JPH07165600A - Antiviral agent - Google Patents

Abstract

PURPOSE:To obtain an antiviral agent having anti-HIV action, comprising a component containing Euphorbia Kansui Liou as an active ingredient. CONSTITUTION:This antiviral agent contains an extract of Euphorbia Kansui Liou, a fleshy perennial plant or a component squeezed from the plant as an active ingredient. The extraction is carried out by using water or an organic solvent (e.g. ethanol), the prepared extract or squeezed component is directly used as the antiviral agent as it is, or water or the solvent is distilled away under reduced pressure and the extract is concentrated and used, or the extract or the concentrate is dried and used as powder. A diterpene derivative of formula I or II (R1 to R7 each is H, a 1-20C acyl, benzoyl or a 1-5C alkyl; X is carbonyl or CH(OH); R8-R12 are each H, OH, a 1-20C acyloxy, a 1-5C alkoxy, etc.) derived from Euphorbia Kansui Liou or a terpene prepared from Euphorbia Kansui radix is used as an active ingredient to give the objective antiviral agent. The daily dose is about 0.01-500mg/kg.

Description

【発明の詳細な説明】Detailed Description of the Invention

【０００１】[0001]

【産業上の利用分野】本発明は新規な抗ウイルス剤に関
する。本発明の抗ウイルス剤は、後天性免疫不全症候群
（ＡＩＤＳ、 Acquired immunodeficiency syndrome)な
どに代表されるウイルス性疾患の発症を予防または治療
することができる。FIELD OF THE INVENTION The present invention relates to a novel antiviral agent. The antiviral agent of the present invention can prevent or treat the onset of viral diseases such as acquired immunodeficiency syndrome (AIDS).

【０００２】[0002]

【従来の技術】ユーホルビア・カンスイ（Euphorbia ka
nsui Liou ）は中国の陜西、河南、小西、甘粛、河北各
省に自生、ときに栽培される肉質の多年生植物である。
ユーホルビア・カンスイの根部は、イオウで燻して日干
しにする工程を加えた後、生薬である甘遂（Euphorbia
kansui radix）となる。甘遂は峻下、利尿薬として中国
で用いられる。甘遂が含有する化合物としてカンスイニ
ンＡ、カンスイニンＢ、２，４−デカジエノイル−２０
−アセチルインゲノール、１３−オキシインゲノール−
１３−ドデカノエート−２０−ヘキサノエートなどのジ
テルペン類、チカロール、α−オイフォール、α−オイ
フオルボールなどのトリテルペン類、タンニンなどが知
られている（原色牧野和漢薬草大図鑑、北隆館、三橋博
著）。BACKGROUND OF THE INVENTION Euphorbia-brine (Euphorbia ka
nsui Liou) is a fleshy perennial plant that is native and sometimes cultivated in Shanxi, Henan, Konishi, Gansu and Hebei provinces of China.
Root of Euphorbia-watering after adding step of the sun and smoked in sulfur, a crude drug Ama遂(Euphorbia
kansui radix). Gansu is used in China as a diuretic. Cansuinin A, cansuinin B, 2,4-decadienoyl-20 as compounds contained in Kasui
-Acetyl ingenol, 13-oxy ingenol-
It is known that diterpenes such as 13-dodecanoate-20-hexanoate, triterpenes such as ticarol, α-euphor and α-euphorbol, and tannins (primary color Makino Kazuhan Encyclopedia, Hokuryukan, Mitsuhashi Hiroshi). Author).

【０００３】なお、本発明者らの一部は、先に例示した
化合物とそれらの誘導体を、甘遂から単離し、構造決定
して報告している。また、甘遂から単離構造決定した化
合物より誘導した化合物の構造についても報告している
（ピュア・アンド・アプライド・ケミストリー（Pure a
nd Applied Chemistry），４１（１−２），１７５−９
９（１９７５）；テトラヘドロン・レターズ（Tetrahed
ron Letters ），１６９７−７００（１９７５）；同
誌，２５２７（１９７４）；同誌，３６７３−３６７６
（１９７１））。[0003] Some of the inventors of the present invention reported the above-exemplified compounds and their derivatives by isolating them from Satsuma and determining their structures. We also reported the structure of the compound derived from the compound whose isolated structure was determined from sweetening (Pure a Applied Chemistry (Pure a
nd Applied Chemistry), 41 (1-2), 175-9
9 (1975); Tetrahed Letters
ron Letters), 1697-700 (1975); ibid, 2527 (1974); ibid, 3673-3676.
(1971)).

【０００４】一方、抗ウイルス剤として、既にアシクロ
ビル（抗ヘルペス剤）、アマンタジン（抗インフルエン
ザ剤）、アジドチミジン（抗ヒト免疫不全ウイルス（Ｈ
ＩＶ、Human immunodeficiency virus）剤）などが知ら
れている。On the other hand, as antiviral agents, acyclovir (anti-herpes agent), amantadine (anti-influenza agent), azidothymidine (anti-human immunodeficiency virus (H
IV, Human immunodeficiency virus) agents, etc. are known.

【０００５】[0005]

【発明が解決しようとする課題】現在、ウイルス性疾患
に対して満足のいく治療薬はなく、新たな抗ウイルス剤
の開発が望まれており、特に抗ＨＩＶ作用をもつ薬剤の
開発が急務となっている。At present, there is no satisfactory therapeutic drug for viral diseases, and there is a demand for the development of a new antiviral agent. In particular, the development of a drug having an anti-HIV action is an urgent need. Has become.

【０００６】[0006]

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
に関し鋭意検討を重ねた結果、ユーホルビア・カンスイ
の含有する成分および甘遂の含有する成分が優れた抗ウ
イルス活性を持つ事を見い出し、本発明を完成した。Means for Solving the Problems As a result of intensive studies on the above problems, the present inventors have found that the components contained in Euphorbia cansui and the components contained in Amiso have excellent antiviral activity. The present invention has been completed.

【０００７】すなわち本発明の特徴は上記各請求項に記
載した発明、特に以下の抗ウイルス剤にある。That is, the features of the present invention reside in the invention described in each of the above claims, particularly the following antiviral agents.

【０００８】すなわち、ユーホルビア・カンスイ（Euph
orbia kansui Liou ）抽出物、またはユーホルビア・カ
ンスイより搾り取った成分を有効成分とする請求項１に
記載した抗ウイルス剤。[0008] In other words, Euphorbia, brine (Euph
orbia kansui Liou) extract or the ingredient squeezed from Euphorbia cansui as an active ingredient.

【０００９】甘遂（Euphorbia kansui radix）抽出物を
有効成分とする請求項２に記載した抗ウイルス剤。The antiviral agent according to claim 2, which contains an extract of Euphorbia kansui radix as an active ingredient.

【００１０】上記ユーホルビア・カンスイまたは上記甘
遂由来のテルペン類より誘導されたテルペン類縁体を有
効成分とする請求項７に記載した抗ウイルス剤。The antiviral agent according to claim 7, which comprises a terpene analog derived from the Euphorbia cansui or the terpene derived from the sweetener as an active ingredient.

【００１１】一般式［Ｉ］General formula [I]

【００１２】[0012]

【化３】 [Chemical 3]

【００１３】［式中、Ｒ1 ，Ｒ2 ，Ｒ3 ，Ｒ4 ，Ｒ5 ，
Ｒ6 ，Ｒ7 は同一または相異なって水素原子、炭素数１
〜２０のアシル基、置換もしくは無置換のベンゾイル
基、炭素数１〜５の低級アルキル基を示し、Ｘはカルボ
ニル基を示すか、または−ＣＨ（ＯＨ）−基を示す。］
で表されるジテルペン誘導体を有効成分とする請求項８
に記載した抗ウイルス剤。[Wherein R1, R2, R3, R4, R5,
R6 and R7 are the same or different and each is a hydrogen atom and has 1 carbon atom.
To 20 acyl groups, substituted or unsubstituted benzoyl groups, and lower alkyl groups having 1 to 5 carbon atoms, and X represents a carbonyl group or a -CH (OH)-group. ]
The diterpene derivative represented by
The antiviral agent described in.

【００１４】一般式［II］General formula [II]

【００１５】[0015]

【化４】 [Chemical 4]

【００１６】［式中、Ｒ8 ，Ｒ9 ，Ｒ10，Ｒ11，Ｒ12は
同一または相異なって水素原子、水酸基、炭素数１〜２
０のアシルオキシ基、置換もしくは無置換のベンゾイル
オキシ基、炭素数１〜５の低級アルコキシ基、トリチル
オキシ基、またはＯＣＯＮＹ１Ｙ２基を示す。ＯＣＯＮ
Ｙ１Ｙ２基においてＹ１，Ｙ２は同一または相異なって
水素原子、炭素数１〜５の低級アルキル基を示す。］で
表されるジテルペン誘導体を有効成分とする請求項９に
記載した抗ウイルス剤。[In the formula, R8, R9, R10, R11 and R12 are the same or different and each is a hydrogen atom, a hydroxyl group or a carbon number of 1 to 2;
0 represents an acyloxy group, a substituted or unsubstituted benzoyloxy group, a lower alkoxy group having 1 to 5 carbon atoms, a trityloxy group or an OCONY1Y2 group. OCON
In the Y1Y2 group, Y1 and Y2 are the same or different and each represents a hydrogen atom or a lower alkyl group having 1 to 5 carbon atoms. ] The antiviral agent of Claim 9 which uses the diterpene derivative represented by these as an active ingredient.

【００１７】以下、本発明を具体的に説明する。The present invention will be specifically described below.

【００１８】本発明では、ユーホルビア・カンスイが含
有する成分の全部または一部を、抽出または搾り取り、
抗ウイルス剤として用いる。抽出または搾り取る方法に
ついては、含有される成分が変性しない限り特に限定さ
れない。In the present invention, all or part of the components contained in Euphorbia cansui is extracted or squeezed,
Used as an antiviral agent. The extraction or squeezing method is not particularly limited as long as the contained components are not modified.

【００１９】例えば、本発明に用いられるユーホルビア
・カンスイ水抽出物は、ユーホルビア・カンスイ１重量
部に対し、冷水、温水あるいは熱湯１〜２０重量部を使
用し、数時間〜数日間、５〜１００℃で抽出を行って得
られる抽出物である。本発明によるユーホルビア・カン
スイ有機溶剤抽出物は、ユーホルビア・カンスイ１重量
部に対し、有機溶剤１〜２０重量部を使用し、数時間〜
数日間、５〜１００℃で抽出を行って得られる抽出物で
ある。For example, the Euphorbia kansui water extract used in the present invention uses 1 to 20 parts by weight of cold water, hot water or hot water for 1 to 20 parts by weight of euphorbia cansui for 5 to 100 hours for several hours to several days. It is an extract obtained by performing extraction at ℃. The Euphorbia cansui organic solvent extract according to the present invention uses 1 to 20 parts by weight of an organic solvent for 1 part by weight of Euphorbia cansui and is used for several hours to several times.
It is an extract obtained by performing extraction at 5 to 100 ° C. for several days.

【００２０】有機溶剤としては、例えばメタノール、エ
タノール、プロパノールなどのアルコール類、ヘキサ
ン、ヘプタン、リグロイン、石油エーテルなどの脂肪族
炭化水素、ベンゼン、トルエン、キシレンなどの芳香族
炭化水素、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテ
ル、ジオキサン、テトラヒドロフラン、ジエチレングリ
コールジメチルエーテルなどのエーテル類、アセトン、
メチルエチルケトン、シクロヘキサノンなどのケトン
類、ジクロロメタン、クロロホルム、ジクロロエタン、
クロロベンゼン、ジクロロベンゼンなどのハロゲン化炭
化水素、酢酸エチル、酢酸ブチルなどのエステル類、ア
セトニトリル、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホ
キシドなどをあげることができる。中でも、アルコール
類が好ましい。また本発明によるユーホルビア・カンス
イより搾り取った成分とは、ユーホルビア・カンスイを
細断または圧縮することによって得られる成分である。Examples of the organic solvent include alcohols such as methanol, ethanol and propanol, aliphatic hydrocarbons such as hexane, heptane, ligroin and petroleum ether, aromatic hydrocarbons such as benzene, toluene and xylene, diethyl ether and diisopropyl. Ethers such as ether, dioxane, tetrahydrofuran, diethylene glycol dimethyl ether, acetone,
Methyl ethyl ketone, ketones such as cyclohexanone, dichloromethane, chloroform, dichloroethane,
Examples thereof include halogenated hydrocarbons such as chlorobenzene and dichlorobenzene, esters such as ethyl acetate and butyl acetate, acetonitrile, dimethylformamide, and dimethyl sulfoxide. Of these, alcohols are preferable. The component squeezed from Euphorbia cansui according to the present invention is a component obtained by shredding or compressing Euphorbia cansui.

【００２１】以上の操作によって得られた水抽出物、有
機溶剤抽出物、または搾り取った成分は、抗ウイルス剤
としてそのまま用いるか、水分や溶剤を減圧溜去し濃縮
して用いるか、またはこれらを凍結乾燥もしくは噴霧乾
燥などの乾燥手段を施して粉末として用いることができ
る。The water extract, organic solvent extract, or squeezed component obtained by the above operation may be used as an antiviral agent as it is, or may be concentrated by distilling off water or solvent under reduced pressure. Can be used as a powder after being subjected to a drying means such as freeze drying or spray drying.

【００２２】また本発明では甘遂の含有する成分の全部
または一部を抽出して、抗ウイルス剤として用いる。本
発明に用いられる甘遂の水抽出物は、甘遂１重量部に対
し、冷水、温水あるいは熱湯１〜２０重量部を使用し、
数時間〜数日間、５〜１００℃で抽出を行って得られる
抽出物である。本発明による甘遂有機溶剤抽出物は、甘
遂１重量部に対し、有機溶剤１〜２０重量部を使用し、
数時間〜数日間、５〜１００℃で抽出を行って得られる
抽出物である。Further, in the present invention, all or part of the ingredients contained in the sweetener are extracted and used as an antiviral agent. The sweetened water extract used in the present invention uses 1 to 20 parts by weight of cold water, hot water or hot water per 1 part by weight of sweetened,
It is an extract obtained by conducting extraction at 5 to 100 ° C. for several hours to several days. The sweetened organic solvent extract according to the present invention uses 1 to 20 parts by weight of an organic solvent per 1 part by weight of sweetened,
It is an extract obtained by conducting extraction at 5 to 100 ° C. for several hours to several days.

【００２３】有機溶剤としては、例えばメタノール、エ
タノール、プロパノールなどのアルコール類、ヘキサ
ン、ヘプタン、リグロイン、石油エーテルなどの脂肪族
炭化水素、ベンゼン、トルエン、キシレンなどの芳香族
炭化水素、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテ
ル、ジオキサン、テトラヒドロフラン、ジエチレングリ
コールジメチルエーテルなどのエーテル類、アセトン、
メチルエチルケトン、シクロヘキサノンなどのケトン
類、ジクロロメタン、クロロホルム、ジクロロエタン、
クロロベンゼン、ジクロロベンゼンなどのハロゲン化炭
化水素、酢酸エチル、酢酸ブチルなどのエステル類、ア
セトニトリル、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホ
キシドなどをあげることができる。中でも、アルコール
類が好ましい。以上の操作によって得られた水抽出物お
よび有機溶剤抽出物は、抗ウイルス剤としてそのまま用
いるか、水分や溶剤を減圧溜去し濃縮して用いるか、ま
たは、これらを凍結乾燥もしくは噴霧乾燥などの乾燥手
段を施して粉末として用いることができる。Examples of the organic solvent include alcohols such as methanol, ethanol and propanol, aliphatic hydrocarbons such as hexane, heptane, ligroin and petroleum ether, aromatic hydrocarbons such as benzene, toluene and xylene, diethyl ether and diisopropyl. Ethers such as ether, dioxane, tetrahydrofuran, diethylene glycol dimethyl ether, acetone,
Methyl ethyl ketone, ketones such as cyclohexanone, dichloromethane, chloroform, dichloroethane,
Examples thereof include halogenated hydrocarbons such as chlorobenzene and dichlorobenzene, esters such as ethyl acetate and butyl acetate, acetonitrile, dimethylformamide, and dimethyl sulfoxide. Of these, alcohols are preferable. The water extract and the organic solvent extract obtained by the above operation may be used as an antiviral agent as they are, or may be concentrated by distilling off water and solvent, or may be freeze-dried or spray-dried. It can be used as a powder by applying a drying means.

【００２４】本発明では、ユーホルビア・カンスイまた
は甘遂の、抽出物または搾り取った物に含まれる抗ウイ
ルス活性成分を精製して用いることができる。精製手段
としては、液々分配、カラム・クロマトグラフィー、薄
層クロマトグラフィー、再結晶を例示することができ
る。液々分配としては、混合物をメタノール−ヘキサン
２層中で分配してヘキサン層を取り出し、残ったメタノ
ールへ水と酢酸エチルを加えて分配し、酢酸エチル層と
水−メタノール層を取り出す方法を例示することができ
る。In the present invention, the antiviral active ingredient contained in the extract or squeezed product of Euphorbia cansui or sweetened can be purified and used. Examples of the purification means include liquid-liquid distribution, column chromatography, thin layer chromatography, and recrystallization. As the liquid-liquid partition, a method of partitioning the mixture in two layers of methanol-hexane and taking out the hexane layer, adding water and ethyl acetate to the remaining methanol for partitioning, and taking out the ethyl acetate layer and the water-methanol layer is exemplified. can do.

【００２５】カラム・クロマトグラフィーとしては、担
体として、シリカゲル、アルミナ、フロリジル、または
活性炭などの吸着型の担体、プロピルアミノ基、γ−シ
アノプロピル基、アクリルアミド基、もしくはプロピル
アルコールなどによって修飾された化学修飾シリカゲ
ル、またはセライトなどの順相分配型の担体、ジメチル
シリル基、ｎ−オクチルジメチルシリル基、またはｎ−
オクタデシルジメチルシリル基などによって修飾された
化学修飾シリカゲルなどの逆相分配型の担体、セファデ
ックス（Sephadex）などの分子ふるい用担体、セルロー
スなどを用いることができる。As column chromatography, as a carrier, an adsorption type carrier such as silica gel, alumina, florisil, or activated carbon, a chemistry modified with a propylamino group, a γ-cyanopropyl group, an acrylamide group, or propyl alcohol is used. Normal-phase partitioning type carrier such as modified silica gel or Celite, dimethylsilyl group, n-octyldimethylsilyl group, or n-
A reverse phase partition type carrier such as a chemically modified silica gel modified with an octadecyldimethylsilyl group or the like, a carrier for molecular sieving such as Sephadex, cellulose or the like can be used.

【００２６】また、展開溶媒としては、メタノール、エ
タノール、またはプロパノールなどのアルコール類、ヘ
キサンまたは、ヘプタンなどの脂肪族炭化水素、ベンゼ
ン、またはトルエンなどの芳香族炭化水素、ジエチルエ
ーテル、ジイソプロピルエーテル、ジオキサン、または
テトラヒドロフランなどのエーテル類、アセトン、メチ
ルエチルケトン、またはシクロヘキサノンなどのケトン
類、ジクロロメタン、クロロホルム、またはジクロロエ
タンなどのハロゲン化炭化水素、酢酸エチル、または酢
酸ブチルなどのエステル類、アセトニトリル、または水
などを用いることができる。これら展開溶媒は、単独で
用いる、任意の比率で混合する、または任意の比率から
任意の比率までのグラジエント行う、などの方法で用い
ることができる。装置としては、オープン・カラム・ク
ロマトグラフィー、フラッシュ・カラム・クロマトグラ
フィー、ＨＰＬＣを用いることができる。具体例として
は、表１にあげる精製手段を例示することができる。As the developing solvent, alcohols such as methanol, ethanol or propanol, aliphatic hydrocarbons such as hexane or heptane, aromatic hydrocarbons such as benzene or toluene, diethyl ether, diisopropyl ether, dioxane. , Or ethers such as tetrahydrofuran, ketones such as acetone, methyl ethyl ketone, or cyclohexanone, halogenated hydrocarbons such as dichloromethane, chloroform, or dichloroethane, esters such as ethyl acetate, or butyl acetate, acetonitrile, or water be able to. These developing solvents can be used alone, mixed in any ratio, or subjected to a gradient from any ratio to any ratio. As the device, open column chromatography, flash column chromatography, and HPLC can be used. As a specific example, the purification means listed in Table 1 can be exemplified.

【００２７】薄層クロマトグラフィーとしては、担体と
して、シリカゲル、またはアルミナなどの吸着型の担
体、プロピルアミノ基、またはγ−シアノプロピル基な
どによって修飾された化学修飾シリカゲルなどの順相分
配型の担体、ジメチルシリル基、ｎ−オクチルジメチル
シリル基、またはｎ−オクタデシルジメチルシリル基な
どによって修飾された化学修飾シリカゲルなどの逆相分
配型の担体、セルロース、セライト、またはポリアミド
などを用いることができる。As the thin layer chromatography, silica gel, an adsorption type carrier such as alumina, or a normal phase partitioning type carrier such as chemically modified silica gel modified with propylamino group or γ-cyanopropyl group is used as the carrier. , A reverse phase partition type carrier such as a chemically modified silica gel modified with a dimethylsilyl group, an n-octyldimethylsilyl group, or an n-octadecyldimethylsilyl group, cellulose, celite, or polyamide can be used.

【００２８】展開溶媒としては、メタノール、エタノー
ル、またはプロパノールなどのアルコール類、ヘキサ
ン、またはヘプタン、などの脂肪族炭化水素、ベンゼ
ン、またはトルエンなどの芳香族炭化水素、ジエチルエ
ーテル、ジイソプロピルエーテル、ジオキサン、または
テトラヒドロフランなどのエーテル類、アセトン、メチ
ルエチルケトン、またはシクロヘキサノンなどのケトン
類、ジクロロメタン、クロロホルム、またはジクロロエ
タンなどのハロゲン化炭化水素、酢酸エチル、または酢
酸ブチルなどのエステル類、アセトニトリル、または水
などを、単独あるいは任意の比率で混合して用いること
ができる。具体例としては、シリカゲル薄層プレートを
用い、展開溶媒としてヘキサン−酢酸エチル系またはメ
タノール−クロロホルム系を用いる方法をあげることが
できる。As the developing solvent, alcohols such as methanol, ethanol or propanol, aliphatic hydrocarbons such as hexane or heptane, aromatic hydrocarbons such as benzene or toluene, diethyl ether, diisopropyl ether, dioxane, Or ethers such as tetrahydrofuran, ketones such as acetone, methyl ethyl ketone, or cyclohexanone, halogenated hydrocarbons such as dichloromethane, chloroform, or dichloroethane, esters such as ethyl acetate, or butyl acetate, acetonitrile, or water alone Alternatively, they can be mixed and used at an arbitrary ratio. As a specific example, a method using a silica gel thin layer plate and using a hexane-ethyl acetate system or a methanol-chloroform system as a developing solvent can be mentioned.

【００２９】再結晶については、溶媒としてエーテル−
石油エーテル系、メタノール、クロロホルム−ヘキサン
系などを用いる場合を例示することができる。For recrystallization, ether is used as a solvent.
The case of using a petroleum ether type, methanol, chloroform-hexane type or the like can be exemplified.

【００３０】これら精製手段は、単独またはいくつか組
み合わせて用いることにより、活性成分をより精製する
ことができる。The active ingredients can be further purified by using these purifying means alone or in combination.

【００３１】[0031]

【表１】 [Table 1]

【００３２】本発明において抗ウイルス剤の活性成分と
しては、例えばテルペン類および、テルペン類より誘導
されるテルペン類縁体をあげることができる。これらは
ユーホルビア・カンスイまたは甘遂に由来するものばか
りでなく、他の動植物等、広く天然に由来するものまた
は合成されたものであってもよい。テルペン類およびテ
ルペン類縁体としては、例えばモノテルペン類、セスキ
テルペン類、カンスイニンＡ、ジヒドロカンスイニン
Ａ、インゲノールトリアセテート、または１３−オキシ
インゲノールトリアセテートなどのジテルペン類、セス
タテルペン類、トリテルペン類、ポリテルペン類などを
あげることができる。具体的には下記一般式［Ｉ］、
［II］で表されるジテルペン類などをあげることができ
る。Examples of the active ingredient of the antiviral agent in the present invention include terpenes and terpene analogs derived from terpenes. These are not only those derived from Euphorbia cansui or Amiso, but may be those derived from a wide range of nature such as other animals and plants, or those synthesized. Examples of the terpenes and terpene analogs include monoterpenes, sesquiterpenes, cansuinin A, dihydrocansuinin A, ingenol triacetate, and diterpenes such as 13-oxyingenol triacetate, sesterterpenes, triterpenes, polyterpenes. You can list the kinds. Specifically, the following general formula [I],
Examples thereof include diterpenes represented by [II].

【００３３】すなわち、一般式［Ｉ］That is, the general formula [I]

【００３４】[0034]

【化５】 [Chemical 5]

【００３５】［式中、Ｒ1 ，Ｒ2 ，Ｒ3 ，Ｒ4 ，Ｒ5 ，
Ｒ6 ，Ｒ7 は同一または相異なって水素原子、炭素数１
〜２０のアシル基、置換もしくは無置換のベンゾイル
基、炭素数１〜５の低級アルキル基を示し、Ｘはカルボ
ニル基を示すか、または−ＣＨ（ＯＨ）−基を示す。］
で表されるジテルペン誘導体、及び、一般式［II］[Wherein R1, R2, R3, R4, R5,
R6 and R7 are the same or different and each is a hydrogen atom and has 1 carbon atom.
To 20 acyl groups, substituted or unsubstituted benzoyl groups, and lower alkyl groups having 1 to 5 carbon atoms, and X represents a carbonyl group or a -CH (OH)-group. ]
And a diterpene derivative represented by the general formula [II]

【００３６】[0036]

【化６】 [Chemical 6]

【００３７】［式中、Ｒ8 ，Ｒ9 ，Ｒ10，Ｒ11，Ｒ12は
同一または相異なって水素原子、水酸基、炭素数１〜２
０のアシルオキシ基、置換もしくは無置換のベンゾイル
オキシ基、炭素数１〜５の低級アルコキシ基、トリチル
オキシ基、またはＯＣＯＮＹ１Ｙ２基を示す。ＯＣＯＮ
Ｙ１Ｙ２基においてＹ１，Ｙ２は同一または相異なって
水素原子、炭素数１〜５の低級アルキル基を示す。］で
表されるジテルペン誘導体である。[In the formula, R8, R9, R10, R11, and R12 are the same or different and each is a hydrogen atom, a hydroxyl group, or a carbon number of 1 to 2.
0 represents an acyloxy group, a substituted or unsubstituted benzoyloxy group, a lower alkoxy group having 1 to 5 carbon atoms, a trityloxy group or an OCONY1Y2 group. OCON
In the Y1Y2 group, Y1 and Y2 are the same or different and each represents a hydrogen atom or a lower alkyl group having 1 to 5 carbon atoms. ] It is a diterpene derivative represented by.

【００３８】上記一般式［Ｉ］において炭素数１〜２０
のアシル基としては、例えばホルミル基、アセチル基、
プロパノイル基、ブタノイル基、ペンタノイル基、ヘキ
サノイル基、ピバリル基、２，３−ジメチルブタノイル
基、２，４−オクタジエノイル基、２，４−デカジエノ
イル基、２，４−ウンデカジエノイル基、ドデカノイル
基、２，４，６，８，１０−テトラデカペンタエノイル
基などをあげることができ、置換もしくは無置換のベン
ゾイル基としては、例えばベンゾイル基、ｐ−クロロベ
ンゾイル基、ｐ−メチルベンゾイル基などをあげること
ができ、炭素数１〜５のアルキル基としては、メチル
基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基をあげるこ
とができる。1 to 20 carbon atoms in the above general formula [I]
Examples of the acyl group include a formyl group, an acetyl group,
Propanoyl group, butanoyl group, pentanoyl group, hexanoyl group, pivalyl group, 2,3-dimethylbutanoyl group, 2,4-octadienoyl group, 2,4-decadienoyl group, 2,4-undecadienoyl group, dodecanoyl group , 2,4,6,8,10-tetradecapentaenoyl group and the like, and examples of the substituted or unsubstituted benzoyl group include benzoyl group, p-chlorobenzoyl group, p-methylbenzoyl group and the like. Examples of the alkyl group having 1 to 5 carbon atoms include a methyl group, an ethyl group, a propyl group and an isopropyl group.

【００３９】一般式［Ｉ］で表される化合物は複数の不
斉炭素を持ち、従って多くの立体異性体が存在する。本
発明の抗ウイルス剤には、これらの立体異性体全てを用
いることができる。一般式［Ｉ］で表される化合物の具
体例として、下記式［Ｉａ」で表されるカンスイニンＡ
（化合物番号１）と下記式［Ｉｂ］で表されるジヒドロ
カンスイニンＡ（化合物番号２）をあげることができ
る。カンスイニンＡの単離精製手順とジヒドロカンスイ
ニンＡの合成法は、ピュア・アンド・アプライド・ケミ
ストリー（Pure and Applied Chemistry），４１（１−
２），１７５−９９（１９７５）に記載されている。The compound represented by the general formula [I] has a plurality of asymmetric carbon atoms, and therefore many stereoisomers exist. All of these stereoisomers can be used for the antiviral agent of the present invention. As a specific example of the compound represented by the general formula [I], cansulinin A represented by the following formula [Ia]
(Compound No. 1) and dihydrocansulinine A (Compound No. 2) represented by the following formula [Ib] can be given. The procedure for isolating and purifying cansulinin A and the method for synthesizing dihydrocansninin A are described in Pure and Applied Chemistry, 41 (1-
2), 175-99 (1975).

【００４０】[0040]

【化７】 [Chemical 7]

【００４１】[0041]

【化８】 [Chemical 8]

【００４２】また、上記一般式［II］において炭素数１
〜２０のアシルオキシ基としては、例えばホルミルオキ
シ基、アセトキシ基、プロパノイルオキシ基、ブタノイ
ルオキシ基、ペンタノイルオキシ基、ヘキサノイルオキ
シ基、ピバリルオキシ基、２，３−ジメチルブタノイル
オキシ基、２，４−オクタジエノイルオキシ基、２，４
−デカジエノイルオキシ基、２，４−ウンデカジエノイ
ルオキシ基、ドデカノイルオキシ基、２，４，６，８，
１０−テトラデカペンタエノイルオキシ基などをあげる
ことができ、置換もしくは無置換のベンゾイルオキシ基
としては、例えばベンゾイルオキシ基、ｐ−クロロベン
ゾイルオキシ基、ｐ−メチルベンゾイルオキシ基などを
あげることができ、炭素数１〜５のアルコキシ基として
は、例えばメトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、イ
ソプロポキシ基などをあげることができ、ＯＣＯＮＹ１
Ｙ２基において、炭素数１〜５の低級アルキル基として
は、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基
をあげることができる。In the above general formula [II], the number of carbon atoms is 1
Examples of the acyloxy group of 20 are formyloxy group, acetoxy group, propanoyloxy group, butanoyloxy group, pentanoyloxy group, hexanoyloxy group, pivalyloxy group, 2,3-dimethylbutanoyloxy group, 2 , 4-octadienoyloxy group, 2,4
-Decadienoyloxy group, 2,4-undecadienoyloxy group, dodecanoyloxy group, 2,4,6,8,
Examples of the substituted or unsubstituted benzoyloxy group include a benzoyloxy group, a p-chlorobenzoyloxy group, a p-methylbenzoyloxy group, and the like. Examples of the alkoxy group having 1 to 5 carbon atoms include methoxy group, ethoxy group, propoxy group and isopropoxy group.
Examples of the lower alkyl group having 1 to 5 carbon atoms in the Y2 group include a methyl group, an ethyl group, a propyl group, and an isopropyl group.

【００４３】一般式［II］は複数の不斉炭素を持ち、従
って多くの立体異性体が存在する。本発明の抗ウイルス
剤には、これらの立体異性体全てを用いることができ
る。一般式［II］で表される本発明化合物の立体配置の
具体例として、下記式［IIａ」で表されるインゲノール
類をあげることができる。本発明化合物のうち、式［II
a ］で表されるインゲノール類の具体例として、表２に
示す化合物をあげることができる。The general formula [II] has a plurality of asymmetric carbon atoms, and therefore many stereoisomers exist. All of these stereoisomers can be used for the antiviral agent of the present invention. Specific examples of the configuration of the compound of the present invention represented by the general formula [II] include ingenols represented by the following formula [IIa]. Among the compounds of the present invention, compounds of the formula [II
Specific examples of the ingenols represented by a] include the compounds shown in Table 2.

【００４４】[0044]

【化９】 [Chemical 9]

【００４５】［式中、Ｒ8 ，Ｒ9 ，Ｒ10，Ｒ11，Ｒ12は
先に示した意味と同じ意味を示す。］[In the formula, R8, R9, R10, R11 and R12 have the same meanings as described above. ]

【００４６】[0046]

【表２】 [Table 2]

【００４７】表２に示した化合物は以下の方法で入手ま
たは調製できる。化合物番号３の化合物は、甘遂の抽出
物の粗分画画分を加水分解し、さらに精製することによ
っても得られるが、バーゼル社より市販されている。化
合物番号４〜６の化合物は化合物番号３の化合物より誘
導することができる（ツァイトシェリフト・フュア・ナ
チュールフォルシュング（Zeitschrift fuer Naturfors
chung ），３６ｂ，８７８（１９８１）；同誌，３７
ｂ，７４８（１９８２））。また、化合物番号５の化合
物はバーゼル社より市販されている。The compounds shown in Table 2 can be obtained or prepared by the following method. The compound of Compound No. 3 is also commercially available from Basel, although it can also be obtained by hydrolyzing the crude fraction fraction of sweetened extract and further purifying it. Compounds Nos. 4-6 can be derived from compounds No. 3 (Zeitschrift fuer Naturfors
chung), 36b, 878 (1981); ibid., 37.
b, 748 (1982)). The compound of Compound No. 5 is commercially available from Basel.

【００４８】化合物番号７の化合物は、甘遂の抽出物の
粗分画画分を加水分解し、さらに精製することによって
得られる。また、甘遂の抽出物より単離した化合物番号
１０の化合物を加水分解することによっても得られる
（テトラヘドロン・レターズ（Tetrahedron Letters
），２５２９（１９７４））。The compound of Compound No. 7 is obtained by hydrolyzing the crude fraction of the sweetened extract and further purifying it. It can also be obtained by hydrolyzing the compound of compound No. 10 isolated from the sweetened extract (Tetrahedron Letters
), 2529 (1974)).

【００４９】化合物番号８，９の化合物は化合物番号
４，５と同様の方法で化合物番号７の化合物より誘導で
きる。化合物番号１１の化合物は甘遂抽出物よりの単離
が報告されている（プランタ・メディカ（Planta Medic
a ），５８（３），２５５−８（１９９２））。The compounds of compound numbers 8 and 9 can be derived from the compound of compound number 7 in the same manner as in compound numbers 4 and 5. The compound of Compound No. 11 has been reported to be isolated from the sweetened extract (Planta Medic
a), 58 (3), 255-8 (1992)).

【００５０】一般式［II］で表される化合物は、多くの
植物が含有する。一般式［II］で表される本発明化合物
を含有する植物として、トウダイグサ科（Euphorbiacea
e ）の植物などをあげることができる。トウダイグサ科
の植物としては、ユーホルビア・カンスイ（Euphorbia
kansui Liou ）のほか、ホルトソウ（Euphorbia lathyr
is L. ）、ハナキリン（Euphorbia Millii）などをあげ
ることができる。Many plants contain the compound represented by the general formula [II]. Examples of plants containing the compound of the present invention represented by the general formula [II] include Euphorbiacea (Euphorbiacea).
e) plants and the like. Euphorbia cansui ( Euphorbia cansui)
kansui Liou), as well as Euphorbia lathyr
is L.), Hanakirin ( Euphorbia Millii ) and the like.

【００５１】ユーホルビア・カンスイおよび甘遂の含有
する成分は、有用な薬理学的性質、特に抗ウイルス作用
を有しており、これらの成分を含有する医薬組成物は、
ウイルスに感染したまたは感染する恐れのある人間の、
予防的または治療的処置に有用である。The ingredients contained in Euphorbia cansui and Kasui have useful pharmacological properties, especially antiviral action, and pharmaceutical compositions containing these ingredients are
Of humans infected or at risk of being infected with the virus,
Useful for prophylactic or therapeutic treatment.

【００５２】ウイルスとしては例えば、ＤＮＡ型ウイル
スでは、ヘルペスウイルス科(Herpesviridae) の単純ヘ
ルペスウイルス１型(Herpes simplex virus type1)、単
純ヘルペスウイルス２型(Herpes simplex virus type
2)、ヒトサイトメガロウイルス(Human cytomegaloviru
s) 、エプスタイン−バールウイルス(Epstein-Barr vir
us)、水痘帯状疱疹ウイルス(Varicella zoster viru
s)、ヘルペスウイルス６型(Human herpes virus6）、ア
デノウイルス科(Adenoviridae)のヒトアデノウイルス(H
uman adenovirus)、ヘパドナウイルス科(Hepadnavirida
e)のＢ型肝炎ウイルス(Hepatitis B virus) 、パポーバ
ウイルス科(Papovaviridae) のヒトパピローマウイルス
(Human papilloma virus) などがあげられる。As the virus, for example, DNA type viruses include Herpes simplex virus type 1 and Herpes simplex virus type 2 of the Herpesviridae family.
2), Human cytomegaloviru
s), Epstein-Barr vir
us), Varicella zoster viru
s), human herpes virus 6 (Human herpes virus6), human adenovirus of the adenoviridae (Adenoviridae) (H
uman adenovirus), Hepadnaviridae
e) Hepatitis B virus, human papillomavirus of the Papovaviridae family
(Human papilloma virus).

【００５３】またＲＮＡ型ウイルスでは、トガウイルス
科(Togaviridae) の風疹ウイルス(Rubella virus) 、日
本脳炎ウイルス(Japanese encephalitis virus) 、Ｃ型
肝炎ウイルス(Hepatitis C virus) 、パラミクソスウイ
ルス科(Paramyxoviridae) のはしかウイルス(Measles v
irus) 、ＲＳウイルス(Respiratory syncytial virus)
、おたふくかぜウイルス(Humps virus) 、オルソミク
ソウイルス科(Orthomyxoviridae)のインフルエンザウイ
ルス(Influenza virus) 、ラブドウイルス(Rhabdovirid
ae) の狂犬病ウイルス(Rabies virus)、レトロウイルス
科(Retroviridae)のＴ細胞白血病ウイルス(Human T-lym
photropic virus)、ヒト免疫不全ウイルス(Human immun
odeficiency virus)、ピコルナウイルス科(Picornaviri
dae)のヒトポリオウイルス(Human polio virus) 、Ａ型
肝炎ウイルス(Hepatitis A virus)などをあげることが
できる。Further, among RNA type viruses, Rubella virus of the Toga viridae, Japanese encephalitis virus, Hepatitis C virus, Hepatitis C virus, Paramyxoviridae The measles virus (Measles v
irus), RS virus (Respiratory syncytial virus)
, Mumps virus, Influenza virus of Orthomyxoviridae, Rhabdovirid
ae) Rabies virus, Retroviridae T-cell leukemia virus (Human T-lym)
photropic virus), human immunodeficiency virus (Human immun
odeficiency virus), Picornavirus family (Picornaviri
The human polio virus, hepatitis A virus, etc. of dae) can be mentioned.

【００５４】これらの中で特にヒト免疫不全ウイルス
（ＨＩＶ、Human immunodeficiency virus）に有効であ
る。Among these, it is particularly effective against human immunodeficiency virus (HIV).

【００５５】ＨＩＶに対する作用点としては、一般にア
ジドチミジンなどの逆転写酵素阻害、キノスタチンなど
のプロテアーゼ阻害などがあげられる。しかしながら本
発明の化合物は、逆転写酵素の阻害活性とプロテアーゼ
の阻害活性を示さず、全く別の作用点を持つものであ
る。ＨＩＶでは特にウイルスの耐性獲得が問題となって
おり、本発明の化合物は，逆転写酵素阻害剤やプロテア
ーゼ阻害剤の耐性株に対する効果が期待される。Examples of the action points on HIV include inhibition of reverse transcriptase such as azidothymidine and inhibition of protease such as quinostatin. However, the compound of the present invention does not exhibit reverse transcriptase inhibitory activity and protease inhibitory activity, and has completely different action points. In HIV, acquisition of virus resistance is particularly problematic, and the compound of the present invention is expected to have an effect on a reverse transcriptase inhibitor or protease inhibitor resistant strain.

【００５６】以上のようにして得られた本発明による抗
ウイルス剤を使用する場合、経口投与、非経口投与（皮
下、静脈、筋肉、胸骨注射など）または直腸投与などに
供することができる。投与量は対象の人間の感染ウイル
ス、症状、年齢、投与方法によっても異なるが、通常有
効成分量として約０．０１〜５００ｍｇ／ｋｇ／日であ
る。有効成分は、適当な製剤用担体と混合して調製した
製剤の形で投与される。製剤の形としては錠剤、顆粒
剤、細粒剤、散剤、カプセル剤、注射剤、点眼剤、眼軟
膏剤または坐剤などが用いられる。製剤に含まれる有効
成分量は、約０．０１〜９９．９９％である。When the antiviral agent according to the present invention obtained as described above is used, it can be used for oral administration, parenteral administration (subcutaneous, intravenous, intramuscular, sternum injection, etc.) or rectal administration. Although the dose varies depending on the infectious virus, symptoms, age and administration method of the human subject, it is usually about 0.01 to 500 mg / kg / day as the amount of the active ingredient. The active ingredient is administered in the form of a preparation prepared by mixing with an appropriate pharmaceutical carrier. As the form of the preparation, tablets, granules, fine granules, powders, capsules, injections, eye drops, eye ointments or suppositories are used. The amount of active ingredient contained in the formulation is about 0.01-99.99%.

【００５７】[0057]

【発明の効果】本発明によるユーホルビア・カンスイお
よび甘遂の含有する成分、その誘導体は、抗ウイルス作
用を有し抗ウイルス剤として有用である。INDUSTRIAL APPLICABILITY The components contained in Euphorbia cansui and Amiso, and derivatives thereof according to the present invention have an antiviral action and are useful as an antiviral agent.

【００５８】[0058]

【実施例】次に、実施例によって本発明を具体的に説明
するが、本発明はこれらの実施例のみに限定されるもの
ではない。EXAMPLES Next, the present invention will be specifically described by way of examples, but the present invention is not limited to these examples.

【００５９】（実施例１） ＨＩＶ−１に対する抗ウイルス試験 ２０ｍＭのヘペス緩衝液、１０％の牛胎仔血清と２０μ
ｇ／ｍＬのゲンタマイシンを含むＲＰＭＩ１６４０培地
中でＭＴ−４細胞（ＨＩＶの感染を受けると死滅する細
胞）３×１０⁴ 個に、細胞１個当たり０．０２個のＨＩ
Ｖ−１を感染させ、直ちに表３に記載の化合物を含む検
体を所定量添加し、３７℃で培養した。培養後５日後に
生細胞をＭＴＴ法により測定し、ＭＴ−４細胞の細胞死
を５０％防ぐのに要する化合物濃度（ＥＣ50）を求め
た。また、ＨＩＶ−１を感染させずに上記と同様に培養
し、ＭＴ−４細胞の５０％が死滅する化合物濃度（ＣＣ
50）を求めた、更に、ＥＣ50およびＣＣ50からＳ．Ｉ．
（＝ＣＣ50／ＥＣ50）を求めた。得られた結果を表３に
示す。Example 1 Antiviral Test Against HIV-1 20 mM Hepes buffer, 10% fetal bovine serum and 20 μm
g / mL gentamycin to 3 × 10 ⁴ cells (cells die when subjected to infection HIV) that MT-4 cells in RPMI1640 medium containing of 0.02 of HI per cell
V-1 was infected, a predetermined amount of the sample containing the compound shown in Table 3 was immediately added, and the mixture was cultured at 37 ° C. Five days after the culture, the viable cells were measured by the MTT method, and the compound concentration (EC50) required to prevent the cell death of MT-4 cells by 50% was determined. In addition, a compound concentration (CC-4) that kills 50% of MT-4 cells by culturing in the same manner as above without infecting HIV-1 (CC
50) was determined, and the S. I.
(= CC50 / EC50) was determined. The results obtained are shown in Table 3.

【００６０】[0060]

【表３】 [Table 3]

【００６１】（実施例２） ＨＩＶ−２に対する抗ウイルス試験 ２０ｍＭのヘペス緩衝液、１０％の牛胎仔血清と２０μ
ｇ／ｍＬのゲンタマイシンを含むＲＰＭＩ１６４０培地
中でＭＴ−４細胞（ＨＩＶの感染を受けると死滅する細
胞）３×１０⁴ 個に、細胞１個当たり０．０２個のＨＩ
Ｖ−２を感染させ、直ちに表４に記載の化合物を含む検
体を所定量添加し、３７℃で培養した。培養後５日後に
生細胞をＭＴＴ法により測定し、ＭＴ−４細胞の細胞死
を５０％防ぐのに要する化合物濃度（ＥＣ50）を求め
た。また、ＨＩＶ−２を感染させずに上記と同様に培養
し、ＭＴ−４細胞の５０％が死滅する化合物濃度（ＣＣ
50）を求めた、更に、ＥＣ50およびＣＣ50からＳ．Ｉ．
（＝ＣＣ50／ＥＣ50）を求めた。得られた結果を表４に
示す。Example 2 Antiviral test against HIV-2 20 mM Hepes buffer, 10% fetal calf serum and 20 μl
g / mL gentamycin to 3 × 10 ⁴ cells (cells die when subjected to infection HIV) that MT-4 cells in RPMI1640 medium containing of 0.02 of HI per cell
V-2 was infected, a predetermined amount of a sample containing the compound shown in Table 4 was immediately added, and the mixture was cultured at 37 ° C. Five days after the culture, the viable cells were measured by the MTT method, and the compound concentration (EC50) required to prevent the cell death of MT-4 cells by 50% was determined. Also, the compound concentration (CC-4) that kills 50% of MT-4 cells by culturing in the same manner as above without infecting HIV-2 (CC
50) was determined, and the S. I.
(= CC50 / EC50) was determined. The results obtained are shown in Table 4.

【００６２】[0062]

【表４】 [Table 4]

【００６３】（実施例３） 甘遂よりのエタノール抽出及びカラム分画 中華人民共和国内で市販の甘遂５０ｋｇに対してエタノ
ール約６０Ｌを用い、以下の抽出操作を行った。すなわ
ち、ブレンダーの容器に甘遂を投入し、甘遂が浸る程度
までエタノールを加えて粉砕し、ポリタンクに移した。
ポリタンクへ残りのエタノールを加えて室温で１週間静
置した。静置中、数回震蕩し、抽出効率の向上を図っ
た。静置後の混合物を吸引濾過し、エタノール抽出液を
得た。この抽出液の一部２Ｌを減圧下濃縮すると抽出物
３５．３２ｇが得られた。(Example 3) Extraction of ethanol from sweetening and column fractionation About 60 L of ethanol was used for 50 kg of sweetening commercially available in the People's Republic of China, and the following extraction operation was performed. That is, the agitator was put in a container of a blender, ethanol was added to such an extent that the agitator was soaked, crushed, and transferred to a plastic tank.
The remaining ethanol was added to a plastic tank and left at room temperature for 1 week. While still standing, it was shaken several times to improve the extraction efficiency. The mixture after standing was suction filtered to obtain an ethanol extract. A 2 L portion of this extract was concentrated under reduced pressure to obtain 35.32 g of extract.

【００６４】エタノール抽出物は高い抗ＨＩＶ活性を示
したので、活性成分の単離を目的とし、実施例１の方法
で求めた抗ＨＩＶ活性を指標に分画操作を行った。ま
ず、エタノール抽出物を液々分配で分画した。すなわち
メタノール−ヘキサン２層中で分配してヘキサン層を取
り出し、残ったメタノールへ水と酢酸エチルを加えて分
配し、酢酸エチル層と水−メタノール層とを取出した。
酢酸エチル層を減圧下濃縮し、褐色の粘稠油状物９．４
６ｇを得た。これをシリカゲル・カラム・クロマトグラ
フィー（ＷＡＫＯＧＥＬ Ｃ−２００ 和光純薬社製、
展開溶媒：メタノール−クロロホルム系、メタノール濃
度０％，１％，２％，５％，１０％，５０％で順次展
開）により９画分に分画した。各画分共に抗ＨＩＶ活性
を示したが、第６画分（１．５０６ｇ回収）が高活性を
示した。Since the ethanol extract showed high anti-HIV activity, the fractionation was carried out with the anti-HIV activity determined by the method of Example 1 as an index, for the purpose of isolating the active ingredient. First, the ethanol extract was fractionated by liquid-liquid partition. That is, the mixture was partitioned in two layers of methanol-hexane, the hexane layer was taken out, water and ethyl acetate were added to the remaining methanol and partitioned, and the ethyl acetate layer and the water-methanol layer were taken out.
The ethyl acetate layer was concentrated under reduced pressure to give a brown viscous oil 9.4.
6 g was obtained. Silica gel column chromatography (WAKOGEL C-200 manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.,
Developing solvent: methanol-chloroform system, sequentially developing with methanol concentrations of 0%, 1%, 2%, 5%, 10% and 50%) were fractionated into 9 fractions. Each fraction showed anti-HIV activity, while the 6th fraction (1.506 g recovered) showed high activity.

【００６５】この第６画分を逆相カラム・クロマトグラ
フィー（ＯＤＳ−ＡＱ １２０−Ｓ５０ ＹＭＣ社製、
展開溶媒：水−メタノール系、水濃度２５％，１２．５
％，０％で順次展開後クロロホルムでカラム洗浄）によ
り１０画分に分画した。これらの画分もすべて抗ＨＩＶ
活性を示したが、第７画分（２１２．０ｍｇ回収）、第
８画分（２９９．１ｍｇ回収）及び第９画分（３５５．
７ｍｇ回収）が高活性を示した。The sixth fraction was subjected to reverse phase column chromatography (ODS-AQ 120-S50 YMC,
Developing solvent: water-methanol system, water concentration 25%, 12.5
%, 0% and then washed with chloroform to separate 10 fractions. All of these fractions are also anti-HIV
Although it showed activity, the 7th fraction (212.0 mg recovered), the 8th fraction (299.1 mg recovered) and the 9th fraction (355.
7 mg recovered) showed high activity.

【００６６】よってこれら第７〜９画分をそれぞれゲル
濾過（Ｓｅｐｈａｄｅｘ ＬＨ−２０ ファルマシア社
製、溶離液：メタノール）により活性成分の精製を試み
た。第７画分は６画分に分画され、それぞれ抗ＨＩＶ活
性を示したが、第３画分（８４．１ｍｇ回収、画分Ａと
する）が高活性を示した。第８画分は５画分に分画さ
れ、それぞれ抗ＨＩＶ活性を示したが、第３画分（１０
０．２ｍｇ回収、画分Ｂとする）が高活性を示した。第
９画分は４画分に分画され、それぞれ抗ＨＩＶ活性を示
したが、第２画分（１０７．１ｍｇ回収、画分Ｃとす
る）が高活性を示した。以上の分画操作手順を図１に示
す。Therefore, each of the 7th to 9th fractions was subjected to gel filtration (Sephadex LH-20 Pharmacia, eluent: methanol) to try to purify the active ingredient. The 7th fraction was fractionated into 6 fractions and each showed anti-HIV activity, while the 3rd fraction (84.1 mg collected, referred to as fraction A) showed high activity. The 8th fraction was fractionated into 5 fractions, each showing anti-HIV activity, but the 3rd fraction (10
0.2 mg was collected and designated as fraction B) showed high activity. The 9th fraction was fractionated into 4 fractions and each showed anti-HIV activity, but the 2nd fraction (107.1 mg recovery, fraction C) showed high activity. The above fractionation operation procedure is shown in FIG.

【００６７】得られた画分のうち、画分Ｃの主成分は先
に示した化合物番号１１の化合物であることが、ＮＭＲ
スペクトルと質量分析スペクトルにより確認された。ま
た、残りのエタノール抽出液をエバポレータにより濃縮
し、エタノール抽出物７７５ｇを得た。Among the obtained fractions, it was confirmed that the main component of the fraction C was the compound No. 11 shown above.
Confirmed by spectrum and mass spectroscopy. Further, the remaining ethanol extract was concentrated by an evaporator to obtain 775 g of ethanol extract.

【００６８】エタノール抽出物と画分Ａ〜Ｃについて実
施例１と同様のＨＩＶ−１に対する抗ウイルス試験を行
って得られた結果を表５に示す。エタノール抽出物と画
分Ａ〜Ｃの０．１ｍｇ／ｍＬメタノール溶液のＵＶスペ
クトルをそれぞれ図２〜図５に示す。またこれらの高速
液体クロマトグラム（カラム：ＴＳＫｇｅｌ ＯＨ−１
２０（東ソー製）、溶離液：５０％酢酸エチル−ヘキサ
ン、流速：１ｍＬ／ｍｉｎ、検出条件：２８１ｎｍ Ｕ
Ｖ検出器）をそれぞれ図６〜図９に示す。図６〜図９中
クロマトグラム下の数字は、保持時間（分）を示す。Table 5 shows the results obtained by subjecting the ethanol extract and the fractions A to C to the same antiviral test against HIV-1 as in Example 1. UV spectra of the ethanol extract and 0.1 mg / mL methanol solutions of fractions A to C are shown in FIGS. 2 to 5, respectively. In addition, these high performance liquid chromatograms (column: TSKgel OH-1
20 (manufactured by Tosoh Corporation), eluent: 50% ethyl acetate-hexane, flow rate: 1 mL / min, detection condition: 281 nm U
V detector) is shown in FIGS. 6 to 9, respectively. The numbers below the chromatograms in FIGS. 6 to 9 indicate the retention time (minutes).

【００６９】さらにこれらの、重クロロホルム溶液の２
００ＭＨｚ ¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルをそれぞれ図１０〜
図１３に示す。一方、画分Ｃの質量分析スペクトルを図
１４〜１７に示す。また、エタノール抽出物と画分Ａ〜
Ｃのシリカゲル薄層クロマトグラム（展開溶媒：３％メ
タノール−クロロホルム）を図１８に示し、逆相薄層ク
ロマトグラム（展開溶媒：９０％メタノール−水）を図
１９に示す。Furthermore, 2 of these heavy chloroform solutions were used.
00 MHz ¹ H-NMR spectra are shown in FIGS.
It shows in FIG. On the other hand, the mass spectrum of the fraction C is shown in FIGS. In addition, the ethanol extract and the fractions A to
The silica gel thin layer chromatogram of C (developing solvent: 3% methanol-chloroform) is shown in FIG. 18, and the reverse phase thin layer chromatogram (developing solvent: 90% methanol-water) is shown in FIG.

【００７０】[0070]

【表５】 [Table 5]

【００７１】（実施例４） ＨＩＶ蛋白分解酵素（プロテアーゼ）阻害試験 １ｍｇ／ｍｌのＨＩＶ−１プロテアーゼの基質（Ｈ−Ｖ
ａｌ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ｉｌ
ｅ−Ｖａｌ−ＯＨ）を１０μｌ、１．３ｍｇ／ｍｌのＨ
ＩＶ−１プロテアーゼを１μｌ、１５ｍＭ ＭＥＳ緩衝
液（ｐＨ６．０）を８μｌ、及び所定濃度の化合物番号
１又は４を１μｌ加え、合計２０μｌの反応液を調整し
た。これを３７℃で３０分間反応させた後、逆相系高速
液体クロマトグラフィーを用いて基質の定量を行い、以
下の式で阻害効果の判定を行った。結果を表６に示す。Example 4 HIV Protease (Protease) Inhibition Test 1 mg / ml HIV-1 protease substrate (H-V)
al-Ser-Glu-Asn-Tyr-Pro-Il
e-Val-OH) 10 μl, 1.3 mg / ml H
1 μl of IV-1 protease, 8 μl of 15 mM MES buffer (pH 6.0), and 1 μl of compound No. 1 or 4 having a predetermined concentration were added to prepare a total of 20 μl of reaction solution. After reacting this at 37 ° C. for 30 minutes, the substrate was quantified using reversed-phase high performance liquid chromatography, and the inhibitory effect was determined by the following formula. The results are shown in Table 6.

【００７２】阻害活性（％）＝（供試基質量−処理区基
質量）×１００／供試基質量Inhibitory activity (%) = (mass of test group-mass of treated group) × 100 / mass of test group

【００７３】[0073]

【表６】 [Table 6]

【００７４】表からも明らかなように、これらの化合物
は、プロテアーゼの阻害が活性点ではないことが明らか
となった。As is clear from the table, it was revealed that protease inhibition was not the active site of these compounds.

【００７５】（実施例５） 逆転写酵素阻害活性試験 ５０ｍＭトリス塩酸（ｐＨ８．４）、２ｍＭジチオスレ
イトール、１００ｍＭ塩化カリウム、０．１％のＴｒｉ
ｔｏｎ Ｘ−１００、１μＣｉのメチル− ³ＨｄＴＴ
Ｐ、０．０１Ａ₂₆₀ 単位のｐｏｌｙ（ｒＡ）．ｏｌｉｇ
ｏ（ｄＴ）、所定濃度の化合物番号１，５又はＡＺＴ−
ＴＰ（対照）、及び０．０５Ｕの酵素を加えた反応混合
物を３７℃で３０分間反応させた後、５％のトリクロロ
酢酸を加え生成した沈殿中の放射活性を測定した。そし
て以下の式で阻害効果の判定を行った。結果を表７に示
す。Example 5 Reverse Transcriptase Inhibitory Activity Test 50 mM Tris-HCl (pH 8.4), 2 mM dithiothreitol, 100 mM potassium chloride, 0.1% Tri
ton X-100, 1 μCi of methyl- ³ HdTT
P, 0.01A ₂₆₀ units of poly (rA). olig
o (dT), compound number 1, 5 or AZT- at a predetermined concentration
The reaction mixture containing TP (control) and 0.05 U of enzyme was reacted at 37 ° C. for 30 minutes, and then 5% trichloroacetic acid was added to measure the radioactivity in the generated precipitate. Then, the inhibitory effect was determined by the following formula. The results are shown in Table 7.

【００７６】阻害活性（％）＝（無処理区基質取込み量
−処理区基質取込み量）×１００／無処理区基質取込み
量Inhibitory activity (%) = (amount of non-treated plot substrate uptake-treated plot substrate uptake amount) × 100 / non-treated plot substrate uptake amount

【００７７】[0077]

【表７】 [Table 7]

【００７８】表からも明らかなように、本発明の化合物
は、逆転写酵素の阻害が作用点ではないことが明らかと
なった。As is clear from the table, it was revealed that the compound of the present invention is not the point of action by the inhibition of reverse transcriptase.

【００７９】（参考例１） インゲノール（化合物番号３）および１３−オキシイン
ゲノール（化合物番号７）の単離精製 実施例３で得られた甘遂のエタノール抽出物７４．４ｇ
を用い、実施例３と同様の手順で、液々分配とシリカゲ
ル・カラム・クロマトグラフィーまで分画を進め、酢酸
エチル層を６画分に分画した。このうち第４画分（２．
５１８ｇ）のＮＭＲを測定するとインゲノール誘導体や
１３−オキシインゲノール誘導体に特徴的なδ６ｐｐｍ
付近のオレフィンプロトンのピークを観察できた。そこ
で、第４画分を加水分解した後、インゲノールと１３−
オキシインゲノールを単離精製することとした。すなわ
ち、第４画分をメタノール５０ｍＬに溶解し、１０％Ｎ
ａＯＨ水溶液５ｍＬを加えて室温で１時間撹伴した。反
応混合物を水中へ注ぎクロロホルムで抽出した。クロロ
ホルム層を１ＮＮａＯＨ水溶液、飽和食塩水で順次洗浄
し、ＭｇＳＯ₄ で乾燥した。ＭｇＳＯ₄ を濾別後、減圧
下濃縮し、残渣１．６９０ｇを得た。Reference Example 1 Isolation and Purification of Ingenol (Compound No. 3) and 13-Oxyingenol (Compound No. 7) 74.4 g of the sweetened ethanol extract obtained in Example 3
The procedure was carried out in the same manner as in Example 3 except that the liquid-liquid distribution and the silica gel column chromatography were carried out to fractionate the ethyl acetate layer into 6 fractions. Of these, the fourth fraction (2.
518 g) was measured, and δ6 ppm characteristic of ingenol derivative and 13-oxyingenol derivative was measured.
The olefin proton peak in the vicinity could be observed. Therefore, after hydrolyzing the fourth fraction, it was mixed with ingenol and 13-
It was decided to isolate and purify oxyingenol. That is, the fourth fraction was dissolved in 50 mL of methanol to obtain 10% N
5 mL of an aOH aqueous solution was added, and the mixture was stirred at room temperature for 1 hour. The reaction mixture was poured into water and extracted with chloroform. The chloroform layer was washed successively with a 1N NaOH aqueous solution and saturated brine, and dried over MgSO ₄ . After removing MgSO ₄ by filtration, the mixture was concentrated under reduced pressure to obtain 1.690 g of a residue.

【００８０】これをシリカゲル・カラム・クロマトグラ
フィー（ＷＡＫＯＧＥＬ Ｃ−３００ 和光純薬社製、
展開溶媒：メタノール−クロロホルム系、メタノール濃
度０％，１％，２％，３％，５％，８％，１６％で順次
展開）により分画した。メタノール濃度５％付近で溶出
した画分より１３−オキシインゲノール２９８ｍｇが得
られた。This was subjected to silica gel column chromatography (WAKOGEL C-300 manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.,
Developing solvent: methanol-chloroform system, sequentially developed with methanol concentrations of 0%, 1%, 2%, 3%, 5%, 8% and 16%). From the fraction eluted at a methanol concentration of around 5%, 298 mg of 13-oxyingenol was obtained.

【００８１】前記の画分の直後からメタノール濃度８％
付近までで溶出した画分２９２ｍｇを逆相カラム・クロ
マトグラフィー（ＹＭＣ ＧＥＬ ＯＤＳ−ＡＱ １２
０−Ｓ５０，ＹＭＣ社製、展開溶媒：水−メタノール
系、水分濃度５０％，２５％，１２．５％，５％，２．
５％，０％，クロロホルムで順次展開）により分画し
た。水分濃度５０％〜２５％付近で溶出した画分よりイ
ンゲノール１４９．４ｍｇが得られ、同じく５％付近で
溶出した画分より１３−オキシインゲノール４８．４ｍ
ｇが得られた。Immediately after the above fractions, the methanol concentration was 8%.
The fraction 292 mg eluted up to the vicinity was subjected to reverse phase column chromatography (YMC GEL ODS-AQ 12
0-S50, manufactured by YMC, developing solvent: water-methanol system, water concentration 50%, 25%, 12.5%, 5%, 2.
5%, 0%, and chloroform were successively developed). 149.4 mg of ingenol was obtained from the fraction eluted at a water concentration of 50% to 25%, and 13-oxyingenol 48.4 m was obtained from the fraction eluted at a water concentration of about 5%.
g was obtained.

【００８２】次に化合物番号１２〜１６の化合物の合成
法を示す。Next, a method for synthesizing the compounds Nos. 12 to 16 will be described.

【００８３】（参考例２） １３−オキシインゲノール ２０−トリチルエーテル
（化合物番号１３）の合成 １３−オキシインゲノール（化合物番号７）４８．６ｍ
ｇ、トリチルクロライド２６５．５ｍｇ、４−ジメチル
アミノピリジン１１８．６ｍｇをＤＭＦ５ｍｌに溶解
し、１００℃で１時間撹伴した。反応混合物をＮＨ₄ Ｃ
ｌ飽和水溶液中へ注ぎ、酢酸エチルで抽出した。酢酸層
を飽和食塩水で洗浄後、ＭｇＳＯ₄ で乾燥した。ＭｇＳ
Ｏ₄ を濾別後、減圧下濃縮すると残渣４４１．１ｍｇが
得られた。これをシリカゲル・カラム・クロマトグラフ
ィー（ＷＡＫＯＧＥＬ Ｃ−３００ 和光純薬社製、展
開溶媒：メタノール−クロロホルム系、メタノール濃度
０％，１％，２％，４％，８％，１６％で順次展開）に
より分画した。メタノール濃度１％付近で溶出した画分
を捕集し、減圧下濃縮すると、１３−オキシインゲノー
ル ２０−トリチルエーテル（化合物番号１３）５７．
５ｍｇが得られた（収率８１％）。Reference Example 2 Synthesis of 13-oxyingenol 20-trityl ether (compound No. 13) 13-oxyingenol (compound No. 7) 48.6 m
g, trityl chloride 265.5 mg, and 4-dimethylaminopyridine 118.6 mg were dissolved in DMF 5 ml, and the mixture was stirred at 100 ° C. for 1 hour. The reaction mixture is treated with NH ₄ C
It was poured into a saturated aqueous solution of 1 and extracted with ethyl acetate. The acetic acid layer was washed with saturated saline and then dried over MgSO ₄ . MgS
After removing O ₄ by filtration, the residue was concentrated under reduced pressure to obtain a residue of 441.1 mg. Silica gel column chromatography (WAKOGEL C-300 manufactured by Wako Pure Chemical Industries, developing solvent: methanol-chloroform system, methanol concentration 0%, 1%, 2%, 4%, 8%, 16% sequentially developed) Was fractionated by. The fractions eluted near a methanol concentration of 1% were collected and concentrated under reduced pressure to give 13-oxyingenol 20-trityl ether (Compound No. 13) 57.
5 mg was obtained (81% yield).

【００８４】粘稠油状物〜固体¹ Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ，δｐｐｍ） 7.44-7.23(15H,m),6.06(1H,d,J=4.4Hz),5.85(1H,d,J=1.
5Hz),4.30(1H,s),4.15(1H,dd,J=12.1,4.4Hz),4.00(1H,
s),3.70(2H,s),3.10(1H,m),2.75(1H,dd,J=16.4,3.3Hz),
2.53(1H,m),2.20(3H,m),1.83(3H,d,J=1.5Hz),1.25(22H,
s),1.09(3H,s),0.96(3H,d,J=7.1Hz),0.88(3H,t,J=6.5H
z) ＩＲ（顕微反射法／アルミ板蒸着、ｃｍ^-1） 3419,2954,2925,2854,1737,1724,1593,1490 （参考例３） １３−オキシインゲノール−３−ピバレート ２０−ト
リチルエーテル（化合物番号１４）の合成 １３−オキシインゲノール ２０−トリチルエーテル４
８．０ｍｇ、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン０．５ｍｌ、ピ
バリルクロライド０．５ｍｌの混合物を５０℃で２４時
間撹伴した。反応混合物を水に注ぎ、ジエチルエーテル
で抽出した。エーテル層を１ＮＨＣｌ水溶液、１ＮＮａ
ＯＨ水溶液、飽和食塩水で順次洗浄し、ＭｇＳＯ₄ で乾
燥した。ＭｇＳＯ₄ を濾別後、減圧下濃縮すると残渣２
９０．３ｍｇが得られた。Viscous oil-solid ¹ H-NMR (CDCl ₃ , δppm) 7.44-7.23 (15H, m), 6.06 (1H, d, J = 4.4Hz), 5.85 (1H, d, J = 1.
5Hz), 4.30 (1H, s), 4.15 (1H, dd, J = 12.1,4.4Hz), 4.00 (1H,
s), 3.70 (2H, s), 3.10 (1H, m), 2.75 (1H, dd, J = 16.4,3.3Hz),
2.53 (1H, m), 2.20 (3H, m), 1.83 (3H, d, J = 1.5Hz), 1.25 (22H,
s), 1.09 (3H, s), 0.96 (3H, d, J = 7.1Hz), 0.88 (3H, t, J = 6.5H
z) IR (microscopic reflection method / aluminum plate vapor deposition, cm ⁻¹ ) 3419,2954,2925,2854,1737,1724,1593,1490 (Reference Example 3) 13-oxyingenol-3-pivalate 20-trityl ether ( Synthesis of compound number 14) 13-oxyingenol 20-trityl ether 4
A mixture of 8.0 mg, N, N-dimethylaniline 0.5 ml and pivalyl chloride 0.5 ml was stirred at 50 ° C. for 24 hours. The reaction mixture was poured into water and extracted with diethyl ether. Ether layer is 1N HCl aqueous solution, 1NNa
It was washed successively with an aqueous OH solution and saturated brine, and dried over MgSO ₄ . After removing MgSO ₄ by filtration and concentrating under reduced pressure, the residue 2
90.3 mg was obtained.

【００８５】これをシリカゲル・カラム・クロマトグラ
フィー（ＷＡＫＯＧＥＬ Ｃ−３００ 和光純薬社製、
展開溶媒：酢酸エチル−ヘキサン系、酢酸エチル濃度５
％，１０％，２０％で順次展開）により５画分に分画し
た。このうち第２画分をシリカゲル薄層クロマトグラフ
ィー（展開溶媒：１％メタノール−クロロホルム）によ
り分画した。Ｒｆ値０．８程度の画分２２．７ｍｇが、
１３−オキシインゲノール−３−ピバレート ２０−ト
リチルエーテル（化合物番号１４）であった（収率４３
％）。This was subjected to silica gel column chromatography (WAKOGEL C-300 manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.,
Developing solvent: ethyl acetate-hexane system, ethyl acetate concentration 5
%, 10%, 20% in sequence) to obtain 5 fractions. Of these, the second fraction was fractionated by silica gel thin layer chromatography (developing solvent: 1% methanol-chloroform). 22.7 mg of a fraction having an Rf value of about 0.8
It was 13-oxyingenol-3-pivalate 20-trityl ether (Compound No. 14) (yield 43.
%).

【００８６】（参考例４） １３−オキシインゲノール−３−ピバレート（化合物番
号１５）の合成 １３−オキシインゲノール−３−ピバレート ２０−ト
リチルエーテル（化合物番号１４）２２．７ｍｇをメタ
ノールに溶解し、Ｐ−トルエンスルホン酸２ｍｇを加え
て室温で８時間撹拌した。反応化合物を水中に注ぎ、ジ
エチルエーテルで抽出した。エーテル層を１ＮＮａＯＨ
水溶液、飽和食塩水で順次洗浄し、ＭｇＳＯ₄ で乾燥し
た。ＭｇＳＯ₄ を濾別後、減圧下濃縮すると残渣２４．
３ｍｇが得られた。これを、シリカゲル・カラム・クロ
マトグラフィー（ＷＡＫＯＧＥＬＣ−３００ 和光純薬
社製、展開溶媒：酢酸エチル−ヘキサン系、酢酸エチル
濃度１０％，５０％で順次展開）により分画し、１３−
オキシインゲノール−３−ピバレート（化合物番号１
５）８．７ｍｇを得た（収率５３％）。Reference Example 4 Synthesis of 13-oxyingenol-3-pivalate (Compound No. 15) 22.7 mg of 13-oxyingenol-3-pivalate 20-trityl ether (Compound No. 14) was dissolved in methanol. , P-toluenesulfonic acid (2 mg) were added, and the mixture was stirred at room temperature for 8 hours. The reaction compound was poured into water and extracted with diethyl ether. Ether layer to 1N NaOH
It was washed with an aqueous solution and a saturated saline solution in that order, and dried over MgSO ₄ . After the MgSO ₄ was filtered off, it was concentrated under reduced pressure to give a residue 24.
3 mg was obtained. This was fractionated by silica gel column chromatography (WAKOGELC-300 manufactured by Wako Pure Chemical Industries, developing solvent: ethyl acetate-hexane system, ethyl acetate concentrations of 10% and 50% were sequentially developed), and 13-
Oxyingenol-3-pivalate (Compound No. 1
5) 8.7 mg was obtained (53% yield).

【００８７】１３−オキシインゲノール−３−ピバレー
ト ２０−トリチルエーテル（化合物番号１４） 粘稠油状物¹ Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ，δｐｐｍ） 7.43-7.22(15H,m),6.00(1H,d,J=1.4Hz),5.92(1H,d,J=4.
5Hz),5.47(1H,s),4.27(1H,d,J=2.8Hz),4.18(1H,m),3.85
(1H,m),3.70(1H,m),3.61(1H,m),2.80-2.55(2H,m),2.60-
2.15(3H,m),1.75(3H,d,J=1.4Hz),1.25(19H,s),1.22(12
H,s),1.08(3H,s),0.98(3H,d,J=7.1Hz),0.88(3H,t,J=7.0
Hz) ＩＲ（顕微反射法／アルミ板蒸着、ｃｍ^-1） 3461,2958,2927,2856,1726,1157 １３−オキシインゲノール−３−ピバレート（化合物番
号１５） 粘稠油状物¹ Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ，δｐｐｍ） 6.02(2H,m),5.40(1H,s),4.16(2H,broad s),4.12(1H,m),
4.06(2H,m),3.46(1H,s),2.80-2.55(2H,m),2.21(2H,t,J=
7.3Hz),2.16(1H,m),1.78(3H,d,J=1.3Hz),1.25(19H,s),
1.24(9H,s),1.20(3H,s),1.07(3H,s),0.98(3H,d,J=7.0H
z),0.88(3H,t,J=6.5Hz) ＩＲ（顕微反射法／アルミ板蒸着、ｃｍ^-1） ３４２３，２９５８，２９２５，２８５６，１７２４，
１７１３，１１６０ （参考例５） １３−オキシインゲノール−３，２０−ジピバレート
（化合物番号１６）の合成 １３−オキシインゲノール４３．１ｍｇ、ピバリルクロ
ライド１ｍｌ、ピリジン２ｍｌの混合物を室温で２０時
間撹伴した。反応混合物を水中へ注ぎ酢酸エチルで抽出
した。酢酸層を１ＮＨＣｌ水溶液、１ＮＮａＯＨ水溶
液、飽和食塩水で順次洗浄しＭｇＳＯ_４ で乾燥した。
ＭｇＳＯ₄ を濾別後、減圧下濃縮すると残渣５４８．２
ｍｇが得られた。これをシリカゲル・カラム・クロマト
グラフィー（ＷＡＫＯＧＥＬ Ｃ−３００ 和光純薬社
製、展開溶媒：酢酸エチル−ヘキサン系、酢酸エチル濃
度５％，１０％，２０％で順次展開）により分画し、１
３−オキシインゲノール−３，２０−ジピバレート（化
合物番号１６）１９．１ｍｇを得た（収率３３．６
％）。13-oxyingenol-3-pivalate 20-trityl ether (compound No. 14) Viscous oil ¹ H-NMR (CDCl ₃ , δppm) 7.43-7.22 (15H, m), 6.00 (1H, d, J = 1.4Hz), 5.92 (1H, d, J = 4.
5Hz), 5.47 (1H, s), 4.27 (1H, d, J = 2.8Hz), 4.18 (1H, m), 3.85
(1H, m), 3.70 (1H, m), 3.61 (1H, m), 2.80-2.55 (2H, m), 2.60-
2.15 (3H, m), 1.75 (3H, d, J = 1.4Hz), 1.25 (19H, s), 1.22 (12
H, s), 1.08 (3H, s), 0.98 (3H, d, J = 7.1Hz), 0.88 (3H, t, J = 7.0
Hz) IR (microscopic reflection method / aluminum plate deposition, cm ⁻¹ ) 3461,2958,2927,2856,1726,1157 13-oxyingenol-3-pivalate (Compound No. 15) Viscous oil ¹ H-NMR ( CDCl ₃ , δppm) 6.02 (2H, m), 5.40 (1H, s), 4.16 (2H, broad s), 4.12 (1H, m),
4.06 (2H, m), 3.46 (1H, s), 2.80-2.55 (2H, m), 2.21 (2H, t, J =
7.3Hz), 2.16 (1H, m), 1.78 (3H, d, J = 1.3Hz), 1.25 (19H, s),
1.24 (9H, s), 1.20 (3H, s), 1.07 (3H, s), 0.98 (3H, d, J = 7.0H
z), 0.88 (3H, t, J = 6.5Hz) IR (microscopic reflection method / aluminum plate deposition, cm ⁻¹ ) 3423, 2958, 2925, 2856, 1724,
1713,1160 (Reference Example 5) Synthesis of 13-oxyingenol-3,20-dipivalate (Compound No. 16) A mixture of 13-oxyingenol 43.1 mg, pivalyl chloride 1 ml, and pyridine 2 ml was stirred at room temperature for 20 hours. Accompanied. The reaction mixture was poured into water and extracted with ethyl acetate. The acetic acid layer was washed successively with a 1N HCl aqueous solution, a 1N NaOH aqueous solution and a saturated saline solution, and dried over MgSO ₄ .
The MgSO ₄ was filtered off and the residue was concentrated under reduced pressure to give a residue of 548.2.
mg was obtained. This was fractionated by silica gel column chromatography (WAKOGEL C-300 manufactured by Wako Pure Chemical Industries, developing solvent: ethyl acetate-hexane system, sequentially developing with ethyl acetate concentrations of 5%, 10%, 20%), and 1
19.1 mg of 3-oxyingenol-3,20-dipivalate (Compound No. 16) was obtained (yield 33.6.
%).

【００８８】粘稠油状物¹ Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ，δｐｐｍ） 6.08(1H,d,J=4.8Hz),6.03(1H,d,J=1.4Hz),5.41(1H,s),
4.76(1H,d,J=12.8Hz),4.48(1H,d,J=12.8Hz),4.07(1H,d
d,J=12.1,4.8Hz),3.84(1H,broad s),3.48(1H,s),2.72(1
H,dd,J=16.7,2.8Hz),2.60(1H,m),2.21(3H,m),1.76(3H,
d,J=1.4Hz),1.25(19H,s),1.23(12H,s),1.18(9H,s),1.06
(3H,s),0.98(3H,d,J=7.2Hz),0.88(3H,t,J=6.5Hz) ＩＲ（顕微反射法／アルミ板蒸着、ｃｍ^-1） 3504,2960,2929,2856,1727,1710,1159 （参考例６） １３−オキシインゲノール−３，２０−ビス（ジメチル
カーバメート）（化合物番号１２）の合成 １３−オキシインゲノール（化合物番号７）１４．６ｍ
ｇ、塩化ジメチルカルバモイル０．１ｍＬ、炭酸カリウ
ム１０２．８ｍｇをアセトニトリル１０ｍＬで懸濁液と
し、２０時間加熱還流した。反応混合物を水中へ注ぎ、
酢酸エチルにより抽出した。酢酸エチル層を飽和食塩水
で洗浄後、ＭｇＳＯ₄ で乾燥した。ＭｇＳＯ₄ を濾別
後、減圧下濃縮すると残渣１９．０ｍｇが得られた。Viscous oil ¹ H-NMR (CDCl ₃ , δppm) 6.08 (1H, d, J = 4.8Hz), 6.03 (1H, d, J = 1.4Hz), 5.41 (1H, s),
4.76 (1H, d, J = 12.8Hz), 4.48 (1H, d, J = 12.8Hz), 4.07 (1H, d
d, J = 12.1,4.8Hz), 3.84 (1H, broad s), 3.48 (1H, s), 2.72 (1
H, dd, J = 16.7,2.8Hz), 2.60 (1H, m), 2.21 (3H, m), 1.76 (3H,
d, J = 1.4Hz), 1.25 (19H, s), 1.23 (12H, s), 1.18 (9H, s), 1.06
(3H, s), 0.98 (3H, d, J = 7.2Hz), 0.88 (3H, t, J = 6.5Hz) IR (microscopic reflection method / aluminum plate deposition, cm ^-1 ) 3504,2960,2929,2856 , 1727,1710,1159 (Reference Example 6) Synthesis of 13-oxyingenol-3,20-bis (dimethylcarbamate) (Compound No. 12) 13-oxyingenol (Compound No. 7) 14.6m
g, 0.1 mL of dimethylcarbamoyl chloride, and 102.8 mg of potassium carbonate were suspended in 10 mL of acetonitrile, and the mixture was heated under reflux for 20 hours. Pour the reaction mixture into water,
It was extracted with ethyl acetate. The ethyl acetate layer was washed with saturated brine and dried over MgSO ₄ . After removing MgSO ₄ by filtration, the residue was concentrated under reduced pressure to obtain a residue (19.0 mg).

【００８９】これをシリカゲル薄層クロマトグラフィー
（展開溶媒：１％メタノール−クロロホルム）により分
画した。Ｒｆ値０．４程度の画分２．８ｍｇを、再度シ
リカゲル薄層クロマトグラフィー（展開溶媒：５０％酢
酸エチル−ヘキサン２回展開）により分画した。Ｒｆ値
０．４程度の画分１．３ｍｇが目的とする１３−オキシ
インゲノール−３，２０ビス（ジメチルカーバメート）
（化合物番号１２）であった（収率７％）。This was fractionated by silica gel thin layer chromatography (developing solvent: 1% methanol-chloroform). A fraction of 2.8 mg having an Rf value of about 0.4 was again fractionated by silica gel thin layer chromatography (developing solvent: 50% ethyl acetate-hexane twice developed). The target 13-oxyingenol-3,20 bis (dimethylcarbamate) is 1.3 mg with an Rf value of about 0.4.
It was (Compound No. 12) (yield 7%).

【００９０】粘稠油状物¹ Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ，δｐｐｍ） 6.22(1H,m),5.95(1H,d,J=1.2Hz),5.48(1H,broad s),4.9
0(1H,s),4.66(1H,d,J=12.3Hz),4.45(1H,d,J=12.3Hz),3.
90(1H,m),3.0-2.8(7H,m),2.7-2.3(2H,m),2.22(2H,t,J=
7.5Hz),1.91(3H,d,J=1.2Hz),1.30(3H,s),1.26(19H,s),
1.11(3H,s),0.96(3H,d,J=6.9Hz),0.88(3H,t,J=6.3Hz) ＩＲ（顕微反射法／アルミ板蒸着、ｃｍ^-1） 2958,2926,2854,1817,1722,1711Viscous oil ¹ H-NMR (CDCl ₃ , δppm) 6.22 (1H, m), 5.95 (1H, d, J = 1.2Hz), 5.48 (1H, broad s), 4.9
0 (1H, s), 4.66 (1H, d, J = 12.3Hz), 4.45 (1H, d, J = 12.3Hz), 3.
90 (1H, m), 3.0-2.8 (7H, m), 2.7-2.3 (2H, m), 2.22 (2H, t, J =
7.5Hz), 1.91 (3H, d, J = 1.2Hz), 1.30 (3H, s), 1.26 (19H, s),
1.11 (3H, s), 0.96 (3H, d, J = 6.9Hz), 0.88 (3H, t, J = 6.3Hz) IR (microscopic reflection method / aluminum plate deposition, cm ^-1 ) 2958,2926,2854, 1817,1722,1711

【図面の簡単な説明】[Brief description of drawings]

【図１】甘遂抽出液からの分画操作手順を示す図であ
る。FIG. 1 is a diagram showing a procedure of a fractionation operation from a sweetened extract.

【図２】エタノール抽出物のＵＶスペクトルを示す図で
ある。FIG. 2 is a diagram showing a UV spectrum of an ethanol extract.

【図３】画分ＡのＵＶスペクトルを示す図である。3 is a diagram showing a UV spectrum of Fraction A. FIG.

【図４】画分ＢのＵＶスペクトルを示す図である。FIG. 4 shows a UV spectrum of Fraction B.

【図５】画分ＣのＵＶスペクトルを示す図である。FIG. 5 shows a UV spectrum of Fraction C.

【図６】エタノール抽出物の高速液体クロマトグラムを
示す図である。FIG. 6 shows a high performance liquid chromatogram of an ethanol extract.

【図７】画分Ａの高速液体クロマトグラムを示す図であ
る。FIG. 7 shows a high performance liquid chromatogram of fraction A.

【図８】画分Ｂの高速液体クロマトグラムを示す図であ
る。FIG. 8 shows a high performance liquid chromatogram of fraction B.

【図９】画分Ｃの高速液体クロマトグラムを示す図であ
る。9 is a diagram showing a high performance liquid chromatogram of fraction C. FIG.

【図１０】エタノール抽出物の２００ＭＨｚ ¹Ｈ−ＮＭ
Ｒスペクトルを示す図である。FIG. 10: 200 MHz ¹ H-NM of ethanol extract
It is a figure which shows R spectrum.

【図１１】画分Ａの２００ＭＨｚ ¹Ｈ−ＮＭＲスペクト
ルを示す図である。FIG. 11 shows a 200 MHz ¹ H-NMR spectrum of fraction A.

【図１２】画分Ｂの２００ＭＨｚ ¹Ｈ−ＮＭＲスペクト
ルを示す図である。FIG. 12 shows a 200 MHz ¹ H-NMR spectrum of fraction B.

【図１３】画分Ｃの４００ＭＨｚ ¹Ｈ−ＮＭＲスペクト
ルを示す図である。FIG. 13 is a diagram showing a 400 MHz ¹ H-NMR spectrum of Fraction C.

【図１４】画分Ｃの質量分析スペクトルを示す図であ
る。FIG. 14 is a diagram showing a mass spectrum of Fraction C.

【図１５】画分Ｃの質量分析スペクトルを示す図であ
る。FIG. 15 is a diagram showing a mass spectrum of Fraction C.

【図１６】画分Ｃの質量分析スペクトルを示す図であ
る。FIG. 16 is a diagram showing a mass spectrum of Fraction C.

【図１７】画分Ｃの質量分析スペクトルを示す図であ
る。FIG. 17 is a diagram showing a mass spectrum of Fraction C.

【図１８】エタノール抽出物と画分Ａ〜Ｃのシリカゲル
薄層クロマトグラムを示す図である。FIG. 18 shows silica gel thin-layer chromatograms of ethanol extract and fractions AC.

【図１９】エタノール抽出物と画分Ａ〜Ｃの逆相薄層ク
ロマトグラムを示す図である。FIG. 19 shows reverse phase thin layer chromatograms of ethanol extract and fractions AC.

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ０７Ｃ 49/727 49/753 Ｂ 9049−4Ｈ Ｃ０７Ｄ 493/08 Ｃ (72)発明者 藤原 将寿 福島県福島市蓬莱町34−92 (72)発明者 横田 智之 福島県福島市飯坂町平野字北下里20−１ (72)発明者 徳久 賢治 神奈川県厚木市岡田一丁目10−39−302 (72)発明者 渡辺 博幸 神奈川県藤沢市湘南台４丁目26−５−402─────────────────────────────────────────────────── ─── Continuation of the front page (51) Int.Cl. ⁶ Identification code Internal reference number FI Technical display location C07C 49/727 49/753 B 9049-4H C07D 493/08 C (72) Inventor Masahisa Fujiwara Fukushima 34-92 Horai-cho, Fukushima Prefecture (72) Inventor Tomoyuki Yokota 20-1 Kitashitari, Hirano, Iizaka-cho, Fukushima City Fukushima Prefecture (72) Kenji Tokuhisa 1-chome, Okada, Atsugi City, Kanagawa Prefecture 10-39-302 (72) ) Inventor Hiroyuki Watanabe 4-26-5-402, Shonandai, Fujisawa City, Kanagawa Prefecture

Claims (9)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項１】 ユーホルビア・カンスイ（Euphorbia ka
nsui Liou ）抽出物、またはユーホルビア・カンスイよ
り搾り取った成分を有効成分とする抗ウイルス剤。[Claim 1] Euphorbia-brine (Euphorbia ka
nsui Liou) An antiviral agent containing an extract or an ingredient extracted from Euphorbia cansui as an active ingredient. 【請求項２】 甘遂（Euphorbia kansui radix）抽出物
を有効成分とする抗ウイルス剤。2. An antiviral agent comprising an extract of Euphorbia kansui radix as an active ingredient. 【請求項３】 水抽出物を有効成分とする請求項１また
は２に記載の抗ウイルス剤。3. The antiviral agent according to claim 1, which comprises a water extract as an active ingredient. 【請求項４】 有機溶剤抽出物を有効成分とする請求項
１または２に記載の抗ウイルス剤。4. The antiviral agent according to claim 1, which comprises an organic solvent extract as an active ingredient. 【請求項５】 アルコール抽出物を有効成分とする請求
項４記載の抗ウイルス剤。5. The antiviral agent according to claim 4, which comprises an alcohol extract as an active ingredient. 【請求項６】 有効成分がテルペン類である請求項１〜
請求項５のいずれかに記載の抗ウイルス剤。6. A terpene as an active ingredient,
The antiviral agent according to claim 5. 【請求項７】 ユーホルビア・カンスイ（Euphorbia ka
nsui Liou ）または甘遂（Euphorbia kansui radix）由
来のテルペン類より誘導されたテルペン類縁体を有効成
分とする抗ウイルス剤。7. The Euphorbia-brine (Euphorbia ka
An antiviral agent containing a terpene analog derived from terpenes derived from nsui Liou) or Amiso ( Euphorbia kansui radix) as an active ingredient. 【請求項８】 一般式［Ｉ］ 【化１】 ［式中、Ｒ1 ，Ｒ2 ，Ｒ3 ，Ｒ4 ，Ｒ5 ，Ｒ6 ，Ｒ7 は
同一または相異なって水素原子、炭素数１〜２０のアシ
ル基、置換もしくは無置換のベンゾイル基、炭素数１〜
５の低級アルキル基を示し、Ｘはカルボニル基を示す
か、または−ＣＨ（ＯＨ）−基を示す。］で表されるジ
テルペン誘導体を有効成分とする抗ウイルス剤。8. A compound represented by the general formula [I]: [Wherein R 1, R 2, R 3, R 4, R 5, R 6 and R 7 are the same or different and each represents a hydrogen atom, an acyl group having 1 to 20 carbon atoms, a substituted or unsubstituted benzoyl group, and 1 to 1 carbon atoms.
5 is a lower alkyl group, and X is a carbonyl group or a -CH (OH)-group. ] The antiviral agent which uses the diterpene derivative represented by these as an active ingredient. 【請求項９】 一般式［II］ 【化２】 ［式中、Ｒ8 ，Ｒ9 ，Ｒ10，Ｒ11，Ｒ12は同一または相
異なって水素原子、水酸基、炭素数１〜２０のアシルオ
キシ基、置換もしくは無置換のベンゾイルオキシ基、炭
素数１〜５の低級アルコキシ基、トリチルオキシ基、ま
たはＯＣＯＮＹ１Ｙ２基を示す。ＯＣＯＮＹ１Ｙ２基に
おいてＹ１，Ｙ２は同一または相異なって水素原子、炭
素数１〜５の低級アルキル基を示す。］で表されるジテ
ルペン誘導体を有効成分とする抗ウイルス剤。9. A compound represented by the general formula [II]: [In the formula, R8, R9, R10, R11 and R12 are the same or different and each is a hydrogen atom, a hydroxyl group, an acyloxy group having 1 to 20 carbon atoms, a substituted or unsubstituted benzoyloxy group, a lower alkoxy group having 1 to 5 carbon atoms. Group, trityloxy group, or OCONY1Y2 group. In the OCONY1Y2 group, Y1 and Y2 are the same or different and each represents a hydrogen atom or a lower alkyl group having 1 to 5 carbon atoms. ] The antiviral agent which uses the diterpene derivative represented by these as an active ingredient.