JPH08511509A

JPH08511509A - Synthetic matrix metalloprotease inhibitor and uses thereof

Info

Publication number: JPH08511509A
Application number: JP6522412A
Authority: JP
Inventors: ガラーディー，リチャード・エドワード; グロベルニー，ダミアン; シュルツ，グレゴリー・スコット
Original assignee: グリコメド・インコーポレイテッド
Priority date: 1993-04-07
Filing date: 1994-04-01
Publication date: 1996-12-03
Also published as: EP0692931A1; EP0692931A4; CA2160139A1; WO1994022309A1; AU6554294A

Abstract

(57)【要約】皮膚疾患、円錐角膜、再発狭窄症および創傷よりなる群から選ばれた疾患の治療または予防に有用な方法および組成物が開示される。該組成物には、合成の哺乳動物マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤が含まれる。 (57) [Summary] Disclosed are methods and compositions useful for treating or preventing a disease selected from the group consisting of skin diseases, keratoconus, restenosis and wounds. The composition includes a synthetic mammalian matrix metalloprotease inhibitor.

Description

【発明の詳細な説明】合成マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤およびその用途技術分野本発明は、マトリックスメタロプロテアーゼの阻害剤である合成化合物、およびその医学的応用に関する。関連技術構造タンパク質の分解を行い、メタロプロテアーゼに構造的に関連した多数の酵素が存在する。これらには、ヒト皮膚線維芽細胞コラゲナーゼ、ヒト皮膚線維芽細胞ゼラチナーゼ、ヒト好中球コラゲナーゼおよびゼラチナーゼ、およびヒトストロメリシン（stromelysin）が含まれる。これらは、アンジオテンシン変換酵素やエンケファリナーゼと同様、亜鉛含有メタロプロテアーゼである。コラゲナーゼおよびその関連酵素は、慢性関節リウマチ（ムリンズ（Ｍullins ,Ｄ.Ｅ.）ら、Ｂiochim Ｂiophys Ａcta（１９８５）６９５：１１７〜２１４）；腫瘍細胞の転移（同書、ブロードハースト（Ｂroadhurst,Ｍ.Ｊ.）ら、ＥＰ出願２７６４３６（１９８７）、ライヒ（Ｒeich,Ｒ.）ら、Ｃancer Ｒes（１９８８）４８：３３０７〜３３１２）；および種々の潰瘍状態を含む幾つかの疾患の総合的症状を媒体するうえで重要である。潰瘍形成性状態は、アルカリ火傷の結果、またはシュードモナス・エルジノーサ（Ｐseudomonas aeruginosa）、アカントアメーバ（Ａcanthamoeba）、単純ヘルペスおよびワクシニアウイルスによる感染の結果、角膜となる。望ましくないマトリックスメタロプロテアーゼ活性を特徴とする他の状態としては、歯周病、表皮水泡症および強膜炎が挙げられる。コラゲナーゼが多数の疾患状態に関与していることから、この酵素の阻害剤を調製しようとする試みがなされている。幾つかのかかる阻害剤が、サール（Ｇ. Ｄ.Ｓearle）のＥＰ出願第１２６,９７４号（１９８４年公開）および同第１５９,３９６号（１９８５年公開）に開示されている。これら阻害剤は、アミノ窒素に結合した両置換基中の２−位にオキソ置換基を有する第二級アミンである。本発明の化合物に一層関連したものとしては、サールの米国特許第４,５９９, ３６１号および同第４,７４３,５８７号に開示された化合物が挙げられる。これら化合物は、その一部にチロシンまたは誘導体化チロシンまたはそれらのある種の類似体を有するヒドロキシルアミンジペプチド誘導体である。スルフヒドリル残基並びにフェニルアラニンやトリプトファンなどの芳香族アミノ酸残基を含有する他の化合物がＰＣＴ出願ＷＯ８８／０６８９０号に開示されている。これら化合物の幾つかはまたｉ−ブチル側鎖を有する。ＰＣＴ出願ＷＯ９２／２１３６０号（発明者はサフー（Ｓahoo,Ｓ.）ら）には、置換Ｎ−カルボキシアルキルペプチジル誘導体、および変形性関節炎、慢性関節リウマチ、ある種の癌および角膜潰瘍形成を含むある種の疾患の治療にこれら化合物を応用することが記載されている。ＥＰ出願第４９７,１９２号（発明者はロッブ（Ｌobb,Ｒ.）ら、）には、薬理学的特性を有するペプチドコラゲナーゼ阻害剤が呈示されている。米国特許第４,６８１,８９４号（発明者はマレイ（Ｍurray,Ｗ.）ら）には、抗炎症剤として有用なヒドロキサム酸およびエステルが呈示されている。米国特許第４,９４３,５８７号（発明者はチェテンコ（Ｃetenko）ら）には、選択された非ステロイド性抗炎症剤のアシル残基のヒドロキサム酸誘導体が記載されている。これら化合物の医学用途もまた示されている。米国特許第４,９１８,１０５号（発明者はカートライト（Ｃartwright,Ｔ.）ら）には、コラゲナーゼ阻害作用を有する化合物が呈示されている。関節炎、潰瘍形成および腫瘍浸潤を含むある種の医学的応用が記載されている。阻害剤はまた、関連プロテアーゼであるサーモリシンに関しても開示されている。これらには、ニシノ（Ｎishino,Ｎ.）ら、Ｂiochemistry（１９７９）１８：４３４０〜４３４７；ニシノら、Ｂiochemistry（１９７８）１７：２８４６〜２８５０によって記載されているヒドロキサム酸ペプチド誘導体が含まれる。トリプトファンもまた種々の状態を治療しうることが知られており、これら疾患の幾つかにはコラゲナーゼが関与している（たとえば、ＪＰ５７／０５８６２６；米国特許第４,６９８,３４２号；同第４,２９１,０４８号参照）。また、細菌コラゲナーゼの阻害剤もまた米国特許第４,５５８,０３４号に開示されている。以下に記載する化合物は、マトリックスメタロプロテアーゼに関して優れた阻害活性を有することがわかった。本発明の化合物は、構造タンパク質を破壊し本明細書で「マトリックスメタロプロテアーゼ」と称するクラスのタンパク質による望ましくない作用を特徴とする状態および疾患の治療に利用できる薬剤のレパートリーを広げるものである。本発明の化合物はまた、一つの成員として望ましくない血管形成を有する疾患を治療するうえでも有用である。血管形成とは、新たな血管、とりわけ毛細管の増殖として定義される。そのような毛細管および補助血管の内方成長は腫瘍の増殖に必須であり、それゆえ、悪性組織の広がりおよび転移を促進する望ましくない生理応答である。それゆえ、血管形成の抑制は悪性腫瘍の有効な治療の一つの成員と考えられる。目の血管新生（neovascularization）は盲目の主要な原因である。この状態の一つの形態である増殖性糖尿病性網膜症は糖尿病の結果生じる。盲目はまた、血管新生性緑内障によっても生じる。血管形成の抑制は、これら状態を治療するうえでも有用である。ＰＣＴ出願ＷＯ９１／１１１９３号（１９９１年１月２５日発行）には、血管形成を抑制するコラゲナーゼ阻害剤の軟骨からの単離が記載されている。この組成物（軟骨由来阻害剤（ＣＤＩ）と称する）は、ウサギ角膜ポケットアッセイにおいて腫瘍により誘発される血管形成を抑制すること、および毛細管の生成を抑制することが報告されている。ペプチドやコラゲナーゼと免疫反応する抗体などの他のコラゲナーゼ阻害剤もまた血管形成を抑制する能力を有することがさらに推測される。加えて、ＥＰ出願第４２４,１９３号（１９９１年４月２４日公開）には、血管形成抑制剤としてのアクチノニン（actinonin）の作用が記載されている。アクチノニンはストレプトマイセス（Ｓtreptomyces）の特定の株によって産生される抗生物質であり、修飾されたペプチド構造である。上記２つの出願に開示されているように、望ましくないレベルの血管形成は、腫瘍増殖に関連して存在するばかりでなく、糖尿病性網膜症の結果としての盲目その他の眼科病理の原因でもある。発明の開示本発明の方法および組成物は、根源的な原因として望ましくないマトリックスメタロプロテアーゼ活性の活性化および／または発現を有するある種の疾患を予防または治療するために用いるのが好ましい。そのような疾患としては、皮膚疾患、円錐角膜、再発狭窄症、創傷、潰瘍（とりわけ、角膜または口の）、または制御されない血管形成によって好影響を受ける疾患状態が挙げられる。後者に関しては、本発明は、好ましくは患者の体内の癌の増殖および拡散を容易にしたり必要な血管形成を抑制することによる、癌の治療方法に関する。マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤のクラスの幾つかの成員は当該技術分野で知られている。他のものは、米国特許出願第０７／７４７,７５１号（１９９１年８月２０日出願）；同第０７／７４７,７５２号（１９９１年８月２０日出願）；および同第０７／６１５,７９８号（１９９０年１１月２１日出願）（参照のため本明細書中に引用する）に記載および特許請求されている。当該技術分野で知られている合成マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤の要約が、ＥＰ出願第４２３,９４３号（１９９１年４月２４日公開）に記載されている。この出願では、当該技術分野で知られた合成マトリックスメタロプロテアーゼの構造を組み立て、神経系の髄鞘破壊性疾患の治療へのその使用を特許請求している。本発明は、これら化合物、並びに上記米国特許出願に開示された化合物の上記用途および以下に記載する他の用途への使用に関する。図面図１は、ＰｄｉＢｕ（パネルＡ）またはＰｄｉＢｕおよび化合物５Ａ（パネルＢ）に暴露し、ヘマトキシリンおよびエオシンで染色３日後のマウス皮膚の光学顕微鏡写真を示す。図２は、術後１〜７日に回収した***切除流体試料中に存在するプロテアーゼレベルが、平均０.７５±０.０６μｇ当量のコラゲナーゼ／ｍｌ創傷流体であったことを示している。図３は、閉鎖性（術後の異なる日に回収）、解放性、または慢性創傷から回収した***切除創傷流体中に存在するプロテアーゼレベルの比較を示す。閉鎖性創傷は限界プロテアーゼ活性を示すのに対して、解放性創傷流体には平均１９９± ５９μｇ／ｍｌのプロテアーゼレベルが含まれ、慢性創傷から回収した流体には平均１２５±９５μｇ／ｍｌのプロテアーゼレベルば含まれていたことに注意すべきである。図４は、慢性創傷流体のプロテアーゼ活性に対する３つのプロテアーゼ阻害剤の効果を示す。化合物５Ａは、最終濃度４０μｇ／ｍｌ（１００μＭ）または４ μｇ／ｍｌ（１０μＭ）にてアゾコル（Ａzocoll）のタンパク質分解を非常に有効に阻害した（最初のタンパク質加水分解活性の約９６％）。メタロプロテイナーゼの非特異的阻害剤であるＥＤＴＡもまたプロテアーゼ活性を有効に減少させた（約９６％）。セリンプロテアーゼの非特異的阻害剤であるＰＭＳＦは、５００μＭの濃度にてタンパク質加水分解活性を約６５％減少させた。図５は、解放性および慢性創傷中に存在するプロテアーゼ活性に対する阻害剤、化合物５Ａ、ＰＭＳＦおよびＥＤＴＡの効果を示す。化合物５ＡおよびＥＤＴＡは非常に効果的な阻害剤であったが、ＰＭＳＦは創傷流体のタンパク質分解活性を有意に減少させなかった。図６は、創傷流体によるアゾコルのタンパク質加水分解に対する化合物５Ａ、Ｓ１２０９、ＵＬ００１、ＭＰ５０６およびＥＤＴＡの効果を示す。図７は、慢性創傷流体中に存在するプロテアーゼ活性に対する阻害剤ＧＭ６００１、ＧＭ１３３９、ＧＭ１４８９およびＳ１２０９の効果を示す。発明の実施の態様本発明の阻害化合物は、哺乳動物マトリックスメタロプロテアーセの合成阻害剤である。マトリックスメタロプロテアーゼとしては、ヒト皮膚線維芽細胞コラゲナーゼ、ヒト皮膚線維芽細胞ゼラチナーゼ、ヒト好中球コラゲナーゼおよびゼラチナーゼ、およびヒトストロメリシンが挙げられるが、これらに限られるものではない。これらは、アンジオテンシン変換酵素やエンケファリナーゼと同様、亜鉛含有メタロプロテアーゼ酵素である。本明細書において「哺乳動物マトリックスメタロプロテアーゼ］とは、適当なアッセイ条件下でコラーゲン、ゼラチンまたはプロテオグリカンの分解を触媒しうる哺乳動物起原の亜鉛含有酵素を意味する。適当なアッセイ条件は、たとえば、米国特許第４,７４３,５８７号（コーストン（Ｃawston）らの手順（Ａnal Ｂiochem（１９７９）９９：３４０〜３４５）を参照している）に記載されており、合成基質の使用はウエインガーテン（Ｗei ngarten,Ｈ.）らのＢiochem Ｂiophys Ｒes Ｃomm（１９８４）１３９：１１８４〜１１８７に記載されている。もちろん、これら構造タンパク質の分解を分析するためのいかなる標準法も用いることができる。本明細書中に言及するマトリックスメタロプロテアーゼ酵素は、すべて、たとえばヒトストロメリシンや皮膚線維芽細胞コラゲナーゼに構造上類似した亜鉛含有プロテアーゼである。マトリックスメタロプロテアーゼ活性を阻害する候補化合物の能力は、もちろん、上記アッセイで試験することができる。単離したマトリックスメタロプロテアーゼ酵素は、本発明の化合物の阻害活性を確認するのに用ることができるし、または組織を破壊しうる所定範囲の酵素を含む粗製の抽出物を用いることができる。詳しくは、阻害活性のアッセイは以下のようにして行うことができる。阻害剤のアッセイは、コーチルビッツ（Ｋortylewicz）およびガラーディ（Ｇalardy）のＪＭed Ｃhem（１９９０）３３：２６３〜２７３に正確に記載されているように、ｐＨ６.５にて合成チオールエステル基質を用い、粗製のまたは精製したヒト皮膚線維芽細胞コラゲナーゼに対して１〜２ｎＭのコラゲナーゼ濃度にて行うことができる。候補阻害剤の試験は、このアッセイにおいて、ヒト皮膚線維芽細胞からの粗製のコラゲナーゼおよびゼラチナーゼ、化膿したヒト好中球からの粗製のコラゲナーゼおよびゼラチナーゼを阻害する能力について行う。その結果は、Ｋｉ、すなわち、酵素との阻害剤複合体の計算した解離定数として示すことができる。有効な阻害剤のＫｉ値は、このアッセイにおいて精製酵素に対して≦ ５００ｎＭである。精製ヒト皮膚コラゲナーゼに対し、優れた阻害剤は≦１０ｎＭのＫｉ値を示す。ヒトストロメリシンの阻害アッセイは、ティーハン（Ｔeaha n，Ｊ.）らのＢiochemistry（１９８９）２０：８４９７〜８５０１の記載に従って行う。これら哺乳動物マトリックスメタロプロテアーゼ阻害アッセイにおいて良好な結果の得られた合成化合物は、一般に、少なくとも一つのアミド結合を有し、種々の側鎖置換基を有する小さな分子である。当該技術分野で知られたかかる化合物の例は、上記のように、ＥＰ出願第４２３,９４３号（参照のため本明細書に引用する）に記載されている。他の適当な阻害剤は、式：または（式中、各Ｒ¹は独立にＨまたはアルキル（１〜８Ｃ）、Ｒ²はアルキル（１〜８Ｃ）、または近接するＲ¹とＲ²とが一緒になって−(ＣＨ₂)_p−（式中、ｐは３〜５）を形成；Ｒ³はＨまたはアルキル（１〜４Ｃ）；Ｒ⁴は縮合したまたは共役した非置換または置換のビシクロアリールメチレン；ｎは０、１または２；ｍは０または１；ＸはＯＲ⁵またはＮＨＲ⁵（式中、Ｒ⁵はＨまたは置換または非置換のアルキル（１〜１２Ｃ）、アリール（６〜１２Ｃ）、アリールアルキル（６〜１６Ｃ）；またはＸはアミノ酸残基またはそのアミド；またはＸは環状アミンまたはヘテロ環状アミンの残基；Ｒ⁶はＨまたは低級アルキル（１〜４Ｃ）、Ｒ⁷はＨ、低級アルキル（１〜４Ｃ）またはアシル基；図示した−ＣＯＮＲ³−アミド結合は、任意に−ＣＨ₂ＮＲ³−、−ＣＨ₂ＣＨＲ³ −、 −ＣＨ＝ＣＲ³−、−ＣＯＣＨＲ³−、−ＣＨＯＨＣＨＲ³−、−ＮＲ³ＣＯ−、− ＣＦ＝ＣＲ³−などの等量の改変結合（modified isosteric bond）で置換されていてよい）で示されるものである。本発明の方法に有用な他の化合物としては、式：または（式中、各Ｒ¹は独立にＨまたはアルキル（１〜８Ｃ）、Ｒ²はアルキル（１〜８Ｃ）、または近接するＲ¹とＲ²とが一緒になって−(ＣＨ₂)_p−（式中、ｐは３〜５）を形成；Ｒ³はＨまたはアルキル（１〜４Ｃ）；Ｒ⁴は縮合したまたは共役した非置換または置換のビシクロアリールメチレン；ｎは０、１または２；ｍは０または１；ＸはＯＲ⁵またはＮＨＲ⁵（式中、Ｒ⁵はＨまたは置換または非置換のアルキル（１〜１２Ｃ）、アリール（６〜１２Ｃ）、アリールアルキル（６〜１６Ｃ））；またはＸはアミノ酸残基またはそのアミド；またはＸは環状アミンまたはヘテロ環状アミンの残基；ＹはＲ⁷ＯＮＲ⁶ＣＯＮＲ⁶−、Ｒ⁶ ₂ＮＣＯＮＯＲ⁷−、およびＲ⁶ＣＯＮＯＲ⁷−（式中、Ｒ⁶は独立にＨまたは低級アルキル（１〜４Ｃ）；Ｒ⁷はＨ、低級アルキル（１〜４Ｃ）またはアシル基）よりなる群から選ばれた基；図示した−ＣＯＮＲ³−アミド結合は、任意に−ＣＨ₂ＮＲ³−、−ＣＨ₂ＣＨＲ³ −、−ＣＨ＝ＣＲ³−、−ＣＯＣＨＲ³−、−ＣＨＯＨＣＨＲ³−、−ＮＲ³ＣＯ− 、−ＣＦ＝ＣＲ³−などの等量の改変結合で置換されていてよい）で示される化合物が含まれる。「アルキル」とは、メチル、エチル、イソブチル、シクロヘキシル、ｔ−ブチルなどの直鎖、分枝鎖または環状飽和炭化水素残基として通常の意味を有する。本発明のアルキル置換基は示した炭素数のものであって、１または２の置換基で置換されていてもよい。置換基は一般に該化合物の活性を妨害しないものであって、ヒドロキシル、ＣＢＺＯ−、ＣＢＺＮＨ−、アミノなどが含まれる。アリールとは、フェニル、ナフチル、ピリジル、キノリル、インドリルなどの芳香族環系をいう。アリールアルキルとは、指示した位置にアルキル残基を介して結合したアリール残基をいう。いかなる場合においても、アリール部位は置換されていても置換されていなくてもよい。「アシル」とは、式：ＲＣＯ−（式中、Ｒは上記アルキルまたはアリールアルキル）で示される置換基をいう。アシル基中の炭素数は一般に１〜１５である。しかしながら、アシル置換基はインビボでは容易にヒドロキシル化されるので、該基の性質は比較的重要ではない。「環状アミン」とは、ピペリジンなどのように窒素がヘテロ環の一部を構成するアミンをいい、「ヘテロ環状アミン」とは、モルホリンなどのように別のヘテロ原子を含むヘテロ環をいう。式（１）および（３）の化合物において、Ｒ¹およびＲ²の好ましい態様には各Ｒ¹がＨまたはＭｅ、Ｒ²が３〜８Ｃのアルキル、とりわけイソブチル、２−メチルブチル、またはイソプロピルであるものが含まれる。特に好ましいのはイソブチルである。（１）〜（４）のすべての式においてｎ＝１またはｍ＝１である化合物もまた好ましい。（１）〜（４）のすべての式において、Ｒ³の好ましい態様はＨおよびメチル、とりわけＨである。Ｒ⁴は、メチレン基を介して該分子に結合した、縮合したまたは共役したビシクロ芳香族系である。「縮合したまたは共役したビシクロ芳香族系」とは、芳香族特性を有する２環式系であって、Ｓ、ＮまたはＯなどの１または２以上のヘテロ原子をさらに含有していてもよいものを意味する。Ｎなどのヘテロ原子が含まれる場合には、該系は式（１）〜（４）の一部を構成するものとして、該窒素に結合したアシル保護基（１〜５Ｃ）を含有していてよい。代表的なビシクロ縮合芳香族系としては、ナフチル、インドリル、キノリニル、およびイソキノリニルが挙げられる。代表的な共役系としては、ビフェニル、４−フェニルピリミジル、３−フェニルピリジルなどが挙げられる。いずれの場合においても、該縮合したまたは共役した２環系上のいずれの利用できる位置もメチレンを介した結合に用いることができる。縮合したまたは共役した芳香族系は、１〜２のアルキル（１〜４Ｃ）残基および／またはヒドロキシでさらに置換されていてよく、いずれの環窒素もアシル化されていてよい。好ましいアシル化はアセチル化である。Ｒ⁴の好ましい態様としては、１−（２−メチルナフチル）メチレン；１−キノリルメチレン；１−ナフチルメチレン；２−ナフチルメチレン；１−イソキノリルメチレン；３−イソキノリルメチレン；３−チオナフテニルメチレン；３− クマロニルメチレン；３−（５−メチルインドリル）メチレン；３−（５−ヒドロキシインドリル）メチレン；３−（２−ヒドロキシインドリル）メチレン；ビフェニルメチレン；および４−フェニルピリミジルメチレン；およびこれらの置換体が挙げられる。これら置換基の多くは、アミノ酸残基の一部としてグリーンスタイン（Ｇreen stein）およびウイニッツ（Ｗinitz）の「アミノ酸の化学（Ｃhemistry of the Ａmino Ａcids）」（１９６１）３：２７３１〜２７４１（ジョン・ウイリー＆サンズ、ニューヨーク）に記載されている。Ｒ⁴の特に好ましい態様は、３−インドリルメチレンまたはそのＮ−アシル誘導体、すなわち「Ｃ−末端」アミノ酸がトリプトファン残基またはその保護形態であるものである。Ｒ⁴が結合している炭素原子の好ましい立体配置はＬ−トリプトファンに対応するものである。Ｘの好ましい態様は、式：ＮＨＲ⁵（式中、Ｒ⁵はＨ、置換されたまたは非置換のアルキル（１〜１２Ｃ）またはアリールアルキル（６〜１２Ｃ））で示されるものである。Ｒ⁵上の特に好ましい置換基はヒドロキシル基、またはフェニルメトキシカルバミル（ＣＢＺＮＨ−）残基である。加えて、Ｘも別のアミノ酸残基、とりわけグリシル残基（このものもまた上記のようにアミド化されてよい）である態様によって該化合物は伸長することができる。一般に、ヒドロキサム酸エステルである化合物は、式：または（式中、ＲはＨまたはアルキル（１〜６Ｃ））で示されるカルボン酸またはエステル前駆体またはその活性形を、変換に有効な条件下でヒドロキシルアミンで処理することによってこれら化合物を対応するヒドロキサム酸エステルに変換することによって得られる。出発物質に関しては、−ＮＲ³−ＣＨＲ⁴ＣＯＸ残基を形成する部分は、トリプトファンおよびその類似体の場合にはエステルまたはアミドとして容易に得られる。上記のように、多くの類似の縮合したビシクロ芳香族アミノ酸がグリーンスタインおよびウイニッツ（上記）によって記載されている。Ｒ⁴が１−（２−メチルナフチル）メチレン；１−キノリルメチレン；１−ナフチルメチレン；１− イソキノリルメチレン；および３−イソキノリルメチレンであるものに対応するアミノ酸は、当該技術分野で理解されているように、アミノ酸のアセトアミドマロン酸エステル合成を用い、ビシクロ芳香族メチレンハライドから調製することができる。メチレンハライド自体は、対応カルボン酸を水素化リチウムアルミニウムで還元し、得られたアルコールをチオニルブロマイドで臭素化することによって調製することができる。一般に、ヒドロキシルアミン試薬は、ヒドロキシルアミン塩酸塩をメタノール中の過剰のＫＯＨと混合し、沈殿した塩化カリウムを濾取することによってその場で生成する。ついで、濾液を式（５）または（６）の前駆体活性化カルボン酸またはエステルとともに室温にて数時間攪拌し、ついで混合物を減圧下で蒸発乾固する。得られた残渣を酸性にし、ついで酢酸エチルなどの適当な有機溶媒で抽出し、抽出物を水性重硫酸カリウムおよび塩で洗浄し、ついで無水硫酸マグネシウムなどの固体乾燥剤で乾燥させる。ついで、抽出物を再び蒸発乾固し、結晶化させる。 −ＮＨＯＲ⁷を含むヒドロキサム酸エステルの置換形態も同様の仕方で合成できるか、ヒドロキシルアミン自体の代わりにＨ₂ＮＯＲ⁷（式中、Ｒ⁷は低級アルキルまたはアシル（１〜４Ｃ））を用いればよい。ついで、得られたＯ−アルキルまたはアシルヒドロキサム酸エステルを所望ならさらにアルキル化してカルボン酸のＲ⁷ＯＮＲ⁶−誘導体を得ることができる。同様に、ＨＮＲ⁶ＯＨをカルボン酸と反応させてＨＯＮＲ⁶−誘導体を得ることができる。ＨＮＣＨ₃ＯＨおよびＨ₂ＮＯＣＨ₃は市販されている。式（５）および（６）の出発物質を調製するため、式：または式：で示されるモノエステル化したカルボン酸を式：ＮＨＲ³ＣＨＲ⁴ＣＯＸ（式中、ＸはＯＨ以外である）で示される酸と、アミド結合が生成する縮合の生じる条件下で反応させる。そのような条件は、一般に、塩基およびカルボジイミドなどの縮合剤の存在下での非水性無水極性非プロトン溶媒中の上記２つの成分の混合物からなる。それゆえ、アミド結合の生成は、カルボジイミド、たとえばジシクロヘキシルカルボジイミドやＮ,Ｎ−カルボニルジイミダゾールなどの標準脱水剤の存在下で触媒することができる。ついで、生成物を式（５）または（６）のジアステレオマーの混合物として回収する。この混合物はヒドロキサム酸エステルへの変換に用いるのが好ましく、得られたジアステレオマーのうちの一つを生成物の混合物から直接結晶化する。別法としては、ヒドロキサム酸エステルに変換する前にジアステレオマーをフラッシュクロマトグラフィーによって分離し、別々に回収する。この方法は、ジアステレオマーの分離を最終生成物が得られるまでとっておく方法に比べると好ましくない。実施例に用いる表示において、「Ａ」異性体はＴＬＣ上で一層速く移動するものとして定義される。「Ｂ」異性体は一層ゆっくりと移動するものである。縮合したビシクロ芳香族環系を有する「Ｌ」形のトリプトファンまたは他のアミノ酸が残基として用いられ、Ｒ¹がＨである場合には、一般に「Ａ」形態は、最終ヒドロキサメート生成物中のＲ²置換基を有する炭素（それが他の唯一の不斉中心てあるという条件で）において対応する立体配置を有するものである。しかしながら、Ｄ−トリプトファンが組成物中に含まれる以下の実施例２においては、「Ｂ」異性体は、式（１）の化合物中のＲ²を有する炭素において「Ｌ」立体配置に対応するものを有するであろう。Ｒ⁶および／またはＲ⁷がアルキルである場合は、実施例１において非置換のヒドロキシルアミンについて行っているように、対応するＯ−またはＮ−アルキルヒドロキシルアミンをメチルエステル４Ａと反応させる。別法として、メチルエステル４Ａを対応カルボン酸にけん化し、オキサリルクロライドまたは他の縮合剤で活性化する。ついで、アルキルヒドロキシルアミンを活性化カルボン酸と反応させてＯ−またはＮ−置換ヒドロキサム酸を得る。Ｏ−およびＮ−メチルヒドロキシルアミンはアルドリッチ・ケミカル・カンパニーから購入することができる。他のＮ−アルキルヒドロキシルアミンの合成は、脂肪族アルデヒドをそのオキシムに変換し、ついで６ＮＨＣｌの存在下、ボラン−ピリジン錯体でＮ−アルキルヒドロキシルアミンに還元することによって行うことができる（カワセ（Ｋ awase,Ｍ.）およびキクガワ（Ｋikugawa,Ｙ.Ｊ.）、Ｃhem Ｓoc.Ｐerkin Ｔrans （１９７９）１：６４３）。他のＯ−アルキルヒドロキシルアミンの合成は、ロバーツ（Ｒoberts,Ｊ.Ｓ.）の「ヒドロキシルアミンの誘導体（Ｄerivatives of Ｈydroxylamine）」（６.４章、バートン（Ｂarton,Ｄ.）ら編、Ｃomprehensiv e Ｏrganic Ｃhemistry （１９７９）２：１８７〜１８８（パーガモン・プレス、オックスフォード）中）に記載された一般法によって行うことができる。使用した２つの一般的方法は、ヒドロキシルアミンスルホン酸またはクロロアミンからの脱離基のＲ⁷Ｏ−による置換、およびヒドロキサム酸のＲ⁷−ＸによるＯ−アルキル化とその後の加水分解である：Ｒ⁷がアシルの場合は、本発明のヒドロキサム酸を酸クロライド、無水物または他のアシル化剤でアシル化してこのクラスの化合物を得ることができる。幾つかの場合には、本発明の化合物の合成に必要な誘導体化マレイン酸およびコハク酸残基は市販されている。市販されていない場合には、これら化合物は、Ｒ¹がＨまたはアルキル（１〜８Ｃ）である態様において、式：Ｒ²ＣＯＣＯＯＲ 'で示される２−オキソカルボン酸エステルをウィティヒ反応においてトリフェニルホスホラニリデン酢酸アルキルまたはα−トリフェニル−ホスホラニリデンアルカン酸アルキルと反応させることにより容易に調製することができる。酢酸メチルおよびアルカン酸メチルが好ましいが、いかなる適当なエステルも用いることができる。この反応は、通常、室温にて非水性の非極性溶媒中で行う。得られる化合物は、式：ＲＯＯＣＣＲ¹＝ＣＲ²ＣＯＯＲ'（式中、ＲおよびＲ'はエステル化するアルキルまたはアリールアルキルアルコールの残基である）で示される。式（６）で示される化合物が望ましい場合は、この生成物を適当なトリプトファンまたは類似誘導体と縮合させる。式（５）で示される化合物が望ましい場合は、この中間体を適当な触媒を用いて水素で還元する。Ｒ¹がＨまたはアルキル、ｎが１でｍが０、Ｒ²がアルキルである態様を得るための反応式を以下の反応式１に示す。Ｒ¹およびＲ²が一緒になって(ＣＨ₂)_pである場合の態様については、式：ＲＯＯＣＣＨＲ¹ＣＨＲ²ＣＯＯＨで示される中間体を対応する１,２−シクロアルカンジカルボン酸、すなわち１,２−シクロペンタンジカルボン酸無水物；１,２− シクロヘキサンジカルボン酸無水物または１,２−シクロヘプタンジカルボン酸無水物から調製する他は反応式１と同様の仕方で本発明の化合物を調製することができる。 −ＣＯＮＲ³−が等量の改変結合形態である化合物については、これら形態は当該技術分野で公知の方法により調製することができる。以下の文献には、これら代替結合残基を含むペプチド類似体の調製が記載されている：スパトラ（Ｓpa tola,Ａ.Ｆ.）、Ｖega Ｄata（１９８３年３月）、Ｖol.１、第３刷、「ペプチド骨格修飾（Ｐeptide Ｂackbone Ｍodifications）」（概論）；スパトラ、「アミノ酸ペプチドおよびタンパク質の化学および生化学（Ｃhemistry and Ｂioc hemistry of Ａmino Ａcids Ｐeptides and Ｐroteins）」（１９８３）ウエインスタイン編、マーセル・デッカー、ニューヨーク、２６７頁（概論）；モーリー（Ｍorley,Ｊ.Ｓ.）、Ｔrends Ｐharm Ｓci（１９８０）４６３〜４６８頁（概論）；ハドソン（Ｈudson,Ｄ.）ら、Ｉnt ＪＰept Ｐrot Ｒes（１９７９）１４：１７７〜１８５（−ＣＨ₂ＮＲ³−、−ＣＨ₂ＣＨＲ³−）；スパトラら、Ｌ ife Ｓci （１９８６）３８：１２４３〜１２４９（−ＣＨ₂−Ｓ）；ハン（Ｈann ,Ｍ.Ｍ.）、ＪＣhem Ｓoc Ｐerkin Ｔrans Ｉ（１９８２）３０７〜３１４（− ＣＨ−ＣＲ³−、シスおよびトランス）；アームキスト（Ａlmquist,Ｒ.Ｇ.）ら、ＪＭed Ｃhem（１９８０）２３：１３９２〜１３９８（−ＣＯＣＨＲ³−）；ジェニングス−ホワイト（Ｊennings−Ｗhite,Ｃ.）ら、Ｔetrahedron Ｌett（１９８２）２３：２５３３（−ＣＯＣＨＲ³−）；スゼルケ（Ｓzelke,Ｍ.）ら、ヨーロッパ特許出願ＥＰ４５６６５号（１９８２）ＣＡ：９７：３９４０５（１９８２）（−ＣＨ(ＯＨ)ＣＨＲ³−）；ホラディー（Ｈolladay,Ｍ.Ｗ.）ら、Ｔe trahedron Ｌett （１９８３）２４：４４０１〜４４０４（−Ｃ(ＯＨ)ＣＨ₂−）；およひフルビー（Ｈruby,Ｖ.Ｊ）、Ｌife Ｓci（１９８２）３１：１８９〜１９９（−ＣＨ₂−Ｓ−）。式（１）または（２）で示される好ましい化合物としては以下のものが挙げられる：ＨＯＮＨＣＯＣＨ₂ＣＨ（ｎ−ヘキシル）−ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨＭｅ；ＨＯＮＨＣＯＣＨ₂ＣＨ（ｎ−ペンチル）−ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨＭｅ；ＨＯＮＨＣＯＣＨ₂ＣＨ（ｉ−ペンチル）−ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨＭｅ；ＨＯＮＨＣＯＣＨ₂ＣＨ（エチル）−ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨＭｅ；ＨＯＮＨＣＯＣＨ₂ＣＨ（エチル）−ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨＣＨ₂ＣＨ₃；ＨＯＮＨＣＯＣＨ₂ＣＨ（エチル）−ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨＣＨ₂ＣＨ₂ＯＨ；ＨＯＮＨＣＯＣＨ₂ＣＨ（エチル）−ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨシクロヘキシル；ＭｅＯＮＨＣＯＣＨ₂ＣＨ（ｉＢｕ）−ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨＥｔ；ＥｔＯＮＭｅＣＯＣＨ₂ＣＨ（ｉＢｕ）−ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨＥｔ；ＭｅＯＮＨＣＯＣＨ₂ＣＨ（ｉＢｕ）−ＣＯ−Ｌ−Ａｌａ（２−ナフチル）−ＮＨＥｔ；ＥｔＯＮＭｅＣＯＣＨ₂ＣＨ（ｉＢｕ）−ＣＯ−Ｌ−Ａｌａ（２−ナフチル）− ＮＨＥｔ；ＨＯＮＨＣＯＣＨ₂ＣＨ（ｉ−Ｂｕ）ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨＭｅ；ＨＯＮＨＣＯＣＨ₂ＣＨ（ｉ−Ｂｕ）ＣＯ−Ｌ−Ｎ−ＭｅＴｒｐ−ＮＨＭｅ；ＨＯＮＨＣＯＣＨ₂ＣＨ（ｉ−Ｂｕ）ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨ(ＣＨ₂)₂ＯＨ；ＨＯＮＨＣＯＣＨ₂ＣＨ（ｉ−Ｂｕ）ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨ（Ｓ）ＣＨＭｅＰｈ；ＨＯＮＨＣＯＣＨ₂ＣＨ（ｉ−Ｂｕ）ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨ(ＣＨ₂)₆ＮＨ−ＣＢＺ；ＨＯＮＨＣＯＣＨ₂ＣＨ（ｉ−Ｂｕ）ＣＯ−Ｌ−Ａｌａ（２−ナフチル）ＮＨＭｅ；ＨＯＮＨＣＯＣＨ₂ＣＨ（ｉ−Ｂｕ）ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨ(ＣＨ₂)₄ＣＨ₃；ＨＯＮＨＣＯＣＨ₂ＣＨ（ｉ−Ｂｕ）ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ピペリジン；ＨＯＮＨＣＯＣＨ₂ＣＨ（ｉ−Ｂｕ）ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨ(ＣＨ₂)₁₁ＣＨ₃；ＨＯＮＨＣＯＣＨ₂ＣＨ（ｉ−Ｂｕ）ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨシクロヘキシル；ＨＯＮＨＣＯＣＨ₂ＣＨ（ｉ−Ｂｕ）−Ｌ−Ｔｒｐ−ＯＨ；ＨＯＮＭｅＣＯＣＨ₂ＣＨ（ｉ−Ｂｕ）ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨＭｅ；ＨＯＮＥｔＣＯＣＨ₂ＣＨ（ｉ−Ｂｕ）ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨＭｅ；ＣＨ₃ＣＯＯＮＨＣＯＣＨ₂ＣＨ（ｉ−Ｂｕ）ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨＭｅ； ΦＣＯＯＮＨＣＯＣＨ₂ＣＨ（ｉ−Ｂｕ）ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨＭｅ；ＣＨ₃ＣＯＯＮＭｅＣＯＣＨ₂ＣＨ（ｉ−Ｂｕ）ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨＭｅ；および ΦＯＣＯＯＮＥｔＣＯＣＨ₂ＣＨ（ｉ−Ｂｕ）ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨＭｅ。式（３）および（４）で示される逆ヒドロキサム酸エステルおよびヒドロキシ尿素は、対応するヒドロキサム酸エステル自体に比べて生物学的に一層安定である。このことは、カーター（Ｃarter,Ｇ.Ｗ.）ら、ＪＰharmacol Ｅxp Ｔher（１９９１）２５６：９２９〜９３７；ジャクソン（Ｊackson,Ｗ.Ｐ.）ら、ＪＭ edＣhem （１９８８）３１：４９９〜５００；ヤング（Ｙoung,Ｐ.Ｒ.）ら、ＦＡＳＥＢＪ（１９９１）５：Ａ１２７３；ハーン（Ｈahn,Ｒ.Ａ.）ら、ＪＰharm acol Ｅxp Ｔher （１９９１）２５６：９４〜１０２；トランポッシュ（Ｔranpo sch,Ｋ.Ｍ.）ら、Ａgents Ａctions（１９９０）３０：４４３〜４５０；アージェンティーリ（Ａrgentieri,Ｄ.Ｃ.）ら；キンバル（Ｋimball,Ｅ.）ら、５th Ｉnt Ｃonf Ｉnflammation Ｒesearch Ａssoc. 、ホワイトヘブン、ペンシルベニア、１９９０年９月２３〜２７日、アブストラクト１００；およびフアン（Ｈua ng,Ｆ.）ら、ＪＭed Ｃhem（１９８９）３２：１８３６〜１８４２において確認されている。それゆえ、合成は若干複雑ではあるが、これら類似体は、これら化合物の治療への応用において有利な生理学的特性を付与する。本発明の逆ヒドロキサム酸エステルおよびヒドロキシ尿素は、以下にさらに詳細に記載するように、合成有機化学の標準法（チャリス（Ｃhallis,Ｂ.Ｃ.）ら、「アミドおよび関連化合物（Ａmides and Ｒelated Ｃompounds）」、「有機化学総論（Ｃomprehensive Ｏrganic Ｃhemistry）」、バートン（Ｂarton,Ｄ. ）ら編（１９７９）２：１０３６〜１０４５、パーガモン・プレス、オックスフォード中）を用いて得ることができる。出発物質に関しては、−ＮＲ³−ＣＨＲ⁴ＣＯＸ残基を形成する部分は、トリプトファンおよびその類似体の場合にはエステルまたはアミドとして容易に得ることができる。上記のように、多くの類似の縮合したビシクロ芳香族アミノ酸がグリーンスタインおよびウイニッツ（上記）によって記載されている。Ｒ⁴が１− （２−メチルナフチル）メチレン；１−キノリル−メチレン；１−ナフチルメチレン；１−イソキノリルメチレン；および３−イソキノリルメチレンであるものに対応するアミノ酸は、当該技術分野でよく理解されているように、アミノ酸のアセトアミドマロン酸エステル合成を用い、ビシクロ芳香族メチレンハライドから調製することができる。メチレンハライド自体は、対応するカルボン酸を水素化リチウムアルミニウムで還元し、得られたアルコールをチオニルブロマイドで臭素化することによって調製することができる。Ｙで示される官能基に依存して、この残基を本発明の化合物中に導入する合成の段階は変わる。ＹがＲ⁷ＯＮＲ⁶ＣＯＮＲ⁶−であり、ｎが０、１または２である態様については、これら化合物の調製は、フィーザー（Ｆieser,Ｌ.Ｆ.）らの「有機合成の試薬（Ｒeagents for Ｏrganic Ｓynthesis）」（１９６７）１：４７９（ジョン・ウイリー＆サンズ、ニューヨーク）に記載されているように、α、βまたは γアミノ酸をそれぞれクロロギ酸メチルまたはクロロギ酸エチルでアシル化し、得られたアミノ酸を残基−ＮＲ³ＣＨＲ⁴ＣＯＸの保護形態と縮合させ、ついで得られたカルボエトキシ「ジペプチド」をヒドロキシルアミンまたは置換ヒドロキシルアミンと反応させることによって行う。この反応手順は、反応式１Ａに示してある。別法として、上記α、βまたはγアミノ酸をたとえばカルボベンゾキシまたはｔ−ブチルオキシカルボニルを用いて一時的に保護し、これをＲ⁴を含有するカルボキシ末端を保護したアミノ酸残基とカップリングさせることもできる。ついで、保護基を水素化分解または酸分解により適当に除去し、ついで脱保護したα 、βまたはγアミノ基をカルボニルジイミダゾールなどの活性化炭酸と反応させる。ついで、得られた生成物をヒドロキシルアミンまたは置換ヒドロキシルアミンと反応させて所望の生成物を得る。この反応の手順を反応式２にまとめて示す（式：Ｉｍ−Ｃｏ−Ｉｍ中、Ｉｍはイミダゾール残基を示す）。適当なα、βまたはγアミノ酸の調製は、ジョーンズ（Ｊones,Ｊ.Ｈ.）らの「アミノ酸（Ａmino Ａcids）」、８３４頁（バートンら編）（「有機化学総論（Ｃomprehensive Ｏrganic Ｃhemistry）」（１９７９）Ｖol.２、パーガモン・プレス）に記載された一般法により行う。そのような方法としては、たとえば、対応するＮ−保護α−アミノ酸のアルント−アイステルト合成による同族体生成（homologation）およびより一般的にはフタルイミドなどの窒素求核試薬のα ，β−不飽和エステル、酸またはニトリルへの付加が挙げられる。ヒドロキシ尿素の第二のクラスにおいて、Ｙは式：Ｒ⁶ ₂ＮＣＯＮＯＲ⁷−を有し、ｎは０、１または２である。これら化合物は、式：Ｒ⁷ＯＮＨ（ＣＨＲ¹）_n ＣＨＲ²ＣＯＯＨで示される対応α、βまたはγヒドロキシアミノ酸から調製する。両方のＲ⁶がＨである場合は、フィーザーおよびフィーザーの「有機合成の試薬（Ｒeagents for Ｏrganic Ｓynthesis）」（１９６８）１：４７９（ジョン・ウイリー＆サンズ、ニューヨーク）に記載されているように、四イソシアネートケイ素と反応させることにより、この中間体を所望のヒドロキシ尿素に変換する。反応は、保護されたまたはＲ⁷で置換されたヒドロキシル基を用いて行う。ついで、得られたヒドロキシ尿素を式：ＨＮＲ³ＣＨＲ⁴ＣＯＸで示される部分とカップリングさせて所望の生成物を得る。別法として、アミドをまず生成させ、Ｎ−ヒドロキシルジペプチドを試薬と反応させる。別法として、ＹがＲ⁶ＨＮＣＯ−ＮＯＲ⁷（式中、Ｒ⁶はアルキル）である場合は、上記Ｏ−保護したα、βまたはγＮ−ヒドロキシアミノ酸を関連するアルキルイソシアネートＲ⁶ＮＣＯと反応させて所望の生成物を得る。Ｙが式：Ｒ⁶ ₂ＮＣＯＮＯＲ⁷−（式中、両方のＲ⁶はアルキル）で示される場合は、α、βまたはγＮ−ヒドロキシアミノ酸を炭酸の活性形、たとえばカルボニルジイミダゾールまたはビス−ｐ−ニトロフェニルカーボネートと反応させ、ついでジアミンＲ⁶ ₂ＮＨ（式中、両方のＲ⁶はアルキル）と反応させる。ついで、所望なら脱保護する。上記条件は、ニシノ（Ｎishino,Ｎ.）らのＢiochemistry（１９７９）１８：４３４０〜４３４６に記載されているように、トリペプチドの同様の調製の記載においても見出すことができる。上記合成において中間体として用いるβ−Ｎ−ヒドロキシアミノ酸はマロン酸エステル合成によって調製することができ、その際、マロン酸ジエチルを２回、一つはＲ²−Ｂｒで、ついでベンジルクロロメチルエーテル（たとえば、Ｒ¹がＨである場合）でアルキル化する。この生成物を、コーチルウイッツらのＢiochem istry （１９８４）２３：２０８３〜２０８７に記載された同族アルデヒドの合成と同様の仕方で、けん化し、脱炭酸し、水素化し、ついで酸化してβ−アルデヒドを得る。ついで、保護した（またはＲ⁷がアルキルの場合はアルキル化した、またはＲ⁷がアシルの場合はアシル化した）ヒドロキシルアミンを付加することにより、所望のβ−ヒドロキシアミノ酸が得られる。Ｒ¹がアルキルである対応化合物は、第二のアルキル化をベンジル−Ｏ−ＣＨＲ¹Ｃｌを用いて行って同様の仕方で調製することができる。同族体のケトンはガラーディー（Ｇ alardy,Ｒ.Ｅ.）らのＢiochemistry（１９８５）２４：７６０７〜７６１２に記載されている。最後に、Ｙが式：Ｒ⁶ＣＯＮＯＲ⁷−，すなわち逆ヒドロキサム酸エステルである化合物は、対応するα、βまたはγＮ−ヒドロキシジペプチドをアシル化することによって調製することができる。別法として、Ｎ−ヒドロキシアミノ酸をアシル化し、ついで縮合して本発明の化合物のアミド結合を生成することができる。アシル化法は、たとえば、ニシノらのＢiochemistry（１９７９）１８：４３４０〜４３４６（上記で引用）に記載されている。別法として、ｎが１、Ｒ¹がＨである化合物については、該化合物の調製は、トリフェニルホスフィンおよび１,１−ジメトキシ−２−ブロモエタンから調製したイリド１,１−ジメトキシ−２−（トリフェニルホスホラニリデン）を４− メチル−２−オキソペンタン酸と縮合することにより行うことができる。ついで、生成物を水素化して４,４−ジメトキシ−２−イソブチルブタン酸を得、これを残基Ｒ³ＮＨＣＨＲ⁴ＣＯＸとカップリングして４,４−ジメトキシ−２−イソブチルブタノイル−ＮＲ³ＣＨＲ⁴ＣＯＸを得る。酸水溶液で処理するとアルデヒドの２−イソブチル−４−オキソブタノイル−ＮＲ³ＣＨＲ⁴ＣＯＸが得られる。ヒドロキシルアミンと反応させてオキシムを調製し、還元して対応するＮ−置換ヒドロキシルアミンとする。ヒドロキサミノールの酸素および窒素の両方をアシル化し、ついでＯ−アシル基を加水分解してＮ−アシル逆ヒドロキサム酸エステルを得る（サマーズ（Ｓummers,Ｊ.Ｂ.）ら、ＪＭed Ｃhem（１９８８）３１：１９６０〜１９６４）。 −ＣＯＮＲ³−が等量の改変結合の形態である化合物については、これらの形態は上記当該技術分野で公知の方法により調製することができる。式（３）および（４）で示される好ましい化合物としては、以下のものが挙げられる：ＥｔＯＮＨＣＯＮＭｅ−ＣＨ₂ＣＨ(ｉＢｕ)−ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨＥｔ；ＥｔＣＯＮＯＨ−ＣＨ₂ＣＨ(ｉＢｕ)−ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨＥｔ；ｎ−ＰｒＣＯＮＯＥｔ−ＣＨ₂ＣＨ(ｉＢｕ)−ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨＥｔ；ＥｔＮＨＣＯＮＯＭｅ−ＣＨ₂ＣＨ(ｉＢｕ)−ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨＥｔ；ＭｅＮＨＣＯＮＯＨ−ＣＨ₂ＣＨ(ｉＢｕ)−ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨＥｔ；ＥｔＯＮＨＣＯＮＭｅ−ＣＨ₂ＣＨ(ｉＢｕ)−ＣＯ−Ｌ−Ａｌａ(２−ナフチル) −ＮＨＥｔ；ＥｔＣＯＮＯＨ−ＣＨ₂ＣＨ(ｉＢｕ)−ＣＯ−Ｌ−Ａｌａ(２−ナフチル)−ＮＨＥｔ；ｎ−ＰｒＣＯＮＯＥｔ−ＣＨ₂ＣＨ(ｉＢｕ)−ＣＯ−Ｌ−Ａｌａ(２−ナフチル) −ＮＨＥｔ；ＥｔＮＨＣＯＮＯＭｅ−ＣＨ₂ＣＨ(ｉＢｕ)−ＣＯ−Ｌ−Ａｌａ(２−ナフチル) −ＮＨＥｔ；ＭｅＮＨＣＯＮＯＨ−ＣＨ₂ＣＨ(ｉＢｕ)−ＣＯ−Ｌ−Ａｌａ(２−ナフチル)− ＮＨＥｔ；ＨＯＮＨＣＯＮＨＣＨ₂ＣＨ(ｉＢｕ)−ＣＯ−Ｌ−ＴｒｐＮＨＭｅ；ＨＯＮＨＣＯＮＨＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ(ｉＢｕ)−ＣＯ−Ｌ−ＴｒｐＮＨＭｅ；ＨＯＮＨＣＯＮＨＣＨ(ｉＢｕ)ＣＯ−Ｌ−ＴｒｐＮＨＭｅ；Ｈ₂ＮＣＯＮ(ＯＨ)ＣＨ(ｉＢｕ)ＣＯ−Ｌ−ＴｒｐＮＨＭｅ；Ｎ(ＯＨ)ＣＨ₂ＣＨ(ｉＢｕ)ＣＯ−Ｌ−ＴｒｐＮＨＭｅ；Ｈ₂ＮＣＯＮ(ＯＨ)ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ(ｉＢｕ)ＣＯ−Ｌ−ＴｒｐＮＨＭｅ；ＣＨ₃ＣＯＮ(ＯＨ)ＣＨ(ｉＢｕ)ＣＯ−Ｌ−ＴｒｐＮＨＭｅ；ＣＨ₃ＣＯＮ(ＯＨ)ＣＨ₂ＣＨ(ｉＢｕ)ＣＯ−Ｌ−ＴｒｐＮＨＭｅ；およびＣＨ₃ＣＯＮ(ＯＨ)ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ(ｉＢｕ)ＣＯ−Ｌ−ＴｒｐＮＨＭｅ。投与および使用上記背景の記載において示したように、過剰または望ましくないマトリックス破壊性のメタロプロテアーゼ活性によって媒体される多数の疾患が知られている。これら疾患には、腫瘍転移、慢性関節リウマチ、皮膚炎症、とりわけ角膜または口の潰瘍形成、感染への反応などが含まれる。本発明の阻害剤によって治療することが可能な疾患の定義に包含されるものとして、創傷、好ましくは慢性の皮膚創傷が挙げられる。しかしながら、本発明の阻害剤は、たとえば、じょく瘡性潰瘍、口の潰瘍を含むあらゆる潰瘍性の皮膚状態、または創傷の快癒がゆっくりとしている他の状態においても有用である。それゆえ、本発明の化合物は、このような望ましくない活性が関与する状態に関する治療において有用である。本発明の化合物は、乾癬の治療または予防にとりわけ有用である。乾癬は、ある種の病因の一般的な炎症性皮膚疾患であり、顕著な表皮過形成、混合炎症性浸潤物および血管変性を特徴とする。乾癬および他の皮膚疾患における表皮過形成の分子機構は未だ解明されていない。しかしながら、種々の増殖因子、サイトカインおよび癌原遺伝子が、細胞外環境から表皮ケラチノサイト中への増殖促進シグナルの導入に関係があるとされている。乾癬および他の過増殖性皮膚疾患の現在の治療法としては、種々の局所性ステロイド剤、表皮剥脱、全身性化学療法および紫外線暴露が挙げられる。しかしながら、これら利用できる療法は毒性並びにタキフィラキシーによって限界がある。本発明のマトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤、とりわけコラゲナーゼ阻害剤に応答性の他の状態としては、血管形成術の後の再発狭窄症が挙げられる。健康な動脈壁は、線維芽細胞の外膜層、平滑筋細胞の中央の中間層および内皮細胞の内腔血管内膜層から構築されている。気球血管形成術後の再発狭窄症の一つの原因は、血管内膜の破壊を引き起こす平滑筋細胞によるコラゲナーゼの産生および放出であることが提案されている。サウスゲート（Ｓouthgate，Ｋ.Ｍ.）ら（１９９２）Ｂichem,Ｊ、２８８：９３〜９９。このことが、今度は平滑筋細胞の血管内膜への移行を容易にし、そこで平滑筋細胞は増殖を続け、再発狭窄症の特徴である線維状のプラークを形成する。それゆえ、本発明のマトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤は、血管形成術の前または後に投与した場合に再発狭窄症を予防または抑制する。本発明のマトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤の他の適用は、癌、とりわけ転移性癌の治療または予防である。癌細胞は、血液中への管外遊出、およびそれに続く血液から標的器官への管外遊出によって原発部位から遠位の第二の部位へ移行する。それゆえ、癌細胞の管外遊出を制御することができるならば転移を予防または排除することが可能となる。管外遊出において鍵となるプロセスが癌細胞によって分泌される酵素、とりわけコラゲナーゼによる細胞外マトリックスの破壊であるので、本発明のコラゲナーゼ阻害剤は癌の治療または予防に対して有意の適用性を有する。上記のように、本発明のコラゲナーゼ阻害剤は、たとえば、じょく瘡性潰瘍、口の潰瘍、または創傷の快癒がゆっくりとしている他の状態を含む潰瘍性の皮膚状態において有用である。本発明の化合物によって治療しうる同様の状態としては、角膜軟化症、強膜軟化症に伴う角膜または強膜の溶解、貫通および結合組織疾患が挙げられる。後者の例は、角膜の薄化（thinning）および中央***に関与する円錐角膜がある。IV型コラゲナーゼは、少なくとも部分的には該疾患の原因であると考えられる。哺乳動物のメタロプロテアーゼの合成阻害剤である化合物は、血管形成を抑制するのに有用である。それゆえ、これら化合物は、望ましくないレベルの血管増殖を特徴とする状態において血管形成を抑制するのに用いるための医薬組成物に調合することができる。Ｒemington's Ｐharmaceutical Ｓciences（マック・パブリッシング・カンパニー、イーストン、ペンシルベニア、最新版）に記載されているものなどの標準医薬調合法を用いることができる。全身治療のための適応症には、本発明の化合物を注射するのが好ましい。これら状態としては、腫瘍増殖および転移が挙げられる。生理食塩水、ハンク液（Ｈ ank's solution）、リンゲル液などの注射目的のために通常用いる賦形剤を用い、本発明の化合物を注射用に調合することができる。注射は、静脈内、筋肉内、腹腔内または皮下であってよい。投与量レベルは、もちろん、状態の性質、患者の性質、選択した本発明の化合物の特定の態様、および調合物の性質および投与経路に応じて０.１ｍｇ／ｋｇ患者から１００ｍｇ／ｋｇ患者のオーダーである。注射による投与に加えて、本発明の化合物はまた、これら組織の浸透に影響を及ぼす剤、たとえば胆汁酸塩、フシジン酸誘導体、コール酸などを含有させることにより経皮または経粘膜送達用の組成物に調合することもできる。本発明の組成物はまた、治療すべき状態の性質に応じて、リポソームに基づくデリバリーシステムとして、および局所および経口投与用調合物として用いることができる。経口投与は、残基−ＣＯＮＲ³−が等量の改変結合の形態である化合物に特に有利である。これら化合物は、消化管の加水分解作用に対して抵抗性である。経口調合物としては、シロップ剤、錠剤、カプセル剤などが挙げられ、化合物はまた食物もしくはジュース中にて投与することができる。本発明の阻害剤は、ターゲティングリガンドを用いることにより、血管新生の生じた特定の部位にターゲティングすることができる。たとえば、本発明の化合物を腫瘍に集中させるため、イムノトキシンの調製において一般に理解されているように腫瘍マーカーに対して免疫反応性の抗体またはその断片に阻害剤を結合させる。ターゲティングリガンドはまた、腫瘍上に存在するレセプターに適したリガンドであってもよい。目的とする標的組織のマーカーと特異的に反応するターゲティングリガンドであればいずれも使用できる。本発明の化合物をターゲティングリガンドに結合させる方法は当該技術分野で知られており、担体にカップリングさせるための以下に記載する方法と同様である。得られたコンジュゲートを調合し、上記のようにして投与する。局在性の状態に対しては局所投与が好ましい。たとえば、糖尿病によって誘発された網膜症または他の血管新生性緑内障を治療するには、罹患した目への直接適用に点眼剤またはエアロゾル剤として調合物を用いる。この処置のため、本発明の化合物をゲル剤または軟膏剤として調合することもできるし、またはコラーゲンまたは親水性ポリマーシールド中に導入することもできる。該物質はまた、コンタクトレンズまたは貯蔵体（reservoir）として、または結膜下調合物として挿入することもできる。上記態様のすべてにおいて、もちろん、本発明の化合物は単独または混合物として投与することができ、組成物にはさらに適応症に適した別の薬剤または賦形剤を含有させることができる。それゆえ、血管形成の抑制によって利益を受ける状態としては、一般に、血管肉腫、カポジ肉腫、多形性膠芽腫、血管芽腫、フォン・ヒッペル・リンドウ病および血管周囲細胞腫；糖尿病性網膜症および血管新生性緑内障などの目の状態；慢性関節リウマチ、好酸球増加症を伴う血管リンパ球過形成などの免疫系の状態；および海綿状血管腫（カサバッハ−メリット症候群を含む）および乾癬などの皮膚状態が挙げられる。以下の実施例は、本発明を説明するものであるが、本発明を限定するものではない。これら実施例は、本発明のある種の化合物の調製および哺乳動物のメタロプロテアーゼを阻害する活性を記載するものである。以下の実施例において、ＴＬＣ溶媒系は以下の通りである：（Ａ）酢酸エチル／メタノール（９５：５）；（Ｂ）酢酸エチル／メタノール（２５：５）；（Ｃ）酢酸エチル；（Ｄ）酢酸エチル／メタノール（３０：５）；（Ｅ）酢酸エチル／ヘキサン（１：１）；（Ｆ）クロロホルム／メタノール／酢酸（３０：６：２）；（Ｇ）クロロホルム／メタノール／酢酸（８５：１０：１）。実施例１Ｎ−[Ｄ,Ｌ−２−イソブチル−３−(Ｎ'−ヒドロキシカルボニルアミド)− プロパノイル]−トリプトファンメチルアミドの製造無水ジメチルホルムアミド１０ｍｌ中の４−メチル−２−オキソ吉草酸のナトリウム塩５ｇ（０.０３３ｍｏｌ）および臭化ベンジル５.６５ｇ（０.０３３ｍｏｌ）の懸濁液を、室温で４日間攪拌した。溶媒を減圧下で蒸発させた後、残渣をヘキサンで１００ｍｌまで希釈し、水（３×２０ｍｌ）および飽和塩化ナトリウムで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒の蒸発により、４−メチル−２−オキソ吉草酸のベンジルエステル（１）６.４ｇ（収率88％）が無色油状物として得られた。乾燥塩化メチレン１００ｍｌ中の（１）６.４ｇ（０.０２９mol）および（トリフェニルホスホラニリデン）酢酸メチル９.７ｇ（０.０２９mol）の混合物を１２時間室温で攪拌し、蒸発乾固した。残渣をヘキサン（３×５０ｍｌ）で抽出した。ヘキサン溶液を１０％炭酸水素ナトリウム（２×３０ｍｌ）、水および飽和塩化ナトリウムで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒の蒸発により、２−イソブチル−３−(メトキシカルボニル)−プロピオン酸ベンジル（２）８.０１ｇ（収率１００％）が、ＥおよびＺ異性体の混合物として得られた。メタノール５０ｍｌ中の（２）８.０１ｇ（０.０２９mol）および１０％パラジウム−炭素１ｇの混合物を、室温で４気圧の水素ガスの下８時間水素添加した。触媒を濾過して除いた後、濾液を減圧下蒸発乾固し、２−イソブチル−３−( メトキシカルボニル)−プロピオン酸（３）４.７ｇ（収率８６％）を無色油状物として得た。乾燥塩化メチレン１０ｍｌ中の（３）０.８５ｇ（４.５ｍｍｏｌ）および塩化オキサリル０.５７ｇ（４.５ｍｍｏｌ）の混合物に、無水ジメチルホルムアミド０.１ｍｌを添加した。１時間室温で攪拌した後、溶媒を減圧下蒸発させ、残渣を無水ジメチルホルムアミドで５ｍｌまで希釈し、Ｌ−トリプトファンメチルアミドの塩酸塩１.０６ｇ（４.１ｍｍｏｌ）（コルチレビッツおよびガラーディ、Ｊ.Ｍed.Ｃhem .（１９９０）３３：（２６３−２７３）を加え、続いてトリエチルアミン１.３ｍｌ（９.３ｍｍｏｌ）を−１０℃で加えた。これを室温で７時間攪拌し、室温で減圧下蒸発乾固した。残渣を酢酸エチルで１５０ｍｌまで希釈し、水（２×１５ｍｌ）、１０％硫酸水素カリウム（５×２０ｍｌ）、１０％炭酸水素ナトリウム（２×２０ｍｌ）、飽和塩化ナトリウムで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、次いで蒸発して、Ｎ−[Ｄ,Ｌ−２−イソブチル−３−(メトキシカルボニル)−プロパノイル]−Ｌ−トリプトファンメチルアミド４１.６ｇ（収率８３％）がジアステレオマー４Ａおよび４Ｂの混合物として得られた。異性体４Ａおよび４Ｂはフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、酢酸エチル）により分離した。異性体４Ａ：ｍｐ＝１３４−１３７℃。Ｒ_f(Ｃ)＝０.３７。異性体４Ｂ：ｍｐ＝１５６−１５８℃。Ｒ_f(Ｃ)＝０.２。別法として、４Ａおよび４Ｂの混合物を下記のように直接そのヒドロキサメートに変換した。この場合、５Ａが５Ａおよび５Ｂの混合物から結晶化した。メタノール１ｍｌ中の水酸化カリウム０.２２ｇ（３.９６ｍｍｏｌ）の温かい混合物を、ヒドロキシルアミンの塩酸塩０.１８４ｇ（２.６５ｍｍｏｌ）の温かい混合物に加えた。アルゴン雰囲気下氷中で冷却した後、塩化カリウムを濾取し、（４Ａ）０.５ｇ（１.３２ｍｍｏｌ）を濾液に加えた。得られた混合物を７時間室温で攪拌し、減圧下蒸発乾固した。残渣を酢酸エチル１００ｍｌに懸濁し、１０％硫酸水素カリウム１０ｍｌ、飽和塩化ナトリウムで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下蒸発乾固した。残渣を酢酸エチルから結晶化させ、純粋５Ａ０.２８ｇ（収率５６％）を得た。異性体４Ｂを、４Ａについて記載したように、対応するヒドロキサム酸５Ｂ（収率７２％）に変換した。異性体５Ａ：ｍｐ＝１７６−１８２℃。Ｒ_f(Ｄ)＝０.４５。異性体５Ｂ：ｍｐ＝１５７−１６２℃。Ｒ_f(Ｄ)＝０.３９。４Ａ／４Ｂ混合物を使用する場合、５Ａが上記のように直接残渣から結晶化できる。上記と類似の方法で、４−メチル−２−オキソ吉草酸、２−オキソ吉草酸、３ −メチル−２−オキソ酪酸、２−オキソヘキサン酸、５−メチル−２−オキソヘキサン酸または２−デカン酸に変えることにより、対応する式（１）（ここで、Ｒ¹はＨおよびＲ²はそれぞれｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、２−メチルブチルおよびｎ−オクチル）で示される化合物が製造される。加えて、上記に記載の実施例１の方法に従って、ウィッティヒ反応で得られた中間体の水素添加の工程を省いて、対応する式（２）（ここで、Ｒ¹はＨおよび、Ｒ²は上記）で示される化合物が得られる。インドリル残基のアシル化形を含む化合物の合成のために、式（３）または（４）の中間体エステルを、ヒドロキサメートに変換する前に、脱エステル化しアシル化する。説明のために、４Ａをエタノール中の水酸化ナトリウムで脱エステル化し、次いで酸性にしてＮ−(Ｌ−２−イソブチル−３−カルボキシプロパノイル)−Ｌ−トリプトファンメチルアミドを得、それをアルキル(１−４Ｃ)カルボン酸無水物で処理してＮ−(Ｌ−２−イソブチル−３−カルボキシプロパノイル)−Ｌ−((Ｎ−アシル)インドリル)−トリプトファンメチルアミドを得る。この中間体を、次いで塩化オキサリル、続いてヒドロキシルアミンで、低温で処理し、対応するヒドロキサメートを得る。実施例２Ｎ−[２−イソブチル−３−(Ｎ'−ヒドロキシカルボニルアミド)− プロパノイル]−Ｄ−トリプトファンメチルアミド（７Ｂ）の製造Ｎ−[２−イソブチル−３−(メトキシ−カルボニル)−プロパノイル]−Ｄ−トリプトファンメチルアミドの２つのジアステレオ異性体６Ａ、Ｂの混合物を、実施例１で４Ａ、Ｂについて記載のように製造した。混合物を酢酸エチルから結晶化し、２回の再結晶の後、純粋なジアステレオマー６Ｂ０.２６ｇ（４９％）が得られた：ｍｐ１５５−１５７℃、Ｒ_f(Ｃ)＝０.３２。６Ｂを実施例１に記載の方法により、そのヒドロキサム酸７Ｂに、収率５０％（１１９ｍｇ）で変換した：ｍｐ１５７−１５９℃、Ｒ_f(Ｄ)＝０.３９。実施例３Ｎ−[２−イソブチル−３−(Ｎ'−ヒドロキシカルボニルアミド)− プロパノイル]−Ｎ−メチル−Ｌ−トリプトファンメチルアミド（９Ａ）の製造Ｎ−メチル−Ｌ−トリプトファンメチルアミドを、実施例１でＬ−トリプトファンメチルアミドについて記載しているのと同様に製造し、４について記載しているように３と反応させ、粗Ｎ−[Ｄ,Ｌ−２−イソブチル−３−(メトキシカルボニル)−プロパノイル]−Ｎ−メチル−Ｌ−トリプトファンメチルアミド８Ａ、Ｂを得、それを酢酸エチルから結晶化し、８Ａ７６ｍｇ（収率１９％）を得た：ｍｐ１７１−１７４℃、Ｒ_f(Ｃ)＝０.４０。実施例１に記載した方法により、８Ａを９Ａに４５％の収率（３４ｍｇ）で変換した：ｍｐ１８０〜１８３℃、Ｒ_f(Ｄ)＝０.５４。実施例４Ｎ−[２−イソブチル−３−(Ｎ−ヒドロキシカルボニルアミド)− プロパノイル]−Ｌ−３−(２−ナフチル)−アラニンメチルアミド(11Ａ)の製造Ｎ−[Ｄ,Ｌ−イソブチル−３−(メトキシカルボニル)−プロパノイル]−Ｌ− ３−(２−ナフチル)−アラニン１０Ａを実施例１の記載と同様にして、Ｌ−３− (２−ナフチル)−アラニンメチルアミドおよび３から製造した。粗生産物を酢酸エチル：ヘキサン１：１のシリカゲル６０ｇのクロマトグラフィーに付し、１０Ａ１２ｍｇ(収率５％)を得た：ｍｐ１５１−１５８℃、Ｒ_f(Ｃ)＝０.６９。１０Ａをヒドロキサメート１１Ａに、実施例１の記載と同様にして、３０％の収率(３ｍｇ)で変換した：ｍｐ１７９−１８１℃、Ｒ_f(Ｄ)＝０.１７。ＭＳ−ＦＡＢ(ｍ／ｚ)４００(Ｍ⁺＋Ｈ)。実施例５Ｎ−[２−イソブチル−３−(Ｎ'−ヒドロキシカルボニルアミド)−プロパノイル ]−Ｌ−トリプトファン−２−ヒドロキシエチルアミド(１３Ａ)の製造３を１,１'−カルボニルジイミダゾールで２０分間塩化メチレン中室温で活性化した以外、実施例１でＬ−トリプトファンメチルアミドの塩酸塩について記載したと同様に、Ｌ−トリプトファン２−ヒドロキシエチルアミドの塩酸塩を製造し、３と結合させた。粗生産物はジアステレオ異性体１２Ａ、Ｂ０.７ｇ(収率６７％)の混合物であった：Ｒ_f(Ｃ)１２Ａ０.３８、Ｒ_f(Ｃ)１２Ｂ０.１９。１２Ａが酢酸エチルから、収率３５％(０.１８ｇ)で結晶化した：ｍｐ１６１ −１６３℃、Ｒ_f(Ｃ)＝０.３８。１２ＡをＮ−[２−イソブチル−３−(Ｎ'−ヒドロキシカルボニルアミド)−プロパノイル]−Ｌ−トリプトファン２−ヒドロキシエチルアミド１３Ａへ、実施例１と同様にして、収率３５％(６２ｍｇ)で変換した：Ｒ_f(Ｄ)＝０.１７、ｍｐ１６２−１６３℃。ＭＳ−ＦＡＢ(ｍ／ｚ)４１９(Ｍ⁺＋Ｈ)。実施例６Ｎ−[２−イソブチル−３−(Ｎ'−ヒドロキシカルボニルアミド)− プロパノイル]−Ｌ−トリプトファンアミルアミド（１５Ａ）の製造Ｌ−トリプトファンアミルアミドの塩酸塩を、実施例１でＬ−トリプトファンメチルアミドについて記載のように製造し、ジクロロメタン中、室温で２０分１ ,１'−カルボニルジイミダゾールで活性化した３と反応させた。Ｎ−[Ｄ,Ｌ−２ーイソブチル−３−(メトキシカルボニル)−プロパノイル]−Ｌ−トリプトファンアミルアミドの２個のジアステレオマー１４Ａ、Ｂ(収率９０％)の混合物を、４Ａについて記載したように、対応するヒドロキサム酸に変換した。酢酸エチル溶液のゆっくりした蒸発により、１５Ａ、Ｂ０.３４３ｇ(７１％)が得られた：ｍｐ１６０−１６３℃。ＭＳ−ＦＡＢ(ｍ／ｚ)４４５(Ｍ⁺＋Ｈ)。実施例７Ｎ−[２−イソブチル−３−(Ｎ'−ヒドロキシカルボニルアミド)− プロパノイル]−Ｌ−トリプトファンピペリジンアミド(１７Ａ、Ｂ)の製造Ｌ−トリプトファンピペリジンアミドを、Ｌ−トリプトファンメチルアミドについて実施例１で行ったように３と反応させ、Ｎ−[Ｄ,Ｌ−２−イソブチル−３ −(メトキシカルボニル)−プロパノイル]−Ｌ−トリプトファンピペリジンアミド１６Ａ、Ｂ１.１４ｇ(収率８９％)を泡状物として得た：Ｒ_f(Ｃ)＝(１６Ａ)０ .７４、(１６Ｂ)０.６７。１６Ａ、Ｂを実施例１の４Ａと同様にして粗１７Ａ、Ｂに、収率８８％(５７０ｍｇ)で変換した：Ｒ_f(Ｄ)(１７Ａ)０.４１、(１７Ｂ)０.３０。粗１７Ａ、Ｂを、シリカゲル１８０ｇで酢酸エチル中の１２％イソプロパノールのクロマトグラフィーに付し、酢酸エチルから結晶化した後、１７Ａ、Ｂ１４０ｍｇ(収率２５％)を得た：ｍｐ１６９−１７０℃。ＭＳ−ＦＡＢ(ｍ／ｚ)４４３(Ｍ⁺＋Ｈ)。実施例８Ｎ−[２−イソブチル−３−(Ｎ'−ヒドロキシカルボニルアミド)− プロパノイル]−Ｌ−トリプトファンドデシルアミド（１９Ａ）の製造Ｌ−トリプトファンドデシルアミドの反応物を、実施例１のＬ−トリプトファンメチルアミドについての記載と同様の方法で製造した。このエステルを実施例１に記載のように３と反応させ、収率９３％で粗Ｎ−[Ｄ,Ｌ−イソブチル−３− (メトキシカルボニル)−プロパノール]−Ｌ−トリプトファンドデシルアミド１８Ａ、Ｂを、異性体１９Ａと１９Ｂの混合物として得た。本混合物をシリカゲル１５０ｇで酢酸エチル：ヘキサン(１：２)のクロマトグラフィーに付し、２個の異性体の混合物０.６２ｇを得た：Ｒ_f(Ｅ)１９Ａ０.３７、Ｒ_f(Ｅ)１９Ｂ０.２９。酢酸エチルからのゆっくしりた蒸発による結晶化により、ＴＬＣおよびＮＭＲ分析により約１０％の１８Ｂが混入した１８Ａ０.３８ｇを得た：ｍｐ１３３− １３５℃。１９Ａのカリウム塩をアルカリ反応混合物から収率８１％(２２２ｍｇ)で結晶化する他は、実施例１に記載と同様にして、１８Ａを対応するヒドロキサム酸に変換した。１９Ａのカリウム塩(５４ｍｇ)を２ｍｌの沸騰メタノールに溶解し、数滴の水を加え、溶液を０.１Ｎ塩酸で酸性にし、水で希釈して１９Ａ５０ｍｇ(収率１００％)を得た：ｍｐ１５５−１５９℃、Ｒ_f(Ｄ)＝０.４９。ＭＳ−ＦＡＢ(ｍ／ｚ)５４３(Ｍ⁺＋Ｈ)。実施例９Ｎ−[２−イソブチル−３−(Ｎ'−ヒドロキシカルボニルアミド)−プロパノイル ]−Ｌ−トリプトファン(Ｓ)−メチルベンジルアミド（２１Ａ）の製造Ｌ−トリプトファン(Ｓ)−メチルベンジルアミドと３の反応を実施例１に記載のように行い、酢酸エチルから結晶化の後、Ｎ−[２−イソブチル−３−(メトキシカルボニル)−プロパノイル]−Ｌ−トリプトファン(Ｓ)−メチルベンジルアミド２０Ａ３３０ｍｇ(収率５１％)を得た：ｍｐ１６０−１６１℃、Ｒ_f(Ｃ)＝０. ７７。２０Ａを、実施例１で使用したのと同様の方法で、収率３８％(７６ｍｇ)でヒドロキサメート２１Ａに変換した：ｍｐ１６５−１６６℃、Ｒ_f(Ｄ)＝０.７３。ＭＳ−ＦＡＢ(ｍ／ｚ)４７９(Ｍ⁺＋Ｈ)。実施例１０Ｎ−[Ｌ−２−イソブチル−３−(Ｎ'−ヒドロキシカルボニルアミド)− プロパノイル]−Ｌ−トリプトファン(６−フェニル−メトキシカルボニルアミノヘキシル−１)アミド（２７Ａ）の製造１−アミノ−６−フェニルメトキシカルボニルアミノヘキサン(２３)の製造のために、塩化メチレン２５ｍｌ中の１,６−ジアミノヘキサンおよびベンズアルデヒドの等モル混合物(０.０１ｍｏｌ)を、無水硫酸マグネシウム１.５ｇの存在下室温で５時間攪拌した。乾燥剤を濾過により除去した後、濾液を減圧下蒸発乾固して粗１−アミノ−６−フェニルアミノヘキサン２２２ｇ(収率１００％)を無色油状物として得た；ＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)１.１−１.９(ｍ，１０Ｈ，ヘキサンＣＨ₂−２,−３,−４,−５,ＮＨ₂)；２.６(ｍ,２Ｈ,ＣＨ₂−１)；３.５１(ｍ,２Ｈ ,ヘキサンＣＨ₂−６)；７.１−７.８(ｍ,５Ｈ,芳香族)；８.１６(ｓ,１Ｈ,イミンＣＨ)。メチレンクロライド２０ｍｌ中の２２２ｇ(０.０１ｍｏｌ)およびトリエチルアミン１.４ｍｌ(０．０１ｍｏｌ)の混合物に。次いでクロロギ酸ベンジル１. ７８ｇ(０.０１ｍｏｌ)を−５℃で滴下した。得られた混合物を０℃で０.５時間、室温で２時間攪拌し、次いで塩化メチレンで５０ｍｌに希釈し、水(２０ｍｌ) 、２％炭酸水素ナトリウム(２０ｍｌ)、水および飽和塩化ナトリウムで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を減圧下で蒸発させた後、残渣をエタノール５ｍｌに溶解し、２Ｎ塩酸１０ｍｌを加えた。得られた混合物を６時間室温で攪拌し、次いで減圧下で蒸発乾固した。残渣を水で５０ｍｌまで希釈し、エチルエーテル(２×１５ｍｌ)で洗浄した。水相を減圧下蒸発させ、生成物２３を少量の水からの結晶化により収率４２％で精製した；ｍｐ１７５−１７８℃。２３の誘導体化のための、ジペプチド同族体(Ｎ−(Ｌ−２−イソブチル−３− メトキシカルボニル)−プロパノイル−Ｌ−トリプトファン(２５Ａ))の製造：塩化メチレン中の５０％無水ＤＭＦ４ｍｌ中の２−イソブチル−３−メトキシカルボニルプロピオン酸３１.７５４ｇ(９.３２ｍｍｏｌ)の混合物に、Ｎ,Ｎ'−カルボニルジイミダゾール(ＣＤＩ)１.６６ｇ(１０.２ｍｍｏｌ)を室温で加えた。室温で１５分攪拌した後、Ｌ−トリプトファンベンジルエステルの塩酸塩３.０８ｇ(９.３１ｍｍｏｌ)を加えた。得られた混合物を一晩室温で攪拌し、次いで酢酸エチルで６０ｍｌまで希釈し、５％炭酸水素ナトリウム(２×１５ｍｌ)、水( ２×１５ｍｌ)、飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒の減圧下での蒸発により、２５のベンジルエステルである２４４.３２ｇ(収率１００％)が無色泡状物として得られ、それを次工程に更に精製することなく使用した。メタノール１５ｍｌ中の２４４.３２ｇ(９．３１ｍｍｏｌ)および１０％パラジウム−炭素０.５ｇの混合物に、水素ガスを２時間通して泡立たせ、その間メタノールを反応混合物の用量を一定に保つために加えた。触媒を濾取し、新しいメタノール(１５ｍｌ)で洗浄し、濾液を減圧下蒸発乾固させた。減圧下での溶媒の蒸発および真空での残渣の乾燥により、酸２５Ａ、Ｂ３.０８ｇ(収率８８％) を２個のジアステレオマーの混合物として無色ガラス状固体の形で得た。これをフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル；酢酸エチル；Ｒ_f(２５Ａ)＝０.２４、Ｒ_f(２５Ｂ) ＝０.１)で異性体２５Ａおよび２５Ｂに分離した。化合物２５Ａを、下記のようにＮ−[Ｌ−２−イソブチル−３−メトキシカルボニルプロパノイル]−Ｌ−トリプトファン(６−フェニルメトキシカルボニルアミノヘキシル)アミド(２６Ａ)に変換した。塩化メチレン中の２％ジメチルホルムアミド１ｍｌ中の２５Ａ０.５５ｇ(１.４７ｍｍｏｌ)およびＣＤＩ０.２４ｇ( １.４８ｍｍｏｌ)の混合物を０.５時間室温で攪拌し、２３０.４２ｇ(１.４７ｍｍｏｌ)を加えた。室温で一晩攪拌した後、混合物をクロロホルムで５０ｍｌまで希釈し、２％硫酸水素カリウム(２×１０ｍｌ)、水(１０ｍｌ)、５％炭酸水素ナトリウム(２×１０ｍｌ)、水(２×１０ｍｌ)および飽和塩化ナトリウムで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒の減圧下での蒸発により粗２６Ａ０ .８ｇを得、それをフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル；酢酸エチル／ヘキサン２５：５)で精製した：収率５６％；Ｒ_f(Ｅ)＝０.５７。実施例１の４Ａを生成物２６Ａに変えた場合、同様の方法により、標題化合物２７Ａ (１０２−１０８℃で融解、収率４６％)が得られた；Ｒ_f(Ｄ)＝０.６３。実施例１１Ｎ−[Ｌ−２−イソブチル−３−(Ｎ'−ヒドロキシカルボニルアミド)− プロパノイル]−Ｌ−トリプトファンシクロヘキシルアミド（２８Ａ）の製造シクロヘキシルアミンを実施例１０の２３の代わりに用い、同様の方法で標題化合物２８Ａ（１９９−２０３℃で融解、収率４９％）を得た；Ｒ_f(Ｄ)＝０.５１。実施例１２Ｎ−[シス−２−(Ｎ'−ヒドロキシカルボニルアミド)−シクロヘキシルカルボニル]−Ｌ−トリプロファンメチルアミド（２９Ａ、Ｂ）の製造メタノール１５ｍｌ中のシス−１,２−シクロヘキサンジカルボン酸無水物２ｇ(０.０１３mol)の混合物を５時間還流し、次いで減圧下蒸発乾固してシス−２ −メトキシカルボニルシクロヘキサンカルボン酸２.４１ｇ(収率１００％)を得た。実施例１の３をこれに変えた場合、同様の方法で標題化合物、(４０−１４４℃で融解、収率３６％)が得られた；Ｒ_f(Ｄ)＝０.５３、０.４７。実施例１３Ｎ−[トランス−２−(Ｎ'−ヒドロキシカルボニルアミド)−シクロヘキシルカルボニル]−Ｌ−トリプトファンメチルアミド)(３０Ａ、Ｂ)の製造 (±)トランス−１,２−シクロヘキサンジカルボン酸無水物を実施例１２のシス−１,２−シクロヘキサンジカルボン酸無水物の代わりに用い、同様の方法で標題化合物３０Ａ、Ｂ(１６７−１７４℃で融解、収率３７％)を得た；Ｒ_f(Ｄ) ＝０.５７。実施例１４Ｎ−[２−イソブチル−３−(Ｎ'−ヒドロキシカルボニルアミド)− プロパノイル]−Ｌ−トリプトファン（３１Ａ）の製造３１Ａを、実施例１０の２５Ａから、実施例１の５Ａの製造と同じ方法で、収率７５％(１２８ｍｇ)で製造し、酢酸エチルから泡状物として単離した：Ｒ_f(Ｆ )＝０.５５、ＭＳ−ＦＡＢ(ｍ／ｚ)(Ｍ⁺＋Ｈ)。酢酸エチルから再結晶した３１Ａの少量のサンプルは、１１６−１２０℃の融点を有していた。実施例１５Ｎ−(Ｄ,Ｌ−２−イソブチル−３−カルボキシイソプロパノイル)− Ｌ−トリプトファン(６−アミノヘキシル−１)アミド(３２Ａ)の製造メタノール中の２Ｎ水酸化カリウム０.４ｍｌ中の２６Ａ０.５ｇ(８.２４ｍｍｏｌ)の混合物を一晩室温で攪拌し、次いで減圧下蒸発乾固した。残渣を水で１５ｍｌまで希釈し、１Ｎ塩酸でｐＨ＝２まで酸性化した。２６Ａの粗遊離酸を酢酸エチル(３×１５ｍｌ)で抽出し、有機相を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、蒸発乾固して２６Ａ０.４５ｇ(収率９２％)を無色泡状物として得た。メタノール１５ｍｌ中の２６Ａの遊離酸０.３９５ｇ(６.６ｍｍｏｌ)の混合物に、１０％パラジウム−炭素の存在下、室温で水素ガスを２時間通して泡立たせた。触媒を濾取し、エタノール(２×２０ｍｌ)で洗浄し、濾液を減圧下蒸発乾固して標題化合物３２Ａ０.３ｇ(収率９２％)を無色泡状物として得た；Ｒ_f(Ｇ)＝０.０８。実施例１６Ｎ−[Ｎ−(２−イソブチル−３−カルボキシプロパノイル)−Ｌ− トリプトファニル]グリシン３４Ａ、Ｂの製造Ｌ−トリプトファン−グリシンメチルエステルと酸３との反応を２５Ａについて記載したのと同様に行い、粗Ｎ−[Ｎ−(Ｄ,Ｌ−２−イソブチル−３−メトキシカルボニルプロパノイル)−Ｌ−トリプトファニル]−グリシンメチルエステル３３を収率８７％で３３Ａおよび３３Ｂのジアステレオマー混合物として得た。異性体３３Ａおよび３３Ｂをフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル；酢酸エチル)により分離した。異性体３３Ａｍｐ＝１５４−１５５℃；Ｒ_f(Ｃ)＝０．４６。エステル３３Ａ、Ｂを、２５Ａについて記載したように、２等量のメタノール性水酸化カリウムにより鹸化して遊離酸３４Ａ、Ｂに転換させた。異性体３４Ａ収率９２％；ｍｐ＝９６−１０２℃；Ｒ_f(Ｇ)＝０.３１。異性体３４Ｂ収率９３％；ｍｐ＝９９−１０５℃；Ｒ_f(Ｇ)＝０.２５。実施例１７Ｎ−[シス−２−カルボキシ−シクロヘキシルカルボニル]−Ｌ− トリプトファンメチルアミド３５の製造ジメチルホルムアミド０.５ｍｌ中のシス−１,２−シクロヘキサンジカルボン酸無水物０.２８１ｇ(１.８２ｍｍｏｌ)およびＬ−Ｔrp-ＮＨＭｅ０.４７ｇの混合物に、トリエチルアミン０.５１ｍｌを室温で加えた。２時間攪拌した後、得られた混合物を水で１０ｍｌまで希釈し、酢酸エチル２５ｍｌを加えた。得られた混合物を１０％硫酸水素カリウムでｐＨ＝２まで酸性化し、有機相を水(２× １５ｍｌ)、飽和塩化ナトリウムで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで洗浄し、蒸発乾固した。標題化合物３５を、酢酸エチル−ヘキサン混合物から結晶化して精製した。収率４８％；ｍｐ＝１０５−１１２℃；Ｒ_f(Ｇ)＝０.６５、０.６１。実施例１８Ｎ−[トランス−２−カルボキシ−シクロヘキシルカルボニル]−Ｌ− トリプトファンメチルアミド３６の製造実施例１７のシス−１,２−シクロヘキサンジカルボン酸無水物を(±)トランス−１,２−シクロヘキサンジカルボン酸無水物に変えた場合、同様の方法で標題化合物３６が５６％の収率で得られた：ｍｐ＝１６７−１７４℃；Ｒ_f(Ｇ)＝０.６７、０.６１。実施例１９Ｎ−[２−イソブチル−３−(Ｎ'−アセトキシカルボニルアミド)− プロパノイル]−Ｌ−トリプトファンメチルアミド(３７Ａ)の製造ジメチルホルムアミド０.５ｍｌ中の５Ａ(実施例１)９７.５ｍｇ(０.２５ｍｍｏｌ)に、酢酸無水物２５.５ｍｇ(０.２５ｍｍｏｌ)および１,８−ジアザビシクロ[５.４.０]−ウンデカ−７−エン(ＤＢＵ)３７ｍｇ(０.２５ｍｍｏｌ)を室温にて加えた。一晩放置した後、ＤＭＦを非常に減圧して蒸発させ、残渣を等量の酢酸エチルおよび２％硫酸水素カリウムで抽出した。酢酸エチル相を２％硫酸水素カリウム、水および食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、蒸発させて固体を得た。固体を温かい酢酸エチル：ヘキサン１：１に溶解し、それを室温で放置して７１ｍｇ(収率６６％)の固体生成物３７Ａを得た：ｍｐ＝１８４−１８６℃；Ｒ_f(Ｇ)＝０.６８。実施例２０Ｎ−[イソブチル−３−(Ｎ'−ベンズオキシカルボニルアミド)− プロパノイル]−Ｌ−トリプトファンメチルアミド(３８Ａ)の製造テトラヒドロフラン１ｍｌ中の安息香酸３０.５ｍｇ(０.２５ｍｍｏｌ)に、カルボニルジイミダゾール４０.５ｍｇ(０.２５ｍｍｏｌ)を加えた。１０分後、実施例１の化合物５Ａ９７ｍｇ(０.２５ｍｍｏｌ)を１ｍｌのジメチルホルムアミド中に加えた。１０分後、高減圧下で反応混合物を蒸発乾固し、等量の酢酸エチルおよび水の混合物中に溶解した。酢酸エチル相を５％炭酸水素ナトリウム、水、２％硫酸水素ナトリウム、水および食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した。酢酸エチル相の小容量への蒸発により標題化合物３８Ａ５０ｍｇ(４１％) を得た：ｍｐ＝１８７−１８７.５℃；Ｆｒ(Ｇ)＝０.５４。実施例２１上記した方法を適用して、以下の本発明化合物が合成される。ＨＯＮＨＣＯＣＨ₂ＣＨ(ｎ−ヘキシル)−ＣＯ−Ｌ−Ｔrp−ＮＨＭe；ＨＯＮＨＣＯＣＨ₂ＣＨ(ｎ−ペンチル)−ＣＯ−Ｌ−Ｔrp−ＮＨＭe；ＨＯＮＨＣＯＣＨ₂ＣＨ(ｉ−ペンチル)−ＣＯ−Ｌ−Ｔrp−ＮＨＭe；ＨＯＮＨＣＯＣＨ₂ＣＨ(エチル)−ＣＯ−Ｌ−Ｔrp-ＮＨＭe；ＨＯＮＨＣＯＣＨ₂ＣＨ(エチル)−ＣＯ−Ｌ−Ｔrp-ＮＨＣＨ₂ＣＨ₃；ＨＯＮＨＣＯＣＨ₂ＣＨ(エチル)−ＣＯ−Ｌ−Ｔrp-ＮＨＣＨ₂ＣＨ₂ＯＨ；ＨＯＮＨＣＯＣＨ₂ＣＨ(エチル)−ＣＯ−Ｌ−Ｔrp−ＮＨシクロヘキシル；ＭeＯＮＨＣＯＣＨ₂ＣＨ(iＢu)−ＣＯ−Ｌ−Ｔrp-ＮＨＥt；ＥtＯＮＭeＣＯＣＨ₂ＣＨ(iＢu)−ＣＯ−Ｌ−Ｔrp-ＮＨＥt；ＭeＯＮＨＣＯＣＨ₂ＣＨ(iＢu)−ＣＯ−Ｌ−Ａla(２−ナフチル)−ＮＨＥt；ＥtＯＮＭeＣＯＣＨ₂ＣＨ(iＢu)−ＣＯ−Ｌ−Ａla（２−ナフチル）−ＮＨＥt；ＥtＯＮＨＣＯＮＭe−ＣＨ₂ＣＨ(iＢu)−ＣＯ−Ｌ−Ｔrp−ＮＨＥt；ＥtＣＯＮＯＨ−ＣＨ₂ＣＨ(iＢu)−ＣＯ−Ｌ−Ｔrp-ＮＨＥt；ｎ−ＰrＣＯＮＯＥt−ＣＨ₂ＣＨ(iＢu)−ＣＯ−Ｌ−Ｔrp−ＮＨＥt；ＥtＮＨＣＯＮＯＭe−ＣＨ₂ＣＨ(iＢu)−ＣＯ−Ｌ−Ｔrp-ＮＨＥt；ＭeＮＨＣＯＮＯＨ−ＣＨ₂ＣＨ(iＢu)−ＣＯ−Ｌ−Ｔrp-ＮＨＥt；ＥtＯＮＨＣＯＮＭe−ＣＨ₂ＣＨ(iＢu)−ＣＯ−Ｌ−Ａla(２−ナフチル)-ＮＨＥ t；ＥtＣＯＮＯＨ−ＣＨ₂ＣＨ(iＢu)−ＣＯ−Ｌ−Ａla(２−ナフチル)-ＮＨＥt；ｎ−ＰrＣＯＮＯＥt−ＣＨ₂ＣＨ(iＢu)−ＣＯ−Ｌ−Ａla(２−ナフチル)-ＮＨＥ t；ＥtＮＨＣＯＮＯＭe−ＣＨ₂ＣＨ(iＢu)−ＣＯ−Ｌ−Ａla(２−ナフチル)-ＮＨＥ t；ＭeＮＨＣＯＮＯＨ−ＣＨ₂ＣＨ(iＢu)−ＣＯ−Ｌ−Ａla(２−ナフチル)-ＮＨＥt ；ＨＯＮＨＣＯＮＨＣＨ₂ＣＨ(iＢu)−ＣＯ−Ｌ−ＴrpＮＨＭe；ＨＯＮＨＣＯＮＨＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ(iＢu)−ＣＯ−Ｌ−ＴrpＮＨＭe；ＨＯＮＨＣＯＮＨＣＨ(iＢu)ＣＯ−Ｌ−ＴrpＮＨＭe；Ｈ₂ＮＣＯＮ(ＯＨ)ＣＨ(iＢu)ＣＯ−Ｌ−ＴrpＮＨＭe；Ｎ(ＯＨ)ＣＨ₂ＣＨ(iＢu)ＣＯ−Ｌ−ＴrpＮＨＭe；Ｈ₂ＮＣＯＮ(ＯＨ)ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ(iＢu)ＣＯ−Ｌ−ＴrpＮＨＭe；ＣＨ₃ＣＯＮ(ＯＨ)ＣＨ(iＢu)ＣＯ−Ｌ−ＴrpＮＨＭe；ＣＨ₃ＣＯＮ(ＯＨ)ＣＨ₂ＣＨ(iＢu)ＣＯ−Ｌ−ＴrpＮＨＭe；およびＣＨ₃ＣＯＮ(ＯＨ)ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ(iＢu)ＣＯ−Ｌ−ＴrpＮＨＭe；製造された幾つかの化合物の阻害活性の測定は上記したように実施され、表１に示す結果を与える。実施例２２脈管形成抑制ウォーカー２５６癌肉腫(ラット悪性腫瘍)の粗抽出物(３０ｍｇ／ｍｌタンパク質)をハイドロン(Ｈydron)(緩放出性ポリマー)に直径１.５ｍｍのペレット円で結合させた。ペレットを麻酔下の白子(albino)ラットの角膜の間質中に移植した。カニューレを下大静脈に慢性的に移植させ、そのカニューレを通して化合物５Ａの５５％ＤＭＳＯ／水溶液(１０ｍｇ／ｍｌ)を継続的に０.８ｍｌ／２４時間の割合で６日間注入した。対照群にはＤＭＳＯ溶液のみを投与した。６日後動物を再麻酔し、角膜血管を目に見えるようにするために墨汁で動脈内潅流した。ついで眼球を摘出し、５％ホルマリンで固定した。ＤＭＳＯ溶液のみを投与された対照群の眼球では、角膜輸部(limbus)からペレット方向に大きい血管成長が観察される。化合物５Ａを投与された動物では、対照群と比べて血管は顕著に短く、および／または顕著に細密であり、インクで殆ど充填されていない。実施例２３乾癬の治療乾癬に対する化合物５Ａの効果をホルボールエステル誘発表皮過形成マウスモデルで検討した。抗増殖剤のスクリーニング用モデルとして広く認められている１２−Ｏ−テトラデカノイルホルボール−１３−アセテート(ＴＰＡ)過形成モデルを選択した。ＴＰＡの単発局所投与により、乾癬で観察されるような顕著な表皮過形成と、強い炎症性反応がマウスに生じる。アージリス(Ａrgyris,Ｔ.Ｓ.)( １９８０)、Ａm.Ｊ.Ｐathol.９８：６３９〜６４８頁。このモデル系では、ＴＰＡ処置から３〜５日目に表皮過形成が組織学的に明らかに見られる。ＴＰＡの他、他のもっと安定なホルボールエステルでもホルボール−１２,１３ジブチロイル(ＰdiＢu)も含めて同様の結果が生じる。本発明化合物の効果を調べるために上記の表皮過形成動物モデルで下記の実験を行った。ホルボールエステル、ＰdiＢu(２０ｎｍｏｌ)のアセトン２０μｌ溶液を無毛マウス(Ｈｒ／Ｈｒ)の両耳(各々約１ｃｍ²)に塗布した。ついで試験化合物(総量２０ μｌ)をＰdiＢu塗布後直ちに(１５〜３０分後に)右耳に塗布した。各動物の左耳には同量(２０μｌ)のビヒクルを塗布した。試験化合物(およびビヒクル)をＰdi Ｂu塗布から６時間および１８時間後に再塗布した。処理時間は正確な時間間隔があくように適当にずらした。ＰdiＢu塗布から３０時間後、動物を麻酔し、耳の厚さ値をマイクロカリパスを用いて測定した。ついでパンチバイオプシー(６ｍｍ)の重さを測定した。組織検査を３０時間目に採取して選択した検体で行った。試験化合物は、化合物ＧＭ６００１(１０ｍｇ／ｍｌエタノール溶液)、負対照、アセトヒドロキサム酸(ＡＨＡ；２ｍｇ／ｍｌエタノール溶液)および正対照としてフルオシノニド(Ｌidex^R)(０.０５％アルコールビヒクル(３５％)溶液、ジイソプロピルアジペート、クエン酸およびプロピレングリコール)を用いた。各動物の左耳をビヒクル−処理対照(ＰdiＢu＋エタノール)とした。つまり、この実験系の対照としては、１）未処理対照、２）ＰdiＢuおよびビヒクルのみ( 各試験マウスを含む)、３）ＰdiＢuおよびＡＨＡ、４）正対照としてＰdiＢuおよびＬidex^Rが含まれる。結果を表２に示す。以上を要するに、化合物ＧＭ６００１は強い抗炎症作用をこの乾癬用標準インビボモデルにおいて示した。抗炎症作用の強さは正対照であるＬidex^Rで観察されるそれと匹敵するくらいであった。ＰdiＢu−誘発耳重量の減少は、耳厚増加の同様の抑制を伴った。さらに、炎症および表皮過形成の減少は組織学的分析により明らかであった。アセトヒドロキサム酸(ＡＨＡ)はＭＭＰに対する阻害作用が欠けているので負の対照として用いた。ＡＨＡは耳厚あるいは重量に対するＰ diＢu−誘発効果を変化させなかった。実施例２４慢性真皮創傷の治療ある種の創傷におけるマトリックスメタロプロテイナーゼ活性の存在、および本発明阻害剤による該プロテアーゼ活性の阻害を示すために実験した。閉鎖性自然治癒創傷、解放性遅延治癒創傷および解放性慢性創傷と呼ばれる３タイプのヒト創傷から流体を集めた。第一のカテゴリーでは、***切断手術後の女性の胸壁から流体を集めた。正当な外科的理由により開放したままで置かれた非感染創傷からの流体は開放性遅延治癒創傷と見なした。密封包帯を創傷部にし、密封から２〜６時間後に流体を集めた。最後に、慢性開放性創傷からも創傷部を密封包帯で覆うことにより流体を集めた。臨床的に感染していず、開放されたままでいて、４週間以上治癒していない場合の創傷を慢性と見なした。種々の創傷流体のマトリックスメタロプロテイナーゼ活性を、シャビラ(Chavi ra)ら、Analytic Biochemistry(１９８４)、１３６：４４６に基本的に記載のアゾコル(Ａzocoll)アッセイを用いて測定した。流体を遠心分離し、上清液を０.４５μ滅菌ゲルマンフィルターを用いて濾過した。濾液をプロテアーゼ活性測定時まで−８０℃で凍結保存した。創傷流体中に存在するプロテアーゼ活性に対する４阻害剤の効果を測定した。これら阻害剤は、化合物５Ａ（ＧＭ６００１ともいう）［ＮＨＯＨＣＯＣＨ２ＣＨ(ｉ−Ｂｕ)ＣＯ−トリプトファン−ＮＨＭＥ］、ＧＮ１３３９［ＮＨＯＨＣＯＣＨ２ＣＨ(ｉ−Ｂｕ)ＣＯ−トリプトファン−ＮＨＣＨＭｅＰｈ］、ＧＭ１４８９［ＨＯＯＣＣＨ２ＣＨ(ｉ−Ｂｕ)ＣＯ−トリプトファン−ＮＨＣＨＭｅＰｈ］、およびＳ１０２９［ＮＨＯＨＣＯＣＨ２ＣＨ(ｉ−Ｂｕ)ＣＯ−チロシン−ＯＭｅＮＨＭｅ］であった。これらの阻害剤をある種の他の阻害剤と比較したが、それらはペプタイズ・インターナショナルから入手したＵＬ００１［ＨＳＣＨ２ＣＨ (ＣＨ２ＣＨ(ＣＨ３)２)ＣＯ−Ｐｈｅ−Ａｌａ−ＮＨ２］と、エラスチン・プロダクツから入手したＭＰ５０６であった。ＥＤＴＡ(エチレンジアミン四酢酸)およびＰＭＳＦ(フェニルメチルスルホニルフルオリド)も試験した。４種の阻害剤の保存溶液はすべて８００μｇ／ｍｌ濃度で調製した。阻害剤の溶解度の違いにより、異なる方法を用いた。化合物ＧＭ６００１は温プロピレングリコールに最終濃度が２.４％になるように溶解し、ついで０.０５％メチルセルロース含有１０ｍＭクエン酸、ｐＨ５.５に溶解した。化合物Ｓ１０２９を１％ＤＭＳＯに溶解し、ついで０.０５％メチルセルロース含有１０ｍＭクエン酸ｐＨ５.５に溶解した。化合物ＧＭ１４８９はプロピレングリコールに最終濃度が２.４％になるよう溶解し、ついで１ｍＭＣａＣｌ₂、５０ｍＭトリス−Ｃｌ、ｐＨ７.８に溶解した。化合物ＧＭ１３３９はプロピレングリコール(２.４％) 、メチルセルロース(０.０５％)および１０ｍＭクエン酸、ｐＨ８に溶解した。プロテアーゼ基質アゾコルはシグマ社(Ｓigma Ｃhemical Ｃorporation)から入手した。これはコラゲナーゼ／ゼラチナーゼ様メタロプロテイナーゼ酵素と一般的なプロテアーゼの基質である。クロストリジウム・ヒストリチカム(Ｃlostr idium histolyticum)コラゲナーゼ(酵素の粗形態)はワージントン・バイオケミカルズ社(Ｗorthington Ｂiochemicals)から入手した。ＴＲＩＳ緩衝液、ＤＭＳＯ、ＣａＣｌ₂等の一般化学薬品はシグマ社から入手した。簡単に説明すると、アゾコル基質の緩衝液(１ｍＭＣａＣｌ₂含有、５０ｍＭＴＲＩＳ、ｐＨ７.８、５μｇ／ｍｌ溶液)中の懸濁液９００μｌを１.５ｍｌのマイクロ遠心分離試験管に加え、ついで阻害剤(あるいは緩衝液)５０μｌと５０ μｌの慢性創傷流体(あるいはコラゲナーゼ標準)を反応管に加えた。反応管を３７℃で振盪器に入れ、毎分３０回の割合で試験管を振盪させた。２４時間インキュベーション後、反応試験管を１０,０００×gで遠心分離し、上清液の５２０ｎｍでの吸光度をミルトン−ロイ分光光度計で測定した。アゾコル基質の蛋白分解により、不溶性のアゾコール基質から可溶性の着色したフラグメントが生じる。創傷流体検体を単独あるいは阻害剤と共にインキュベートした。対照として、アッセイ緩衝液とアゾコル基質とを共にインキュベートし、基質の自然退化を測定した。アゾコル基質の消化の標準曲線をアゾコルと粗細菌由来コラゲナーゼとを共にインキュベートして得た。プロテアーゼレベルは慢性創傷流体１ｍｌあたりのコラゲナーゼ当量の正味のμｇで表した。図中、ある種の創傷流体は個人の名前で呼ぶ。図２にその結果を示す。手術後１〜７日後に集めた***切除手術の流体検体は、創傷流体１ｍｌあたり平均０.７５±０.０６μｇ当量のコラゲナーゼ活性であり、低いプロテアーゼ活性を示した。これに比較して、図３から、開放性創傷から集めた創傷流体は創傷流体１ｍｌあたり平均１９９±５９μｇ当量のプロテアーゼ活性を示し、慢性創傷から集めた流体は、平均１２５±９５μｇ／ｍｌのプロテアーゼ活性を示した。慢性あるいは開放性創傷からの１３流体検体中唯−Ｌ .スミスのみが測定可能なレベルのアゾコル加水分解活性を示さなかった。開放性および慢性創傷からの残り１２検体ではすべて、***切除手術創傷流体中で測定したレベルより高いレベルを示し、２〜５８５μｇ／ｍｌの間であった。このように、慢性および開放性創傷から集めた流体は***切除手術排膿液から集めた流体に比べアゾコル分解プロテアーゼ活性が非常に高いことが明白である。このことより、開放性あるいは慢性創傷のインビボ環境は、創傷の細胞外マトリックスタンパク質分解能を有するプロテアーゼを含有することが明らかである。種々の創傷流体中のプロテアーゼ活性レベルを確立することにより、３種のプロテアーゼ阻害剤の効果を測定した。図４に示すように、化合物ＧＭ６００１は４０μｇ／ｍｌ(１００μＭ)あるいは４μｇ／ｍｌ(１０μＭ)の最終濃度で添加した時に、慢性創傷流体によるアゾコルのタンパク質分解を効果的に(初期のタンパク質分解活性の約９６％)阻害した。低濃度の化合物ＧＭ６００１［４μｇ／ｍｌ(１μＭ)および０.４μｇ／ｍｌ(０.１μＭ)］は、非処理プロテアーゼレベルの約９２％を阻害した。メタロプロテイナーゼの非特異的阻害剤であるＥＤＴＡの添加によっても、プロテアーゼ活性は効果的に減少した(約９６％阻害)。しかしながら、化合物ＧＭ６００１の有効濃度はμＭであるのに対して、ＥＤＴＡの有効濃度はｍＭ単位である。セリンプロテアーゼの非特異的阻害剤であるＰＭＳＦの添加は、５００μＭ濃度で添加したときにタンパク質分解活性が約６５％減少した。低濃度(５００μＭあるいは５０μＭ)のＰＭＳＦでは、実際にはプロテアーゼ活性レベルが僅かに上昇する。図中のＣＷはプロテアーゼ阻害剤で処理していない創傷流体を表す。結論としてに、化合物ＧＭ６００１およびＥＤＴＡの両者は慢性創傷流体のプロテアーゼ活性を効果的に阻害したが、化合物ＧＭ６００１はＥＤＴＡよりはるかに強力であった。ＰＭＳＦは高濃度以外では効果的な阻害剤ではなかった。このことは、慢性創傷流体中に存在するタンパク質分解活性の多くはメタロプロテイナーゼに因るものであることを示している。高濃度のＰＭＳＦで観察された阻害は、主としてＰＭＳＦの高濃度で報告されている非セリンプロテアーゼの非特異的阻害によるものと思われた(例えば、Ａrch.Ｂiochem.Ｂiiphys.１２４：７０参照)。開放性および慢性創傷に対するある種の阻害剤の効果を確認するためにさらに実験を行い、その結果を図５に示す。ＰＭＳＦが創傷流体のタンパク質分解活性を有意に減少しないのに対して、化合物ＧＭ６００１およびＥＤＴＡは非常に効果的な阻害剤であった。要約すると、化合物ＧＭ６００１とＥＤＴＡは一貫して高レベルのアゾコル分解プロテアーゼ活性をもつ開放性または慢性創傷流体中のタンパク質分解活性を９５％減少させた。ＰＭＳＦはタンパク質分解活性レベルを減少させなかった。このことは、開放性および慢性創傷は一貫してマトリックスメタロプロテイナーゼレベルを増大させ、それを化合物ＧＭ６００１は効果的に阻害し得るという一般的概念を支持する。一連のマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤の、損傷流体によるアゾコルタンパク質分解に対する効果を測定するためさらに実験を行った。この実験では、化合物ＧＭ６００１、化合物Ｓ１２０９、ＵＬ００１およびＥＤＴＡが損傷流体のタンパク質分解活性を非常に効果的に阻害した。例えば、これらの阻害剤はクリスティの損傷流体のタンパク質分解活性を９７％〜９４％減少させた(損傷流体１ｍｌあたり、４０４μｇコラゲナーゼから９〜１８μｇコラゲナーゼまで) 。しかしながら、ＭＰ５０６は実質的には他の阻害剤に比べ効果が小さかった。開放性および慢性損傷４検体中３検体でＭＰ５０６はプロテアーゼ活性レベルを減少させなかった。図６はこの結果を総括している。上記の結果から、化合物ＧＭ６００１および化合物Ｓ１２０９は多くの損傷流体中のアゾコル分解プロテアーゼの非常に効果的な阻害剤である。ＭＰ５０６は化合物ＧＭ６００１あるいは化合物Ｓ１２０９と比べいくらか効果が少ない。最後に、化合物ＧＭ６００１、化合物ＧＭ１３３９、化合物ＧＭ１４８９および化合物Ｓ１２０９の、慢性創傷流体中に存在するプロテアーゼ活性に対する効果を確認するために実験を行った。これらの実験のために、阻害剤の溶解度の違いにより異なる方法を用いた。化合物ＧＭ６００１は温プロピレングリコールに最終濃度が２.４％になるように溶解し、ついで０.０５％メチルセルロース含有１０ｍＭクエン酸、ｐＨ５.５に溶解した。化合物Ｓ１０２９は１％ＤＭＳＯに溶解し、ついで０.０５％メチルセルロース含有１０ｍＭクエン酸、ｐＨ５.５に溶解した。化合物ＧＭ１４８９はプロピレングリコールに最終濃度が２.４％になるよう溶解し、ついで１ｍＭＣａＣｌ₂、５０ｍトリス−Ｃｌ、ｐＨ７.８に溶解した。化合物ＧＭ１３３９はプロピレングリコール(２.４％)、メチルセルロース(０.０５％)および１０ｍＭクエン酸、ｐＨ８に溶解した。図７、実施例２３、に示すように、慢性創傷流体は創傷流体１ｍｌあたり平均２８４±５２μｇコラゲナーゼ当量の高レベルのプロテアーゼ活性を包含していた。８００μｇ／ｍｌの化合物ＧＭ６００１の添加により、創傷流体１ｍｌあたり４５±１μｇコラゲナーゼ当量まで８４％プロテアーゼ活性レベルが減少した。低濃度の化合物ＧＭ６００１の添加では、創傷流体１ｍｌあたり９０±６μｇコラゲナーゼ当量のプロテアーゼ活性で、わずかに高いレベルとなった。化合物ＧＭ１３３９および化合物Ｓ１２０９もまた効果的に慢性創傷流体中のプロテアーゼ活性を阻害し、最高濃度(８００μｇ／ｍｌ)では各々９４％および７０％阻害した(表１参照)。これに対し、化合物ＧＭ１４８９は最高濃度でさえ、プロテアーゼ活性をわずか２３％のみ阻害し、８μｇ／ｍｌおよび０.８μｇ／ｍｌ濃度では各々１３％と３０％の増加が見られた。以上を要するに、最高濃度で３阻害剤すべてがアゾコルのタンパク質分解を減少させた。しかしながら、化合物ＧＭ１４８９は化合物ＧＭ６００１、化合物ＧＭ１３３９あるいは化合物Ｓ１２０９に比べ有意に活性が弱く、低濃度の化合物ＧＭ１４８９は実際には慢性創傷流体のタンパク質分解活性レベルを上昇させた。Detailed Description of the Invention Synthetic matrix metalloprotease inhibitor and uses thereofTechnical field The present invention provides synthetic compounds that are inhibitors of matrix metalloproteinases, and And its medical application.Related technology It carries out the degradation of structural proteins and produces a number of structurally related metalloproteases. Enzyme is present. These include human skin fibroblast collagenase, human skin fiber Blast gelatinase, human neutrophil collagenase and gelatinase, and human Includes stromelysin. These are the angiotensin conversions Like enzymes and enkephalinases, they are zinc-containing metalloproteases. Collagenase and related enzymes are associated with rheumatoid arthritis (Mullins , D.E.) Et al.Biochim Biophys Acta(1985)695: 117-214) Tumor cell metastasis (ibid., Broadhurst, M.J., et al., EP publication) Wish 276436 (1987), Reich, R., et al.Cancer Res(198 8)48: 3307-3312); and of several diseases including various ulcer conditions. It is important in mediating overall symptoms. The ulcerative condition is a consequence of alkaline burns. Fruit, or Pseudomonas aeruginosa, red Acanthamoeba, herpes simplex and vaccinia viruses Resulting in a cornea. Undesirable matrix metalloprotease activity Other conditions characterized by: periodontal disease, epidermolysis bullosa and scleritis . Since collagenase is involved in many disease states, inhibitors of this enzyme should be identified. Attempts have been made to prepare it. Some such inhibitors have been reported by Sar (G. D. Searle) EP applications 126,974 (published in 1984) and 15 No. 9,396 (published in 1985). These inhibitors are aminonitride It is a secondary amine having an oxo substituent at the 2-position in both substituents attached to the element. More related to the compounds of the present invention are those of US Pat. The compounds disclosed in No. 361 and No. 4,743,587 are mentioned. this These compounds include tyrosine or derivatized tyrosine or some of them. Is a hydroxylamine dipeptide derivative having an analog of. Sulfhydryl residues and aromatic compounds such as phenylalanine and tryptophan Other compounds containing mino acid residues are disclosed in PCT application WO88 / 06890. Have been. Some of these compounds also have i-butyl side chains. PCT application WO 92/21360 (inventor Sahoo, S. et al.) Is a substituted N-carboxyalkylpeptidyl derivative, and osteoarthritis, chronic It is used to treat certain diseases including rheumatoid arthritis, certain cancers and corneal ulcerations It is described that these compounds are applied. EP Application 497,192 (inventor, Lobb, R. et al.) Peptide collagenase inhibitors with biological properties have been presented. U.S. Pat. No. 4,681,894 (inventor Murray, W. et al.) Hydroxamic acids and esters useful as anti-inflammatory agents have been presented. U.S. Pat. No. 4,943,587 (the inventor is Cetenko et al.) Described hydroxamic acid derivatives of acyl residues of selected non-steroidal anti-inflammatory agents Has been done. The medical use of these compounds has also been shown. U.S. Pat. No. 4,918,105 (inventor Cartwright, T.) Et al.) Present a compound having a collagenase inhibitory action. Arthritis, crush Certain medical applications have been described, including ulceration and tumor invasion. Inhibitors have also been disclosed for the related protease thermolysin. It These include Nishino, N. et al.Biochemistry(1979)18 : 4340-4347; Nishino et al.,Biochemistry(1978)17: 2846 Included are hydroxamic acid peptide derivatives as described by ~ 2850. Tryptophan is also known to be able to treat various conditions, and these diseases Collagenase is involved in some of these (eg, JP57 / 058626). U.S. Pat. No. 4,698,342; U.S. Pat. No. 4,291,048). Also bacteria Inhibitors of collagenase are also disclosed in US Pat. No. 4,558,034. The compounds described below are excellent inhibitors for matrix metalloproteases. It was found to have harmful activity. The compounds of the present invention destroy structural proteins According to a class of proteins referred to herein as "matrix metalloproteases" Of a drug that can be used to treat conditions and diseases characterized by unwanted effects of It expands the tree. The compounds of the present invention may also have disorders in which one member has undesired angiogenesis. It is also useful in treating Angiogenesis is the formation of new blood vessels, especially capillaries. Defined as proliferation. In-growth of such capillaries and accessory blood vessels increases tumor growth. Are essential for reproduction and therefore promote the spread and metastasis of malignant tissue. It is a physiological response. Therefore, inhibition of angiogenesis is one of the effective treatments for malignant tumors. Considered a member. Neovascularization is the leading cause of blindness is there. One form of this condition, proliferative diabetic retinopathy, results from diabetes . Blindness is also caused by angiogenic glaucoma. Inhibition of angiogenesis It is also useful in treating the condition. PCT application WO 91/11193 (issued January 25, 1991) contains blood The isolation of collagenase inhibitors from cartilage that suppress tube formation has been described. this The composition, referred to as a cartilage-derived inhibitor (CDI), is used in the rabbit corneal pocket assay. The inhibition of tumor-induced angiogenesis and the formation of capillaries in It has been reported to suppress. Antibodies that immunoreact with peptides and collagenase It is further that any other collagenase inhibitor also has the ability to suppress angiogenesis. Guessed. In addition, EP Application No. 424,193 (published April 24, 1991) contains blood The action of actinonin as a tube formation inhibitor has been described. A Cutinon is Streptomyces (StreptomycesProduced by a particular strain of It is an antibiotic that is modified and has a modified peptide structure. As disclosed in the above two applications, undesired levels of angiogenesis are associated with Blindness as a result of diabetic retinopathy as well as being associated with tumor growth It is also the cause of other ophthalmologic pathologies.Disclosure of the invention The methods and compositions of the present invention provide a matrix that is undesirable as a root cause. Predicts certain diseases with activation and / or expression of metalloprotease activity It is preferably used for prevention or treatment. Such diseases include skin diseases. Affected, keratoconus, restenosis, wound, ulcer (especially of the cornea or mouth), or Mention may be made of disease states that are favored by uncontrolled angiogenesis. Regarding the latter Thus, the present invention preferably facilitates the growth and spread of cancer in the patient's body. It relates to a method of treating cancer by suppressing the necessary angiogenesis. Some members of the class of matrix metalloprotease inhibitors have Known in the field. Others are described in US patent application Ser. No. 07 / 747,751 (19 No. 07 / 747,752 (filed on August 20, 1991) (August 20, 1991) No. 07 / 615,798 (filed on November 21, 1990) ( Cited and incorporated herein by reference). The requirement for synthetic matrix metalloprotease inhibitors known in the art About is described in EP Application No. 423,943 (published April 24, 1991) There is. In this application, synthetic matrix metalloprotea known in the art is used. The structure of a protease and claiming its use in the treatment of demyelinating diseases of the nervous system are doing. The present invention is directed to these compounds, as well as the compounds disclosed in the above U.S. patent applications. The use of the product for the above and other uses described below.Drawing FIG. 1 shows PdiBu (panel A) or PdiBu and compound 5A (panel). B) optical exposure of mouse skin 3 days after staining with hematoxylin and eosin. A micrograph is shown. FIG. 2 is a protease present in mastectomy fluid samples collected 1 to 7 days after surgery. The levels were 0.75 ± 0.06 μg equivalent collagenase / ml wound fluid on average. It shows that. Figure 3 shows closed (recovered on different days post-surgery), open, or recovered from chronic wounds 7 shows a comparison of protease levels present in mastectomy wound fluids. Closed wound Wounds exhibit marginal protease activity, whereas open wound fluids average 199 ± A fluid recovered from chronic wounds contained a protease level of 59 μg / ml Note that a mean protease level of 125 ± 95 μg / ml was included. Should be. FIG. 4 shows three protease inhibitors for the protease activity of chronic wound fluid. Shows the effect of. Compound 5A has a final concentration of 40 μg / ml (100 μM) or 4 Very proteolytic degradation of Azocoll at μg / ml (10 μM) Efficacy (about 96% of the initial proteolytic activity). Metalloproteiner EDTA, a non-specific inhibitor of proteases, also effectively reduces protease activity. (About 96%). PMSF, a non-specific inhibitor of serine proteases, The proteolytic activity was reduced by about 65% at a concentration of 0 μM. Figure 5: Inhibitors of protease activity present in open and chronic wounds. Shows the effects of compound 5A, PMSF and EDTA. Compound 5A and EDT A was a very effective inhibitor, while PMSF was proteolytically active in wound fluids. It did not significantly reduce sex. FIG. 6 shows compound 5A for proteolysis of azocol by wound fluid, The effect of S1209, UL001, MP506 and EDTA is shown. Figure 7: GM60, an inhibitor of protease activity present in chronic wound fluid The effect of 01, GM1339, GM1489 and S1209 is shown.Mode for Carrying Out the Invention The inhibitor compounds of the present invention inhibit the synthesis of mammalian matrix metalloproteases. It is an agent. As a matrix metalloprotease, human skin fibroblast Genase, human dermal fibroblast gelatinase, human neutrophil collagenase and Includes, but is not limited to, Latinase and human stromelysin is not. These are similar to angiotensin converting enzyme and enkephalinase It is a zinc-containing metalloprotease enzyme. As used herein, "mammal matrix" Cousmetalloprotease] means collagen, gelatin under appropriate assay conditions. Or a zinc-containing enzyme of mammalian origin that can catalyze the degradation of proteoglycans To do. Suitable assay conditions are described, for example, in US Pat. No. 4,743,587 (Coast Cawston et al.'S procedure (Anal Biochem(1979)99: 340-345) The use of synthetic substrates is described in Weingarten (Weigarten). ngarten, H.) et al.Biochem Biophys Res Comm(1984)139: 118 4 to 1187. Of course, analyze the degradation of these structural proteins Any standard method for working can be used. Matri referred to herein X-metalloprotease enzymes, such as human stromelysin and skin. It is a zinc-containing protease structurally similar to fibroblast collagenase. The ability of candidate compounds to inhibit matrix metalloprotease activity is Well, it can be tested in the above assay. Isolated matrix metalloprote The ase enzyme can be used to confirm the inhibitory activity of the compounds of the invention, Alternatively, a crude extract containing a range of enzymes that can destroy tissue can be used. It Specifically, the inhibitory activity assay can be performed as follows. Inhibitor Assays are based on Kortylewicz and Galardy ofJ Med Chem(1990)33: 263-273 , Crude or purified using synthetic thiol ester substrate at pH 6.5 Performed at a collagenase concentration of 1-2 nM against human skin fibroblast collagenase. I can. Testing of candidate inhibitors was performed in this assay in human skin fibroblasts. Crude Collagenase and Gelatinase from Cells, from Purified Human Neutrophils Performed on the ability to inhibit crude collagenase and gelatinase. as a result Is expressed as Ki, the calculated dissociation constant of the inhibitor complex with the enzyme Can be. Ki values for effective inhibitors are ≤ for purified enzyme in this assay. It is 500 nM. Excellent inhibitors for purified human skin collagenase ≤10n The Ki value of M is shown. The human stromelysin inhibition assay is based on Teaha n, J.) et al.Biochemistry(1989)20: 8497-8501 I will do it. Good results in these mammalian matrix metalloprotease inhibition assays The resulting synthetic compounds generally have at least one amide bond and are It is a small molecule with various side chain substituents. Such compounds known in the art Examples of articles are, as mentioned above, EP Application No. 423,943 (herein incorporated by reference). Citation). Other suitable inhibitors have the formula: Or (In the formula, each R¹Are independently H or alkyl (1-8C), R²Is alkyl (1-8 C) or adjacent R¹And R²Together with-(CH₂)_p-(In the formula, p is 3 to Forming 5); R³Is H or alkyl (1-4C); R^FourIs a fused or conjugated unsubstituted or substituted bicycloarylmethylene; n is 0, 1 or 2; m is 0 or 1; X is OR^FiveOr NHR^Five(In the formula, R^FiveIs H or a substituted or unsubstituted alkyl ( 1-12C), aryl (6-12C), arylalkyl (6-16C); Or X is an amino acid residue or an amide thereof; or X is a residue of a cyclic amine or a heterocyclic amine; R⁶Is H or lower alkyl (1-4C), R⁷Is H, lower alkyl (1-4C) Or an acyl group; Illustrated -CONR³-The amide bond is optionally -CH₂NR³-, -CH₂CHR³ -, -CH = CR³-, -COCHR³-, -CHOCHHR³-, -NR³CO-,- CF = CR³-Is replaced by an equal amount of modified isosteric bond It may be). Other compounds useful in the methods of the invention include compounds of the formula: Or (In the formula, each R¹Are independently H or alkyl (1-8C), R²Is alkyl (1-8 C) or adjacent R¹And R²Together with-(CH₂)_p-(In the formula, p is 3 to Forming 5); R³Is H or alkyl (1-4C); R^FourIs a fused or conjugated unsubstituted or substituted bicycloarylmethylene; n is 0, 1 or 2; m is 0 or 1; X is OR^FiveOr NHR^Five(In the formula, R^FiveIs H or a substituted or unsubstituted alkyl ( 1-12C), aryl (6-12C), arylalkyl (6-16C)); Or X is an amino acid residue or an amide thereof; or X is a residue of a cyclic amine or a heterocyclic amine; Y is R⁷ONR⁶CONR⁶-, R⁶ ₂NCONOR⁷-, And R⁶CONOR⁷-( Where R⁶Are independently H or lower alkyl (1-4C); R⁷Is H, lower alkyl A group selected from the group consisting of (1-4C) or an acyl group); Illustrated -CONR³-The amide bond is optionally -CH₂NR³-, -CH₂CHR³ -, -CH = CR³-, -COCHR³-, -CHOCHHR³-, -NR³CO- , -CF = CR³-May be substituted with an equivalent amount of modified bond such as) The compound is included. "Alkyl" means methyl, ethyl, isobutyl, cyclohexyl, t-butyl. It has its usual meaning as a straight chain, branched chain or cyclic saturated hydrocarbon residue such as The alkyl substituents of this invention are of the indicated number of carbons and may be 1 or 2 substituents. It may be substituted. Substituents generally do not interfere with the activity of the compound. And include hydroxyl, CBZO-, CBZNH-, amino and the like. Ally Ru is an aromatic ring such as phenyl, naphthyl, pyridyl, quinolyl, and indolyl. The system. Arylalkyl is attached at the indicated position via an alkyl residue. Aryl residue. In all cases, the aryl moiety is substituted Alternatively, it may not be replaced. "Acyl" has the formula: RCO- (wherein R is The above-mentioned alkyl or arylalkyl) means a substituent. Charcoal in acyl group The prime numbers are generally 1-15. However, acyl substituents are easy in vivo The nature of the group is relatively unimportant since it is hydroxylated to. "Cyclic amine "Means an amine in which the nitrogen forms part of the heterocycle, such as piperidine. , "Heterocyclic amine" refers to a heterocyclic amine containing another heteroatom such as morpholine. The terror ring. In the compounds of formulas (1) and (3), R¹And R²Each of the preferred embodiments of R¹Is H or Me, R²Is 3-8C alkyl, especially isobutyl, 2-methyl Rubutyl or isopropyl is included. Particularly preferred isob It's chill. In all equations (1) to (4), n = 1 or m = 1 Compounds are also preferred. In all formulas (1) to (4), R³Preferred embodiments of H and methyl , Especially H. R^FourIs a fused or conjugated vicinal linked to the molecule via a methylene group. It is a black aromatic system. "Fused or conjugated bicycloaromatic system" means aromatic Bicyclic systems having group characteristics, wherein one or more hete such as S, N or O (B) means that it may further contain an atom. Contains heteroatoms such as N In this case, the system is regarded as a part of the formulas (1) to (4), and It may contain an attached acyl protecting group (1-5C). Typical bicyclo condensation Aromatic systems include naphthyl, indolyl, quinolinyl, and isoquinolinyl. Is mentioned. Typical conjugated systems are biphenyl and 4-phenylpyrimidyl , 3-phenylpyridyl and the like. In either case, the condensation Any available position on the bicyclic or conjugated bicyclic ring system will result in a bond through the methylene. Can be used. A fused or conjugated aromatic system may have 1-2 alkyl ( 1-4C) residues and / or further substituted with hydroxy, either The ring nitrogen of may also be acylated. A preferred acylation is acetylation. R^Four1- (2-methylnaphthyl) methylene; 1-ki Norylmethylene; 1-naphthylmethylene; 2-naphthylmethylene; 1-isoquino Rylmethylene; 3-Isoquinolylmethylene; 3-Thionaphthenylmethylene; 3- Coumaronyl methylene; 3- (5-methylindolyl) methylene; 3- (5-hydr) Roxyindolyl) methylene; 3- (2-hydroxyindolyl) methylene; Bi Phenylmethylene; and 4-phenylpyrimidylmethylene; and their placement A substitute is mentioned. Many of these substituents are part of the amino acid residue Greenstein (Green). Stein and Winitz, “Amino Acid Chemistry (Chemistry of the Amino Acids) "(1961)Three: 2731-2741 (John Willie & Sands, NY). R^FourA particularly preferred embodiment of is 3-indolyl methylene or its N-acyl derivative. The conductor, ie, the "C-terminal" amino acid, is a tryptophan residue or its protected form. Is what is. R^FourThe preferred configuration of the carbon atom to which is bound is L-tri It corresponds to Putophan. A preferred embodiment of X is of the formula: NHR^Five(In the formula, R^FiveIs H, substituted or unsubstituted Of alkyl (1-12C) or arylalkyl (6-12C) of It is a thing. R^FiveThe above particularly preferred substituents are a hydroxyl group or a phenyl group. It is a toxycarbamyl (CBZNH-) residue. In addition, X is another amino acid residue , Especially at glycyl residues, which may also be amidated as described above In one aspect the compound is capable of elongation. In general, compounds that are hydroxamic acid esters have the formula: Or (In the formula, R is H or alkyl (1-6C)) The tellurium precursor or its active form is treated with hydroxylamine under conditions effective for conversion. By conversion these compounds into the corresponding hydroxamic acid esters Obtained by For the starting material,³-CHR^FourThe part that forms the COX residue is Easily obtained as an ester or amide in the case of tophan and its analogues It As mentioned above, many similar fused bicycloaromatic amino acids are greens. Described by Tyne and Winitz (supra). R^FourIs 1- (2-me 1-naphthyl methylene; 1-naphthyl methylene; Isoquinolyl methylene; and corresponding to what is 3-isoquinolyl methylene The amino acid is the acetamide amide of the amino acid, as is understood in the art. Prepared from bicyclo aromatic methylene halides using ronate synthesis Can be. Methylene halide itself is prepared by converting the corresponding carboxylic acid into lithium aluminum hydride. By reducing the resulting alcohol with bromination of the resulting alcohol with thionyl bromide. Can be prepared. Generally, hydroxylamine reagents are used to convert hydroxylamine hydrochloride to methanol. By mixing with excess KOH in and filtering off the precipitated potassium chloride. Generate on the fly. The filtrate is then treated with the precursor-activated carboxylic acid of formula (5) or (6). Alternatively, stir with the ester at room temperature for several hours, then evaporate the mixture to dryness under reduced pressure. Harden. The residue obtained is acidified and then extracted with a suitable organic solvent such as ethyl acetate. Discharge, wash the extract with aqueous potassium bisulfate and salt, then dry magnesium sulfate. Dry with a solid desiccant such as um. The extract is then re-evaporated to dryness and crystallized. Let -NHOR⁷Substituted forms of hydroxamic acid esters containing Or H instead of hydroxylamine itself₂NOR⁷(In the formula, R⁷Is lower al Kill or acyl (1-4C)) may be used. Then, the obtained O-alky Or an acyl hydroxamic acid ester can be further alkylated to give a carbohydrate. Acid R⁷ONR⁶-Derivatives can be obtained. Similarly, HNR⁶Carbo OH HRON by reacting with acid⁶-Derivatives can be obtained. HNCH₃OH and H₂NOCH₃Is commercially available. To prepare the starting materials of formulas (5) and (6), the formula: Or expression: The monoesterified carboxylic acid represented by the formula: NHR³CHR^FourCOX (In the formula, X is other than OH) and the condensation reaction to form an amide bond. React under the same conditions. Such conditions generally include base and carbodiimid. Two components in a non-aqueous anhydrous polar aprotic solvent in the presence of a condensing agent such as Consisting of a mixture of. Therefore, the formation of an amide bond is linked to a carbodiimide such as Standards such as dicyclohexylcarbodiimide and N, N-carbonyldiimidazole It can be catalyzed in the presence of a semi-dehydrating agent. The product is then transformed into formula (5) or ( Recovered as a mixture of 6) diastereomers. This mixture is hydroxamic acid Preferably used for conversion to an ester, one of the diastereomers obtained One Crystallize directly from the product mixture. Alternatively, to hydroxamic acid ester The diastereomers were separated by flash chromatography before conversion. , Collect separately. This method separates the diastereomers to give the final product. It is not preferable compared to the method that is set aside. In the representation used in the examples, the "A" isomer migrates faster on TLC as well. Is defined as The "B" isomer is the one that moves more slowly. Condensation L-form tryptophan or other amino acid having a modified bicycloaromatic ring system Is used as a residue, R¹Is H, the “A” form is generally the final R in the droxamate product²A carbon bearing a substituent, which is the only other asymmetric center (With the proviso that it is present) has the corresponding configuration. But However, in Example 2 below in which D-tryptophan is included in the composition, “ The “B” isomer is the R in the compound of formula (1)²"L" configuration at carbon with Will have a counterpart. R⁶And / or R⁷Is alkyl in Example 1 Corresponding O- or N-alkyl as done for droxylamine Hydroxylamine methyl ester4AReact with. Alternatively, methyl Steal4ATo the corresponding carboxylic acid, oxalyl chloride or other condensation Activate with the agent. The alkylhydroxylamine is then reacted with the activated carboxylic acid. To give an O- or N-substituted hydroxamic acid. O- and N-methylhydroxide Roxylamine can be purchased from Aldrich Chemical Company It The synthesis of other N-alkylhydroxylamines involves the reaction of aliphatic aldehydes with their Conversion to a shim, followed by N-alcohol with a borane-pyridine complex in the presence of 6N HCl. It can be carried out by reducing it to kill hydroxylamine (Kawase (K awase, M.) and Kikugawa (Y.J.),Chem Soc. Perkin Trans (1979)1: 643). The synthesis of other O-alkyl hydroxylamines is "Derivatives of hydroxylamine (Roberts, J.S.)" Hydroxylamine ”(Chapter 6.4, edited by Barton, D.),Comprehensiv e Organic Chemistry (1979)Two187-188 (Pergamon Press, Oxford)). use Two common methods are from hydroxylamine sulfonic acid or chloroamine R of the leaving group of⁷Substitution with O-, and R of hydroxamic acid⁷O-al by -X Killing and subsequent hydrolysis: R⁷When is an acyl, the hydroxamic acid of the present invention is converted to an acid chloride, an anhydride or Can be acylated with other acylating agents to give compounds of this class. In some cases, derivatized maleic acid necessary for the synthesis of compounds of the invention and Succinic acid residues are commercially available. If not commercially available, these compounds are R¹Is H or alkyl (1-8C), the formula: R²COCOOR In the Wittig reaction, the 2-oxocarboxylic acid ester represented by Nylphosphoranylidene alkyl acetate or α-triphenyl-phosphoranylidene It can be easily prepared by reacting with an alkyl alkanoate. Acetic acid Methyl and methyl alkanoate are preferred, but any suitable ester is used be able to. The reaction is usually performed at room temperature in a non-aqueous non-polar solvent. Got The compound has the formula: ROOCCR¹= CR²COOR '(where R and R'are es Is a residue of an alkyl or arylalkyl alcohol that is tellurized) It If the compound of formula (6) is desired, this product is treated with a suitable tryptophan. Condensed with van or similar derivatives. When the compound represented by formula (5) is desirable Reduces this intermediate with hydrogen using a suitable catalyst. R¹Is H or alkyl , N is 1 and m is 0, R²Is an alkyl, the reaction formula is It is shown in Equation 1. R¹And R²Together (CH₂)_pAnd the formula: RO OCCHR¹CHR²The intermediate represented by COOH is converted to the corresponding 1,2-cycloalka Dicarboxylic acid, that is, 1,2-cyclopentanedicarboxylic acid anhydride; 1,2- Cyclohexanedicarboxylic acid anhydride or 1,2-cycloheptanedicarboxylic acid Preparing a compound of the invention in a similar manner to Scheme 1 except that it is prepared from the anhydride. Can be. -CONR³For compounds in which-is the equivalent modified binding form, these forms are It can be prepared by a method known in the art. In the following literature, this Have described the preparation of peptide analogs containing alternative binding residues: Spatra. tola, A.F.),Vega Data(March 1983), Vol. 1, 3rd printing, "Pepti" Peptide Backbone Modifications "(Overview); Spatra," Chemistry and biochemistry of amino acid peptides and proteins (Chemistry and Bioc hemistry of Amino Acids Peptides and Proteins) "(1983) Marstein Decker, New York, pp. 267 (Introduction); Maury. -(Morley, JS),Trends Pharm Sci(1980) pages 463-468 ( Overview); Hudson, D. et al.Int J Pept Prot Res(1979)14 177 to 185 (-CH₂NR³-, -CH₂CHR³-); Spatra et al.L ife Sci (1986)38: 1243-1249 (-CH₂-S); Han (Hann , MM),J Chem Soc Perkin Trans I(1982) 307-314 (- CH-CR³-, Cis and trans); Almquist, RG, et al. ,J Med Chem(1980)23: 1392-1398 (-COCHR³-); Jennings-White, C. et al.Tetrahedron Lett( 1982)23: 2533 (-COCHR³-); Szelke, M. et al. European Patent Application EP 45665 (1982) CA:97: 39405 (1 982) (-CH (OH) CHR³-); Holladay, MW, et al.,Te trahedron Lett (1983)24: 4401-4404 (-C (OH) CH₂−) ; And Fulbee (Hruby, V.J),Life Sci(1982)31: 189-1 99 (-CH₂-S-). Preferred compounds represented by formula (1) or (2) include the following. Is: HONHCOCH₂CH (n-hexyl) -CO-L-Trp-NHMe; HONHCOCH₂CH (n-pentyl) -CO-L-Trp-NHMe; HONHCOCH₂CH (i-pentyl) -CO-L-Trp-NHMe; HONHCOCH₂CH (ethyl) -CO-L-Trp-NHMe; HONHCOCH₂CH (ethyl) -CO-L-Trp-NHCH₂CH₃; HONHCOCH₂CH (ethyl) -CO-L-Trp-NHCH₂CH₂OH; HONHCOCH₂CH (ethyl) -CO-L-Trp-NH cyclohexyl; MeONHCOCH₂CH (iBu) -CO-L-Trp-NHEt; EtONMeCOCH₂CH (iBu) -CO-L-Trp-NHEt; MeONHCOCH₂CH (iBu) -CO-L-Ala (2-naphthyl) -N HEt; EtONMeCOCH₂CH (iBu) -CO-L-Ala (2-naphthyl)- NHEt; HONHCOCH₂CH (i-Bu) CO-L-Trp-NHMe; HONHCOCH₂CH (i-Bu) CO-L-N-MeTrp-NHMe; HONHCOCH₂CH (i-Bu) CO-L-Trp-NH (CH₂)₂OH; HONHCOCH₂CH (i-Bu) CO-L-Trp-NH (S) CHMeP h; HONHCOCH₂CH (i-Bu) CO-L-Trp-NH (CH₂)₆NH-C BZ; HONHCOCH₂CH (i-Bu) CO-L-Ala (2-naphthyl) NHM e; HONHCOCH₂CH (i-Bu) CO-L-Trp-NH (CH₂)_FourCH₃; HONHCOCH₂CH (i-Bu) CO-L-Trp-piperidine; HONHCOCH₂CH (i-Bu) CO-L-Trp-NH (CH₂)₁₁CH₃; HONHCOCH₂CH (i-Bu) CO-L-Trp-NH cyclohexyl; HONHCOCH₂CH (i-Bu) -L-Trp-OH; HONMeCOCH₂CH (i-Bu) CO-L-Trp-NHMe; HONEtCOCH₂CH (i-Bu) CO-L-Trp-NHMe; CH₃COONHCOCH₂CH (i-Bu) CO-L-Trp-NHMe; ΦCOONHCOCH₂CH (i-Bu) CO-L-Trp-NHMe; CH₃COONMeCOCH₂CH (i-Bu) CO-L-Trp-NHMe; And ΦOCOONEtCOCH₂CH (i-Bu) CO-L-Trp-NHMe. Reverse hydroxamic acid ester and hydroxy represented by formulas (3) and (4) Urea is biologically more stable than the corresponding hydroxamic acid ester itself. It This is due to Carter, GW, et al.J Pharmacol Exp Ther( 1991)256: 929-937; Jackson, WP, et al.,J M edChem (1988)31: 499-500; Young (PR) et al.,FA SEB J (1991)5: A1273; Hahn, RA, et al.J Pharm acol Exp Ther (1991)256: 94-102; Tranpoche sch, K.M.) et al.Agents Actions(1990)30: 443-450; Arge Argentieri, D.C. et al .; Kimball, E. et al.5th Int Conf Inflammation Research Assoc. , Whitehaven, Pennsylvania 23-27 September 1990, Abstract 100; and Juan (Hua ng, F.) et al.J Med Chem(1989)32: 1836 to 1842 It has been certified. Therefore, although the synthesis is somewhat complicated, these analogues It confers advantageous physiological properties in therapeutic applications of the compounds. The reverse hydroxamic acid esters and hydroxyureas of the present invention are described in further detail below. As detailed, standard methods of synthetic organic chemistry (Challis, BC, et al. , "Amides and Related Compounds", "Organic General Chemistry (Comprehensive Organic Chemistry), Barton, D. ) Et al. (1979)Two: 1036-1045, Pergamon Press, Oxhu Mode). For the starting material,³-CHR^FourThe part that forms the COX residue is In the case of tophan and its analogues it is easily available as an ester or amide. You can As mentioned above, many similar fused bicycloaromatic amino acids W. Leinstein and Winitz (supra). R^FourIs 1- (2-Methylnaphthyl) methylene; 1-quinolyl-methylene; 1-naphthylmethyi Len; 1-isoquinolyl methylene; and 3-isoquinolyl methylene The amino acid corresponding to the amino acid is, as is well understood in the art Bicycloaromatic methylene halide Can be prepared from The methylene halide itself is the hydrogen of the corresponding carboxylic acid. Reduction with lithium aluminum bromide and the resulting alcohol with thionyl bromide It can be prepared by bromination. Synthesis in which this residue is introduced into the compound of the present invention depending on the functional group represented by Y The stages of change. Y is R⁷ONR⁶CONR⁶-And n is 0, 1 or 2 For the preparation of these compounds, see “Fieser, LF” et al. Reagents for Organic Synthesis "(1967)1: 479 (Jo N Willie & Sons, New York), α, β or acylating each gamma amino acid with methyl chloroformate or ethyl chloroformate, The resulting amino acid is referred to as residue-NR³CHR^FourCondensed with a protected form of COX and then obtained The resulting carboethoxy “dipeptide” is treated with hydroxylamine or substituted hydroxy It is carried out by reacting with silamine. This reaction procedure is shown in Reaction Scheme 1A. There is. Alternatively, the above α, β or γ amino acid can be replaced by, for example, carbobenzoxy or Temporarily protected with t-butyloxycarbonyl, which was^FourContaining It can also be coupled with a protected amino acid residue at the ruboxy terminus. Just Then, the protecting group is appropriately removed by hydrogenolysis or acidolysis, and then the deprotected α Reacting β, γ or γ amino groups with activated carbonic acid such as carbonyldiimidazole It The product obtained is then treated with hydroxylamine or a substituted hydroxylamine. To give the desired product. The procedure of this reaction is summarized in reaction formula 2. (In the formula: Im-Co-Im, Im represents an imidazole residue). The preparation of suitable α, β or γ amino acids is described by Jones, JH. "Amino Acids", p. 834 (edited by Burton et al.) ("Introduction to Organic Chemistry" (Comprehensive Organic Chemistry) "(1979) Vol. 2, Pergamon -The general method described in (Press) is used. As such a method, for example , A homologue of the corresponding N-protected α-amino acid by Arnto-Iestert synthesis Α for the homologation and more commonly for nitrogen nucleophiles such as phthalimide , Β-unsaturated esters, addition to acids or nitriles. In the second class of hydroxyureas, Y has the formula: R⁶ ₂NCONOR⁷-Has However, n is 0, 1 or 2. These compounds have the formula: R⁷ONH (CHR¹)_n CHR²Prepared from the corresponding α, β or γ hydroxy amino acid designated COOH It Both R⁶Is H, the feeder and the "organic synthetic" Reagents for Organic Synthesis "(1968)1: 479 (Jo Willie & Sons, NY) Conversion of this intermediate to the desired hydroxyurea by reaction with silicon oxide To do. The reaction is protected or R⁷With a hydroxyl group substituted with . The resulting hydroxyurea is then of the formula: HNR³CHR^FourPart indicated by COX To give the desired product. Alternatively, first generate the amide , N-hydroxyl dipeptide is reacted with a reagent. Alternatively, Y is R⁶HNCO-NOR⁷(In the formula, R⁶Is alkyl) Is an alkyl group that is related to the above O-protected α, β or γ N-hydroxy amino acids. Rusocyanate R⁶React with NCO to give the desired product. Y is the formula: R⁶ ₂NCONOR⁷-(Wherein both R⁶Is alkyl) Is an α, β or γ N-hydroxy amino acid in the activated form of carbonic acid, such as carbonic acid. By reacting with ludiimidazole or bis-p-nitrophenyl carbonate, Ideamine R⁶ ₂NH (wherein both R⁶Is an alkyl). Then Deprotect if desired. The above conditions are those of Nishino, N. et al.Biochemistry(1979)18: Description of a similar preparation of tripeptides as described in 4340-4346. Can also be found in. The β-N-hydroxy amino acid used as an intermediate in the above synthesis is malonic acid. It can be prepared by ester synthesis, wherein diethyl malonate is added twice, One is R²-Br, then benzyl chloromethyl ether (eg R¹Is H If), alkylate. This product was obtained from Cochilwitz et al.Biochem istry (1984)23No .: 2083 to 2087, a compound of a homologous aldehyde Saponification, decarboxylation, hydrogenation and then oxidation of β-alde Get the hide. Then protected (or R⁷Is alkylated when is alkyl , Or R⁷(Acylated) is added, hydroxylamine can be added. With, the desired β-hydroxy amino acid is obtained. R¹Is an alkyl pair The corresponding compound was obtained by subjecting the second alkylation to benzyl-O-CHR.¹With Cl It can be done and prepared in a similar manner. The homologous ketone is Garradi (G alardy, RE)) et al.Biochemistry(1985)24: 7607-7612 It is listed. Finally, Y is the formula: R⁶CONOR⁷-, That is, a reverse hydroxamic acid ester Compounds acylate the corresponding α, β or γ N-hydroxydipeptides Can be prepared by Alternatively, the N-hydroxy amino acid It can be silylated and then condensed to form the amide bond of the compounds of the invention. . The acylation method is described, for example, in Nishino et al.Biochemistry(1979)18: 43 40-4346 (cited above). Alternatively, n is 1, R¹For compounds where H is H, the preparation of the compound is Prepared from triphenylphosphine and 1,1-dimethoxy-2-bromoethane Ylide 1,1-dimethoxy-2- (triphenylphosphoranylidene) It can be carried out by condensation with methyl-2-oxopentanoic acid. Incidentally , Hydrogenating the product to give 4,4-dimethoxy-2-isobutylbutanoic acid, which The residue R³NHCHR^FourCoupling with COX gives 4,4-dimethoxy-2-iso Butylbutanoyl-NR³CHR^FourGet COX. Aldehi when treated with an aqueous acid solution 2-isobutyl-4-oxobutanoyl-NR³CHR^FourCOX is obtained. The oxime is prepared by reaction with hydroxylamine and reduced to the corresponding N-substitution. Use hydroxylamine. Both oxygen and nitrogen of hydroxaminol are And then hydrolyzing the O-acyl group to produce N-acyl reverse hydroxamic acid ester. (Summers, J.B. et al.J Med Chem(1988)31: 1960-1964). -CONR³For compounds in which-is in the form of an equivalent modified bond, these forms The state can be prepared by a method known in the art. Preferred compounds represented by formulas (3) and (4) include the following. Can: EtONHCONMe-CH₂CH (iBu) -CO-L-Trp-NHEt; EtCONOH-CH₂CH (iBu) -CO-L-Trp-NHEt; n-PrCONOEt-CH₂CH (iBu) -CO-L-Trp-NHEt; EtNHCONOMe-CH₂CH (iBu) -CO-L-Trp-NHEt; MeNHCONOH-CH₂CH (iBu) -CO-L-Trp-NHEt; EtONHCONMe-CH₂CH (iBu) -CO-L-Ala (2-naphthyl) -NHEt; EtCONOH-CH₂CH (iBu) -CO-L-Ala (2-naphthyl) -NH Et; n-PrCONOEt-CH₂CH (iBu) -CO-L-Ala (2-naphthyl) -NHEt; EtNHCONOMe-CH₂CH (iBu) -CO-L-Ala (2-naphthyl) -NHEt; MeNHCONOH-CH₂CH (iBu) -CO-L-Ala (2-naphthyl)- NHEt; HONHCONHCH₂CH (iBu) -CO-L-TrpNHMe; HONHCONHCH₂CH₂CH (iBu) -CO-L-TrpNHMe; HONHCONHCH (iBu) CO-L-TrpNHMe; H₂NCON (OH) CH (iBu) CO-L-TrpNHMe; N (OH) CH₂CH (iBu) CO-L-TrpNHMe; H₂NCON (OH) CH₂CH₂CH (iBu) CO-L-TrpNHMe; CH₃CON (OH) CH (iBu) CO-L-TrpNHMe; CH₃CON (OH) CH₂CH (iBu) CO-L-TrpNHMe; and CH₃CON (OH) CH₂CH₂CH (iBu) CO-L-TrpNHMe.Administration and use As indicated in the background description above, an excess or unwanted matrix Numerous diseases known to be mediated by destructive metalloprotease activity . These diseases include tumor metastasis, rheumatoid arthritis, skin inflammation, especially cornea or Includes mouth ulceration, reaction to infection, etc. Treated with the inhibitors of the invention Wound, preferably chronic skin, as included in the definition of possible diseases Silk Wounds. However, the inhibitors of the present invention are useful, for example, in acne ulcers. Ulcers, any ulcerative skin condition including mouth ulcers, or slow healing of wounds It is also useful in other operating conditions. Therefore, the compounds of the present invention are It is useful in the treatment of conditions involving such undesirable activities. The compounds of the invention are especially useful for treating or preventing psoriasis. Psoriasis It is a common inflammatory skin disease of various etiologies, with prominent epidermal hyperplasia and mixed inflammatory lesions. It is characterized by wetting and vascular degeneration. Epidermal hyperplasia in psoriasis and other skin disorders The molecular mechanism of is not yet understood. However, various growth factors, And proto-oncogenes promote growth from the extracellular environment into epidermal keratinocytes. It is said to be related to the introduction of Gunnar. The manifestation of psoriasis and other hyperproliferative skin disorders Current treatments include various topical steroids, exfoliation of the skin, and systemic chemotherapy. And UV exposure. However, these available therapies are There are limits to tachyphylaxis. Matrix metalloprotease inhibitors of the invention, especially collagenase inhibition Other conditions responsive to the agent include restenosis after angioplasty. Ken The loose arterial wall consists of the adventitial layer of fibroblasts, the middle middle layer of smooth muscle cells and endothelial cells. It is constructed from the lumenal intimal layer. One of restenosis after balloon angioplasty The cause is the production of collagenase by smooth muscle cells that cause destruction of the intima and And emissions are proposed. Southgate (KM) et al. 1992) Bichem, J,288: 93-99. This, in turn, of smooth muscle cells It facilitates its migration to the intima, where smooth muscle cells continue to proliferate and develop features of restenosis. Form the characteristic fibrous plaques. Therefore, the matrix metallo of the present invention Protease inhibitors cause restenosis when given before or after angioplasty. Prevent or suppress. Other applications of the matrix metalloprotease inhibitors of the present invention include cancer, especially Treatment or prevention of metastatic cancer. Cancer cells extravasate into the blood, and Subsequent extravasation of blood into the target organ from the primary site to the distal second site Transition. Therefore, if the extravasation of cancer cells can be controlled, metastasis is predicted. It can be prevented or eliminated. The key process in extravasation is cancer Of extracellular matrix by enzymes secreted by vesicles, especially collagenase Because of its destruction, the collagenase inhibitors of the present invention are useful for treating or preventing cancer. It has applicability. As mentioned above, the collagenase inhibitors of the present invention include, for example, acne ulcers, Ulcerative skin, including mouth ulcers, or other conditions in which wound healing is slow Useful in conditions. As a similar condition treatable by the compounds of the invention Corneal or keratomalacia, corneal or scleral lysis, penetrating and connective tissue associated with Diseases are mentioned. The latter example is involved in corneal thinning and central ridge There is a keratoconus. Type IV collagenase is at least partially responsible for the disease Is considered to be. Compounds that are inhibitors of mammalian metalloprotease synthesis suppress angiogenesis Useful to do. Therefore, these compounds have undesired levels of vasodilation. A pharmaceutical composition for use in inhibiting angiogenesis in a condition characterized by vegetation Can be compounded. Remington's Pharmaceutical Sciences(Mac Publishing Campa Standards such as those listed in Knee, Easton, Pennsylvania, latest edition) Pharmaceutical formulations can be used. For indications for systemic treatment, the compound of the invention is preferably injected. this Such conditions include tumor growth and metastasis. Saline solution, Hank's solution (H ank's solution), Ringer's solution, etc. , The compounds of the invention can be formulated for injection. Injection can be intravenous, intramuscular, It may be intraperitoneal or subcutaneous. The dose level, of course, depends on the nature of the condition, the patient. Properties, particular aspects of the selected compound of the invention, and nature and administration of the formulation Depending on the route, on the order of 0.1 mg / kg patient to 100 mg / kg patient . In addition to administration by injection, the compounds of the invention also affect the penetration of these tissues. Affects such as bile salts, fusidic acid derivatives, cholic acid, etc. It can also be formulated into a composition for transdermal or transmucosal delivery by. The invention set The product may also be liposome-based delivery system, depending on the nature of the condition to be treated. It can be used as a stem and as a formulation for topical and oral administration. Oral administration is residue-CONR³-Is particularly present in compounds in the form of modified linkages in equal amounts. It is profitable. These compounds are resistant to the hydrolytic action of the digestive tract. Oral Formulations include syrups, tablets, capsules and the like, in which the compound also It can be administered in food or juice. The inhibitor of the present invention uses the targeting ligand to induce angiogenesis. It can be targeted to the specific site generated. For example, the compound of the present invention It is commonly understood in the preparation of immunotoxins to concentrate things in the tumor. Inhibitors to antibodies or fragments thereof that are immunoreactive with tumor markers Let Targeting ligands are also suitable for receptors present on tumors It may be a ligand. A target that specifically reacts with the marker of the target tissue of interest. Any targeting ligand can be used. The compounds of the present invention are targeted Methods for attaching binding ligands are known in the art and are Similar to the method described below for ringing. The obtained conjugate Is prepared and administered as described above. Topical administration is preferred for localized conditions. For example, triggered by diabetes Directly to the affected eye to treat retinopathy or other angiogenic glaucoma The formulation is used as an eye drop or aerosol for application. Because of this treatment, The light compound can be formulated as a gel or ointment, or collage It can also be incorporated into the gen or hydrophilic polymer shield. The substance also As a contact lens or reservoir or as a subconjunctival formulation It can also be inserted. In all of the above embodiments, of course, the compounds of the invention may be used alone or in a mixture. And the composition may further comprise another drug or excipient suitable for the indication. Agents can be included. Therefore, the conditions that would benefit from inhibition of angiogenesis are generally vascular Sarcoma, Kaposi's sarcoma, glioblastoma multiforme, hemangioblastoma, von Hippel-Lindau disease And periangiomas; eye conditions such as diabetic retinopathy and neovascular glaucoma; Immune system conditions such as rheumatoid arthritis and vascular lymphocyte hyperplasia with eosinophilia And such as cavernous hemangiomas (including Casabach-Merit syndrome) and psoriasis Skin conditions are mentioned. The following examples illustrate the invention but do not limit it. Absent. These examples illustrate the preparation of certain compounds of the invention and mammalian metallo It describes the activity of inhibiting proteases. In the following examples, the TLC solvent system is as follows: (A) ethyl acetate / Methanol (95: 5); (B) Ethyl acetate / methanol (25: 5); (C ) Ethyl acetate; (D) Ethyl acetate / methanol (30: 5); (E) Ethyl acetate / Hexane (1: 1); (F) chloroform / methanol / acetic acid (30: 6: 2) ); (G) Chloroform / methanol / acetic acid (85: 10: 1). Example 1 N- [D, L-2-isobutyl-3- (N'-hydroxycarbonylamide)- Production of propanoyl] -tryptophan methylamide Nato of 4-methyl-2-oxovaleric acid in 10 ml of anhydrous dimethylformamide 5 g (0.033 mol) of a strontium salt and 5.65 g (0.033 m) of benzyl bromide ol) was stirred at room temperature for 4 days. After evaporation of the solvent under reduced pressure, the residue Was diluted to 100 ml with hexane and washed with water (3 x 20 ml) and saturated sodium chloride. It was washed with um and dried over anhydrous magnesium sulfate. By evaporation of the solvent, 4-me Cyl-2-oxovaleric acid benzyl ester (1) 6.4 g (88% yield) is colorless Obtained as an oil. In 100 ml of dry methylene chloride (1) 6.4 g (0.029 mol) and A mixture of 9.7 g (0.029 mol) of methyl (phenylphenylphosphoranylidene) acetate was added. It was stirred for 12 hours at room temperature and evaporated to dryness. Extract the residue with hexane (3 x 50 ml) did. The hexane solution was washed with 10% sodium hydrogen carbonate (2 x 30 ml), water and saturated water. It was washed with sodium chloride and dried over anhydrous magnesium sulfate. For evaporation of solvent From 2-iso Butyl-3- (methoxycarbonyl) -benzyl propionate (Two) 8.01 g ( Yield 100%) was obtained as a mixture of E and Z isomers. In 50 ml of methanol (Two) 8.01 g (0.029 mol) and 10% para A mixture of 1 g of di-carbon was hydrogenated at room temperature under 4 atmospheres of hydrogen gas for 8 hours. . After removing the catalyst by filtration, the filtrate was evaporated to dryness under reduced pressure to give 2-isobutyl-3- ( Methoxycarbonyl) -propionic acid (Three) 4.7 g (86% yield) as a colorless oil Got as. In 10 ml of dry methylene chloride (Three) 0.85 g (4.5 mmol) and chloride Oxalyl (0.57 g, 4.5 mmol) was added to a mixture of anhydrous dimethylformamide. 0.1 ml was added. After stirring for 1 hour at room temperature, the solvent was evaporated under reduced pressure and the residue Was diluted with anhydrous dimethylformamide to 5 ml, and L-tryptophan methyl acetate was added. Mido hydrochloride 1.06 g (4.1 mmol) (Cortilevits and Garradi,J. Med. Chem . (1990)33: (263-273) was added, followed by triechi Luamine 1.3 ml (9.3 mmol) was added at -10 ° C. This at room temperature for 7 hours Stir and evaporate to dryness under reduced pressure at room temperature. Dilute the residue to 150 ml with ethyl acetate , Water (2 x 15 ml), 10% potassium hydrogen sulfate (5 x 20 ml), 10% carbonic acid Wash with sodium hydrogen (2 x 20 ml), saturated sodium chloride and dry magnesium sulfate. Dried with nesium and then evaporated to give N- [D, L-2-isobutyl-3- (meth Xycarbonyl) -propanoyl] -L-tryptophan methylamideFour1.6g (83% yield) is a diastereomer4Aand4BWas obtained as a mixture of Isomer4Aand4BFlash chromatography (silica gel, acetate Chill). Isomer4A: Mp = 134-137 ° C. R_f(C) = 0.37. Isomer4B: Mp = 156-158 [deg.] C. R_f(C) = 0.2. Alternatively,4Aand4BOf the hydroxamate directly as described below. Converted to in this case,5ABut5Aand5BIt was crystallized from a mixture of. 0.22 g (3.96 mmol) warm potassium hydroxide in 1 ml methanol The mixture was warmed to 0.184 g (2.65 mmol) of the hydroxylamine hydrochloride salt. Mixed Added to the mix. After cooling in ice under an argon atmosphere, potassium chloride was filtered off, and (4A ) 0.5 g (1.32 mmol) was added to the filtrate. Room the resulting mixture for 7 hours Stir at warm and evaporate to dryness under reduced pressure. The residue was suspended in 100 ml of ethyl acetate and 10 % Potassium hydrogensulfate 10ml, washed with saturated sodium chloride, anhydrous magnesium sulfate It was dried with um and evaporated to dryness under reduced pressure. The residue was crystallized from ethyl acetate, pure5 A 0.28 g (yield 56%) was obtained. Isomer4BTo4AThe corresponding hydroxamic acid as described for5B( Yield 72%). Isomer5A: Mp = 176-182 ° C. R_f(D) = 0.45. Isomer5B: Mp = 157-162 ° C. R_f(D) = 0.39. 4A/4BWhen using a mixture,5AIs crystallized directly from the residue as described above. Wear. In a manner similar to the above, 4-methyl-2-oxovaleric acid, 2-oxovaleric acid, 3 -Methyl-2-oxobutyric acid, 2-oxohexanoic acid, 5-methyl-2-oxobutyric acid By changing to xanoic acid or 2-decanoic acid, the corresponding formula (1) (where: R¹Is H and R²Are n-propyl, i-propyl, n-butyl and 2-me, respectively. Compounds represented by tylbutyl and n-octyl) are produced. In addition, above Hydrogenation of the intermediate obtained in the Wittig reaction according to the method of Example 1 described in The corresponding step (2) (where R¹Is H and R²Is above) The compound shown is obtained. For the synthesis of compounds containing an acylated form of an indolyl residue, a compound of formula (3) or ( The intermediate ester of 4) is de-esterified before conversion to the hydroxamate. Silize. For explanation,4ADeesterification with sodium hydroxide in ethanol And then acidified to give N- (L-2-isobutyl-3-carboxypropano Yl) -L-tryptophan methylamide, which is alkyl (1-4C) carboxyl Treated with boric acid anhydride to give N- (L-2-isobutyl-3-carboxypropanoic acid ) -L-((N-acyl) indolyl) -tryptophan methylamide. This Was treated with oxalyl chloride followed by hydroxylamine at low temperature And respond To obtain a hydroxamate. Example 2 N- [2-isobutyl-3- (N'-hydroxycarbonylamide)- Production of propanoyl] -D-tryptophan methylamide (7B) N- [2-isobutyl-3- (methoxy-carbonyl) -propanoyl] -D-to Two diastereoisomers of liptophan methylamide6A, BA mixture of In Example 14A, BWas prepared as described above. Crystallize the mixture from ethyl acetate Pure diastereomer, after recrystallization twice6B0.26 g (49%) Obtained: mp155-157 ° C, R_f(C) = 0.32.6BAs described in Example 1 By that method hydroxamic acid7BTo 50% yield (119 mg) : mp157-159 ° C, R_f(D) = 0.39. Example 3 N- [2-isobutyl-3- (N'-hydroxycarbonylamide)- Production of propanoyl] -N-methyl-L-tryptophan methylamide (9A) N-methyl-L-tryptophan methylamide was added to L-tryptophan in Example 1. Manufactured as described for van-methyl amide,FourAbout To beThreeReact with crude N- [D, L-2-isobutyl-3- (methoxycarb Bonyl) -propanoyl] -N-methyl-L-tryptophan methylamide8A, B Was obtained, which was crystallized from ethyl acetate,8A76 mg (19% yield) were obtained: mp171-174 ° C, R_f(C) = 0.40. By the method described in Example 1,8ATo9AWith a yield of 45% (34 mg) Changed: mp180-183 ° C, R_f(D) = 0.54. Example 4 N- [2-isobutyl-3- (N-hydroxycarbonylamide)- Production of propanoyl] -L-3- (2-naphthyl) -alanine methylamide (11A) N- [D, L-isobutyl-3- (methoxycarbonyl) -propanoyl] -L- 3- (2-naphthyl) -alanine10AIn the same manner as described in Example 1, L-3- (2-naphthyl) -alanine methylamide andThreeManufactured from. Acetate crude product Chromatography on 60 g of silica gel 1: 1 ethyl: hexane,10 A 12 mg (5% yield) were obtained: mp 151-158 ° C, R_f(C) = 0.69. 10AHydroxamate11AIn the same manner as described in Example 1, 30% Converted in yield (3 mg): mp 179-181 ° C., R_f(D) = 0.17. MS-F AB (m / z) 400 (M⁺+ H). Example 5 N- [2-isobutyl-3- (N'-hydroxycarbonylamido) -propanoyl ] -L-Tryptophan-2-hydroxyethylamide (13A) Production ThreeActivated with 1,1'-carbonyldiimidazole for 20 minutes in methylene chloride at room temperature Except that the hydrochloride of L-tryptophan methylamide is described in Example 1. In the same manner as above, to produce the hydrochloride salt of L-tryptophan 2-hydroxyethylamide. ThenThreeCombined with. The crude product is a diastereoisomer12A, B0.7 g (yield 6 7%): R_f(C)12A0.38, R_f(C)12B0.19. 12AWas crystallized from ethyl acetate in 35% yield (0.18 g): mp161. -163 ° C, R_f(C) = 0.38. 12ATo N- [2-isobutyl-3- (N'-hydroxycarbonylamido) -p- Lopanoyl] -L-tryptophan 2-hydroxyethylamide13ATo Converted as in Example 1 with a yield of 35% (62 mg): R_f(D) = 0.17, mp 162-163 ° C. MS-FAB (m / z) 419 (M⁺+ H). Example 6 N- [2-isobutyl-3- (N'-hydroxycarbonylamide)- Production of propanoyl] -L-tryptophan amylamide (15A) The hydrochloride salt of L-tryptophan amylamide was used in Example 1 as L-tryptophan. Prepared as described for methylamide, 20 min 1 in dichloromethane at room temperature. Activated with 1,1'-carbonyldiimidazoleThreeAnd reacted. N- [D, L-2 -Isobutyl-3- (methoxycarbonyl) -propanoyl] -L-tryptopha The two diastereomers of amylamide14A, B(Yield 90%) of the mixture,4A Was converted to the corresponding hydroxamic acid as described above. Ethyl acetate Due to the slow evaporation of the solution15A, B0.343 g (71%) was obtained: mp 160-163 ° C. MS-FAB (m / z) 445 (M⁺+ H). Example 7 N- [2-isobutyl-3- (N'-hydroxycarbonylamide)- Production of propanoyl] -L-tryptophan piperidine amide (17A, B) L-tryptophan piperidine amide to L-tryptophan methyl amide As in Example 1ThreeN- [D, L-2-isobutyl-3 -(Methoxycarbonyl) -propanoyl] -L-tryptophan piperidineami Do16A, B1.14 g (89% yield) were obtained as a foam: R_f(C) ＝ (16A) 0 .74, (16B) 0.67. 16A, BOf Example 14ASame as coarse17A, BThe yield is 88% (57 0 mg) converted: R_f(D) (17A) 0.41, (17B) 0.30. Rough17A, B Was chromatographed on 180 g of silica gel with 12% isopropanol in ethyl acetate. After applying Ruffy and crystallizing from ethyl acetate,17A, B140 mg (yield 2 5%) was obtained: mp 169-170 ° C. MS-FAB (m / z) 443 (M⁺+ H). Example 8 N- [2-isobutyl-3- (N'-hydroxycarbonylamide)- Production of propanoyl] -L-tryptophan decylamide (19A) The reaction product of L-tryptophandecylamide was used as L-tryptophan of Example 1. Prepared in a similar manner to that described for methyl amide. Example of this ester As described in 1.ThreeThe crude N- [D, L-isobutyl-3- (Methoxycarbonyl) -propanol] -L-tryptophandecylamide1 8A, B The isomer19AWhen19BWas obtained as a mixture of This mixture is silica gel Chromatograph on 150 g ethyl acetate: hexane (1: 2) to give two 0.62 g of a mixture of isomers was obtained: R_f(E)19A0.37, R_f(E)19B0.2 9. TLC and NMR by crystallization by slow evaporation from ethyl acetate. Analysis of about 10%18BMixed in18AObtained 0.38 g: mp133- 135 ° C.19A81% yield of the potassium salt of the alkaline reaction mixture (222 m g) in the same manner as described in Example 1 except that crystallization is performed.18ACorresponding hydro Converted to xamic acid.19APotassium salt (54mg) in 2ml boiling methanol Dissolved in, added a few drops of water, acidified the solution with 0.1N hydrochloric acid and diluted with water.19 A Obtained 50 mg (yield 100%): mp155-159 ° C., R_f(D) = 0.49. MS-FAB (m / z) 543 (M⁺+ H). Example 9 N- [2-isobutyl-3- (N'-hydroxycarbonylamido) -propanoyl ] -L-Tryptophan (S) -Methylbenzylamide (21A) With L-tryptophan (S) -methylbenzylamideThreeReaction of Example 1 is described in Example 1. And crystallize from ethyl acetate, then use N- [2-isobutyl-3- (meth Cycarbonyl) -propanoyl] -L-tryptophan (S) -methylbenzylami Do20AObtained 330 mg (51% yield): mp 160-161 ° C., R_f(C) = 0. 77. 20AIn a yield similar to that used in Example 1, yield 38% (76 mg). Droxamate21AConverted to: mp165-166 ° C., R_f(D) = 0.73. MS-FAB (m / z) 479 (M⁺+ H). Example 10 N- [L-2-isobutyl-3- (N'-hydroxycarbonylamide)- Propanoyl] -L-tryptophan (6-phenyl-methoxycarbonyl Production of aminohexyl-1) amide (27A) Preparation of 1-amino-6-phenylmethoxycarbonylaminohexane (23) For the preparation of 1,6-diaminohexane and benzal in 25 ml of methylene chloride An equimolar mixture of dehydrate (0.01 mol) and the presence of 1.5 g of anhydrous magnesium sulfate. The mixture was stirred at room temperature for 5 hours. After removing the desiccant by filtration, the filtrate is evaporated to dryness under reduced pressure. Solid crude 1-amino-6-phenylaminohexane222 g (100% yield) Obtained as a colored oil; NMR (CDCl₃) 1.1-1.9 (m, 10H, hexane C H₂-2, -3, -4, -5, NH₂); 2.6 (m, 2H, CH₂-1); 3.51 (m, 2H , F Xan CH₂-6); 7.1-7.8 (m, 5H, aromatic); 8.16 (s, 1H, imine C H). In 20 ml of methylene chloride222 g (0.01 mol) and triethyl Lumine to a mixture of 1.4 ml (0.01 mol). Then benzyl chloroformate 1. 78 g (0.01 mol) was added dropwise at -5 ° C. The resulting mixture is kept at 0 ° C. for 0.5 hours , Stir at room temperature for 2 hours, then dilute to 50 ml with methylene chloride and water (20 ml) Wash with 2% sodium bicarbonate (20 ml), water and saturated sodium chloride, It was dried over anhydrous magnesium sulfate. After evaporating the solvent under reduced pressure, the residue is taken up in ethanol. 10 ml of 2N hydrochloric acid was added. The resulting mixture is allowed to stand at room temperature for 6 hours. Stirred at, then evaporated to dryness under reduced pressure. Dilute the residue to 50 ml with water and Wash with ether (2 x 15 ml). The aqueous phase is evaporated under reduced pressure and the product23Small Purified in 42% yield by crystallization from an amount of water; mp 175-178 ° C. 23For the derivatization of dipeptide homologues (N- (L-2-isobutyl-3- Methoxycarbonyl) -propanoyl-L-tryptophan (25A)) Production: Salt 2-Isobutyl-3-methoxycarbal in 4 ml of 50% anhydrous DMF in methylene chloride Bonyl propionic acidThreeTo the mixture of 1.754 g (9.32 mmol), N, N'-cal Bonyldiimidazole (CDI) 1.66 g (10.2 mmol) was added at room temperature. Room After stirring at the temperature for 15 minutes, L-tryptophan benzyl ester hydrochloride 3.08 g (9.31 mmol) was added. The resulting mixture was stirred overnight at room temperature, then vinegar. Dilute to 60 ml with ethyl acetate, add 5% sodium hydrogen carbonate (2 x 15 ml), water ( 2 × 15 ml), washed with saturated sodium chloride solution, dried over magnesium sulfate It was By evaporation of the solvent under reduced pressure,25Is the benzyl ester of244.32 g (100% yield) was obtained as a colorless foam, which was further purified in the next step. Used without. In 15 ml of methanol244.32 g (9.31 mmol) and 10% para Hydrogen gas was bubbled through the mixture of 0.5 g of di-carbon for 2 hours, while Tanol was added to keep the dose of the reaction mixture constant. The catalyst is filtered off and fresh It was washed with methanol (15 ml) and the filtrate was evaporated to dryness under reduced pressure. Solvent under reduced pressure Of the acid by evaporation of the and drying the residue in vacuo.25A, B3.08 g (88% yield) Was obtained in the form of a colorless glassy solid as a mixture of two diastereomers. this Flash black Matography (silica gel; ethyl acetate; R_f(25A) = 0.24, R_f(25B) = 0.1) isomer25Aand25BSeparated. Compound25AAs shown below in N- [L-2-isobutyl-3-methoxycarb Bonylpropanoyl] -L-tryptophan (6-phenylmethoxycarbonyla Minohexyl) amide (26A). 2% dimethylform in methylene chloride In 1 ml of muamide25A0.55 g (1.47 mmol) and CDI 0.24 g ( 1.48 mmol) of the mixture was stirred for 0.5 hours at room temperature,230.42g (1.47m mol) was added. After stirring overnight at room temperature, the mixture is diluted with chloroform to 50 ml. Diluted with 2% potassium hydrogen sulfate (2 × 10 ml), water (10 ml), 5% hydrogen carbonate Wash with sodium (2 x 10 ml), water (2 x 10 ml) and saturated sodium chloride And dried over anhydrous magnesium sulfate. Crude by evaporation of the solvent under reduced pressure.26A0 0.8 g was obtained which was flash chromatographed (silica gel; ethyl acetate / hexane). Xane 25: 5): Yield 56%; R_f(E) = 0.57. Of Example 14AThe product26AIn the same manner, the title compound27A (Melting at 102-108 ° C., yield 46%) was obtained; R_f(D) = 0.63. Example 11 N- [L-2-isobutyl-3- (N'-hydroxycarbonylamide)- Production of propanoyl] -L-tryptophan cyclohexylamide (28A) Cyclohexylamine of Example 1023Used in place of Compound28A(Melting at 199-203 ° C., yield 49%) was obtained; R_f(D) = 0.5 1. Example 12 N- [cis-2- (N'-hydroxycarbonylamido) -cyclohexyl Carbonyl] -L-triprofan methyl amide (29A, B) Cis-1,2-cyclohexanedicarboxylic acid anhydride 2 in 15 ml of methanol The mixture of g (0.013 mol) was refluxed for 5 hours and then evaporated to dryness under reduced pressure to give cis-2. -2.41 g (yield 100%) of methoxycarbonylcyclohexanecarboxylic acid was obtained. It was Of Example 1ThreeIn the same manner, the title compound, (40-14 Melting at 4 ° C., yield 36%) was obtained; R_f(D) = 0.53, 0.47. Example 13 N- [trans-2- (N'-hydroxycarbonylamido) -cyclohexyl Carbonyl] -L-tryptophan methylamide) (30A, B) The (±) trans-1,2-cyclohexanedicarboxylic acid anhydride was prepared as in Example 12. Substituted with 1,2,2-cyclohexanedicarboxylic anhydride in the same manner Title compound30A, B(Melting at 167-174 ° C., yield 37%) was obtained; R_f(D) = 0.57. Example 14 N- [2-isobutyl-3- (N'-hydroxycarbonylamide)- Production of propanoyl] -L-tryptophan (31A) 31AOf Example 1025AFrom Example 15AIn the same way as 75% (128 mg) and isolated as a foam from ethyl acetate: R_f(F ) = 0.55, MS-FAB (m / z) (M⁺+ H). Recrystallized from ethyl acetate31 A A small sample of had a melting point of 116-120 ° C. Example 15 N- (D, L-2-isobutyl-3-carboxyisopropanoyl)- Production of L-tryptophan (6-aminohexyl-1) amide (32A) In 0.4 ml of 2N potassium hydroxide in methanol26A0.5g (8.24mm ol) was stirred overnight at room temperature and then evaporated to dryness under reduced pressure. 1 residue with water Diluted to 5 ml and acidified to pH = 2 with 1N hydrochloric acid.26AVinegar of crude free acid Extract with ethyl acetate (3 x 15 ml), dry the organic phase over anhydrous magnesium sulfate and steam. To dry up26A0.45 g (92% yield) was obtained as a colorless foam. In 15 ml of methanol26AA mixture of 0.395 g (6.6 mmol) of the free acids of Bubbling hydrogen gas through it for 2 hours at room temperature in the presence of 10% palladium-carbon. It was The catalyst was filtered off, washed with ethanol (2 x 20 ml) and the filtrate evaporated to dryness under reduced pressure. Then the title compound32A0.3 g (92% yield) was obtained as a colorless foam; R_f(G) = 0.08. Example 16 N- [N- (2-isobutyl-3-carboxypropanoyl) -L- Production of tryptophanyl] glycine 34A, B L-tryptophan-glycine methyl ester and acidThreeReaction with25AAbout The crude N- [N- (D, L-2-isobutyl-3-methoxy- Cycarbonylpropanoyl) -L-tryptophanyl] -glycine methyl ester33 With a yield of 87%33Aand33BObtained as a mixture of diastereomers of. Isomer33Aand33BFlash chromatography (silica gel; acetic acid Separated by ethyl). Isomer33Amp = 154-155 ° C .; R_f(C) = 0. 46. ester33A, BTo25AAs described for 2 equivalents of methanol Free acid by saponification with basic potassium hydroxide34A, BConverted to. Isomer34A Yield 92%; mp = 96-102 ° C .; R_f(G) = 0.31. Isomer34BYield 93%; mp = 99-105 ° C .; R_f(G) = 0.25. Example 17 N- [cis-2-carboxy-cyclohexylcarbonyl] -L- Production of tryptophan methylamide 35 Cis-1,2-cyclohexanedicarboxylic in 0.5 ml of dimethylformamide A mixture of 0.281 g (1.82 mmol) of acid anhydride and 0.47 g of L-Trp-NHMe. To the mixture was added 0.51 ml of triethylamine at room temperature. After stirring for 2 hours, get The resulting mixture was diluted to 10 ml with water and 25 ml ethyl acetate was added. Obtained The mixture was acidified with 10% potassium hydrogen sulfate to pH = 2 and the organic phase was washed with water (2 × 15 ml), washed with saturated sodium chloride, washed with anhydrous magnesium sulfate and steamed. It evaporates to dryness. Title compound35Was crystallized from an ethyl acetate-hexane mixture and purified. Made. Yield 48%; mp = 105-112 ° C; R_f(G) = 0.65, 0.61. Example 18 N- [trans-2-carboxy-cyclohexylcarbonyl] -L- Production of tryptophan methylamide 36 The cis-1,2-cyclohexanedicarboxylic acid anhydride of Example 17 was treated with (±) tran. When changed to s-1,2-cyclohexanedicarboxylic anhydride, the same procedure is used. Title compound36Was obtained in a yield of 56%: mp = 167-174 ° C .; R_f(G) = 0.67, 0.61. Example 19 N- [2-isobutyl-3- (N'-acetoxycarbonylamide)- Production of propanoyl] -L-tryptophan methylamide (37A) Dimethylformamide in 0.5 ml5A(Example 1) 97.5 mg (0.25 mm) ol), 25.5 mg (0.25 mmol) of acetic anhydride and 1,8-diazabicycle. B [5.4.0] -Undec-7-ene (DBU) 37 mg (0.25 mmol) at room temperature Added in. After standing overnight, the DMF was evaporated under very reduced pressure to remove the residue in an equal volume. Extract with ethyl acetate and 2% potassium hydrogen sulfate. Ethyl acetate phase is 2% sulfuric acid water Wash with potassium, water and brine, dry over magnesium sulphate and evaporate A solid was obtained. Dissolve the solid in warm ethyl acetate: hexane 1: 1 and mix it at room temperature. 71 mg (66% yield) of solid product upon standing37AWas obtained: mp = 184-18 6 ° C; R_f(G) = 0.68. Example 20 N- [isobutyl-3- (N'-benzoxycarbonylamide)- Production of propanoyl] -L-tryptophan methylamide (38A) To 30.5 mg (0.25 mmol) of benzoic acid in 1 ml of tetrahydrofuran, Lubonyldiimidazole 40.5 mg (0.25 mmol) was added. 10 minutes later, the fruit Compound of Example 15A97 mg (0.25 mmol) of 1 ml of dimethylformami It was added during the operation. After 10 minutes, the reaction mixture was evaporated to dryness under high vacuum and an equal volume of ethyl acetate was added. Dissolved in a mixture of water and water. The ethyl acetate phase was added to 5% sodium hydrogen carbonate, water Wash with 2% sodium hydrogensulfate, water and brine, dry over magnesium sulfate did. The title compound was obtained by evaporation of the ethyl acetate phase to a small volume.38A50 mg (41%) Obtained: mp = 187-187.5 ° C .; Fr (G) = 0.54. Example 21 The following compounds of the present invention are synthesized by applying the above method. HONHCOCH₂CH (n-hexyl) -CO-L-Trp-NHMe; HONHCOCH₂CH (n-pentyl) -CO-L-Trp-NHMe; HONHCOCH₂CH (i-pentyl) -CO-L-Trp-NHMe; HONHCOCH₂CH (ethyl) -CO-L-Trp-NHMe; HONHCOCH₂CH (ethyl) -CO-L-Trp-NHCH₂CH₃; HONHCOCH₂CH (ethyl) -CO-L-Trp-NHCH₂CH₂OH; HONHCOCH₂CH (ethyl) -CO-L-Trp-NH cyclohexyl; MeONHCOCH₂CH (iBu) -CO-L-Trp-NHEt; EtONMeCOCH₂CH (iBu) -CO-L-Trp-NHEt; MeONHCOCH₂CH (iBu) -CO-L-Ala (2-naphthyl) -NHET; EtONMeCOCH₂CH (iBu) -CO-L-Ala (2-naphthyl) -NHET; EtONHCONMe-CH₂CH (iBu) -CO-L-Trp-NHEt; EtCONOH-CH₂CH (iBu) -CO-L-Trp-NHEt; n-PrCONOEt-CH₂CH (iBu) -CO-L-Trp-NHEt; EtNHCONOMe-CH₂CH (iBu) -CO-L-Trp-NHEt; MeNHCONOH-CH₂CH (iBu) -CO-L-Trp-NHEt; EtONHCONMe-CH₂CH (iBu) -CO-L-Ala (2-naphthyl) -NHE t ； EtCONOH-CH₂CH (iBu) -CO-L-Ala (2-naphthyl) -NHET; n-PrCONOEt-CH₂CH (iBu) -CO-L-Ala (2-naphthyl) -NHE t ； EtNHCONOMe-CH₂CH (iBu) -CO-L-Ala (2-naphthyl) -NHE t ； MeNHCONOH-CH₂CH (iBu) -CO-L-Ala (2-naphthyl) -NHET ; HONHCONHCH₂CH (iBu) -CO-L-TrpNHMe; HONHCONHCH₂CH₂CH (iBu) -CO-L-TrpNHMe; HONHCONHCH (iBu) CO-L-TrpNHMe; H₂NCON (OH) CH (iBu) CO-L-TrpNHMe; N (OH) CH₂CH (iBu) CO-L-TrpNHMe; H₂NCON (OH) CH₂CH₂CH (iBu) CO-L-TrpNHMe; CH₃CON (OH) CH (iBu) CO-L-TrpNHMe; CH₃CON (OH) CH₂CH (iBu) CO-L-TrpNHMe; and CH₃CON (OH) CH₂CH₂CH (iBu) CO-L-TrpNHMe; The measurement of the inhibitory activity of some of the compounds produced was carried out as described above and is shown in Table 1. Gives the results shown in. Example 22 Angiogenesis suppression Walker 256 carcinosarcoma (rat malignant tumor) crude extract (30 mg / ml tamper Cylindric to Hydron (slow release polymer) with a diameter of 1.5 mm Combined with. The pellet was transplanted into the corneal stroma of anesthetized albino rats. It was Chronically implant the cannula into the inferior vena cava, through which the compound 5A 55% DMSO / water solution (10 mg / ml) continuously at 0.8 ml / 24 hours The injection was carried out for 6 days at a ratio of between. The DMSO solution alone was administered to the control group. 6 days later The objects were re-anesthetized and percutaneously perfused with India ink to make the corneal vessels visible. Then, the eyeball was extracted and fixed with 5% formalin. Only DMSO solution is administered In the control eyes, large vascular growth was observed in the pellet direction from the corneal limbus. Be perceived. Animals treated with Compound 5A have significantly shorter blood vessels than controls , And / or significantly finer and less filled with ink. Example 23 Psoriasis treatment The effect of compound 5A on psoriasis was confirmed by phorbol ester-induced epidermal hyperplasia mouse mice. Considered by Dell. Widely accepted as a model for screening antiproliferative agents 12-O-Tetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA) Hyperplastic Model Selected. A single topical administration of TPA resulted in a prominent table as observed in psoriasis. Skin hyperplasia and a strong inflammatory response occur in mice. Argyris, TS ( 1980), Am. J. Pathol. 98: 639-648. In this model system, epidermal hyperplasia was histologically evident 3-5 days after TPA treatment. Can be seen. In addition to TPA, other more stable phorbol esters can be used as phorbols. Similar results occur with the inclusion of ru-12,13 dibutyroyl (PdiBu). In order to examine the effect of the compound of the present invention, the following experiment was carried out in the above-described epidermal hyperplasia animal model I went. Hairless phorbol ester, PdiBu (20 nmol) in 20 μl of acetone Both ears of mouse (Hr / Hr) (about 1 cm each)²) Was applied. Then test compound (total 20 μl) was applied to the right ear immediately (15 to 30 minutes) after application of PdiBu. Left ear of each animal The same amount of vehicle (20 μl) was applied to each. Test compound (and vehicle) with Pdi Recoating was carried out 6 hours and 18 hours after the Bu coating. Accurate time intervals for processing time It was shifted appropriately so that it would come back. 30 hours after PdiBu application, animals are anesthetized and ear Was measured using a micro caliper. Then punch biopsy (6 mm) was measured. Histological examination is performed at the 30th hour and performed on the selected specimen It was Test compound is compound GM6001 (10 mg / ml ethanol solution), negative control , Acetohydroxamic acid (AHA; 2 mg / ml ethanol solution) and positive control And fluocinonide (Lidex^R) (0.05% alcohol vehicle (35%) solution, di Isopropyl adipate, citric acid and propylene glycol) were used. The left ear of each animal served as a vehicle-treated control (PdiBu + ethanol). That is, The controls for this experimental system were 1) untreated control, 2) PdiBu and vehicle only ( (Including each test mouse), 3) PdiBu and AHA, 4) PdiBu as a positive control. And Lidex^RIs included. The results are shown in Table 2. In summary, the compound GM6001 has a strong anti-inflammatory effect on this standard insulin for psoriasis. Shown in the Vivo model. The strength of anti-inflammatory effect is Lidex which is a positive control^RObserved in It was comparable to that. PdiBu-induced reduction in ear weight increases ear thickness With similar suppression of. Furthermore, the reduction of inflammation and epidermal hyperplasia was histologically analyzed. It was more obvious. Acetohydroxamic acid (AHA) inhibits MMP Was used as a negative control. AHA is P for ear thickness or weight DiBu-induced effect was unchanged. Example 24 Treatment of chronic dermal wounds The presence of matrix metalloproteinase activity in certain wounds, and Experiments were performed to show the inhibition of the protease activity by the inhibitors of the invention. Called closed spontaneous healing, open delayed healing wounds and chronic open wounds 3 Fluid was collected from a type of human wound. In the first category, after mastectomy surgery Fluid was collected from the female chest wall. Left open for legitimate surgical reasons Fluid from uninfected wounds was considered an open delayed healing wound. Put the occlusive bandage on the wound The fluid was collected 2-6 hours after sealing. Finally, from chronic open wounds to wounds The fluid was collected by covering the with a occlusive dressing. Not clinically infected and released Wounds that had not healed for more than 4 weeks were considered chronic. The matrix metalloproteinase activity of various wound fluids was determined by ra) et al.Analytic Biochemistry(1984),136: 446 basically described in It was measured using the Azocoll assay. Centrifuge the fluid and filter the supernatant with a 0.45μ sterile German filter. did. The filtrate was frozen and stored at -80 ° C until the time of measuring the protease activity. The effect of 4 inhibitors on the protease activity present in wound fluid was measured. These inhibitors are compound 5A (also called GM6001) [NHOHCOCH2C H (i-Bu) CO-tryptophan-NHME], GN1339 [NHOHCO CH2CH (i-Bu) CO-tryptophan-NHCHMePh], GM148 9 [HOOCCH2CH (i-Bu) CO-tryptophan-NHCHMePh] , And S1029 [NHOHCOCH2CH (i-Bu) CO-tyrosine-OMe NHMe]. I compared these inhibitors with certain other inhibitors, UL001 [HSCH2CH obtained from Peptize International (CH2CH (CH3) 2) CO-Phe-Ala-NH2] and elastin pro It was MP506 obtained from Ducts. EDTA (ethylenediaminetetraacetic acid) And PMSF (phenylmethylsulfonyl fluoride) were also tested. Stock solutions of all four inhibitors were prepared at 800 μg / ml concentration. Inhibitor Different methods were used due to different solubilities. Compound GM6001 is warm propylene Dissolve in glycol to a final concentration of 2.4% and then add 0.05% methyl acetate. It was dissolved in 10 mM citric acid containing lulose, pH 5.5. Compound S1029 1 % DMSO, then 10 mM citric acid containing 0.05% methylcellulose Dissolved at pH 5.5. Compound GM1489 is a final concentration in propylene glycol Dissolved to 2.4%, then 1 mM CaCl₂, 50 mM Tris-Cl , PH 7.8. Compound GM1339 is propylene glycol (2.4%) , Methylcellulose (0.05%) and 10 mM citric acid, pH 8. The protease substrate Azocol is from Sigma Chemical Corporation. obtained. It is compatible with collagenase / gelatinase-like metalloproteinase enzymes. It is a substrate for general proteases. Clostridium histolyticum (Clostr idium histolyticum) collagenase (crude form of the enzyme) is Worthington Biochem Obtained from Calz (Worthington Biochemicals). TRIS buffer, DMS O, CaCl₂General chemicals such as were obtained from Sigma. Briefly, azocol substrate buffer (1 mM CaCl 2₂Contains, 50 mM TRIS, pH 7.8, 5 μg / ml solution) 900 μl of suspension in 1.5 ml Add to the microcentrifuge tube, then 50 μl of inhibitor (or buffer) μl of chronic wound fluid (or collagenase standard) was added to the reaction tube. 3 reaction tubes It was placed in a shaker at 7 ° C. and the test tube was shaken at a rate of 30 times per minute. 24 hours ink After incubation, centrifuge the reaction test tube at 10,000 xg to obtain 520 n of supernatant. Absorbance at m was measured with a Milton-Roy spectrophotometer. Proteolysis of azocol substrate To More soluble colored fragments are produced from insoluble azocol substrates. Creation Wound fluid specimens were incubated alone or with inhibitors. As a contrast, Say buffer and Azocol substrate were incubated together to measure the spontaneous degeneration of the substrate. It was The standard curve for digestion of the azocol substrate was determined by combining azocol and crude bacterial collagenase. It was obtained by incubating. Protease levels per ml of chronic wound fluid It was expressed as net μg of collagenase equivalent. In the figure, some wound fluids are the names of individuals. Call with. The results are shown in FIG. The mastectomy fluid samples collected 1-7 days after surgery , With an average collagenase activity of 0.75 ± 0.06 μg / ml of wound fluid. And showed low protease activity. In comparison with this, from FIG. The wound fluid collected from them was an average of 199 ± 59 μg equivalent of protea / ml of wound fluid. Fluid exhibiting enzyme activity and collected from chronic wounds had an average of 125 ± 95 μg / ml It showed a lotase activity. 13-fluid sample from chronic or open wound Only Smith did not show measurable levels of azocol hydrolysis activity. Open All the remaining 12 specimens from sexual and chronic wounds were measured in mastectomy wound fluid. It showed a level higher than that determined and was between 2 and 585 μg / ml. Thus, fluid collected from chronic and open wounds will be removed from mastectomy drainage. It is evident that the azocol-degrading protease activity is much higher than the collected fluid . From this, the in vivo environment of an open or chronic wound is Revealed to contain a protease with lyx protein degradability . By establishing the level of protease activity in different wound fluids, three species The effect of the Rotase inhibitor was measured. As shown in FIG. 4, the compound GM6001 is Add at a final concentration of 40 μg / ml (100 μM) or 4 μg / ml (10 μM) When used, the proteolysis of azocol by chronic wound fluid is (About 96% of protein degradation activity). Low concentration of compound GM6001 [4 μg / Ml (1 μM) and 0.4 μg / ml (0.1 μM)] Inhibited about 92% of the bells. ED, a non-specific inhibitor of metalloproteinases The addition of TA also effectively reduced the protease activity (about 96% inhibition). Only However, while the effective concentration of compound GM6001 is μM, Effective concentrations are in mM. PMS, a non-specific inhibitor of serine proteases When F was added at a concentration of 500 μM, the proteolytic activity was reduced by about 65%. A little bit At low concentrations (500 μM or 50 μM) PMSF, the A slight increase in ase activity level. CW in the figure was treated with a protease inhibitor Not representing wound fluid. In conclusion, both compound GM6001 and EDTA are associated with chronic wound fluid Compound GM6001 is more effective than EDTA, although it effectively inhibits Rotase activity It was very strong. PMSF was not an effective inhibitor except at high concentrations. This That is, most of the proteolytic activity present in chronic wound fluid is due to metalloprotease. It is shown to be due to inase. The interference observed with high concentrations of PMSF Harm is mainly due to the non-specific effects of non-serine proteases that have been reported at high PMSF concentrations. It was thought to be due to differential inhibition (eg Arch.Biochem.Biiphys.124: 7. 0). Further to confirm the effect of certain inhibitors on open and chronic wounds An experiment was conducted and the result is shown in FIG. PMSF proteolytic activity of wound fluid Compound GM6001 and EDTA are highly effective. It was a fruitful inhibitor. In summary, the compounds GM6001 and EDTA consistently show high levels of azocol content. Proteolytic activity in open or chronic wound fluids with proteolytic activity 95% reduction. PMSF did not reduce proteolytic activity levels. This indicates that open and chronic wounds consistently have matrix metalloproteinases. It was shown that compound GM6001 can effectively inhibit the increase Support the general concept. Azocol by a damaging fluid of a series of matrix metalloproteinase inhibitors Further experiments were performed to determine the effect on protein degradation. In this experiment , Compound GM6001, Compound S1209, UL001 and EDTA Very effectively inhibited the proteolytic activity of the body. For example, these inhibitors Ku Reduced the proteolytic activity of the damage fluid of Listie by 97% to 94% (damage flow (From 404 μg collagenase to 9-18 μg collagenase per 1 ml of body) . However,MP506Was substantially less effective than other inhibitors. 3 out of 4 samples with openness and chronic damageMP506Is the protease activity level Did not reduce. FIG. 6 summarizes the results. From the above results, compound GM6001 and compound S1209 showed a large amount of damage flow. It is a highly effective inhibitor of azocol-degrading proteases in the body.MP506Is Somewhat less effective than compound GM6001 or compound S1209. Finally, compound GM6001, compound GM1339, compound GM1489 and And Compound S1209 Effect on Protease Activity Present in Chronic Wound Fluid An experiment was conducted to confirm the result. For these experiments different methods were used due to the different solubilities of the inhibitors. Conversion Compound GM6001 is added to warm propylene glycol to a final concentration of 2.4% Dissolve and then add 10 mM citric acid containing 0.05% methylcellulose, pH 5.5 Dissolved. Compound S1029 was dissolved in 1% DMSO and then 0.05% methyl It was dissolved in 10 mM cellulose-containing citric acid, pH 5.5. Compound GM1489 Is dissolved in propylene glycol to a final concentration of 2.4%, then 1 mM CaCl₂, 50m Tris-Cl, pH 7.8. Compound GM1339 is Propylene glycol (2.4%), methylcellulose (0.05%) and 10 mM Dissolved in citric acid, pH 8. As shown in FIG. 7, Example 23, the chronic wound fluid is an average per 1 ml of wound fluid. 284 ± 52 μg Collagenase Equivalent to High Level of Protease Activity It was 1 ml of wound fluid was added by the addition of 800 μg / ml of compound GM6001. 84% protease activity level decreased to 45 ± 1 μg collagenase equivalent . Addition of low concentration of compound GM6001 yields 90 ± 6 μg / ml wound fluid Collagenase equivalent protease activity resulted in slightly higher levels. Compound GM1339 and compound S1209 also effectively protea in chronic wound fluids It inhibits the enzyme activity at 94% and 70% respectively at the highest concentration (800 μg / ml). harm (See Table 1). In contrast, the compound GM1489, even at the highest concentration, It inhibits the enzyme activity by only 23% and has a concentration of 8 μg / ml and 0.8 μg / ml. In each case, there was an increase of 13% and 30%, respectively. All in all, at the highest concentration all three inhibitors reduce azocol proteolysis I reduced it. However, compound GM1489 is compound GM6001, compound G Compounds with significantly lower activity and lower concentrations than M1339 or compound S1209 GM1489 actually increased proteolytic activity levels in chronic wound fluids .

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩＡ６１Ｋ 38/00 ＡＢＷ 9159−4ＣＣ０７Ｄ 209/20 // Ｃ０７Ｄ 209/20 9159−4Ｃ 401/04 ２０９ 401/04 ２０９ 9455−4ＣＡ６１Ｋ 37/02 ＡＢＷ (72)発明者シュルツ，グレゴリー・スコットアメリカ合衆国32605フロリダ、ゲインズビル、ノース・ウエスト・フォーティフィフス・テラス832番─────────────────────────────────────────────────── ─── Continuation of the front page (51) Int.Cl. ⁶ Identification code Internal reference number FI A61K 38/00 ABW 9159-4C C07D 209/20 // C07D 209/20 9159-4C 401/04 209 401/04 209 9455-4C A61K 37/02 ABW (72) Inventor Schulz, Gregory Scott United States 32605 Florida, Gainesville, Northwest Fortifth Terrace 832

Claims

【特許請求の範囲】１．動物における皮膚疾患、円錐角膜、再発狭窄症および創傷よりなる群から選ばれた疾患にかかった患者に、合成の哺乳動物マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤の有効量を有効期間投与することを特徴とする、動物における該疾患の予防または治療方法。２．該疾患が皮膚疾患である請求項１の方法。３．該疾患が円錐角膜である請求項１の方法。４．該疾患が再発狭窄症である請求項１の方法。５．該創傷が慢性皮膚創傷である請求項１の方法。６．該阻害剤が、式：または（式中、各Ｒ¹は独立してＨまたはアルキル（Ｃ_1〜8）、Ｒ²はアルキル（Ｃ₁ _〜8 ）、または近接するＲ¹とＲ²が一緒になって−(ＣＨ₂)_p−(ｐ＝３〜５)を形成、Ｒ³はＨまたはアルキル（Ｃ_1〜4）、Ｒ⁴は縮合または共役した非置換または置換のビシクロアリールメチレン、ｎは０、１または２、ｍは０または１、およびＸはＯＲ⁵またはＮＨＲ⁵（Ｒ⁵はＨまたは置換または非置換アルキル（Ｃ_1〜12 ）、アリール（Ｃ_6〜12）、アリールアルキル（Ｃ_6〜16））、またはＸはアミノ酸残基またはそのアミド、またはＸは環状アミンまたはヘテロ環状アミンの残基、Ｒ⁶はＨまたは低級アルキル（Ｃ_1〜4）およびＲ⁷はＨ、低級アルキル（Ｃ_1〜4 ）またはアシル基、該−ＣＯＮＲ³−アミド結合は、−ＣＨ₂ＮＲ³−、−ＣＨ₂ＣＨＲ³−、−ＣＨ＝ＣＲ³−、−ＣＯＣＨＲ³−、−ＣＨＯＨＣＨＲ³−、−ＮＲ³ＣＯ−、および− ＣＦ＝ＣＲ³−から選ばれる等量の改変結合で置換していてもよい）で示される物質である請求項１の方法。７．該阻害剤が、式：または（式中、各Ｒ¹は独立してＨまたはアルキル（Ｃ_1〜8）、Ｒ²はアルキル（Ｃ₁ _〜8 ）、または近接するＲ¹とＲ²が一緒になって−（ＣＨ₂）_p−（ｐ＝３〜５）を形成、Ｒ³はＨまたはアルキル（Ｃ_1〜4）、Ｒ⁴は縮合または共役した非置換または置換のビシクロアリールメチレン、ｎは０、１または２、ｍは０または１、およびＸはＯＲ⁵またはＮＨＲ⁵（Ｒ⁵はＨまたは置換または非置換アルキル（Ｃ_1〜12 ）、アリール（Ｃ_6〜12）、アリールアルキル（Ｃ_6〜16））、またはＸはアミノ酸残基またはそのアミド、またはＸは環状アミンまたはヘテロ環状アミンの残基、ＹはＲ⁷ＯＮＲ⁶ＣＯＮＲ⁶−、Ｒ⁶ ₂ＮＣＯＮＯＲ⁷−、およびＲ⁶ＣＯＮＯＲ⁷− （各Ｒ⁶は独立してＨまたは低級アルキル（Ｃ_1〜4）、Ｒ⁷はＨ、低級アルキル（Ｃ_1〜4）、またはアシル基）から選ばれる、該−ＣＯＮＲ³−アミド結合は、−ＣＨ₂ＮＲ³−、−ＣＨ₂ＣＨＲ³−、−ＣＨ＝ＣＲ³−、−ＣＯＣＨＲ³−、−ＣＨＯＨＣＨＲ³−、−ＮＲ³ＣＯ−、および− ＣＦ＝ＣＲ³−から選ばれる等量の改変結合で置換していてもよい）で示される物質である請求項１の方法。８．該阻害剤がＮＨＯＨＣＯＣＨ₂ＣＨ(ｉ−Ｂｕ)ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨＭｅである請求項７の方法。９．少なくとも１種の薬理学的に許容しうる賦形剤とともに少なくとも１種の合成の哺乳動物マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤を含有することを特徴とする、皮膚疾患、円錐角膜、再発狭窄症および創傷よりなる群から選ばれた疾患の治療または予防用医薬組成物。１０．該阻害剤が、式：または（式中、各Ｒ¹は独立してＨまたはアルキル（Ｃ_1〜8）、Ｒ²はアルキル（Ｃ₁ _〜8 ）、または近接するＲ¹とＲ²が一緒になって−(ＣＨ₂)_p−(ｐ＝３〜５)を形成、Ｒ³はＨまたはアルキル（Ｃ_1〜4）、Ｒ⁴は縮合または共役した非置換または置換のビシクロアリールメチレン、ｎは０、１または２、ｍは０または１、およびＸはＯＲ⁵またはＮＨＲ⁵（Ｒ⁵はＨまたは置換または非置換アルキル（Ｃ_1〜12 ）、アリール（Ｃ_6〜12）、−アリールアルキル（Ｃ_6〜16））またはＸはアミノ酸残基またはそのアミド、またはＸは環状アミンまたはヘテロ環状アミンの残基、Ｒ⁶はＨまたは低級アルキル（Ｃ_1〜4）およびＲ⁷はＨ、低級アルキル（Ｃ_1〜4 ）またはアシル基、該−ＣＯＮＲ³−アミド結合は、−ＣＨ₂ＮＲ³−、−ＣＨ₂ＣＨＲ³−、−ＣＨ＝ＣＲ³−、−ＣＯＣＨＲ³−、−ＣＨＯＨＣＨＲ³−、−ＮＲ³ＣＯ−、および− ＣＦ＝ＣＲ³−から選ばれる等量の改変結合で置換していてもよい）で示される物質である請求項９の医薬組成物。１１．該阻害剤が、式：または（式中、各Ｒ¹は独立してＨまたはアルキル（Ｃ_1〜8）、Ｒ²はアルキル（Ｃ₁ _〜8 ）、または近接するＲ¹とＲ²が一緒になって−(ＣＨ₂)_p−(ｐ＝３〜５)を形成、Ｒ³はＨまたはアルキル（Ｃ_1〜4）、Ｒ⁴は縮合または共役した非置換または置換のビシクロアリールメチレン、ｎは０、１または２、ｍは０または１、およびＸはＯＲ⁵またはＮＨＲ⁵（Ｒ⁵はＨまたは置換または非置換アルキル（Ｃ_1〜12 ）、アリール（Ｃ_6〜12）、アリールアルキル（Ｃ_6〜16））、またはＸはアミノ酸残基またはそのアミド、またはＸは環状アミンまたはヘテロ環状アミンの残基、ＹはＲ⁷ＯＮＲ⁶ＣＯＮＲ⁶−、Ｒ⁶ ₂ＮＣＯＮＯＲ⁷−、およびＲ⁶ＣＯＮＯＲ⁷− （各Ｒ⁶は独立してＨまたは低級アルキル（Ｃ_1〜4）、Ｒ⁷はＨ、低級アルキル（Ｃ_1〜4）、またはアシル基）から選ばれる、該−ＣＯＮＲ³−アミド結合は、−ＣＨ₂ＮＲ³−、−ＣＨ₂ＣＨＲ³−、−ＣＨ＝ＣＲ³−、−ＣＯＣＨＲ³−、−ＣＨＯＨＣＨＲ³−、−ＮＲ³ＣＯ−、および− ＣＦ＝ＣＲ³−から選ばれる等量の改変結合で置換していてもよい）で示される物質である請求項１０の医薬組成物。１２．該阻害剤がＮＨＯＨＣＯＣＨ₂ＣＨ(ｉ−Ｂｕ)ＣＯ−Ｌ−Ｔｒｐ−ＮＨＭｅである請求項１１の医薬組成物。[Claims] 1. From the group consisting of skin diseases, keratoconus, restenosis and wounds in animals Synthetic mammalian matrix metalloprotears for patients with selected diseases Of the disease in an animal characterized by administering an effective amount of a ze inhibitor for an effective period. Prevention or treatment method. 2. The method of claim 1, wherein the disease is a skin disease. 3. The method of claim 1, wherein the disease is keratoconus. 4. The method of claim 1, wherein the disease is restenosis. 5. The method of claim 1, wherein the wound is a chronic skin wound. 6. The inhibitor has the formula: Or (In the formula, each R¹Are independently H or alkyl (C_{1 ~ 8}), R²Is alkyl (C₁ _{~ 8} ), Or an adjacent R¹And R²Together-(CH₂)_pForm-(p = 3-5) Success, R³Is H or alkyl (C_{1 to 4}), R^FourIs a fused or conjugated unsubstituted or substituted bicycloarylmethylene, n is 0, 1 or 2, m is 0 or 1, and X is OR^FiveOr NHR^Five(R^FiveIs H or substituted or unsubstituted alkyl (C_{1 ~ 12} ), Aryl (C_{6 ~ 12}), Arylalkyl (C_{6 ~ 16})), Or X is an amino acid residue or its amide, or X is a residue of a cyclic amine or a heterocyclic amine, R⁶Is H or lower alkyl (C_{1 to 4}) And R⁷Is H, lower alkyl (C_{1 to 4} ) Or an acyl group, The -CONR³-The amide bond is -CH₂NR³-, -CH₂CHR³-, -CH = CR³-, -COCHR³-, -CHOCHHR³-, -NR³CO-, and- CF = CR³-May be substituted with an equivalent amount of modified bond selected from) The method according to claim 1, which is a substance represented by: 7. The inhibitor has the formula: Or (In the formula, each R¹Are independently H or alkyl (C_{1 ~ 8}), R²Is alkyl (C₁ _{~ 8} ), Or an adjacent R¹And R²Together- (CH₂)_p-(P = 3-5) Forming a R³Is H or alkyl (C_{1 to 4}), R^FourIs a fused or conjugated unsubstituted or substituted bicycloarylmethylene, n is 0, 1 or 2, m is 0 or 1, and X is OR^FiveOr NHR^Five(R^FiveIs H or substituted or unsubstituted alkyl (C_{1 ~ 12} ), Aryl (C_{6 ~ 12}), Arylalkyl (C_{6 ~ 16})), Or X is an amino acid residue or its amide, or X is a residue of a cyclic amine or a heterocyclic amine, Y is R⁷ONR⁶CONR⁶-, R⁶ ₂NCONOR⁷-, And R⁶CONOR⁷− (Each R⁶Are independently H or lower alkyl (C_{1 to 4}), R⁷Is H, lower alkyl ( C_{1 to 4}), Or an acyl group), The -CONR³-The amide bond is -CH₂NR³-, -CH₂CHR³-, -CH = CR³-, -COCHR³-, -CHOCHHR³-, -NR³CO-, and- CF = CR³-May be substituted with an equivalent amount of modified bond selected from) The method according to claim 1, which is a substance represented by: 8. The inhibitor is NHOHCOCH₂CH (i-Bu) CO-L-Trp-NHM The method of claim 7, which is e. 9. At least one together with at least one pharmacologically acceptable excipient Characterized by containing a synthetic mammalian matrix metalloprotease inhibitor A disease selected from the group consisting of skin diseases, keratoconus, restenosis and wounds A pharmaceutical composition for treating or preventing. 10. The inhibitor has the formula: Or (In the formula, each R¹Are independently H or alkyl (C_{1 ~ 8}), R²Is alkyl (C₁ _{~ 8} ), Or an adjacent R¹And R²Together-(CH₂)_pForm-(p = 3-5) Success, R³Is H or alkyl (C_{1 to 4}), R^FourIs a fused or conjugated unsubstituted or substituted bicycloarylmethylene, n is 0, 1 or 2, m is 0 or 1, and X is OR^FiveOr NHR^Five(R^FiveIs H or substituted or unsubstituted alkyl (C_{1 ~ 12} ), Aryl (C_{6 ~ 12}), -Arylalkyl (C_{6 ~ 16})) Or X is an amino acid residue or its amide, or X is a residue of a cyclic amine or a heterocyclic amine, R⁶Is H or lower alkyl (C_{1 to 4}) And R⁷Is H, lower alkyl (C_{1 to 4} )Also Is an acyl group, The -CONR³-The amide bond is -CH₂NR³-, -CH₂CHR³-, -CH = CR³-, -COCHR³-, -CHOCHHR³-, -NR³CO-, and- CF = CR³-May be substituted with an equivalent amount of modified bond selected from) The pharmaceutical composition according to claim 9, which is a substance represented by: 11. The inhibitor has the formula: Or (In the formula, each R¹Are independently H or alkyl (C_{1 ~ 8}), R²Is alkyl (C₁ _{~ 8} ), Or an adjacent R¹And R²Together-(CH₂)_pForm-(p = 3-5) Success, R³Is H or alkyl (C_{1 to 4}), R^FourIs a fused or conjugated unsubstituted or substituted bicycloarylmethylene, n is 0, 1 or 2, m is 0 or 1, and X is OR^FiveOr NHR^Five(R^FiveIs H or substituted or unsubstituted alkyl (C_{1 ~ 12} ), Aryl (C_{6 ~ 12}), Arylalkyl (C_{6 ~ 16})), Or X is an amino acid residue or its amide, or X is a residue of a cyclic amine or a heterocyclic amine, Y is R⁷ONR⁶CONR⁶-, R⁶ ₂NCONOR⁷-, And R⁶CONOR⁷− (Each R⁶Are independently H or lower alkyl (C_{1 to 4}), R⁷Is H, lower alkyl ( C_{1 to 4}), Or an acyl group), The -CONR³-The amide bond is -CH₂NR³-, -CH₂CHR³-, -CH = CR³-, -COCHR³-, -CHOCHHR³-, -NR³CO-, and- CF = CR³-May be substituted with an equivalent amount of modified bond selected from) The pharmaceutical composition according to claim 10, which is a substance represented by: 12. The inhibitor is NHOHCOCH₂CH (i-Bu) CO-L-Trp-NH The pharmaceutical composition according to claim 11, which is Me.