JPH09235292A - Galactose derivative - Google Patents

Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To obtain a new derivative, a galactose group-bearing specific triglyceride derivative, capable of giving lipid membrane structural form for the drug delivery system exhibiting specific affinity for cells having a galactose receptor. SOLUTION: This derivative is a new galactose derivative expressed by formula I (R<1> and R<2> are each a 12-30C saturated or unsaturated fatty acid residue; (n) is an integer of 2-50)(e.g. 1,2dipalmitoyl-3-O- glycerinylpolyethylenedioxyethyl-D-galactosyl succinate), being useful for e.g. lipid membrane structural, form for e.g. the drug den-ivery system(DDS) having specific affinity for galactose receptor-bearing cells represented by hepatocyte. This new derivative is obtained by protecting the carboxyl group of 1,2-protected 3-O-glycerinylpolyethylenedioxyethyl succinate of formula II followed by deprotection of the 1,2-sites and acylation, liberation of the terminal carboxylic acid on the 3-site and then binding galactose thereto.

Description

【発明の詳細な説明】Detailed Description of the Invention

【０００１】[0001]

【発明の属する技術分野】本発明は、肝実質細胞に代表
されるガラクトースレセプターを有する細胞に対し、特
異的親和性を有するＤＤＳ（ドラッグ・デリバリー・シ
ステム）に関する。TECHNICAL FIELD The present invention relates to a DDS (drug delivery system) having a specific affinity for cells having a galactose receptor represented by liver parenchymal cells.

【０００２】[0002]

【従来の技術】ガラクトース残基でリポソームの脂質二
分子膜の表面を修飾したリポソームをガラクトース修飾
リポソームと呼び、これらは肝実質細胞へ特異的に結合
することが既に知られている。2. Description of the Related Art Liposomes in which the surface of a lipid bilayer membrane of a liposome is modified with galactose residues are called galactose-modified liposomes, and it is already known that they specifically bind to hepatocytes.

【０００３】ガラクトース残基で修飾したリポソーム
（ガラクトース修飾リポソーム）としては、アシアロフ
ェツインを含有するリポソーム（バイオケミカル・アン
ド・バイオフィジカル・リサーチ・コミュニケーション
ズ ６５巻、５３７頁、１９７５年）、アシアロガング
リオシドを含有するリポソーム（バイオキミカ・バイオ
フィジカ・アクタ ４９７巻、７６０頁、１９７７
年）、ラクトシルセラミドを含有するリポソーム（バイ
オケミカル・アンド・バイオフィジカル・リサーチ・コ
ミュニケーションズ １１０巻、１４０頁、１９８３
年）、ジガラクトシルジグリセリドを含有するリポソー
ム（ディアベトロジア ２７巻、３３３Ａ頁、１９８４
年）、乳糖モノ脂肪酸エステルを含有するリポソーム
（ジャーナル・オブ・マイクロエンカプスレーション
１１巻、１７９頁、１９９４年）、乳糖モノ脂肪酸アミ
ドを含有するリポソーム（ジャーナル・オブ・マイクロ
エンカプスレーション １１巻、２８７頁、１９９４
年）、糖骨格を有する分枝鎖型誘導体を含有するリポソ
ーム（特開平６−９６７５号公報）等が報告され、肝実
質細胞へのターゲッティングを目的として、ｉｎ ｖｉ
ｖｏでの研究がなされているが、未だ満足のいく結果は
得られていない。As liposomes modified with galactose residues (galactose-modified liposomes), liposomes containing asialofetuin (Biochemical and Biophysical Research Communications, vol. 65, p. 537, 1975) and asialoganglioside are available. Liposomes (Biokimika Biophysica Acta 497, 760, 1977)
, Lactosylceramide-containing liposomes (Biochemical and Biophysical Research Communications 110, 140, 1983).
,) And liposomes containing digalactosyl diglyceride (Diabetrodia 27, 333A, 1984).
, Lactose monofatty acid ester-containing liposomes (Journal of Microencapsulation)
11, 179, 1994), liposomes containing lactose monofatty acid amide (Journal of Microencapsulation, 11, 287, 1994).
), A liposome containing a branched-chain derivative having a sugar skeleton (Japanese Patent Laid-Open No. 6-9675), and the like were reported, and in vivo for the purpose of targeting to hepatocytes.
Studies have been done in vo, but still unsatisfactory results have been obtained.

【０００４】[0004]

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
を解決するために鋭意検討した結果、ある特定の化学構
造を有するガラクトース誘導体を用いて製した脂質膜構
造体が肝実質細胞へターゲッティングすることを見いだ
した。Means for Solving the Problems As a result of intensive studies for solving the above problems, the present inventors have found that a lipid membrane structure produced by using a galactose derivative having a specific chemical structure can be applied to liver parenchymal cells. I found that I was targeting.

【０００５】[0005]

【発明の実施の形態】すなわち、本発明は次の〜の
発明に関する。 一般式（Ｉ）BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION That is, the present invention relates to the following inventions. General formula (I)

【０００６】[0006]

【化４】 ［式中、Ｒ^１およびＲ^２は各々独立して炭素数１２〜３
０の飽和または不飽和脂肪酸残基を意味する。ｎは２〜
５０の整数を意味する。］で表されるガラクトース誘導
体。Embedded image [In the formula, R ¹ and R ² each independently have 12 to 3 carbon atoms.
It means 0 saturated or unsaturated fatty acid residues. n is 2
It means an integer of 50. ] The galactose derivative represented by these.

【０００７】 一般式（Ｉ）General formula (I)

【０００８】[0008]

【化５】 ［式中、Ｒ^１およびＲ^２は各々独立して炭素数１２〜３
０の飽和または不飽和脂肪酸残基を意味する。ｎは２〜
５０の整数を意味する。］で表されるガラクトース誘導
体を含有する脂質膜構造体。Embedded image [In the formula, R ¹ and R ² each independently have 12 to 3 carbon atoms.
It means 0 saturated or unsaturated fatty acid residues. n is 2
It means an integer of 50. ] The lipid membrane structure containing the galactose derivative represented by these.

【０００９】 薬物および／または遺伝子を保持し
た、一般式（Ｉ）General formula (I) carrying a drug and / or gene

【００１０】[0010]

【化６】 ［式中、Ｒ^１およびＲ^２は各々独立して炭素数１２〜３
０の飽和または不飽和脂肪酸残基を意味する。ｎは２〜
５０の整数を意味する。］で表されるガラクトース誘導
体を含有する脂質膜構造体。[Chemical 6] [In the formula, R ¹ and R ² each independently have 12 to 3 carbon atoms.
It means 0 saturated or unsaturated fatty acid residues. n is 2
It means an integer of 50. ] The lipid membrane structure containing the galactose derivative represented by these.

【００１１】 一般式（Ｉ）中のＲ^１およびＲ^２が各
々パルミトイル基を意味し、ｎが１０を意味する発明
に記載のガラクトース誘導体。The galactose derivative according to the invention, wherein R ¹ and R ² in the general formula (I) each represent a palmitoyl group, and n represents 10.

【００１２】 一般式（Ｉ）中のＲ^１およびＲ^２が各
々パルミトイル基を意味し、ｎが１０を意味する発明
またはに記載の脂質膜構造体。The lipid membrane structure according to the invention or, wherein R ¹ and R ² in the general formula (I) each represent a palmitoyl group, and n represents 10.

【００１３】 発明、またはのいずれか１つの
発明に記載の脂質膜構造体がリポソームである脂質膜構
造体。The lipid membrane structure according to the invention, or the lipid membrane structure according to any one of the inventions, is a liposome.

【００１４】以下に、本発明について説明する。The present invention will be described below.

【００１５】まず、本発明の一般式（Ｉ）で表されるガ
ラクトース誘導体における置換基について説明する。First, the substituents in the galactose derivative represented by the general formula (I) of the present invention will be described.

【００１６】一般式（Ｉ）中、Ｒ^１およびＲ^２は各々独
立して炭素数１２〜３０の飽和または不飽和脂肪酸残基
を意味する。これらの例としては、ドデカノイル基、ト
リデカノイル基、テトラデカノイル基、ペンタデカノイ
ル基、ヘキサデカノイル（パルミトイル）基、ヘプタデ
カノイル基、オクタデカノイル（ステアロイル）基、ノ
ナデカノイル基、エイコサノイル基、ヘニコサノイル
基、ドコサノイル基、トリコサノイル基、テトラコサノ
イル基、ヘキサコサノイル基、トリアコンタノイル基、
４−ドデセノイル基、９−ヘキサデセノイル基、９−オ
クタデセノイル基、１１−エイコセノイル基、１３−ド
コセノイル基、１５−テトラコセノイル基、９，１２−
オクタデカジエノイル基、１１，１４−エイコサジエノ
イル基、９，１２，１５−オクタデカトリエノイル基、
１１，１４，１７−エイコサトリエノル基、４，８，１
２，１６−エイコサテトラエノイル基、４，８，１２，
１５，１９−ドコサペンタノイル基、２−デカニルヘキ
サデカノイル基、２−テトラデシルヘキサデカノイル
基、２−テトラデシルヘキサデセノイル基、２−テトラ
デセニルヘキサデカノイル基等の直鎖もしくは分枝状の
飽和または不飽和の脂肪酸残基を挙げることができる。In the general formula (I), R ¹ and R ² each independently represent a saturated or unsaturated fatty acid residue having 12 to 30 carbon atoms. Examples of these include dodecanoyl group, tridecanoyl group, tetradecanoyl group, pentadecanoyl group, hexadecanoyl (palmitoyl) group, heptadecanoyl group, octadecanoyl (stearoyl) group, nonadecanoyl group, eicosanoyl group, henicosanoyl group, Docosanoyl group, tricosanoyl group, tetracosanoyl group, hexacosanoyl group, triacontanoyl group,
4-dodecenoyl group, 9-hexadecenoyl group, 9-octadecenoyl group, 11-eicosenoyl group, 13-docosenoyl group, 15-tetracosenoyl group, 9,12-
Octadecadienoyl group, 11,14-eicosadienoyl group, 9,12,15-octadecatrienoyl group,
11,14,17-eicosatrienol group, 4,8,1
2,16-eicosatetraenoyl group, 4,8,12,
Directly attached to a 15,19-docosapentanoyl group, 2-decanylhexadecanoyl group, 2-tetradecylhexadecanoyl group, 2-tetradecylhexadecenoyl group, 2-tetradecenylhexadecanoyl group, etc. Mention may be made of chain or branched saturated or unsaturated fatty acid residues.

【００１７】また、ｎは２〜５０の整数を意味するが、
２〜２５が好ましく、５〜１５が特に好ましい。Further, n means an integer of 2 to 50,
2-25 are preferable and 5-15 are especially preferable.

【００１８】本発明のガラクトース誘導体を製造するた
めの製造フローの１例を表１と表２を用いて、次に示
す。An example of a production flow for producing the galactose derivative of the present invention is shown below using Tables 1 and 2.

【００１９】[0019]

【表１】 [Table 1]

【００２０】[0020]

【表２】 [Table 2]

【００２１】本発明において、脂質膜構造体とはミセ
ル、エマルジョン、リポソーム等を意味し、本発明の一
般式（Ｉ）で表されるガラクトース誘導体を含有する脂
質膜構造体は、公知の製造方法に従って製造することが
できる。In the present invention, the lipid membrane structure means micelles, emulsions, liposomes and the like, and the lipid membrane structure containing the galactose derivative represented by the general formula (I) of the present invention is a known production method. Can be manufactured according to.

【００２２】すなわち、ミセルおよびエマルジョンの製
造方法としては、たとえば、ドラッグデリバリーシステ
ム（瀬崎 仁 編 南江堂 １９８６年）に記載の方法
を挙げることができる。That is, as a method for producing micelles and emulsions, for example, the method described in Drug Delivery System (edited by Hitoshi Sezaki, Nankodo 1986) can be mentioned.

【００２３】また、リポソームの製造方法としては、機
械的振動法、超音波処理法、逆相蒸発法、凍結乾燥法、
加温法、多価アルコール法、メカノケミカル法、脂質溶
解法および噴霧乾燥法等を挙げることができる。Further, as a method for producing liposomes, a mechanical vibration method, an ultrasonic treatment method, a reverse phase evaporation method, a freeze-drying method,
The heating method, polyhydric alcohol method, mechanochemical method, lipid dissolution method, spray drying method and the like can be mentioned.

【００２４】脂質膜構造体は、一般式（Ｉ）で表される
ガラクトース誘導体のみだけでも製することができる
が、更に一般的に脂質膜構造体を製するのに用いられる
脂質を加えてもよい。例えば、それらの例として、ホス
ファチジルコリン、ホスファチジルセリン、スフィンゴ
ミエリン等を挙げることができる。The lipid membrane structure can be produced only by the galactose derivative represented by the general formula (I), but it may be prepared by adding a lipid generally used for producing the lipid membrane structure. Good. For example, examples thereof include phosphatidylcholine, phosphatidylserine, sphingomyelin and the like.

【００２５】また、脂質膜構造体がリポソームにおいて
は、膜の安定化剤としてコレステロール、コレスタノー
ル等のステロール類、酸化防止剤としてα−トコフェロ
ール等を更に添加してもよい。When the lipid membrane structure is a liposome, sterols such as cholesterol and cholestanol as a membrane stabilizer and α-tocopherol as an antioxidant may be further added.

【００２６】本発明の脂質膜構造体は、人体等に投与す
るものであり、実施時の形態としては、注射剤を挙げる
ことができる。したがって、脂質膜構造体は、溶液中に
分散した状態にあるのが好ましい。分散媒としては、水
性溶媒であれば特に限定されるべきものではないが、
水、種々の緩衝液、種々の等溶液、水溶性の有機溶媒等
を挙げることができる。これら水性溶媒は２種以上を混
合して用いてもよい。なお、脂質膜構造体の分散液に
は、安定化剤、等張化剤、ｐＨ調整剤等の添加剤を更に
添加してもよい。安定化剤としては、エチレンジアミン
四酢酸、トコフェロールおよびアスコルビン酸等を挙げ
ることができるが、特にこれらに限定されるべきもので
はない。The lipid membrane structure of the present invention is to be administered to the human body or the like, and examples of the form at the time of implementation include injections. Therefore, the lipid membrane structure is preferably dispersed in the solution. The dispersion medium is not particularly limited as long as it is an aqueous solvent,
Examples thereof include water, various buffer solutions, various equivalent solutions, water-soluble organic solvents and the like. You may use these aqueous solvents in mixture of 2 or more types. The dispersion liquid of the lipid membrane structure may further contain additives such as a stabilizer, a tonicity agent, and a pH adjuster. Examples of the stabilizer include ethylenediaminetetraacetic acid, tocopherol and ascorbic acid, but the stabilizer is not particularly limited thereto.

【００２７】等張化剤とは、血液または体液と等張にす
るためのものであり、糖類、多価アルコール、塩化ナト
リウム等を挙げることができる。また、ｐＨ調整剤とし
ては、人体等に無害な酸またはアルカリならば特に限定
されるべきものではないが、塩酸および水酸化ナトリウ
ム等を挙げることができる。The isotonicity agent is to make isotonic with blood or body fluid, and examples thereof include sugars, polyhydric alcohols, sodium chloride and the like. The pH adjusting agent is not particularly limited as long as it is an acid or alkali that is harmless to the human body, but examples thereof include hydrochloric acid and sodium hydroxide.

【００２８】以下に、本発明の薬物および／または遺伝
子を保持させた一般式（Ｉ）で表されるガラクトース誘
導体を含有する脂質膜構造体の製造方法について説明す
る。The method for producing the lipid membrane structure containing the galactose derivative represented by the general formula (I) which retains the drug and / or gene of the present invention will be described below.

【００２９】脂質膜構造体がミセルであるとき、すなわ
ち薬物および／または遺伝子を保持したミセルを製造す
るには、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステ
ル、脂肪酸ナトリウムおよびポリオキシエチレン等のミ
セル形成界面活性物質をミセル形成臨界濃度以上の濃度
で分散媒に加え、ミセルの分散液を調製する。調製した
ミセルの分散液に薬物および／または遺伝子と一般式
（Ｉ）で表されるガラクトース誘導体を加え、一定時間
放置、好ましくは４０℃以上に加温し、ついで放冷する
ことにより、薬物および／または遺伝子を保持させた一
般式（Ｉ）で表されるガラクトース誘導体を含有するミ
セルを製造することができる。また、ミセル形成物質、
一般式（Ｉ）で表されるガラクトース誘導体、薬物およ
び／または遺伝子をあらかじめ混合し、次いで公知のミ
セルの製造法に従って処理することにより、薬物および
／または遺伝子を保持させた一般式（Ｉ）で表されるガ
ラクトース誘導体を含有するミセルを製造することがで
きる。When the lipid membrane structure is a micelle, that is, in order to produce a drug- and / or gene-carrying micelle, a micelle-forming surfactant such as polyoxyethylene sorbitan fatty acid ester, fatty acid sodium and polyoxyethylene is used. A micelle dispersion is prepared by adding to the dispersion medium at a concentration equal to or higher than the micelle formation critical concentration. The drug and / or gene and the galactose derivative represented by the general formula (I) are added to the prepared micelle dispersion, the mixture is allowed to stand for a certain period of time, preferably heated to 40 ° C. or higher, and then allowed to cool to give the drug and It is possible to produce a micelle containing a galactose derivative represented by the general formula (I) in which a gene is retained. Also, micelle forming substances,
A galactose derivative represented by the general formula (I), a drug and / or a gene are mixed in advance, and then treated according to a known micelle production method to give the drug and / or the gene of the general formula (I). Micelle containing the represented galactose derivative can be produced.

【００３０】脂質膜構造体がエマルジョンであるときに
は、先に述べた方法により製した、薬物および／または
遺伝子を保持させた一般式（Ｉ）で表されるガラクトー
ス誘導体を含有するミセルに、あらかじめ薬物および／
または遺伝子を分散もしくは溶解させた大豆油等の油脂
を加えて、ミセル内を飽和させ、不可逆的な油層分離が
生じない程度まで油相を増加させることにより、薬物お
よび／または遺伝子を保持させた一般式（Ｉ）で表され
るガラクトース誘導体を含有するエマルジョンを製造す
ることができえる。また、公知の方法に従って、調製し
たエマルジョンに、薬物および／または遺伝子と一般式
（Ｉ）で表されるガラクトース誘導体を加え、一定時間
放置後、好ましくは４０℃以上に加温し、次いで放冷す
ることにより、一般式（Ｉ）で表されるガラクトース誘
導体を含有するエマルジョンを製造することができる。When the lipid membrane structure is an emulsion, the drug and / or gene-carrying micelle containing the galactose derivative represented by the general formula (I) is prepared in advance by the method described above. and/
Alternatively, a drug and / or gene was retained by adding an oil or fat such as soybean oil in which the gene was dispersed or dissolved to saturate the micelle and increase the oil phase to the extent that irreversible oil layer separation did not occur. It is possible to prepare an emulsion containing a galactose derivative of the general formula (I). Further, a drug and / or gene and a galactose derivative represented by the general formula (I) are added to an emulsion prepared according to a known method, allowed to stand for a certain period of time, preferably heated to 40 ° C. or higher, and then allowed to cool. By doing so, an emulsion containing the galactose derivative represented by the general formula (I) can be produced.

【００３１】また、脂質膜構造体がリポソームであると
き、すなわち薬物および／または遺伝子を保持したリポ
ソームを製造するには、薬物を一般式（Ｉ）で表される
ガラクトース誘導体等の脂質成分と共に有機溶媒中に溶
解した後、公知の方法に従い、リポソームの分散液を調
製しても良いし、またはあらかじめ調製したリポソーム
の分散液に、薬物の水溶液もしくは粉体の薬物を加え一
定時間放置、好ましくは膜の相転移温度以上に加温し
て、次いで放冷することにより、薬物および／または遺
伝子を保持させた一般式（Ｉ）で表されるガラクトース
誘導体を含有するリポソーム分散液を製造することがで
きる。When the lipid membrane structure is a liposome, that is, in order to produce a liposome carrying a drug and / or a gene, the drug is combined with a lipid component such as a galactose derivative represented by the general formula (I) and an organic compound. After dissolving in a solvent, a liposome dispersion may be prepared according to a known method, or an aqueous drug solution or powder drug is added to a liposome dispersion prepared in advance and left standing for a certain period of time, preferably A liposome dispersion containing a galactose derivative represented by the general formula (I), which retains a drug and / or a gene, can be produced by heating above the phase transition temperature of the membrane and then allowing to cool. it can.

【００３２】本発明の脂質膜構造体に保持させる薬物ま
たは遺伝子は、特に限定されるべきものではないが、特
に抗がん作用を有する薬物（制癌剤）、ヒトの欠損して
いる遺伝子や機能不全の遺伝子、発現するとヒトにとっ
て好ましくない遺伝子を抑制するアンチセンスオリゴヌ
クレオチド、実験動物や家畜等の産業用動物の品種改良
における遺伝子等が脂質膜構造体に保持させるのに適し
ている。The drug or gene to be retained in the lipid membrane structure of the present invention is not particularly limited, but it is particularly a drug having an anticancer action (anticancer drug), human defective gene or dysfunction. The above gene, an antisense oligonucleotide that suppresses a gene that is not preferable for humans when expressed, and a gene for breeding industrial animals such as experimental animals and livestock are suitable for being retained in the lipid membrane structure.

【００３３】薬物としては、たとえば、プロスタグラン
ジン、トロンボキサンおよびロイトコリエン等のアラキ
ドン酸代謝産物またはその誘導体、インターフェロン、
インターロイキン、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、上皮成長
因子（ＥＧＦ）、神経成長因子（ＮＧＦ）、肝細胞増殖
因子（ＨＧＦ）、心房性利尿ペプチド（ＡＮＰ）および
エリスロポエチン等の生理活性物質等のペプチド類、ス
テロイド等のホルモン類、シトシンアラビノシド、ダウ
ノルビシン、ドキソルビシン、アクラルビシン、４−Ｏ
−テトラハイドロピラニル−アドリアマイシン、４−エ
ピアドリアマイシン、４−デメトキシダウノマイシン、
マイトマイシンＣ、ブレオマイシン、メトトレキサー
ト、カンプトテシンおよびその誘導体等の制癌剤、アン
ピシリン、セファレキシン、ゲンタマイシン、ストレプ
トマイシン、カナマイシン、アミカシン、アムホテリシ
ンＢ、ベンジルペニシリン、ピペラシリン、セファロリ
ジン、セファロチン、セファゾリン、セファマンドー
ル、セフォタキシム、セフォキシチン、セフメタゾー
ル、セフォテタン等の抗生物質、スルフィソミジン、ス
ルファジメトキシン、スルファモノメトキシン、イソニ
アジド、ナリジクス酸、オフロキサシン、ノルフロキサ
シン、エノキサシン、レボフロキサシン、ロメフロキサ
シン等の化学療法剤、イオヘキソール、イオジキサノー
ル、インドシアニングリーン、イオタラム酸ナトリウム
等の造影剤、グルタチオン、ブクラデシンナトリウム等
を挙げることができる。中でも、本発明においては、制
癌剤が好ましい。Examples of the drug include arachidonic acid metabolites such as prostaglandins, thromboxane and leutcolyene or derivatives thereof, interferon,
Peptides such as interleukins, tumor necrosis factor (TNF), epidermal growth factor (EGF), nerve growth factor (NGF), hepatocyte growth factor (HGF), atrial diuretic peptide (ANP) and erythropoietin , Hormones such as steroids, cytosine arabinoside, daunorubicin, doxorubicin, aclarubicin, 4-O
-Tetrahydropyranyl-adriamycin, 4-epiadriamycin, 4-demethoxydaunomycin,
Anticancer agents such as mitomycin C, bleomycin, methotrexate, camptothecin and its derivatives, ampicillin, cephalexin, gentamicin, streptomycin, kanamycin, amikacin, amphotericin B, benzylpenicillin, piperacillin, cephaloridine, cephalothin, cefazoline, cefamandole, fofotaxol, cefotaxol. Antibiotics such as cefmetazole and cefotetan, sulfisomidine, sulfadimethoxine, sulfamonomethoxine, isoniazid, nalidixic acid, ofloxacin, norfloxacin, enoxacin, levofloxacin, chemotherapeutic agents such as lomefloxacin, iohexol, iodixanol, indocyanine green, sodium iotalamate, etc. Glutathione, a contrast agent , Mention may be made of the blanking class crepe de Chine sodium and the like. Among them, anticancer agents are preferable in the present invention.

【００３４】また、遺伝子としては、たとえば、ウイル
ス肝炎（Ａ、ＢおよびＣ）に感染した際のウイルス遺伝
子の発現を抑制するアンチセンスオリゴヌクレオチド、
がん遺伝子の発現を抑制するアンチセンスオリゴヌクレ
オチド等を挙げることができる。As the gene, for example, an antisense oligonucleotide that suppresses the expression of a viral gene when infected with viral hepatitis (A, B and C),
Examples thereof include antisense oligonucleotides that suppress the expression of oncogenes.

【００３５】保持させる遺伝子の形態は、特に限定され
るべきものではないが、遺伝子の導入や発現のさせやす
さ等を考慮して、該遺伝子が発現できるように構築され
たプラスミドが好ましい。また、発現をさせやすくする
ために、該プラスミドにおいて、遺伝子にプロモーター
および／またはエンハンサーを連結してもよい。The form of the gene to be held is not particularly limited, but a plasmid constructed so that the gene can be expressed is preferable in consideration of easiness of gene introduction and expression. Further, in order to facilitate expression, a promoter and / or enhancer may be linked to the gene in the plasmid.

【００３６】次に、本発明を実施例及び試験例により説
明するが、本発明はこれらによって限定されるものでは
ない。Next, the present invention will be described with reference to examples and test examples, but the present invention is not limited thereto.

【００３７】[0037]

【実施例】【Example】

実施例１ １，２−ジパルミトイル−３−Ｏ−グリセリ
ニル−ポリエチレンジオキシエチル−Ｄ−ガラクトシル
サクシネート（ポリオキシエチレンの平均分子量：１
０００）の合成Example 1 1,2-dipalmitoyl-3-O-glycerinyl-polyethylenedioxyethyl-D-galactosyl succinate (average molecular weight of polyoxyethylene: 1
000) synthesis

【００３８】１−１． １，２−プロピリデン−３−Ｏ
−グリセリニルポリエチレンジオキシエチルベンジルサ
クシネート（ポリオキシエチレンの平均分子量：１００
０）の合成1-1. 1,2-propylidene-3-O
-Glycerinyl polyethylene dioxyethyl benzyl succinate (polyoxyethylene average molecular weight: 100
Synthesis of 0)

【００３９】１，２−プロピリデン−３−Ｏ−グリセリ
ニルポリエチレンジオキシエチルサクシネート（５．６
ｇ、５．１ｍｍｏｌ）を１０ｍｌのＮ，Ｎ−ジメチルホ
ルムアミド（ＤＭＦ）に溶解し、その溶液を５０ｍｌの
ＤＭＦに炭酸水素カリウム（１．０ｇ、１０ｍｍｏｌ）
を懸濁した懸濁液に加えた。ついで、得られた懸濁液に
１０ｍｌのＤＭＦにベンジルブロマイド（１．３ｇ、
７．７ｍｍｏｌ）を溶解した溶液を加えた。混合液を室
温で２４時間攪拌し、攪拌後、冷水に注いでクロロホル
ムで抽出し、硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を減
圧留去し、残渣をセファデックス ＬＨ２０カラム（溶
出液：メタノール）を用いて精製し、標題の化合物を無
色油状物として得た。収率は７９％（４．８ｇ）であっ
た。1,2-Propylidene-3-O-glycerinyl polyethylenedioxyethyl succinate (5.6
g, 5.1 mmol) was dissolved in 10 ml of N, N-dimethylformamide (DMF), and the solution was dissolved in 50 ml of DMF with potassium hydrogen carbonate (1.0 g, 10 mmol).
Was added to the suspended suspension. The resulting suspension was then added to 10 ml of DMF with benzyl bromide (1.3 g,
7.7 mmol) was dissolved in the solution. The mixture was stirred at room temperature for 24 hours, stirred, poured into cold water, extracted with chloroform, and dried with magnesium sulfate. The solvent was evaporated under reduced pressure, and the residue was purified by using a Sephadex LH20 column (eluent: methanol) to give the title compound as a colorless oil. The yield was 79% (4.8 g).

【００４０】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：１．３６
（３Ｈ，ｓ，（ＣＨ_３ ）_２Ｃ），１．４２（３Ｈ，ｓ，
（ＣＨ_３ ）_２Ｃ），２．６８（４Ｈ，ｓ，ＣＯＣＨ_２ Ｃ
Ｈ_２ ＣＯ），３．４９−３．７６（ｍ，ｏｘｙｅｔｈｙ
ｌｅｎｅ Ｈ），５．１７（２Ｈ，ｂｒ，ＣＨ_２ −Ｐ
ｈ），７．３６（５Ｈ，ｍ，ＣＨ_２−Ｐｈ）^１３ Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：２４．８，２６．２
（（ＣＨ_３）_２Ｃ），２８．４，２８．５（ＣＯＣＨ _２
ＣＨ_２ＣＯ），６３．２，６５．８，６６．１，６８．
４，７０．３，７１．７（ＣＨ_２Ｏ−），７４．１（Ｃ
Ｈ _２ＣＨＣＨ_２），１０８．７（（ＣＨ_３） _２Ｃ），１
２７．６，１２７．７，１２７．９（ａｒｏｍａｔｉｃ
ＣＨ），１３５．２（ａｒｏｍａｔｉｃ Ｃ），１７
１．４，１７１．６（ＣＯＣＨ_２ＣＨ _２ＣＯ） ¹ H-NMR (CDCl ₃ ) δ: 1.36
_{(3H, s, (C H} 3) 2 C), 1.42 (3H, s,
(C H ₃ ) ₂ C), 2.68 (4H, s, COCH ₂ C
H ₂ CO), 3.49-3.76 (m, oxyethy
len H), 5.17 (2H, br, C H ₂ -P
^{_{h), 7.36 (5H, m}} , CH 2 - Ph) 13 C-NMR (CDCl 3) δ: 24.8,26.2
(( C H ₃ ) ₂ C), 28.4, 28.5 (CO C H ₂
C H ₂ CO), 63.2, 65.8, 66.1, 68.
_{4,70.3,71.7 (C H 2 O -)} , 74.1 (C
H ₂ C HCH ₂ ), 108.7 ((CH ₃ ) ₂ C ), 1
27.6, 127.7, 127.9 (aromatic
CH), 135.2 (aromatic C), 17
_{1.4,171.6 (C OCH 2 CH 2 C} O)

【００４１】１−２． グリセリニル−ポリエチレンジ
オキシエチルベンジルサクシネート（ポリオキシエチレ
ンの平均分子量：１０００）の合成1-2. Synthesis of glycerinyl-polyethylenedioxyethylbenzyl succinate (polyoxyethylene average molecular weight: 1000)

【００４２】１−１．で得た化合物（３．３６ｇ、２．
８ｍｍｏｌ）に４０ｍｌの６０％（ｖ／ｖ）酢酸水溶液
を加え、室温で２時間攪拌した。溶媒をトルエンで共沸
留去し、粗混合物を得た。粗混合物をシリカゲルクロマ
トグラフィー（ＣＨＣｌ_３：ＭｅＯＨ＝２０：１）を用
いて精製し、標題の化合物を無色油状物として得た。収
率は８６％であった。1-1. The compound obtained in 3. (3.36 g, 2.
To 8 mmol), 40 ml of 60% (v / v) acetic acid aqueous solution was added, and the mixture was stirred at room temperature for 2 hours. The solvent was distilled off azeotropically with toluene to obtain a crude mixture. The crude mixture was purified using silica gel chromatography (CHCl ₃ : MeOH = 20: 1) to give the title compound as a colorless oil. The yield was 86%.

【００４３】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：２．６８
（４Ｈ，ｓ，ＣＯＣＨ_２ ＣＨ_２ ＣＯ），３．４１−３．
６８（ｍ，ｏｘｙｅｔｈｙｌｅｎｅ Ｈ），５．１３
（２Ｈ，ｓ，ＣＨ_２ −ｐｈ），７．３６（５Ｈ，ｍ，Ｃ
Ｈ_２−ｐｈ）^１３ Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：２９．０，２９．１
（ＣＯＣＨ _２ＣＨ_２ＣＯ），６３．８６，６３．８９，
６６．５，６９．０，７０．８（ＣＨ_２Ｏ−），７２．
９（ＣＨ _２ＣＨＣＨ_２），１２８．１，１２８．２，１
２８．５，（ａｒｏｍａｔｉｃ ＣＨ），１３５．８
（ａｒｏｍａｔｉｃ Ｃ），１７２．０，１７２．２
（ＣＯＣＨ_２ＣＨ _２ＣＯ） ¹ H-NMR (CDCl ₃ ) δ: 2.68
_{(4H, s, COC H 2} C H 2 CO), 3.41-3.
68 (m, oxyethylene H), 5.13
_{(2H, s, C H 2} -ph), 7.36 (5H, m, C
^{_{H 2 - ph) 13 C-}} NMR (CDCl 3) δ: 29.0,29.1
_{(CO C H 2 C H 2} CO), 63.86,63.89,
_{66.5,69.0,70.8 (C H 2 O -)} , 72.
9 (CH ₂ CHCH ₂ ), 128.1, 128.2, 1
28.5, (aromatic CH), 135.8
(Aromatic C), 172.0, 172.2.
_{(C OCH 2 CH 2 C O} )

【００４４】１−３． １，２−ジステアロイル−３−
Ｏ−グリセリニルポリエチレンジオキシエチルベンジル
サクシネート（ポリオキシエチレンの平均分子量：１０
００）の合成1-3. 1,2-Distearoyl-3-
O-glycerinyl polyethylene dioxyethyl benzyl succinate (average molecular weight of polyoxyethylene: 10
00) synthesis

【００４５】ステアリン酸無水物（１．８ｇ、３．３ｍ
ｍｏｌ）を５０ｍｌのクロロホルムに溶解し、この溶液
を１−２．で得た化合物（１．７ｇ、１．５ｍｍｏ
ｌ）、トリエチルアミン（０．３９ｇ、３．９ｍｍｏ
ｌ）と４−ジメチルアミノピリジン（０．０９０ｇ、
０．７ｍｍｏｌ）を５０ｍｌのクロロホルムに溶解した
溶液に窒素下で５０〜６０℃、２時間かけて攪拌しなが
ら滴下した。反応混合物をクロロホルムで希釈し、硫酸
マグネシウムで乾燥させた。溶媒を留去し、残渣をセフ
ァデックス ＬＨ２０カラム（溶出液：メタノール）用
いて精製した。収率は５１％（１．３ｇ）であった。Stearic anhydride (1.8 g, 3.3 m)
mol) was dissolved in 50 ml of chloroform, and this solution was added to 1-2. Compound obtained in (1.7 g, 1.5 mmo
l), triethylamine (0.39 g, 3.9 mmo
l) and 4-dimethylaminopyridine (0.090 g,
0.7 mmol) was dissolved in 50 ml of chloroform and added dropwise under nitrogen at 50 to 60 ° C. for 2 hours while stirring. The reaction mixture was diluted with chloroform and dried over magnesium sulfate. The solvent was distilled off, and the residue was purified using a Sephadex LH20 column (eluent: methanol). The yield was 51% (1.3 g).

【００４６】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：δ０．８８
（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．３３Ｈｚ，ＣＨ_３ （Ｃ
Ｈ_２）_１６），１．２５（５６Ｈ，ｂｒ，ＣＨ_３（ＣＨ
_２ ）_１４ＣＨ_２ＣＨ_２−），１．５９−１．６６（４
Ｈ，ｍ，ＣＨ_３（ＣＨ_２）_１４ＣＨ_２ ＣＨ_２−），２．
２７−２．３４（４Ｈ，ｍ，ＣＨ_３（ＣＨ_２）_１４ＣＨ
_２ＣＨ_２ −），２．６９（４Ｈ，ｓ，ＣＯＣＨ_２ ＣＨ_２
ＣＯ），３．６０−３．７０（ｍ，ｏｘｙｅｔｈｙｌｅ
ｎｅ Ｈ），４．１５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．９２Ｈ
ｚ，Ｊ＝６．４２Ｈｚ，ｇｌｙｃｅｒｏｌ Ｈ），４．
２２−４．２４（２Ｈ，ｍ，（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_９ＣＨ
_２ＣＨ_２ ＯＣＯＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯ−），４．３４（１
Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．９２Ｈｚ，Ｊ＝３．６６Ｈｚ，ｇ
ｌｙｃｅｒｏｌ Ｈ），５．１４（２Ｈ，ｓ，ＣＨ_２ Ｐ
ｈ），５．２０−５．２２（１Ｈ，ｍ，ｇｌｙｃｅｒｏ
ｌ Ｈ），７．３５−７．３７（５Ｈ，ｍ，ＣＨ _２Ｐ
ｈ） ¹ H-NMR (CDCl ₃ ): δ 0.88
(6H, t, J = 6.33Hz, C H ₃ (C
H ₂ ) ₁₆ ), 1.25 (56H, br, CH ₃ (C H
₂ ) ₁₄ CH ₂ CH ₂ —), 1.59-1.66 (4
_{H, m, CH 3 (CH} 2) 14 C H 2 CH 2 -), 2.
_{27-2.34 (4H, m, CH 3} (CH 2) 14 CH
₂ C H ₂ −), 2.69 (4 H, s, COCH ₂ C H ₂
CO), 3.60-3.70 (m, oxyethyle
ne H), 4.15 (1H, dd, J = 11.92H
z, J = 6.42 Hz, glycerol H), 4.
_{22-4.24 (2H, m, (CH} 2 CH 2 O) 9 CH
_{2 C H 2 OCOCH 2 CH 2} CO -), 4.34 (1
H, dd, J = 11.92 Hz, J = 3.66 Hz, g
Lycerol H), 5.14 (2H, s, C H ₂ P
h), 5.20-5.22 (1H, m, glycero
1 H), 7.35-7.37 (5 H, m, CH ₂ P
h )

【００４７】１−４． １，２−ジステアロイル−３−
Ｏ−グリセリニル−ポリエチレンジオキシエチルサクシ
ネート（ポリオキシエチレンの平均分子量：１０００）
の合成1-4. 1,2-Distearoyl-3-
O-glycerinyl-polyethylenedioxyethyl succinate (average molecular weight of polyoxyethylene: 1000)
Synthesis of

【００４８】１−３．で得た化合物（１．３ｇ、０．８
ｍｍｏｌ）とＰｄ−Ｃ（１．０ｇ）を加えた１０ｍｌの
メタノールを水素下、室温で一晩攪拌した。触媒を濾過
により除去し、フィルターを乾燥させ、白色固体を得
た。収率は７８％（１．０ｇ）であった。1-3. Compound obtained in (1.3 g, 0.8
(10 mmol) and Pd-C (1.0 g) were added and 10 ml of methanol was stirred under hydrogen at room temperature overnight. The catalyst was removed by filtration and the filter dried to give a white solid. The yield was 78% (1.0 g).

【００４９】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）：０．８８
（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．３３Ｈｚ，ＣＨ_３ （Ｃ
Ｈ_２）_１６），１．２６（５６Ｈ，ｂｒ，ＣＨ_３（ＣＨ
_２ ）_１４ＣＨ_２ＣＨ_２−），１．６０（４Ｈ，ｍ，ＣＨ
_３（ＣＨ_２）_１４ＣＨ_２ ＣＨ_２−），２．２４−２．３
４（４Ｈ，ｍ，ＣＨ_３（ＣＨ_２）_１４ＣＨ_２ＣＨ
_２ −），２．６５（４Ｈ，ｓ，ＣＯＣＨ_２ ＣＨ_２ Ｃ
Ｏ），３．６０−３．６９（ｍ，ｏｘｙｅｔｈｙｌｅｎ
ｅ Ｈ），４．１５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．９２Ｈ
ｚ，Ｊ＝６．４２Ｈｚ，ｇｌｙｃｅｒｏｌ Ｈ），４．
２５−４．２７（２Ｈ，ｍ，（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_９ＣＨ
_２ＣＨ_２ ＯＣＯＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯ−），４．３２（１
Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．９２Ｈｚ，Ｊ＝３．６６Ｈｚ，ｇ
ｌｙｃｅｒｏｌ Ｈ），５．１８−５．２５（１Ｈ，
ｍ，ｇｌｙｃｅｒｏｌ Ｈ）^１３ Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：１４．１（ＣＨ
_３（ＣＨ_２）_１６ＣＯ），２２．７（ＣＨ_３（ＣＨ_２）
_１４ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯ），２９．６（ＣＨ_３（ＣＨ_２）
_１４ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯ），３２．０（ＣＨ_３（ＣＨ_２）
_１４ＣＨ _２ＣＨ_２ＣＯ），３４．２，３４．３（ＣＯＣ
Ｈ _２ＣＨ_２ＣＯ），７０．６（ＯＣＨ _２ＣＨ_２Ｏ），１
７２．０，１７３．１，１７３．４，１７３．８（ＣＯ
ＣＨ_２ＣＨ _２ＣＯ ａｎｄ ＣＨ_３（ＣＨ_２） _１６Ｃ
Ｏ）[0049]¹H-NMR (CDCl₃): 0.88
(6H, t, J = 6.33Hz, CH ₃ (C
H₂)₁₆), 1.26 (56H, br, CH₃(CH
₂ )₁₄CH₂CH₂-), 1.60 (4H, m, CH
₃(CH₂)₁₄CH ₂ CH₂-), 2.24-2.3
4 (4H, m, CH₃(CH₂)₁₄CH₂CH
₂ -), 2.65 (4H, s, COCH ₂ CH ₂ C
O), 3.60-3.69 (m, oxyethylen
e H), 4.15 (1H, dd, J = 11.92H
z, J = 6.42 Hz, glycerol H), 4.
25-4.27 (2H, m, (CH₂CH₂O)₉CH
₂CH ₂ OCOCH₂CH₂CO-), 4.32 (1
H, dd, J = 11.92 Hz, J = 3.66 Hz, g
Lycerol H), 5.18-5.25 (1H,
m, glycerol H)¹³ C-NMR (CDCl₃) Δ: 14.1 (CH
₃(CH₂)₁₆CO), 22.7 (CH₃(CH₂)
₁₄ CH₂CH₂CO), 29.6 (CH₃(CH₂)
₁₄CH₂CH₂CO), 32.0 (CH₃(CH₂)
₁₄CH ₂ CH₂CO), 34.2, 34.3 (COC
H ₂ CH₂CO), 70.6 (OCH ₂ CH₂O), 1
72.0, 173.1, 173.4, 173.8 (CO
CH₂CH ₂ CO and CH₃(CH₂) ₁₆ C
O)

【００５０】１−５． １，２−ジパルミトイル−３−
Ｏ−グリセリニル−ポリエチレンジオキシエチル−２，
３，４，６−テトラ−Ｏ−ベンジル−Ｄ−ガラクトシル
サクシネートの合成1-5. 1,2-dipalmitoyl-3-
O-glycerinyl-polyethylenedioxyethyl-2,
Synthesis of 3,4,6-tetra-O-benzyl-D-galactosyl succinate

【００５１】ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−ト
リス（ジメチルアミノ）フォスホニウム ヘキサフルオ
ロフォスフェート（０．４５ｇ、０．３４ｍｍｏｌ）
を、１−４．で得た化合物（０．３ｇ、０．１９ｍｍｏ
ｌ）、２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ベンジル−Ｄ−ガ
ラクトース（０．１２ｇ、０．２２ｍｍｏｌ）とトリエ
チルアミン（０．０５ｇ、０．５ｍｍｏｌ）を１０ｍｌ
のクロロホルムに溶解させた溶液に添加し、０℃で一晩
攪拌した。反応混合物を０．２Ｎの塩酸で一度洗い、Ｎ
ａＣｌで飽和させた。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥
させた。溶媒留去後、残渣をセファデックス ＬＨ２０
カラム（溶出液：クロロホルム：メタノール＝１：１）
を用いて精製し、標題の化合物を白色固体として得た。
収率は７４％（０．３ｇ）であった。Benzotriazol-1-yloxy-tris (dimethylamino) phosphonium hexafluorophosphate (0.45 g, 0.34 mmol)
1-4. Compound obtained in (0.3 g, 0.19 mmo
l), 2,3,4,6-tetra-O-benzyl-D-galactose (0.12 g, 0.22 mmol) and triethylamine (0.05 g, 0.5 mmol) in 10 ml.
Was added to the solution dissolved in chloroform and stirred at 0 ° C. overnight. The reaction mixture was washed once with 0.2N hydrochloric acid,
Saturated with aCl. The organic layer was dried with magnesium sulfate. After distilling off the solvent, the residue is Sephadex LH20.
Column (eluent: chloroform: methanol = 1: 1)
Purify with to give the title compound as a white solid.
The yield was 74% (0.3 g).

【００５２】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：０．８８
（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，ＣＨ_３ （Ｃ
Ｈ_２）_１４），１．２６（４８Ｈ，ｂｒ，ＣＨ_３（ＣＨ
_２ ）_１２ＣＨ_２ＣＨ_２−），１．６０（４Ｈ，ｍ，ＣＨ
_３（ＣＨ_２）_１２ＣＨ_２ ＣＨ_２−），２．２８−２．３
３（４Ｈ，ｍ，ＣＨ_３（ＣＨ_２）_１２ＣＨ_２ＣＨ
_２ −），２．６０−２．６５（４Ｈ，ｍ，ＣＯＣＨ_２ Ｃ
Ｈ_２ ＣＯ），３．５６−３．６９（ｍ，ｏｘｙｅｔｈｙ
ｌｅｎｅ Ｈ），３．９６（２Ｈ，ｍ，Ｈ−２，Ｈ−６
ａ），４．１５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，Ｊ＝１
１．５Ｈｚ，ＣＨ_２ ＯＣＯ（ＣＨ_２）_１４ＣＨ_３），
４．２０−４．２２（１Ｈ，ｍ，（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_９
ＣＨ_２ＣＨ_２ ＯＣＯＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯ−），４．２３−
４．２６（１Ｈ，ｍ，（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_９ＣＨ_２ Ｃ
Ｈ_２ ＯＣＯＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯ−），４．３４（１Ｈ，ｄ
ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１２．０Ｈｚ，ＣＨ_２ ＯＣＯ（Ｃ
Ｈ_２）_１４ＣＨ_３），４．３９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．
４Ｈｚ，ＯＣＨ_２ −ｐｈ），４．４４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝
１０．４Ｈｚ，ＯＣＨ_２ −ｐｈ），４．６１（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，ＯＣＨ_２ −ｐｈ），４．７１
（２Ｈ，ｓ，ＯＣＨ_２ −ｐｈ），４．７５（１Ｈ，ｄ，
Ｊ＝１１．５Ｈｚ，ＯＣＨ_２ −ｐｈ），４．８１（１
Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ，ＯＣＨ_２ −ｐｈ），４．９
３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，ＯＣＨ_２ −ｐｈ），
５．２１（１Ｈ，ｍ，ＣＨ_２ＣＨＣＨ_２），５．５８
（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，Ｈ−１），７．３０−
７．３３（２０Ｈ，ｍ，ＯＣＨ_２−ｐｈ）^１３ Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：１４．１（ＣＨ
_３（ＣＨ_２）_１６ＣＯ），２２．７（ＣＨ_３（ＣＨ_２）
_１４ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯ），２９．７（ＣＨ_３（ＣＨ_２）
_１４ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯ），３１．９（ＣＨ_３（ＣＨ_２）
_１４ＣＨ _２ＣＨ_２ＣＯ），３４．２，３４．３（ＣＯＣ
Ｈ _２ＣＨ_２ＣＯ），７０．６（ＯＣＨ _２ＣＨ_２Ｏ），９
４．６（Ｃ−１），１２７．６，１２７，７，１２７．
８，１２７．９，１２８．０，１２８．２，１２８．
３，１２８．４（ａｒｏｍａｔｉｃ ＣＨ），１３７．
７，１３８．２，１３８．３，１３８．５（ａｒｏｍａ
ｔｉｃＣ），１７０．８，１７１．９，１７３．１，１
７３．４（ＣＯＣＨ_２ＣＨ _２ＣＯ ａｎｄ ＣＨ_３（Ｃ
Ｈ_２） _１６ＣＯ） ¹ H-NMR (CDCl ₃ ) δ: 0.88
(6H, t, J = 6.4Hz, C H ₃ (C
H ₂ ) ₁₄ ), 1.26 (48 H , br, CH ₃ (C H
₂ ) ₁₂ CH ₂ CH ₂ —), 1.60 (4H, m, CH
_{3 (CH 2) 12 C H} 2 CH 2 -), 2.28-2.3
_{3 (4H, m, CH 3} (CH 2) 12 CH 2 C H
_{2 -), 2.60-2.65 (4H,} m, COC H 2 C
_{H 2 CO), 3.56-3.69 (m} , oxyethy
ren H), 3.96 (2H, m, H-2, H-6
a), 4.15 (1H, dd, J = 6.5 Hz, J = 1)
1.5 Hz, C H ₂ OCO (CH ₂ ) ₁₄ CH ₃ ),
_{4.20-4.22 (1H, m, (CH} 2 CH 2 O) 9
_{CH 2 C H 2 OCOCH 2 CH} 2 CO -), 4.23-
_{4.26 (1H, m, (CH} 2 CH 2 O) 9 CH 2 C
_{H 2 OCOCH 2 CH 2 CO -} ), 4.34 (1H, d
d, J = 4.0 Hz, 12.0 Hz, C H ₂ OCO (C
H ₂ ) ₁₄ CH ₃ ), 4.39 (1H, d, J = 10.
4 Hz, OC H ₂ -ph), 4.44 (1 H, d, J =
_{10.4Hz, OC H 2 -ph),} 4.61 (1H,
d, J = 11.5 Hz, OC H ₂ -ph), 4.71
_{(2H, s, OC H 2} -ph), 4.75 (1H, d,
J = 11.5 Hz, OC H ₂ -ph), 4.81 (1
H, d, J = 11.0 Hz, OC H ₂ -ph), 4.9
3 (1H, d, J = 11.5Hz, OC H 2 -ph),
_{5.21 (1H, m, CH 2} C H CH 2), 5.58
(1H, d, J = 7.5Hz, H-1), 7.30-
^{_{7.33 (20H, m, OCH 2}} - ph) 13 C-NMR (CDCl 3) δ: 14.1 (C H
₃ (CH ₂ ) ₁₆ CO, 22.7 (CH ₃ (CH ₂ )
_{14 C H 2 CH 2 CO)} , 29.7 (CH 3 (C H 2)
₁₄ CH ₂ CH ₂ CO), 31.9 (CH ₃ (CH ₂ ).
_{14 CH 2 C H 2 CO)} , 34.2,34.3 (CO C
H ₂ C H ₂ CO), 70.6 (O C H ₂ C H ₂ O), 9
4.6 (C-1), 127.6, 127, 7, 127.
8, 127.9, 128.0, 128.2, 128.
3, 128.4 (aromatic CH), 137.
7, 138.2, 138.3, 138.5 (aroma
ticC), 170.8, 171.9, 173.1, 1
_{73.4 (C OCH 2 CH 2 C} O and CH 3 (C
H ₂ ) ₁₆ C O)

【００５３】１−６． １，２−ジパルミトイル−３−
Ｏ−グリセリニル−ポリエチレンジオキシエチル−Ｄ−
ガラクトシル サクシネートの合成1-6. 1,2-dipalmitoyl-3-
O-glycerinyl-polyethylenedioxyethyl-D-
Synthesis of galactosyl succinate

【００５４】１−５．で得た化合物（０．２７ｇ、０．
１３ｍｍｏｌ）とＰｄ−Ｃ（０．２７ｇ）を加えた１０
ｍｌのエタノールを水素下、室温で３日間攪拌した。触
媒を濾過により除去し、フィルターを乾燥させ、残渣を
セファデックス ＬＨ２０カラム（溶出液：メタノー
ル）を用いて精製し、標題の化合物を白色固体として得
た。収率は６０％（０．１３ｇ）であった。1-5. The compound (0.27 g, 0.
13 mmol) and Pd-C (0.27 g) were added 10
ml of ethanol was stirred under hydrogen at room temperature for 3 days. The catalyst was removed by filtration, the filter was dried and the residue was purified using a Sephadex LH20 column (eluent: methanol) to give the title compound as a white solid. The yield was 60% (0.13 g).

【００５５】^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）δ：０．８８
（６Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，ＣＨ_３ （Ｃ
Ｈ_２）_１４），１．２６（４８Ｈ，ｂｒ，ＣＨ_３（ＣＨ
_２ ）_１２ＣＨ_２ＣＨ_２−），１．６０（４Ｈ，ｍ，ＣＨ
_３（ＣＨ_２）_１２ＣＨ_２ ＣＨ_２−），２．２８−２．３
３（４Ｈ，ｍ，ＣＨ_３（ＣＨ_２）_１２ＣＨ_２ＣＨ
_２ −），２．６０−２．６５（４Ｈ，ｍ，ＣＯＣＨ_２ Ｃ
Ｈ_２ ＣＯ），３．５８−３．７５（ｍ，ｏｘｙｅｔｈｙ
ｌｅｎｅ Ｈ），３．７８−３．７９（１Ｈ，ｍ，Ｈ−
２），４．１５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，Ｊ＝１
１．５Ｈｚ，ＣＨ_２ ＯＣＯ（ＣＨ_２）_１４ＣＨ_３），
４．２３−４．２６（２Ｈ，ｍ，（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_９
ＣＨ_２ＣＨ_２ ＯＣＯＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯ−），４．３４
（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，Ｃ
Ｈ_２ ＯＣＯ（ＣＨ_２）_１４ＣＨ_３），５．２０−５．２
２（１Ｈ，ｍ，ＣＨ_２ＣＨＣＨ_２），５．５３（１Ｈ，
ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，Ｈ−１） ¹ H-NMR (CDCl ₃ ) δ: 0.88
(6H, t, J = 6.4Hz, C H ₃ (C
H ₂ ) ₁₄ ), 1.26 (48 H , br, CH ₃ (C H
₂ ) ₁₂ CH ₂ CH ₂ —), 1.60 (4H, m, CH
_{3 (CH 2) 12 C H} 2 CH 2 -), 2.28-2.3
_{3 (4H, m, CH 3} (CH 2) 12 CH 2 C H
_{2 -), 2.60-2.65 (4H,} m, COC H 2 C
_{H 2 CO), 3.58-3.75 (m} , oxyethy
len H), 3.78-3.79 (1H, m, H-
2), 4.15 (1H, dd, J = 6.5Hz, J = 1
1.5 Hz, C H ₂ OCO (CH ₂ ) ₁₄ CH ₃ ),
_{4.23-4.26 (2H, m, (CH} 2 CH 2 O) 9
_{CH 2 C H 2 OCOCH 2 CH} 2 CO -), 4.34
(1H, dd, J = 4.0Hz, J = 12.0Hz, C
_{H 2 OCO (CH 2) 14} CH 3), 5.20-5.2
_{2 (1H, m, CH 2} C H CH 2), 5.53 (1H,
d, J = 8.5 Hz, H-1)

【００５６】実施例２ １，２−ジパルミトイル−３−
Ｏ−グリセリニル−ポリエチレンジオキシエチル−Ｄ−
ガラクトシル サクシネート（ポリオキシエチレンの平
均分子量：５００）の合成Example 2 1,2-dipalmitoyl-3-
O-glycerinyl-polyethylenedioxyethyl-D-
Synthesis of galactosyl succinate (average molecular weight of polyoxyethylene: 500)

【００５７】ポリオキシエチレンの平均分子量を１００
０から５００に変えた以外は実施例１と同様にして、標
題の化合物を得た。The average molecular weight of polyoxyethylene is 100
The title compound was obtained in the same manner as in Example 1 except that 0 to 500 was changed.

【００５８】実施例３ １，２−ジパルミトイル−３−
Ｏ−グリセリニル−ポリエチレンジオキシエチル−Ｄ−
ガラクトシル サクシネート（ポリオキシエチレンの平
均分子量：２０００）の合成Example 3 1,2-dipalmitoyl-3-
O-glycerinyl-polyethylenedioxyethyl-D-
Synthesis of galactosyl succinate (average molecular weight of polyoxyethylene: 2000)

【００５９】ポリオキシエチレンの平均分子量を１００
０から２０００に変えた以外は実施例１と同様にして、
標題の化合物を得た。The average molecular weight of polyoxyethylene is 100
In the same manner as in Example 1 except that the number was changed from 0 to 2000,
The title compound was obtained.

【００６０】[0060]

【試験例】[Test example]

試験例１．ＲＣＡ−レクチンによる凝集実験 Test Example 1. Aggregation experiment with RCA-lectin

【００６１】卵黄フォスファチジルコリン（以下、ＰＣ
と略する。）と実施例２の１，２−ジパルミトイル−３
−Ｏ−グリセリニル−ポリエチレンジオキシエチル−Ｄ
−ガラクトシル サクシネート（以下、Ｇａｌ−ＰＥＧ
（５００）−ｌｉｐｉｄと略する。）が８：２のモル比
を有するリポソーム（８００μＭリン脂質）をバンガム
法にて調製した。脂質の懸濁液はポリカーボネートメン
ブランフィルター（０．１μｍ）で数回押し出し濾過を
行い、サイジングした。ガラクトース結合レクチンとし
て知られているＲＣＡ（Ricinus communis agglutini
n）−レクチン（０．５ｍｇ／ｍｌ）を含有するトリス
−塩酸緩衝液（１ｍｌ）をリポソーム懸濁液（２ｍｌ）
に添加した。レクチンとの凝集は、波長４５０ｎｍで分
光光度計により濁度の増加として観察した。結果を図１
に示す。Egg yolk phosphatidylcholine (hereinafter PC
Abbreviated. ) And 1,2-dipalmitoyl-3 of Example 2
-O-glycerinyl-polyethylenedioxyethyl-D
-Galactosyl succinate (hereinafter Gal-PEG
Abbreviated as (500) -lipid. ) Had a molar ratio of 8: 2 (800 μM phospholipid) was prepared by the bangham method. The lipid suspension was sized by extrusion filtration with a polycarbonate membrane filter (0.1 μm) several times. RCA (Ricinus communis agglutini) known as a galactose-binding lectin
n) -Lectin (0.5 mg / ml) in Tris-HCl buffer (1 ml) in liposome suspension (2 ml)
Was added. Aggregation with lectins was observed as an increase in turbidity with a spectrophotometer at a wavelength of 450 nm. Figure 1 shows the results
Shown in

【００６２】[0062]

【図１】結果から明らかなように、Ｇａｌ−ＰＥＧ（５
００）−ｌｉｐｉｄを含有するリポソームは凝集が見ら
れた。FIG. 1 shows that Gal-PEG (5
Aggregation was observed for liposomes containing (00) -lipid.

【００６３】試験例２．Ｇａｌ−ＰＥＧ（５００）−ｌ
ｉｐｉｄの用量効果Test Example 2. Gal-PEG (500) -1
dose effect of ipid

【００６４】試験例１と同様にして、ＰＣとＧａｌ−Ｐ
ＥＧ（５００）−ｌｉｐｉｄのモル比を変えたリポソー
ム懸濁液を調製し、凝集を観察した。結果を図２に示
す。In the same manner as in Test Example 1, PC and Gal-P were used.
Liposome suspensions with different EG (500) -lipid molar ratios were prepared, and aggregation was observed. The results are shown in FIG.

【００６５】[0065]

【図２】結果から明らかなように、Ｇａｌ−ＰＥＧ（５
００）−ｌｉｐｉｄを含有する種々の組成のリポソーム
は全てレクチンとの凝集が見られた。FIG. 2 shows that Gal-PEG (5
Aggregation with lectins was observed in all liposomes of various compositions containing (00) -lipid.

【００６６】[0066]

【発明の効果】本発明のガラクトース誘導体を含有する
脂質膜構造体は、膜の表面上にガラクトース残基を有す
るため、ＲＣＡ−レクチンの添加により凝集した。INDUSTRIAL APPLICABILITY The lipid membrane structure containing the galactose derivative of the present invention has galactose residues on the surface of the membrane and therefore aggregated by the addition of RCA-lectin.

【００６７】したがって、本発明のガラクトース誘導体
およびガラクトース誘導体を含有する脂質膜構造体は、
肝実質細胞に代表されるガラクトースレセプターを有す
る細胞へのターゲッティングに有用である。Therefore, the galactose derivative and the lipid membrane structure containing the galactose derivative of the present invention are
It is useful for targeting cells having a galactose receptor represented by liver parenchymal cells.

【図面の簡単な説明】[Brief description of drawings]

【図１】リポソーム表面上にガラクトース残基が露出し
ているかどうかを確認するためのＲＣＡ−レクチンによ
る凝集実験の結果を示す図である。FIG. 1 is a diagram showing the results of an aggregation experiment with RCA-lectin for confirming whether galactose residues are exposed on the liposome surface.

【図２】ＲＣＡ−レクチンが誘発するリポソームの凝集
におけるＧａｌ−ＰＥＧ（５００）−ｌｉｐｉｄの用量
における効果を示す図である。FIG. 2 shows the effect of Gal-PEG (500) -lipid dose on RCA-lectin-induced liposome aggregation.

Claims (6)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項１】 一般式（Ｉ） 【化１】 ［式中、Ｒ^１およびＲ^２は各々独立して炭素数１２〜３
０の飽和または不飽和脂肪酸残基を意味する。ｎは２〜
５０の整数を意味する。］で表されるガラクトース誘導
体。1. A compound of the general formula (I) [In the formula, R ¹ and R ² each independently have 12 to 3 carbon atoms.
It means 0 saturated or unsaturated fatty acid residues. n is 2
It means an integer of 50. ] The galactose derivative represented by these. 【請求項２】 一般式（Ｉ） 【化２】 ［式中、Ｒ^１およびＲ^２は各々独立して炭素数１２〜３
０の飽和または不飽和脂肪酸残基を意味する。ｎは２〜
５０の整数を意味する。］で表されるガラクトース誘導
体を含有する脂質膜構造体。2. A compound of the general formula (I) [In the formula, R ¹ and R ² each independently have 12 to 3 carbon atoms.
It means 0 saturated or unsaturated fatty acid residues. n is 2
It means an integer of 50. ] The lipid membrane structure containing the galactose derivative represented by these. 【請求項３】 薬物および／または遺伝子を保持した、
一般式（Ｉ） 【化３】 ［式中、Ｒ^１およびＲ^２は各々独立して炭素数１２〜３
０の飽和または不飽和脂肪酸残基を意味する。ｎは２〜
５０の整数を意味する。］で表されるガラクトース誘導
体を含有する脂質膜構造体。3. A drug and / or gene-carrying gene,
General formula (I) [In the formula, R ¹ and R ² each independently have 12 to 3 carbon atoms.
It means 0 saturated or unsaturated fatty acid residues. n is 2
It means an integer of 50. ] The lipid membrane structure containing the galactose derivative represented by these. 【請求項４】 一般式（Ｉ）中のＲ^１およびＲ^２が各々
パルミトイル基を意味し、ｎが１０を意味する請求項１
に記載のガラクトース誘導体。4. R ¹ and R ² in the general formula (I) each represent a palmitoyl group, and n represents 10.
The galactose derivative according to. 【請求項５】 一般式（Ｉ）中のＲ^１およびＲ^２が各々
パルミトイル基を意味し、ｎが１０を意味する請求項２
または３に記載の脂質膜構造体。5. R ¹ and R ² in the general formula (I) each represent a palmitoyl group, and n represents 10.
Or the lipid membrane structure according to 3. 【請求項６】 請求項２、３または５のいずれか１項に
記載の脂質膜構造体がリポソームである脂質膜構造体。6. The lipid membrane structure according to claim 2, 3 or 5, wherein the lipid membrane structure is a liposome.