JPH09183764A - N-benzoylproline ester derivative - Google Patents

Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To obtain a new compound excellent in antagonism on cholecystokinin A and B receptors and a gastrin receptor and strong in antibacterial action on Helicobacter pylori, useful for preventing and treating a digestive organ-based disease. SOLUTION: This compound is shown by formula I (R<1> is A-CO-CH=CH or an amino of the formula, NHR<2> ; A is phenyl, etc.; R<2> is H, a lower alkyl, phenyl, etc.; X is O or an imino of the formula, NR<3> ; R<3> is H, a lower alkyl, etc.; Y is O or S) such as N-[N-benzoyl-(S)-prolinoyloxyethyl]-N'-phenylurea. The compound of formula I is obtained by reacting a 2-substituted ethyl alcohol derivative of formula II with an N-benzoylproline of formula III optionally in the presence of a base (e.g. 4-dimthylaminopyridine) in a solvent (e.g. methylene chloride) by using a coupling reagent (e.g. N,N'-dicyclohexylcarbodiimide) at 0 deg.C to the boiling compound of the solvent for 30 minutes to 48 hours.

Description

【発明の詳細な説明】Detailed Description of the Invention

【０００１】[0001]

【産業上の利用分野】本発明は、コレシストキニン（Ｃ
ＣＫ）−Ａ、Ｂ受容体及びガストリン受容体に対して優
れた拮抗作用を有し、さらにヘリコバクター・ピロリ
（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ、以下ＨＰ
と略称する。）に対して強い抗菌作用を示すことから、
消化器官系疾患、特に消化性潰瘍等の予防及び治療に有
用なＮ−ベンゾイルプロリンエステル誘導体を含有する
医薬組成物に関する。BACKGROUND OF THE INVENTION The present invention relates to cholecystokinin (C
CK) -A, B receptor and gastrin receptor have excellent antagonism, and further Helicobacter pylori (Helicobacter pylori, hereinafter HP)
Is abbreviated. ) Has a strong antibacterial action against
The present invention relates to a pharmaceutical composition containing an N-benzoylproline ester derivative useful for the prevention and treatment of digestive system diseases, particularly peptic ulcer.

【０００２】[0002]

【従来の技術】本発明化合物と類似の構造を持ったプロ
リン誘導体は、種々提案されており、例えばＡＣＥ阻害
作用を有する降圧剤であるカプトプリル、エナラプリル
（特開昭５２−１１６４５７号公報）等が知られてい
る。また、プロリン残基を有するペプチド誘導体として
は、冠疾患及び器質性脳症候群治療剤（特開昭６２−２
１５５２３号公報）、プロリンエンドペプチダーゼ阻害
作用を有する抗健忘症剤（特開昭６４−６８３９６号公
報）及びＣＣＫ−ガストリン受容体拮抗剤（アメリカ特
許 ５３４０８０１号）等が知られている。さらに、特
開平７−２５２２１７号公報には蛋白分解酵素阻害活性
を有する経口抗凝固剤及び膵疾患治療剤等に有用なプロ
リンアミド誘導体が開示されている。2. Description of the Related Art Various proline derivatives having a structure similar to that of the compound of the present invention have been proposed, for example, captopril, enalapril (JP-A-52-116457), which are antihypertensive agents having an ACE inhibitory action, and the like. Are known. In addition, as a peptide derivative having a proline residue, a therapeutic agent for coronary diseases and organic brain syndrome (Japanese Patent Application Laid-Open No. 62-2
15523), an antiamnestic agent having a proline endopeptidase inhibitory action (Japanese Patent Laid-Open No. 64-68396), a CCK-gastrin receptor antagonist (US Pat. No. 5,340,801) and the like are known. Further, JP-A-7-252217 discloses a proline amide derivative useful as an oral anticoagulant having a protease inhibitory activity, a therapeutic agent for pancreatic diseases and the like.

【０００３】[0003]

【発明が解決しようとする課題】ＨＰに対する抗菌作用
並びにこの作用を有する物質については、日本臨床第５
１巻、第１２号（１９９３年）に記載されている。すな
わち、ＨＰはヒト胃粘膜表層部から分離された微好気性
グラム陰性螺旋状短桿菌であり、ヒトの胃及び十二指腸
疾患に深く関与していることが指摘されている。特に本
菌の感染が消化性潰瘍の治癒の遷延と難治化および再発
の大きな要因であることが明らかにされるに従って、消
化性潰瘍の再発予防及び治療をする上でＨＰの除菌を試
みることが必須であると考えられるようになった。現在
のところ、ＨＰを除菌するためには、ペニシリン系、セ
ファロスポリン系、テトラサイクリン系、ニュ−キノロ
ン系、マクロライド系等の抗生物質、ビスマス製剤、プ
ロトンポンプインヒビター、ヒスタミンＨ₂受容体拮抗
剤及びプラウトノ−ル、ソファルコン、塩酸ベネキサ−
ト等の抗潰瘍剤とを組み合わせて投与する併用療法が試
みられている。しかしながら、ＨＰに対して未だ充分な
除菌効果が得られていないのが現状で、より有効な抗菌
剤が望まれている。一方、ＣＣＫ−Ａ、ＣＣＫ−Ｂ及び
ガストリン受容体拮抗作用並びにそれらの作用を有する
物質についてはアナールス オブ ザ ニューヨーク
アカデミーオブ サイエンス、第７１３巻、１〜１６７
ページ（１９９４年）［Annals of The New York Acade
my of Sciences,713,1〜167(1994)］に記載されてい
る。すなわち、ＣＣＫ及びガストリン受容体に対して拮
抗作用を示す物質は、消化器官系疾患の予防及び治療に
有効であるとして、現在までに数多くの拮抗性物質が見
い出されている。また、消化性潰瘍の予防及び治療薬と
してもプログルミドをはじめとして、グルタミン酸誘導
体、Ｎ−アシルトリプトファン誘導体、グリシン尿素誘
導体、１，４−ベンゾジアゼピン誘導体等数多くのＣＣ
Ｋ及びガストリン受容体拮抗物質が見い出されている。
以上のように消化器官系疾患、特に消化性潰瘍の再発予
防及び治療には、ＨＰに対する抗菌剤やＣＣＫ及びガス
トリン受容体拮抗物質が有用であることが知られてい
る。しかしながら、消化器官系疾患、特に消化性潰瘍の
再発予防及び治療に有用であると考えられるＣＣＫ及び
ガストリン受容体拮抗作用並びにＨＰに対する抗菌作用
を併せ持った医薬品は現在のところ知られておらず、両
作用を併せ持つことで、より優れた予防及び治療効果が
期待できる。従って、本発明は、ＣＣＫ−Ａ、ＣＣＫ−
Ｂ及びガストリン受容体拮抗作用を有し、さらに、消化
性潰瘍に深く関与していると考えられているＨＰに対し
て優れた抗菌作用を併せ持つ消化器官系疾患、特に消化
性潰瘍の再発予防及び治療するための医薬組成物を提供
することを課題とする。[Problems to be Solved by the Invention] Antibacterial action against HP and substances having this action are described in Japanese Clinical No. 5
Vol. 1, No. 12 (1993). That is, it is pointed out that HP is a microaerobic Gram-negative spiral bacillus isolated from the surface layer of human gastric mucosa and is deeply involved in human gastric and duodenal diseases. In particular, as it is revealed that the infection of this bacterium is a major factor of the prolongation of healing of peptic ulcer and its refractory and recurrence, HP eradication is attempted for the prevention and treatment of recurrence of peptic ulcer. Came to be considered essential. At present, in order to eradicate HP, antibiotics such as penicillins, cephalosporins, tetracyclines, new-quinolones, macrolides, bismuth preparations, proton pump inhibitors, histamine H ₂ receptor antagonists are used. Agent and proutnol, sofarcon, benexa hydrochloride
Combination therapy has been attempted, which is administered in combination with an anti-ulcer drug such as G. However, under the present circumstances, a sufficient bactericidal effect against HP has not yet been obtained, and a more effective antibacterial agent is desired. On the other hand, regarding CCK-A, CCK-B, gastrin receptor antagonistic action and substances having these actions, see Anals of the New York.
Academy of Science, Volume 713, 1-167
Page (1994) [Annals of The New York Acade
my of Sciences, 713, 1-167 (1994)]. That is, many antagonistic substances have been found to date as being effective for the prevention and treatment of digestive system diseases, as substances that have an antagonistic action on CCK and gastrin receptors. Also, as a prophylactic and therapeutic drug for peptic ulcer, various CCs such as proglumide, glutamic acid derivative, N-acyltryptophan derivative, glycine urea derivative, 1,4-benzodiazepine derivative, etc.
K and gastrin receptor antagonists have been found.
As described above, it is known that antibacterial agents against HP, CCK and gastrin receptor antagonists are useful for the prevention and treatment of recurrence of digestive system diseases, particularly peptic ulcer. However, a drug having both CCK and gastrin receptor antagonistic action and antibacterial action against HP, which are considered to be useful for preventing and treating recurrence of digestive organ diseases, in particular peptic ulcer, is not known at present. By having the action together, more excellent preventive and therapeutic effects can be expected. Therefore, the present invention relates to CCK-A and CCK-
B and gastrin receptor antagonism, and further has excellent antibacterial action against HP, which is considered to be deeply involved in peptic ulcer, and prevent recurrence of peptic ulcer It is an object to provide a pharmaceutical composition for treating.

【０００４】[0004]

【課題を解決するための手段】本発明者らは前記のよう
な状況に鑑みて、鋭意研究を行った結果、従来のプロリ
ン誘導体とは異なる新規なＮ−ベンゾイルプロリンエス
テル誘導体がＣＣＫ−Ａ、ＣＣＫ−Ｂ及びガストリン受
容体拮抗作用を有し、かつＨＰに対して強い抗菌作用を
有することを見い出し、本発明を完成することができ
た。[Means for Solving the Problems] The inventors of the present invention have conducted intensive studies in view of the above situation, and as a result, a novel N-benzoylproline ester derivative different from the conventional proline derivative was found to be CCK-A, It has been found that it has CCK-B and gastrin receptor antagonistic action and also has a strong antibacterial action against HP, and was able to complete the present invention.

【０００５】すなわち、本発明は、下記の一般式（Ｉ）
で表されるＮ−ベンゾイルプロリンエステル誘導体を有
効成分とするＣＣＫ−Ａ、ＣＣＫ−Ｂ、ガストリン受容
体拮抗作用及びＨＰに対する抗菌作用を有する消化器官
系疾患、特に消化性潰瘍の再発予防及び治療するための
医薬組成物に関する。That is, the present invention provides the following general formula (I)
Preventing and treating recurrence of digestive organ system diseases, especially peptic ulcer, which has CCK-A, CCK-B, gastrin receptor antagonistic action and antibacterial action against HP containing N-benzoylproline ester derivative represented by To a pharmaceutical composition for.

【０００６】[0006]

【化２】 Embedded image

【０００７】［式中、Ｒ¹はＡ−ＣＯ−ＣＨ＝ＣＨ−基
（Ａは置換基を有していてもよいフェニル基を表す。）
又はＮＨＲ²で示されるアミノ基（Ｒ²は水素原子、低級
アルキル基、シクロアルキル基、低級アルケニル基、ア
ラルキル基又はフェニル基を表す。）を表す。Ｘは酸素
原子又はＮＲ³で示されるイミノ基（Ｒ³は水素原子、低
級アルキル基、ベンジル基又はフェニル基を表す。）を
表す。Ｙは酸素原子又は硫黄原子を表す。］で表され
る。[In the formula, R ¹ is an A-CO-CH = CH- group (A represents a phenyl group which may have a substituent).
Or an amino group represented by NHR ² (R ² represents a hydrogen atom, a lower alkyl group, a cycloalkyl group, a lower alkenyl group, an aralkyl group or a phenyl group). X represents an oxygen atom or an imino group represented by NR ³ (R ³ represents a hydrogen atom, a lower alkyl group, a benzyl group or a phenyl group). Y represents an oxygen atom or a sulfur atom. ].

【０００８】以下に、上記一般式（Ｉ）で表される本発
明のＮ−ベンゾイルプロリンエステル誘導体におけるＲ
¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｘ及びＹの具体例を示す。The R in the N-benzoylproline ester derivative of the present invention represented by the above general formula (I) is described below.
Specific examples of ¹ , R ² , R ³ , X and Y are shown below.

【０００９】Ｒ¹が、Ａ−ＣＯ−ＣＨ＝ＣＨ−基で示さ
れる場合のＡとしては、フェニル基、４−トリル基、
３，４−ジメチルフェニル基、４−メトキシフェニル
基、３，４−ジメトキシフェニル基、４−ヒドロキシフ
ェニル基及び４−クロロフェニル基等を挙げることがで
きるが、特にフェニル基が好ましい。また、Ｒ¹がＮＨ
Ｒ²で示されるアミノ基である場合のＲ²としては、メチ
ル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル
基、イソブチル基、シクロヘキシル基、アリル基、ベン
ジル基、フェネチル基及びフェニル基等を挙げることが
できるが、特にメチル基又はフェニル基が好ましい。When R ¹ is represented by A-CO-CH = CH-group, A is phenyl group, 4-tolyl group,
Examples thereof include a 3,4-dimethylphenyl group, a 4-methoxyphenyl group, a 3,4-dimethoxyphenyl group, a 4-hydroxyphenyl group and a 4-chlorophenyl group, and a phenyl group is particularly preferable. R ¹ is NH
When R ² is an amino group represented by R ² , methyl group, ethyl group, propyl group, isopropyl group, butyl group, isobutyl group, cyclohexyl group, allyl group, benzyl group, phenethyl group, phenyl group, etc. Of these, a methyl group or a phenyl group is particularly preferable.

【００１０】Ｘとしては、酸素原子が好ましい。As X, an oxygen atom is preferable.

【００１１】また、ＸがＮＲ³で示されるイミノ基であ
る場合のＲ³としては、水素原子、メチル基、エチル
基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチ
ル基、ベンジル基及びフェニル基等を挙げることができ
るが、特に水素原子又はメチル基が好ましい。When X is an imino group represented by NR ³ , R ³ is a hydrogen atom, a methyl group, an ethyl group, a propyl group, an isopropyl group, a butyl group, an isobutyl group, a benzyl group or a phenyl group. The hydrogen atom or the methyl group is particularly preferable.

【００１２】Ｙとしては、酸素原子又は硫黄原子が好ま
しい。As Y, an oxygen atom or a sulfur atom is preferable.

【００１３】更に、本発明化合物（Ｉ）は、少なくとも
１つの不斉中心を含有しており、これらの光学異性体も
本発明に含まれる。更に本発明化合物（Ｉ）には、構造
による幾何異性体も含まれる。Further, the compound (I) of the present invention contains at least one asymmetric center, and these optical isomers are also included in the present invention. Further, the compound (I) of the present invention also includes geometrical isomers depending on the structure.

【００１４】上記一般式（Ｉ）で表されるＮ−ベンゾイ
ルプロリンエステル誘導体は、種々の方法で製造できる
が、代表的な方法を挙げれば以下の通りである。The N-benzoylproline ester derivative represented by the above general formula (I) can be produced by various methods. Typical methods are as follows.

【００１５】[0015]

【化３】 Embedded image

【００１６】［式中、Ｒ¹、Ｘ及びＹは前記と同義であ
る。］[In the formula, R ¹ , X and Y have the same meaning as defined above. ]

【００１７】本発明に含まれる化合物（Ｉ）は、２−置
換エチルアルコール誘導体（II）とＮ−ベンゾイルプロ
リン（III）を、通常、塩基の存在又は非存在下で溶媒
中、ペプチド合成に使用されるカップリング試薬を用い
て反応させることにより製造できる。反応に用いる溶媒
は、塩化メチレン、クロロホルム、四塩化炭素、ベンゼ
ン、トルエン、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラ
ン、ジオキサン、アセトニトリル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホ
ルムアミド、ジメチルスルホキシド等の有機溶媒を挙げ
ることができるが、特に塩化メチレン及びテトラヒドロ
フランが好ましい。また、この反応に用いる塩基として
は、４−ジメチルアミノピリジンが好ましい。さらにカ
ップリング試薬としては、Ｎ，Ｎ′−ジシクロヘキシル
カルボジイミド、Ｎ，Ｎ′−カルボニルジイミダゾー
ル、Ｎ，Ｎ′−ジスクシンイミドカーボナート、Ｎ，
Ｎ′−ジスクシンイミジルオキザラート等を挙げること
ができるが、特にＮ，Ｎ′−ジシクロヘキシルカルボジ
イミドが好ましい。反応温度は０℃から溶媒の沸点程度
であるが、特に室温程度が好ましく、反応時間は通常３
０分から４８時間の範囲内で行うことができる。As the compound (I) included in the present invention, the 2-substituted ethyl alcohol derivative (II) and N-benzoylproline (III) are usually used for peptide synthesis in a solvent in the presence or absence of a base. It can be produced by reacting with a coupling reagent. Examples of the solvent used in the reaction include organic solvents such as methylene chloride, chloroform, carbon tetrachloride, benzene, toluene, diethyl ether, tetrahydrofuran, dioxane, acetonitrile, N, N-dimethylformamide, dimethyl sulfoxide, and the like. Methylene and tetrahydrofuran are preferred. Further, 4-dimethylaminopyridine is preferable as the base used in this reaction. Further, as the coupling reagent, N, N'-dicyclohexylcarbodiimide, N, N'-carbonyldiimidazole, N, N'-disuccinimide carbonate, N,
Although N'-disuccinimidyl oxalate and the like can be mentioned, N, N'-dicyclohexylcarbodiimide is particularly preferable. The reaction temperature is about 0 ° C. to the boiling point of the solvent, preferably about room temperature, and the reaction time is usually 3
It can be performed within the range of 0 minutes to 48 hours.

【００１８】前記の反応において原料として用いた２−
置換エチルアルコール誘導体（IIａ、IIｂ及びIIｃ）
は、以下の方法により製造することができる。2 used as a raw material in the above reaction
Substituted ethyl alcohol derivatives (IIa, IIb and IIc)
Can be produced by the following method.

【００１９】[0019]

【化４】 Embedded image

【００２０】［式中、Ｒ²、Ｒ³及びＹは前記と同義であ
る。］[In the formula, R ² , R ³ and Y are as defined above. ]

【００２１】化合物（IIａ）は、化合物（IV）と化合物
（Ｖ）を原料に用い、ジャーナルオブ ファーマシュチ
カル サイエンス、第５９巻、第１０号、１５１５〜１
５１８ページ（１９７０年）［J. Pharm. Sci., 59(1
0), 1515〜1518(1970)］に記載の方法に従って合成でき
る。The compound (IIa) is prepared by using the compound (IV) and the compound (V) as raw materials, and Journal of Pharmaceutical Sciences, Vol. 59, No. 10, 1515-1.
Page 518 (1970) [J. Pharm. Sci., 59 (1
0), 1515-1518 (1970)].

【００２２】[0022]

【化５】 Embedded image

【００２３】［式中、Ｒ¹及びＲ³は前記と同義であ
る。］[In the formula, R ¹ and R ³ are as defined above. ]

【００２４】化合物（IIｂ）は、化合物（VI）と化合物
（VII）を原料に用い、ＷＯ９４／１４７４９号に記載
の方法に従って合成できる。The compound (IIb) can be synthesized by using the compound (VI) and the compound (VII) as raw materials according to the method described in WO94 / 14749.

【００２５】一方、化合物（IIｃ）は、化合物（VI）と
化合物（IV）を原料に用い、ジャーナル オブ ファー
マシー アンド ファーマコロジー、第２９巻、１４７
〜１５２ページ（１９７７年）［J. Pharm. Pharmac.,
29, 147〜152(1977)］に記載の方法に従って合成でき
る。On the other hand, the compound (IIc) is prepared by using the compound (VI) and the compound (IV) as starting materials, Journal of Pharmacy and Pharmacology, Vol. 29, 147.
Pp. 152 (1977) [J. Pharm. Pharmac.,
29, 147-152 (1977)].

【００２６】本発明化合物（Ｉ）はＣＣＫ−Ａ、ＣＣＫ
−Ｂ、ガストリン受容体拮抗作用及びヘリコバクター・
ピロリに対する強い抗菌作用を有することから消化器官
系疾患の予防及び治療に有用である。本発明化合物を医
薬として用いる場合の一般的な製剤の形態としては、例
えば、錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、シロップ剤又
は注射剤などとして、経口又は非経口的に投与すること
ができる。The compound (I) of the present invention is CCK-A, CCK
-B, gastrin receptor antagonism and Helicobacter
Since it has a strong antibacterial action against Helicobacter pylori, it is useful for the prevention and treatment of digestive system diseases. When the compound of the present invention is used as a medicine, it can be orally or parenterally administered in the form of a general preparation such as a tablet, powder, granule, capsule, syrup or injection.

【００２７】製剤化の際は、通常の製剤担体を用い、常
法に従って製造できる。すなわち、経口用固形製剤を製
造する場合は、主薬に賦形剤及び必要に応じて結合剤、
崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味矯臭剤などを加えた後、
常法に従って錠剤、被覆製剤、顆粒剤、散剤、カプセル
剤などとする。ここで賦形剤としては、例えば乳糖、シ
ョ糖、デンプン、タルク、セルロース、デキストリン等
が用いられる。これらの錠剤、顆粒剤に糖衣、ゼラチン
衣、その他必要により適宜コーティングを施すことは何
等差し支えない。また、非経口投与のための注射剤を調
製する場合には、主薬に溶剤又は懸濁剤、例えば水、プ
ロピレングリコール、ポリエチレングリコール、レシチ
ン等が用いられ、必要に応じてｐＨ調整剤、緩衝剤、安
定化剤、可溶化剤などを添加し、常法により皮下、筋肉
内、静脈内用注射剤とすることができる。In the case of formulation, it can be produced by a conventional method using a usual formulation carrier. That is, in the case of producing a solid preparation for oral use, the main ingredient is an excipient and optionally a binder,
After adding disintegrant, lubricant, coloring agent, flavoring agent, etc.,
Tablets, coated preparations, granules, powders, capsules and the like are prepared by a conventional method. Here, as the excipient, for example, lactose, sucrose, starch, talc, cellulose, dextrin and the like are used. These tablets and granules may be sugar-coated, gelatin-coated, or any other suitable coating may be applied. When preparing an injection for parenteral administration, a solvent or suspension agent such as water, propylene glycol, polyethylene glycol, lecithin, etc. is used as a main ingredient, and a pH adjusting agent and a buffering agent are used as necessary. By adding a stabilizer, a solubilizer, etc., a subcutaneous, intramuscular, or intravenous injection can be prepared by a conventional method.

【００２８】本発明化合物（Ｉ）の投与量及び投与回数
は患者の症状、年齢、体重等に応じて適宜選択すること
ができる。例えば、一般成人に対して一日５〜１５００
ｍｇ、好ましくは２０〜８００ｍｇを１回から数回に分
けて投与してもよいし、間欠投与してもよい。また、注
射剤として用いる場合には、一回量０．０１〜１００ｍ
ｇを連続又は間欠投与してもよい。The dose and frequency of administration of the compound (I) of the present invention can be appropriately selected depending on the patient's symptoms, age, body weight and the like. For example, 5 to 1500 per day for general adults
mg, preferably 20 to 800 mg, may be administered once or in several divided doses, or may be administered intermittently. When used as an injection, the dose is 0.01 to 100 m.
g may be administered continuously or intermittently.

【００２９】[0029]

【実施例】以下に、本発明を実施例、製剤例及び試験例
により具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例、
製剤例及び試験例に限定されるものではない。EXAMPLES The present invention will be specifically described below with reference to Examples, formulation examples and test examples.
It is not limited to formulation examples and test examples.

【００３０】〔実施例１〕 Ｎ−［Ｎ−ベンゾイル−（Ｓ）−プロリノイルオキシエ
チル］−Ｎ′−フェニル尿素の合成 Ｎ−ベンゾイル−（Ｓ）−プロリン（２．１９ｇ，１０
ｍｍｏｌ）とＮ−（２−ヒドロキシエチル）−Ｎ′−フ
ェニル尿素（１．８ｇ，１０ｍｍｏｌ）を塩化メチレン
（５０ｍｌ）に溶解し、４−ジメチアミノピリジン
（０．１２２ｇ，１ｍｍｏｌ）を加えた後、室温でＮ、
Ｎ′−ジシクロヘキシルカルボジイミド（２．０６ｇ，
１０ｍｍｏｌ）の塩化メチレン（１０ｍｌ）溶液を加え
た。室温で２０時間攪拌し、不溶物を濾過した後、濾液
を減圧乾固し、残査に酢酸エチル（５０ｍｌ）を加えて
溶解し、再度不溶物を濾過した。濾液を２Ｎ塩酸洗浄、
飽和炭酸ナトリウム水溶液洗浄、次いで飽和食塩水洗浄
した。無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。得
られた残留物をシリカゲルクロマトグラフィー〔溶出溶
媒：クロロホルム−酢酸エチル（５：１から１：１）の
混合溶媒〕により精製し、表記化合物（３．５５ｇ，９
３％）を無色油状物として得た。Example 1 Synthesis of N- [N-benzoyl- (S) -prolinoyloxyethyl] -N'-phenylurea N-benzoyl- (S) -proline (2.19 g, 10)
mmol) and N- (2-hydroxyethyl) -N'-phenylurea (1.8 g, 10 mmol) were dissolved in methylene chloride (50 ml), and 4-dimethylaminopyridine (0.122 g, 1 mmol) was added. , At room temperature N,
N'-dicyclohexylcarbodiimide (2.06 g,
A solution of 10 mmol) in methylene chloride (10 ml) was added. The mixture was stirred at room temperature for 20 hours, the insoluble matter was filtered off, the filtrate was evaporated to dryness under reduced pressure, ethyl acetate (50 ml) was added to the residue to dissolve it, and the insoluble matter was filtered again. The filtrate is washed with 2N hydrochloric acid,
It was washed with a saturated sodium carbonate aqueous solution and then with a saturated saline solution. The extract was dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under reduced pressure. The obtained residue was purified by silica gel chromatography [elution solvent: chloroform-ethyl acetate (5: 1 to 1: 1) mixed solvent] to give the title compound (3.55 g, 9
3%) as a colorless oil.

【００３１】［α］_D；−３７．７（２４℃，ｃ＝１．
１，ＭｅＯＨ） ＩＲ（ｎｕｊｏｌ法）ν_max ｃｍ^-1；３３５２（Ｎ
Ｈ），１７３４（Ｃ＝Ｏ） ＦＡＢ−Ｍａｓｓ（＋） ｍ／ｚ；３８２（Ｍ＋１）^{+ 1} Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ；１．８−２．２ ａｎｄ
２．４−２．６（３Ｈ ａｎｄ １Ｈ，ｍ，ｐｒｏｌｉ
ｎｅ−ＣＨ₂ＣＨ₂），３．２５−３．４５，３．５５−
３．８５，３．９５−４．１，４．５−４．６５ ａｎ
ｄ ４．７−４．８５（１Ｈ，３Ｈ，１Ｈ，１Ｈ ａｎ
ｄ １Ｈ，ｍ，ＣＨ₂Ｎ，ＣＨＮ ａｎｄ ＣＨ₂Ｏ），
６．１３（１Ｈ，ｍ，ＮＨ），６．８−６．９ ａｎｄ
７．０−７．１５（１Ｈ ａｎｄ ４Ｈ，ｍ，Ａｒ−
Ｈ），７．２６（１Ｈ，ｓ，ＮＨ），７．４−７．６５
（５Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ） 元素分析（Ｃ₂₁Ｈ₂₃Ｎ₃Ｏ₄） 理論値（％）：Ｃ，６６．１３；Ｈ，６．０８；Ｎ，１
１．０２ 実測値（％）：Ｃ，６５．６７；Ｈ，５．８５；Ｎ，１
０．９０[Α] _D ; -37.7 (24 ° C., c = 1.
1, MeOH) IR (nujol method) ν _max cm ^-1 ; 3352 (N
H), 1734 (C = O ) FAB-Mass (+) m / z; 382 (M + 1) + 1 H-NMR (CDCl 3) δ; 1.8-2.2 and
2.4-2.6 (3H and 1H, m, proli
_{ne-CH 2 CH 2),} 3.25-3.45,3.55-
3.85, 3.95-4.1, 4.5-4.65 an
d 4.7-4.85 (1H, 3H, 1H, 1H an
d 1H, m, CH ₂ N, CHN and CH ₂ O),
6.13 (1H, m, NH), 6.8-6.9 and
7.0-7.15 (1H and 4H, m, Ar-
H), 7.26 (1H, s, NH), 7.4-7.65.
(5H, m, Ar-H ) Elemental analysis _{(C 21 H 23 N 3 O} 4) theory (%): C, 66.13; H, 6.08; N, 1
1.02 found (%): C, 65.67; H, 5.85; N, 1
0.90

【００３２】〔実施例２から６〕実施例１と同様の方法
で得られた化合物を一括して表１に示した。[Examples 2 to 6] The compounds obtained by the same method as in Example 1 are shown in Table 1 collectively.

【００３３】[0033]

【表１】 [Table 1]

【００３４】〔実施例７〕 ［Ｎ−ベンゾイル−（Ｓ）−プロリノイルオキシ］エチ
ル−（Ｅ）−４−オキソ−４−フェニル−２−ブテノエ
ートの合成 Ｎ−ベンゾイル−（Ｓ）−プロリン（２．１９ｇ，１０
ｍｍｏｌ）と（Ｅ）−２−ヒドロキシエチル−４−オキ
ソ−４−フェニル−２−ブテノエート（２．２１ｇ，１
０ｍｍｏｌ）を塩化メチレン（５０ｍｌ）に溶解し、４
−ジメチルアミノピリジン（０．１２２ｇ，１ｍｍｏ
ｌ）を加えた後、室温でＮ、Ｎ′−ジシクロヘキシルカ
ルボジイミド（２．０６ｇ，１０ｍｍｏｌ）の塩化メチ
レン（１０ｍｌ）溶液を加えた。室温で２０時間攪拌
し、不溶物を濾過した後、濾液を減圧乾固し、残査に酢
酸エチル（５０ｍｌ）を加えて溶解し、再度不溶物を濾
過した。濾液を２Ｎ塩酸洗浄、飽和炭酸ナトリウム水溶
液洗浄、次いで飽和食塩水洗浄した。無水硫酸ナトリウ
ムで乾燥後、減圧濃縮した。得られた残留物をシリカゲ
ルクロマトグラフィー〔溶出溶媒：クロロホルム−メタ
ノール（５０：１）さらにヘキサン−酢酸エチル（２：
１）の混合溶媒〕により精製し、表記化合物（１．３
ｇ，３１％）を淡黄色油状物として得た。Example 7 Synthesis of [N-benzoyl- (S) -prolinoyloxy] ethyl- (E) -4-oxo-4-phenyl-2-butenoate N-benzoyl- (S) -proline ( 2.19g, 10
mmol) and (E) -2-hydroxyethyl-4-oxo-4-phenyl-2-butenoate (2.21 g, 1
0 mmol) in methylene chloride (50 ml),
-Dimethylaminopyridine (0.122g, 1mmo
l) was added, and then a solution of N, N′-dicyclohexylcarbodiimide (2.06 g, 10 mmol) in methylene chloride (10 ml) was added at room temperature. The mixture was stirred at room temperature for 20 hours, the insoluble matter was filtered off, the filtrate was evaporated to dryness under reduced pressure, ethyl acetate (50 ml) was added to the residue to dissolve it, and the insoluble matter was filtered again. The filtrate was washed with 2N hydrochloric acid, saturated aqueous sodium carbonate solution, and then saturated brine. The extract was dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under reduced pressure. The obtained residue was chromatographed on silica gel [eluent: chloroform-methanol (50: 1) and then hexane-ethyl acetate (2:
1) mixed solvent] to give the title compound (1.3
g, 31%) as a pale yellow oil.

【００３５】［α］_D；−３９．７（２４℃，ｃ＝１．
０３，ＭｅＯＨ） ＩＲ（ｆｉｌｍ法）ν_max ｃｍ^-1；１７２６（Ｃ＝Ｏ） ＦＡＢ−Ｍａｓｓ（＋） ｍ／ｚ；４２２（Ｍ＋１）^{+ 1} Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ；１．８−２．１５ ａｎ
ｄ ２．２５−２．４５（３Ｈ ａｎｄ １Ｈ，ｍ，ｐｒ
ｏｌｉｎｅ−ＣＨ₂ＣＨ₂），３．４５−３．７（２Ｈ，
ｍ，ＣＨ₂Ｎ），４．３５−４．５５（４Ｈ，ｍ，ＣＨ₂
Ｏ），４．６５−４．７５（１Ｈ，ｍ，ＣＨＮ），６．
８８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，＝ＣＨ），７．３
−７．７（８Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ），７．９−８．０５
（３Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ ａｎｄ ＝ＣＨ） 元素分析（Ｃ₂₄Ｈ₂₃ＮＯ₆） 理論値（％）：Ｃ，６８．４０；Ｈ，５．５０；Ｎ，
３．３２ 実測値（％）：Ｃ，６７．９０；Ｈ，５．２６；Ｎ，
３．３２[Α] _D ; -39.7 (24 ° C., c = 1.
03, MeOH) IR (film method) ν _max cm ^-1 ; 1726 (C = O) FAB-Mass (+) m / z; 422 (M + 1) ^{+ 1} H-NMR (CDCl ₃ ) δ; 1.8- 2.15 an
d 2.25-2.45 (3H and 1H, m, pr
_{oline-CH 2 CH 2),} 3.45-3.7 (2H,
m, CH ₂ N), 4.35-4.55 (4H, m, CH ₂
O), 4.65-4.75 (1H, m, CHN), 6.
88 (1H, d, J = 15.6 Hz, = CH), 7.3
-7.7 (8H, m, Ar-H), 7.9-8.05.
(3H, m, Ar-H and = CH) Elemental analysis (C ₂₄ H ₂₃ NO ₆₎ theory (%): C, 68.40; H, 5.50; N,
3.32 Found (%): C, 67.90; H, 5.26; N,
3.32

【００３６】〔実施例８〕 Ｎ−｛［Ｎ−ベンゾイル−（Ｓ）−プロリノイルオキ
シ］エチル｝−（Ｅ）−４−オキソ−４−フェニル−２
−ブテナミドの合成 実施例１と同様の方法で表記化合物（２．６５ｇ，６３
％）を淡黄色油状物として得た。 ［α］_D；−２９．９（２６℃，ｃ＝１．０７，ＭｅＯ
Ｈ） ＩＲ（ｆｉｌｍ法）ν_max ｃｍ^-1；３３００（ＮＨ），
１７４２（Ｃ＝Ｏ） ＦＡＢ−Ｍａｓｓ（＋） ｍ／ｚ；４２１（Ｍ＋１）^{+ 1} Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ；１．８−２．２ ａｎｄ
２．２８−２．４２（３Ｈ ａｎｄ １Ｈ，ｍ，ｐｒ
ｏｌｉｎｅ−ＣＨ₂ＣＨ₂），３．５−３．８５（２Ｈ，
ｍ，ＣＨ₂Ｎ），４．２５−４．４６（３Ｈ，ｍ，ＣＨ₂
Ｏ ａｎｄ ＣＨＮ），６．９３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１
５．３Ｈｚ，＝ＣＨ），７．３−７．６５（９Ｈ，ｍ，
Ａｒ−Ｈ ａｎｄ ＮＨ），７．８６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝
１５．３Ｈｚ，＝ＣＨ），７．９５−８．０５（２Ｈ，
ｍ，Ａｒ−Ｈ ） 元素分析（Ｃ₂₄Ｈ₂₄Ｎ₂Ｏ₅） 理論値（％）：Ｃ，６８．５６；Ｈ，５．７５；Ｎ，
６．６６ 実測値（％）：Ｃ，６８．６７；Ｈ，５．５８；Ｎ，
６．３１Example 8 N-{[N-benzoyl- (S) -prolinoyloxy] ethyl}-(E) -4-oxo-4-phenyl-2
-Synthesis of butenamide In the same manner as in Example 1, the title compound (2.65 g, 63
%) As a pale yellow oil. [Α] _D ; −29.9 (26 ° C., c = 1.07, MeO
H) IR (film method) v _max cm ^-1 ; 3300 (NH),
1742 (C = O) FAB- Mass (+) m / z; 421 (M + 1) + 1 H-NMR (CDCl 3) δ; 1.8-2.2 and
2.28-2.42 (3H and 1H, m, pr
rine-CH ₂ CH ₂ ), 3.5-3.85 (2H,
m, CH ₂ N), 4.25-4.46 (3H, m, CH ₂
O and CHN), 6.93 (1H, d, J = 1)
5.3 Hz, = CH), 7.3-7.65 (9H, m,
Ar-H and NH), 7.86 (1H, d, J =
15.3 Hz, = CH), 7.95-8.05 (2H,
m, Ar-H) Elemental analysis _{(C 24 H 24 N 2 O} 5) theory (%): C, 68.56; H, 5.75; N,
6.66 Found (%): C, 68.67; H, 5.58; N,
6.31

【００３７】〔実施例９〕 Ｎ−｛［Ｎ−ベンゾイル−（Ｓ）−プロリノイルオキ
シ］エチル｝−Ｎ−メチル−（Ｅ）−４−オキソ−４−
フェニル−２−ブテナミドの合成 実施例１と同様の方法で表記化合物（０．９５ｇ，２２
％）を淡黄色油状物として得た。 ［α］_D；−４９．２（２５℃，ｃ＝１．００，ＭｅＯ
Ｈ） ＩＲ（ｆｉｌｍ法）ν_max ｃｍ^-1；１７４４（Ｃ＝Ｏ） ＦＡＢ−Ｍａｓｓ（＋） ｍ／ｚ；４３５（Ｍ＋１）^{+ 1} Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ；１．８−２．１５ ａｎ
ｄ ２．２５−２．４（３Ｈ ａｎｄ １Ｈ，ｍ，ｐｒｏ
ｌｉｎｅ−ＣＨ₂ＣＨ₂），３．１４ ａｎｄ ３．２８
（３Ｈ，ｅａｃｈ ｓ，Ｎ−ＣＨ₃），３．４５−３．
９（２Ｈ，ｍ，ＣＨ₂Ｎ），４．３−４．７（３Ｈ，
ｍ，ＣＨ₂Ｏ ａｎｄ ＣＨＮ），７．３−７．７（９
Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ ａｎｄ ＝ＣＨ），７．９３（１
Ｈ，ｄ，Ｊ＝１５．０Ｈｚ，＝ＣＨ），８．０−８．１
（２Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ ） 元素分析（Ｃ₂₅Ｈ₂₆Ｎ₂Ｏ₅） 理論値（％）：Ｃ，６９．１１；Ｈ，６．０３；Ｎ，
６．４５ 実測値（％）：Ｃ，６８．７１；Ｈ，６．１７；Ｎ，
６．１７Example 9 N-{[N-benzoyl- (S) -prolinoyloxy] ethyl} -N-methyl- (E) -4-oxo-4-
Synthesis of Phenyl-2-butenamide In the same manner as in Example 1, the title compound (0.95 g, 22
%) As a pale yellow oil. [Α] _D ; −49.2 (25 ° C., c = 1.00, MeO
H) IR (film method) v _max cm ^-1 ; 1744 (C = O) FAB-Mass (+) m / z; 435 (M + 1) ^{+ 1} H-NMR (CDCl ₃ ) δ; 1.8-2. 15 an
d 2.25-2.4 (3H and 1H, m, pro
_{line-CH 2 CH 2),} 3.14 and 3.28
(3H, each s, N- CH 3), 3.45-3.
9 (2H, m, CH ₂ N), 4.3-4.7 (3H,
m, CH ₂ O and CHN), 7.3-7.7 (9
H, m, Ar-H and = CH), 7.93 (1
H, d, J = 15.0 Hz, = CH), 8.0-8.1
(2H, m, Ar-H ) Elemental analysis _{(C 25 H 26 N 2 O} 5) theory (%): C, 69.11; H, 6.03; N,
6.45 Found (%): C, 68.71; H, 6.17; N,
6.17

【００３８】〔製剤例１〕実施例８の化合物及び乳糖を
混合粉砕し、この混合物に乳糖、コーンスターチ、微結
晶セルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ステア
リン酸マグネシウム、カルボキシメチルセルロースカル
シウム、タルクを加えて、さらに均一に混合し、打錠機
を用いて加圧成型して有効成分５０ｍｇを含有する２０
０ｍｇ／錠の錠剤を製造した。 実施例８の化合物 ５０ｍｇ 乳糖 ６０ｍｇ コーンスターチ ４０ｍｇ 微結晶セルロース ３０ｍｇ ヒドロキシプロピルセルロース ８ｍｇ ステアリン酸マグネシウム １ｍｇ カルボキシメチルセルロースカルシウム １０ｍｇ タルク １ｍｇ 計 ２００ｍｇ[Formulation Example 1] The compound of Example 8 and lactose were mixed and ground, and lactose, corn starch, microcrystalline cellulose, hydroxypropyl cellulose, magnesium stearate, carboxymethyl cellulose calcium, and talc were added to the mixture, and the mixture was further homogenized. 20 and containing 50 mg of the active ingredient by pressure molding using a tableting machine.
0 mg / tablet tablets were produced. Compound of Example 8 50 mg Lactose 60 mg Corn starch 40 mg Microcrystalline cellulose 30 mg Hydroxypropyl cellulose 8 mg Magnesium stearate 1 mg Carboxymethyl cellulose calcium 10 mg Talc 1 mg Total 200 mg

【００３９】〔製剤例２〕下記成分を混合し、打錠機を
用いて加圧成型して有効成分１００ｍｇを含有する２２
５ｍｇ／錠の錠剤を製造した。 実施例９の化合物 １００ｍｇ 微結晶セルロース ５５ｍｇ 乳糖 ４９ｍｇ ステアリン酸マグネシウム ２ｍｇ ヒドロキシプロピルセルロース ２ｍｇ カルボキシメチルセルロースナトリウム １５ｍｇ タルク ２ｍｇ 計 ２２５ｍｇ[Formulation Example 2] The following components are mixed and pressure-molded using a tableting machine to contain 100 mg of the active ingredient 22.
Tablets of 5 mg / tablet were produced. Compound of Example 9 100 mg Microcrystalline cellulose 55 mg Lactose 49 mg Magnesium stearate 2 mg Hydroxypropyl cellulose 2 mg Carboxymethyl cellulose sodium 15 mg Talc 2 mg Total 225 mg

【００４０】〔製剤例３〕実施例７の化合物及び乳糖を
混合粉砕し、この混合物を乳糖、コーンスターチ、ステ
アリン酸マグネシウム、カルボキシメチルセルロースカ
ルシウム、ヒドロキシプロピルセルロース及び軽質無水
ケイ酸を加えて、さらに均一に混合した。これを１カプ
セルあたり２００ｍｇの割合で３号ゼラチン硬カプセル
に充填してカプセル剤を製造した。 実施例７の化合物 ５０ｍｇ 乳糖 １１５ｍｇ コーンスターチ ２０ｍｇ ステアリン酸マグネシウム １ｍｇ カルボキシメチルセルロースカルシウム １０ｍｇ ヒドロキシプロピルセルロース ２ｍｇ 軽質無水ケイ酸 ２ｍｇ 計 ２００ｍｇ[Formulation Example 3] The compound of Example 7 and lactose were mixed and ground, and the mixture was further homogenized by adding lactose, corn starch, magnesium stearate, carboxymethyl cellulose calcium, hydroxypropyl cellulose and light anhydrous silicic acid. Mixed. No. 3 gelatin hard capsules were filled with this at a ratio of 200 mg per capsule to produce capsules. Compound of Example 7 50 mg Lactose 115 mg Corn starch 20 mg Magnesium stearate 1 mg Carboxymethyl cellulose calcium 10 mg Hydroxypropyl cellulose 2 mg Light anhydrous silicic acid 2 mg Total 200 mg

【００４１】〔製剤例４〕下記化合物をよく混合した
後、湿潤液（３０％エタノール）を加えて練合し、押し
出し造粒機で造粒し、直ちにマルメライザーで整粒した
後、乾燥、篩過して１２〜４２メッシュの柱状顆粒を製
造した。 柱状顆粒２００ｍｇ中の組成 実施例８の化合物 ５０ｍｇ 乳糖 ５９ｍｇ コーンスターチ ４０ｍｇ 微結晶セルロース ３９ｍｇ ヒドロキシプロピルセルロース ２ｍｇ カルボキシメチルセルロース １０ｍｇ[Formulation Example 4] After thoroughly mixing the following compounds, a wetting liquid (30% ethanol) was added and kneaded, granulated by an extrusion granulator, immediately sized by a marumerizer, and then dried, It was sieved to produce 12-42 mesh columnar granules. Composition of columnar granules 200 mg Compound of Example 8 50 mg Lactose 59 mg Corn starch 40 mg Microcrystalline cellulose 39 mg Hydroxypropyl cellulose 2 mg Carboxymethyl cellulose 10 mg

【００４２】〔製剤例５〕実施例７の化合物を１ｍｌあ
たり１ｍｇ含有する下記成分からなる注射剤を常法によ
り製造した。 実施例７の化合物 １０ｍｇ 注射用ポリエチレングリコール４００ ２ｍｌ 塩化ナトリウム １ｍｇ 注射用蒸留水を加えて全量１０ｍｌとする。[Formulation Example 5] An injection containing the following components containing 1 mg of the compound of Example 7 per ml was produced by a conventional method. Compound of Example 7 10 mg Polyethylene glycol 400 for injection 2 ml Sodium chloride 1 mg Distilled water for injection is added to make a total volume of 10 ml.

【００４３】〔試験例１〕 インビトロにおけるＣＣＫ
−Ａ、ＣＣＫ−Ｂ及びガストリン受容体拮抗作用に関す
る試験 （１） ＣＣＫ−Ａ及びＣＣＫ−Ｂ受容体拮抗作用 ＣＣＫ受容体標品の作成：ｄｄＹ系雄性マウスを断頭屠
殺後、膵臓（ＣＣＫ−Ａ）及び大脳皮質（ＣＣＫ−Ｂ）
を速やかに摘出した。 受容体標本（粗膜分画）の調製：マウスを断頭屠殺し、
直ちに大脳及び膵臓を取り出し、あらかじめ冷却してお
いたＰＢＳ液で洗浄し、大脳皮質を分離した。膵臓及び
大脳皮質は冷却した５０ｍＭトリスバッファー（ｐＨ
７．４）で再度洗浄した。膵臓は０．５〜１．０ｇ／バ
イアルに秤量し、使用時まで−８０℃に保存した。１０
倍量の５０ｍＭトリスバッファーを加え、テフロン−ガ
ラスホモジナイザーにてホモジナイズ（７ストローク）
し、さらにポリトロンホモジナイザーにて２０秒間ホモ
ジナイズした。１５分間４００００×ｇにて遠心分離
し、ペレットを得た。さらに１０倍量の５０ｍＭトリス
バッファーを加え、ポリトロンホモジナイザーにて２０
秒間ホモジナイズし、同様に遠心分離し、ペレットを得
た（２回繰り返し、蛋白質量を測定した）。１０倍量の
インキュベーションバッファー（１０ｍＭ ＨＥＰＥ
Ｓ、１３０ｍＭ ＮａＣｌ、４．７ｍＭ ＫＣｌ、５ｍ
Ｍ ＭｇＣｌ₂・６Ｈ₂０、１ｍＭ ＥＧＴＡ、５ｍｇ／
ｍｌＢＳＡ及び０．２５ｍｇ／ｍｌバシトロシンを含
む）を加え、ポリトロンホモジナイザーにて２０秒間ホ
モジナイズ後、同バッファーにて大脳皮質は最終的に２
００倍、膵臓は１００倍希釈し、それぞれＣＣＫ−Ｂ及
びＣＣＫ−Ａ受容体標本とした。 バインディングアッセイ： 被験薬液の調製：ガラス試験管にそれぞれ被験化合物を
秤量し、ＤＭＳＯ液に溶解して１０ｍＭ濃度、さらに蒸
留水で２倍、５０％ＤＭＳＯ液で２倍希釈して２．５ｍ
Ｍ（最終濃度０．１ｍＭ）の被験薬液を調製した。チュ
ーブに被験薬液２０μｌ、［³Ｈ］ＣＣＫ−８（５０ｎ
Ｍ）１０μｌ及び受容体標本４７０μｌを添加した。２
５℃で３０分間インキュベーションした後、吸引濾過し
（Ｗｈａｔｍａｎ ｇｌａｓｓ ｍｉｃｒｏｆｉｌｔｅ
ｒ，ＧＦ／Ｃ）、冷却した５０ｍＭトリスバッファーに
て３回洗浄した。５ｍｌのインスタゲルカクティルを加
え、振盪後数時間放置し、放射能を液体シンチレーショ
ンカウンターにより５分間計測した。総結合数の測定
は、被験薬液の代わりに５０％ＤＭＳＯ液２０μｌを用
い、また非特異的結合数の測定には、セルレイン（ｃｅ
ｒｕｌｅｉｎ）（１μＭ）２０μｌを用い、同様に行っ
た。被験薬液（０．１ｍＭ濃度）の特異的な結合数［総
結合数（ｄｐｍ）−非特異的結合数（ｄｐｍ）］を算出
し、競合的阻害率を求め、その結果を表２に示した。[Test Example 1] CCK in vitro
-A, CCK-B and gastrin receptor antagonism (1) CCK-A and CCK-B receptor antagonism Preparation of CCK receptor preparation: ddY male mice were decapitated and then pancreas (CCK-A ) And cerebral cortex (CCK-B)
Was promptly removed. Preparation of Receptor Specimen (Coarse Membrane Fraction): Mice were killed by decapitation,
Immediately, the cerebrum and pancreas were taken out and washed with a pre-cooled PBS solution to separate the cerebral cortex. Pancreas and cerebral cortex were cooled with 50 mM Tris buffer (pH
It wash | cleaned again by 7.4). The pancreas was weighed at 0.5 to 1.0 g / vial and stored at −80 ° C. until use. 10
Add double volume of 50 mM Tris buffer and homogenize with Teflon-glass homogenizer (7 strokes).
And further homogenized for 20 seconds with a Polytron homogenizer. The pellet was obtained by centrifugation at 40,000 xg for 15 minutes. Further, add 10 times volume of 50 mM Tris buffer, and add 20 with a Polytron homogenizer.
The mixture was homogenized for 2 seconds and centrifuged in the same manner to obtain a pellet (repeated twice to measure the protein amount). 10 volumes of incubation buffer (10 mM HEPE
S, 130 mM NaCl, 4.7 mM KCl, 5 m
_{M MgCl 2 · 6H 2 0,1mM EGTA} , 5mg /
mlBSA and 0.25 mg / ml bacitrosin) were added and homogenized for 20 seconds with a Polytron homogenizer, and then the cerebral cortex was finally adjusted to 2 with the same buffer.
The 00-fold and the pancreas were diluted 100-fold and used as CCK-B and CCK-A receptor specimens, respectively. Binding assay: Preparation of test drug solution: Each test compound was weighed in a glass test tube, dissolved in DMSO solution to a concentration of 10 mM, and further diluted with distilled water by 2 times and 50% DMSO solution by 2 times to 2.5 m.
A test drug solution of M (final concentration 0.1 mM) was prepared. 20 μl of test drug solution, [ ³ H] CCK-8 (50 n
M) 10 μl and receptor preparation 470 μl were added. 2
After incubating at 5 ° C. for 30 minutes, suction filtration (Whatman glass microfilte was performed.
r, GF / C), and washed with cold 50 mM Tris buffer three times. 5 ml of Instagelcutyl was added, the mixture was left for several hours after shaking, and the radioactivity was measured for 5 minutes by a liquid scintillation counter. The total binding number was measured by using 20 μl of 50% DMSO solution instead of the test drug solution, and the non-specific binding number was measured by cerulein (ce).
rulein) (1 μM) was used in the same manner. The specific binding number [total binding number (dpm) -nonspecific binding number (dpm)] of the test drug solution (0.1 mM concentration) was calculated, and the competitive inhibition rate was calculated. The results are shown in Table 2. .

【００４４】（２） ガストリン受容体拮抗作用 ガストリン受容体標品の作成：Ｈａｒｔｌｅｙ系雄性モ
ルモットを断頭屠殺後、胃を速やかに摘出し、バーグリ
ン及びオブリンク、アクタ・フィジオロジカ・スカンジ
ナビカ、第９６巻、第１５０ページ、１９７６年［Berg
lingh and Obrink, Acta Physiologica Scandinavica,
96, 150(1976)］およびプライスマンら、Ｃ．Ｊ．レセ
プター・リサーチ、第３巻、１９８３年［Praissman et
al., C. J. Receptor Res., 3(1983)］の方法に従っ
て、胃粘膜腺を調製した。 受容体標本（遊離胃腺）の調製：モルモットを断頭屠殺
し、直ちに胃を摘出し、大弯部を切開し内容物を冷水中
で洗浄した。胃粘膜を剥離し、完全に洗浄した後、下記
成分からなる標準緩衝液中鋭いはさみで切り刻んだ（１
２８ｍＭ ＮａＣｌ、４．８ｍＭ ＫＣｌ、５ｍＭ Ｎ
ａＨＣＯ₃、１．２ｍＭ ＫＨ₂ＰＯ₄、１．２ｍＭ Ｍｇ
ＳＯ₄、２ｍＭ ＣａＣｌ₂、１０ｍＭ グルコース及び
４ｍＭ Ｌ−グルタミン、ｐＨ７．４の１２．５ｍＭ
ＨＥＰＥＳに０．０２５％トリプシンインヒビター、Ｍ
ＥＭビタミン溶液、ＭＥＭアミノ酸溶液を添加）。切り
刻んだ組織を洗浄した後、０．１％コラゲナーゼ及び
０．１％ＢＳＡを含有した緩衝液と共に３７℃の振盪浴
中で４０分間インキュベーションした。組織を２０ｍｌ
プラスチック製シリンジに４回通過させて胃腺を遊離さ
せた後、２００メッシュフィルターに通して濾過した。
濾過した胃腺を２７０×ｇで２分間遠心分離し、再懸濁
及び遠心分離によって２回洗浄し、ガストリン受容体標
本とした。 バインディングアッセイ： 被験薬液の調製：ガラス試験管にそれぞれ被験化合物を
秤量し、ＤＭＳＯ液に溶解し１０ｍＭ濃度（最終濃度
０．１ｍＭ）を被験薬液を調製した。調製した洗浄済み
モルモット胃腺をバシトラシン０．２５ｍｇ／ｍｌ含有
標準緩衝液４０ｍｌに再懸濁した。シリコナイズした
１．５ｍｌプラスチックチューブに胃腺２３０μｌを加
え、１５分間インキュベーションした後、１０μｌの緩
衝液（全結合用）又はガストリン（最終濃度１μＭ、非
特異的結合用）と２．５μｌのＤＭＳＯ又は被験薬液及
び１０μｌの¹²⁵Ｉ−ガストリン（ＮＥＷ、２２００Ｃ
ｉ／ｍｍｏｌ、最終１００ｐＭ）を加えた。２５℃で１
５分間のインキュベーションした後、冷却した緩衝液１
ｍｌを添加し、９０００×ｇで１分間遠心分離した。さ
らに０．５ｍｌの緩衝液で洗浄後、遊離胃腺が沈殿した
プラスチックチューブの先端をカットすることにより採
取した遊離胃腺の放射能をガンマーカウンターにより計
測した。被験薬液（０．１ｍＭ濃度）の特異的な結合数
［総結合数（ｄｐｍ）−非特異的結合数（ｄｐｍ）］を
算出し、競合的阻害率を求め、その結果を表２に示し
た。(2) Gastrin Receptor Antagonistic Action Preparation of Gastrin Receptor Specimen: After slaughtering decapitated male Hartley guinea pigs, the stomach was rapidly removed, Berglin and Obrink, Acta Physiologica Scandinavian, Vol. 96, Page 150, 1976 [Berg
lingh and Obrink, Acta Physiologica Scandinavica,
96, 150 (1976)] and Priceman et al. J. Receptor Research, Volume 3, 1983 [Praissman et
al., CJ Receptor Res., 3 (1983)], gastric mucosal glands were prepared. Preparation of receptor specimen (free gastric gland): A guinea pig was killed by decapitation, the stomach was immediately removed, the greater curvature was incised, and the contents were washed in cold water. The gastric mucosa was peeled off, thoroughly washed, and then chopped with sharp scissors in a standard buffer solution containing the following components (1
28 mM NaCl, 4.8 mM KCl, 5 mM N
aHCO ₃ , 1.2 mM KH ₂ PO ₄ , 1.2 mM Mg
SO _4, 2mM CaCl _2, 10mM glucose and 4 mM L-glutamine, 12.5 mM of pH7.4
HEPES with 0.025% trypsin inhibitor, M
Add EM vitamin solution and MEM amino acid solution). After the minced tissue was washed, it was incubated with a buffer containing 0.1% collagenase and 0.1% BSA for 40 minutes in a 37 ° C. shaking bath. 20 ml tissue
It was passed through a plastic syringe four times to release the gastric glands, and then filtered through a 200 mesh filter.
The filtered gastric glands were centrifuged at 270 xg for 2 minutes, washed twice by resuspension and centrifugation, and used as a gastrin receptor sample. Binding assay: Preparation of test drug solution: A test compound was weighed in a glass test tube and dissolved in a DMSO solution to prepare a test drug solution having a concentration of 10 mM (final concentration 0.1 mM). The prepared washed guinea pig gastric glands were resuspended in 40 ml of standard buffer containing 0.25 mg / ml bacitracin. 230 μl of gastric gland was added to a 1.5 ml plasticized tube and incubated for 15 minutes, then 10 μl of buffer (for total binding) or gastrin (final concentration 1 μM, for non-specific binding) and 2.5 μl of DMSO or test drug solution. And 10 μl of ¹²⁵ I-gastrin (NEW, 2200C
i / mmol, final 100 pM) was added. 1 at 25 ° C
After incubation for 5 minutes, chilled buffer 1
ml was added and centrifuged at 9000 xg for 1 minute. After washing with 0.5 ml of a buffer solution, the radioactivity of the free gastric glands collected by cutting the tip of the plastic tube in which the free gastric glands were precipitated was measured by a gamma counter. The specific binding number [total binding number (dpm) -nonspecific binding number (dpm)] of the test drug solution (0.1 mM concentration) was calculated, and the competitive inhibition rate was calculated. The results are shown in Table 2. .

【００４５】[0045]

【表２】 [Table 2]

【００４６】〔試験結果〕 前記の表２の結果から、本
発明化合物はＣＣＫ−Ａ、ＣＣＫ−Ｂ及びガストリン受
容体拮抗作用を有することが明らかとなった。[Test Results] From the results shown in Table 2 above, it was revealed that the compounds of the present invention have CCK-A, CCK-B and gastrin receptor antagonistic activity.

【００４７】〔試験例２〕 ヘリコバクター・ピロリに
対する抗菌作用 寒天希釈法を用い、それぞれのヘリコバクター・ピロリ
（標準菌株 ＡＴＣＣ４３５０４及びＡＴＣＣ ４３５
２６）に対する抗菌活性を測定した。試験に先立って、
５％馬脱繊血を含むトリプチケース ソイ 寒天（Trip
ticase soyagar）斜面培地上、ＨＰ菌を１０％ ＣＯ₂／
９０％ air条件下、３７℃ ４日間前培養した。その
後、２mlのブルセラ液体培地（Brucella broth）を加
え、軽くピペッティングすることによりＨＰ菌液を回収
した。次に、得られた菌液の１００μｌを９６穴マルチ
ウエルプレートに取り、６５０ｎｍにおける濁度を測定
し、マックファーランド（MacFarland）Ｎｏ．２［衛生
検査技術講座 ４，微生物学（第５版），３３８〜３３
９（１９６９）］の濁度（ＯＤ６５０ 約０．１４８）
になるようにブルセラ液体培地で調製した。一方、被験
化合物はジメチルスルホキシドに溶解し、この溶媒の最
終濃度が１％以下になるように滅菌蒸留水を加え、５μ
ｇ／ｍｌから８０ｍｇ／ｍｌの２倍希釈系列の被験薬液
を調製した。この被験薬液を８０μｌをオートクレーブ
滅菌後、４８℃に保温した１０％無菌馬血清を含むミュ
ーラー・ヒントン寒天培地（Mueller Hintone agar）８
ｍｌに、被験薬液８０μｌを加え、充分に混合した後に
直径６０ｍｍのシャーレに注ぎ、放冷固化してこれを試
験培地とした。次に、この試験培地にブルセラ液体培地
で調製したＨＰ菌液５μｌをマイクロプランターで接種
し、ガスパックジャー中、微好気下に３７℃で３日間培
養した後、肉眼で可視的発育を示さない最小発育阻止濃
度（ＭＩＣ）を求めた。なお、対照薬として、ストレプ
トマイシン、オメプラゾール及びプラウノトールを使用
し、被験化合物と同様に操作してそれぞれのＭＩＣ値を
求めた。それらの結果を表３に示した。[Test Example 2] Antibacterial activity against Helicobacter pylori Using the agar dilution method, the respective Helicobacter pylori (standard strains ATCC 43504 and ATCC 435) were used.
The antibacterial activity against 26) was measured. Prior to the exam
Triptychase Soy Agar (Trip) containing 5% horse defibrillation
ticase soyagar) HP bacteria 10% CO ₂ / on a slant medium
Preculture was carried out at 37 ° C. for 4 days under 90% air condition. After that, 2 ml of Brucella liquid medium (Brucella broth) was added thereto, and lightly pipetting was performed to recover the HP bacterial solution. Next, 100 μl of the obtained bacterial solution was placed in a 96-well multi-well plate, the turbidity at 650 nm was measured, and MacFarland No. 2 [Hygiene Inspection Technology Course 4, Microbiology (5th Edition), 338-33
9 (1969)] turbidity (OD650 about 0.148)
Was prepared in Brucella liquid medium. On the other hand, the test compound is dissolved in dimethylsulfoxide, and sterile distilled water is added so that the final concentration of this solvent is 1% or less, and 5 μm is added.
A test drug solution of 2-fold dilution series from g / ml to 80 mg / ml was prepared. After autoclaving 80 μl of this test drug solution, Mueller Hintone agar containing 10% sterile horse serum kept at 48 ° C. (Mueller Hintone agar) 8
80 μl of the test drug solution was added to ml, mixed thoroughly, poured into a dish having a diameter of 60 mm, and allowed to cool and solidify to obtain a test medium. Next, this test medium was inoculated with 5 μl of HP bacterial solution prepared in Brucella liquid medium with a microplanter and cultured in a gas pack jar under aerobic conditions at 37 ° C. for 3 days, after which it showed visible growth with the naked eye. The minimum inhibitory concentration (MIC) was determined. Note that streptomycin, omeprazole, and plaunotol were used as control drugs, and the MIC values of each were determined by operating in the same manner as the test compound. Table 3 shows the results.

【００４８】[0048]

【表３】 [Table 3]

【００４９】〔試験結果〕 前記の表３の結果から、本
発明化合物はＨＰに対して、強い抗菌作用を有すること
が明らかとなった。[Test Results] From the results in Table 3 above, it became clear that the compounds of the present invention have a strong antibacterial action against HP.

【００５０】〔試験例３〕 急性毒性試験 本発明化合物（５００ｍｇ／ｋｇ）を０．５％カルボキ
シメチルセルロースナトリウム溶液に懸濁し、２４時間
絶食したｄｄＹ系雄性マウス（５週令、一群５匹）に、
経口投与し、投与後７日間観察したところ、全例に死亡
例は認められなかった。Test Example 3 Acute Toxicity Test In a ddY male mouse (5 weeks old, 5 mice per group), the compound of the present invention (500 mg / kg) was suspended in a 0.5% sodium carboxymethylcellulose solution and fasted for 24 hours. ,
Oral administration and observation for 7 days after administration revealed no death in any case.

【００５１】[0051]

【発明の効果】以上の結果から、本発明化合物（Ｉ）
は、ＣＣＫ−Ａ、ＣＣＫ−Ｂ、ガストリン受容体拮抗作
用及びＨＰに対して強い抗菌作用を有することから、消
化器官系疾患の予防及び治療薬として有効である。From the above results, the compound (I) of the present invention
Has a CCK-A, CCK-B, gastrin receptor antagonistic action and a strong antibacterial action against HP, and is therefore effective as a preventive and therapeutic drug for digestive system diseases.

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 西川 淳 滋賀県野洲郡野洲町久野部184−２ ヴィ ルヌーブ 野洲909号 (72)発明者 高橋 和義 滋賀県守山市岡町60−３ ─────────────────────────────────────────────────── ─── Continuation of the front page (72) Inventor Jun Nishikawa 184-2 Kunobu, Yasu-cho, Yasu-gun, Shiga Prefecture Viruneuve No. 909 Yasu (72) Inventor Kazuyoshi Takahashi 60-3 Okamachi, Moriyama-shi, Shiga Prefecture

Claims (4)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項１】 下記の一般式（Ｉ） 【化１】 ［式中、Ｒ¹はＡ−ＣＯ−ＣＨ＝ＣＨ−基（Ａは置換基
を有していてもよいフェニル基を表す。）又はＮＨＲ²
で示されるアミノ基（Ｒ²は水素原子、低級アルキル
基、シクロアルキル基、低級アルケニル基、アラルキル
基又はフェニル基を表す。）を表す。Ｘは酸素原子又は
ＮＲ³で示されるイミノ基（Ｒ³は水素原子、低級アルキ
ル基、ベンジル基又はフェニル基を表す。）を表す。Ｙ
は酸素原子又は硫黄原子を表す。］で表わされるＮ−ベ
ンゾイルプロリンエステル誘導体。1. A compound represented by the following general formula (I): [In the formula, R ¹ represents an A—CO—CH═CH— group (A represents a phenyl group which may have a substituent) or NHR ²
(Wherein R ² represents a hydrogen atom, a lower alkyl group, a cycloalkyl group, a lower alkenyl group, an aralkyl group or a phenyl group). X represents an oxygen atom or an imino group represented by NR ³ (R ³ represents a hydrogen atom, a lower alkyl group, a benzyl group or a phenyl group). Y
Represents an oxygen atom or a sulfur atom. ] The N-benzoyl proline ester derivative represented by these. 【請求項２】 Ｒ¹はＮＨＲ²で示されるアミノ基（Ｒ²
はメチル基又はフェニル基を表す。）であり、ＸはＮＲ
³で示されるイミノ基（Ｒ³は水素原子又はメチル基を表
す。）であり、Ｙは酸素原子又は硫黄原子である請求項
１に記載の化合物。Wherein the amino group R ¹ is represented by NHR ² (R ²
Represents a methyl group or a phenyl group. ) And X is NR
Imino group represented by ³ (R ³ represents a hydrogen atom or a methyl group.), And, Y is A compound according to claim 1 is an oxygen atom or a sulfur atom. 【請求項３】 Ｒ¹はＡ−ＣＯ−ＣＨ＝ＣＨ−基（Ａは
フェニル基を表す）であり、Ｘは酸素原子又はＮＲ³で
示されるイミノ基（Ｒ³は水素原子又はメチル基を表
す。）であり、Ｙは酸素原子である請求項１に記載の化
合物。3. R ¹ is an A—CO—CH═CH— group (A represents a phenyl group), X is an oxygen atom or an imino group represented by NR ³ (R ³ is a hydrogen atom or a methyl group). The compound of claim 1, wherein Y is an oxygen atom. 【請求項４】 請求項１〜３のいずれか１項記載の化合
物を有効成分とする消化器官系疾患の予防又は治療のた
めの医薬組成物。4. A pharmaceutical composition for preventing or treating a gastrointestinal system disease, which comprises the compound according to any one of claims 1 to 3 as an active ingredient.