JPH07203954A - Culture of bifidus bacterium and production thereof - Google Patents
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Landscapes
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- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
【０００１】[0001]
【産業上の利用分野】本発明は、ビフィズス菌の生菌体
を含有する培養物及びそれを製造する方法に関する。本
発明のビフィズス菌の生菌体を含有する培養物は、酢酸
の生成量が少なく風味も良好なので、発酵乳などの発酵
乳製品として利用される。TECHNICAL FIELD The present invention relates to a culture containing live cells of Bifidobacterium and a method for producing the same. Since the culture containing the viable cells of Bifidobacterium of the present invention produces less acetic acid and has a good flavor, it is used as a fermented milk product such as fermented milk.
【０００２】[0002]
【従来の技術】一般的に、ビフィズス菌は、乳幼児から
老人に至るまで人の健康と深く関わっていると言われて
いる。現在、ビフィズス菌を利用した医薬品や食品は、
大変多く、特に発酵乳などの発酵乳製品に多く用いられ
ている。しかしながら、ビフィズス菌は、一般に酵母エ
キスなどの生育促進物質を添加した乳を主成分とする培
地で培養する必要があり、このようにして得られる培養
物は風味が悪くなるという問題がある。また、発酵に用
いるビフィズス菌が生成する酢酸などの風味が人の嗜好
に合わないという問題もある。そこで、人参ジュースを
添加することによりビフィズス菌発酵乳製品の風味を改
良する方法（特公昭５６−３９８５２号公報）や香料な
どを添加することにより風味を改良する方法などが知ら
れている。また、ビフィズス菌の菌体を製品に添加した
り、製品に用いるビフィズス菌培養物を少量としたり、
さらには、他の乳酸菌と組み合わせることにより短時間
で培養物の乳酸酸度が０．７％程度の低酸度培養を行っ
て製品の風味を改良している現状にある。2. Description of the Related Art It is generally said that Bifidobacteria are deeply related to human health from infants to the elderly. Currently, pharmaceuticals and foods that use Bifidobacterium are
Very many, especially in fermented milk products such as fermented milk. However, bifidobacteria generally need to be cultivated in a medium containing milk as a main component, to which a growth promoting substance such as yeast extract is added, and the culture thus obtained has a problem that the flavor is deteriorated. There is also a problem that the flavor of acetic acid produced by the bifidobacteria used for fermentation does not match the taste of humans. Then, the method of improving the flavor of a bifidobacteria fermented dairy product by adding ginseng juice (Japanese Patent Publication No. 56-39852), the method of improving a flavor by adding a fragrance, etc. are known. In addition, adding Bifidobacterium cells to the product, or reducing the amount of Bifidobacterium culture used for the product,
Furthermore, in combination with other lactic acid bacteria, the low-acidity culture with a lactic acid acidity of the culture of about 0.7% is carried out in a short time to improve the flavor of the product.
【０００３】[0003]
【発明が解決しようとする課題】発酵乳製品の風味は、
用いた菌の代謝産物の種類と濃度、乳固形濃度、ｐＨな
どの影響を受け易い。特にビフィズス菌を用いた場合、
酵母エキスなどの生育促進物質を添加した乳を主成分と
する培地で培養することで風味が悪くなったり、ビフィ
ズス菌の代謝産物である酢酸の影響で風味が悪くなった
りする。この酢酸による発酵乳製品の風味劣化は、味覚
に対する直接的な刺激に因るものであり、酢酸特有の臭
気が主な原因と考えられている。なお、ビフィズス菌の
酢酸産生量は乳酸産生量１モルに対して１．５モルにも
達し、この時の酢酸量（Ｗ／Ｖ）は乳酸量（Ｗ／Ｖ）に
対して１００％となる。この割合は、培養の進行度に関
係無くほぼ一定であって、ビフィズス菌による発酵を行
う限り、酢酸の産生は避けることができない。The flavor of fermented dairy products is
It is easily affected by the type and concentration of the metabolites of the bacteria used, milk solids concentration, pH, etc. Especially when Bifidobacterium is used,
Cultivation in a medium containing milk, which is a growth-promoting substance such as yeast extract, as a main component causes the flavor to deteriorate, or the acetic acid, which is a metabolite of Bifidobacterium, causes the flavor to deteriorate. The flavor deterioration of the fermented dairy product due to this acetic acid is due to the direct irritation to the taste, and the odor peculiar to acetic acid is considered to be the main cause. The amount of acetic acid produced by Bifidobacteria reaches 1.5 mol per 1 mol of lactic acid, and the amount of acetic acid (W / V) at this time is 100% relative to the amount of lactic acid (W / V). . This ratio is almost constant regardless of the progress of the culture, and the production of acetic acid cannot be avoided as long as the fermentation with Bifidobacterium is carried out.
【０００４】これまでに、本発明者らは、ドリンクヨー
グルトや乳飲料などの発酵乳製品中で生残性の高いビフ
ィズス菌を得るために種々研究を重ねてきたところ、ビ
フィズス菌としては、極めて特異な性質を有する菌株で
あるビフィドバクテリウム・ブレーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂ
ａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ）ＳＢＲ３２１２（ＦＥ
ＲＭ Ｐ−１１９１５）を見出した（特開平４−３２０
６４２号公報）。この菌株は、好気的条件下、純粋な牛
乳培地中でも増殖が可能であり、しかも優れた耐酸性を
有するので、保存中に死滅し難いという特徴を有する。
そして、さらにこの菌株について、研究を進めたとこ
ろ、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂ
ａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ）ＳＢＲ３２１２（ＦＥ
ＲＭ Ｐ−１１９１５）とラクトバチルス・カゼイ（Ｌ
ａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ）ＡＳＴ−８
（ＦＥＲＭ Ｐ−１２７０４）とが、非常に強い共生関
係を示すことを見出し、これらの菌株を用いるビフィズ
ス菌培養物及びその製造法を提案している（特開平５−
２２７９４６号公報）。この発明によると、好気的条件
下、酵母エキスなどの生育促進物質を含有しない乳を主
成分とする培地でビフィズス菌を培養すると、酸生成が
高く、ビフィズス菌の生菌数の高い培養物を得ることが
できる。The inventors of the present invention have conducted various studies to obtain bifidobacteria having high survival rate in fermented dairy products such as drink yogurt and milk drinks. Bifidobacterium breve , which is a strain having unique properties
bacterium breve ) SBR3212 (FE
RM P-11915) was found (JP-A-4-320).
642 publication). This strain is characterized in that it can grow even in a pure milk medium under aerobic conditions and has excellent acid resistance, so that it is difficult to die during storage.
And further research on this strain revealed that Bifidobacterium breve
bacterium breve ) SBR3212 (FE
RM P-11915) and Lactobacillus casei ( L
actobacillus casei ) AST-8
(FERM P-12704) has been found to exhibit a very strong symbiotic relationship, and a bifidobacteria culture using these strains and a method for producing the same have been proposed (Japanese Patent Laid-Open No. HEI 5-1951).
227946). According to this invention, when a bifidobacteria is cultured under aerobic conditions in a medium containing milk as a main component that does not contain a growth promoting substance such as yeast extract, acid production is high, and a culture with a high viable count of bifidobacteria is obtained. Can be obtained.
【０００５】しかし、本発明者らは、さらにより風味の
良好なビフィズス菌培養物を得るために鋭意研究を進め
たところ、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Ｂｉｆｉ
ｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ）ＳＢＲ３２１２
（ＦＥＲＭ Ｐ−１１９１５）、ラクトバチルス・カゼ
イ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ）ＡＳＴ
−８（ＦＥＲＭ Ｐ−１２７０４）及びストレプトコッ
カス・サーモフィルス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ
ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）ＳＢＲ２１２２（ＦＥＲＭ
Ｐ−１３９０６）を混合培養することにより、ビフィ
ズス菌の生菌数が高く、風味の良好な培養物を得ること
ができることが判明し、本発明を完成するに至った。However, the inventors of the present invention have conducted extensive studies to obtain a culture of Bifidobacterium having a better flavor, and found that Bifidobacterium breve ( Bifif.
dobrium breve ) SBR3212
(FERM P-11915), Lactobacillus casei AST
-8 (FERM P-12704) and Streptococcus thermophilus ( Streptococcus)
thermophilus ) SBR2122 (FERM
It was revealed that a mixed culture of P-13906) can give a culture with a high viable count of bifidobacteria and a good flavor, thus completing the present invention.
【０００６】したがって、本発明は、よりビフィズス菌
の生菌数が高く、しかも風味の良好なビフィズス菌培養
物及びその製造法を提供することにある。すなわち、具
体的には、本発明は、ビフィドバクテリウム・ブレーベ
（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ）、ラ
クトバチルス・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｃ
ａｓｅｉ）及びストレプトコッカス・サーモフィルス
（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌ
ｕｓ）を混合培養することにより得られるビフィズス菌
の生菌数が少なくとも１×１０9 ＣＦＵ／ｍｌを維持す
ると共に風味に悪影響を及ぼす酢酸の生成量を抑制した
ビフィズス菌培養物を提供することを課題とする。ま
た、本発明は、ビフィズス菌の生菌数が少なくとも１×
１０9 ＣＦＵ／ｍｌを維持すると共に風味に悪影響を及
ぼす酢酸の生成量を抑制したビフィズス菌培養物をビフ
ィドバクテリウム・ブレーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅ
ｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ）、ラクトバチルス・カゼイ（Ｌ
ａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｃａｓｅｉ）及びストレプト
コッカス・サーモフィルス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕ
ｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）の混合培養により得る
方法を提供することを課題とする。[0006] Therefore, the present invention is to provide a culture of Bifidobacterium having a high viable count of Bifidobacterium and a good flavor, and a method for producing the same. That is, specifically, the present invention provides Bifidobacterium breve (Bifidobacterium breve), Lactobacillus casei (Lactobacillusc
asei ) and Streptococcus thermophilus ( Streptococcus thermophilus)
The present invention provides a bifidobacteria culture in which the viable cell count of bifidobacteria obtained by co-cultivation of us ) is at least 1 × 10 9 CFU / ml and the production of acetic acid that adversely affects flavor is suppressed. It is an issue. The present invention also provides that the viable cell count of Bifidobacterium is at least 1 ×.
Bifidobacterium breve ( Bifidobacterium breve) was prepared by maintaining the amount of acetic acid that adversely affects the flavor while maintaining 10 9 CFU / ml.
rum breve ), Lactobacillus casei ( L
Actobacillus casei ) and Streptococcus thermophilus ( Streptococcu)
and to provide a method of obtaining a mixed culture of s thermophilus).
【０００７】[0007]
【課題を解決するための手段】すなわち、本発明は、乳
を主成分とする培地でビフィドバクテリウム・ブレーベ
（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ）、ラ
クトバチルス・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ
ｃａｓｅｉ）及びストレプトコッカス・サーモフィルス
（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌ
ｕｓ）を混合培養して得られ、これらの菌の生菌体を含
有し、次の性質を有することを特徴とするビフィズス菌
培養物である。 （１）培養物の酸度が１．０％以上である。 （２）培養物に含まれる酢酸量の割合が、乳酸量に対し
て８％以下である。 （３）ビフィズス菌の生菌数が、１×１０9 ＣＦＵ／ｍ
ｌ以上である。さらに、本発明は、このようなビフィズ
ス菌培養物の製造法である。本発明をその製造法に基づ
いて説明する。Means for Solving the Problems That is, the present invention is bi in a medium composed mainly of milk Bifidobacterium breve (Bifidobacterium breve), Lactobacillus casei (Lactobacillus
casei ) and Streptococcus thermophilus ( Streptococcus thermophilus)
us ) is obtained by mixing and culturing, and contains the viable cells of these bacteria, and has the following properties. (1) The acidity of the culture is 1.0% or more. (2) The ratio of the amount of acetic acid contained in the culture is 8% or less with respect to the amount of lactic acid. (3) The viable cell count of Bifidobacterium is 1 × 10 9 CFU / m
It is 1 or more. Furthermore, the present invention is a method for producing such a bifidobacteria culture. The present invention will be described based on its manufacturing method.
【０００８】本発明では、乳を主成分とする原料に、ビ
フィドバクテリウム・ブレーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔ
ｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ）、ラクトバチルス・カゼイ
（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ）及びスト
レプトコッカス・サーモフィルス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏ
ｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）を接種し、混合
培養を行う。特に、ビフィドバクテリウム・ブレーベ
（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ）及び
ラクトバチルス・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ
ｃａｓｅｉ）からなる混合スターターとストレプトコ
ッカス・サーモフィルス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ
ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）の単独スターターを同時
に乳を主成分とする原料に接種し、培養を行うと良い。
なお、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Ｂｉｆｉｄｏ
ｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ）及びラクトバチルス
・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ）
からなる混合スターターとストレプトコッカス・サーモ
フィルス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏ
ｐｈｉｌｕｓ）の単独スターターは、１：１〜１０：１
の比率で混合し、培地に対して１〜５％（Ｖ／Ｖ）程度
接種すると良い。In the present invention, Bifidobacterium breve is used as a raw material containing milk as a main component.
erium breve ), Lactobacillus casei ( Lactobacillus casei ) and Streptococcus thermophilus ( Streptoco)
ccus thermophilus ) is inoculated and mixed culture is performed. In particular, Bifidobacterium breve (Bifidobacterium breve) and Lactobacillus casei (Lactobacillus
casei ) and a Streptococcus thermophilus ( Streptococcus)
It is advisable to inoculate a raw material containing milk as a main component at the same time with a single starter of thermophilus ) and perform culturing.
In addition, Bifidobacterium breve ( Bifido
bacteria breve ) and Lactobacillus casei ( Lactobacillus casei )
Mixed starter consists of a Streptococcus thermophilus (Streptococcus thermo
philus ) single starter is 1: 1 to 10: 1
It is advisable to mix them at a ratio of 1 and inoculate about 1 to 5% (V / V) with respect to the medium.
【０００９】本発明で用いるビフィドバクテリウム・ブ
レーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖ
ｅ）及びラクトバチルス・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉ
ｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ）からなる混合スターターは、５
代の継代培養を行ったときに、ビフィドバクテリウム・
ブレーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖ
ｅ）の生菌数が１×１０9 ＣＦＵ／ｍｌ以上、ラクトバ
チルス・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓ
ｅｉ）の生菌数が３×１０8 ＣＦＵ／ｍｌ以上、それぞ
れ維持されるような菌株を用いる。また、ストレプトコ
ッカス・サーモフィルス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ
ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）は、１２％還元脱脂乳培
地で、３７℃、１８時間培養したときに、その培養物の
乳酸酸度が１．０％未満の菌株を用いる。なお、同様の
条件で培養した培養物の乳酸酸度が１．０％以上となる
ストレプトコッカス・サーモフィルス（Ｓｔｒｅｐｔｏ
ｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）の菌株は、
ビフィズス菌と混合培養すると培養初期にビフィズス菌
を死滅させてしまうので好ましくない。 Bifidobacterium brev used in the present invention
e) and Lactobacillus casei (Lactobaci
mixed starter consisting llus casei), the 5
Bifidobacterium
Breve ( Bifidobacterium brev
viable counts of e) is 1 × 10 9 CFU / ml or more, Lactobacillus casei (Lactobacillus cas
Strains such that the viable cell count of ei ) is maintained at 3 × 10 8 CFU / ml or more are used. In addition, Streptococcus thermophilus ( Streptococcus
thermophilus ), a strain having a lactic acidity of less than 1.0% of the culture when used in a 12% reduced skim milk medium at 37 ° C. for 18 hours is used. In addition, Streptococcus thermophilus (Streptococcus thermophilus (Streptococcus spp.
strains of Coccus thermophilus )
Mixed culture with Bifidobacterium is not preferable because it kills Bifidobacterium in the early stage of culture.
【００１０】本発明で用いる乳を主成分とする原料は、
通常の発酵乳製品を製造する際に用いられるものであ
り、牛乳、粉乳、その他の乳製品である。これらの原料
を単独あるいは混合して用いる。さらに、培養に際して
は、通常の乳酸菌培養装置を用いることができる。この
ようにして、例えば、１２〜２０％還元脱脂乳培地で培
養した場合、３７℃、１６〜２４時間で各菌種は最高の
生菌数に達し、乳酸酸度が１．０％以上となると共に、
酢酸量（Ｗ／Ｖ）が乳酸量（Ｗ／Ｖ）に比較して８％以
下となるので、風味の良好なビフィズス菌培養物を得る
ことができる。そして、このビフィズス菌培養物は、そ
のまま発酵乳食品とすることもできるし、また、水、糖
類、果汁、香料などを適宜配合して発酵乳飲料とするこ
ともできる。The raw material composed mainly of milk used in the present invention is
It is used in the production of ordinary fermented dairy products, and is milk, milk powder, and other dairy products. These raw materials are used alone or as a mixture. Further, in culturing, a usual lactic acid bacterium culture device can be used. Thus, for example, when cultured in a 12 to 20% reduced skim milk medium, each bacterial species reaches the maximum viable cell count at 37 ° C. for 16 to 24 hours, and the lactic acid acidity becomes 1.0% or more. With
Since the amount of acetic acid (W / V) is 8% or less as compared with the amount of lactic acid (W / V), it is possible to obtain a bifidobacteria culture having a good flavor. And this bifidobacteria culture can be used as a fermented milk food as it is, or can be appropriately mixed with water, sugars, fruit juices, flavors and the like to be a fermented milk drink.
【００１１】ここで、本発明に係るビフィズス菌培養物
を得るために、特に好ましい各菌株について説明する。
ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃ
ｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ）ＳＢＲ３２１２（ＦＥＲＭ
Ｐ−１１９１５）は、生後数ヶ月の健康な母乳栄養児
の糞便から分離された菌株であって、以下のような菌学
的性質を示す。 （１）菌形（光学顕微鏡による観察） ＢＬ寒天平板培地を用い、３７℃、４８〜７２時間スチ
ールウール法により嫌気培養したとき 大きさ：０．５±０．３×１．１±０．５μｍ 形状：棍棒状あるいは分岐状の菌形を示す （２）グラム染色性 前記（１）と同一条件で培養したとき、陽性あるいは弱
陽性を示す。 （３）コロニー形態 前記（１）と同一条件で培養したときのコロニーの形態
は、次の通りである。 形状：円形 ***：円錐状あるいは凸円状 周縁：円滑 大きさ：１〜３ｍｍ 色調：白濁色あるいは赤褐色 表面：円滑で光沢有りHere, each of the particularly preferable strains for obtaining the culture of Bifidobacterium according to the present invention will be described.
Bifidobacterium breve
terium breve) SBR3212 (FERM
P-11915) is a strain isolated from the feces of healthy breast-fed infants several months after birth, and exhibits the following mycological properties. (1) Bacterial form (observation by optical microscope) When anaerobically cultivated by a steel wool method at 37 ° C. for 48 to 72 hours using a BL agar plate medium Size: 0.5 ± 0.3 × 1.1 ± 0. 5 μm shape: shows a club-shaped or branched fungus form (2) Gram stainability It shows positive or weakly positive when cultured under the same conditions as in (1) above. (3) Colony morphology The morphology of colonies when cultured under the same conditions as in (1) above is as follows. Shape: Circular ridge: Conical or convex circular Edge: Smooth Size: 1-3 mm Color tone: Cloudy or reddish brown Surface: Smooth and glossy
【００１２】（４）芽胞形成：陰性 （５）ガス産生：陰性 （６）運動性：陰性 （７）カタラーゼ活性：陰性 （８）ミルク凝固性：陽性 （９）ゼラチン液化性：陰性 （１０）硝酸塩還元性：陰性 （１１）インドール産生：陰性 （１２）硫化水素産生：陰性 （１３）酢酸／Ｌ（＋）乳酸のモル比：１．７±０．３ （１４）糖の発酵性 リボース、グルコース、マンノース、フラクトース、ガ
ラクトース、シュークロース、マルトース、セロビオー
ス、ラクトース、トレハロース、メリビオース、ラフィ
ノース、デキストリン、マンニトール、ソルビトール、
エスクリン、サリシン、アミグダリン、α−メチル−グ
ルコシドは、陽性。アラビノース、キシロース、ラムノ
ース、メレチトース、澱粉、グリコーゲン、イヌリン、
イノシトールは、陰性。(4) Spore formation: negative (5) Gas production: negative (6) Motility: negative (7) Catalase activity: negative (8) Milk coagulation: positive (9) Gelatin liquefaction: negative (10) Nitrate reduction: Negative (11) Indole production: Negative (12) Hydrogen sulfide production: Negative (13) Acetic acid / L (+) lactic acid molar ratio: 1.7 ± 0.3 (14) Sugar fermentability Ribose, Glucose, mannose, fructose, galactose, sucrose, maltose, cellobiose, lactose, trehalose, melibiose, raffinose, dextrin, mannitol, sorbitol,
Esculin, salicin, amygdalin, and α-methyl-glucoside are positive. Arabinose, xylose, rhamnose, melezitose, starch, glycogen, inulin,
Inositol is negative.
【００１３】なお、上記菌株の母乳栄養児糞便からの分
離は、「腸内細菌の世界」（光岡知足著、叢文社、１９
８０年発行）に記載の方法に従って行った。そして、分
離した菌株の中から耐酸性が高く好気的生育に優れた菌
株を選び出し、さらに、それらの菌株を低ｐＨの酢酸緩
衝液で数回処理した後、最も生残性に優れた菌株を分離
した。また、この菌株は、“Ｂｅｒｇｒｙ’ｓ ｏｆ
Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ”
（Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｌｋｉｎｓ，１９８６
年発行）及び「腸内細菌の世界」（光岡知足著、叢文
社、１９８０年発行）に記載の基準を参照し、ビフィド
バクテリウム・ブレーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉ
ｕｍ ｂｒｅｖｅ）と同定した。この菌株は、ビフィド
バクテリウム・ブレーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉ
ｕｍ ｂｒｅｖｅ）の菌学的性質を示すが、さらに高い
耐酸性及び酸素耐性を有する点で新規であり、工業技術
院生命工学工業技術研究所にビフィドバクテリウム・ブ
レーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖ
ｅ）ＳＢＲ３２１２ 受託番号（ＦＥＲＭ Ｐ−１１９
１５）として寄託されている。The isolation of the above strains from the feces of breast-fed infants is described in "The World of Intestinal Bacteria" (Mitsuoka Tomohi, Moubunsha, 19).
Published in 1980). Then, from among the isolated strains, strains having high acid resistance and excellent aerobic growth were selected, and further, those strains were treated with a low pH acetate buffer several times, and then the strains with the best survival properties were selected. Separated. In addition, this strain is "Bergry's of
Systematic bacteriology ”
(Williams & Willkins, 1986
Issue) and "The world of intestinal bacteria" (written by Tomofumi Mitsuoka, Moubunsha, published in 1980), with reference to Bifidobacterium breve ( Bifidobacterium
um breve ). This strain is Bifidobacterium breve ( Bifidobacterium
show mycological properties of um breve), are novel in that they have a higher acid resistance and oxygen resistance, Agency of Bioscience and Human Technology Institute Bifidobacterium breve (Bifidobacterium brev
e ) SBR3212 accession number (FERM P-119
15) has been deposited.
【００１４】ラクトバチルス・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａ
ｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ）ＡＳＴ−８（ＦＥＲＭ Ｐ
−１２７０４）は、以下のような菌学的性質を示す。 （１）菌形（光学顕微鏡による観察） ＢＬ寒天平板培地を用い、３７℃、４８〜７２時間スチ
ールウール法により嫌気培養したとき 大きさ：０．５±０．３×３．２±１．５μｍ 形状：短桿菌で、長連鎖を形成する傾向にある。 （２）グラム染色性 前記（１）と同一条件で培養したとき、陽性を示す。 （３）コロニー形態 前記（１）と同一条件で培養したときのコロニーの形態
は、次の通りである。 形状：円形 ***：中凸状 周縁：波状 大きさ：２〜４ｍｍ 色調：茶褐色 表面：ラフ[0014] Lactobacillus casei (Lactoba
cillus casei ) AST-8 (FERM P
-12704) shows the following mycological properties. (1) Bacterial form (observation with an optical microscope) When anaerobically cultivated by a steel wool method at 37 ° C. for 48 to 72 hours using a BL agar plate medium Size: 0.5 ± 0.3 × 3.2 ± 1. 5 μm shape: short bacilli, tending to form long chains. (2) Gram stainability It shows positive when cultured under the same conditions as in (1) above. (3) Colony morphology The morphology of colonies when cultured under the same conditions as in (1) above is as follows. Shape: Circular ridge: Medium convex Edge: Wavy Size: 2-4 mm Color tone: Brown Surface: Rough
【００１５】（４）芽胞形成：陰性 （５）ガス産生：陰性 （６）運動性：陰性 （７）カタラーゼ活性：陰性 （８）ミルク凝固性：陽性 （９）ゼラチン液化性：陰性 （１０）硝酸塩還元性：陰性 （１１）インドール産生：陰性 （１２）硫化水素産生：陰性 （１３）１５℃発育性：発育する （１４）４５℃発育性：発育しない （１５）乳酸の旋光性：Ｌ（＋） （１６）糖の発酵性 リボース、グルコース、マンノース、フラクトース、ガ
ラクトース、シュークロース、マルトース、セロビオー
ス、ラクトース、トレハロース、マンニトール、ソルビ
トール、エスクリン、サリシン、アミグダリン、α−メ
チル−グルコシドは、陽性。アラビノース、キシロー
ス、ラムノース、メリビオース、ラフィノース、メレチ
トース、スターチは、陰性。(4) Spore formation: negative (5) Gas production: negative (6) Motility: negative (7) Catalase activity: negative (8) Milk coagulation: positive (9) Gelatin liquefaction: negative (10) Nitrate reduction: Negative (11) Indole production: Negative (12) Hydrogen sulfide production: Negative (13) 15 ° C development: Growth (14) 45 ° C development: No development (15) Lactic acid rotation of L: L ( +) (16) Fermentability of sugar Ribose, glucose, mannose, fructose, galactose, sucrose, maltose, cellobiose, lactose, trehalose, mannitol, sorbitol, esculin, salicin, amygdalin, α-methyl-glucoside are positive. Arabinose, xylose, rhamnose, melibiose, raffinose, melezitose, and starch are negative.
【００１６】なお、上記菌株は、“Ｂｅｒｇｒｙ’ｓ
ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇ
ｙ”（Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｌｋｉｎｓ，１９
８６年発行）及び「腸内細菌の世界」（光岡知足著、叢
文社、１９８０年発行）に記載の基準を参照し、ラクト
バチルス・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｈｉｌｌｕｓｃａ
ｓｅｉ）と同定した。また、この菌株は工業技術院生命
工学工業技術研究所にラクトバチルス・カゼイ（Ｌａｃ
ｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ）ＡＳＴ−８ 受託
番号（ＦＥＲＭ Ｐ−１２７０４）として寄託されてい
る。The above-mentioned strain is "Bergry's".
of Systematic vectoriolog
y ”(Williams & Willkins, 19
1986) and "The world of intestinal bacteria" (Mitsuoka Tomohi, Moubunsha, 1980), and the Lactobacillus casei ( Lactobacillusca).
sei ). In addition, this strain was found in Lactobacillus casei ( Lac
tobacillus casei ) AST-8 Deposit No. (FERM P-12704).
【００１７】ストレプトコッカス・サーモフィルス（Ｓ
ｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕ
ｓ）ＳＢＲ２１２２（ＦＥＲＭ Ｐ−１３９０６）は、
以下のような菌学的性質を示す。 （１）菌形（光学顕微鏡による観察） ＢＬ寒天平板培地を用い、３７℃、４８時間好気培養し
たとき 大きさ：０．８±０．１μｍ 形状：球状あるいは楕円状で連鎖を示す。 （２）グラム染色性 前記（１）と同一条件で培養したとき、陽性あるいは弱
陽性を示す。 （３）コロニー形態 前記（１）と同一条件で培養したときのコロニーの形態
は、次の通りである。 形状：円形 ***：凸円状 周縁：円滑 大きさ：１〜３ｍｍ 色調：白褐色あるいは赤褐色 表面：円滑で光沢有りStreptococcus thermophilus ( S
treptococcus thermophilu
s ) SBR2122 (FERM P-13906)
It has the following mycological properties. (1) Bacterial form (observation by an optical microscope) When aerobically cultured on a BL agar plate medium at 37 ° C. for 48 hours Size: 0.8 ± 0.1 μm Shape: spherical or elliptical, showing a chain. (2) Gram stainability It shows positive or weakly positive when cultured under the same conditions as in (1) above. (3) Colony morphology The morphology of colonies when cultured under the same conditions as in (1) above is as follows. Shape: Circular ridge: Convex circle Perimeter: Smooth Size: 1-3 mm Color tone: White brown or reddish brown Surface: Smooth and glossy
【００１８】（４）芽胞形成：陰性 （５）ガス産生：陰性 （６）運動性：陰性 （７）カタラーゼ活性：陰性 （８）１０℃リトマスミルクの生育性：陰性 （９）４０℃リトマスミルクの生育性：陽性 （１０）５０℃リトマスミルクの生育性：陽性 （１１）６０℃、３０分耐熱性：陽性 （１２）２．０％ＮａＣｌ生育性：陽性 （１３）４．０％ＮａＣｌ生育性：陰性 （１４）６．５％ＮａＣｌ生育性：陰性 （１５）０．１％（Ｗ／Ｖ）メチレンブルー添加乳の生
育性：陰性 （１６）ｐＨ９．６での生育性：陰性 （１７）乳酸の旋光性：Ｌ（＋） （１６）糖の発酵性 グルコース、フラクトース、シュークロース、ラクトー
スは、陽性。アラビノース、デキストリン、グリセロー
ス、イヌリン、マンニトール、ラムノース、サリシン、
ソルビトール、スターチ、キシロース、ラフィノース、
マルトース、トレハロースは、陰性。(4) Spore formation: Negative (5) Gas production: Negative (6) Motility: Negative (7) Catalase activity: Negative (8) 10 ° C litmus milk growth: Negative (9) 40 ° C litmus milk Growth: Positive (10) Litmus milk growth at 50 ° C: Positive (11) Heat resistance at 60 ° C for 30 minutes: Positive (12) 2.0% NaCl growth: Positive (13) 4.0% NaCl growth Gender: Negative (14) 6.5% NaCl growth: Negative (15) 0.1% (W / V) methylene blue added milk growth: Negative (16) Growth at pH 9.6: Negative (17) Optical activity of lactic acid: L (+) (16) Fermentability of sugar Glucose, fructose, sucrose, and lactose are positive. Arabinose, dextrin, glycerose, inulin, mannitol, rhamnose, salicin,
Sorbitol, starch, xylose, raffinose,
Maltose and trehalose are negative.
【００１９】なお、上記菌株は、“Ｂｅｒｇｒｙ’ｓ
ｏｆ Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇ
ｙ”（Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｌｋｉｎｓ，１９
８６年発行）及び「腸内細菌の世界」（光岡知足著、叢
文社、１９８０年発行）に記載の基準を参照し、ストレ
プトコッカス・サーモフィルス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃ
ｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）と同定した。ま
た、この菌株は、工業技術院生命工学工業技術研究所
に、ストレプトコッカス・サーモフィルス（Ｓｔｒｅｐ
ｔｏｃｏｃｅｕｓ ｔｈｅｍｏｐｈｉｌｕｓ）ＳＢＲ２
１２２、受託番号（ＦＥＲＭ Ｐ−１３９０６）として
寄託されている。以下に試験例及び実施例を示し、本発
明を詳しく説明する。The above-mentioned strain is "Bergry's".
of Systematic vectoriolog
y ”(Williams & Willkins, 19
1986) and "World of Enterobacteriaceae" (Mitsuoka Tomohi, Soubunsha, 1980), with reference to Streptococcus thermophilus ( Streptococcus)
cus thermophilus ). In addition, this strain was transferred to Streptococcus thermophilus (Streptococcus thermophilus Strep
tococeus thermophilus ) SBR2
122, deposit number (FERM P-13906). The present invention will be described in detail below by showing test examples and examples.
【００２０】[0020]
【試験例１】１２％還元脱脂乳培地を９５℃、３０分間
加熱殺菌した後、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Ｂ
ｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ）ＳＢＲ３
２１２（ＦＥＲＭ Ｐ−１１９１５）とラクトバチルス
・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ）
ＡＳＴ−８（ＦＥＲＭ Ｐ−１２７０４）を混合培養し
たスターター２％とストレプトコッカス・サーモフィル
ス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉ
ｌｕｓ）ＳＢＲ２１２２（ＦＥＲＭ Ｐ−１３９０６）
を単独で培養したスターター０．５％を接種し、３７
℃、好気的条件下で１８時間培養した。なお、培養後の
生菌数及び乳酸酸度を比較するために、ストレプトコッ
カス・サーモフィルス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ
ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）ＳＢＲ２１２２（ＦＥＲＭ
Ｐ−１３９０６）に代えてストレプトコッカス・サー
モフィルス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍ
ｏｐｈｉｌｕｓ）ＳＢＲ２１１５を用い、同様の培養を
行った。また、ストレプトコッカス・サーモフィルス
（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌ
ｕｓ）ＳＢＲ２１１５とストレプトコッカス・サーモフ
ィルス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐ
ｈｉｌｕｓ）ＳＢＲ２１２２（ＦＥＲＭ Ｐ−１３９０
６）については、単独で同様の培養を行い、さらには、
ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃ
ｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ）ＳＢＲ３２１２（ＦＥＲＭ
Ｐ−１１９１５）とラクトバチルス・カゼイ（Ｌａｃ
ｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ）ＡＳＴ−８（ＦＥ
ＲＭ Ｐ−１２７０４）については、混合して同様の培
養を行った。その結果を表１に示す。[Test Example 1] 12% reduced skim milk medium was sterilized by heating at 95 ° C for 30 minutes, and then Bifidobacterium breve ( B
ifidobacterium breve ) SBR3
212 (FERM P-11915) and Lactobacillus casei
2% starter in which AST-8 (FERM P-12704) was mixed and cultured, and Streptococcus thermophilus ( Streptococcus thermophi)
lus ) SBR2122 (FERM P-13906)
Was inoculated with 0.5% of the starter cultured alone, and
The cells were cultured under aerobic conditions at 18 ° C for 18 hours. In order to compare the viable cell count and lactic acid acidity after culturing, Streptococcus thermophilus ( Streptococcus
thermophilus ) SBR2122 (FERM
P-13906) instead of Streptococcus thermophils ( Streptococcus therm
Ophilus ) SBR2115 was used to carry out the same culture. In addition, Streptococcus thermophilus ( Streptococcus thermophile
us ) SBR2115 and Streptococcus thermop
hilus ) SBR2122 (FERM P-1390)
Regarding 6), the same culture was performed independently, and further,
Bifidobacterium breve
terium breve) SBR3212 (FERM
P-11915) and Lactobacillus casei ( Lac
tobacillus casei ) AST-8 (FE
RM P-12704) was mixed and the same culture was performed. The results are shown in Table 1.
【００２１】[0021]
【表１】 ──────────────────────────────────── 菌株名 培養開始直後 培養１８時間 ──────────────────────────────────── SBR2115株 生菌数（CFU/ml） 5.2×107 2.3×109 乳酸酸度 (%) 0.36 1.10 ──────────────────────────────────── SBR2122株 生菌数（CFU/ml） 3.8×107 2.1×109 乳酸酸度 (%) 0.37 0.85 ──────────────────────────────────── SBR3212株 生菌数（CFU/ml） 3.2×107 3.8×109 AST-8株 生菌数（CFU/ml） 2.6×107 7.3×108 乳酸酸度 (%) 0.37 1.28 ──────────────────────────────────── SBR3212株 生菌数（CFU/ml） 4.3×107 2.5×106 AST-8株 生菌数（CFU/ml） 1.9×107 7.1×107 SBR2115株 生菌数（CFU/ml） 5.2×107 2.0×109 乳酸酸度 (%) 0.38 1.27 ──────────────────────────────────── SBR3212株 生菌数（CFU/ml） 3.6×107 3.1×109 AST-8株 生菌数（CFU/ml） 1.9×107 1.8×108 SBR2122株 生菌数（CFU/ml） 5.2×107 1.2×109 乳酸酸度 (%) 0.36 1.11 ────────────────────────────────────[Table 1] ──────────────────────────────────── Strain name Immediately after the start of culture 18 hours of culture ── ────────────────────────────────── SBR2115 strain Viable cell count (CFU / ml) 5.2 × 10 7 2.3 × 10 9 Lactic acid degree (%) 0.36 1.10 ──────────────────────────────────── SBR2122 strain Viable count (CFU / ml) 3.8 × 10 7 2.1 × 10 9 Lactic acid degree (%) 0.37 0.85 ─────────────────────────────── ────── SBR3212 strain Viable cell count (CFU / ml) 3.2 × 10 7 3.8 × 10 9 AST-8 strain Viable cell count (CFU / ml) 2.6 × 10 7 7.3 × 10 8 Lactic acid content (%) 0.37 1.28 ──────────────────────────────────── SBR3212 strain Viable cell count (CFU / ml) 4.3 × 10 7 2.5 × 10 6 AST-8 strain Viable cell count (CFU / ml) 1.9 × 10 7 7.1 × 10 7 SB R2115 strain Viable cell count (CFU / ml) 5.2 × 10 7 2.0 × 10 9 Lactic acid degree (%) 0.38 1.27 ────────────────────────── ─────────── SBR3212 strain Viable cell count (CFU / ml) 3.6 × 10 7 3.1 × 10 9 AST-8 strain Viable cell count (CFU / ml) 1.9 × 10 7 1.8 × 10 8 SBR2122 Strain viable count (CFU / ml) 5.2 × 10 7 1.2 × 10 9 Lactic acid degree (%) 0.36 1.11 ─────────────────────────── ──────────
【００２２】以上の通り、ビフィドバクテリウム・ブレ
ーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ）
ＳＢＲ３２１２（ＦＥＲＭ Ｐ−１１９１５）、ラクト
バチルス・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａ
ｓｅｉ）ＡＳＴ−８（ＦＥＲＭ Ｐ−１２７０４）及び
ストレプトコッカス・サーモフィルス（Ｓｔｒｅｐｔｏ
ｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）ＳＢＲ２１
２２（ＦＥＲＭ Ｐ−１３９０６）を混合培養すること
により、乳酸酸度が１．０％以上で、かつ、ビフィズス
菌の生菌数が１×１０9 ＣＦＵ／ｍｌ以上であるビフィ
ズス菌培養物を得ることができた。As described above, Bifidobacterium breve
SBR3212 (FERM P-11915), Lactobacillus casei ( Lactobacillus ca
sei ) AST-8 (FERM P-12704) and Streptococcus thermophilus ( Strepto)
coccus thermophilus ) SBR21
22 (FERM P-13906) is mixed and cultured to obtain a bifidobacteria culture having a lactic acidity of 1.0% or more and a viable Bifidobacterium count of 1 × 10 9 CFU / ml or more. I was able to.
【００２３】[0023]
【試験例２】試験例１で用いた培養物の中、ビフィドバ
クテリウム・ブレーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕ
ｍ ｂｒｅｖｅ）ＳＢＲ３２１２（ＦＥＲＭ Ｐ−１１
９１５）及びラクトバチルス・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａ
ｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ）ＡＳＴ−８（ＦＥＲＭ Ｐ
−１２７０４）を混合培養した培養物とビフィドバクテ
リウム・ブレーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ
ｂｒｅｖｅ）ＳＢＲ３２１２（ＦＥＲＭ Ｐ−１１９１
５）、ラクトバチルス・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌ
ｌｕｓ ｃａｓｅｉ）ＡＳＴ−８（ＦＥＲＭ Ｐ−１２
７０４）及びストレプトコッカス・サーモフィルス（Ｓ
ｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕ
ｓ）ＳＢＲ２１２２（ＦＥＲＭ Ｐ−１３９０６）を混
合培養した培養物について、培養１８時間の培養物中に
含まれる乳酸量及び酢酸量を測定した。その結果を表２
に示す。Test Example 2 Among the cultures used in Test Example 1, Bifidobacterium breve ( Bifidobacterium
m breve ) SBR3212 (FERM P-11)
915) and Lactobacillus casei ( Lactoba)
cillus casei ) AST-8 (FERM P
-12704) mixed culture and Bifidobacterium breve ( Bifidobacterium
breve ) SBR3212 (FERM P-1191)
5), Lactobacillus
lus casei ) AST-8 (FERM P-12)
704) and Streptococcus thermophilus ( S
treptococcus thermophilu
s ) Regarding the culture in which SBR2122 (FERM P-13906) was mixed and cultured, the amount of lactic acid and the amount of acetic acid contained in the culture for 18 hours of culture were measured. The results are shown in Table 2.
Shown in.
【００２４】[0024]
【表２】 ──────────────────────────────────── 菌株名 乳酸量 (g/100ml) 酢酸量 (g/100ml) 乳酸酸度 (%) ──────────────────────────────────── SBR3212株 0.69 0.39 1.28 AST-8株 ──────────────────────────────────── SBR3212株 0.87 0.05 1.11 AST-8株 SBR2122株 ────────────────────────────────────[Table 2] ──────────────────────────────────── Strain name Lactic acid amount (g / 100ml) Acetic acid Amount (g / 100ml) Lactic acid degree (%) ──────────────────────────────────── SBR3212 strain 0.69 0.39 1.28 AST-8 stock ──────────────────────────────────── SBR3212 stock 0.87 0.05 1.11 AST-8 Stock SBR2122 Stock ────────────────────────────────────
【００２５】以上の通り、ビフィドバクテリウム・ブレ
ーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ）
ＳＢＲ３２１２（ＦＥＲＭ Ｐ−１１９１５）及びラク
トバチルス・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃ
ａｓｅｉ）ＡＳＴ−８（ＦＥＲＭ Ｐ−１２７０４）を
混合培養した培養物は、酢酸量が乳酸量の５６．５％で
あるのに対し、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Ｂｉ
ｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ）ＳＢＲ３２
１２（ＦＥＲＭ Ｐ−１１９１５）、ラクトバチルス・
カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ）Ａ
ＳＴ−８（ＦＥＲＭ Ｐ−１２７０４）及びストレプト
コッカス・サーモフィルス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕ
ｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）ＳＢＲ２１２２（ＦＥ
ＲＭ Ｐ−１３９０６）を混合培養した培養物は、酢酸
量が乳酸量の５．７％であり、酢酸量の占める割合が非
常に少ないビフィズス菌培養物を得ることができた。As described above, Bifidobacterium breve
SBR3212 (FERM P-11915) and Lactobacillus c
Ase ) AST-8 (FERM P-12704) in the mixed culture, the amount of acetic acid was 56.5% of the amount of lactic acid, whereas Bifidobacterium breve ( Bi
fidobacterium breve ) SBR32
12 (FERM P-11915), Lactobacillus
Lactobacillus casei A
ST-8 (FERM P-12704) and Streptococcus thermophilus ( Streptococcu
s thermophilus ) SBR2122 (FE
The culture in which RM P-13906) was mixed and cultured had an acetic acid content of 5.7% of the lactic acid content, and a bifidobacteria culture in which the proportion of the acetic acid content was very small could be obtained.
【００２６】[0026]
【試験例３】１６％還元脱脂乳培地を９５℃、３０分間
加熱殺菌した後、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Ｂ
ｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ）ＳＢＲ３
２１２（ＦＥＲＭ Ｐ−１１９１５）及びラクトバチル
ス・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅ
ｉ）ＡＳＴ−８（ＦＥＲＭ Ｐ−１２７０４）を混合培
養したスターター２％とストレプトコッカス・サーモフ
ィルス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐ
ｈｉｌｕｓ）ＳＢＲ２１２２（ＦＥＲＭ Ｐ−１３９０
６）を単独で培養したスターター０．５％を接種し、３
７℃、好気的条件下で１８時間培養した。この培養物
は、乳酸酸度１．４７％、ｐＨ４．３、ビフィドバクテ
リウム・ブレーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ
ｂｒｅｖｅ）の生菌数２．１×１０9 ＣＦＵ／ｍｌ、ラ
クトバチルス・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ
ｃａｓｅｉ）の生菌数３．１×１０8 ＣＦＵ／ｍｌ及び
ストレプトコッカス・サーモフィルス（Ｓｔｒｅｐｔｏ
ｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）の生菌数
２．５×１０9 ＣＦＵ／ｍｌであった。[Test Example 3] A 16% reduced skim milk medium was sterilized by heating at 95 ° C for 30 minutes, and then Bifidobacterium breve ( B
ifidobacterium breve ) SBR3
212 (FERM P-11915) and Lactobacillus casei ( Lactobacillus case)
i ) 2% starter in which AST-8 (FERM P-12704) was mixed and cultured, and Streptococcus thermophilus ( Streptococcus thermop)
hilus ) SBR2122 (FERM P-1390)
6) was inoculated with 0.5% of the starter cultivated alone, and 3
The cells were cultured at 7 ° C under aerobic conditions for 18 hours. This culture has a lactic acid content of 1.47%, a pH of 4.3, and Bifidobacterium breve ( Bifidobacterium).
breve ) viable cell count 2.1 × 10 9 CFU / ml, Lactobacillus casei ( Lactobacillus)
casei ) 3.1 × 10 8 CFU / ml and Streptococcus thermophilus ( Strepto)
The viable cell count of Coccus thermophilus was 2.5 × 10 9 CFU / ml.
【００２７】また、対照として、ビフィドバクテリウム
・ブレーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅ
ｖｅ）ＳＢＲ３２１２（ＦＥＲＭ Ｐ−１１９１５）及
びラクトバチルス・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕ
ｓ ｃａｓｅｉ）ＡＳＴ−８（ＦＥＲＭ Ｐ−１２７０
４）を混合培養したスターターを用い、同一の培地で３
４℃、好気的条件下で１６時間培養した。この培養物
は、乳酸酸度１．５２％、ｐＨ４．４であった。Further, as a control, Bifidobacterium brebe ( Bifidobacterium bre
ve ) SBR3212 (FERM P-11915) and Lactobacillus casei ( Lactobacillus).
s casei ) AST-8 (FERM P-1270)
Using the starter obtained by mixing and culturing 4) in the same medium,
The cells were cultured at 4 ° C under aerobic conditions for 16 hours. The culture had a lactic acidity of 1.52% and a pH of 4.4.
【００２８】そして、このようにして得られたそれぞれ
の培養物５０％、庶糖７％、水４３％を混合し、均質処
理して、風味の官能評価を実施した。評価は、専門のパ
ネラー１２名の絶対評価によった。その結果、３菌種の
混合培養物については美味しいという評価であったが、
２菌種の混合培養物については不味いという評価であっ
た。Then, 50% of each culture thus obtained, 7% of sucrose and 43% of water were mixed and homogenized to carry out a sensory evaluation of flavor. The evaluation was based on the absolute evaluation by 12 professional panelists. As a result, the mixed culture of the three strains was evaluated as delicious,
The mixed culture of the two bacterial strains was evaluated as having no taste.
【００２９】[0029]
【実施例１】脱脂粉乳１６ｋｇを水８４ｋｇに溶解した
培地を９５℃、３０分間加熱殺菌した後、ビフィドバク
テリウム・ブレーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ
ｂｒｅｖｅ）ＳＢＲ３２１２（ＦＥＲＭ Ｐ−１１９
１５）とラクトバチルス・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉ
ｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ）ＡＳＴ−８（ＦＥＲＭ Ｐ−１
２７０４）を混合培養したスターター２％とストレプト
コッカス・サーモフィルス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕ
ｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）ＳＢＲ２１２２（ＦＥ
ＲＭ Ｐ−１３９０６）を単独で培養したスターター
０．５％を接種し、３７℃、好気的条件下で１８時間培
養して、乳酸酸度１．５２％、ｐＨ４．２の培養物を得
た。次に、この培養物を均質処理した後、培養物５０ｋ
ｇ、庶糖７ｋｇ、香料０．２ｋｇ及び水４２．８ｋｇを
混合し、均質処理してビフィズス菌発酵乳飲料９０ｌを
得た。そして、２００ｍｌ容ガラス瓶に充填し、４３０
個の製品を製造した。Example 1 A medium prepared by dissolving 16 kg of skim milk powder in 84 kg of water was sterilized by heating at 95 ° C. for 30 minutes, and then Bifidobacterium breve ( Bifidobacterium)
breve ) SBR3212 (FERM P-119
15) and Lactobacillus casei (Lactobaci
llus casei ) AST-8 (FERM P-1)
2704) was mixed and cultured with Streptococcus thermophilus ( Streptococcus
s thermophilus ) SBR2122 (FE
RM P-13906) alone was inoculated with 0.5% of the starter and cultured at 37 ° C. under aerobic conditions for 18 hours to obtain a culture with a lactic acid acidity of 1.52% and a pH of 4.2. . Next, after homogenizing this culture, the culture 50k
g, 7 kg of sucrose, 0.2 kg of fragrance and 42.8 kg of water were mixed and homogenized to obtain 90 l of bifidobacteria fermented milk drink. Then, fill a 200 ml glass bottle with 430
Individual products were manufactured.
【００３０】なお、このビフィズス菌発酵乳飲料は、乳
酸酸度０．７６％、ｐＨ４．２、ビフィドバクテリウム
・ブレーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅ
ｖｅ）の生菌数１．６×１０9 ＣＦＵ／ｍｌ、ラクトバ
チルス・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓ
ｅｉ）の生菌数２．１×１０8 ＣＦＵ／ｍｌ及びストレ
プトコッカス・サーモフィルス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃ
ｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）の生菌数２．７×
１０9 ＣＦＵ／ｍｌであった。また、乳酸量と酢酸量を
測定した結果、乳酸量０．５９ｇ／１００ｍｌ、酢酸量
０．０３ｇ／１００ｍｌで、酢酸量が乳酸量の５．２％
となり、風味が良好であった。さらに、このビフィズス
菌発酵乳飲料を１０℃、１０日間保存した後のビフィド
バクテリウム・ブレーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉ
ｕｍ ｂｒｅｖｅ）の生菌数７．３×１０7 ＣＦＵ／ｍ
ｌであった。This Bifidobacteria fermented milk drink had a Lactic acid content of 0.76%, a pH of 4.2, and Bifidobacterium breve.
ve ) viable cell count 1.6 × 10 9 CFU / ml, Lactobacillus cas
ei ) viable cell count 2.1 × 10 8 CFU / ml and Streptococcus thermophilus ( Streptococ
Cus thermophilus ) 2.7 ×
It was 10 9 CFU / ml. In addition, as a result of measuring the amount of lactic acid and the amount of acetic acid, the amount of lactic acid was 0.59 g / 100 ml, the amount of acetic acid was 0.03 g / 100 ml, and the amount of acetic acid was 5.2% of the amount of lactic acid.
The flavor was good. Further, this Bifidobacterium fermented milk drink was stored at 10 ° C. for 10 days, and Bifidobacterium breve ( Bifidobacterium
um breve ) viable cell count 7.3 × 10 7 CFU / m
It was l.
【００３１】[0031]
【実施例２】脱脂粉乳１．２ｋｇを水８．８ｋｇに溶解
した培地を１１５℃、２０分間滅菌した後、ビフィドバ
クテリウム・ブレーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕ
ｍｂｒｅｖｅ）ＳＢＲ３２１２（ＦＥＲＭ Ｐ−１１９
１５）とラクトバチルス・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉ
ｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ）ＡＳＴ−８（ＦＥＲＭ Ｐ−１
２７０４）を混合培養したスターター２％とストレプト
コッカス・サーモフィルス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕ
ｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）ＳＢＲ２１２２（ＦＥ
ＲＭ Ｐ−１３９０６）を単独で培養したスターター
０．５％を接種し、３４℃、１８時間培養して、スター
ター１０ｋｇを調製し、脱脂粉乳１６ｋｇを水８４ｋｇ
に溶解した培地を９５℃、３０分間加熱殺菌した後、こ
の調製したスターター３ｌを接種して、３７℃、好気的
条件下で１８時間培養し、乳酸酸度１．５４％、ｐＨ
４．２の培養物を得た。そして、この培養物３５ｋｇ、
庶糖８ｋｇ、ペクチン０．４５ｋｇ、香料０．２ｋｇ及
び水５６．３５ｋｇを混合し、均質処理してビフィズス
菌発酵乳飲料９１ｌを得た。そして、２００ｍｌ容ガラ
ス瓶に充填し、４４０個の製品を製造した。Example 2 A medium prepared by dissolving 1.2 kg of skim milk powder in 8.8 kg of water was sterilized at 115 ° C. for 20 minutes, and then Bifidobacterium breve ( Bifidobacterium)
mbrev ) SBR3212 (FERM P-119)
15) and Lactobacillus casei (Lactobaci
llus casei ) AST-8 (FERM P-1)
2704) was mixed and cultured with Streptococcus thermophilus ( Streptococcus
s thermophilus ) SBR2122 (FE
RM P-13906) alone was inoculated with 0.5% of the starter and cultured at 34 ° C. for 18 hours to prepare 10 kg of the starter, 16 kg of skim milk powder and 84 kg of water.
After sterilizing the medium dissolved in the above by heat sterilization at 95 ° C for 30 minutes, inoculate with 3 l of the prepared starter and incubate at 37 ° C under aerobic conditions for 18 hours to obtain a lactic acid acidity of 1.54%, pH.
A culture of 4.2 was obtained. And 35 kg of this culture,
8 kg of sucrose, 0.45 kg of pectin, 0.2 kg of fragrance and 56.35 kg of water were mixed and homogenized to obtain 91 L of bifidobacteria fermented milk drink. And it filled in a 200 ml glass bottle and manufactured 440 products.
【００３２】なお、このビフィズス菌発酵乳飲料は、乳
酸酸度０．５４％、ｐＨ４．２、ビフィドバクテリウム
・ブレーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅ
ｖｅ）の生菌数５．２×１０8 ＣＦＵ／ｍｌ、ラクトバ
チルス・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓ
ｅｉ）の生菌数２．６×１０8 ＣＦＵ／ｍｌ及びストレ
プトコッカス・サーモフィルス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃ
ｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）の生菌数９．７×
１０8 ＣＦＵ／ｍｌであった。また、乳酸量と酢酸量を
測定した結果、乳酸量０．４６ｇ／１００ｍｌ、酢酸量
０．０３ｇ／１００ｍｌで、酢酸量が乳酸量の６．５％
となり、風味が良好であった。さらに、このビフィズス
菌発酵乳飲料を１０℃、１０日間保存した後のビフィド
バクテリウム・ブレーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉ
ｕｍ ｂｒｅｖｅ）の生菌数２．６×１０6 ＣＦＵ／ｍ
ｌであった。This Bifidobacterium fermented milk beverage has a Lactic acid content of 0.54%, a pH of 4.2, and Bifidobacterium breve.
The number of viable bacteria ve) 5.2 × 10 8 CFU / ml, Lactobacillus casei (Lactobacillus cas
ei ) viable cell count of 2.6 × 10 8 CFU / ml and Streptococcus thermophilus ( Streptococcus
cus thermophilus ) viable cell count 9.7 ×
It was 10 8 CFU / ml. Moreover, as a result of measuring the amount of lactic acid and the amount of acetic acid, the amount of lactic acid was 0.46 g / 100 ml, the amount of acetic acid was 0.03 g / 100 ml, and the amount of acetic acid was 6.5% of the amount of lactic acid.
The flavor was good. Further, this Bifidobacterium fermented milk drink was stored at 10 ° C. for 10 days, and Bifidobacterium breve ( Bifidobacterium
um breve ) viable cell count 2.6 × 10 6 CFU / m
It was l.
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ１２Ｒ 1:46） (72)発明者 加藤 育男 愛知県岩倉市曽野町47−３ ケープラスワ ン さくら202 (72)発明者 小川 浩司 愛知県西春日井郡弥勒寺西１丁目93 ヒカ リハイツ201 (72)発明者 山口 勝信 愛知県小牧市藤島町梵天133−２ (72)発明者 豊田 修次 北海道札幌郡広島町広葉町１丁目１−３─────────────────────────────────────────────────── ─── Continuation of the front page (51) Int.Cl. 6 Identification number Reference number within the agency FI technical display location C12R 1:46) (72) Inventor Ikuo Kato 47-3 Sono-cho, Iwakura-shi, Aichi Prefecture 202 (72) Inventor Koji Ogawa, Nishi-Kasugai-gun, Aichi Prefecture 93 1 Hikari Heights 201 (72) Inventor Katsunobu Yamaguchi 133-2, Brahten Fujishima-cho, Komaki-shi, Aichi (72) Inventor Shuji Toyota Hiroba, Hiroshima-cho, Hokkaido Town 1-3
Claims (3)
リウム・ブレーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ
ｂｒｅｖｅ）、ラクトバチルス・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂ
ａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ）及びストレプトコッカス
・サーモフィルス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈ
ｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）を混合培養して得られ、これら
の菌の生菌体を含有し、次の性質を有することを特徴と
するビフィズス菌培養物。 （１）培養物の酸度が１．０％以上である。 （２）培養物に含まれる酢酸量の割合が、乳酸量に対し
て８％以下である。 （３）ビフィズス菌の生菌数が、１×１０9 ＣＦＵ／ｍ
ｌ以上である。1. A bi in a medium composed mainly of milk Bifidobacterium breve (Bifidobacterium
breve ), Lactobacillus casei ( Lactob)
acillus casei ) and Streptococcus th
A bifidobacteria culture, which is obtained by mixing and culturing Ermophilus ), contains live cells of these bacteria, and has the following properties. (1) The acidity of the culture is 1.0% or more. (2) The ratio of the amount of acetic acid contained in the culture is 8% or less with respect to the amount of lactic acid. (3) The viable cell count of Bifidobacterium is 1 × 10 9 CFU / m
It is 1 or more.
ｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｒｅｖｅ）ＳＢＲ３２
１２（ＦＥＲＭ Ｐ−１１９１５）、ラクトバチルス・
カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ）Ａ
ＳＴ−８（ＦＥＲＭ Ｐ−１２７０４）及びストレプト
コッカス・サーモフィルス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕ
ｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）ＳＢＲ２１２２（ＦＥ
ＲＭＰ−１３９０６）である請求項１記載の培養物。2. Bifidobacterium breve ( Bi
fidobacterium breve ) SBR32
12 (FERM P-11915), Lactobacillus
Lactobacillus casei A
ST-8 (FERM P-12704) and Streptococcus thermophilus ( Streptococcu
s thermophilus ) SBR2122 (FE
The culture according to claim 1, which is RMP-13906).
テリウム・ブレーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ
ｂｒｅｖｅ）とラクトバチルス・カゼイ（Ｌａｃｔｏ
ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｓｅｉ）を混合培養したスター
ターとストレプトコッカス・サーモフィルス（Ｓｔｒｅ
ｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）を単
独培養したスターターとを接種し、培養することを特徴
とするこれらの菌の生菌体を含有し、次の性質を有する
ビフィズス菌培養物の製造法。 （１）培養物の酸度が１．０％以上である。 （２）培養物に含まれる酢酸量の割合が、乳酸量に対し
て８％以下である。 （３）ビフィズス菌の生菌数が、１×１０9 ＣＦＵ／ｍ
ｌ以上である。The 3. A milk medium composed mainly, Bifidobacterium breve (Bifidobacterium
breve) and Lactobacillus casei (Lacto
Bacillus casei mixed culture of starter and Streptococcus thermophilus ( Stre
A method for producing a Bifidobacteria culture containing live cells of these bacteria, which comprises inoculating and culturing a starter obtained by culturing ptococcus thermophilus alone. (1) The acidity of the culture is 1.0% or more. (2) The ratio of the amount of acetic acid contained in the culture is 8% or less with respect to the amount of lactic acid. (3) The viable cell count of Bifidobacterium is 1 × 10 9 CFU / m
It is 1 or more.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6015852A JP2965281B2 (en) | 1994-01-14 | 1994-01-14 | Bifidobacterium culture and method for producing the same |
Applications Claiming Priority (1)
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|---|---|---|---|
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Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07203954A true JPH07203954A (en) | 1995-08-08 |
| JP2965281B2 JP2965281B2 (en) | 1999-10-18 |
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| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP6015852A Expired - Fee Related JP2965281B2 (en) | 1994-01-14 | 1994-01-14 | Bifidobacterium culture and method for producing the same |
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|---|---|
| JP (1) | JP2965281B2 (en) |
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| JP2010200717A (en) * | 2009-03-05 | 2010-09-16 | Morinaga Milk Ind Co Ltd | Acidic lactic acid bacteria beverage and method for producing the same |
| KR101040686B1 (en) * | 2009-04-14 | 2011-06-13 | 충주대학교 산학협력단 | Lactobacillus casei cjnu 0588 stimulating the growth of bifidobacterium sp., foods containing the bacterial strain and the method for growth stimulation of bifidobacterium sp. using the strain |
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1994
- 1994-01-14 JP JP6015852A patent/JP2965281B2/en not_active Expired - Fee Related
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| WO2024122619A1 (en) * | 2022-12-09 | 2024-06-13 | 麒麟麦酒株式会社 | Lactic acid bacterium-containing beverage with improved disharmonic taste flow and manufacturing method thereof |
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| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2965281B2 (en) | 1999-10-18 |
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