入口チャンネル144を通り、キュベット146および余剰血漿捨て場147へ 移動するのを示す。出口サイホン140の中の流れに対する抵抗は、分配リング 142および入口チャンネル144の中の流れに対する抵抗より高く選び、これ らのキュベットが満たされるにつれ、キュベット146の中にある空気が逃げら れるようにする。特に、サイホン140は、入口チャンネル144の断面積とそ れらの中の液体の断面積の比が2:1以上、好ましくは4:1以上であるような 寸法になっている。入口チャンネル144の断面積は、典型的には、分配チャン ネル142のそれと同じかわずかに小さく、それで抽気されないキュベットの中 のガスが入口チャンネル144および分配チャンネル142を通って逃げる。も し、試料が血漿または希釈した血漿であり、チャンネル断面が矩形であるなら、 それらの寸法は典型的には次の通りである:サイホン:深さ0.150mm、幅 0.200mm;分配チャンネル深さ0.300mm、幅0.500mm;入口 チャンネル:深さ0.150、幅0.500。 キュベットを満たしてから、これらのキュベットの中にある試薬をこの溶液と 混ぜ、この試料について必要な測光分析を行う。そのような分析は、上に説明し たように当業者に知られた方法に従って実施する。 上記の発明は、理解を明瞭にするために詳しく説明したが、添付の請求項の範 囲内である修正を行うことができることは明白だろう。DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION Improved siphon this application to improve the measurement accuracy, which is incorporated herein by reference, is a continuation-in-part application of U.S. Patent Application No. 08/11 5,162 pending applications. BACKGROUND OF THE INVENTION The present invention relates generally to devices and methods for analyzing biological fluids. In particular, it relates to the design and use of an improved centrifugal rotor having a siphon that allows for the delivery of a precise amount of liquid to a chamber within the rotor. Biological tests on plasma and other biological fluids often require that these fluids be rapidly divided into predetermined volumes for analysis with a wide variety of optical tests or assays. It is often desirable to separate potentially interfering cytoplasmic components of this material from other liquids before testing. Such measurement and separation steps conventionally typically use centrifugation, for example, to separate plasma from cytoplasmic components, and then manually or automatically transfer a predetermined amount of plasma to a separate test reservoir. This was done by pipetting. Such a procedure is labor intensive and time consuming. As a result, various automated systems and methods have been proposed for obtaining multiple aliquots suitable for more efficient testing. A major advance in the analysis of biological fluids has been to use centrifugal rotors. These rotors are designed to measure the amount of biological fluid, remove cytoplasmic components, and mix this fluid with a suitable diluent for analysis, for example, by optical testing. Typically, these rotors place a plurality of separate amounts of sample in separate cuvettes and optically analyze the sample therein. In order to guarantee accurate and consistent results, such rotors need to deliver precisely measured amounts of liquid to the various chambers of the rotor. This often must be done in an environment where the rotor is rapidly accelerated or decelerated during operation or otherwise disrupted. This confusion can often lead to inaccurate measurements. The present invention addresses these and other needs. 2. Description of the Background Art U.S. Pat. Nos. 4,894,204 and 5,160,702 disclose siphons for transferring liquid between chambers in a rotor. U.S. Pat. No. 4,244,916 discloses a rotor that includes a plurality of cuvettes disposed radially outward of a central receptacle. Each cuvette is connected to this central receptacle by a duct and contains another air escape orifice. U.S. Pat. No. 4,314,968 relates to a rotor having cells arranged on the outer periphery of the rotor. Each cell includes a peripheral orifice for removing liquid introduced into the cell. U.S. Pat. No. 4,902,479 discloses a multi-cuvette rotor that includes a long, radially extending cuvette. Each of the long cuvettes includes a first chamber for receiving a first component and a second chamber for receiving a second component. The partition structure between the first chamber and the second chamber prevents mixing of these components before a predetermined time. Mixing occurs when the rotor rotates at a sufficient speed. U.S. Pat. No. 4,963,498 discloses an apparatus that relies on capillaries, chambers, and orifices to pump and mix liquids for optical analysis. U.S. Pat. No. 5,077,013 discloses a rotor that includes an outer peripheral cuvette connected to a holding chamber disposed radially therein. SUMMARY OF THE INVENTION The present invention is a centrifugal rotor including a siphon for delivering a pre-measured volume of a biological sample, such as plasma, typically between a first chamber and a second chamber in the rotor. I will provide a. The siphon of the present invention has an elbow radially inward of the innermost point of the liquid in the first chamber. As the rotor rotates, no liquid flows through this elbow. Once the rotor has stopped, capillary forces "prime" or prime the siphon by drawing the liquid immediately around the elbow. When the rotor restarts, centrifugal force draws the remaining liquid from the metering chamber into the receiving chamber until the height of the liquid in the metering chamber is the same radial distance as the siphon outlet. The siphon of the present invention is designed such that the inlet of the siphon above the first chamber is radially outward from the outlet of the siphon above the second chamber. This arrangement of the siphon inlet and outlet of the present invention provides a number of advantages. For example, the siphon inlet is always radially outward from the final position of the meniscus of the liquid in the first chamber after the liquid has been transferred to the second chamber. Thus, since this meniscus is minimized, measurement inaccuracies associated with different liquids and different meniscus shapes are minimized. Moreover, those skilled in the art will recognize that all siphons are semi-stable because the liquid connection in the siphon is stable, but if the rotor is disrupted, it is easily compromised. When centrifugal force breaks this liquid connection, the liquid in the siphon will flow radially to the outermost point. In prior art siphons, this is the siphon outlet. Thus, an unmeasured amount of liquid may be pumped into the receiving chamber. In the siphon of the present invention, the outermost point in the radial direction of the siphon is the siphon entrance. This design avoids the problem of pumping out this unmeasured volume of liquid as the liquid connection breaks and the liquid flows back into the first chamber. The chambers connected by the siphon of the present invention can perform a number of functions, such as metering liquids, separating solid components from a sample, and mixing a sample with a diluent. In a preferred embodiment, the siphon connects the plasma measuring chamber to the mixing chamber to mix a pre-measured amount of plasma with the diluent. Moreover, the rotor of the present invention includes an unmodified inlet channel connecting the distribution ring to a cuvette containing reagents for optical analysis of a biological sample. These inlet channels are sized so that as the rotor rotates, liquid enters the cuvette through the inlet channels so that gas escapes through the inlet channels. An "unmodified inlet channel", as referred to herein, typically does not modify (e.g., by changing the cross-sectional shape, surface texture, etc.) to create a passageway for gas not otherwise bled to escape from the cuvette. Specifically, it refers to a simple entrance channel with a rectangular cross section. BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS FIGS. 1A-1F are plan views of a rotor of the present invention showing the flow of liquid through the chambers and channels of the rotor as it rotates. DESCRIPTION OF THE PREFERRED EMBODIMENTS The present invention provides a method and apparatus for pumping liquid into a chamber of an analytical rotor. The rotor of the present invention includes a siphon that ensures accurate delivery of a metered amount of liquid to a desired chamber in the rotor. The rotor of the present invention is suitable for the analysis of any liquid, typically a biological sample such as whole blood or plasma. It is also useful in a number of other biological fluids, such as urine, sputum, semen, saliva, ocular lens fluid, cerebral fluid, cerebrospinal fluid, and amniotic fluid. Other liquids that can be tested include tissue culture media, food and industrial chemicals, environmental samples, and the like. The rotor typically separates cellular components from a biological sample (eg, whole blood), measures the exact amount of a liquid sample (eg, plasma), and mixes the sample with an appropriate diluent. And a chamber capable of delivering the diluted sample to a cuvette for optical analysis. The liquid delivered to these cuvettes undergoes reactions in these cuvettes, for example, with reagents that form part of an analytical procedure for detecting one or more analytes. This sample may be further optically analyzed while in the rotor, independent of the previous reaction. The apparatus of the present invention includes an analytical rotor having a rotor body that can be attached to a conventional commercially available laboratory centrifuge, the centrifuge being a spinco division of Beckman Instruments, Inc., Fullerton, California. Available from vendors such as Fisher Scientific, Pittsburgh, PA; VWR Scientific, San Francisco, CA; Generally, the centrifugal rotor has a receptacle or other coupling device suitable for mounting on a vertical drive shaft provided in the centrifuge. The particular design of the receptacle or coupling device will depend on the nature of the centrifuge, so that the centrifugal rotor of the present invention will be available now or may become available in all or most types of centrifuges. You can see that you can adapt it to use it. The rotor body has a structure that maintains the desired geometry or relationship between the plurality of chambers, interconnecting passages, and vents, as described in more detail below. Various specialized chambers and channels suitable for use in the rotor of the present invention are disclosed in U.S. Pat. Nos. 5,061,381 and 5,122,284, and U.S. Pat. Nos. 07 / 678,762 and 07 / 7783,041. Typically, the body is a substantially solid plate or disk in which channels and channels are formed as spaces or cavities in a solid matrix. Such a solid board may conveniently be formed by laminating a plurality of separately made layers together as a composite structure and creating a chamber and a horizontal passage generally between adjacent layers. Vertical passages may be made through these layers. The individual layers may be made by injection molding, machining, or a combination thereof, and are typically joined together, typically using a suitable adhesive or by ultrasonic welding. Final enclosed volumes are created when these layers are put together. Of course, the centrifugal rotor can also be made by arranging a plurality of individual parts, such as tubes, vessels, chambers, etc., in a suitable framework. However, such an assembly of individual parts is generally more difficult to manufacture than that made in a substantially solid plate, and is therefore undesirable. The rotor body may be made from a variety of materials and may optionally include more than one material. Usually these materials are transparent so that the presence and distribution of biological fluids, cellular components and reagents in the various internal chambers and passages can be observed. Optionally, to the extent that an analytical chamber, for example, a cuvette or other test reservoir is made in this rotor, the contents of these cuvettes can be analyzed spectroscopically, fluorometrically, or otherwise optically analyzed. It is desirable that the rotor has an appropriate optical path so that the evaluation instrument can be observed. A suitable cuvette configuration having a special light path through it is disclosed in US Pat. No. 5,173,193, which is incorporated herein by reference. In the preferred embodiment, the rotor is made of an acrylic resin having suitable optical properties, at least in the region forming the optical path. The devices and methods of the present invention are suitable for performing a wide variety of analytical procedures and assays that are beneficially or necessarily performed on plasma and other samples. These analytical procedures involve combining the sample with one or more reagents to cause certain detectable changes that may be related to the presence and / or amount of a particular component (analyte), or the properties of the sample. May require combining. For example, the sample may undergo a reaction or other change that results in a change in color, fluorescence, luminescence, etc., which can be measured with a conventional spectrophotometer, fluorimeter, photodetector, etc. In some cases, immunoassays and other specific binding assays may be performed in a cell-free liquid collection chamber or in a cuvette coupled to this collection chamber. Generally, such an assay procedure should be homogeneous and should not require a separation step. However, in other cases, heterogeneous assays may be performed by providing a means for separating a sample (eg, plasma) from this collection chamber or another test reservoir or cuvette after the immunological reaction step has occurred. May be able to accommodate the system. One skilled in the art will appreciate that the means for analyzing the sample is not a critical aspect of the invention. Any of a number of analytical methods can be adapted for use with the rotor of the present invention, depending on the particular sample being analyzed and the components to be detected. In the case of blood analysis, typically a conventional blood test is performed. Examples of assays that can be performed include glucose, lactate dehydrogenase, serum glutamate-oxaloacetate transaminase (SGOT), serum glutamate-pyruvate transaminase (SGPT), blood urea nitrogen (BUN), total protein, alkalinity, phosphatase , Bilirubin, calcium, chloride, sodium, potassium, magnesium and the like. This table is not exhaustive and is merely provided as an example of an assay that can be performed using the devices and methods of the present invention. Usually, these tests involve combining blood and plasma with one or more reagents, which produce changes in the plasma that are optically detectable, usually photometric. These necessary reagents are well known and are extensively described in the patent and scientific literature. These reagents are preferably provided in lyophilized form to increase stability. Ideally, they are provided in the form of lyophilized reagent spheres, as described in US patent application Ser. No. 07 / 747,179, which is incorporated herein by reference. Referring now to FIGS. 1A-1F, an analytical rotor including the channel of the present invention can be seen. FIG. 1A shows the position of blood sample 102 in blood application chamber 104 after blood sample 102 has been placed in rotor body 100. A diluent container in the chamber 106 is used to connect the rotor to the centrifuge as described in co-pending and commonly assigned U.S. patent application Ser. No. 07 / 873,327, which is incorporated herein by reference. Open when attached to the spindle. FIG. 1B shows the position of diluent 108 and blood sample 102 after the rotor has been rotated at 4,000 rpm. Blood sample 102 begins to exit blood application chamber 104 and enters plasma metering chamber 110. At the same time, diluent 108 pours from the diluent container into holding chamber 112. The diluent immediately begins to enter the diluent metering chamber 114 through the channel 116. FIG. 1C shows the position of these liquids as rotor 100 continues to rotate. Here, the blood sample 102 empties the blood application chamber 104, overflows from the plasma measuring chamber 110 to the overflow chamber 118, and flows therefrom to the hemoglobin cuvette 120 and the excess blood dumping area 122. On the other hand, the diluent 108 fills the diluent metering chamber 114 and the excess flows through the channel 124 to the diluent-only cuvette 126 and the excess diluent dumping site 127. FIG. 1D shows the position of these liquids at the end of this first rotation. Blood sample 102 is divided into cells 128 and plasma 130. The diluent-only cuvette 126 is filled and a predetermined amount of diluent remains in the diluent metering chamber 114. Next, the rotor 100 is stopped and the siphon 132 from the diluent metering chamber 114 and the siphon 134 from the plasma metering chamber 110 are primed as described above. The siphon 134 is the siphon of the present invention. It is connected to the plasma metering chamber 110 at the inlet 138. The inlet 138 is located radially outward from the siphon outlet 139, through which the siphon 134 communicates with the mixing chamber 136. FIG. 1E shows the position of these liquids during a second rotation of the rotor. A diluent metering chamber 114 communicates with the mixing chamber 136 through the siphon 132. A predetermined amount of the plasma 130 is metered and supplied to the mixing chamber 136 to mix the two liquids, thereby forming a diluted plasma 131. The amount of plasma 130 delivered to mixing chamber 136 is determined by the location of outlet 139 on siphon 134. As can be seen in this figure, the final height 133 of the plasma in the plasma metering chamber 110 is at the same radial position as the outlet 139. Thus, the amount of plasma delivered to the mixing chamber 136 is determined by the volume between the outlet 129 of the plasma metering chamber 110 to the overflow chamber and the final height 133 of the plasma. After the plasma and diluent have been mixed in mixing chamber 136, the rotor is stopped again and outlet siphon 140 is primed. FIG. 1F shows the position of the diluted plasma 131 as it rotates during the third rotation of the rotor. This figure shows the diluted plasma 131 traveling through the distribution ring 142 and the inlet channel 144 to the cuvette 146 and the excess plasma dump 147. The resistance to flow in the outlet siphon 140 is chosen higher than the resistance to flow in the distribution ring 142 and the inlet channel 144 so that air in the cuvette 146 escapes as these cuvettes are filled. In particular, siphon 140 is dimensioned such that the ratio of the cross-sectional area of inlet channels 144 to the cross-sectional area of the liquid therein is greater than or equal to 2: 1, and preferably greater than or equal to 4: 1. The cross-sectional area of the inlet channel 144 is typically the same or slightly smaller than that of the distribution channel 142 so that gas in the cuvette that is not bled escapes through the inlet channel 144 and the distribution channel 142. If the sample is plasma or diluted plasma and the channel cross section is rectangular, their dimensions are typically as follows: siphon: 0.150 mm deep, 0.200 mm wide; distribution channel depth Inlet channel: depth 0.150, width 0.500. After filling the cuvettes, the reagents in these cuvettes are mixed with the solution and the sample is subjected to the required photometric analysis. Such an analysis is performed according to methods known to those skilled in the art as described above. While the above invention has been described in detail for clarity of understanding, it will be apparent that modifications may be made which are within the scope of the appended claims.

Claims (1)

【特許請求の範囲】 1. 液体の入る第1室、第2室、およびサイホンを含むロータ本体を含む遠 心式ロータであって、このサイホンがサイホン入口を介してこの第1室に、およ びサイホン出口を介してこの第2室に接続されていて、このサイホン入口がこの サイホン出口の半径方向に外にあるロータ。 2. 請求項1のロータにおいて、この第2室が混合室であるロータ。 3. 請求項1のロータにおいて、この第1室が計量室であるロータ。 4. 請求項1のロータにおいて、この液体が血漿であるロータ。 5. 請求項1のロータであって、更に、生物学的試料の分析に必要な試薬の 入るキュベットを含むロータ。 6. 請求項1のロータにおいて、このロータが更に、この第2室の半径方向 に外に配置された分配リング、およびこの分配リングを第2室に接続する送り出 しチャンネルを含み、この分配リングが入口チャンネルを介してキュベットに接 続されているロータ。 7. 請求項6のロータにおいて、この入口チャンネルの断面積が送り出しチ ャンネルの断面積の少なくとも約1.5倍であるロータ。 8. 請求項7のロータにおいて、この入口チャンネルの断面積が送り出しチ ャンネルの断面積の少なくとも約2倍であるロータ。 9. 請求項7のロータにおいて、この送り出しチャンネルの断面積が約0. 03mm2であるロータ。 10. 請求項6のロータにおいて、この送り出しチャンネルがサイホンであ るロータ。 11. ロータの中の第1室から第2室へ予め測定した量の液体を送り出す方 法であって: 第1室、第2室、並びにサイホン入口を介してこの第1室に、およびサイホン 出口を介してこの第2室に接続されたサイホンを含み、このサイホン入口がこの サイホン出口の半径方向に外にあるロータを設ける工程; このロータを回転し、それによって未測定量の液体をこの第1室に導入する工 程; このロータの回転を止め、それによってこの第1室を第2室へ接続するサイホ ンをプライミングする工程;並びに このロータを回転し、それによってこのサイホンの動作を始めて、予め測定し た量の液体をこの第1室から第2室へ送り出し、この予め測定した量がこのサイ ホン出口の半径方向の位置によって決まる工程; を含む方法。 12.請求項11の方法において、この送り出しチャンネルがサイホンであり 、このロータを回転する工程が、サイホンをプライミングするようにロータの速 度を落とす工程を含む方法。[Claims] 1. A centrifugal rotor including a first chamber, a second chamber, and a rotor body containing a siphon, wherein the siphon is in the first chamber through a siphon inlet and in the second chamber through a siphon outlet. And the siphon inlet is radially outside of the siphon outlet. 2. 2. The rotor according to claim 1, wherein said second chamber is a mixing chamber. 3. 2. The rotor according to claim 1, wherein said first chamber is a measuring chamber. 4. The rotor of claim 1, wherein the liquid is plasma. 5. 2. The rotor of claim 1, further comprising a cuvette containing reagents required for analyzing a biological sample. 6. 2. The rotor of claim 1 wherein said rotor further includes a distribution ring disposed radially outward of said second chamber, and a delivery channel connecting said distribution ring to said second chamber, said distribution ring comprising an inlet channel. Rotor connected to the cuvette via a. 7. 7. The rotor of claim 6, wherein the cross-sectional area of the inlet channel is at least about 1.5 times the cross-sectional area of the delivery channel. 8. The rotor of claim 7, wherein the cross-sectional area of the inlet channel is at least about twice the cross-sectional area of the delivery channel. 9. 8. The rotor of claim 7, wherein the cross-sectional area of the delivery channel is about 0.5. 03 mm 2 rotor. 10. 7. The rotor according to claim 6, wherein said delivery channel is a siphon. 11. A method for delivering a pre-measured amount of liquid from a first chamber in a rotor to a second chamber, comprising: a first chamber, a second chamber, and a siphon inlet into the first chamber and through a siphon outlet. Providing a rotor having a siphon connected to the second chamber of the lever and having a siphon inlet radially outward of the siphon outlet; rotating the rotor to thereby displace an unmeasured amount of liquid in the first chamber. Stopping the rotation of the rotor, thereby priming the siphon connecting the first chamber to the second chamber; and rotating the rotor, thereby starting the operation of the siphon and pre-measuring. Pumping an amount of liquid from the first chamber to the second chamber, the pre-measured amount being determined by a radial position of the siphon outlet. 12. 12. The method of claim 11, wherein the delivery channel is a siphon, and rotating the rotor includes slowing down the rotor to prime the siphon.
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