JPH09183764A - Ｎ−ベンゾイルプロリンエステル誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【構成】下記の一般式（Ｉ） 【化１】 ［式中、Ｒ¹はＡ−ＣＯ−ＣＨ＝ＣＨ−基（Ａはフェニ
ル基等）又はＮＨＲ²で示されるアミノ基（Ｒ²は水素原
子、低級アルキル基、フェニル基等）；Ｘは酸素原子又
はＮＲ³で示されるイミノ基（Ｒ³は水素原子、低級アル
キル基等）；Ｙは酸素原子又は硫黄原子］で表わされる
Ｎ−ベンゾイルプロリンエステル誘導体。 【効果】本発明化合物（Ｉ）は、ＣＣＫ−Ａ、ＣＣＫ−
Ｂ及びガストリン受容体拮抗作用を有し、ヘリコバクタ
ー・ピロリに対して強い抗菌作用を示すことから、消化
器官系疾患の予防及び治療薬として有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、コレシストキニン（Ｃ
ＣＫ）−Ａ、Ｂ受容体及びガストリン受容体に対して優
れた拮抗作用を有し、さらにヘリコバクター・ピロリ
（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ、以下ＨＰ
と略称する。）に対して強い抗菌作用を示すことから、
消化器官系疾患、特に消化性潰瘍等の予防及び治療に有
用なＮ−ベンゾイルプロリンエステル誘導体を含有する
医薬組成物に関する。

【０００２】

【従来の技術】本発明化合物と類似の構造を持ったプロ
リン誘導体は、種々提案されており、例えばＡＣＥ阻害
作用を有する降圧剤であるカプトプリル、エナラプリル
（特開昭５２−１１６４５７号公報）等が知られてい
る。また、プロリン残基を有するペプチド誘導体として
は、冠疾患及び器質性脳症候群治療剤（特開昭６２−２
１５５２３号公報）、プロリンエンドペプチダーゼ阻害
作用を有する抗健忘症剤（特開昭６４−６８３９６号公
報）及びＣＣＫ−ガストリン受容体拮抗剤（アメリカ特
許 ５３４０８０１号）等が知られている。さらに、特
開平７−２５２２１７号公報には蛋白分解酵素阻害活性
を有する経口抗凝固剤及び膵疾患治療剤等に有用なプロ
リンアミド誘導体が開示されている。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】ＨＰに対する抗菌作用
並びにこの作用を有する物質については、日本臨床第５
１巻、第１２号（１９９３年）に記載されている。すな
わち、ＨＰはヒト胃粘膜表層部から分離された微好気性
グラム陰性螺旋状短桿菌であり、ヒトの胃及び十二指腸
疾患に深く関与していることが指摘されている。特に本
菌の感染が消化性潰瘍の治癒の遷延と難治化および再発
の大きな要因であることが明らかにされるに従って、消
化性潰瘍の再発予防及び治療をする上でＨＰの除菌を試
みることが必須であると考えられるようになった。現在
のところ、ＨＰを除菌するためには、ペニシリン系、セ
ファロスポリン系、テトラサイクリン系、ニュ−キノロ
ン系、マクロライド系等の抗生物質、ビスマス製剤、プ
ロトンポンプインヒビター、ヒスタミンＨ₂受容体拮抗
剤及びプラウトノ−ル、ソファルコン、塩酸ベネキサ−
ト等の抗潰瘍剤とを組み合わせて投与する併用療法が試
みられている。しかしながら、ＨＰに対して未だ充分な
除菌効果が得られていないのが現状で、より有効な抗菌
剤が望まれている。一方、ＣＣＫ−Ａ、ＣＣＫ−Ｂ及び
ガストリン受容体拮抗作用並びにそれらの作用を有する
物質についてはアナールス オブ ザ ニューヨーク
アカデミーオブ サイエンス、第７１３巻、１〜１６７
ページ（１９９４年）［Annals of The New York Acade
my of Sciences,713,1〜167(1994)］に記載されてい
る。すなわち、ＣＣＫ及びガストリン受容体に対して拮
抗作用を示す物質は、消化器官系疾患の予防及び治療に
有効であるとして、現在までに数多くの拮抗性物質が見
い出されている。また、消化性潰瘍の予防及び治療薬と
してもプログルミドをはじめとして、グルタミン酸誘導
体、Ｎ−アシルトリプトファン誘導体、グリシン尿素誘
導体、１，４−ベンゾジアゼピン誘導体等数多くのＣＣ
Ｋ及びガストリン受容体拮抗物質が見い出されている。
以上のように消化器官系疾患、特に消化性潰瘍の再発予
防及び治療には、ＨＰに対する抗菌剤やＣＣＫ及びガス
トリン受容体拮抗物質が有用であることが知られてい
る。しかしながら、消化器官系疾患、特に消化性潰瘍の
再発予防及び治療に有用であると考えられるＣＣＫ及び
ガストリン受容体拮抗作用並びにＨＰに対する抗菌作用
を併せ持った医薬品は現在のところ知られておらず、両
作用を併せ持つことで、より優れた予防及び治療効果が
期待できる。従って、本発明は、ＣＣＫ−Ａ、ＣＣＫ−
Ｂ及びガストリン受容体拮抗作用を有し、さらに、消化
性潰瘍に深く関与していると考えられているＨＰに対し
て優れた抗菌作用を併せ持つ消化器官系疾患、特に消化
性潰瘍の再発予防及び治療するための医薬組成物を提供
することを課題とする。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは前記のよう
な状況に鑑みて、鋭意研究を行った結果、従来のプロリ
ン誘導体とは異なる新規なＮ−ベンゾイルプロリンエス
テル誘導体がＣＣＫ−Ａ、ＣＣＫ−Ｂ及びガストリン受
容体拮抗作用を有し、かつＨＰに対して強い抗菌作用を
有することを見い出し、本発明を完成することができ
た。

【０００５】すなわち、本発明は、下記の一般式（Ｉ）
で表されるＮ−ベンゾイルプロリンエステル誘導体を有
効成分とするＣＣＫ−Ａ、ＣＣＫ−Ｂ、ガストリン受容
体拮抗作用及びＨＰに対する抗菌作用を有する消化器官
系疾患、特に消化性潰瘍の再発予防及び治療するための
医薬組成物に関する。

【０００６】

【化２】

【０００７】［式中、Ｒ¹はＡ−ＣＯ−ＣＨ＝ＣＨ−基
（Ａは置換基を有していてもよいフェニル基を表す。）
又はＮＨＲ²で示されるアミノ基（Ｒ²は水素原子、低級
アルキル基、シクロアルキル基、低級アルケニル基、ア
ラルキル基又はフェニル基を表す。）を表す。Ｘは酸素
原子又はＮＲ³で示されるイミノ基（Ｒ³は水素原子、低
級アルキル基、ベンジル基又はフェニル基を表す。）を
表す。Ｙは酸素原子又は硫黄原子を表す。］で表され
る。

【０００８】以下に、上記一般式（Ｉ）で表される本発
明のＮ−ベンゾイルプロリンエステル誘導体におけるＲ
¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｘ及びＹの具体例を示す。

【０００９】Ｒ¹が、Ａ−ＣＯ−ＣＨ＝ＣＨ−基で示さ
れる場合のＡとしては、フェニル基、４−トリル基、
３，４−ジメチルフェニル基、４−メトキシフェニル
基、３，４−ジメトキシフェニル基、４−ヒドロキシフ
ェニル基及び４−クロロフェニル基等を挙げることがで
きるが、特にフェニル基が好ましい。また、Ｒ¹がＮＨ
Ｒ²で示されるアミノ基である場合のＲ²としては、メチ
ル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル
基、イソブチル基、シクロヘキシル基、アリル基、ベン
ジル基、フェネチル基及びフェニル基等を挙げることが
できるが、特にメチル基又はフェニル基が好ましい。

【００１０】Ｘとしては、酸素原子が好ましい。

【００１１】また、ＸがＮＲ³で示されるイミノ基であ
る場合のＲ³としては、水素原子、メチル基、エチル
基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチ
ル基、ベンジル基及びフェニル基等を挙げることができ
るが、特に水素原子又はメチル基が好ましい。

【００１２】Ｙとしては、酸素原子又は硫黄原子が好ま
しい。

【００１３】更に、本発明化合物（Ｉ）は、少なくとも
１つの不斉中心を含有しており、これらの光学異性体も
本発明に含まれる。更に本発明化合物（Ｉ）には、構造
による幾何異性体も含まれる。

【００１４】上記一般式（Ｉ）で表されるＮ−ベンゾイ
ルプロリンエステル誘導体は、種々の方法で製造できる
が、代表的な方法を挙げれば以下の通りである。

【００１５】

【化３】

【００１６】［式中、Ｒ¹、Ｘ及びＹは前記と同義であ
る。］

【００１７】本発明に含まれる化合物（Ｉ）は、２−置
換エチルアルコール誘導体（II）とＮ−ベンゾイルプロ
リン（III）を、通常、塩基の存在又は非存在下で溶媒
中、ペプチド合成に使用されるカップリング試薬を用い
て反応させることにより製造できる。反応に用いる溶媒
は、塩化メチレン、クロロホルム、四塩化炭素、ベンゼ
ン、トルエン、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラ
ン、ジオキサン、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホ
ルムアミド、ジメチルスルホキシド等の有機溶媒を挙げ
ることができるが、特に塩化メチレン及びテトラヒドロ
フランが好ましい。また、この反応に用いる塩基として
は、４−ジメチルアミノピリジンが好ましい。さらにカ
ップリング試薬としては、Ｎ，Ｎ′−ジシクロヘキシル
カルボジイミド、Ｎ，Ｎ′−カルボニルジイミダゾー
ル、Ｎ，Ｎ′−ジスクシンイミドカーボナート、Ｎ，
Ｎ′−ジスクシンイミジルオキザラート等を挙げること
ができるが、特にＮ，Ｎ′−ジシクロヘキシルカルボジ
イミドが好ましい。反応温度は０℃から溶媒の沸点程度
であるが、特に室温程度が好ましく、反応時間は通常３
０分から４８時間の範囲内で行うことができる。

【００１８】前記の反応において原料として用いた２−
置換エチルアルコール誘導体（IIａ、IIｂ及びIIｃ）
は、以下の方法により製造することができる。

【００１９】

【化４】

【００２０】［式中、Ｒ²、Ｒ³及びＹは前記と同義であ
る。］

【００２１】化合物（IIａ）は、化合物（IV）と化合物
（Ｖ）を原料に用い、ジャーナルオブ ファーマシュチ
カル サイエンス、第５９巻、第１０号、１５１５〜１
５１８ページ（１９７０年）［J. Pharm. Sci., 59(1
0), 1515〜1518(1970)］に記載の方法に従って合成でき
る。

【００２２】

【化５】

【００２３】［式中、Ｒ¹及びＲ³は前記と同義であ
る。］

【００２４】化合物（IIｂ）は、化合物（VI）と化合物
（VII）を原料に用い、ＷＯ９４／１４７４９号に記載
の方法に従って合成できる。

【００２５】一方、化合物（IIｃ）は、化合物（VI）と
化合物（IV）を原料に用い、ジャーナル オブ ファー
マシー アンド ファーマコロジー、第２９巻、１４７
〜１５２ページ（１９７７年）［J. Pharm. Pharmac.,
29, 147〜152(1977)］に記載の方法に従って合成でき
る。

【００２６】本発明化合物（Ｉ）はＣＣＫ−Ａ、ＣＣＫ
−Ｂ、ガストリン受容体拮抗作用及びヘリコバクター・
ピロリに対する強い抗菌作用を有することから消化器官
系疾患の予防及び治療に有用である。本発明化合物を医
薬として用いる場合の一般的な製剤の形態としては、例
えば、錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、シロップ剤又
は注射剤などとして、経口又は非経口的に投与すること
ができる。

【００２７】製剤化の際は、通常の製剤担体を用い、常
法に従って製造できる。すなわち、経口用固形製剤を製
造する場合は、主薬に賦形剤及び必要に応じて結合剤、
崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味矯臭剤などを加えた後、
常法に従って錠剤、被覆製剤、顆粒剤、散剤、カプセル
剤などとする。ここで賦形剤としては、例えば乳糖、シ
ョ糖、デンプン、タルク、セルロース、デキストリン等
が用いられる。これらの錠剤、顆粒剤に糖衣、ゼラチン
衣、その他必要により適宜コーティングを施すことは何
等差し支えない。また、非経口投与のための注射剤を調
製する場合には、主薬に溶剤又は懸濁剤、例えば水、プ
ロピレングリコール、ポリエチレングリコール、レシチ
ン等が用いられ、必要に応じてｐＨ調整剤、緩衝剤、安
定化剤、可溶化剤などを添加し、常法により皮下、筋肉
内、静脈内用注射剤とすることができる。

【００２８】本発明化合物（Ｉ）の投与量及び投与回数
は患者の症状、年齢、体重等に応じて適宜選択すること
ができる。例えば、一般成人に対して一日５〜１５００
ｍｇ、好ましくは２０〜８００ｍｇを１回から数回に分
けて投与してもよいし、間欠投与してもよい。また、注
射剤として用いる場合には、一回量０．０１〜１００ｍ
ｇを連続又は間欠投与してもよい。

【００２９】

【実施例】以下に、本発明を実施例、製剤例及び試験例
により具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例、
製剤例及び試験例に限定されるものではない。

【００３０】〔実施例１〕 Ｎ−［Ｎ−ベンゾイル−（Ｓ）−プロリノイルオキシエ
チル］−Ｎ′−フェニル尿素の合成 Ｎ−ベンゾイル−（Ｓ）−プロリン（２．１９ｇ，１０
ｍｍｏｌ）とＮ−（２−ヒドロキシエチル）−Ｎ′−フ
ェニル尿素（１．８ｇ，１０ｍｍｏｌ）を塩化メチレン
（５０ｍｌ）に溶解し、４−ジメチアミノピリジン
（０．１２２ｇ，１ｍｍｏｌ）を加えた後、室温でＮ、
Ｎ′−ジシクロヘキシルカルボジイミド（２．０６ｇ，
１０ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（１０ｍｌ）溶液を加え
た。室温で２０時間攪拌し、不溶物を濾過した後、濾液
を減圧乾固し、残査に酢酸エチル（５０ｍｌ）を加えて
溶解し、再度不溶物を濾過した。濾液を２Ｎ塩酸洗浄、
飽和炭酸ナトリウム水溶液洗浄、次いで飽和食塩水洗浄
した。無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。得
られた残留物をシリカゲルクロマトグラフィー〔溶出溶
媒：クロロホルム−酢酸エチル（５：１から１：１）の
混合溶媒〕により精製し、表記化合物（３．５５ｇ，９
３％）を無色油状物として得た。

【００３１】［α］_D；−３７．７（２４℃，ｃ＝１．
１，ＭｅＯＨ） ＩＲ（ｎｕｊｏｌ法）ν_max ｃｍ^-1；３３５２（Ｎ
Ｈ），１７３４（Ｃ＝Ｏ） ＦＡＢ−Ｍａｓｓ（＋） ｍ／ｚ；３８２（Ｍ＋１）^{+ 1} Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ；１．８−２．２ ａｎｄ
２．４−２．６（３Ｈ ａｎｄ １Ｈ，ｍ，ｐｒｏｌｉ
ｎｅ−ＣＨ₂ＣＨ₂），３．２５−３．４５，３．５５−
３．８５，３．９５−４．１，４．５−４．６５ ａｎ
ｄ ４．７−４．８５（１Ｈ，３Ｈ，１Ｈ，１Ｈ ａｎ
ｄ １Ｈ，ｍ，ＣＨ₂Ｎ，ＣＨＮ ａｎｄ ＣＨ₂Ｏ），
６．１３（１Ｈ，ｍ，ＮＨ），６．８−６．９ ａｎｄ
７．０−７．１５（１Ｈ ａｎｄ ４Ｈ，ｍ，Ａｒ−
Ｈ），７．２６（１Ｈ，ｓ，ＮＨ），７．４−７．６５
（５Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ） 元素分析（Ｃ₂₁Ｈ₂₃Ｎ₃Ｏ₄） 理論値（％）：Ｃ，６６．１３；Ｈ，６．０８；Ｎ，１
１．０２ 実測値（％）：Ｃ，６５．６７；Ｈ，５．８５；Ｎ，１
０．９０

【００３２】〔実施例２から６〕実施例１と同様の方法
で得られた化合物を一括して表１に示した。

【００３３】

【表１】

【００３４】〔実施例７〕 ［Ｎ−ベンゾイル−（Ｓ）−プロリノイルオキシ］エチ
ル−（Ｅ）−４−オキソ−４−フェニル−２−ブテノエ
ートの合成 Ｎ−ベンゾイル−（Ｓ）−プロリン（２．１９ｇ，１０
ｍｍｏｌ）と（Ｅ）−２−ヒドロキシエチル−４−オキ
ソ−４−フェニル−２−ブテノエート（２．２１ｇ，１
０ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（５０ｍｌ）に溶解し、４
−ジメチルアミノピリジン（０．１２２ｇ，１ｍｍｏ
ｌ）を加えた後、室温でＮ、Ｎ′−ジシクロヘキシルカ
ルボジイミド（２．０６ｇ，１０ｍｍｏｌ）の塩化メチ
レン（１０ｍｌ）溶液を加えた。室温で２０時間攪拌
し、不溶物を濾過した後、濾液を減圧乾固し、残査に酢
酸エチル（５０ｍｌ）を加えて溶解し、再度不溶物を濾
過した。濾液を２Ｎ塩酸洗浄、飽和炭酸ナトリウム水溶
液洗浄、次いで飽和食塩水洗浄した。無水硫酸ナトリウ
ムで乾燥後、減圧濃縮した。得られた残留物をシリカゲ
ルクロマトグラフィー〔溶出溶媒：クロロホルム−メタ
ノール（５０：１）さらにヘキサン−酢酸エチル（２：
１）の混合溶媒〕により精製し、表記化合物（１．３
ｇ，３１％）を淡黄色油状物として得た。

【００３５】［α］_D；−３９．７（２４℃，ｃ＝１．
０３，ＭｅＯＨ） ＩＲ（ｆｉｌｍ法）ν_max ｃｍ^-1；１７２６（Ｃ＝Ｏ） ＦＡＢ−Ｍａｓｓ（＋） ｍ／ｚ；４２２（Ｍ＋１）^{+ 1} Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ；１．８−２．１５ ａｎ
ｄ ２．２５−２．４５（３Ｈ ａｎｄ １Ｈ，ｍ，ｐｒ
ｏｌｉｎｅ−ＣＨ₂ＣＨ₂），３．４５−３．７（２Ｈ，
ｍ，ＣＨ₂Ｎ），４．３５−４．５５（４Ｈ，ｍ，ＣＨ₂
Ｏ），４．６５−４．７５（１Ｈ，ｍ，ＣＨＮ），６．
８８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，＝ＣＨ），７．３
−７．７（８Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ），７．９−８．０５
（３Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ ａｎｄ ＝ＣＨ） 元素分析（Ｃ₂₄Ｈ₂₃ＮＯ₆） 理論値（％）：Ｃ，６８．４０；Ｈ，５．５０；Ｎ，
３．３２ 実測値（％）：Ｃ，６７．９０；Ｈ，５．２６；Ｎ，
３．３２

【００３６】〔実施例８〕 Ｎ−｛［Ｎ−ベンゾイル−（Ｓ）−プロリノイルオキ
シ］エチル｝−（Ｅ）−４−オキソ−４−フェニル−２
−ブテナミドの合成 実施例１と同様の方法で表記化合物（２．６５ｇ，６３
％）を淡黄色油状物として得た。 ［α］_D；−２９．９（２６℃，ｃ＝１．０７，ＭｅＯ
Ｈ） ＩＲ（ｆｉｌｍ法）ν_max ｃｍ^-1；３３００（ＮＨ），
１７４２（Ｃ＝Ｏ） ＦＡＢ−Ｍａｓｓ（＋） ｍ／ｚ；４２１（Ｍ＋１）^{+ 1} Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ；１．８−２．２ ａｎｄ
２．２８−２．４２（３Ｈ ａｎｄ １Ｈ，ｍ，ｐｒ
ｏｌｉｎｅ−ＣＨ₂ＣＨ₂），３．５−３．８５（２Ｈ，
ｍ，ＣＨ₂Ｎ），４．２５−４．４６（３Ｈ，ｍ，ＣＨ₂
Ｏ ａｎｄ ＣＨＮ），６．９３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１
５．３Ｈｚ，＝ＣＨ），７．３−７．６５（９Ｈ，ｍ，
Ａｒ−Ｈ ａｎｄ ＮＨ），７．８６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝
１５．３Ｈｚ，＝ＣＨ），７．９５−８．０５（２Ｈ，
ｍ，Ａｒ−Ｈ ） 元素分析（Ｃ₂₄Ｈ₂₄Ｎ₂Ｏ₅） 理論値（％）：Ｃ，６８．５６；Ｈ，５．７５；Ｎ，
６．６６ 実測値（％）：Ｃ，６８．６７；Ｈ，５．５８；Ｎ，
６．３１

【００３７】〔実施例９〕 Ｎ−｛［Ｎ−ベンゾイル−（Ｓ）−プロリノイルオキ
シ］エチル｝−Ｎ−メチル−（Ｅ）−４−オキソ−４−
フェニル−２−ブテナミドの合成 実施例１と同様の方法で表記化合物（０．９５ｇ，２２
％）を淡黄色油状物として得た。 ［α］_D；−４９．２（２５℃，ｃ＝１．００，ＭｅＯ
Ｈ） ＩＲ（ｆｉｌｍ法）ν_max ｃｍ^-1；１７４４（Ｃ＝Ｏ） ＦＡＢ−Ｍａｓｓ（＋） ｍ／ｚ；４３５（Ｍ＋１）^{+ 1} Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ；１．８−２．１５ ａｎ
ｄ ２．２５−２．４（３Ｈ ａｎｄ １Ｈ，ｍ，ｐｒｏ
ｌｉｎｅ−ＣＨ₂ＣＨ₂），３．１４ ａｎｄ ３．２８
（３Ｈ，ｅａｃｈ ｓ，Ｎ−ＣＨ₃），３．４５−３．
９（２Ｈ，ｍ，ＣＨ₂Ｎ），４．３−４．７（３Ｈ，
ｍ，ＣＨ₂Ｏ ａｎｄ ＣＨＮ），７．３−７．７（９
Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ ａｎｄ ＝ＣＨ），７．９３（１
Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．０Ｈｚ，＝ＣＨ），８．０−８．１
（２Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ ） 元素分析（Ｃ₂₅Ｈ₂₆Ｎ₂Ｏ₅） 理論値（％）：Ｃ，６９．１１；Ｈ，６．０３；Ｎ，
６．４５ 実測値（％）：Ｃ，６８．７１；Ｈ，６．１７；Ｎ，
６．１７

【００３８】〔製剤例１〕実施例８の化合物及び乳糖を
混合粉砕し、この混合物に乳糖、コーンスターチ、微結
晶セルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ステア
リン酸マグネシウム、カルボキシメチルセルロースカル
シウム、タルクを加えて、さらに均一に混合し、打錠機
を用いて加圧成型して有効成分５０ｍｇを含有する２０
０ｍｇ／錠の錠剤を製造した。 実施例８の化合物 ５０ｍｇ 乳糖 ６０ｍｇ コーンスターチ ４０ｍｇ 微結晶セルロース ３０ｍｇ ヒドロキシプロピルセルロース ８ｍｇ ステアリン酸マグネシウム １ｍｇ カルボキシメチルセルロースカルシウム １０ｍｇ タルク １ｍｇ 計 ２００ｍｇ

【００３９】〔製剤例２〕下記成分を混合し、打錠機を
用いて加圧成型して有効成分１００ｍｇを含有する２２
５ｍｇ／錠の錠剤を製造した。 実施例９の化合物 １００ｍｇ 微結晶セルロース ５５ｍｇ 乳糖 ４９ｍｇ ステアリン酸マグネシウム ２ｍｇ ヒドロキシプロピルセルロース ２ｍｇ カルボキシメチルセルロースナトリウム １５ｍｇ タルク ２ｍｇ 計 ２２５ｍｇ

【００４０】〔製剤例３〕実施例７の化合物及び乳糖を
混合粉砕し、この混合物を乳糖、コーンスターチ、ステ
アリン酸マグネシウム、カルボキシメチルセルロースカ
ルシウム、ヒドロキシプロピルセルロース及び軽質無水
ケイ酸を加えて、さらに均一に混合した。これを１カプ
セルあたり２００ｍｇの割合で３号ゼラチン硬カプセル
に充填してカプセル剤を製造した。 実施例７の化合物 ５０ｍｇ 乳糖 １１５ｍｇ コーンスターチ ２０ｍｇ ステアリン酸マグネシウム １ｍｇ カルボキシメチルセルロースカルシウム １０ｍｇ ヒドロキシプロピルセルロース ２ｍｇ 軽質無水ケイ酸 ２ｍｇ 計 ２００ｍｇ

【００４１】〔製剤例４〕下記化合物をよく混合した
後、湿潤液（３０％エタノール）を加えて練合し、押し
出し造粒機で造粒し、直ちにマルメライザーで整粒した
後、乾燥、篩過して１２〜４２メッシュの柱状顆粒を製
造した。 柱状顆粒２００ｍｇ中の組成 実施例８の化合物 ５０ｍｇ 乳糖 ５９ｍｇ コーンスターチ ４０ｍｇ 微結晶セルロース ３９ｍｇ ヒドロキシプロピルセルロース ２ｍｇ カルボキシメチルセルロース １０ｍｇ

【００４２】〔製剤例５〕実施例７の化合物を１ｍｌあ
たり１ｍｇ含有する下記成分からなる注射剤を常法によ
り製造した。 実施例７の化合物 １０ｍｇ 注射用ポリエチレングリコール４００ ２ｍｌ 塩化ナトリウム １ｍｇ 注射用蒸留水を加えて全量１０ｍｌとする。

【００４３】〔試験例１〕 インビトロにおけるＣＣＫ
−Ａ、ＣＣＫ−Ｂ及びガストリン受容体拮抗作用に関す
る試験 （１） ＣＣＫ−Ａ及びＣＣＫ−Ｂ受容体拮抗作用 ＣＣＫ受容体標品の作成：ｄｄＹ系雄性マウスを断頭屠
殺後、膵臓（ＣＣＫ−Ａ）及び大脳皮質（ＣＣＫ−Ｂ）
を速やかに摘出した。 受容体標本（粗膜分画）の調製：マウスを断頭屠殺し、
直ちに大脳及び膵臓を取り出し、あらかじめ冷却してお
いたＰＢＳ液で洗浄し、大脳皮質を分離した。膵臓及び
大脳皮質は冷却した５０ｍＭトリスバッファー（ｐＨ
７．４）で再度洗浄した。膵臓は０．５〜１．０ｇ／バ
イアルに秤量し、使用時まで−８０℃に保存した。１０
倍量の５０ｍＭトリスバッファーを加え、テフロン−ガ
ラスホモジナイザーにてホモジナイズ（７ストローク）
し、さらにポリトロンホモジナイザーにて２０秒間ホモ
ジナイズした。１５分間４００００×ｇにて遠心分離
し、ペレットを得た。さらに１０倍量の５０ｍＭトリス
バッファーを加え、ポリトロンホモジナイザーにて２０
秒間ホモジナイズし、同様に遠心分離し、ペレットを得
た（２回繰り返し、蛋白質量を測定した）。１０倍量の
インキュベーションバッファー（１０ｍＭ ＨＥＰＥ
Ｓ、１３０ｍＭ ＮａＣｌ、４．７ｍＭ ＫＣｌ、５ｍ
Ｍ ＭｇＣｌ₂・６Ｈ₂０、１ｍＭ ＥＧＴＡ、５ｍｇ／
ｍｌＢＳＡ及び０．２５ｍｇ／ｍｌバシトロシンを含
む）を加え、ポリトロンホモジナイザーにて２０秒間ホ
モジナイズ後、同バッファーにて大脳皮質は最終的に２
００倍、膵臓は１００倍希釈し、それぞれＣＣＫ−Ｂ及
びＣＣＫ−Ａ受容体標本とした。 バインディングアッセイ： 被験薬液の調製：ガラス試験管にそれぞれ被験化合物を
秤量し、ＤＭＳＯ液に溶解して１０ｍＭ濃度、さらに蒸
留水で２倍、５０％ＤＭＳＯ液で２倍希釈して２．５ｍ
Ｍ（最終濃度０．１ｍＭ）の被験薬液を調製した。チュ
ーブに被験薬液２０μｌ、［³Ｈ］ＣＣＫ−８（５０ｎ
Ｍ）１０μｌ及び受容体標本４７０μｌを添加した。２
５℃で３０分間インキュベーションした後、吸引濾過し
（Ｗｈａｔｍａｎ ｇｌａｓｓ ｍｉｃｒｏｆｉｌｔｅ
ｒ，ＧＦ／Ｃ）、冷却した５０ｍＭトリスバッファーに
て３回洗浄した。５ｍｌのインスタゲルカクティルを加
え、振盪後数時間放置し、放射能を液体シンチレーショ
ンカウンターにより５分間計測した。総結合数の測定
は、被験薬液の代わりに５０％ＤＭＳＯ液２０μｌを用
い、また非特異的結合数の測定には、セルレイン（ｃｅ
ｒｕｌｅｉｎ）（１μＭ）２０μｌを用い、同様に行っ
た。被験薬液（０．１ｍＭ濃度）の特異的な結合数［総
結合数（ｄｐｍ）−非特異的結合数（ｄｐｍ）］を算出
し、競合的阻害率を求め、その結果を表２に示した。

【００４４】（２） ガストリン受容体拮抗作用 ガストリン受容体標品の作成：Ｈａｒｔｌｅｙ系雄性モ
ルモットを断頭屠殺後、胃を速やかに摘出し、バーグリ
ン及びオブリンク、アクタ・フィジオロジカ・スカンジ
ナビカ、第９６巻、第１５０ページ、１９７６年［Berg
lingh and Obrink, Acta Physiologica Scandinavica,
96, 150(1976)］およびプライスマンら、Ｃ．Ｊ．レセ
プター・リサーチ、第３巻、１９８３年［Praissman et
al., C. J. Receptor Res., 3(1983)］の方法に従っ
て、胃粘膜腺を調製した。 受容体標本（遊離胃腺）の調製：モルモットを断頭屠殺
し、直ちに胃を摘出し、大弯部を切開し内容物を冷水中
で洗浄した。胃粘膜を剥離し、完全に洗浄した後、下記
成分からなる標準緩衝液中鋭いはさみで切り刻んだ（１
２８ｍＭ ＮａＣｌ、４．８ｍＭ ＫＣｌ、５ｍＭ Ｎ
ａＨＣＯ₃、１．２ｍＭ ＫＨ₂ＰＯ₄、１．２ｍＭ Ｍｇ
ＳＯ₄、２ｍＭ ＣａＣｌ₂、１０ｍＭ グルコース及び
４ｍＭ Ｌ−グルタミン、ｐＨ７．４の１２．５ｍＭ
ＨＥＰＥＳに０．０２５％トリプシンインヒビター、Ｍ
ＥＭビタミン溶液、ＭＥＭアミノ酸溶液を添加）。切り
刻んだ組織を洗浄した後、０．１％コラゲナーゼ及び
０．１％ＢＳＡを含有した緩衝液と共に３７℃の振盪浴
中で４０分間インキュベーションした。組織を２０ｍｌ
プラスチック製シリンジに４回通過させて胃腺を遊離さ
せた後、２００メッシュフィルターに通して濾過した。
濾過した胃腺を２７０×ｇで２分間遠心分離し、再懸濁
及び遠心分離によって２回洗浄し、ガストリン受容体標
本とした。 バインディングアッセイ： 被験薬液の調製：ガラス試験管にそれぞれ被験化合物を
秤量し、ＤＭＳＯ液に溶解し１０ｍＭ濃度（最終濃度
０．１ｍＭ）を被験薬液を調製した。調製した洗浄済み
モルモット胃腺をバシトラシン０．２５ｍｇ／ｍｌ含有
標準緩衝液４０ｍｌに再懸濁した。シリコナイズした
１．５ｍｌプラスチックチューブに胃腺２３０μｌを加
え、１５分間インキュベーションした後、１０μｌの緩
衝液（全結合用）又はガストリン（最終濃度１μＭ、非
特異的結合用）と２．５μｌのＤＭＳＯ又は被験薬液及
び１０μｌの¹²⁵Ｉ−ガストリン（ＮＥＷ、２２００Ｃ
ｉ／ｍｍｏｌ、最終１００ｐＭ）を加えた。２５℃で１
５分間のインキュベーションした後、冷却した緩衝液１
ｍｌを添加し、９０００×ｇで１分間遠心分離した。さ
らに０．５ｍｌの緩衝液で洗浄後、遊離胃腺が沈殿した
プラスチックチューブの先端をカットすることにより採
取した遊離胃腺の放射能をガンマーカウンターにより計
測した。被験薬液（０．１ｍＭ濃度）の特異的な結合数
［総結合数（ｄｐｍ）−非特異的結合数（ｄｐｍ）］を
算出し、競合的阻害率を求め、その結果を表２に示し
た。

【００４５】

【表２】

【００４６】〔試験結果〕 前記の表２の結果から、本
発明化合物はＣＣＫ−Ａ、ＣＣＫ−Ｂ及びガストリン受
容体拮抗作用を有することが明らかとなった。

【００４７】〔試験例２〕 ヘリコバクター・ピロリに
対する抗菌作用 寒天希釈法を用い、それぞれのヘリコバクター・ピロリ
（標準菌株 ＡＴＣＣ４３５０４及びＡＴＣＣ ４３５
２６）に対する抗菌活性を測定した。試験に先立って、
５％馬脱繊血を含むトリプチケース ソイ 寒天（Trip
ticase soyagar）斜面培地上、ＨＰ菌を１０％ ＣＯ₂／
９０％ air条件下、３７℃ ４日間前培養した。その
後、２mlのブルセラ液体培地（Brucella broth）を加
え、軽くピペッティングすることによりＨＰ菌液を回収
した。次に、得られた菌液の１００μｌを９６穴マルチ
ウエルプレートに取り、６５０ｎｍにおける濁度を測定
し、マックファーランド（MacFarland）Ｎｏ．２［衛生
検査技術講座 ４，微生物学（第５版），３３８〜３３
９（１９６９）］の濁度（ＯＤ６５０ 約０．１４８）
になるようにブルセラ液体培地で調製した。一方、被験
化合物はジメチルスルホキシドに溶解し、この溶媒の最
終濃度が１％以下になるように滅菌蒸留水を加え、５μ
ｇ／ｍｌから８０ｍｇ／ｍｌの２倍希釈系列の被験薬液
を調製した。この被験薬液を８０μｌをオートクレーブ
滅菌後、４８℃に保温した１０％無菌馬血清を含むミュ
ーラー・ヒントン寒天培地（Mueller Hintone agar）８
ｍｌに、被験薬液８０μｌを加え、充分に混合した後に
直径６０ｍｍのシャーレに注ぎ、放冷固化してこれを試
験培地とした。次に、この試験培地にブルセラ液体培地
で調製したＨＰ菌液５μｌをマイクロプランターで接種
し、ガスパックジャー中、微好気下に３７℃で３日間培
養した後、肉眼で可視的発育を示さない最小発育阻止濃
度（ＭＩＣ）を求めた。なお、対照薬として、ストレプ
トマイシン、オメプラゾール及びプラウノトールを使用
し、被験化合物と同様に操作してそれぞれのＭＩＣ値を
求めた。それらの結果を表３に示した。

【００４８】

【表３】

【００４９】〔試験結果〕 前記の表３の結果から、本
発明化合物はＨＰに対して、強い抗菌作用を有すること
が明らかとなった。

【００５０】〔試験例３〕 急性毒性試験 本発明化合物（５００ｍｇ／ｋｇ）を０．５％カルボキ
シメチルセルロースナトリウム溶液に懸濁し、２４時間
絶食したｄｄＹ系雄性マウス（５週令、一群５匹）に、
経口投与し、投与後７日間観察したところ、全例に死亡
例は認められなかった。

【００５１】

【発明の効果】以上の結果から、本発明化合物（Ｉ）
は、ＣＣＫ−Ａ、ＣＣＫ−Ｂ、ガストリン受容体拮抗作
用及びＨＰに対して強い抗菌作用を有することから、消
化器官系疾患の予防及び治療薬として有効である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 西川 淳 滋賀県野洲郡野洲町久野部184−２ ヴィ ルヌーブ 野洲909号 (72)発明者 高橋 和義 滋賀県守山市岡町60−３

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 下記の一般式（Ｉ） 【化１】 ［式中、Ｒ¹はＡ−ＣＯ−ＣＨ＝ＣＨ−基（Ａは置換基
   を有していてもよいフェニル基を表す。）又はＮＨＲ²
   で示されるアミノ基（Ｒ²は水素原子、低級アルキル
   基、シクロアルキル基、低級アルケニル基、アラルキル
   基又はフェニル基を表す。）を表す。Ｘは酸素原子又は
   ＮＲ³で示されるイミノ基（Ｒ³は水素原子、低級アルキ
   ル基、ベンジル基又はフェニル基を表す。）を表す。Ｙ
   は酸素原子又は硫黄原子を表す。］で表わされるＮ−ベ
   ンゾイルプロリンエステル誘導体。
2. 【請求項２】 Ｒ¹はＮＨＲ²で示されるアミノ基（Ｒ²
   はメチル基又はフェニル基を表す。）であり、ＸはＮＲ
   ³で示されるイミノ基（Ｒ³は水素原子又はメチル基を表
   す。）であり、Ｙは酸素原子又は硫黄原子である請求項
   １に記載の化合物。
3. 【請求項３】 Ｒ¹はＡ−ＣＯ−ＣＨ＝ＣＨ−基（Ａは
   フェニル基を表す）であり、Ｘは酸素原子又はＮＲ³で
   示されるイミノ基（Ｒ³は水素原子又はメチル基を表
   す。）であり、Ｙは酸素原子である請求項１に記載の化
   合物。
4. 【請求項４】 請求項１〜３のいずれか１項記載の化合
   物を有効成分とする消化器官系疾患の予防又は治療のた
   めの医薬組成物。