JPH0776524A

JPH0776524A - 動物用抗貧血剤

Info

Publication number: JPH0776524A
Application number: JP15839994A
Authority: JP
Inventors: Toshihiro Ishiguro; 敏弘石黒; Noriaki Ubukawa; 憲明生川; Masahide Oka; 正秀岡; Hiromi Yamamoto; 博巳山本
Original assignee: Takeda Chemical Industries Ltd
Current assignee: Takeda Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1993-07-13
Filing date: 1994-07-11
Publication date: 1995-03-20

Abstract

(57)【要約】【目的】副作用を伴うことなく安全に子豚等の動物に
投与できる動物用抗貧血剤およびこれを用いる動物の貧
血の予防・治療方法の提供。【構成】微生物学的方法により得られるデキストラン
カルボン酸と鉄塩との複合体を含有することを特徴とす
る動物用抗貧血剤、及びこれを投与することによる動物
の貧血の予防又は治療方法。【効果】鉄を安全に高濃度に含有し、しかも低粘度の
製剤が得られるので、着色斑や痛みを伴うことなく安全
に動物に投与でき、低毒性でしかもすぐれた貧血改善・
予防作用を奏する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は動物用抗貧血剤に関す
る。さらに詳しくは、本発明は、動物とりわけ子豚等の
鉄欠乏性貧血に対する鉄補給剤、抗貧血剤に関する。

【０００２】

【従来技術および発明が解決すべき課題】子豚は出生時
体重が小さいため貯蔵鉄量が少ないこと、および成長速
度が非常に速いので、鉄含量の少ない母乳のみでは鉄供
給が不十分で、生後短時日のうちに鉄欠乏性貧血に陥る
ことがよく知られている。とくに近年、繁殖豚が閉鎖的
な舎飼いシステム下で飼育されることが多くなったこと
に伴い、土壌からの鉄の摂取が困難になり、子豚とりわ
け幼若豚の鉄欠乏性貧血の発生の頻度が増加してきてい
る。これに対し、従来、フマール酸第１鉄やデキストラ
ン鉄等が投与されてきている。デキストランは乳酸菌に
属するロイコノストック・メセンテロイデス（Leuconos
toc mesenteroides）などによって、シュークロースか
ら生成するα１→６結合を主体とする高分子グルカンの
総称である。デキストランと水酸化鉄とから製造される
デキストラン鉄は予防的・治療的に有効な生成物とし
て、主として筋肉内注射のような非経口投与による方法
で、動物とりわけ子豚に鉄補給し、鉄欠乏性貧血症状を
改善するのに用いられてきた。

【０００３】特にデキストランと水酸化第２鉄の複合体
からなるデキストラン鉄製剤と、デキストランから増炭
反応により得られるデキストランヘプトン酸の水酸化第
２鉄の複合体の製剤が、豚の鉄欠乏性貧血症状の予防、
治療剤として利用されている。一方、デキストランの化
学修飾法が種々試みられているが、一般に使用される化
学反応では位置選択的に高い反応率で、生成物を得るこ
とが難しく、多数の副反応生成物を与えてしまう。この
ように、デキストランをはじめとする多くの多糖類は、
分子量の異なる各種高分子の同族体で構成されるので、
化学修飾では、いろいろの副反応が起こり生成物が複雑
化し成績体の実体も明確化できない例が多い。〔“バイ
オトランスフォーメーションズ・イン・プリパラティブ
・オーガニック・ケミストリー”（Biotransformations
in Preparative Organic Chemistry H. G. Davis et a
l, Academic Press）参照〕

【０００４】特に、従来よりデキストランと次亜塩素酸
ナトリウム、亜臭素酸ナトリウム，塩素，臭素，ヨウ素
などの酸化剤により化学酸化することが試みられている
が（例えば、特開昭６１−２３３００１参照）、その成
績体について構造が必ずしも明確にされていないか、十
分な裏付けがなされていない。従来知られている抗貧血
製剤は、鉄を安定に高濃度かつ低粘度に製剤化すること
に困難をともなったり、筋肉注射部位に着色斑を生じる
などの問題点がある。これらの問題は、デキストランか
ら、化学合成手段により誘導されるデキストラン修飾体
自体の純度、特に化学反応に付随する副反応物の混在な
どに基因すると考えられる。本発明の目的は、従来から
用いられている貧血予防・治療剤に比べより効果的でか
つ毒性が低く副作用が少ないより安全な動物用抗貧血
剤、および動物の貧血の予防・治療方法を提供すること
である。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記目的
を達成すべく、種々の抗貧血作用を有する化合物を探索
し、鋭意研究した結果、微生物学的方法により高純度で
得られるデキストランカルボン酸と鉄塩との複合体が、
子豚等の動物の貧血を改善することを見出し、さらに研
究を重ね本発明を完成するに至った。すなわち、本発明
は（１）微生物学的方法により得られるデキストランカ
ルボン酸と鉄塩との複合体を含有することを特徴とする
動物用抗貧血剤、（２）ヒドロキシメチル基及び／又は
ヘミアセタール水酸基を有するデキストランのヒドロキ
シメチル基及び／又は水酸基含有ヘミアセタール部をカ
ルボキシル基に酸化する能力を有するシュードグルコノ
バクター属に属する微生物又はその処理物を、かかる基
を有するデキストランに作用させ、対応するカルボン酸
を生成、蓄積せしめ、これを採取して得られるデキスト
ランカルボン酸を用いる上記（１）記載の動物用抗貧血
剤、（３）微生物がシュードグルコノバクター・サッカ
ロケトゲネスである上記（２）記載の動物用抗貧血剤、
（４）微生物がシュードグルコノバクター・サッカロケ
トゲネスＦＥＲＭＢＰ−１１２８、ＦＥＲＭＢＰ−
１１２９、ＦＥＲＭＢＰ−１１３０、ＦＥＲＭＢＰ
−１１３１、ＦＥＲＭＢＰ−１１３２またはＦＥＲＭ
ＢＰ−１１３３である上記（２）記載の動物用抗貧血
剤、（５）鉄塩が水酸化鉄または酸化鉄である上記
（１）記載の動物用抗貧血剤、（６）鉄塩が水酸化第２
鉄である上記（５）記載の動物用抗貧血剤、（７）微生
物の処理物が微生物の培養液である上記（２）記載の動
物用抗貧血剤、（８）デキストランカルボン酸が式(I
I)、(III)または(IV)：

【０００６】

【化２】

【０００７】[式中、ｎは１〜５０を示す]で表される上
記（１）記載の動物用抗貧血剤、（９）ｎが１〜１５で
ある上記（８）記載の動物用抗貧血剤、（１０）複合体
が、デキストランカルボン酸に水酸化第２鉄ゾルを反応
させることにより得られる上記（１）記載の動物用抗貧
血剤、（１１）注射剤である上記（１）記載の動物用抗
貧血剤、（１２）筋肉注射剤である上記（１）記載の動
物用抗貧血剤、（１３）子豚に用いる上記（１）記載の
動物用抗貧血剤、（１４）鉄欠乏性貧血に適用する上記
（１）記載の動物用抗貧血剤、（１５）微生物学的方法
により得られるデキストランカルボン酸と水酸化第２鉄
との複合体の抗貧血作用を奏する有効な量を、貧血の予
防または治療を要する動物に投与することを特徴とする
動物の貧血の予防または治療方法、および（１６）動物
が子豚である上記（１５）記載の方法に関する。

【０００８】従来、微生物を用いた、ヒドロキシメチル
基及び／又は水酸基含有ヘミアセタール部をもつ糖類な
どの化合物の対応するカルボン酸への酸化は、用いる微
生物の基質特異性のため、単糖類など、ごく限られたも
のに適用されているに過ぎなかった。また、ヒドロキシ
メチル基や水酸基含有ヘミアセタール部の化学酸化は、
上記のとおり、副反応が多く精製工程の煩雑化が避けら
れないことから、より選択性が高く効率的な酸化反応に
よるデキストラン又はその誘導体の酸化体の製造法及び
このようにして得られる純度の高いデキストランカルボ
ン酸が求められていた。本発明によれば、デキストラン
のヒドロキシメチル基及び／又はヘミアセタール水酸基
含有ヘミアセタール部を微生物を用いて酸化することに
より、高純度のデキストランカルボン酸が高収率、高選
択的に得られる。

【０００９】本発明で微生物学的にデキストランカルボ
ン酸を得るのに使用できるシュードグルコノバクター属
に属する微生物としては、糖類のヒドロキシメチル基及
び／又は水酸基含有ヘミアセタール部をカルボキシル基
に酸化する能力を有するシュードグルコノバクター属に
属する微生物であればいずれでもよく、通常の変異誘発
操作、例えばニトロソグアニジン等の変異剤処理、紫外
線照射処理等あるいは、遺伝子組換え等により得られる
変異株も含まれる。とりわけシュードグルコノバクター
・サッカロケトゲネスの菌が好ましい。より具体的に
は、例えば、ヨーロッパ特許公開（ＥＰ−Ａ）第２２
１,７０７号に記載されている下記の菌株が代表例とし
て挙げられる。シュードグルコノバクター・サッカロケトゲネスＫ５９
１ｓ株：ＦＥＲＭＢＰ−１１３０，ＩＦＯ１４４６
４シュードグルコノバクター・サッカロケトゲネス１２−
５株：ＦＥＲＭＢＰ−１１２９，ＩＦＯ１４４６５シュードグルコノバクター・サッカロケトゲネスＴＨ
１４−８６株：ＦＥＲＭＢＰ−１１２８，ＩＦＯ１
４４６６シュードグルコノバクター・サッカロケトゲネス１２−
１５株：ＦＥＲＭＢＰ−１１３２，ＩＦＯ１４４８
２シュードグルコノバクター・サッカロケトゲネス１２−
４株：ＦＥＲＭＢＰ−１１３１，ＩＦＯ１４４８３シュードグルコノバクター・サッカロケトゲネス２２−
３株：ＦＥＲＭＢＰ−１１３３，ＩＦＯ１１４８
４。

【００１０】本発明の方法においては、シュードグルコ
ノバクター属の微生物の菌体自体を作用させてもよく、
あるいはその処理物を用いてもよい。処理物としては例
えばこれらの微生物の培養液を用いることができる。更
にこれらの微生物が産生する酵素を用いてもよい。但
し、本発明のシュードグルコノバクター属の微生物の場
合、通常、酵素は菌体内に蓄積される。通常、菌体自身
を用い、これを原料糖類に接触・作用させカルボン酸ま
たはその塩を生成せしめるのが好都合である。とりわ
け、休止菌体を用いるのが好ましい。菌体またはその培
養液は例えば、特開昭６４−８５０８８に記載の方法ま
たはこれを類似の方法に従って製造することができる。
すなわち、スラントからシード培養を行い、ついで本培
養を行い、培養液を得るとともに、必要に応じて、この
培養液を遠心分離し、沈澱物を集め、ついで、食塩水溶
液で数回洗浄し、得られた沈澱物を菌体反応に供するこ
とができる。また該微生物は好気的条件下で、該菌株が
利用しうる栄養源、すなわち炭素源（グルコース，蔗
糖，スターチ等の炭水化物またはペプトン，イーストエ
キス等の有機物），窒素源（アンモニウム塩類，尿素や
コーンスティープリカー，ペプトン等の無機、有機の窒
素化合物），無機塩類（カリウム，ナトリウム，カルシ
ウム，マグネシウム，鉄，マンガン，コバルト，銅，リ
ン酸，チオ硫酸等の塩類），および微量栄養素としてＣ
oＡ，パントテン酸，ビオチン，チアミン，リボフラビ
ン，ＦＭＮ（フラビンモノヌクレオシド）等のビタミン
・補酵素類またはＬ−システイン，Ｌ−グルタミン酸等
のアミノ酸またはそれらを含む天然物を含む液体培地で
培養することができ、このようにして得られる培養液自
体を本発明方法に用いてもよい。培養はｐＨ４〜９、好
ましくはｐＨ６〜８で行うことが出来る。

【００１１】培養時間は使用する微生物および培地の組
成等によって種々異なるが、好ましくは、１０〜１００
時間である。培養を行うのに好適な温度範囲は、１０〜
４０℃，好ましくは、２５〜３５℃である。培養に際
し、培地に希土類元素を添加することにより、より効率
的に目的物を生成せしめることができる。培地に添加さ
れる希土類元素としては、スカンジュウム（Ｓc），イ
ットリウム（Ｙ），ランタン（Ｌa），セリウム（Ｃ
e），プラセオジウム（Ｐr），ネオジウム（Ｎd），サ
マリウム（Ｓm），ユウロピウム（Ｅu），ガドリニウム
（Ｇd），テルビウム（Ｔb），ジスプロシウム（Ｄ
y），ホルミウム（Ｈo），エルビウム（Ｅr），ツリウ
ム（Ｔm），イッテルビウム（Ｙb）およびルテチウム
（Ｌu）などが挙げられる。これらの希土類元素は金属
末または金属片として添加してもよいし、塩化物，炭酸
塩，硫酸塩，硝酸塩，酸化物あるいはシュウ酸塩のよう
な化合物としても用いられる。それらは単独で用いても
よいし、二種類以上の希土類元素例えば、炭酸セリウム
と塩化ランタンとを同時に使用することもできる。さら
には諸元素の分離精製過程で得られる粗製物等も用いる
ことができる。培地に添加される希土類元素の量は、用
いる微生物の生育を抑制しない範囲で選択すればよく、
通常０.０００００１〜０.１％（Ｗ／Ｖ），好ましくは
０.０００１〜０.０５％（Ｗ／Ｖ）の範囲が効果的であ
る。培地への添加法としては、予め培地に添加しておく
のもよいが、培養途中に間欠的に添加しても、または連
続的に添加してもよい。

【００１２】なお、デキストランカルボン酸を培養液中
に生成蓄積せしめる場合、ＥＰ−Ａ−２２１,７０７に
記載のように、シュードグルコノバクターを別種の細菌
の共存下で培養すると、シュードグルコノバクター属細
菌を単独で培養するより生成物の蓄積量を増加させるこ
とができる。このような混合培養、すなわちシュードグ
ルコノバクター属細菌を別種の混合菌の共存下で行う培
養は、ＥＰ−Ａ−２２１,７０７の開示に従い適宜行う
ことができる。このような混合菌としては特に、バチル
ス・メガテリウム属細菌が好ましい。

【００１３】本発明によりデキストランカルボン酸を製
造するにあたり、反応に供する糖類を水または、水と混
和できる溶媒、例えば、メタノール，アセトン，ポリエ
チレングリコールなどに溶解又は懸濁したものを用いて
微生物と接触してもよい。使用する溶媒量は反応を遅延
させない範囲で選択すればよく、基質濃度として、通常
０.１〜２０％（Ｗ／Ｖ），好ましくは、１〜５％（Ｗ
／Ｖ）の範囲が効果的である。本発明の微生物による酸
化反応を行うのに好適な温度範囲は、１０〜４０℃，好
ましくは２５〜３５℃である。また反応は好気的条件下
で行うのが好ましく、例えば、空気を０.１〜５リット
ル／分で通気しながら、必要に応じて、５０〜２０００
回転で撹拌することもできる。反応時間は、反応に供す
る糖類に置換する１級水酸基の性質により異るが、５分
〜３日間，通常、１時間〜２４時間である。この反応は
ｐＨを調整するのが好ましい。通常ｐＨ４〜９，好まし
くはｐＨ６〜８の範囲で行うのが効果的である。ｐＨ調
整に用いる塩基としては、反応を阻害しないものならい
ずれを用いてもよい。例えば、水酸化ナトリウム，水酸
化カリウム，炭酸カルシウム，水酸化マグネシウム，水
酸化第１鉄などの無機塩，モルホリノエタンスルホン酸
ナトリウム，モルホリノエタンスルホン酸カルシウムな
どの有機塩なども使用することができる。

【００１４】また、所望により陰イオン交換樹脂を添加
することにより、ｐＨを調整するための上記した、アル
カリ金属塩などの中和剤を加える必要がなく、かつ反応
を選択的に制御することができる。とりわけ選択的に反
応させ１当量酸化体を得る場合に、この陰イオン交換樹
脂を添加する方法は好適である。ここで使用する陰イオ
ン交換樹脂としては、生成したカルボン酸を吸着するも
のなら、陰イオン交換樹脂はいずれでもよい。とりわけ
スチレン系及びアクリル系陰イオン交換樹脂が好まし
い。具体的には、例えばアンバーライト（商品名，オル
ガノ社）ＩＲＡ−４００，ＩＲＡ−４０１，ＩＲＡ−４
０２，ＩＲＡ−４１０，ＩＲＡ−９００，ＩＲＡ−９１
０，ＩＲＡ−３５，ＩＲＡ−６８，ＩＲＡ−９４Ｓな
ど、ダイヤイオン（商品名，三菱化成）ＳＡ−１０Ａ，
ＳＡ−２０Ａ，ＰＡ−３０６，ＰＡ−３０８，ＰＡ−４
０６，ＷＡ−１０，ＷＡ−１１，ＷＡ−２０，ＷＡ−３
０などが挙げられる。

【００１５】基質として加えた糖類（すなわち、ヒドロ
キシメチル基及び／又はヘミアセタール水酸基を有する
デキストラン）が反応液中に消失したところで、撹拌を
停止し、反応液と陰イオン交換樹脂を分離し、適当な溶
離剤を加えて陰イオン交換樹脂を溶出し、目的物を得る
ものである。溶離剤として、食塩，アルカリ金属塩など
の水溶液、あるいは、塩酸，硫酸，リン酸，クエン酸な
どの酸性水溶液などが挙げられる。このようにして溶
離、蓄積された糖カルボン酸は公知の手段（例えばＨＰ
−２０やＳＰ２０５などの吸着性樹脂による分離、精製
等）又はそれに準じる方法により採取、精製することも
できる。

【００１６】さらに、得られるデキストランカルボン酸
から無機イオンを除くため、これをイオン交換樹脂を通
過させる処理、または透析、電気透析または限外濾過に
よって脱塩処理することができる。このようなデキスト
ランカルボン酸としては例えば下式（II）、（III）、
（IV）で示されるような化合物が代表例として挙げられ
る。

【００１７】

【化３】

【００１８】[式中、ｎは１〜５０を示す。好ましくは
ｎは１〜１５である。]本発明で用いるデキストラン
は、実際には、異なる分子量を有するポリマーの混合物
であるが、好ましくは下式（I）で表される。

【００１９】

【化４】

【００２０】[式中、ｎは上記と同意義を有する。]本発
明で微生物学的酸化に付される基質はデキストランの誘
導体であってもよく、またこれを含むものであってもよ
い。かかるデキストラン誘導体としては、例えば、上記
式（II）または（III）で表されるデキストラニルグル
コン酸、デキストラニルグルクロン酸、およびこれらの
混合物が挙げられる。また、これらの化合物を上記微生
物による酸化に付し、例えば上記式（IV）の化合物のよ
うな別の酸化体に導くこともできる。得られたデキスト
ランカルボン酸は鉄塩と容易に複合体化（錯体化を含
む）して、５〜３０％またはそれより多くの鉄分を含有
する非毒性で安定な注射可能な液状複合体を製造するこ
とができる。鉄塩としては、例えば水酸化第１鉄、水酸
化第２鉄、酸化鉄等が挙げられる。通常、水酸化第２鉄
がより好ましく用いられる。

【００２１】デキストランカルボン酸と鉄塩との複合体
は通常、デキストランと鉄塩との複合体を製造する公知
方法又はそれに準じて製造することができる。例えば、
デキストランカルボン酸と水酸化第２鉄等鉄塩のゾルと
を反応させることにより複合体を製造することもでき
る。好ましくは、デキストランカルボン酸と該ゾルをｐ
Ｈ４.０〜１０で、加温された温度条件、例えば１００
℃〜１２０℃におけるオートクレーブなどで、３０分間
加熱処理することにより、コロイド溶液または懸濁液が
得られる。水酸化第２鉄ゾルの製法として、常法に従い
塩化第２鉄溶液に、アルカリ金属塩とりわけ、炭酸ナト
リウム溶液を用いることもできる。しかしながら、これ
らを用いた場合、添加速度を極めて低くして行わなけれ
ばならない欠点があった。今回、種々検討した結果、ア
ルカリ炭酸水素塩溶液、とりわけ、炭酸水素ナトリウム
溶液で中和すると、添加速度を従来の方法より高速で添
加できることを見いだした。この方法により、鉄は塩形
成、キレート形成、水和化などのプロセスなどにより、
デキストランカルボン酸と鉄塩の複合体が形成される。
後述するように、この水相中コロイド懸濁鉄塩複合体の
元素鉄含有量は溶液または懸濁液の約５０〜３００mg／
mlであり、所望により蒸発、濃縮などの操作により、低
鉄分含有品から高鉄分含有鉄塩複合体を調製することも
できる。このようにして得られた、高鉄分含有鉄塩複合
体はそれ自体長期間極めて安定であり、特に水相中でそ
のコロイド状態が安定に保持される特性を有している。

【００２２】本発明で用いる複合体の特性を検討したと
ころ、低分子デキストランカルボン酸と鉄塩との複合
体、例えば式（II）、（III）または（IV）[各式中、ｎ
は１〜１５を示す]で表される低分子デキストランカル
ボン酸と鉄塩との複合体が好ましいことが見出された。
このうち、低分子デキストラングルコン酸鉄塩複合体が
特に好ましく、該複合体を用いて、粘度の低い、高含有
鉄の安定した製剤が製造できる。実際、従来のデキスト
ラン鉄製剤の鉄含有量がせいぜい２００mg／ml程度であ
るのに対して、本発明の低分子デキストラングルコン酸
と鉄塩との複合体を用いることにより３００mg／mlの鉄
高含有製剤の製造が可能である。本鉄高含有製剤は、投
与容量の削減を可能にし注射投与作業の改善、投与時間
の短縮をもたらすことができるため、有利に使用するこ
とができる。また、育種改良にともなう幼若豚の大型化
にも対処できる抗貧血剤を提供することができる。

【００２３】このようにして得られたデキストランカル
ボン酸と鉄塩との複合体は、注射用蒸留水、生理食塩水
等で希釈して注射剤として非経口的に動物に投与しても
よく、又、公知の製剤学的製造法に準じ、所望により製
剤学的に許容される希釈剤、賦型剤を用い、大型丸剤、
錠剤、粉剤、顆粒剤、カプセル剤、乳剤、液剤、プレミ
ックス剤、シロップ剤等として経口的に投与することが
できる。又、一剤とした後直接又は担体に分散させたも
のと飼料、飲水等に混ぜて用いることができる。

【００２４】従って、本発明の貧血予防治療剤は、例え
ば上記デキストランカルボン酸と鉄塩との複合体を固状
または液状の担体で希釈し、あるいは被覆等により安定
化し、例えば散剤，粉剤，顆粒剤，錠剤，大型丸剤，液
剤，乳剤，ペースト剤，カプセル剤，プレミックス剤，
注射剤などとするか、あるいは飼料、飲料などに直接ま
たは担体中に分散させたものを添加することにより製造
される。固体担体としては、例えば乳糖，蔗糖，でんぷ
ん，小麦粉，とうもろこし粉，ふすま，大豆油粕，脱脂
米糠，菜種油粕，豆腐粕，繊維素，酵母菌体，魚粉，落
花生のしぼり粕，貝殻の粉，炭酸カルシウムなどが挙げ
られ、液状担体としては、例えば水、生理的食塩水，生
理学的に無害な有機溶媒などが挙げられる。その他適宜
の補助剤、例えば乳化剤，分散剤，懸濁剤，湿潤剤，濃
縮剤，ゲル化剤，可溶化剤を適当量添加しても差し支え
ない。プレミックスの形にすることもできる。さらに、
防腐剤，殺菌剤，駆虫剤，抗酸化剤，着色剤，芳香剤，
抗菌剤，抗生物質，酵素製剤，乳酸菌製剤，解熱剤，鎮
痛剤，消炎剤などを配合してもよく、他の貧血の予防治
療剤を配合して併用することもできる。また、各種ビタ
ミン類，ミネラル類，アミノ酸類などを配合してもよ
い。

【００２５】本発明の抗貧血剤中の該複合体の量は通
常、該製剤全量に対し０.１〜１００重量％、好ましく
は１〜１０重量％の範囲で配合される。該複合体は、筋
肉注射、皮下注射、腹腔内注射等の注射剤として投与す
るのが好ましい。特に筋肉注射が好都合である。これら
の注射剤には通常、注射用蒸留水、生理食塩水等でデキ
ストランカルボン酸と鉄塩の複合体を希釈して用いるの
が好適である。

【００２６】本発明の抗貧血剤は、鉄欠乏性貧血をはじ
め、種々の疾患に基因する貧血の予防または／および治
療の目的で豚，牛，馬，犬，猫等の畜産、家畜あるいは
愛玩動物に投与される。とりわけ貧血になり易い子豚等
に好ましく適用される。投与量は投与対象、症状、投与
経路にも左右されるが、例えば注射剤は、通常鉄量とし
て１回当り５〜５００mg／１頭、好ましくは１００〜３
００mg／１頭の範囲である。必要により症状に応じ回数
を増してもよい。又、錠剤等の固型製剤等についても上
記投与量に相当するよう、直接又は飼料等に配合して投
与するのがよい。特に、本発明の抗貧血剤は、筋肉注射
による子豚の貧血の予防または治療に有用である。例え
ば、本抗貧血剤は幼若の豚の臀部に筋肉注射することに
より、均一な分散および生体組織への良好な吸収を示
す。また、本発明の抗貧血剤は、副作用等著明な異常は
認められず毒性が低く安全である。例えば、下記実施例
に示されるように子豚に投与した場合、４週間一切副作
用や異常は認められなかった。下記実施例で示すよう
に、血液学的検査項目の本発明の抗貧血剤の幼若ブタへ
の投与実験で、特にヘモグロビン量（ＨＧＢ），ヘマト
クリット値（ＨＣＴ），平均赤血球容積（ＭＣＶ），増
体重などのパラメーターの多くについて対照群に比し、
有意に改善された。

【００２７】

【実施例】参考例、実施例を以下に示し、本発明をさら
に具体的に説明するが本発明はこれらに限定されるもの
ではない。参考例１シュードグルコノバクター・サッカロケトゲネス（Pseu
dogluconobacter saccharoketogenes）ＴＨ１４−８６
菌液の調製；シュードグルコノバクター・サッカロケト
ゲネスＴＨ１４−８６（ＦＥＲＭＢＰ−１１２８）株ス
ラントを２０mlの下記表１の培地に対して１白金耳加
え、これを２００mlのスムースフラスコで３０℃，１日
間，回転振盪機を用いて、撹拌下培養する。ついで、２
０mlの培地当り上記培養液１mlをとり、これを３０℃，
２日間，振盪培養を行い、種培養とした。一方、バチル
ス・メガテリウム（Bacillus megaterium）(ＩＦＯ１
２１０８）株のスラントを２０mlの下記表２に示す組成
当り、１白耳、２００mlのスムースフラスコに加え、３
０℃で２日間振盪培養を行う。

【００２８】

【表１】シュードグルコノバクター・サッカロケトゲネスＴＨ１４−８６の培地成分％（Ｗ／Ｖ）ラクトース１酵母エキス１（プロディヴェル（Ｐrodivel）） (ＮＨ₄)₂ＳＯ₄ ０.３コーン・スティープ・リカー３ＣaＣＯ₃ ２（スーパー（Ｓuper））ＣaＣＯ₃添加前のpＨ＝７.０

【００２９】

【表２】

【００３０】次に、以下の本培養を行った。上記シュー
ドグルコノバクター・サッカロケトゲネスＴＨ１４−８
６株の種（シード）培養培地１００mlおよび、バチルス
・メガテリウムのシード培地１.５mlを９００mlの下記
表３に示す本培養培地に加え、ついで、３０℃で約２０
時間振盪培養し、シュードグルコノバクター・サッカロ
ケトゲネスＴＨ１４−８６の培養液とした。

【００３１】

【表３】本培養培地成分％（Ｗ／Ｖ）シュークロース０.０５（単独で滅菌）コーン・スティープ・リカー２（単独で滅菌） (ＮＨ₄)₂ＳＯ₄ ０.３（単独で滅菌）ＦeＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ０.１（単独で滅菌）ビタミンＢ₂ １mg／リットル（滅菌前のpＨ＝７.０）ソルボース１０（単独で滅菌）ＬaＣl₃ ０.０１（単独で滅菌）ＣaＣＯ₃ ４（単独で滅菌）（スーパー（Ｓuper））

【００３２】このようにして得られたシュードグルコノ
バクター・サッカロケトゲネス培養液１.５リットルに
デキストラン−４（分子量：４０００〜６０００；エキ
ストラシンテーゼ社（仏国）製）３０ｇをバイオット社
製５リットルのジャーファンメンターに入れ、ついで滅
菌水１.７リットルを加え反応液とした。これを３２
℃、６００回転／分で撹拌しながら、空気を１.６リッ
トル／分で通気し、０.５％ＮaＯＨ溶液でｐＨが６.３
になるように反応の進行に伴い自動的に滴下した。３時
間で反応を止め、ついで、反応液１２.０リットルを８
０００回転で冷却遠心器で分離し、菌体を除き、上澄液
１.９８リットルを得た。この上澄液をセルロースアセ
テートメンブランフィルター（φ０.２〜μm）で濾過
し、再度除菌化した。得られた濾液を、アンバーライト
ＩＲＡ−６８（ＯＨ型）カラム（５０ml）に通導し、
少量の水（１００ml）で洗い、通過液２リットルを得
た。この通過液をＨＰ−２０カラム（９００ml）に通導
した。ついで、水２リットルで溶離し、初めの通過液７
００mlは捨て、ついで溶出される液３.３リットルを集
め、これに濃塩酸１３.８mlを加えて酸性とし、これを
セルロースアセテートメンブランフィルター（φ０.２
μm）で濾過し、濾液をセファビーズ（商品名）ＳＰ２
０５（三菱化成社製）１０００mlに通導した。ついで、
０.０５Ｍ塩酸７００mlおよび水２リットルで洗浄後、
２０％メタノール水溶液２リットルで溶出し、目的物の
画分を得た。これを減圧濃縮し、デキストラニル−グル
クロン酸の白色粉末１４ｇを得た。本品のＨＰＬＣ（条
件：アサヒパックＧＳ３２０（φ７.６ｍｍ×５０ｍ
ｍ；旭化成社製）、移動相；水１ml／分，検出；ＲＩ
（ウォータース４１０）及び２００nm（東ソーＵＶ−
８０２０）サンプル０.５％水溶液２０μl 注入）でＲt
８.４８に単一のピークを示した。（原料のデキストラ
ン−４のＲtは１０.８３であった）。本品の構造確認の
ため、酵素消化処理実験を行った。本品の１.５％水溶
液１００μl にグルコアミラーゼ（和光純薬製）溶液
（４mg／ml）１００μlを加え、３０℃で１昼夜インキ
ュベーションを行い、この酵素処理液をＨＰＬＣで検討
を行った。対照実験として、デキストラン−４も同様に
処理を行った。その結果、本品はグルコアミラーゼ消化
を受けないことが分った。一方、デキストラン−４は、
グルコアミラーゼ消化を受け、基質は消失し、グルコー
スが新生した。このことから、本品は、前記式（II）
（但し、式中、ｎは平均８）で示されるデキストラニル
グルクロン酸と確認した。

【００３３】参考例２シュードグルコノバクターサッカロケトゲネスＫ５９
１s（ＦＥＲＭＢＰ−１１３０）菌株をバクトペプト
ン１％，イーストエキス１％からなるペプトンイースト
（ＰＹ）培地を用いて、３０℃、２３０回転の振とう
下、ｐＨ７.５で３日間培養を行った。ついで、メイン
培養に移し、ＰＹ培地に０.１％の塩化カルシウムを添
加し、３０℃、２３０rpm で振とうしながら、４８時間
培養した。ついで、得られた培養液を１００００回転
で、１０分間遠心分離し、集菌し、ついで水５００mlで
洗菌し、培養液１リットル当り、７.５９ｇの菌体を得
た。ついで、デキストラン−４（分子量４０００〜６０
００；エキストラシンテーゼ社（仏国）製）３０ｇを水
１リットルに溶かし、ついで湿菌体５６ｇを水１リット
ルに懸濁した液を加え、３２℃、８００rpm で撹拌しな
がら、空気を１分間６０mlで通気し、０.１％ＮaＯＨ溶
液でｐＨ６.３に制御しながら６.５時間反応させた。反
応液を遠心分離し、上清２リットルを分取し、メンブラ
ンフィルターで濾過除菌し、ＨＰ−２０カラム（９００
ml）に通導し、水２０００mlで溶出した。通過液に最終
濃度０.０５Ｍになるように、濃塩酸を加え、酸性と
し、メンブランフィルターで濾過したあと、濾液をＳＰ
−２０５カラム（１００ml）に通導し、初め０.０５Ｍ
塩酸（１０００ml）、ついで水（２０００ml）で洗浄
後、２０％メタノール（２０００ml）で溶出される画分
を集め、濃縮後、凍結乾燥し、１４ｇの白色粉末のデキ
ストラニルグルコン酸を得た。本品のＨＰＬＣ条件[ア
サヒパックＧＳ３２０（φ７.６mm×５０mm：旭化成社
製）、移動相：水１ml／min，ＲＩ（ウォータース４１
０）及び２００nm（東ソーＵＶ−８０２０）、サンプル
０.５％水溶液２０μl注入]でＲｔ８.７０に単一のピー
クを示した。出発物質として用いたデキストラン−４の
Ｒtは１０.８３であった。本品を前記した条件でグルコ
アミラーゼ消化を行ったところ、容易に消化され、グル
コースとグルコシルグルコン酸を検出することができ
た。従って、本化合物は、前記式（III）（但し、式
中、ｎは平均８）で示されるデキストラニルグルコン酸
であることが確認された。

【００３４】参考例３参考例２と同様にして、シュードグルコノバクター・サ
ッカロケトゲネス菌を培養し、この菌体（湿菌体）５０
ｇをデキストラニルグルクロン酸（参考例１記載の方法
で調製したもの）３０ｇを水１リットルに溶解させた溶
液に加え、３２℃、８００rpm で撹拌しながら、空気を
１分間６０mlで通気し、０.１％ＮaＯＨ溶液でｐＨ６.
３に制御しながら、２１時間反応させた。反応液を遠心
分離し、上清２リットルを分取し、メンブランフィルタ
ーで濾過除菌し、ＨＰ−２０カラム（９００ml）に通導
し、水１.５リットルで溶出し、目的画分を集め、濃縮
後凍結乾燥し、１５ｇのグルクロニルデキストラニルグ
ルコン酸ナトリウム塩の白色粉末１２ｇを得た。

【００３５】参考例４塩化第２鉄・６水和物（ＦeＣl₃・６Ｈ₂Ｏ）の５０％水
溶液５０mlを３０℃に加温し、ついで２４％Ｎa₂ＣＯ₃
溶液５０mlを１分間０.４mlの速度でよく撹拌しながら
滴下する。ついで、参考例１で得たデキストラニルグル
クロン酸の１０％溶液５０mlを、３ml／分の速度で滴下
し、１６％Ｎa₂ＣＯ₃溶液を０.４ml／分の速度で滴下
し、ｐＨ４.３に調整した。次に、エタノール２００ml
を加え、強く撹拌しスラリー状にし、遠心分離（５００
０rpm）し、沈殿を集め、ついで水４０mlに溶かし、６
０mlのエタノールでよく撹拌し、遠心分離し、可溶物を
除いた。水２０mlを加えて沈殿物をよく分散させ、減圧
下、エバポレーターでエタノールをよく除き、０.２ml
／分の速度でよく撹拌しながら１０％ＮaＯＨ溶液を加
え、ｐＨを５〜６に調整し、１００℃で２０分間加熱
し、ついでフェノールを４mg／mlになるように加え、所
望のデキストラニルグルクロン酸と水酸化第２鉄ゾル溶
液との複合体２２mlを得た。

【００３６】参考例５塩化第２鉄・６水和物１００ｇを１００mlの水に溶解さ
せ、この溶液をブランソン（Branson）Ｇ−２２０で１
時間超音波処理し、充分溶解させる。ついで、水を加え
て２００mlとし、５００mlのビーカーに溶液を移す。つ
いで２４％Ｎa₂ＣＯ₃水溶液２００mlをよく撹拌しなが
ら、３０℃、０.８ml／分の速度で添加し、淡黄褐色の
水酸化第２鉄ゾルを調製した。このようにして調製した
水酸化第２鉄ゾル１００mlを分取し、３００mlのビーカ
ーに移し、３０℃でよく撹拌しながら、１０％デキスト
ラニルグルコン酸溶液５０mlを徐々に加えた。ついで、
１６％ＮaＣＯ₃溶液を、極めてゆっくり、０.１〜０.２
ml／分の速度で加え、ｐＨを４.３に調整した。つい
で、エタノール２００mlを撹拌しながら加え、生じた沈
澱物を遠心分離し、上清と分け、沈澱物を水８０mlによ
く懸濁させたあと、エタノール１２０mlを加え、再沈澱
させ、沈澱物を遠心分離し、分取した。この操作をさら
にもう一回繰り返し、得られた沈澱物を水２０mlで懸濁
し、よく撹拌した。１０％ＮaＯＨ溶液を０.１〜０.２m
l／分の速度で加え、ｐＨを６.０になるまで加えた。こ
の溶液を１２０℃で１０分間、オートクレーブ処理し、
防腐剤としてフェノール（最終濃度１％となるように）
を加え、ついで、エバポレーターで濃縮し、所望のデキ
ストラニルグルコン酸と水酸化第２鉄ゾルとの複合体を
得た。本品は、安定した水酸化第２鉄ゾルを形成した。
その性状を分析したところ、以下のとおりであった。総
鉄塩濃度：２００mg／ml，粘度：３２cＰ，電導度：４
７mＳ／cmであった。

【００３７】実施例１供試材料：抗貧血剤として、参考例４で得たデキストラ
ニルグルクロン酸と水酸化第２鉄ゾルとの複合体（１２
９mg Ｆe／ml含有，以下、グルクロン酸・鉄と略称す
る）および参考例５で得たデキストラニルグルコン酸と
水酸化第２鉄ゾルとの複合体（２０６ml Ｆe／ml含有，
以下、グルコン酸・鉄と略称する）を用いた。供試動物：ランドレース系統の幼若豚を用いた。試験方法：６日齢時に１腹９頭を３群に分け〔ｎ＝３
（各群３頭）〕、検体を鉄元素として２００mg／頭を左
臀部に筋肉内投与した。試験開始時およびその後１週間
ごとに、体重測定と採血を行い、ヘモグロビン量（ＨＧ
Ｂ）、ヘマトクリット値（ＨＣＴ）、平均赤血球容積
（ＭＣＶ）および体重の各パラメーターを測定し、無処
置の対照群と比較した。その結果を表４に示す。

【００３８】

【表４】

【００３９】表４に示すとおり、血液の各貧血パラメー
ターが対照群に比し有意に上昇し、貧血の進行が本発明
抗貧血剤の投与により明らかに抑制された。また、投与
後第３週目の血清鉄、総鉄結合能を測定し、不飽和鉄結
合能（総鉄結合能−血清鉄）及び鉄飽和度（＝血清鉄／
総鉄結合能×１００）を算出し、対照群と比較した。そ
の結果を表５に示す。

【００４０】

【表５】検体血清鉄総鉄結合能不飽和鉄結合能鉄飽和度（μg／dl）（μg／dl）（μg／dl）（％）対照６０．５７５５．８
６９５．３８．１グルクロン酸・鉄１０１．５６４６．４
５４４．８１５．７グルコン酸・鉄 152.8 588.1 435.3 27.8

【００４１】表５に示すとおり、本発明の複合体を投与
した場合、対照群に比し、血清鉄濃度が顕著に高く、総
鉄結合能の上昇が抑制され、鉄飽和度の明らかな改善が
認められる。また、本発明の抗貧血複合体が投与部位の
組織から効率的に吸収・利用されていることがわかる。
以上の結果より、本発明の抗貧血剤は動物の貧血の予防
・治療に有効である。

【００４２】参考例６参考例２と同様の方法で得られたシュードグルコノバク
ター・サッカロケトゲネスＫ５９１s菌株の洗浄菌体を
得た。ついで、デキストラン−４(分子量４０００〜６
０００;エキストラシンテーゼ社(仏国)製)３０gを水１
リットルに溶かし、ついで該溶液を、水１リットルに懸
濁した湿菌体５６gに加え、３２℃、８００rpmで攪拌し
ながら、空気を１分間６０mlで通気し、０.１％ＮaＯＨ
水溶液でpＨ６.３に制御しながら５時間反応させた。本
反応液をＨＰＬＣ(分析条件は参考例２に記載したと同
条件)で分析したところ、Ｒt８.７０のデキストラニル
グルコン酸が６２％と、Ｒt１０.９０の未酸化デキスト
ランが３８％の組成であることが判明した。ついで、こ
の反応液を遠心分離し、上清２リットルを分取し、メン
ブランフィルターで濾過除菌した。ついで、除菌液はＩ
Ｒ−１２０Ｂ(Ｈ⁺)(１００ml)に通導し、ついで水(２０
０ml)で溶出し、溶出液を集め、減圧濃縮後、凍結乾燥
し、２７gの白色粉末を得た。本品は、ＨＰＬＣによ
り、デキストラニルグルコン酸とデキストランの混合物
で、その組成比は６:４であることを確認した。

【００４３】ついで、参考例５に記載した方法で、水酸
化第２鉄ゾルを調製し、その１００mlを分取し、透析用
チューブ、スペクトラ／ポア（ＳＰＥＣＴＲＡ／ＰＯ
Ｒ）２（分画分子量１２,０００〜１４,０００）[スペ
クトラム・メディカル・インダストリーズ・インコーポ
レーティッド(ＳＰＥＣＴＲＵＭＭＥＤＩＣＡＬＩ
ＮＤＵＳＴＲＩＥＳ,Ｉnc）社、米国]に移し、一夜透析
した。透析後の水酸化鉄ゾル溶液に、上記した白色粉末
(デキストラニルグルコン酸とデキストランの６:４の混
合物)５gを水５０mlに溶かした溶液を３０℃でよく攪拌
しながら、徐々に加えた。ついで、１６％Ｎa₂ＣＯ₃溶
液を、極めてゆっくり加え、pＨを４.３に調整した。３
０℃で１時間攪拌後、１００℃で３０分間オートクレー
ブ処理をし、完全に溶解させ、１Ｎ−ＮaＯＨ溶液でpＨ
６.４１に調整した。ついで、該溶液をエバポレーター
で濃縮し、防腐剤としてフェノール(最終濃度０.５％と
なるように)を加え、所望のデキストラニルグルコン酸
と水酸化鉄ゾルとの複合体を得た。本品は安定した水酸
化鉄ゾルを形成した。その性状を分析したところ、以下
のとおりであった。総鉄塩濃度：１９７mg／ml、粘度：６２cＰ、電導度：
５０mＳ／cm。

【００４４】実施例２デキストラン鉄２００mg Ｆe／ml含有製剤(商品名:アネ
メックス、フジタ製薬)を対照薬剤として用い、ランド
レース系統の幼若豚を用いることにより、参考例６の複
合体の抗貧血活性を比較検討した。該複合体および対照
薬剤（鉄元素として２００mg／頭）を、３日齢の２頭の
豚の臀部にそれぞれ筋肉内投与した。投与２週間後、ヘ
モグロビン量(ＨＧＢ)、ヘマトクリット値(ＨＣＴ)、平
均赤血球容積(ＭＣＶ)および増体重を測定した。その結
果を対照薬剤を１００とする指数で表６に示す。

【００４５】

【表６】項目対照薬剤投与群本発明品投与群ＨＧＢ１００１０９ＨＣＴ１００１１０ＭＣＶ１００１０６増体重１００１１５

【００４６】上記結果より、本発明複合体を投与した場
合、対照薬剤を投与した場合に比べ、試験したいずれの
貧血パラメーターにおいても、よりすぐれた改善がみら
れることがわかった。

【００４７】参考例７シュードグルコノバクター・サッカロケトゲネスＫ５９
１s株の菌体１白金耳を、表７に示す完全培地５mlを含
む試験管(１６mm×１６０mm)に植菌し、３０℃で２日間
振盪培養した。

【００４８】

【表７】完全培地成分ｇ／リットルＤ−ソルビトール２５ペプトン１０酵母エキス１０ pＨ＝６.５（固体培地では寒天２０g／リットルを加える）

【００４９】この培養液１mlを同じ培地５mlを含む試験
管に移植し、５時間振盪培養した。得られた培養液５ml
を無菌的に５℃で１５分間遠心分離(６,５００rpm)して
集菌し、ついで０.０５Ｍトリス−マレイン酸緩衝液(１
０ml，pＨ６.５)に懸濁し、再び遠心分離(６,５００rp
m)した。これを２回繰り返した。得られた洗浄菌体を
０.５mg／mlのＮ−メチル−Ｎ'−ニトロ−Ｎ−ニトロソ
グアニジン(ニトロソグアニジン)を含む上記緩衝液５ml
に懸濁し、３０℃で１時間振盪した。この処理液を５℃
で１５分間遠心分離(６,５００rpm)して菌体を集めた。
上記と同様にして、トリス−マレイン酸緩衝液（１０m
l）で２回洗浄して、ニトロソグアニジン処理菌体を得
た。これを０.８５％食塩水で適当に希釈して、１５ml
の完全培地(固形)を含むプレート(直径９cm)に撒き、３
０℃で５日間培養しコロニーを形成させた。完全培地上
のコロニーを、表８に示す最小培地(固形)プレートにレ
プリカし、３０℃で３日間培養した。

【００５０】

【表８】

【００５１】以上のように培養処理した菌液を適当に希
釈し、表９に示す選択培地(固形)プレートに一枚当り約
５０コロニー形成するように撒いた。

【００５２】

【表９】

【００５３】３０℃で１２日間培養後、コロニーの周囲
に炭酸カルシウムの溶解円が認められない菌株を選択し
た。参考例１と同様の培地及び培養条件で、上記菌株の
菌液を調製し、洗浄菌体を得た。ついで、デキストラン
(分子量１５００、バイオ・ケミカ（Ｂio Ｃhemika）社
(スイス国)製)３０gを水１リットルに溶かし、ついで湿
菌体４０gを水１リットルに懸濁した液を加え、３２℃
で８００rpmで攪拌しながら、空気を１分間６０mlで通
気し、０.１％ＮaＯＨ溶液でpＨ６.３に制御しながら、
２１時間反応させた。本反応液をＨＰＬＣ(分析条件は
参考例２に記載)で分析したところ、Ｒt９.６９のデキ
ストラニルグルコン酸が９６％とＲt１５.１２の未酸化
のデキストランが４％の組成であることが判明した。

【００５４】ついで反応液を遠心分離し、上清を分取
し、メンブランフィルターで濾過除菌し、ついで除菌液
はＩＲ−１２０Ｂ(Ｈ⁺)カラム(１００ml)に通導し、水
(２００ml)で溶出した。溶出液を集め、減圧濃縮後凍結
乾燥し２９gの白色粉末を得た。本品はＨＰＬＣより、
デキストラニルグルコン酸とデキストランの混合物でそ
の組成比は９０:１０であった。ついで、参考例５に記
載した方法で、水酸化鉄ゾルを調製し、その１００mlを
分取し、透析用チューブ、スペクトラ／ポア（ＳＰＥＣ
ＴＲＡ／ＰＯＲ）[スペクトラム・メディカル・インダ
ストリーズ・インコーポレーティッド（ＳＰＥＣＴＲＵ
ＭＭＥＤＩＣＡＬＩＮＤＵＳＴＲＩＥＳＩnc）
社、米国]に移し、一夜透析した。透析後の水酸化第２
鉄ゾル溶液に、上記した白色粉末(デキストラニルグル
コン酸とデキストランの９０:１０の混合物)５gを水５
０mlに溶かした溶液を、３０℃でよく攪拌しながら除々
に加えた。ついで１６％Ｎa₂ＣＯ₃水溶液をゆっくり加
え、pＨ４.３に調整した。ついで３０℃で１時間攪拌
後、１００℃で３０分間オートクレーブ処理をして完全
に溶解させた。ついで、１Ｎ−ＮaＯＨ溶液でpＨ６.４
０に調整した後、エバポレーターで濃縮し、防腐剤とし
てフェノール(最終濃度０.５％となるように)を加え、
所望の複合体を得た。本品は安定な水酸化第２鉄ゾルで
あった。その性状を分析したところ、以下のとおりであ
った。総鉄塩濃度:２３８mg／ml、粘度：２１.９cＰ、電導
度：４７mＳ／cm。

【００５５】実施例３５日齢のランドレース系統の幼若豚を用いることによ
り、参考例７の複合体の抗貧血活性を調べた。該複合体
を、２頭の該豚の臀部に筋肉内投与した（鉄元素として
２００mg／頭）。投与２週間後、ヘモグロビン量(ＨＧ
Ｂ)、ヘマトクリット値(ＨＣＴ)、平均赤血球容積(ＭＣ
Ｖ)および増体重を測定した。その結果を無処理対照群
を１００とする指数で表１０に示す。

【００５６】

【表１０】項目無処置対照群本発明品投与群ＨＧＢ１００３０９ＨＣＴ１００２５９ＭＣＶ１００１４３増体重１００１３３

【００５７】上記の結果から、本発明の複合体の投与に
より、対照群と比較して極めて顕著な貧血症状の改善が
みられることがわかる。

【００５８】参考例８参考例５に記載した方法で、水酸化第２鉄ゾルを調製
し、その１００mlを分取し、透析用チューブ、スペクト
ラ／ポア（ＳＰＥＣＴＲＡ／ＰＯＲ）に移し、一夜透析
した。透析後の水酸化第２鉄ゾル溶液に、デキストラニ
ルグルコン酸(平均分子量１５００のデキストランの酸
化体)５gを水５０mlに溶解させた液を３０℃でよく攪拌
しながら加えた。ついで１６％Ｎa₂ＣＯ₃溶液を極めて
ゆっくり加え、pＨ４.３に調整した。３０℃で１時間攪
拌後、１００℃で３０分間オートクレーブ処理をし、完
全に溶解させ、ついでpＨ６.４０に調整した後、再度透
析チューブ、スペクトラ／ポア（ＳＰＥＣＴＲＡ／ＰＯ
Ｒ）に入れ、一夜透析した。透析内液はエバポレーター
で濃縮し、防腐剤としてフェノール(最終濃度０.５％と
なるように)を加え、所望の安定な水酸化鉄ゾル製剤を
調製した。本品の性状を分析したところ、以下のとおり
であった。総鉄塩濃度:３３１mg／ml、粘度：３８.０cＰ、電導
度：６.６mＳ／cm。

【００５９】参考例９塩化第２鉄・６水和物５００gを１０００mlの水に溶解
させ、この溶液をパソリナＵＳＣ−１型で３０分間超音
波処理し、充分溶解させる。この液を５０００mlのビー
カーに移し、１０％ＮaＨＣＯ₃水溶液１６００mlをよく
撹拌しながら、２５℃、３０ml／分の速度で添加した
後、７０℃で１時間加熱した。この液に１０％ＮaＨＣ
Ｏ₃水溶液約３２００mlをよく撹拌しながら、２５℃、
３０ml／分の速度で添加し、pＨを４.５に調整した。こ
の液をラボモジュールＡＣＰ１０１０型（分画分子量：
１３０００）を用いて約２０分で限外濾過し、濾過後の
水酸化第２鉄ゾル２０００mlを得た。このゾルに水３０
００mlを加えて、前述と同一条件で限外濾過した。この
操作を更に２回繰り返し、脱塩した水酸化第２鉄ゾル１
６００mlを得た（鉄含量実測値：６６.６mg／ml）。こ
のゾル１３０ml（鉄として８６５８mg）に参考例７と同
様の方法で調製したデキストラニルグルコン酸（平均分
子量１５００）８１３０mgを加え、撹拌して溶解させ、
１０％ＮaＨＣＯ₃水溶液約５mlを加え、pＨ４.５に調整
した後、１００℃で３０分間加熱して、黒褐色のデキス
トラニルグルコン酸・鉄ゾルを得た。このゾルをロータ
リーエバポレーターを用い５０℃の水浴上で実測鉄濃度
３０５mg／mlに濃縮し、防腐剤としてフェノール（最終
濃度０.５％）を加えた後、水を加えて目標鉄濃度２５
０mg／mlの液を得た。この液を１２１℃で２０分間、オ
ートクレーブし、所望の安定な水酸化第２鉄ゾル製剤を
調製した。別に粘度を比較するための対照製剤として、
デキストラニルグルコン酸（平均分子量：１５００）の
原料として用いたデキストラン（平均分子量１５００、
バイオ・ケミカ（Ｂio Ｃhemika）社（スイス国）製）
を用いて本参考例と同様な方法でデキストランの水酸化
第２鉄ゾル製剤を調製した。これらの製剤の性状を分析
したところ、以下のとおりであった。デキストラニルグ
ルコン酸を用いる水酸化鉄ゾル製剤：総鉄塩濃度：２５９mg／ml、粘度：３７.６cＰデキストランを用いる水酸化鉄ゾル製剤：総鉄塩濃度：２５２mg／ml、粘度：１１２cＰ

【００６０】

【発明の効果】本発明によれば、デキストランカルボン
酸と鉄塩との複合体を含有する新規動物用抗貧血剤およ
びこれを用いる動物の貧血の予防・治療方法が提供され
る。本発明の動物用抗貧血剤は、豚等の動物の貧血状態
を顕著に改善し、しかも極めて毒性が低く安全である。
特に本発明によれば鉄を安定に高濃度に含有し、しかも
粘度を低く抑えた製剤が製造可能である。従って、本発
明の抗貧血剤は注射剤とした場合も、着色斑や痛みを伴
うことなく安全に幼若豚等を含む動物に投与することが
できる。

フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所Ｃ１２Ｒ 1:38）

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】微生物学的方法により得られるデキスト
ランカルボン酸と鉄塩との複合体を含有することを特徴
とする動物用抗貧血剤。
【請求項２】ヒドロキシメチル基及び／又はヘミアセ
タール水酸基を有するデキストランのヒドロキシメチル
基及び／又は水酸基含有ヘミアセタール部をカルボキシ
ル基に酸化する能力を有するシュードグルコノバクター
属に属する微生物又はその処理物を、かかる基を有する
デキストランに作用させ、対応するデキストランカルボ
ン酸を生成、蓄積せしめ、これを採取して得られるデキ
ストランカルボン酸を用いる請求項１記載の動物用抗貧
血剤。
【請求項３】微生物がシュードグルコノバクター・サ
ッカロケトゲネスである請求項２記載の動物用抗貧血
剤。
【請求項４】微生物がシュードグルコノバクター・サ
ッカロケトゲネスＦＥＲＭＢＰ−１１２８、ＦＥＲＭ
ＢＰ−１１２９、ＦＥＲＭＢＰ−１１３０、ＦＥＲ
ＭＢＰ−１１３１、ＦＥＲＭＢＰ−１１３２または
ＦＥＲＭＢＰ−１１３３である請求項２記載の動物用
抗貧血剤。
【請求項５】鉄塩が水酸化鉄または酸化鉄である請求
項１記載の動物用抗貧血剤。
【請求項６】鉄塩が水酸化第２鉄である請求項５記載
の動物用抗貧血剤。
【請求項７】微生物の処理物が微生物の培養液である
請求項２記載の動物用抗貧血剤。
【請求項８】デキストランカルボン酸が式(II)、(II
I)または(IV)：【化１】 [式中、ｎは１〜５０を示す]で表される請求項１記載の
動物用抗貧血剤。
【請求項９】ｎが１〜１５である請求項８記載の動物
用抗貧血剤。
【請求項１０】複合体が、デキストランカルボン酸に
水酸化第２鉄ゾルを反応させることにより得られる請求
項１記載の動物用抗貧血剤。
【請求項１１】注射剤である請求項１記載の動物用抗
貧血剤。
【請求項１２】筋肉注射剤である請求項１記載の動物
用抗貧血剤。
【請求項１３】子豚に用いる請求項１記載の動物用抗
貧血剤。
【請求項１４】鉄欠乏性貧血に適用する請求項１記載
の動物用抗貧血剤。
【請求項１５】微生物学的方法により得られるデキス
トランカルボン酸と水酸化第２鉄との複合体の抗貧血作
用を奏する有効な量を、貧血の予防または治療を要する
動物に投与することを特徴とする動物の貧血の予防また
は治療方法。
【請求項１６】動物が子豚である請求項１５記載の方
法。