JPH08166384A - 全血試料分析用乾式分析素子 - Google Patents
全血試料分析用乾式分析素子Info
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- JPH08166384A JPH08166384A JP31050994A JP31050994A JPH08166384A JP H08166384 A JPH08166384 A JP H08166384A JP 31050994 A JP31050994 A JP 31050994A JP 31050994 A JP31050994 A JP 31050994A JP H08166384 A JPH08166384 A JP H08166384A
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Abstract
い精度で容易に測定できる全血試料分析用乾式分析素子
を提供する。 【構成】 本発明の乾式分析素子は、全血を展開する展
開層、少なくとも1層の試薬層及び水不透過性支持体が
この順に積層されてなる乾式分析素子において、前記展
開層に全血を溶血させる試薬成分が含まれていることを
特徴としている。
Description
乾式分析素子に関するものである。
れるようになり、この生化学検査に乾式分析素子が使わ
れるようになってきている。
ても、赤血球を除去した血清または血漿を試料として分
析が行なわれることが多かった。しかし、血液の他の成
分から赤血球を分離する操作には多くの労力と装置のコ
ストを伴うので、未希釈の全血で分析できることが望ま
しい。
は、従来は多層分析素子内に血球分離層又は血球分離素
子を設けて血球(赤血球及び白血球)及び全血の他の有
形成分を分離していた。この血球分離層又は血球分離素
子にはガラス繊維、メンブランフィルター、綿ウール繊
維製品等を使用しうることが特開昭57−53661号
公報、特開昭61−96466号公報等に開示されてい
る。また、2層以上を組合せる(積層する)ことも知ら
れており、特開昭62−138756号公報、特開平3
−16651号公報等には繊維質多孔性層と非繊維質多
孔性層を組み合わせることが開示されている。
きく、ヘマトクリット値が低い人では10数%、高い人で
は70%と、非常に広い範囲で変動する。このことは、
分析素子に供給する全血検体の量が常に一定であつて
も、その中に含まれる血漿の量は80数%〜30%近く
まで変動することを意味する。その結果、血漿を受容す
る層に供給される血漿の量も大きく変動し、分析結果に
誤差を生じるという問題がある。乾式分析素子には、通
常展開層が最も上側に積層されている。この展開層は点
着された水性検体に含まれている成分を実質的に偏在さ
せることなく平面的に拡げ、単位面積当りほぼ一定量の
割合でその下の層に供給する能力を有しているので上記
の血漿量の変動は特にヘマトクリット値の高い全血検体
の場合に問題である。
りなく全血検体を高い精度で容易に測定できる全血試料
分析用乾式分析素子を提供することにある。
した全血試料分析用乾式分析素子を提供するものであ
り、かかる分析素子は全血を展開する展開層、少なくと
も1層の試薬層及び水不透過性支持体がこの順に積層さ
れてなる乾式分析素子において、前記展開層に全血を溶
血させる試薬成分を含むことを特徴としている。
分を実質的に偏在させることなしに平面的に拡げ、単位
面積当りほぼ一定量の割合で親水性ポリマー層に供給す
る機能を有する層である。展開層としては、従来、乾式
分析素子(多層分析要素、乾式分析要素、乾式分析フィ
ルムなどとも称される)の展開層として使われている、
公知の非繊維質及び繊維質の多孔性材料を用いることが
できる。具体的には、特開昭55−164356号公
報、特開昭57−66359号公報等に記載の織物布地
展開層(例:ブロード、ポプリン等の平織布地等)、特
開昭60−222769号公報等に記載の編物布地展開
層(例:トリコット編布地、ダブルトリコット編布地、
ミラニーズ編布地等)、特開平1−172753号公報
に記載のアルカリエッチング液でエッチング処理した織
物布地又は編物布地からなる展開層、特開昭57−14
8250号公報に記載の有機ポリマー繊維パルプ含有抄
造紙からなる展開層;特公昭53−21677号公報、
米国特許3,992,158等に記載のメンブランフイ
ルタ(ブラッシュポリマー層)、ポリマーミクロビー
ズ、ガラスミクロビーズ、珪藻土が親水性ポリマーバイ
ンダーに保持されてなる連続微空隙含有多孔性層等の非
繊維等方的多孔性展開層、特開昭55−90859号公
報に記載のポリマーミクロビーズが水で膨潤しないポリ
マー接着剤で点接触状に接着されてなる連続微空隙含有
多孔性層(三次元格子状粒状構造物層)からなる非繊維
等方的多孔性展開層等を用いることができる。
く、特開昭61−4959、同62−138756、同
62−135757、同62−138758等に開示さ
れいてる様に、2層以上の多孔性層を部分的に配置され
た接着剤により接着された積層物を用いることができ
る。
的で、親水性のポリマー等の展開制御剤を含ませること
ができる。
の、あるいは干渉、妨害反応を低減、阻止する為の各種
試薬、もしくは試薬の1部を含ませることができる。
しくは50〜170μm、更に好ましくは80〜150
μmである。
布地又は抄造紙は特開昭57−66359に記載のグロ
ー放電処理またはコロナ放電処理に代表される物理的活
性化処理を布生地又は紙の少なくとも片面に施すか、ま
たは特開昭55−164356、特開昭57−6635
9等に記載の水洗脱脂処理、界面活性剤含浸又は親水性
ポリマー含浸等の親水化処理、またはこれらの処理工程
を適宜に組み合せて逐次実施することにより布地又は紙
を親水化し、下側(支持体に近い側)の層との接着力を
増大させることができる。
血させる、すなわち、赤血球、白血球等の細胞膜を有す
る成分(有形成分とも称される)の細胞膜を破りあるい
は細胞膜を溶解させて内容物を血漿に放出させる、試薬
成分を含有させるところに特徴がある。この溶血試薬と
しては、溶血能を有する界面活性剤と(免疫成分であ
る)溶血素と補体の組合せ(例:ウサギの抗ヒツジ血球
抗体とモルモットの補体の組合せ)の2種が代表例であ
る。用いうる界面活性剤にはノニオン性界面活性剤;カ
チオン性界面活性剤;アニオン性界面活性剤があり、好
ましい界面活性剤はノニオン性界面活性剤である。
g/m2のノニオン界面活性剤を展開層に含む乾式分析
素子が知られている(特開昭61−85200)。しか
しながら、この分析素子は総コレステロール定量用の乾
式分析素子血清試料におけるトリグリセリドの影響を排
除することを目的としており、全血試料に適用して溶血
させることは示されていない。
p−(1,1,3,3−テトラメチルブチル)フェノキシポ
リエトキシエタノール(オキシエチレン単位平均9〜1
0含有 Triton X−100:オキシエチレン単
位平均16含有 TritonX−165:オキシエチ
レン単位平均40含有 Triton X−405、い
ずれもChemical Abstract Regi
stry No.9002−93−1)のようなアルキ
ルフェノールポリエチレンオキシド縮合物:p−ノニル
フェノキシポリグリシドール(グリシドール単位平均1
0含有)のようなアルキルフェノールポリグリシドール
縮合物:ラウリルアルコールポリエチレンオキシド縮合
物(例えばBrij 35、Chemical Abst
ractRegistry No.9002−92−
0):セチルアルコールポリエチレンオキシド縮合物
(例えばBrij 58、Chemical Abst
ractRegistry No.9004−95−
9)のような高級脂肪族アルコールのポリエチレンオキ
シド縮合物:ステアリン酸エステルポリエチレングリコ
ール縮合物(例えばMyrj 52,Myrj 59、
いずれもChemicalAbstract Regi
stry No.9004−99−3)のようなポリエ
チレングリコールの高級脂肪酸エステル縮合物:ゾルビ
タンモノラウリン酸エステルのポリエチレングリコール
縮合物(例えばTween 20、Chemical A
bstract Registry No.9005−
64−5)のような高級脂肪酸ゾルビタンエステルのポ
リエチレングリコール縮合物がある。
に、ノニオン、アニオン、カチオンもしくは両性の界面
活性剤を含ませることができる。
性剤は全血試料の展開を一様にしかつ展開を促進する作
用をも有するものである。
0g/m2程度、好ましくは2〜20g/m2程度が適当
である。
制御用のポリマー溶液に溶解又は分散させて展開層の上
から塗布すればよい。ポリマー溶液の溶媒には水、有機
溶媒、水−有機溶媒混合溶媒等を使用することができ、
この有機溶媒にはアルコール(例:メタノール、エタノ
ール、イソプロピルアルコール)等を使用できる。
光学的に検出可能な変化を生じる後述の試薬組成物の少
なくとも一部が親水性ポリマーバインダー中に実質的に
一様に分散されている吸水性で水浸透性の層である。こ
の試薬層には指示薬層、発色層なども含まれる。
きる親水性ポリマーは、一般には水吸収時の膨潤率が3
0℃で約150%から約2000%、好ましくは約25
0%から約1500%の範囲の天然または合成親水性ポ
リマーである。そのような親水性ポリマーの例として
は、特開昭58−171864号公報および特開昭60
−108753号公報等に開示されているゼラチン
(例、酸処理ゼラチン、脱イオンゼラチン等)、ゼラチ
ン誘導体(例、フタル化ゼラチン、ヒドロキシアクリレ
ートグラフトゼラチン等)、アガロース、プルラン、プ
ルラン誘導体、ポリアクリルアミド、ポリビニルアルコ
ール、ポリビニルピロリドン等をあげることができる。
れた層とすることができる。架橋剤の例として、ゼラチ
ンに対する1,2−ビス(ビニルスルホニルアセトアミ
ド)エタン、ビス(ビニルスルホニルメチル)エーテル
等の公知のビニルスルホン系架橋剤、アルデヒド等、メ
タリルアルコールコポリマーに対するアルデヒド、2個
のグリシジル基含有エポキシ化合物等がある。
00μmの範囲であることが好ましく、より好ましくは
約3μmから約30μmの範囲である。また試薬層は実
質的に透明であることが好ましい。
に用いられている光透過性でかつ水不透過性の支持体を
用いることができる。光透過性・水不透過性支持体の例
としては、ポリエチレンテレフタレート、ビスフェノー
ルAのポリカルボネート、ポリスチレン、セルロースエ
ステル(例、セルロースジアセテート、セクローストリ
アセテート、セルロースアセテートプロピオネート等)
等のポリマーからなる厚さ約50μmから約1mm、好
ましくは約80μmから約300μmの範囲のフィルム
もしくはシート状の透明支持体を挙げることができる。
て、支持体の上に設けられる試薬層と支持体との接着を
強固なものにすることができる。また、下塗層の代り
に、支持体の表面を物理的あるいは化学的な活性化処理
を施して接着力の向上を図ってもよい。
設けることができる。光遮蔽層は、光吸収性または光反
射性(これらを合わせて光遮蔽性という。)を有する微
粒子が少量の被膜形成能を有する親水性ポリマーバイン
ダーに分散保持されている水透過性または水浸透性の層
である。光遮蔽層は試薬層にて発生した検出可能な変化
(色変化、発色等)を光透過性を有する支持体側から反
射測光する際に、後述する展開層に点着供給された水性
液体の色、特に試料が全血である場合のヘモグロビンの
赤色等、を遮蔽するとともに光反射層または背景層とし
ても機能する。
酸化チタン微粒子(ルチル型、アナターゼ型またはブル
カイト型の粒子径が約0.1μmから約1.2μmの微
結晶粒子等)、硫酸バリウム微粒子、アルミニウム微粒
子または微小フレーク等を挙げることができ、光吸収性
微粒子の例としては、カーボンブラック、ガスブラッ
ク、カーボンミクロビーズ等を挙げることができ、これ
らのうちでは二酸化チタン微粒子、硫酸バリウム微粒子
が好ましい。特に好ましいのは、アナターゼ型二酸化チ
タン微粒子である。
ダーの例としては、前述の試薬層の製造に用いられる親
水性ポリマーと同様の親水性ポリマーのほかに、弱親水
性の再生セルロース、セルロースアセテート等を挙げる
ことができ、これらのうちではゼラチン、ゼラチン誘導
体、ポリアクリルアミド等が好ましい。なお、ゼラチ
ン、ゼラチン誘導体は公知の硬化剤(架橋剤)を混合し
て用いることができる。
マーとの水性分散液を公知の方法により試薬層の上に塗
布し乾燥することにより設けることができる。また光遮
蔽層を設ける代りに、前述の展開層中に光遮蔽性微粒子
を含有させてもよい。
蔽層等の層を介して、前述の展開層を接着し積層するた
めに接着層を設けてもよい。
を含んで膨潤しているときに展開層を接着することがで
き、これにより各層を一体化できるような親水性ポリマ
ーからなることが好ましい。接着層の製造に用いること
ができる親水性ポリマーの例としては、試薬層の製造に
用いられる親水性ポリマーと同様な親水性ポリマーがあ
げられる。これらのうちではゼラチン、ゼラチン誘導
体、ポリアクリルアミド等が好ましい。接着層の乾燥膜
厚は一般に約0.5μmから約20μm、好ましくは約
1μmから約10μmの範囲である。
間の接着力を向上させるため所望の層上に設けてもよ
い。接着層は親水性ポリマーと、必要によって加えられ
る界面活性剤等を含む水溶液を公知の方法で、支持体や
試薬層等の上に塗布する方法などにより設けることがで
きる。
層の間に吸水層を設けることができる。吸水層は水を吸
収して膨潤する親水性ポリマーを主成分とする層で、吸
水層の界面に到達または浸透した水性液体試料の水を吸
収できる層であり、全血試料を用いる場合には水性液体
成分である血漿の試薬層への浸透を促進する作用を有す
る。吸水層に用いられる親水性ポリマーは前述の試薬層
に使用されるもののなかから選択することができる。吸
水層には一般的にはゼラチンまたはゼラチン誘導体、ポ
リアクリルアミド、ポリビニルアルコール、特に前述の
ゼラチン又は脱イオンゼラチンが好ましく、試薬層と同
じ前述のゼラチンが最も好ましい。吸水層の乾燥時の厚
さは約3μmから約100μm、好ましくは約5μmか
ら約30μmの範囲、被覆量では約3g/m2から約1
00g/m2、好ましくは約5g/m2から約30g/m
2の範囲である。吸水層には後述するpH緩衝剤、公知
の塩基性ポリマー等を含有させて使用時(分析操作実施
時)のpHを調節することができる。さらに吸水層には
公知の媒染剤、ポリマー媒染剤等を含有させることがで
きる。
モニア生成基質を分析する場合には第1の試薬層(指示
薬層)の上に液体遮断層を設ける。この液体遮断層は、
多層分析素子の製造時及び/又は分析操作時において、
塗布液、試料液等の液体及びこれらの液体に溶解含有さ
れている妨害成分(例えば、アルカリ性成分等)が実質
的に透過せずかつガス状アンモニアが透過できるような
貫通空気孔を有する微多孔性物質で構成されている。こ
の微多孔性物質は、液体、特に水による毛細管現象が実
質的に生じないような疎水性材料あるいは、毛細管現象
が実質的に生じない程度に疎水化処理(撥水性処理)さ
れた材料で作られているのが好ましい。
樹脂、シリコーンオイル、弗素樹脂、弗素オイルに代表
される、一般に疎水化処理剤又は撥水化処理剤として公
知の材料をそのまま、あるいは必要により溶剤(例え
ば、ヘキサン、シクロヘキサン、石油エーテル等)で疎
水化処理剤又は撥水化処理剤の含有量が約0.1〜約5
重量%の範囲内になるように希釈し、これを含浸、塗布
又はスプレー等の方法により、連続した空隙を有する微
多孔性材料の少なくとも一表面及びその近傍に適用する
ことにより実施することができる。
ィルター;繊維状材料が相互にからみあわされてなる
か、あるいは接着又は結合されてなる微多孔性材料(例
えば、紙、濾紙、フェルト、不織布等);及び織物生
地、編物生地又は細網状物からなる微多孔性材料を挙げ
ることができる。
ニトレート、再生セルロース、ポリアミド、ビスフェノ
ールAのポリカーボネート、ポリエチレン、ポリプロピ
レン、ポリテトラフルオロエチレン等のフッ素含有ポリ
マー等を用いて作られているメンブランフィルターある
いはこれらの材料を必要により撥水性処理したものが挙
げられる。本発明の一体型多層分析素子に用いる場合、
上記メンブランフィルターの厚さは、約30μm〜約3
00μmの範囲内、好ましくは約70μm〜約200μ
mの範囲内である。メンブランフィルターの気孔率(空
隙率)は、約25%〜約90%、好ましくは約60〜約
90%である。また、メンブランフィルターの平均孔径
は約0.01〜約20μm、好ましくは約0.1〜約1
0μmの範囲内である。これらメンブランフィルター
は、既に多くのメーカーから様々な種類のものが市販さ
れており、これらの市販品の中から必要に応じて選択し
て用いることができる。
実用的な強度をもって接着する。接着は、指示薬層表面
をウェット状態にして貼り付け乾燥すればよい。ここに
ウェット状態とは、バインダーを溶解している溶媒が残
っているか、あるいは乾燥した膜が可溶性溶媒で濡らさ
れてバインダーが膨潤状態、分散状態又は溶液状態にあ
ることを意味する。
反応してアンモニアを生成させる試薬を含む第2の試薬
層を設ける。
たアンモニアが下記の内因性アンモニア捕捉層へ拡散す
ることを実質的に防止する機能を有し、アンモニア捕捉
およびアンモニア生成反応のいずれも実質的に行わない
アンモニア拡散防止層を設けることが好ましい。アンモ
ニア拡散防止層はアンモニア捕捉およびアンモニア生成
反応が実質的に行わない層であれば、他の機能を有する
層で代用することもできる。他の機能を有する層の例と
しては、硬化親水性ポリマー層、光遮蔽層、接着層等が
ある。
ア生成物質定量用の場合にはアンモニア拡散防止層の上
に直接または前述した光遮蔽層または他の中間層を介し
て、水性液体試料中にすでに存在するアンモニア(内因
性アンモニア)に作用して内因性アンモニアを実質的に
前記反応層に到達しえない状態に変化させる試薬を含む
内因性アンモニア捕捉層(以下、単に内因性アンモニア
捕捉層と記す)を設けることが好ましい。内因性アンモ
ニア捕捉層は、アナライト(被検成分)であるクレアチ
ニンまたは尿素窒素等のアンモニア生成物質が反応層に
到達してアンモニアが生成する反応が生起するに先立っ
て、併存する内因性アンモニアを捕捉する機能を有する
層である。
モニアを基質として他の物質に変化させる触媒能を有す
る酵素を含む試薬組成物を用いるのが好ましい。内因性
アンモニア捕捉試薬の具体例としては、NADH(ニコ
チンアミド・アデニン・ジヌクレオチド還元型)、およ
び/またはNADPH(ニコチンアミド・アデニン・ジ
ヌクレオチド・ホスフェート還元型)、グルタミン酸デ
ヒドロゲナーゼ(EC1.4.1.3;以下GLDHと記
す)およびα−ケトグルタル酸(またはそのニナトリウ
ム塩:以下、α−KGと記す)を含む試薬組成物を挙げ
ることができる。また、アスパルターゼ(EC4.3.1.
1)とフマル酸またはフマル酸塩を含む試薬組成物を用
いてもよい。本発明の乾式分析素子においては、NAD
H、GLDHおよびα−KGを含む試薬組成物を内因性
アンモニア捕捉試薬として用いることが好ましい。ま
た、GLDHを含む試薬組成物またはアスパルターゼを
含む試薬組成物を用いる場合には、内因性アンモニア捕
捉層のpH値を通常10.0以下、好ましくは7.0〜
9.5の範囲内に維持できるように、適当な緩衝剤を用
いることが好ましい。
内因性アンモニア捕捉層を設けないことはいうまでもな
い。
特に限定されないが、血漿中の含有量もわかる点で血球
中の含有量と血漿中の含有量のあまり変わらないものが
好ましい。このような被検物質の例として、クレアチニ
ン、グルコース、尿素窒素、無機燐、重炭酸塩等があ
る。本発明の端緒はクレアニチン等の含有量が血球と血
漿であまり変わらないことを見出し、さらに本発明の分
析素子を用いて得られた全血の測定値と血漿検体の測定
値がほぼ一致するということを見出したことによる。
等に応じて試薬を含有させる。
呈色性アンモニア指示薬として、ロイコシアニン染料、
ニトロ置換ロイコ染料およびロイコフタレイン染料のよ
うなロイコ染料(米国再発行特許第30267号明細書
または特公昭58−19062号公報記載):ブロムフ
ェノールブルー、ブロムクレゾールグリーン、ブロムチ
モールブルー、キノリンブルーおよびロゾール酸のよう
なpH指示薬(共立出版(株)、化学大辞典、第10巻6
3〜65頁参照):トリアリールメタン系染料前駆体:
ロイコベンジリデン色素(特開昭55−379号および
特開昭56−145273号各公報に記載):ジアゾニ
ウム塩とアゾ染料カプラー:塩基漂白可能染料等を用い
ることができる。バインダーの重量に対する呈色性アン
モニア指示薬の配合量は約1〜20重量%の範囲内であ
ることが好ましい。
を生成させる試薬は酵素または酵素を含有する試薬であ
ることが好ましく、アナライトであるアンモニア生成物
質の種類に応じて、分析に適した酵素を選択して用いる
ことができる。上記試薬として酵素を用いる場合には、
その酵素の特異性からアンモニア生成物質と試薬の組み
合わせが決定される。アンモニア生成物質と試薬として
の酵素の組合せの具体例としては、尿素:ウレアーゼ、
クレアチニン:クレアチニンデイミナーゼ、アミノ酸:
アミノ酸デヒドロゲナーゼ、アミノ酸:アミノ酸オキシ
ダーゼ、アミノ酸:アンモニアリアーゼ、アミン:アミ
ンオキシダーゼ、ジアミン:アミンオキシダーゼ、グル
コースおよびホスホアミダート:ホスホアミダートヘキ
ソースホスホトランスフェラーゼ、ADP:カルバミン
酸塩キナーゼおよび燐酸カルバモル、酸アミド:アミド
ヒドロラーゼ、ヌクレオ塩基:ヌクレオ塩基デアミナー
ゼ、ヌクレオシド/ヌクレオシドデアミナーゼ、ヌクレ
オチド:ヌクレオチドデアミナーゼ、グアニン:グアナ
ーゼ等を挙げることができる。アンモニアを分析する場
合の試薬層に用いることができるアルカリ性緩衝剤とし
ては、pHが7.0〜12.0、好ましくは7.5〜1
1.5の範囲の緩衝剤を用いることができる。
アンモニア生成物質と反応してアンモニアを生成させる
試薬、アルカリ性緩衝剤およびフィルム形成能を有する
親水性ポリマーバインダー以外にも必要に応じて湿潤
剤、バインダー架橋剤(硬化剤)、安定剤、重金属イオ
ントラップ剤(錯化剤)等を含有させることができる。重
金属イオントラップ剤は、酵素活性を阻害するような重
金属イオンをマスキングするために使用されるものであ
る。重金属イオントラップ剤の具体例としては、EDT
A・2Na、EDTA・4Na、ニトリロトリ酢酸(N
TA)、ジエチレントリアミンペンタ酢酸のようなコン
プレクサン(complexane)を挙げることがで
きる。
内因性アンモニア捕捉層、光反射層、接着層、展開層、
中間層、アンモニア捕捉試薬組成物を含有する展開層等
には界面活性剤を含有させることができる。その例とし
てノニオン性界面活性剤がある。ノニオン性界面活性剤
の具体例として、p−オクチルフェノキシポリエトキシ
エタノール、p−ノニルフェノキシポリエトキシエタノ
ール、ポリオキシエチレンオレイルエーテル、ポリオキ
シエチレンソルビタンモノラウレート、p−ノニルフェ
ノキシポリグリシドール、オクチルグルコシド等があ
る。ノニオン性界面活性剤を展開層に含有させることに
より水性液体試料の展開作用(メータリング作用)がよ
り良好になる。ノニオン性界面活性剤を試薬層又は吸水
層に含有させることにより、分析操作時に水性液体試料
中の水が試薬層または吸水層に実質的に一様に吸収され
やすくなり、また展開層との液体接触が迅速に、かつ実
質的に一様になる。
米国特許3,992,158;特開昭54−2679
3;特開昭59−20853;特開昭59−4685
4;特開昭59−54962等に記載のグルコースオキ
シダーゼ、ペルオキシダーゼ、4−アミノアンチピリン
又はその誘導体、1,7−ジヒドロキシナフタレンを含
む改良Trinder試薬組成物がある。
調製することができる。溶血試薬は塗布または含浸され
る試薬水溶液に予め加えておけばよい。他の方法として
は、単独又は界面活性剤・展開面積制御のための親水性
ポリマーなどを含む水溶液、有機溶媒(エタノール、メ
タノールなど)溶液又は水−有機溶媒混合液溶液を展開
層の上から塗布して含浸させることもできる。これを用
いたアナライトの分析も公知の方法に従って行なうこと
ができる。インクベーション温度、時間等は従来と同じ
でよい。
層、少なくとも1層の試薬層及び水不透過性支持体がこ
の順に積層されてなる乾式分析素子において、前記展開
層に全血を溶血させる試薬成分を含むことを特徴とする
乾式分析素子。
試薬成分が界面活性剤である実施態様項1に記載の乾式
分析素子。
オン性界面活性剤である実施態様項2に記載の乾式分析
素子。
性剤がアルキルフェノキシポリエトキシエタノールであ
る実施態様項3に記載の乾式分析素子。
層における被覆量が1g/m2〜50g/m2の範囲であ
る実施態様項2に記載の乾式分析素子。
層における被覆量が2g/m2〜20g/m2の範囲であ
る実施態様項2に記載の乾式分析素子。
れている試薬組成物が、クレアチニン、尿素窒素、無機
燐又は重炭酸塩測定用試薬組成物である実施態様項1に
記載の乾式分析素子。
れている試薬組成物が、クレアチニン又は尿素窒素測定
用試薬組成物である実施態様項1に記載の乾式分析素
子。
(PET)平滑フィルムシート(支持体)上に、表1記
載の被覆量になるようにエタノールを溶媒に用いて塗
布、乾燥して指示薬層を設けた。
5%、厚さ100μmのポリエチレン製メンブランフィ
ルターを均一に圧着して液体遮断層を設けた。
になるように水を溶媒に用いて塗布、乾燥し、アンモニ
ア生成反応試薬層を設けた。
るように水を溶媒に用いて塗布、乾燥し、アンモニア拡
散防止層を設けた。
被覆量になるように水を溶媒に用いて塗布、乾燥し、内
因性アンモニア捕捉層を設けた。
に、30g/m2の割合で水を供給して湿潤させた後、
厚さ300μmの純ポリエチレンテレフタレート製トリ
コット編物布地(100S相当の紡績糸製で厚さ約25
0μm)を一様に軽く圧力をかけてラミネートした。さ
らに、この編物布地に、表5記載の被覆量になるように
エタノールを溶媒に用いて含浸、塗布、乾燥し、展開層
を設けた。
分析素子を作製した。
で、トリトン X100を除いた以外は、実施例1と同
様にして、クレアチニン測定用分析素子を作製した。
ット依存性を調べるために、以下の試験を実施した。
定された人全血から、血漿(ヘマトクリット0%に相
当)、及びヘマトクリット値10%、20%、30%、
40%、50%に調整した全血を調整し、この分析素子
にそれぞれ10μlずつ点着した。
ーションした後、波長600nmにて支持体側からの反
射濃度を測定した。この反射濃度から換算したクレアチ
ニン濃度を〔表6〕と〔図1〕に示す。図中、実線は実
施例品を用いて得られた結果を、点線は比較例品を用い
て得られた結果をそれぞれ示している。
クリット0%に相当)からヘマトクリット値50%の全
血試料までの範囲でヘマトクリット値にかかわらずクレ
アチニン濃度が、検定値7.5mg/dLに近い正確な
値として測定できることが明らかである。一方比較例の
分析素子では、血漿からヘマトクリット値40%の全血
試料までの範囲でクレアチニン濃度が、検定値7.5m
g/dLから約20%〜約70%も離れた極めて不正確
な測定値しか得られないことが明らかになった。
レフタレートシート(支持体)の上に表7の被覆量にな
るようにしてグルコース測定用試薬組成物の水溶液を塗
布し、乾燥して、グルコース測定用試薬層を設けた。
合で水を供給して試薬層の表面をほぼ一様に湿潤させた
後、純ポリエチレンテレフタレート製トリコット編物布
地(100S相当の紡績糸製で厚さ約250μm)を軽
く圧力をかけて一様にラミネートして展開層を設けた。
になるようにして溶血試薬成分と展開制御用親水性ポリ
マーを含むエタノール溶液を塗布し、含浸させ乾燥し
て、グルコース定量用一体型多層乾式分析素子を作成し
た。
物に溶血試薬成分を含まないほかは実施例2と同様にし
て従来技術に属するグルコース定量用一体型多層乾式分
析素子を作成した。
る、全血試料のヘマトクリット値が測定結果に及ぼす影
響(誤差)を調べるために以下の評価試験を実施した。
れた人全血から、血漿(ヘマトクリット0%に相当)、
及びヘマトクリット値10%、20%、30%、40
%、50%に調整した全血を調製し、前記の分析素子に
それぞれ10μLずつ点着した。各分析要素を37℃に
て6分インクベーションした後、中心波長550nmの
可視光を支持体側から照射して反射光学濃度を測定し
た。予め作成しておいた検量線を用いて、得られた反射
光学濃度値からグルコース濃度値を求めた結果を表9と
図2に示す。
クリット0%に相当)からヘマトクリット値50%の全
血試料までの範囲でヘマトクリット値にかかわらずグル
コース濃度が、検定値380mg/dLに近い正確な値
として測定できることが明らかである。一方比較例の分
析素子では、ヘマトクリット値20%から30%の範囲
の全血試料でではグルコース濃度が検定値380mg/
dLから約3.7%以下の範囲の正確な測定値が得られ
たものの、血漿からヘマトクリット値10%の全血試料
までの範囲ではグルコース濃度が検定値から約9%〜約
15%、ヘマトクリット値40%から50%の全血試料
の範囲ではグルコース濃度が検定値から約8%〜約17
%離れた極めて不正確な測定値しか得られないことが明
らかになった。
に係わりなく全血試料を簡単にかつ精度よく分析でき
る。
析素子を用いて、クレアチニン濃度検定値7.5mg/
dLの血漿試料とヘマトクリット値が異なる全血試料を
測定した測定例の試験結果を示すグフラである。グラフ
の横軸はヘマトクリット値、縦軸は測定されたクレアチ
ニン濃度値を表す。
析素子を用いて、グルコース濃度検定値380mg/d
Lの血漿試料とヘマトクリット値が異なる全血試料を測
定した測定例の試験結果を示すグラフである。グラフの
横軸はヘマトクリット値、縦軸は測定されたグルコース
濃度値を表す。
Claims (1)
- 【請求項1】 全血を展開する展開層、少なくとも1層
の試薬層及び水不透過性支持体がこの順に積層されてな
る乾式分析素子において、前記展開層に全血を溶血させ
る試薬成分が含まれていることを特徴とする乾式分析素
子。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP31050994A JP3309103B2 (ja) | 1994-12-14 | 1994-12-14 | 全血試料分析用乾式分析素子 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP31050994A JP3309103B2 (ja) | 1994-12-14 | 1994-12-14 | 全血試料分析用乾式分析素子 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH08166384A true JPH08166384A (ja) | 1996-06-25 |
JP3309103B2 JP3309103B2 (ja) | 2002-07-29 |
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ID=18006087
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP31050994A Expired - Fee Related JP3309103B2 (ja) | 1994-12-14 | 1994-12-14 | 全血試料分析用乾式分析素子 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP3309103B2 (ja) |
-
1994
- 1994-12-14 JP JP31050994A patent/JP3309103B2/ja not_active Expired - Fee Related
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