JPH0751092A - 光学活性ピロリジン誘導体の製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 光学活性な４−メルカプト−２−ピロリドン
（又は−２−チオピロリドン）誘導体の新規な製造法を
提供する。 【構成】 一般式〔ＩＩ〕 【化２０】 （式中、Ｒ¹ はアルキル基又は置換基を有していてもよ
いフェニル基、Ｒ² は水素原子又はアシル基、Ｘは酸素
原子又は硫黄原子を表す。）で示されるピロリジン誘導
体を、酵素的に不斉還元することを特徴とする一般式
〔Ｉ〕 【化２１】 （式中、記号は前記と同一意味を有する。）又は一般式
〔ＩＩ〕 【化２２】 （式中、記号は前記と同一意味を有する。）で示される
化合物の光学活性体の製法。該化合物は、各種医薬品、
例えばカルバペネム系抗菌薬の合成中間体として重要で
ある。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は光学活性ピロリジン誘導
体の新規製法に関する。

【０００２】

【従来の技術】２位にオキソ基またはチオキソ基を有す
る光学活性４−メルカプトピロリジン化合物は、各種医
薬品、例えばカルバペネム系抗菌薬の合成中間体として
有用な化合物である。例えばその２−オキソ体は、２−
〔ピロリジン−２−オン−４−イルチオ〕−６−〔１−
ヒドロキシエチル〕−１−メチルカルバペン−２−エム
−３−カルボン酸の製造用中間体として公知である（特
開平２−４９７８３号）。また対応２−チオキソ体も同
様にカルバペネム系抗菌薬の合成中間体として用いられ
ている（特開平４−２７９５８８号）。

【０００３】上記合成中間体の製法としては、例えば、
光学活性４−ヒドロキシ−２−ピロリドンとチオ酢酸と
をジエチルアゾジカルボキシレート及びトリフェニルホ
スフィンの存在下反応させて４位ヒドロキシ基をチオー
ル基に変換し、必要に応じて更に２位オキソ基をチオキ
ソ基に変換させる方法が知られている（特開平２−４９
７８３号、特開平４−２７９５８８号）。しかし、この
既知方法は、使用するジエチルアゾジカルボキシレート
が高価であり、しかも爆発性がある為、実験室的な小規
模合成には用いることができても、工業的な大規模合成
に使用しがたいという難点があり、又光学活性４−ヒド
ロキシ−２−ピロリドンの調製にも多段階を要するた
め、さらに工業的に有利な製法が求められていた。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、２位にオキ
ソ基又はチオキソ基を有する光学活性ピロリジン誘導体
を、従来法に較べて工業的に有利に製造しうる新規製法
を提供するものである。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明によれば、一般式
〔Ｉ〕

【０００６】

【化１０】

【０００７】（式中、Ｒ² は水素原子又はアシル基、Ｘ
は酸素原子又は硫黄原子を表す。）で示される４−メル
カプトピロリジン誘導体の光学活性体は、一般式〔Ｉ
Ｉ〕

【０００８】

【化１１】

【０００９】（式中、Ｒ¹ はアルキル基又は置換基を有
していてもよいフェニル基、他の記号は前記と同一意味
を有する。）で示されるラセミ型ピロリジン誘導体に、
該誘導体のチオエステル結合を不斉加水分解又は不斉加
アルコール分解する能力を有する酵素を作用させて一方
の光学活性体を加水分解又は加アルコール分解すること
により製造することができる。

【００１０】本発明の酵素反応は、適当な溶媒中、基質
となるピロリジン誘導体〔ＩＩ〕と該誘導体のチオエス
テル結合を不斉加水分解又は不斉加アルコール分解する
能力を有する酵素とを接触させることにより実施でき
る。

【００１１】本発明において、化合物〔ＩＩ〕の例とし
ては、Ｒ¹ が炭素数１〜２０のアルキル基（例えば、メ
チル基、エチル基、ｎ−プロピル基、ｎ−ブチル基、ｎ
−ペンチル基、ｎ−ヘキシル基、ｎ−ヘプチル基、ｎ−
オクチル基、ｎ−ノニル基、ｎ−デカニル基、ペンタデ
カニル基、ヘプタデカニル基、イソプロピル基、イソブ
チル基、イソペンチル基、ｔ−ブチル基等）又はフェニ
ル基（炭素数１〜５のアルキル基あるいはハロゲン原子
等の置換基を有していてもよい）であり、Ｒ²が水素原
子又はアルキルカルボニル基、置換されていてもよいフ
ェニルカルボニル基等の炭素数１〜１０のアシル基（例
えば、ホルミル基、アセチル基、プロピオニル基、ブチ
リル基、イソブチリル基、バレリル基、イソバレリル
基、ヘキサノイル基、ヘプタノイル基、トリメチルアセ
チル基、ベンゾイル基等）である化合物があげられる。

【００１２】本発明において、酵素反応の基質となるピ
ロリジン誘導体〔ＩＩ〕としては、（Ｒ）体及び（Ｓ）
体を等量含むものだけでなく、これらの活性体を共に含
むものであればいずれも用いることができる。

【００１３】本発明に使用し得る酵素としては、化合物
〔ＩＩ〕におけるチオエステル結合を不斉加水分解又は
不斉加アルコール分解する能力を有するものであればよ
く、例えば、リパーゼ、エステラーゼ又はプロテアーゼ
と呼ばれる一群の酵素があげられる。かかる酵素は、微
生物由来のものであっても、動物細胞や植物細胞から公
知方法により抽出したものであってもよいが、とりわけ
微生物由来のものが好ましい。

【００１４】本発明で用いる酵素が微生物由来のもので
ある場合、これら酵素を生産する微生物としては、真
菌、細菌、放線菌等があげられ、例えば、真菌として
は、アスペルギルス属、ベアウベリア属、ゲオトリカム
属、ペニシリウム属、カンジダ属、リゾプス属、ムコー
ル属、フミコーラ属に属する微生物があげられ、細菌と
しては、アセトバクター属、バシルス属、ブレビバクテ
リウム属、コリネバクテリウム属、シュードモナス属、
ロドコッカス属、セラチア属、クロモバクテリウム属に
属する微生物があげられ、又放線菌としては、ノカルデ
ィア属、ストレプトマイセス属に属する微生物があげら
れる。

【００１５】かかる微生物の具体例としては、例えば、
アスペルギルス フラバス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ
ｆｌａｖｕｓ）ＩＦＯ ５８３９、アスペルギルス ウ
サミー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｕｓａｍｉｉ）ＩＦ
Ｏ ４３８８、ベアウベリアバシアーナ（Ｂｅａｕｖｅ
ｒｉａ ｂａｓｓｉａｎａ）ＡＴＣＣ ７１５９、ゲオ
トリカム カンディダム（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ ｃａ
ｎｄｉｄｕｍ）ＩＦＯ ４５９８、ペニシリウム オキ
サリカム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｏｘａｌｉｃｕ
ｍ）ＩＦＯ ５７４８、アセトバクター パステウリア
ヌス（Ａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｐａｓｔｅｕｒｉａｎ
ｕｓ）ＩＦＯ ３２２３、バシルス リヘニホルミス
（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）Ａ
ＴＣＣ １４５８０、バシルス プミラス（Ｂａｃｉｌ
ｌｕｓ ｐｕｍｉｌｕｓ）ＩＦＯ１２０８６、同 ＩＦ
Ｏ １２０８７、同 ＩＦＯ １２０８９、バシルス
サブティリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）
ＡＴＣＣ ６６３３、ブレビバクテリウム フラバム
（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｆｌａｖｕｍ）ＡＴ
ＣＣ １４０６７、コリネバクテリウム グルタミカム
（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｇｌｕｔａｍｉｃ
ｕｍ）ＡＴＣＣ １３７６１、シュードモナスアルギノ
ーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓ
ａ）ＡＴＣＣ１０１４５、同 ＡＴＣＣ ７７００、シ
ュードモナス プチダ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｕ
ｔｉｄａ）ＡＴＣＣ １２６３３、同 ＡＴＣＣ １７
４２６、同 ＩＦＯ １２９９６、ロドコッカス スピ
ーシーズ（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ ｓｐ．）ＡＴＣＣ
１５５９２、ロドコッカス ロドクロウス（Ｒｈｏｄ
ｏｃｏｃｃｕｓ ｒｈｏｄｏｃｈｒｏｕｓ）ＡＴＣＣ
２９６７０、セラチアマルセッセンス（Ｓｅｒｒａｔｉ
ａ ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ）ＡＴＣＣ ２１０７４、同
ＦＥＲＭ ＢＰ−４８７、ノカルディア アステロイ
デス（Ｎｏｃａｒｄｉａ ａｓｔｅｒｏｉｄｅｓ）ＩＦ
Ｏ ３４２４、ストレプトマイセス スカビエス（Ｓｔ
ｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｓｃａｂｉｅｓ）ＩＦＯ ３１
１１等があげられる。

【００１６】これらの微生物は、野性株、変異株であっ
てもよく、さらにはこれらの微生物から遺伝子組換え、
細胞融合等の生物工学的手法により誘導されるものであ
ってもよい。

【００１７】又、本発明に使用し得る酵素は市販の酵素
でもよく、かかる市販の酵素としては、例えば、リパー
ゼＯＦ（カンジダ シリンドラシア由来、名糖産業
製）、リパーゼＭＹ（カンジダ シリンドラシア由来、
名糖産業製）、リパーゼＡＹ（カンジダ シリンドラシ
ア由来、天野製薬製）、リパーゼＡ（アスペルギルス
ニガー由来、天野製薬製）、デナプシン１０Ｐ（アスペ
ルギルス ニガー由来、ナガセ生化学工業製）、プロテ
アーゼＭ（アスペルギルス オリゼー由来、天野製薬
製）、アルカラーゼ２．５Ｌ（バシルス リヘニホルミ
ス由来、デンマーク国、ノボ ノルディスク製）、エス
ペラーゼ８．０Ｌ（バシルス スピーシーズ由来、デン
マーク国、ノボ ノルディスク製）、ＸＰ−４１５（リ
ゾプス デレマー由来、ナガセ生化学工業製）、リパー
ゼ サイケン１００（リゾプス ジャポニカス由来、ナ
ガセ生化学工業製）、ニューラーゼ（リゾプス ニベウ
ス由来、天野製薬製）、リパーゼＰ（シュードモナス
スピーシーズ由来、天野製薬製）、リパーゼＰ（シュー
ドモナス スピーシーズ由来、ナガセ生化学工業製）、
リパーゼＣＥＳ（シュードモナス スピーシーズ由来、
天野製薬製）、リパーゼＹＳ（シュードモナス スピー
シーズ由来、天野製薬製）、リパーゼＧ（ペニシリウム
シクロピウム由来、天野製薬製）、リパーゼＲ（ペニ
シリウム ロクエフォルティ由来、天野製薬製）、リパ
ーゼＣＥ（フミコーラ ランギノーサ由来、天野製薬
製）、パラターゼＭ（ムコール ミーヘイ由来、デンマ
ーク国、ノボノルディスク製）、リパーゼＧＣ（ゲオト
リカム カンディダム由来、天野製薬製）、リパーゼＬ
Ｐ（クロモバクテリウム ビスコサム由来、旭化成工業
製）、ＳＰ３９８（デンマーク国、ノボ ノルディスク
製）等があげられる。

【００１８】本発明で使用する酵素を微生物の培養によ
り得る場合、微生物の培養方法は常法に従い、微生物を
通常この分野において用いる培地、例えば、慣用の炭素
源、窒素源及び無機塩類含有培地中、常温ないし加温下
（好ましくは約２０〜４０℃）、かつ好気的条件下、ｐ
Ｈ２〜８で培養すればよい。また、微生物を培養し、酵
素を分離・採取または精製する方法の一例としては、特
開平４−２２８０７０の記載に従うこともできる。

【００１９】本発明方法において、酵素の使用形態とし
ては、酵素それ自体の他、該酵素を生産する能力を有す
る微生物の培養液（固体培地でもよい）、該培養液の処
理物、該培養液から慣用の方法により分離した菌体又は
該菌体の処理物のいずれの形態でも用いることができ
る。

【００２０】微生物菌体の処理物としては、上記微生物
の凍結乾燥菌体、アセトン乾燥菌体、菌体自己消化物、
菌体抽出物、菌体磨砕物、菌体の超音波処理物等があげ
られる。

【００２１】更に本発明で用いる酵素、微生物菌体、菌
体処理物は、例えば、ポリアクリルアミド法、含硫多糖
ゲル法（カラギーナンゲル法等）、アルギン酸ゲル法、
寒天ゲル法、光架橋性樹脂、ポリエチレングリコール等
の公知方法により固定化して使用することができる。

【００２２】本発明の酵素反応において、基質となる化
合物〔ＩＩ〕の濃度は、約０．０１〜２０％、とりわけ
０．０５〜１０％が好ましく、反応は、常温ないし加温
下、好ましくは１０〜５０℃、とりわけ２５〜４０℃で
好適に進行する。又反応に際しては、反応液のｐＨが７
以下、とりわけｐＨ５．０〜６．０になるように調整す
るのが好ましい。酵素反応に用いる溶媒としては、水或
いはアルカノール（例えば、メタノール、エタノール、
ｎ−プロパノール、ｎ−ブタノール、ｎ−オクタノール
等）を用いることができるが、化合物〔ＩＩ〕の溶解
度、及び安定性に応じて、水又はアルカノール単独で用
いるだけでなく、水或いはアルカノールに有機溶媒を加
えたものも用いることができる。かかる有機溶媒として
は、例えば、ベンゼン、ｎ−ヘキサン、イソオクタン、
ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、トルエ
ン、シクロヘキサン、四塩化炭素、塩化メチレン、酢酸
エチル、酢酸メチル、アセトン、ジメチルホルムアミ
ド、ジオキサン、テトラヒドロフラン、アセトニトリ
ル、ピリジンや、メタノール、エタノール等の低級アル
カノール等があげられる。その際、化合物〔ＩＩ〕の添
加方法は最初に一括して添加してもよく、あるいは反応
中数回に分割して添加してもよい。

【００２３】本発明に使用し得る酵素の不斉加水分解又
は不斉加アルコール分解能力は、基質の種類や反応条件
（溶媒の種類等）により変化するが、好ましい酵素をあ
げるとすれば、例えば、カンジダ シリンドラシア、シ
ュードモナス スピーシーズ、アスペルギルス ニガ
ー、アスペルギルス オリゼー、セラチア マルセッセ
ンス、コリネバクテリウム グルタミカム、ゲオトリカ
ム カンディダム、バシルス サブティリス、ロドコッ
カス ロドクロウス、ムコール ミーヘイ、フミコーラ
ランギノーサ等の微生物由来の酵素があげられる。

【００２４】なお、本発明では、使用する酵素を適宜選
択することにより、化合物〔Ｉ〕の４位の立体配置にお
ける２種類の光学活性体、即ち（Ｒ）体及び（Ｓ）体の
うちいずれか一方を選択的に製造することができる。

【００２５】例えば、Ｒ² がアシル基である化合物
〔Ｉ〕の（Ｒ）体を得たいとき（Ｒ² がアシル基である
化合物〔ＩＩ〕の（Ｓ）体を得たいとき）は、該化合物
〔ＩＩ〕の（Ｒ）体を選択的に分解する酵素を用いれば
よく、かかる市販の酵素の具体例としては、例えば、リ
パーゼＯＦ（カンジダ シリンドラシア由来、名糖産業
製）、リパーゼＭＹ（カンジダ シリンドラシア由来、
名糖産業製）、リパーゼＡＹ（カンジダ シリンドラシ
ア由来、天野製薬製）、リパーゼＰ（シュードモナス
スピーシーズ由来、天野製薬製）、リパーゼＣＥＳ（シ
ュードモナス スピーシーズ由来、天野製薬製）、リパ
ーゼＣＥ（フミコーラ ランギノーサ由来、天野製薬
製）、パラターゼＭ（ムコール ミーヘイ由来、デンマ
ーク国、ノボノルディスク製）、リパーゼＧＣ（ゲオト
リカム カンディダム由来、天野製薬製）、リパーゼＬ
Ｐ（クロモバクテリウム ビスコサム由来、旭化成工業
製）、リパーゼＹＳ（シュードモナス スピーシーズ由
来、天野製薬製）、リパーゼＰ（シュードモナス スピ
ーシーズ由来、ナガセ生化学工業製）、ＳＰ３９８（デ
ンマーク国、ノボ ノルディスク製）等があげられ、
又、かかる酵素を生産する微生物としては、例えば、ア
スペルギルス フラバス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｆｌ
ａｖｕｓ）ＩＦＯ ５８３９、アスペルギルス ウサミ
ー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｕｓａｍｉｉ）ＩＦＯ
４３８８、ベアウベリア バシアーナ（Ｂｅａｕｖｅｒ
ｉａ ｂａｓｓｉａｎａ）ＡＴＣＣ ７１５９、ゲオト
リカム カンディダム（Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ ｃａｎ
ｄｉｄｕｍ）ＩＦＯ ４５９８、ペニシリウム オキサ
リカム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｏｘａｌｉｃｕｍ）
ＩＦＯ ５７４８、ブレビバクテリウム フラバム（Ｂ
ｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍｆｌａｖｕｍ）ＡＴＣＣ
１４０６７、コリネバクテリウム グルタミカム（Ｃｏ
ｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｇｌｕｔａｍｉｃｕｍ）
ＡＴＣＣ １３７６１、シュードモナス アルギノーサ
（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）Ａ
ＴＣＣ １０１４５、シュードモナス プチダ（Ｐｓｅ
ｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｕｔｉｄａ）ＡＴＣＣ １２６３
３、ロドコッカス ロドクロウス（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃ
ｕｓ ｒｈｏｄｏｃｈｒｏｕｓ）ＡＴＣＣ ２９６７
０、セラチア マルセッセンス（Ｓｅｒｒａｔｉａ ｍ
ａｒｃｅｓｃｅｎｓ）ＡＴＣＣ２１０７４、同 ＦＥＲ
Ｍ ＢＰ−４８７、ノカルディア アステロイデス（Ｎ
ｏｃａｒｄｉａ ａｓｔｅｒｏｉｄｅｓ）ＩＦＯ ３４
２４等があげられる。

【００２６】一方、Ｒ² が水素原子である化合物〔Ｉ〕
の（Ｒ）体を得たいとき（Ｒ² が水素原子である化合物
〔ＩＩ〕の（Ｓ）体を得たいとき）は、該化合物〔Ｉ
Ｉ〕の（Ｒ）体を選択的に分解する酵素を用いればよ
く、かかる市販の酵素の具体例としては、例えば、リパ
ーゼＡ（アスペルギルス ニガー由来、天野製薬製）が
あげられ、又、かかる酵素を生産する微生物としては、
例えば、セラチア マルセッセンス（Ｓｅｒｒａｔｉａ
ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ）ＦＥＲＭ ＢＰ−４８７等が
ある。

【００２７】Ｒ² がアシル基である化合物〔Ｉ〕の
（Ｓ）体を得たいとき（Ｒ² がアシル基である化合物
〔ＩＩ〕の（Ｒ）体を得たいとき）は、該化合物〔Ｉ
Ｉ〕の（Ｓ）体を選択的に分解する酵素を用いればよ
く、かかる市販の酵素の具体例としては、例えば、リパ
ーゼＡ（アスペルギルス ニガー由来、天野製薬製）、
デナプシン１０Ｐ（アスペルギルス ニガー由来、ナガ
セ生化学工業製）、プロテアーゼＭ（アスペルギルス
オリゼー由来、天野製薬製）、アルカラーゼ２．５Ｌ
（バシルス リヘニホルミス由来、デンマーク国、ノボ
ノルディスク製）、エスペラーゼ８．０Ｌ（バシルス
スピーシーズ由来、デンマーク国、ノボ ノルディス
ク製）、ＸＰ−４１５（リゾプス デレマー由来、ナガ
セ生化学工業製）、ニューラーゼ（リゾプス ニベウス
由来、天野製薬製）、リパーゼＧ（ペニシリウム シク
ロピウム由来、天野製薬製）、リパーゼＲ（ペニシリウ
ム ロクエフォルティ由来、天野製薬製）等があげら
れ、又、かかる酵素を生産する微生物としては、例え
ば、アセトバクター パステウリアヌス（Ａｃｅｔｏｂ
ａｃｔｅｒｐａｓｔｅｕｒｉａｎｕｓ）ＩＦＯ ３２２
３、バシルス リヘニホルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌ
ｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）ＡＴＣＣ １４５８０、バ
シルス プミラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｕｍｉｌｕ
ｓ）ＩＦＯ １２０８７、バシルス サブティリス（Ｂ
ａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）ＡＴＣＣ ６６３
３、ロドコッカス スピーシーズ（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃ
ｕｓ ｓｐ．）ＡＴＣＣ１５５９２、ストレプトマイセ
ス スカビエス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｓｃａｂｉ
ｅｓ）ＩＦＯ ３１１１等がある。

【００２８】Ｒ² が水素原子である化合物〔Ｉ〕の
（Ｓ）体を得たいとき（Ｒ² が水素原子である化合物
〔ＩＩ〕の（Ｒ）体を得たいとき）は、該化合物〔Ｉ
Ｉ〕の（Ｓ）体を選択的に分解する酵素を用いればよ
く、かかる市販の酵素の具体例としては、例えば、リパ
ーゼＯＦ（カンジダ シリンドラシア由来、名糖産業
製）、リパーゼ・サイケン１００（リゾプス ジャポニ
カス由来、ナガセ生化学工業製）等がある。

【００２９】酵素反応終了後、酵素反応で得られた光学
活性な４−メルカプトピロリジン誘導体〔Ｉ〕を分離す
るには、４位のメルカプト基を保護基で保護して一般式
〔Ｉ−Ａ〕

【００３０】

【化１２】

【００３１】（式中、Ｒ³ はメルカプト基の保護基、他
の記号は前記と同一意味を有する。）で示される光学活
性ピロリジン誘導体に変換し、反応混合物より抽出、晶
析、クロマトグラフィー、蒸留等の常法によって分離す
ることができる。

【００３２】メルカプト基の保護基としては、アラルキ
ル基又はＲ¹ ＣＯ−とは異なるアシル基等があげられ、
例えば、ベンジル基、４−メトキシベンジル基等のアラ
ルキル基、アセチル基、パルミトイル基、ベンゾイル
基、ベンジルオキシカルボニル基、ニトロベンゾイル基
等のアシル基等が用いられる。

【００３３】又、酵素反応終了後、未反応で残存した光
学活性な化合物〔ＩＩ〕は、反応混合物より４−メルカ
プトピロリジン誘導体〔Ｉ〕を銅塩としてろ去するか、
又は反応混合物より抽出、晶析、クロマトグラフィー、
蒸留等の常法によって分離することができる。

【００３４】上記により得られる一般式

【００３５】

【化１３】

【００３６】（式中、Ｒ³¹はＲ¹ ＣＯ又はＲ³ を表し、
他の記号は前記と同一意味を有する。

【００３７】）で示される化合物の光学活性体を、Ｒ
² がアシル基の場合、所望により脱アシル化し、チオ
カルボニル化剤で処理してチオケトン体とした後、
基：−Ｒ³¹を除去するにより、一般式〔Ｉ−Ｂ〕

【００３８】

【化１４】

【００３９】（式中、Ｒ²¹は水素原子又はアシル基を表
す。）で示される４−メルカプト−２−チオピロリドン
化合物の光学活性体を製造することができる。

【００４０】上記工程における脱アシル化は、酸処理
により実施することができ、例えば、０．１〜１５％
（とりわけ０．３〜１０％）の塩化水素−低級アルカノ
ール（メタノール等）溶液を加え、室温で反応させるこ
とにより実施することができる。

【００４１】チオカルボニル化反応は、適当な溶媒中、
チオカルボニル化剤で処理して、好適に実施することが
できる。チオカルボニル化剤としては、ローソン試薬
〔２，４−ビス（４−メトキシフェニル）−１，３−ジ
チア−２，４，−ジホスフェタン−２，４−ジスルフィ
ド〕、２，４−ジメチル−１，３，−ジチア−２，４，
−ジホスフェタン−２，４−ジスルフィド、五硫化リン
等をいずれも好適に用いることができる。溶媒は、当該
反応に不活性な溶媒であればよく、例えば、ジメトキシ
エタン、ピリジン、キシレン、トルエン、ベンゼン等を
適宜用いることができる。本反応は、室温〜加熱下、例
えば、１０〜２００℃で実施するのが好ましい。

【００４２】基：−Ｒ³¹の除去は、その種類に応じ、酸
処理、アルカリ処理、還元又は酵素による加水分解等の
常法に従い実施することができる。例えば、Ｒ³¹がフェ
ニル低級アルキル基の場合、液体アンモニア中、ナトリ
ウムを用いて実施することができ、Ｒ³¹が置換フェニル
低級アルキル基の場合、アニソール等の適当な溶媒中、
トリフルオロ酢酸等の酸を用いて実施することができ
る。

【００４３】かくして得られる光学活性な４−メルカプ
トピロリジン誘導体〔Ｉ〕又は〔Ｉ−Ｂ〕は、カルバペ
ネム誘導体の側鎖の合成中間体として有用であり、例え
ば特開平２−４９７８３号又は特開平４−２７９５８８
号記載の方法に従って、一般式〔ＩＶ〕

【００４４】

【化１５】

【００４５】（式中、ＯＲ⁴ は保護されていてもよい水
酸基を表し、Ｒ⁵ は水素原子又はエステル残基を表
す。）で示されるケトン化合物の２位オキソ基における
反応性誘導体と反応させ、Ｒ⁴が水酸基の保護基である
か、及び／又はＲ⁵ がカルボキシル基の保護基となりう
るエステル残基である場合、所望により、さらに当該保
護基及び／又はエステル残基を除去し、要すれば、生成
物をその薬理的に許容し得るエステルもしくは塩とする
ことにより抗菌薬として有用な一般式〔ＩＩＩ〕

【００４６】

【化１６】

【００４７】（式中、Ｒ²²は水素原子又はアシル基、Ｏ
Ｒ⁴¹は保護されていてもよい水酸基、Ｒ⁵¹は水素原子又
はエステル残基を表し、Ｘは前記と同一意味を有す
る。）で示される１−メチルカルバペネム誘導体を製造
することができる。

【００４８】本発明に用いる原料化合物〔ＩＩ〕は、フ
ァルマコ エジジオン サイエンティフィカ〔Ｆａｒｍ
ａｃｏ Ｅｄｉｚｉｏｎｅ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃａ〕
ｖｏｌ．３３，１３０−１４１頁（１９７８）記載の方
法に準じて製した一般式〔Ｖ〕

【００４９】

【化１７】

【００５０】（式中、−ＯＲ⁶ は保護されていてもよい
水酸基、他の記号は前記と同一意味を有する。）で示さ
れるラセミ型４−ヒドロキシ−２−ピロリドン誘導体
を、塩基で処理して基：−ＯＲ⁶ の脱離反応に付して、
一般式〔ＶＩ〕

【００５１】

【化１８】

【００５２】（式中、記号は前記と同一意味を有す
る。）で示される３−ピロリン−２−オン誘導体とした
後、一般式〔ＶＩＩ〕

【００５３】

【化１９】

【００５４】（式中、記号は前記と同一意味を有す
る。）で示されるチオカルボン酸体と付加反応させて得
ることができる。またチオケトン体は、対応するケトン
体をチオカルボニル化剤で処理して得ることができる。

【００５５】上記反応の原料であるラセミ型４−ヒドロ
キシ−２−ピロリドン誘導体〔Ｖ〕において、−ＯＲ⁶
が保護された水酸基の場合、このような保護基として
は、アセチル基、パルミトイル基、ベンゾイル基、ベン
ジルオキシカルボニル基等のアシル基があげられる。

【００５６】化合物〔Ｖ〕からの基：−ＯＲ⁶ の脱離反
応は、溶媒中、塩基の存在下に実施することができ、反
応は冷却下〜加熱下、好ましくは０〜８０℃、とりわけ
２０〜４０℃で好適に進行する。

【００５７】３−ピロリン−２−オン誘導体〔ＶＩ〕と
チオカルボン酸体〔ＶＩＩ〕の付加反応は、前記脱離反
応と同様な溶媒及び温度条件で実施することができる。

【００５８】なお、本発明において目的とする一方の光
学異性体を分離した後、不要な対掌体、例えば不斉加水
分解または加アルコール分解で残存した光学活性なピロ
リジン誘導体〔ＩＩ〕または４位のメルカプト基を保護
した光学活性化合物〔Ｉ−Ａ〕は、塩基の存在下チオカ
ルボン酸体〔ＶＩＩ〕を作用させることにより容易にラ
セミ化できるので、原料化合物として再使用することが
でき、これを繰り返すことにより、理論的にほぼ定量的
に光学活性なピロリジン誘導体を得ることができる。

【００５９】本明細書において、アルキル基とは、炭素
数１〜２０のものを表し、低級アルキル基、低級アルカ
ノールとは、炭素数１〜６のものを表し、アシル基と
は、炭素数１〜２０のものを表す。

【００６０】次に、実施例をあげて本発明をさらに詳し
く説明するが、本発明はこれらに限定されるものではな
い。なお、実施例中、光学活性体の定量及び光学純度の
決定は、光学異性体分離カラムを用いる高速液体クロマ
トグラフィーにて行った。

【００６１】

【実施例】

実施例１ （±）−１−イソブチリル−４−アセチルチオ−２−ピ
ロリドン２００ｍｇをトルエン８０ｍｌに溶解し、リパ
ーゼＭＹ（カンジダ シリンドラシア由来、名糖産業
製）１５０ｍｇを溶解した水溶液８０ｍｌを加え、３０
℃で１６時間攪拌した。反応液をろ過後、トルエン層を
分取し、酢酸銅２００ｍｇの水溶液１５０ｍｌを加え、
生成したチオールを銅塩としてろ去した。次いで、トル
エン層を分取し、乾燥し、溶媒を留去した後、シリカゲ
ルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒；ｎ−ヘキサ
ン：酢酸エチル＝１０：１）により（Ｓ）−１−イソブ
チリル−４−アセチルチオ−２−ピロリドン７０ｍｇを
油状物として得た。

【００６２】光学純度：＞９９％ｅ．ｅ． ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δ：１．０８〜１．２８（ｄ×
２，６Ｈ）、２．３６（ｓ，３Ｈ）、２．５５〜２．７
３（ｍ，１Ｈ）、３．０３〜３．２２（ｍ，１Ｈ）、
３．５５〜３．８５（ｍ，２Ｈ）、３．９６〜４．３２
（ｍ，２Ｈ）。

【００６３】実施例２ （±）−１−イソブチリル−４−アセチルチオ−２−ピ
ロリドン６ｍｇをトルエン２ｍｌに溶解し、下記表１及
び表２に示す酵素を溶解したマクイルバイン緩衝液
〔０．２Ｍ−リン酸二ナトリウムと０．１Ｍ−クエン酸
の混液〕（ｐＨ５．５）２ｍｌを加えた。３０℃静置に
て不斉加水分解反応を行い、トルエン層の１−イソブチ
リル−４−アセチルチオ−２−ピロリドンを定量した。
その結果を表１及び表２に示す。

【００６４】

【表１】

【００６５】

【表２】

【００６６】実施例３ （±）−１−イソブチリル−４−アセチルチオ−２−ピ
ロリドン６ｍｇを下記表３に示した有機溶媒２ｍｌに溶
解し、リパーゼＭＹ（カンジダ シリンドラシア由来、
名糖産業製）１０ｍｇを溶解したマクイルバイン緩衝液
（ｐＨ５．５）２ｍｌを加えた。３０℃静置にて不斉加
水分解反応を行い、各有機溶媒中の１−イソブチリル−
４−アセチルチオ−２−ピロリドンを定量した。その結
果を表３に示す。

【００６７】

【表３】

【００６８】実施例４ （±）−１−イソブチリル−４−アセチルチオ−２−ピ
ロリドン８００ｍｇをトルエン８０ｍｌに溶解し、リパ
ーゼＭＹ（カンジダ シリンドラシア由来、名糖産業
製）２００ｍｇの水溶液５０ｍｌを加え、窒素ガスを吹
き込みながら３０℃で７時間攪拌した。トルエン中の１
−イソブチリル−４−アセチルチオ−２−ピロリドン及
び１−イソブチリル−４−メルカプト−２−ピロリドン
を定量した。これらの生成量及び残存量は下記の通りで
あった。

【００６９】（Ｓ）−１−イソブチリル−４−アセチル
チオ−２−ピロリドン：３８３ｍｇ （Ｒ）−１−イソブチリル−４−アセチルチオ−２−ピ
ロリドン： ３７ｍｇ （Ｓ）−１−イソブチリル−４−メルカプト−２−ピロ
リドン： ２０ｍｇ （Ｒ）−１−イソブチリル−４−メルカプト−２−ピロ
リドン：２８０ｍｇ。

【００７０】実施例５ （±）−１−アセチル−４−アセチルチオ−２−ピロリ
ドン６ｍｇをトルエン２ｍｌに溶解し、下記表４及び表
５に示す酵素を溶解したマクイルバイン緩衝液（ｐＨ
５．５）２ｍｌを加えた。３０℃で２日間静置にて不斉
加水分解反応を行い、トルエン層の１−アセチル−４−
アセチルチオ−２−ピロリドンを定量した。その結果を
表４及び表５に示す。

【００７１】

【表４】

【００７２】

【表５】

【００７３】実施例６ 下記表６に示した組成に調整した各培地２ｍｌを試験管
に分注し、１２０℃１０分間加圧蒸気滅菌を行った後、
下記表７及び表８に示した微生物を植菌し、細菌は３０
℃で１日、真菌・放線菌は３０℃で３日間振とう培養し
た。この培養液を、各々の培養液が３ｍｌになるように
マクイルバイン緩衝液でｐＨ５．５〜６．０に調整し、
（±）−１−アセチル−４−アセチルチオ−２−ピロリ
ドン９ｍｇを含むトルエン３ｍｌを加え、３０℃で２日
間静置にて不斉加水分解反応を行い、トルエン中の１−
アセチル−４−アセチルチオ−２−ピロリドンを定量し
た。その結果を表７及び表８に示す。

【００７４】

【表６】

【００７５】

【表７】

【００７６】

【表８】

【００７７】実施例７ 窒素ガス気流下、（±）−１−アセチル−４−アセチル
チオ−２−ピロリドン３．０ｇをトルエン２００ｍｌに
溶解し、リパーゼＣＥ（フミコーラ ランギノーサ由
来、天野製薬製）１ｇの水溶液２００ｍｌを加え、窒素
ガスを吹き込みながら３０℃で３０時間攪拌した。トル
エン層の１−アセチル−４−アセチルチオ−２−ピロリ
ドン及び１−アセチル−４−メルカプト−２−ピロリド
ンを定量した。これらの生成量及び残存量は下記の通り
であった。

【００７８】（Ｓ）−１−アセチル−４−アセチルチオ
−２−ピロリドン：１．４７ｇ （Ｒ）−１−アセチル−４−アセチルチオ−２−ピロリ
ドン：０．３３ｇ （Ｓ）−１−アセチル−４−メルカプト−２−ピロリド
ン：０．０５ｇ （Ｒ）−１−アセチル−４−メルカプト−２−ピロリド
ン：０．８７ｇ。

【００７９】実施例８ （±）−１−アセチル−４−ベンゾイルチオ−２−ピロ
リドン６ｍｇをトルエン２ｍｌに溶解し、下記表９に示
した酵素１０ｍｇを溶解したマクイルバイン緩衝液（ｐ
Ｈ５．５）２ｍｌを加えた。３０℃で３日間静置にて不
斉加水分解反応を行い、トルエン層の１−アセチル−４
−ベンゾイルチオ−２−ピロリドンを定量した。その結
果を表９に示す。

【００８０】

【表９】

【００８１】実施例９ （±）−１−アセチル−４−ｎ−カプリルチオ−２−ピ
ロリドン６ｍｇをトルエン２ｍｌに溶解し、下記表１０
及び表１１に示した酵素を溶解したマクイルバイン緩衝
液（ｐＨ５．５）２ｍｌを加えた。３０℃で２日間静置
にて不斉加水分解反応を行い、トルエン層の１−アセチ
ル−４−ｎ−カプリルチオ−２−ピロリドンを定量し
た。その結果を表１０及び表１１に示す。

【００８２】

【表１０】

【００８３】

【表１１】

【００８４】実施例１０ （１） 下記表１２に示した酵素１０ｍｇを溶解したマ
クイルバイン緩衝液（ｐＨ５．５）２ｍｌに（±）−４
−アセチルチオ−２−ピロリドン６ｍｇを加えた。３０
℃静置にて不斉加水分解反応を行い、反応液をクロロホ
ルム２ｍｌで抽出し、残存する４−アセチルチオ−２−
ピロリドンを定量した。その結果を表１２に示す。

【００８５】

【表１２】

【００８６】（２） （Ｒ）−４−アセチルチオ−２−
ピロリドン１０ｇをトルエン１００ｍｌに溶かし、五硫
化リン９．５ｇを徐々に加え、室温で２０分間攪拌し
た。反応液に水及び酢酸エチルを加え、室温で１．５時
間攪拌した。不溶物をろ去し、有機層を水洗、乾燥後、
溶媒を留去した。残査をトルエンから再結晶して、
（Ｒ）−４−アセチルチオ−２−チオピロリドン７．９
ｇを得た。

【００８７】収率：７２％ ｍ．ｐ．：９４〜９５℃ 〔α〕_D ²⁵ ＋５７．７°（ｃ＝１、メタノール）。

【００８８】実施例１１ 下記表１３及び表１４に示した酵素を溶解したマクイル
バイン緩衝液（ｐＨ５．０）１．５ｍｌに（±）−４−
アセチルチオ−２−チオピロリドン２ｍｇを加えた。３
０℃静置にて不斉加水分解反応を行い、反応液をクロロ
ホルム２ｍｌで抽出し、４−アセチルチオ−２−チオピ
ロリドンを定量した。その結果を表１３及び表１４に示
す。

【００８９】

【表１３】

【００９０】

【表１４】

【００９１】実施例１２ （１） 窒素ガス気流下、（±）−１−アセチル−４−
アセチルチオ−２−ピロリドン３．０ｇをトルエン２０
０ｍｌに溶解し、リパーゼＣＥ (フミコーラ ランギノ
ーサ由来、天野製薬製）１ｇの水溶液２００ｍｌを加
え、窒素ガスを吹き込みながら３０℃で３０時間攪拌し
た。反応液からトルエン層を分取し、さらに水層をトル
エン２００ｍｌ、次いでクロロホルム２００ｍｌで抽出
した。抽出した有機層は合わせ、脱水後、約１５０ｍｌ
に濃縮した。次いで、窒素ガス気流下、氷冷下、この有
機層にトリエチルアミン０．８２ｍｌ、４−ジメチルア
ミノピリジン１０ｍｇ及び塩化パルミトイル１．６ｇを
加え、１０分間攪拌後、さらに室温で１時間攪拌した。
反応液を洗浄、乾燥後、溶媒を留去し、ｎ−ヘキサンを
加えて２℃で放置した。析出晶をろ取し、メタノールで
再結晶することにより、（Ｒ）−１−アセチル−４−パ
ルミトイルチオ−２−ピロリドン７００ｍｇを得た。

【００９２】光学純度：９５％ｅ．ｅ． ｍ．ｐ．：６０−６２℃ 〔α〕_D ²⁷：＋１５．６°（ｃ＝１．００７、クロロホ
ルム）。

【００９３】また、ろ液は集めて溶媒を留去し、ｎ−ヘ
キサン２００ｍｌに溶解後、蒸留水で２回洗浄した。ｎ
−ヘキサン層を乾燥後、溶媒を留去し、メタノールで晶
析することにより、（Ｒ）−１−アセチル−４−パルミ
トイルチオ−２−ピロリドン８１９ｍｇ（光学純度：６
７％ｅ．ｅ．）を、さらにこのメタノールろ液から
（Ｒ）−１−アセチル−４−パルミトイルチオ−２−ピ
ロリドン２１５ｍｇ（光学純度：８９％ｅ．ｅ．）を得
た。

【００９４】ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δ：０．８０〜０．
９５（ｔ，３Ｈ）、１．１０〜１．４５（２４Ｈ）、
１．４５〜１．８０（ｍ，２Ｈ）、２．５１（ｓ，３
Ｈ）、２．４５〜２．７０（ｍ，３Ｈ）、３．００〜
３．２５（ｍ，１Ｈ）、３．６５〜３．８５（ｍ，１
Ｈ）、３．９５〜４．３０（ｍ，２Ｈ）。

【００９５】一方、洗液の水層は、クロロホルムで４回
抽出し、乾燥後、溶媒を留去し、シリカゲルカラムクロ
マトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝８：２〜
７：３）により、（Ｓ）−１−アセチル−４−アセチル
チオ−２−ピロリドン１．３４ｇを油状物として得た。

【００９６】光学純度：４７％ｅ．ｅ．。

【００９７】（２） （Ｒ）−１−アセチル−４−パル
ミトイルチオ−２−ピロリドン５００ｍｇ（光学純度：
９５％ｅ．ｅ．）をメタノール７ｍｌとトルエン３ｍｌ
の混液に溶解し、１５％塩酸メタノール溶液０．２４ｍ
ｌを加え、室温で３時間攪拌した。反応液を濃縮し、
（Ｒ）−４−パルミトイルチオ−２−ピロリドン３３３
ｍｇを結晶としてろ取した。

【００９８】光学純度：９８％ｅ．ｅ． ｍ．ｐ．：９９．５−１００．５℃ 〔α〕_D ³⁰：＋３２．２°（ｃ＝０．６７８、クロロホ
ルム） ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δ：０．８０〜１．００（ｔ，３
Ｈ）、１．１０〜１．４５（２４Ｈ）、１．５０〜１．
８０（ｍ，２Ｈ）、２．２０〜２．４０（ｍ，１Ｈ）、
２．４５〜２．６５（ｔ，２Ｈ）、２．７０〜２．９５
（ｍ，１Ｈ）、３．２０〜３．４０（ｍ，１Ｈ）、３．
８０〜３．９８（ｍ，１Ｈ）、４．１０〜４．３０
（ｍ，１Ｈ）、５．９０〜６．２５（ｂｒ，１Ｈ）。

【００９９】（３） （Ｒ）−４−パルミトイルチオ−
２−ピロリドン２５０ｍｇ（光学純度：９８％ｅ．
ｅ．）をトルエン５ｍｌに加熱溶解し、ローソン試薬１
４２ｍｇを加え、１００℃で１０分間攪拌した。反応液
を室温まで放冷し、結晶を析出させた。溶媒を留去し、
残査を酢酸エチルに加熱溶解し、放冷後、（Ｒ）−４−
パルミトイルチオ−２−チオピロリドン２２９ｍｇを結
晶としてろ取した。

【０１００】光学純度：＞９９％ｅ．ｅ． ｍ．ｐ．：１０５．５−１０７℃ 〔α〕_D ³¹：＋４３．９°（ｃ＝１．０８、クロロホル
ム） ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δ：０．７３〜１．００（ｔ，３
Ｈ）、１．０５〜１．５０（２４Ｈ）、１．５０〜１．
８０（ｍ，２Ｈ）、２．４０〜２．６２（ｔ，２Ｈ）、
２．７５〜２．９８（ｍ，１Ｈ）、３．２３〜３．４８
（ｍ，１Ｈ）、３．４８〜３．６５（ｍ，１Ｈ）、４．
０５〜４．３８（ｍ，２Ｈ）、７．７６〜８．１３（ｂ
ｒ，１Ｈ）。

【０１０１】（４） （Ｒ）−４−パルミトイルチオ−
２−チオピロリドン１００ｍｇ（光学純度：＞９９％
ｅ．ｅ．）を、クロロホルム１０ｍｌに溶解し、これに
１５％塩酸メタノール溶液１２ｍｌを加え、４２℃で
８．５時間攪拌した後、室温で一晩放置した。反応液に
３０分間窒素ガスを吹き込んだ後、溶媒を留去し、残査
に蒸留水を加え、ｎ−ヘキサンで洗浄した。水層をクロ
ロホルムで２回抽出し、乾燥後、溶媒を留去することに
より（Ｒ）−４−メルカプト−２−チオピロリドン１１
ｍｇを得た。

【０１０２】ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δ：１．９０〜２．
０５（ｄ，１Ｈ）、２．７５〜３．００（ｍ，１Ｈ）、
３．２２〜３．５０（ｍ，１Ｈ）、３．５０〜３．９５
（ｍ，２Ｈ）、３．９８〜４．２０（ｍ，１Ｈ）、７．
９０〜８．５０（ｂｒ，１Ｈ） ＭＳ（ｍ／ｅ）：１３３（Ｍ⁺ ） 本化合物の光学純度は、常法によりベンゾイル化して
（Ｒ）−４−ベンゾイルチオ−２−チオピロリドンとし
て測定した。

【０１０３】光学純度：９９％ｅ．ｅ．。

【０１０４】実施例１３ （１） （±）−１−イソブチリル−４−アセチルチオ
−２−ピロリドン８００ｍｇをトルエン８０ｍｌに溶解
し、リパーゼＭＹ（カンジダ シリンドラシア由来、名
糖産業製）２００ｍｇの水溶液５０ｍｌを加え、窒素ガ
スを吹き込みながら３０℃で７時間攪拌した。反応液か
らトルエン層を分取し、さらに水層をトルエン１００ｍ
ｌで抽出した。抽出した有機層は合わせ、脱水後、約４
０ｍｌに濃縮した。次いで、窒素ガス気流下、氷冷下、
このトルエン層にトリエチルアミン０．２２ｍｌ、４−
ジメチルアミノピリジン１０ｍｇ及び塩化パルミトイル
４３０ｍｇを加え、１０分間攪拌後、さらに室温で２０
分間攪拌した。反応液にトルエン２０ｍｌを加え、洗
浄、乾燥後、溶媒を留去し、シリカゲルカラムクロマト
グラフィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝９：１）によ
り、（Ｒ）−１−イソブチリル−４−パルミトイルチオ
−２−ピロリドン５７７ｍｇを得た。

【０１０５】光学純度：９３％ｅ．ｅ． ｍ．ｐ．：５２．５−５４．５℃ 〔α〕_D ³¹：＋１２．３°（ｃ＝１．０、クロロホル
ム） ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δ：０．７７〜０．９８（ｔ，３
Ｈ）、１．０５〜１．２５（ｄ×２，６Ｈ）、１．０５
〜１．４５（２４Ｈ）、１．４５〜１．７８（ｍ，２
Ｈ）、２．４２〜２．７２（ｍ，３Ｈ）、２．９８〜
３．２０（ｍ，１Ｈ）、３．５５〜３．８０（ｍ，２
Ｈ）、３．９５〜４．３０（ｍ，２Ｈ）。

【０１０６】また、上記シリカゲルカラムクロマトグラ
フィー（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝９：１）により、
（Ｓ）−１−イソブチリル−４−アセチルチオ−２−ピ
ロリドン２７２ｍｇを回収した。

【０１０７】光学純度：８２％ｅ．ｅ．。

【０１０８】（２） （Ｒ）−１−イソブチリル−４−
パルミトイルチオ−２−ピロリドン３００ｍｇ（光学純
度：９３％ｅ．ｅ．）をメタノール４ｍｌとトルエン
１．５ｍｌの混液に溶解し、１５％塩酸メタノール溶液
０．１５ｍｌを加え、室温で４時間攪拌した。反応液を
濃縮し、（Ｒ）−４−パルミトイルチオ−２−ピロリド
ン１５０ｍｇを結晶としてろ取した。

【０１０９】光学純度：９８％ｅ．ｅ． ｍ．ｐ．：９９．５−１０１℃。

【０１１０】実施例１４ （±）−１−アセチル−４−アセチルチオ−２−ピロリ
ドン１０ｍｇとその４倍モルのｎ−プロパノールを溶解
したトルエン溶液１ｍｌに、表１５及び表１６に示した
酵素１０ｍｇを懸濁し、３０℃で３日間振とう反応し
た。反応液を遠心分離後、トルエン層の１−アセチル−
４−アセチルチオ−２−ピロリドンを定量した。その結
果を表１５及び表１６に示す。

【０１１１】

【表１５】

【０１１２】

【表１６】

【０１１３】実施例１５ （±）−１−アセチル−４−アセチルチオ−２−ピロリ
ドン１０ｍｇとその４倍モルの表１７に示したアルカノ
ールを溶解したトルエン溶液１ｍｌに、リパーゼＧＣ
（ゲオトリカム カンディダム由来、天野製薬製）１０
ｍｇを懸濁し、３０℃で３日間振とう反応した。反応液
を遠心分離後、トルエン層に残存する１−アセチル−４
−アセチルチオ−２−ピロリドン及び生成物の１−アセ
チル−４−メルカプト−２−ピロリドンを定量した。そ
の結果を表１７に示す。

【０１１４】

【表１７】

【０１１５】実施例１６ （±）−１−アセチル−４−アセチルチオ−２−ピロリ
ドン５ｍｇとその４倍モルのｎ−プロパノールを溶解し
た表１８記載の各種溶液１ｍｌに、リパーゼＧＣ（ゲオ
トリカム カンディダム由来、天野製薬製）１０ｍｇを
懸濁し、３０℃で３日間振とう反応した。反応液を遠心
分離後、有機層の１−アセチル−４−アセチルチオ−２
−ピロリドンを定量した。その結果を表１８に示す。

【０１１６】

【表１８】

【０１１７】実施例１７ 窒素ガス気流下、（±）−１−アセチル−４−アセチル
チオ−２−ピロリドン３００ｍｇをトルエン１００ｍｌ
に溶解し、リパーゼＣＥ（フミコーラ ランギノーサ由
来、天野製薬製）４００ｍｇの水溶液１００ｍｌを加
え、３０℃で７８時間攪拌した。反応液をトルエン１０
０ｍｌで２回抽出し、トルエン層を分取し、脱水後約１
５０ｍｌに濃縮した。次いで、窒素ガス気流下、氷冷
下、このトルエン層にトリエチルアミン８４μｌ、４−
ジメチルアミノピリジン５ｍｇ及び塩化ベンゾイル８４
ｍｇを加え、４０分間攪拌した。反応液を洗浄後、溶媒
を留去し、残査をｎ−ヘキサン１００ｍｌに加熱溶解し
た。室温で放置後、析出した（Ｒ）−１−アセチル−４
−ベンゾイルチオ−２−ピロリドン６７ｍｇ（光学純
度：９７％ｅ．ｅ．）をろ取した。さらに、ろ液を水洗
し、（Ｓ）−１−アセチル−４−アセチルチオ−２−ピ
ロリドンを除いた後、溶媒を留去し、メタノールより再
結晶することにより（Ｒ）−１−アセチル−４−ベンゾ
イルチオ−２−ピロリドン４０ｍｇ（光学純度：９６％
ｅ．ｅ．）を得た (全収量１０７ｍｇ）。

【０１１８】ｍ．ｐ．：１１６−１１８℃ 〔α〕_D ²⁸：＋１４．１°（ｃ＝０．５５、メタノー
ル） ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δ：２．５３（ｓ，３Ｈ）、２．
６５〜２．８５（ｍ，１Ｈ）、３．１２〜３．２６
（ｍ，１Ｈ）、３．７８〜４．００（ｍ，１Ｈ）、４．
１８〜４．４２（ｍ，２Ｈ）、７．４０〜８．００
（ｍ，５Ｈ）。

【０１１９】また、水層より（Ｓ）−１−アセチル−４
−アセチルチオ−２−ピロリドン１４８ｍｇをクロロホ
ルムで抽出することにより回収した。

【０１２０】実施例１８ 窒素ガス気流下、（±）−１−イソブチリル−４−アセ
チルチオ−２−ピロリドン３００ｍｇをトルエン１００
ｍｌに溶解し、リパーゼＭＹ（カンジダ シリンドラシ
ア由来、名糖産業製）２００ｍｇの水溶液１００ｍｌを
加え、３０℃で１３時間攪拌した。反応液からトルエン
層を分取し、脱水後約７０ｍｌに濃縮した。次いで、窒
素ガス気流下、氷冷下、このトルエン層にトリエチルア
ミン９２μｌ、４−ジメチルアミノピリジン５ｍｇ及び
塩化ベンゾイル９２ｍｇを加え、１時間攪拌した。反応
液を洗浄後、溶媒を留去し、残査をシリカゲルカラムク
ロマトグラフィー（溶出溶媒；ｎ−ヘキサン：酢酸エチ
ル＝１０：１）に付し、（Ｒ）−１−イソブチリル−４
−ベンゾイルチオ−２−ピロリドン１３８ｍｇ（光学純
度：９１％ｅ．ｅ．）を得た。

【０１２１】ｍ．ｐ．：５５−５６℃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δ：１．１０〜１．２８（ｄ×
２，６Ｈ）、２．６３〜２．８７（ｍ，１Ｈ）、３．１
０〜３．３８（ｍ，１Ｈ）、３．５８〜４．００（ｍ，
２Ｈ）、４．１８〜４．４６（ｍ，２Ｈ）、７．３８〜
８．０２（ｍ，５Ｈ）。

【０１２２】また、上記シリカゲルカラムクロマトグラ
フィー（溶出溶媒；ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１０：
１）により、（Ｓ）−１−イソブチリル−４−アセチル
チオ−２−ピロリドン１２０ｍｇを得た。

【０１２３】参考例１ ラセミ型４−アミノ−３−ヒドロキシ酪酸５０ｇ及び無
水酢酸１９８ｍｌの混合物を１．５時間還流した。冷却
後、反応混合物を濃縮し、残査をトルエンで二度共沸し
た。得られた油状物７６ｇを酢酸エチル１７５ｍｌに溶
かし、トリエチルアミン２３．３ｍｌを加え、室温で一
晩放置した。その後、該酢酸エチル溶液を氷冷し、チオ
ール酢酸３３ｍｌを加え室温で３時間攪拌した。反応液
を水洗、乾燥後、溶媒を留去し、ラセミ型１−アセチル
−４−アセチルチオ−２−ピロリドン７９ｇを得た。

【０１２４】収率：９３％ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δ：２．３６（ｓ，３Ｈ）、２．
５０（ｓ，３Ｈ）、２．５〜２．７（ｍ，１Ｈ）、３．
１〜３．２（ｍ，１Ｈ）、３．７〜３．８（ｍ，１
Ｈ）、４．０〜４．３（ｍ，２Ｈ）。

【０１２５】参考例２ （Ｓ）−１−アセチル−４−アセチルチオ−２−ピロリ
ドン５３ｍｇ（光学純度：６３％ｅ．ｅ．）をメタノー
ル５ｍｌに溶解し、これにトリエチルアミン４２μｌを
加え、室温で９．５時間攪拌した。反応液にチオ酢酸４
０μｌを加え、一晩放置後、溶媒を留去した。残査をク
ロロホルムに溶解し、洗浄、乾燥後、溶媒を留去し、シ
リカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン：酢
酸エチル＝１０：１）により、（±）−１−アセチル−
４−アセチルチオ−２−ピロリドン１８ｍｇ（Ｒ体：Ｓ
体＝３４：３６）を得た。

【０１２６】

【発明の効果】本発明によれば、光学活性４−メルカプ
ト−２−ピロリドン（又は−２−チオピロリドン）誘導
体を、ラセミ型化合物から簡便な操作で高収率で製造す
ることができるため、爆発性を有し、入手困難なジエチ
ルアゾジカルボキシレートを用いる従来法に比べ優れた
工業的製法となるものである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 //(Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:66） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:01） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:645） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:80） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:13） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:15） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:385） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:40） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:425） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:365） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:10） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:07） (Ｃ１２Ｐ 41/00 Ｃ１２Ｒ 1:465）

Claims (12)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】一般式〔ＩＩ〕 【化１】 （式中、Ｒ¹ はアルキル基又は置換基を有していてもよ
   いフェニル基、Ｒ² は水素原子又はアシル基、Ｘは酸素
   原子又は硫黄原子を表す。）で示されるピロリジン誘導
   体に、該誘導体のチオエステル結合を不斉加水分解又は
   不斉加アルコール分解する能力を有する酵素を作用させ
   て一方の光学活性体を加水分解又は加アルコール分解す
   ることを特徴とする一般式〔Ｉ〕 【化２】 （式中、記号は前記と同一意味を有する。）で示される
   ４−メルカプトピロリジン誘導体の光学活性体の製法。
2. 【請求項２】一般式〔ＩＩ〕 【化３】 （式中、Ｒ¹ はアルキル基又は置換基を有していてもよ
   いフェニル基、Ｒ² は水素原子又はアシル基、Ｘは酸素
   原子又は硫黄原子を表す。）で示されるピロリジン誘導
   体に、該誘導体のチオエステル結合を不斉加水分解又は
   不斉加アルコール分解する能力を有する酵素を作用させ
   て一方の光学活性体を加水分解又は加アルコール分解
   し、未反応の対掌体を分離することを特徴とする一般式
   〔ＩＩ〕 【化４】 （式中、記号は前記と同一意味を有する。）で示される
   ピロリジン誘導体の光学活性体の製法。
3. 【請求項３】Ｒ¹ が炭素数１〜２０のアルキル基、又は
   炭素数１〜５のアルキル基及びハロゲン原子から選ばれ
   る基で置換されていてもよいフェニル基である請求項１
   又は２記載の製法。
4. 【請求項４】酵素がエステラーゼ、リパーゼ又はプロテ
   アーゼである請求項１、２又は３記載の製法。
5. 【請求項５】酵素が微生物由来の酵素である請求項１、
   ２、３又は４記載の製法。
6. 【請求項６】酵素がカンジダ属、アスペルギルス属、リ
   ゾプス属、フミコーラ属、ムコール属、ゲオトリカム
   属、ベアウベリア属、ペニシリウム属、バシルス属、シ
   ュードモナス属、クロモバクテリウム属、アセトバクタ
   ー属、ブレビバクテリウム属、コリネバクテリウム属、
   ロドコッカス属、セラチア属、ノカルディア属又はスト
   レプトマイセス属に属する微生物由来の酵素である請求
   項１、２、３又は４記載の製法。
7. 【請求項７】酵素がカンジダ属、アスペルギルス属、フ
   ミコーラ属、ムコール属、ゲオトリカム属、バシルス
   属、シュードモナス属、コリネバクテリウム属、ロドコ
   ッカス属又はセラチア属に属する微生物由来の酵素であ
   る請求項１、２、３又は４記載の製法。
8. 【請求項８】請求項１で得られる光学活性な４−メルカ
   プトピロリジン誘導体〔Ｉ〕の４位メルカプト基を保護
   基で保護することを特徴とする一般式〔Ｉ−Ａ〕 【化５】 （式中、Ｒ³ はメルカプト基の保護基、Ｒ² は水素原子
   又はアシル基、Ｘは酸素原子又は硫黄原子を表す。）で
   示されるピロリジン誘導体の光学活性体の製法。
9. 【請求項９】請求項２又は８記載の製法により得られる
   一般式 【化６】 （式中、Ｒ³¹はＲ¹ ＣＯ又はＲ³ 、Ｒ¹ はアルキル基又
   は置換基を有していてもよいフェニル基、Ｒ³ はメルカ
   プト基の保護基、Ｒ² は水素原子又はアシル基を表
   す。）で示される化合物の光学活性体を、Ｒ² がアシ
   ル基の場合、所望により脱アシル化し、チオカルボニ
   ル化剤で処理してチオケトン体とした後、基：−Ｒ³¹
   を除去することを特徴とする一般式〔Ｉ−Ｂ〕 【化７】 （式中、Ｒ²¹は水素原子又はアシル基を表す。）で示さ
   れる４−メルカプト−２−チオピロリドン化合物の光学
   活性体の製法。
10. 【請求項１０】化合物〔Ｉ−Ｂ〕が（Ｒ）体である請求
    項９記載の製法。
11. 【請求項１１】化合物〔Ｉ−Ｂ〕が（Ｓ）体である請求
    項９記載の製法。
12. 【請求項１２】請求項１又は９記載の製法により得られ
    る４−メルカプトピロリジン誘導体〔Ｉ〕又は〔Ｉ−
    Ｂ〕の光学活性体を一般式〔ＩＶ〕 【化８】 （式中、ＯＲ⁴ は保護されていてもよい水酸基を表し、
    Ｒ⁵ は水素原子又はエステル残基を表す。）で示される
    ケトン化合物の２位オキソ基における反応性誘導体と反
    応させ、所望により、保護基及び／又はエステル残基を
    除去し、要すれば、生成物をその薬理的に許容し得るエ
    ステルもしくは塩とすることを特徴とする一般式〔ＩＩ
    Ｉ〕 【化９】 （式中、Ｒ²²は水素原子又はアシル基、Ｘは酸素原子又
    は硫黄原子、ＯＲ⁴¹は保護されていてもよい水酸基を表
    し、Ｒ⁵¹は水素原子又はエステル残基を表す。）で示さ
    れる１−メチルカルバペネム誘導体又はその薬理的に許
    容し得る塩の製法。