JPH0757198B2 - ジデオキシイノシンの製造方法 - Google Patents
ジデオキシイノシンの製造方法Info
- Publication number
- JPH0757198B2 JPH0757198B2 JP63229585A JP22958588A JPH0757198B2 JP H0757198 B2 JPH0757198 B2 JP H0757198B2 JP 63229585 A JP63229585 A JP 63229585A JP 22958588 A JP22958588 A JP 22958588A JP H0757198 B2 JPH0757198 B2 JP H0757198B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- dideoxyinosine
- dideoxyadenosine
- atcc
- reaction
- producing
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/26—Preparation of nitrogen-containing carbohydrates
- C12P19/28—N-glycosides
- C12P19/38—Nucleosides
- C12P19/40—Nucleosides having a condensed ring system containing a six-membered ring having two nitrogen atoms in the same ring, e.g. purine nucleosides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は2′,3′−ジデオキシアデノシンからの2′,
3′−ジデオキシイノシンの製造方法に関するものであ
る。
3′−ジデオキシイノシンの製造方法に関するものであ
る。
2′,3′−ジデオキシイノシンは強い抗ウイルス作用を
有する為に、インフルエンザ,エイズ等のウイルス性疾
患の治療薬として期待されている。
有する為に、インフルエンザ,エイズ等のウイルス性疾
患の治療薬として期待されている。
従来、2′,3′−ジデオキシイノシン等のジデオキシヌ
クレオシドの合成方法としてはChem.Pharm.Bull.,22,12
8(1974)に知られているようにヌクレオシド類の2′
位あるいは3′位の脱酸素反応が知られているが、反応
に先立ち保護基を導入しなければならないこと、2′
位、3′位は立体障害が大きく反応が起きにくいこと、
ヌクレオシドが過激な条件下では不安定なため、過激な
反応条件や反応剤を用いることができない等の理由によ
り報告例は極めて少なく,また工業的に満足する方法は
まだ確立されていない。
クレオシドの合成方法としてはChem.Pharm.Bull.,22,12
8(1974)に知られているようにヌクレオシド類の2′
位あるいは3′位の脱酸素反応が知られているが、反応
に先立ち保護基を導入しなければならないこと、2′
位、3′位は立体障害が大きく反応が起きにくいこと、
ヌクレオシドが過激な条件下では不安定なため、過激な
反応条件や反応剤を用いることができない等の理由によ
り報告例は極めて少なく,また工業的に満足する方法は
まだ確立されていない。
このような背景の下、本発明者らは2′,3′−ジデオキ
シウリジン又は2′,3′−ジデオキシリボース−1−リ
ン酸から微生物の作用により2′,3′−ジデオキシイノ
シン、2′,3′−ジデオキシアデノシン等の2′,3′−
ジデオキシヌクレオシドを製造する方法を開発している
(特願昭62−149893)。
シウリジン又は2′,3′−ジデオキシリボース−1−リ
ン酸から微生物の作用により2′,3′−ジデオキシイノ
シン、2′,3′−ジデオキシアデノシン等の2′,3′−
ジデオキシヌクレオシドを製造する方法を開発している
(特願昭62−149893)。
しかし、この方法は効果的な方法ではあるが、2′,3′
−ジデオキシイノシンを製造する場合には若干収率が劣
るという欠点が残る。
−ジデオキシイノシンを製造する場合には若干収率が劣
るという欠点が残る。
また、動物臓器由来のアデノシンデアミナーゼを用い
て、2′,3′−ジデオキシアデノシンを2′,3′−ジデ
オキシイノシンに変換する試み(Biohim.Biophis,Act
a.,566(2),259(1979))もなされているが酵素源が
動物由来であるために、コスト面と供給量の両面におい
て、工業的に適していない。
て、2′,3′−ジデオキシアデノシンを2′,3′−ジデ
オキシイノシンに変換する試み(Biohim.Biophis,Act
a.,566(2),259(1979))もなされているが酵素源が
動物由来であるために、コスト面と供給量の両面におい
て、工業的に適していない。
従来、化学法はいずれも反応工程が長く、また収率が低
いという欠点がある。従って本発明の課題は高収率で効
率良くしかも安価に、2′,3′−ジデオキシイノシンを
製造する方法の提供である。
いという欠点がある。従って本発明の課題は高収率で効
率良くしかも安価に、2′,3′−ジデオキシイノシンを
製造する方法の提供である。
酵素を用いて、2′,3′−ジデオキシアデノシンを
2′,3′−ジデオキシイノシンに変換する方法は、先に
示した様に動物臓器由来のアデノシンデアミナーゼにお
いて知られているが、微生物由来の酵素においてはまっ
たく知られていない。一般に動物由来の酵素は、基質特
異性が広く(上記の例ではアデノシンをイノシンに変換
するアデノシンデアミナーゼが、2′,3′−ジデオキシ
アデノシンに作用して2′,3′−ジデオキシイノシンを
生成)、一方、微生物由来の酵素はその基質特異性が狭
いことが知られている。本発明の課題は、2′,3′−ジ
デオキシアデノシンをジデオキシイノシンに変換する酵
素源を工業的に適した微生物に求め、動物酵素と同様
に、基質特異性の広い酵素を生産する微生物を見い出す
か、あるいは、2′,3′−ジデオキシアデノシンに特異
的に作用する酵素を生産する微生物を見い出し、2′,
3′−ジデオキシアデノシンを安価に2′,3′−ジデオ
キシイノシンに変換する方法を確立することにある。
2′,3′−ジデオキシイノシンに変換する方法は、先に
示した様に動物臓器由来のアデノシンデアミナーゼにお
いて知られているが、微生物由来の酵素においてはまっ
たく知られていない。一般に動物由来の酵素は、基質特
異性が広く(上記の例ではアデノシンをイノシンに変換
するアデノシンデアミナーゼが、2′,3′−ジデオキシ
アデノシンに作用して2′,3′−ジデオキシイノシンを
生成)、一方、微生物由来の酵素はその基質特異性が狭
いことが知られている。本発明の課題は、2′,3′−ジ
デオキシアデノシンをジデオキシイノシンに変換する酵
素源を工業的に適した微生物に求め、動物酵素と同様
に、基質特異性の広い酵素を生産する微生物を見い出す
か、あるいは、2′,3′−ジデオキシアデノシンに特異
的に作用する酵素を生産する微生物を見い出し、2′,
3′−ジデオキシアデノシンを安価に2′,3′−ジデオ
キシイノシンに変換する方法を確立することにある。
本発明者はこのような目的を達成すべく鋭意検討の結
果、先に開発した2′,3′−ジデオキシウリジン又は
2′,3′−ジデオキシリボース−1−リン酸から微生物
の作用により、安定かつ安価に生産・供給される2′,
3′−ジデオキシアデノシンを基質に用い、これに微生
物の菌体等を作用させることにより高収率で2′,3′−
ジデオキシイノシンが生産できることを初めて見いだ
し、本発明を完成するに至った。
果、先に開発した2′,3′−ジデオキシウリジン又は
2′,3′−ジデオキシリボース−1−リン酸から微生物
の作用により、安定かつ安価に生産・供給される2′,
3′−ジデオキシアデノシンを基質に用い、これに微生
物の菌体等を作用させることにより高収率で2′,3′−
ジデオキシイノシンが生産できることを初めて見いだ
し、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は、2′,3′−ジデオキシアデノシン
を2′,3′−ジデオキシイノシンに変換する能力を有す
るアクロモバクター,アシネトバクター,エアロモナ
ス,アグロバクテリウム,アルカリゲネス,アースロバ
クター,バチルス,ブレビバクテリウム,セルロモナ
ス,シトロバクター,コリネバクテリウム,エシェリヒ
ア,エンテロバクター,エルビニア,フラボバクテリウ
ム,ハフニア,クレブシエラ,クルイヘラ,ミクロバク
テリウム,ミクロコッカス,ミコプラナ,ノカルディ
ア,プラノコッカス,プロタミノバクター,プロテウ
ス,シュードモナス,リゾビウム,ロドコッカス,サル
モネラ,セラチア,スタフィロコッカス,ストレプトマ
イセス,ビブリオ,キサントモナス属に属する微生物の
培養液、菌体または菌体処理物を2′,3′−ジデオキシ
アデノシンに作用せしめて、2′,3′−ジデオキシイノ
シンを生成・蓄積させることを特徴とする2′,3′−ジ
デオキシイノシンの製造方法に関する。
を2′,3′−ジデオキシイノシンに変換する能力を有す
るアクロモバクター,アシネトバクター,エアロモナ
ス,アグロバクテリウム,アルカリゲネス,アースロバ
クター,バチルス,ブレビバクテリウム,セルロモナ
ス,シトロバクター,コリネバクテリウム,エシェリヒ
ア,エンテロバクター,エルビニア,フラボバクテリウ
ム,ハフニア,クレブシエラ,クルイヘラ,ミクロバク
テリウム,ミクロコッカス,ミコプラナ,ノカルディ
ア,プラノコッカス,プロタミノバクター,プロテウ
ス,シュードモナス,リゾビウム,ロドコッカス,サル
モネラ,セラチア,スタフィロコッカス,ストレプトマ
イセス,ビブリオ,キサントモナス属に属する微生物の
培養液、菌体または菌体処理物を2′,3′−ジデオキシ
アデノシンに作用せしめて、2′,3′−ジデオキシイノ
シンを生成・蓄積させることを特徴とする2′,3′−ジ
デオキシイノシンの製造方法に関する。
もちろん本発明者等が以前に開発した上記方法(2′,
3′−ジデオキシウリジン又は2′,3′−ジデオキシリ
ボース−1−リン酸から直接2′,3′−ジデオキシイノ
シンを製造する方法)を用いても2′,3′−ジデオキシ
イノシンを得ることができるが、2′,3′−ジデオキシ
イノシンの生産に関しては、本発明の方法の方が反応収
率が極めて高く、より有利な方法と言える。
3′−ジデオキシウリジン又は2′,3′−ジデオキシリ
ボース−1−リン酸から直接2′,3′−ジデオキシイノ
シンを製造する方法)を用いても2′,3′−ジデオキシ
イノシンを得ることができるが、2′,3′−ジデオキシ
イノシンの生産に関しては、本発明の方法の方が反応収
率が極めて高く、より有利な方法と言える。
本発明に使用される微生物としては、例えば以下の様な
ものがある。
ものがある。
Acinetobacter lwoffii ATCC−9036 Aeromonas salmonicida ATCC−14174 Alcaligenes faecalis FERMBP−940 Arthrobacter citreus ATCC−11624 Bacillus firmus ACTT−8247 Brevibacterium pusillum ACTT−19096 Cellulomonas flavigena ATCC−491 Citrobacter freundii ATCC−8090 Corynebacterium aquaticum ATCC−14665 Escherichia coli FERM−P 7404 Enterobacter cloacae ATCC−13047 Erwinia carotovora FERM−P 2766 Flavobacterium aquatile ATCC 8375 Hafnia alvei ATCC−9760 Klebsiella pneumoniae ATCC−8308 Kluyvera citrophila FERM−P 8193 Microbacterium imperiable ATCC−8365 Micrococcus luteus ATCC−400 Mycoplana dimorpha ATCC−4279 Nocardia restricta ATCC−14887 Planococcus citreus ATCC−15234 Protaminobacter alboflavus ATCC−8458 Proteus rettgeri FERMBP−941 Pseudomonas oleovorans ATCC−8062 Rhizobium meliloti FERM−P 8197 Rhodococcus rhodochrous ATCC−12974 Salmonella typhimurium FERM−P 9470 Arthobacter ureafaciens FERMBP−2472 Serratia grimesii ATCC−14460 Staphyrococcus epidermidis ATCC−155 Streptomyces flavovirens IFO−3197 Vibrio metschnikovii ATCC−7708 Xantomonas citri FERM−P 3396 また、本発明に用いられる微生物は、2′,3′−ジデオ
キシアデノシンを脱アミノ化させて2′,3′−ジデオキ
シイノシンを生成するものであれば上記以外の微生物で
も特に限定されない。
キシアデノシンを脱アミノ化させて2′,3′−ジデオキ
シイノシンを生成するものであれば上記以外の微生物で
も特に限定されない。
本微生物を培養することにより2′,3′−ジデオキシア
デノシンを2′,3′−ジデオキシイノシンに変換せしめ
る方法としては培養当初より2′,3′−ジデオキシアデ
ノシンを含有する培地に本発明の微生物を培養してもよ
いし、また培養途中に2′,3′−ジデオキシアデノシン
を培地に添加してもよい。
デノシンを2′,3′−ジデオキシイノシンに変換せしめ
る方法としては培養当初より2′,3′−ジデオキシアデ
ノシンを含有する培地に本発明の微生物を培養してもよ
いし、また培養途中に2′,3′−ジデオキシアデノシン
を培地に添加してもよい。
本微生物の培養のために用いられる培地は2′,3′−ジ
デオキシアデノシンを含むほかは通常の炭素源,窒素
源,無機イオン更に必要ならば有機栄養源を含む通常の
培地である。
デオキシアデノシンを含むほかは通常の炭素源,窒素
源,無機イオン更に必要ならば有機栄養源を含む通常の
培地である。
炭素源としては、グルコース等の炭水化物、グリセロー
ル等のアルコール類、有機酸その他が適宜使用される。
窒素源としては、アンモニアガス,アンモニア水、アン
モニウム塩,その他が用いられる。無機イオンとして
は、マグネシウムイオン,燐酸イオン,カリウムイオ
ン,鉄イオン,マンガンイオン,その他が必要に応じ適
宜使用される。有機栄養源としては、ビタミン,アミノ
酸等及びこれらを含有する酵母エキス,ペプトン,肉エ
キス,コーンスティープリカー,カゼイン分解物その他
が適宜用いられる。
ル等のアルコール類、有機酸その他が適宜使用される。
窒素源としては、アンモニアガス,アンモニア水、アン
モニウム塩,その他が用いられる。無機イオンとして
は、マグネシウムイオン,燐酸イオン,カリウムイオ
ン,鉄イオン,マンガンイオン,その他が必要に応じ適
宜使用される。有機栄養源としては、ビタミン,アミノ
酸等及びこれらを含有する酵母エキス,ペプトン,肉エ
キス,コーンスティープリカー,カゼイン分解物その他
が適宜用いられる。
培養は好気的条件下に、pH5ないし8、温度25ないし40
℃の適当な範囲に制御しつつ行えば望ましい結果が得ら
れる。
℃の適当な範囲に制御しつつ行えば望ましい結果が得ら
れる。
かくして1ないし10日間も培養を行えば、2′,3′−ジ
デオキシアデノシンは2′,3′−ジデオキシイノシンに
効率よく変換される。
デオキシアデノシンは2′,3′−ジデオキシイノシンに
効率よく変換される。
一方、本微生物の培養液または菌体または菌体処理物
を、水溶液中にて2′,3′−ジデオキシアデノシンと接
触せしめて作用せしめる場合には、酵素源として、本酵
素を含む微生物菌体、及びそれを含む培養液等が使用で
きる他に、これらの処理物等も使用できる。処理物とし
ては、アセトン乾燥物、磨砕物,超音波処理物,界面活
性剤あるいはトルエン等の処理物,リゾチーム等の酵素
処理物,菌体より抽出した後、塩析,カラムクロマト等
により分離した蛋白画分,本反応の酵素活性を有する蛋
白画分の精製物,更にこれら菌体およびその処理物の固
定化物等何れもが利用できる。
を、水溶液中にて2′,3′−ジデオキシアデノシンと接
触せしめて作用せしめる場合には、酵素源として、本酵
素を含む微生物菌体、及びそれを含む培養液等が使用で
きる他に、これらの処理物等も使用できる。処理物とし
ては、アセトン乾燥物、磨砕物,超音波処理物,界面活
性剤あるいはトルエン等の処理物,リゾチーム等の酵素
処理物,菌体より抽出した後、塩析,カラムクロマト等
により分離した蛋白画分,本反応の酵素活性を有する蛋
白画分の精製物,更にこれら菌体およびその処理物の固
定化物等何れもが利用できる。
基質として使用する2′,3′−ジデオキシアデノシンの
濃度は1−5000mM程度が適当であり、反応開始時に全量
添加してもよいし、反応途中に分割添加してもよい。こ
の基質を含む水溶液に微生物の培養液,菌体,または菌
体処理物を加え、pHを3−10、好ましくは4−9の範囲
に調整した後、5−70℃、好ましくは20−60℃で静置あ
るいはかくはんしながら10分−10日間保持すると反応が
進行し、反応液中に目的とする2′,3′−ジデオキシイ
ノシンが著量蓄積される。尚、本反応はアンモニアが生
成する反応である為、反応の進行と共に反応液のpHが上
昇するので酸を用いてpHの上昇をおさえれば更に良い結
果を得ることができる。使用される酸は、塩酸,燐酸,
硫酸,硝酸等の鉱酸,蟻酸,酢酸,クエン酸等の有機酸
を始め、反応を大きく阻害しないものであれば何を用い
ても良い。
濃度は1−5000mM程度が適当であり、反応開始時に全量
添加してもよいし、反応途中に分割添加してもよい。こ
の基質を含む水溶液に微生物の培養液,菌体,または菌
体処理物を加え、pHを3−10、好ましくは4−9の範囲
に調整した後、5−70℃、好ましくは20−60℃で静置あ
るいはかくはんしながら10分−10日間保持すると反応が
進行し、反応液中に目的とする2′,3′−ジデオキシイ
ノシンが著量蓄積される。尚、本反応はアンモニアが生
成する反応である為、反応の進行と共に反応液のpHが上
昇するので酸を用いてpHの上昇をおさえれば更に良い結
果を得ることができる。使用される酸は、塩酸,燐酸,
硫酸,硝酸等の鉱酸,蟻酸,酢酸,クエン酸等の有機酸
を始め、反応を大きく阻害しないものであれば何を用い
ても良い。
反応液より2′,3′−ジデオキシイノシンを採取する方
法は、水等の溶媒に対する溶解度差を利用する方法、イ
オン交換樹脂や吸着樹脂を用いる方法など通常の精製法
で行うことができる。
法は、水等の溶媒に対する溶解度差を利用する方法、イ
オン交換樹脂や吸着樹脂を用いる方法など通常の精製法
で行うことができる。
また2′,3′−ジデオキシイノシンの定量は常法に従っ
て高速液体クロマトグラフィーで行った。以下、実施例
に従って本発明を更に詳細に説明する。
て高速液体クロマトグラフィーで行った。以下、実施例
に従って本発明を更に詳細に説明する。
実施例1 5g/dlの2′,3′−ジデオキシアデノシンまたはアデノ
シンを含む1MのTris−HCl緩衝液(pH7.5)10mlに、各々
シグマ社製アデノシンデアミナーゼ(タイプX,仔牛脾臓
由来)8ユニットまたは天野製薬製デアミザイム (糸
状菌由来)50mgまたは第1表に示した微生物の洗浄菌体
(微生物の培養条件は次の実施例2と同様)200mgを添
加し、30℃にて1時間反応させた。
シンを含む1MのTris−HCl緩衝液(pH7.5)10mlに、各々
シグマ社製アデノシンデアミナーゼ(タイプX,仔牛脾臓
由来)8ユニットまたは天野製薬製デアミザイム (糸
状菌由来)50mgまたは第1表に示した微生物の洗浄菌体
(微生物の培養条件は次の実施例2と同様)200mgを添
加し、30℃にて1時間反応させた。
この時生成した2′,3′−ジデオキシイノシンまたはイ
ノシンの量を高速液体クロマトグラフィーで測定し、第
1表にその相対値を示した。
ノシンの量を高速液体クロマトグラフィーで測定し、第
1表にその相対値を示した。
ここで、市販品である天野製薬製の微生物由来のデアミ
ザイム を用いた場合は、2′,3′−ジデオキシアデノ
シンを基質とした時にはアデノシンを基質とした時と比
較して、ほとんど反応性がなかった。これに対し、本発
明の微生物を用いた場合には、シグマ社製動物由来酵素
と同様に、アデノシンを基質に用いた場合よりも、
2′,3′−ジデオキシアデノシンを用いた場合の方が、
反応性が高かった。
ザイム を用いた場合は、2′,3′−ジデオキシアデノ
シンを基質とした時にはアデノシンを基質とした時と比
較して、ほとんど反応性がなかった。これに対し、本発
明の微生物を用いた場合には、シグマ社製動物由来酵素
と同様に、アデノシンを基質に用いた場合よりも、
2′,3′−ジデオキシアデノシンを用いた場合の方が、
反応性が高かった。
なお、Sarcina albida FERM−P 7048の場合において、
2′,3′−ジデオキシアデノシンを2′,3′−ジデオキ
シイノシンに変換する反応を触媒する酵素をDEAE−Toyo
pearlを用いて部分精製して性質を検討した結果、アデ
ノシンをイノシンにするが、2′,3′−ジデオキシイア
デノシンには作用しない酵素と、2′,3′−ジデオキシ
アデノシンを2′,3′−ジデオキシイノシンに変換する
がアデノシンもイノシンに変換できる酵素の2つが含ま
れている事が判明した。
2′,3′−ジデオキシアデノシンを2′,3′−ジデオキ
シイノシンに変換する反応を触媒する酵素をDEAE−Toyo
pearlを用いて部分精製して性質を検討した結果、アデ
ノシンをイノシンにするが、2′,3′−ジデオキシイア
デノシンには作用しない酵素と、2′,3′−ジデオキシ
アデノシンを2′,3′−ジデオキシイノシンに変換する
がアデノシンもイノシンに変換できる酵素の2つが含ま
れている事が判明した。
実施例2 酵母エキス0.5g/dl,ペプトン1.0g/dl,肉エキス1.0g/dl
およびNaCl0.5g/dlを含む培地(pH7.0)50mlを500ml容
肩付きフラスコに分注し殺菌した。この培地に、ブイヨ
ン寒天培地にて30℃、16時間前培養した第2表に示す微
生物を1白金耳ずつ接種し、30℃にて16時間振とう培養
した。得られた培養液より菌体を遠心分離にて分離した
後、0.05M Tris HCl緩衝液(pH7.2)で洗浄し、更に遠
心分離することにより洗浄菌体を調製した。
およびNaCl0.5g/dlを含む培地(pH7.0)50mlを500ml容
肩付きフラスコに分注し殺菌した。この培地に、ブイヨ
ン寒天培地にて30℃、16時間前培養した第2表に示す微
生物を1白金耳ずつ接種し、30℃にて16時間振とう培養
した。得られた培養液より菌体を遠心分離にて分離した
後、0.05M Tris HCl緩衝液(pH7.2)で洗浄し、更に遠
心分離することにより洗浄菌体を調製した。
上記洗浄菌体を1g/dlの2′,3′−ジデオキシアデノシ
ンを含む0.05M Tris−HCl緩衝液(pH7.2)に5g/dlにな
るように添加し、30℃、2時間反応させた。この時に生
成した2′,3′−ジデオキシイノシン量を第2表に示し
た。
ンを含む0.05M Tris−HCl緩衝液(pH7.2)に5g/dlにな
るように添加し、30℃、2時間反応させた。この時に生
成した2′,3′−ジデオキシイノシン量を第2表に示し
た。
〔発明の効果〕 本発明によれば安価に供給される微生物及びその含有物
もしくはその処理物を作用させることにより効率よく、
しかも短時間で2′,3′−ジデオキシアデノシンから
2′,3′−ジデオキシイノシンを製造することができ
る。
もしくはその処理物を作用させることにより効率よく、
しかも短時間で2′,3′−ジデオキシアデノシンから
2′,3′−ジデオキシイノシンを製造することができ
る。
フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 FI 技術表示箇所 C12R 1:07 1:13 1:15 1:19 1:18 1:20 1:22 1:265 1:365 1:38 1:41 1:42 1:425 1:45 1:465 1:63 1:64) 微生物の受託番号 FERM P−8197 微生物の受託番号 FERM P−9470 微生物の受託番号 FERM BP−2472 微生物の受託番号 FERM P−3396 (72)発明者 入江 康夫 神奈川県川崎市川崎区鈴木町1―1 味の 素株式会社中央研究所内 審査官 谷口 博
Claims (1)
- 【請求項1】2′,3′−ジデオキシアデノシンを2′,
3′−ジデオキシイノシンに変換する能力を有するアシ
ネトバクター、エアロモナス、アルカリゲネス、アース
ロバクター、バチルス、ブレビバクテリウム、セルロモ
ナス、シトロバクター、コリネバクテリウム、エシェリ
ヒア、エンテロバクター、エルビニア、フラボバクテリ
ウム、ハフニア、クレブシエラ、クルイヘラ、ミクロバ
クテリウム、ミクロコッカス、ミコプラナ、ノカルディ
ア、プラノコッカス、プロタミノバクター、プロテウ
ス、シュードモナス、リゾビウム、ロドコッカス、サル
モネラ、セラチア、スタフィロコッカス、ストレプトマ
イセス、ビブリオ、キサントモナス属に属する微生物の
培養液、菌体または菌体処理物を2′,3′−ジデオキシ
アデノシンに作用せしめて、2′,3′−ジデオキシイノ
シンを生成・蓄積させることを特徴とする2′,3′−ジ
デオキシイノシンの製造方法。
Priority Applications (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP63229585A JPH0757198B2 (ja) | 1987-10-07 | 1988-09-13 | ジデオキシイノシンの製造方法 |
US07/254,584 US4970148A (en) | 1987-10-07 | 1988-10-07 | Method of producing 2',3'-dideoxyinosine |
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP62-253382 | 1987-10-07 | ||
JP25338287 | 1987-10-07 | ||
JP32779087 | 1987-12-24 | ||
JP62-327790 | 1987-12-24 | ||
JP63229585A JPH0757198B2 (ja) | 1987-10-07 | 1988-09-13 | ジデオキシイノシンの製造方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH02291291A JPH02291291A (ja) | 1990-12-03 |
JPH0757198B2 true JPH0757198B2 (ja) | 1995-06-21 |
Family
ID=27331547
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP63229585A Expired - Lifetime JPH0757198B2 (ja) | 1987-10-07 | 1988-09-13 | ジデオキシイノシンの製造方法 |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4970148A (ja) |
JP (1) | JPH0757198B2 (ja) |
Families Citing this family (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2619710B2 (ja) * | 1989-02-27 | 1997-06-11 | 日本製紙 株式会社 | 2′,3′−ジデオキシプリンヌクレオシド類の製造方法 |
US5221611A (en) * | 1991-06-19 | 1993-06-22 | Sigma Chemical Company | Ddi immunoassays, derivatives, conjugates and antibodies |
JP3799784B2 (ja) * | 1997-11-14 | 2006-07-19 | 味の素株式会社 | 2,6−ジアミノプリン−2’−デオキシリボシドおよび2’−デオキシグアノシンの製造法 |
US20080016318A1 (en) * | 1999-04-09 | 2008-01-17 | Dave Stuttard | Parallel data processing apparatus |
US20040175804A1 (en) * | 2003-03-04 | 2004-09-09 | Skonezny Paul M. | Process for preparing dideoxyinosine using adenosine deaminase enzyme |
WO2006080326A1 (ja) * | 2005-01-25 | 2006-08-03 | Ajinomoto Co., Inc. | ヌクレオシド誘導体の製造方法 |
Family Cites Families (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3111459A (en) * | 1959-10-19 | 1963-11-19 | Ajinomoto Kk | Method for preparation of inosine |
CH464211A (de) * | 1965-05-14 | 1968-10-31 | Takeda Chemical Industries Ltd | Verfahren zur Herstellung von Inosin |
US3634193A (en) * | 1965-06-10 | 1972-01-11 | Takeda Chemical Industries Ltd | Method for the production of inosine and 5{40 -inosinic acid |
IT1001452B (it) * | 1965-06-11 | 1976-04-20 | Ajinomoto Kk | Metodo per produrre inosina mediante fermentazione |
GB1175979A (en) * | 1965-12-28 | 1970-01-01 | Takeda Chemical Industries Ltd | A method for the Production of 5'-Inosinic Acid and Inosine |
US3616212A (en) * | 1967-09-27 | 1971-10-26 | Kyowa Hakko Kogyo Kk | Process for production of inosine and 5'-guanylic acid nucleotides |
JPS552956B2 (ja) * | 1974-03-30 | 1980-01-23 | ||
JPS5894397A (ja) * | 1981-11-27 | 1983-06-04 | Takeda Chem Ind Ltd | イノシンおよびグアノシンの製造法 |
JPS59175895A (ja) * | 1983-03-28 | 1984-10-04 | Kikkoman Corp | サイクリツク−3′,5′−イノシン酸の製造法 |
JP2677384B2 (ja) * | 1988-06-30 | 1997-11-17 | オルガノ株式会社 | イオン交換装置の再生廃液の処理方法 |
-
1988
- 1988-09-13 JP JP63229585A patent/JPH0757198B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1988-10-07 US US07/254,584 patent/US4970148A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US4970148A (en) | 1990-11-13 |
JPH02291291A (ja) | 1990-12-03 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EP0093401B1 (en) | Process for producing ribavirin | |
GB2042531A (en) | Process for preparing D-???-amino acids | |
JPH0757198B2 (ja) | ジデオキシイノシンの製造方法 | |
JP3928676B2 (ja) | 2’−デオキシアデノシン、2’−デオキシグアノシンの製造法 | |
JP3799784B2 (ja) | 2,6−ジアミノプリン−2’−デオキシリボシドおよび2’−デオキシグアノシンの製造法 | |
JP3834960B2 (ja) | D−アミノ酸の製造方法 | |
JPH0763385B2 (ja) | チミジンの製造方法 | |
JP2695180B2 (ja) | アスコルビン酸−2−リン酸の製造法 | |
USH1453H (en) | N-acetyl-D-glucosamine deacetylase and a process for preparing the same | |
JP2800187B2 (ja) | 5−メチルウリジンの製造方法 | |
JP4173815B2 (ja) | 2’−デオキシグアノシンの製造法 | |
JP3992073B2 (ja) | 2’−デオキシアデノシン、2’−デオキシグアノシンの製造法 | |
JPH0789948B2 (ja) | 2▲’▼−デオキシシチジンの製造方法 | |
JPS63279798A (ja) | S−アデノシルメチオニンの製造法 | |
JPH0720433B2 (ja) | ウリジンの製造方法 | |
JPH0614772A (ja) | 新規エステル分解酵素aおよびその製造方法 | |
JP2899071B2 (ja) | L―α―アラニンの製造法 | |
JPS5813394A (ja) | 1−β−D−リボフラノシル−4,5−置換イミダゾ−ルの製造法 | |
JPS6154397B2 (ja) | ||
JPS6150597B2 (ja) | ||
JPH01257488A (ja) | 2’,3’−ジデオキシヌクレオシドの製造方法 | |
JPH038760B2 (ja) | ||
JPS58134997A (ja) | γ−グルタミル−α−アミノ−n−ブチリル−グリシンの製造法 | |
JPH0329395B2 (ja) | ||
JPH0353916B2 (ja) |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
EXPY | Cancellation because of completion of term | ||
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090621 Year of fee payment: 14 |