JPH0672863A - マイクロカプセル型徐放性製剤及びその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 分別整粒操作を必要としない微細かつ均一な
粒径を有するマイクロカプセル型徐放性製剤及びその製
造法を提供する。 【構成】 生理活性物質を含有する内包物と生体内分解
性及び／又は生体内組織適合性を有する生体適合高分子
物質で形成された外殻物質とを有し、最大粒径が１５０
μｍ以下であって平均粒径が５〜１００μｍであり、か
つ、変動係数が５０％以下であるマイクロカプセル型徐
放性製剤である。また、生理活性物質含有の水溶液と生
体適合性高分子物質含有の有機溶剤溶液とでＷ／Ｏ型乳
化物を調製し、このＷ／Ｏ型乳化物と水溶性高分子物質
の水溶液とで二次乳化させてＷ／Ｏ／Ｗ型乳化物を調製
し、得られたＷ／Ｏ／Ｗ型乳化物からマイクロカプセル
型徐放性製剤を調製するに際し、二次乳化工程でその外
水層に０．１Ｍ濃度ないし飽和濃度の塩物質を存在させ
るマイクロカプセル型徐放性製剤の製造法である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】この発明は、人、馬、牛等の温血
哺乳動物に投与され、内包された生理活性物質をこれら
温血哺乳動物の体内で長期間に亘って徐々に放出するマ
イクロカプセル型徐放性製剤及びその製造法に関する。

【０００２】

【従来の技術】長期間の投与を必要とする生理活性物質
については、これをマイクロカプセル化し、このマイク
ロカプセル中に内包された生理活性物質を徐々に放出さ
せ、これによって生理活性物質の薬効の持続性を改善す
ることが行われており、また、この様に生理活性物質を
マイクロカプセル化するための種々の方法が提案されて
いる。例えば、特公平１−５７，０８７号公報には、Ｗ
／Ｏ／Ｗ型乳化物を形成して水中乾燥法によりマイクロ
カプセルを製造する際に、水溶性薬物及び薬物保持物質
を含む内水層を粘度約５，０００ｃｐ以上に増粘あるい
は固化したＷ／Ｏ型乳化物を調製し、これによってマイ
クロカプセル中に薬物を効率良く取り込むようにしたマ
イクロカプセルの製造方法が開示されている。また、特
開昭６２−２０１，８１６号公報には、Ｗ／Ｏ／Ｗ型乳
化物を形成して水中乾燥法によりマイクロカプセルを製
造する際に、Ｗ／Ｏ型乳化物の粘度を１５０〜１０，０
００ｃｐに調整し、これによってマイクロカプセル中に
薬物を効率良く取り込むようにしたマイクロカプセルの
製造方法が開示されている。更に、特開平２−１２４，
８１４号公報には、水溶性薬物を含む内水層中に塩基性
の薬物保持物質を添加することにより、効率良く、初期
バーストの少ないマイクロカプセルが得られることが開
示されている。加えて、特公昭６３−３６，２９０号公
報には、溶剤中で生物学活性剤等の活性剤を外殻物質に
溶解又は分散させる工程と、得られた懸濁液又は溶液を
その溶剤より高沸点の水等の連続相生成媒体中に分散さ
せてＷ／Ｏ型又はＯ／Ｗ型乳化物を生成せしめる工程
と、前工程で得られた分散液から溶剤の一部を蒸散させ
てマイクロカプセルを生成させる工程と、このマイクロ
カプセルを分離する工程と、得られたマイクロカプセル
から残余の溶剤を抽出する工程とからなり、活性剤含有
量が高く、高品質のマイクロカプセルを得ることができ
るマイクロカプセルの製造方法が開示されている。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】しかしながら、上記い
ずれの方法においても、得られたマイクロカプセルはそ
の粒子の粒径が大きいばかりでなく、不揃いであってそ
の粒度分布が広いという問題がある。このため、この様
な方法によって製造されたマイクロカプセルを例えば医
療用注射剤とする場合には、日本薬局方の製剤総則の１
６．注射剤の（４）項に「懸濁性注射液中の粒子は、通
例、１５０μｍ以下とし、」と記載されていることか
ら、篩を使用して粒径１５０μｍ以下に分別整粒操作を
行う必要があり、この分別整粒操作は製品の歩留を著し
く低下させるばかりでなく、それ自体が極めて面倒な操
作であり、かつ、医療用注射剤とするものであるから無
菌無塵雰囲気下に行わなければならず、コストアップの
原因になり、この点を解決することが工業的に製造する
際における重大な課題になっていた。

【０００４】そこで、本発明者らは、この様な分別整粒
操作を必要とすることなく、粒径が微細かつ均一な生理
活性物質のマイクロカプセル型徐放性製剤を得ることが
できるマイクロカプセル型徐放性製剤及びその製造法に
ついて鋭意研究を重ねた結果、Ｗ／Ｏ型乳化物からＷ／
Ｏ／Ｗ型乳化物を調製する二次乳化工程でその外水層に
０．１Ｍ濃度ないし飽和濃度の塩物質を存在させること
により、微細かつ均一な粒径を有するマイクロカプセル
型徐放性製剤を得ることができることを見出し、本発明
に到達した。

【０００５】従って、本発明の目的は、分別整粒操作を
必要としない微細かつ均一な粒径を有するマイクロカプ
セル型徐放性製剤及びその製造法を提供することにあ
る。また、本発明の他の目的は、内包物となる生理活性
物質のマイクロカプセル中への高い取込み率を達成でき
るマイクロカプセル型徐放性製剤及びその製造法を提供
することにある。更に、本発明の他の目的は、内包物と
なる生理活性物質の水溶液の濃度あるいは外殻物質とな
る生体適合性高分子物質の有機溶剤溶液の濃度に関係な
く良好なマイクロカプセル型徐放性製剤を製造すること
ができ、これによって生理活性物質の放出速度を適宜変
更することが可能であるマイクロカプセル型徐放性製剤
及びその製造法を提供することにある。

【０００６】

【課題を解決するための手段】すなわち、本発明は、生
理活性物質を含有する内包物と生体内分解性及び／又は
生体内組織適合性を有する生体適合高分子物質で形成さ
れた外殻物質とを有し、最大粒径が１５０μｍ以下であ
って平均粒径が５〜１００μｍであり、かつ、変動係数
が５０％以下であるマイクロカプセル型徐放性製剤であ
る。また、本発明は、生理活性物質を含有する水溶液と
生体内分解性及び／又は生体内組織適合性の生体適合性
高分子物質を含有する有機溶剤溶液とでＷ／Ｏ型乳化物
を調製し、次いでこのＷ／Ｏ型乳化物と水溶性高分子物
質の水溶液とで二次乳化させてＷ／Ｏ／Ｗ型乳化物を調
製し、得られたＷ／Ｏ／Ｗ型乳化物から上記有機溶剤を
蒸散、固化させ、更に洗浄し、乾燥させて生理活性物質
を内包物とし、かつ、生体適合高分子物質を外殻物質と
するマイクロカプセル型徐放性製剤を調製するに際し、
上記二次乳化工程でその外水層に０．１Ｍ濃度ないし飽
和濃度の塩物質を存在させるマイクロカプセル型徐放性
製剤の製造法である。

【０００７】本発明において、マイクロカプセルの内包
物となる生理活性物質としては、それが優れた親水性を
有して水に可溶性であればよく、薬理作用等によって特
に制限を受けるものではなく、生理活性を有する蛋白質
やポリペプチド及びこれらの誘導体、その他に、抗生物
質、抗腫瘍剤、解熱剤、鎮痛剤、消炎剤、鎮咳去痰剤、
鎮静剤、筋弛緩剤、抗てんかん剤、抗潰瘍剤、抗うつ
剤、抗アレルギー剤、強心剤、不整脈治療剤、血管拡張
剤、降圧利尿剤、糖尿病治療剤、抗凝血剤、止血剤、抗
結核剤、ホルモン剤、麻薬拮抗剤等の種々のものを挙げ
ることができる。このうち、特に好ましい生理活性物質
は、本発明のマイクロカプセル型徐放性製剤が微細かつ
均一な粒径を有して特に分別整粒操作を必要とすること
なく注射用製剤とすることが可能であることから、注射
剤とする必要があり、また、比較的長期の投与が必要と
されようなタンパク質やポリペプチド及びこれらの誘導
体であり、具体的には、例えばエリスロポエチン（ＥＰ
Ｏ）、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ） 、マク
ロファージコロニー刺激因子（Ｍ−ＣＳＦ）、顆粒球マ
クロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、イン
ターフェロンＩＦＮα、ＩＦＮβ、ＩＦＮγ) 、インタ
ーロイキン（ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−
４、ＩＬ−５、ＩＬ−６) 、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、
成長ホルモン（ＧＨ又はＳＴＨ）、インスリン、カルシ
トニン（ＣＴ）等及びこれらの誘導体を挙げることがで
きる。これらの生理活性物質は、それが哺乳動物、魚
類、鳥類等の動物やその他の植物等から抽出精製された
天然由来のものであっても、また、遺伝子組換え、合
成、半合成等の手段で製造されたものであってもよい。
これらの生理活性物質は、その１種のみを使用してもよ
く、また、必要により２種以上を併用使用してもよい。
そして、この生理活性物質は、その種類や性状等によっ
ても異なるが、通常、マイクロカプセル中に０．０１〜
５０重量％の範囲で内包される。

【０００８】また、本発明で使用するマイクロカプセル
の外殻物質となる生体適合高分子物質は、それが生体内
分解性あるいは生体内組織適合性であって、人、馬、牛
等の生体内に入った際に分解しあるいは組織に取り込ま
れて適合するものであれば、如何なるものであってもよ
く、具体的には、生体内分解性の生体適合高分子物質と
しては、例えばポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリクエ
ン酸、ポリリンゴ酸、ポリ乳酸グリコール酸共重合体等
の脂肪酸エステルの単独重合体や共重合体や、ポリα−
シアノアクリル酸エステル等のポリアクリル酸エステル
類や、ポリβ−ヒドロキシ酪酸等のヒドロキシ酪酸類
や、ポリトリメチレンオキサレート等のポリアルキレン
オキサレート類や、ポリオルソエステルや、ポリオルソ
カーボネート、ポリエチレンカーボネート等のポリカー
ボネート類や、ポリγ−ベンジル−Ｌ−グルタミン酸、
ポリＬ−アラニン等のポリアミノ酸等があり、また、生
体内組織適合性の生体適合高分子物質としては、例えば
ポリスチレン、ポリアクリル酸、ポリメタクリル酸、ス
チレンとアクリル酸又はメタクリル酸との共重合体、ア
クリル酸とメタクリル酸との共重合体、ナイロン、テト
ロン、ポリアミノ酸、シリコンポリマー、ポリウレタ
ン、ポリビニルアセテート、ポリビニルアルコール、ポ
リアクリルアミド、エチレン−ビニルアセテート系共重
合体、無水マレイン酸系共重合体、デキストランステア
レート、エチルセルロース、アセチルセルロース、ニト
ロセルロース等を挙げることができる。これらの生体適
合高分子物質は、その１種のみを使用してもよく、ま
た、必要により２種以上を混合使用してもよい。これら
のうち、特に好ましい生体適合高分子物質は、本発明の
マイクロカプセル型徐放性製剤が特に注射用製剤として
最適であることから、生体内分解性の生体適合高分子物
質、特にポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリクエン酸、
ポリリンゴ酸、ポリ乳酸グリコール酸共重合体等の脂肪
酸エステルの単独重合体や共重合体である。そして、こ
れらの生体適合高分子物質の平均分子量については、好
ましくは約１，０００〜２００，０００程度のものであ
り、より好ましくは２，０００〜１００，０００の範囲
である。この生体適合高分子物質は、その種類等によっ
ても異なるが、通常、マイクロカプセル中に２０〜９９
重量％、好ましくは４０〜９５重量％の範囲となるよう
に使用される。

【０００９】更に、本発明においては、上記生理活性物
質の安定性を確保したり、あるいは、この生理活性物質
を増量し取扱易くする等の目的で、必要に応じて水溶性
の安定化剤や賦形剤（補形剤）等をマイクロカプセル中
に内包させることができる。この目的で使用される安定
化剤としては、例えばアルブミン、ゼラチン等のタンパ
ク質類や、グリシン、アルギニン、ヒスチジン、リジ
ン、グルタミン酸、アスパラギン酸等のアミノ酸類又は
これらの塩類や、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキ
シエチレン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル
等の界面活性剤や、エチレンジアミン四酢酸塩、クエン
酸等のキレート剤や、グルコース、シュクロース、フラ
クトース、トレハロース、デキストリン、デキストラ
ン、マンニトール、ソルビトール等の糖類又は糖アルコ
ール類等を挙げることができる。また、賦形剤として
は、例えば、アラビアゴム、キサンタンガム等の天然水
溶性ガムや、カゼイン、ゼラチン、コラーゲン、アルブ
ミン、セルロース、デンプン、寒天等の天然水溶性高分
子化合物や、カルボキシメチルセルロース、ポリサッカ
ライド等の合成水溶性高分子化合物を挙げることができ
る。これら安定化剤や賦形剤の使用量は、その種類や目
的等によって決定されるものであるが、通常、生体適合
高分子物質に対して０〜５００％程度である。

【００１０】本発明のマイクロカプセル型徐放性製剤
は、生理活性物質の水溶液と生体適合性高分子物質の有
機溶剤溶液とでＷ／Ｏ型乳化物を調製し、このＷ／Ｏ型
乳化物と水溶性高分子物質の水溶液とで二次乳化させる
際にその外水層に０．１Ｍ濃度ないし飽和濃度の塩物質
を存在させてＷ／Ｏ／Ｗ型乳化物を調製し、得られたＷ
／Ｏ／Ｗ型乳化物から生理活性物質を内包物とし、か
つ、生体適合高分子物質を外殻物質とするマイクロカプ
セルを調製して得られるものであるが、この得られたマ
イクロカプセルは、その最大粒径が１５０μｍ以下、通
常７５μｍ以下、より好ましい形態としては３０μｍ以
下であつてその平均粒径が５〜１００μｍ、通常５〜２
５μｍ、より好ましい形態としては５〜１５μｍの範囲
内で、その変動係数が５０％以下であり、特に分別整粒
操作を行うことなくそのまま注射剤として利用できる。
最大粒径は乳化の条件や溶液の濃度によって影響を受
け、これらの条件によっては１５０μｍ近くの値を示す
場合もある。なお、最大粒径は１ロット中の最大粒子の
粒径を求めることにより、平均粒径は粒子５００個の粒
径の平均値を求めることにより、また、変動係数は（標
準偏差）÷（平均粒径）×１００の式から算出すること
により求められる値である。

【００１１】本発明のマイクロカプセル型徐放性製剤
は、以下の方法で製造される。先ず、生体適合高分子物
質を有機溶剤に溶解し、その有機溶剤溶液を調製する。
この目的で使用される有機溶剤としては、比較的沸点が
低くて水と混和せず、生体適合高分子物質を溶解するも
のであればよく、例えば、ジクロロメタン、クロロエタ
ン、クロロホルム、トリクロルエタン、四塩化炭素、酢
酸エチル、ｎ−ヘキサン、トルエン等を挙げることがで
き、これらはその１種のみを単独で使用できるほか、２
種以上を混合して使用することもできる。この有機溶剤
溶液における生体適合高分子物質の濃度は、使用する生
体適合高分子物質の種類等に応じて適宜変更し得るもの
であるが、通常０．５〜５０重量％、好ましくは１〜４
０重量％程度である。

【００１２】また、上記の生体適合高分子物質の有機溶
剤溶液とは別に、上記生理活性物質及び必要に応じて添
加される水溶性の安定化剤や賦形剤を所定の水に溶解し
てその水溶液を調製する。そして、この生理活性物質の
水溶液を調製する際には、その安定性や溶解性を保持す
る目的で、必要によりｐＨ調整剤を添加する。この目的
で使用されるｐＨ調整剤としては、例えば燐酸、クエン
酸、酢酸、炭酸等の酸類やこれらのナトリウム塩やカリ
ウム塩、更には燐酸緩衝液等の各種の緩衝液を挙げるこ
とができる。これらｐＨ調整剤の使用量は、特に限定さ
れるものではないが、通常数１０ｍＭ濃度程度である。

【００１３】次に、この様にして調整された生理活性物
質の水溶液を高速攪拌下に上記生体適合高分子物質の有
機溶剤溶液中に添加し、Ｗ／Ｏ型乳化物を調製する。こ
の際の攪拌速度は通常１，０００〜３０，０００ｒｐ
ｍ、好ましくは５，０００〜２８，０００ｒｐｍであ
り、乳化温度は−１００〜４０℃、好ましくは−５０〜
２０℃程度がよい。この様にして調製されたＷ／Ｏ型乳
化物は、次に外水層中に０．１Ｍ濃度から飽和濃度の塩
物質を存在させて予め準備された水溶性高分子物質の水
溶液と混合され、二次乳化されてＷ／Ｏ／Ｗ型乳化物と
される。

【００１４】この二次乳化工程で使用する水溶性高分子
物質としては、例えばポリビニルアルコール（ＰＶ
Ａ）、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロ
ースナトリウム、ゼラチン、キチン及びその誘導体、キ
サントン及びその誘導体、ヒアルロン酸及びそのナトリ
ウム塩、デキストラン、ペクチン、コンドロイチン硫酸
及びそのナトリウム塩等を挙げることができ、これらは
その１種のみを単独で使用できるほか、２種以上を混合
物として使用することもできる。この水溶性高分子物質
の水溶液における濃度は、通常０．０５〜５．０重量％
の範囲、好ましくは０．１〜２．０重量％の範囲がよ
い。

【００１５】また、上記二次乳化の際にその外水層中に
存在させる塩物質としては、それが先に調製されたＷ／
Ｏ型乳化物と外水層との間の界面で形成されるエマルジ
ョンの安定性を改善し、かつ、生体適合高分子物質の膨
潤を抑えることができるものであればよく、特に限定さ
れるものではないが、例えば酢酸ナトリウム、クエン酸
ナトリウム、クエン酸カリウム等の種々の有機酸塩や、
塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、硫酸
ナトリウム、硫酸カリウム等の種々の無機酸塩や、硫酸
アンモニウム等のアンモニウム塩や、コリンクロライ
ド、テトラメチルアンモニウムクロライド等の第四級ア
ミン塩等を挙げることができる。これらの塩物質は、通
常、外水層中に０．１Ｍ濃度から飽和濃度の範囲、好ま
しくは０．５Ｍ濃度から飽和濃度の範囲で存在させるの
がよく、０．１Ｍ濃度より低いとバースト化という問題
が生じ、また、飽和濃度より高くなると塩の包埋化とい
う問題が生じる。そして、この塩物質を外水層中に存在
させる方法については、二次乳化工程でＷ／Ｏ／Ｗ型乳
化物が調製される際に結果としてその外水層中に存在す
ればよく、予め水溶性高分子物質の水溶液中に添加して
おいてもよく、また、Ｗ／Ｏ型乳化物と水溶性高分子物
質の水溶液とを混和する際に別途に添加してもよい。

【００１６】この様にして調製されたＷ／Ｏ／Ｗ型乳化
物は、次に通常室温下で若しくは０〜５０℃、好ましく
は０〜２５℃で攪拌され、有機溶剤を蒸散し、これによ
って外殻物質の生体適合高分子物質が固化してマイクロ
カプセルが生成する。更に、生成したマイクロカプセル
は、遠心分離あるいは濾過等の手段で分離し、必要によ
り洗浄し、乾燥させる。その後、必要に応じて例えばマ
ンニトール等の適当な賦形剤を含む水溶液に再度分散さ
せ、凍結乾燥等の手段で乾燥させ、残留有機溶剤を除去
し、使用時の再分散性に優れたマイクロカプセル型徐放
性製剤を生成せしめる。

【００１７】以上のようにして得られたマイクロカプセ
ルは、その最大粒径が１５０μｍ以下であつてその平均
粒径が５〜１００μｍであり、しかも、変動係数が５０
％以下であって、特に分別整粒操作を行うことなくその
まま注射剤として利用できる。また、本発明によるマイ
クロカプセル型徐放性製剤は、治療目的やマイクロカプ
セル中に内包物として含有される生理活性物質の薬理作
用に応じて、注射剤、散剤、顆粒剤、錠剤、坐剤等の任
意の剤形に製剤することができるが、粒径が微細かつ均
一であって分別整粒操作を行うことなくそのままで通針
性や再分散性を有することから、特に注射剤として好適
である。

【００１８】

【作用】本発明のマイクロカプセル型徐放性製剤はその
粒径が微細かつ均一である。また、本発明方法によれ
ば、Ｗ／Ｏ型乳化物をＷ／Ｏ／Ｗ型乳化物に乳化させる
二次乳化工程でその外水層に０．１Ｍ濃度ないし飽和濃
度の塩物質を存在させることにより、Ｗ／Ｏ型乳化物と
水溶性高分子物質の水溶液との間の界面の性質が改善さ
れ、これによって粒径が微細かつ均一なマイクロカプセ
ル型徐放性製剤が得られるものと考えられる。

【００１９】

【実施例】以下、実施例及び実験例に基づいて、本発明
を具体的に説明する。

【００２０】実施例１ ポリ乳酸グリコール酸共重合体（乳酸／グリコール酸比
率＝７５／２５、重量平均分子量１０，０００）１ｇを
ジクロロメタン５ｍｌに溶解し、生体適合高分子物質の
有機溶剤溶液とした。遺伝子組換えヒトエリスロポエチ
ン（以下、ｒＥＰＯと略す）１ｍｇ及びニッピハイグレ
ードゼラチンタイプＢ〔（株）ニッピ製、平均分子量約
７，０００のアルカリ処理ゼラチン〕４０ｍｇを１ｍｌ
の日本薬局方注射用水に溶解し、孔径０．２２μｍのメ
ンブランフィルター（日本ミリポアリミテッド製：マイ
レックスＧＶ）で無菌濾過し、生理活性物質の水溶液と
した。ホモジナイザー（キネマチカ製：ポリトロン）に
よって攪拌（２８，０００ｒｐｍ）下の上記有機溶剤溶
液中に上記水溶液を滴下し、更に同回転数で３０秒間攪
拌混合してＷ／Ｏ型乳化物を得た。

【００２１】次に、予め別に氷冷しておいた１Ｍ−塩化
ナトリウムを含む０．５％−ポリビニルアルコール水溶
液２００ｍｌ中に上記Ｗ／Ｏ型乳化物を加え、１０，０
００ｒｐｍの速度で３０秒間攪拌混合し、Ｗ／Ｏ／Ｗ型
乳化物を生成せしめた。更に、このＷ／Ｏ／Ｗ型乳化物
を含む分散液を引続き室温で穏和に攪拌することによ
り、残存する塩化メチレンを揮散させ、かつポリ乳酸グ
リコール酸共重合物を固化させた後、３，０００ｒｐ
ｍ、１０分間の遠心分離により生成したマイクロカプセ
ルを捕集した。このようにして得られたマイクロカプセ
ルを再び注射用水に分散し、更に遠心分離を行う操作を
５回繰り返すことにより、外水層中のポリビニルアルコ
ール、塩化ナトリウム及び遊離したｒＥＰＯ、ポリ乳酸
グリコール酸共重合物を洗浄した。最終的に捕集された
マイクロカプセルは、５％−マンニトール水溶液５ｍｌ
に再分散した後、凍結乾燥に供した。なお、以上の工程
は全て無菌無塵的に行った。

【００２２】この様にして得られたｒＥＰＯ含有マイク
ロカプセルは、その最大粒径が１５μｍであって平均粒
径が８．０μｍであり、変動係数は４０％であった。ま
た、ｒＥＰＯの取込み率は約９５％であった。

【００２３】実験例 上記実施例１で得られたｒＥＰＯ含有マイクロカプセル
１０ｍｇを、１０ｍｌの０．０５％−Ｔｗｅｅｎ２０を
含む５０ｍＭ−リン酸緩衝液（ｐＨ７．４）に分散さ
せ、回転培養機〔太陽科学工業（株）：ＲＴ−５０）を
用いて、３７℃の恒温槽中、２５ｒｐｍで転倒回転させ
た。所定時間後、分散液を遠心分離（３，０００ｒｐ
ｍ、１０分）に供しマイクロカプセルを捕集した。マイ
クロカプセル中のｒＥＰＯ含量は、捕集したマイクロカ
プセルをアセトニトリル１ｍｌで溶解した後、５０ｍＭ
−リン酸緩衝液で全量１０ｍｌに調整し、逆相高速液体
クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）で定量した。経時的に
定量したマイクロカプセル中のｒＥＰＯ含量の変化を第
１図に示す。この第１図から明らかなように、このマイ
クロカプセル中のｒＥＰＯは、ほぼ一定速度で４週間放
出されていることが認められた。

【００２４】実施例２ ポリ乳酸グリコール酸共重合体（乳酸／グリコール酸比
率＝７５／２５、重量平均分子量１０，０００）１ｇを
ジクロロメタン５ｍｌに溶解し、生体適合高分子物質の
有機溶剤溶液とした。ｒＥＰＯ１ｍｇを１ｍｌの５０ｍ
Ｍ−燐酸緩衝液（ｐＨ６．６）に溶解し、孔径０．２２
μｍのメンブランフィルターで無菌濾過し、生理活性物
質の水溶液とした。ホモジナイザーによって攪拌（２
８，０００ｒｐｍ）下の上記有機溶剤溶液中に上記水溶
液を滴下し、更に同回転数で３０秒間攪拌混合してＷ／
Ｏ型乳化物を得た。次に、予め別に氷冷しておいた１Ｍ
−塩化ナトリウムを含む0.５％−ポリビニルアルコール
水溶液２００ｍｌ中に上記Ｗ／Ｏ型乳化物を加え、１
０，０００ｒｐｍの速度で３０秒間攪拌混合し、Ｗ／Ｏ
／Ｗ型乳化物を生成せしめた。以下、上記実施例１と同
様にして、ｒＥＰＯ含有マイクロカプセルを得た。この
様にして得られたｒＥＰＯ含有マイクロカプセルは、そ
の最大粒径が４０μｍであって平均粒径が２２μｍであ
り、変動係数は４５％であった。また、ｒＥＰＯの取込
み率は約８０％であった。

【００２５】実施例３ ポリ乳酸グリコール酸共重合体（乳酸／グリコール酸比
率＝７５／２５、重量平均分子量２０，０００）１ｇを
ジクロロメタン５ｍｌに溶解し、有機溶剤溶液とした。
また、遺伝子組換えヒト顆粒球コロニー刺激因子（以
下、ｒＧ−ＣＳＦ）１ｍｇ及びニッピハイグレードゼラ
チンタイプＢ４０ｍｇを１ｍｌの日本薬局方注射用水に
溶解し、孔径０．２２μｍのメンブランフィルターで無
菌濾過して水溶液とした。ホモジナイザーによって攪拌
下（２８，０００ｒｐｍ）の上記有機溶剤溶液中に上記
水溶液を滴下し、さらに同回転数で３０秒間攪拌混合す
ることによってＷ／Ｏ型乳化物を得た。次に、予め別に
氷冷しておいた１Ｍ−硫酸ナトリウムを含む0.５％−ポ
リビニルピロリドン水溶液２００ｍｌに上記Ｗ／Ｏ型乳
化物を加え、１０，０００ｒｐｍの速度で３０秒間攪拌
混合し、Ｗ／Ｏ／Ｗ型乳化物を生成せしめた。以下、上
記実施例１と同様にして、ｒＧ−ＣＳＦ含有マイクロカ
プセルを得た。得られたｒＧ−ＣＳＦ含有マイクロカプ
セルは、その最大粒径が５０μｍであって平均粒径が２
０μｍであり、その変動係数は４０％であった。また、
ｒＧ−ＣＳＦの取込み率は約９０％であった。

【００２６】実施例４ ポリ乳酸グリコール酸共重合体（乳酸／グリコール酸比
率＝７５／２５、重量平均分子量５，０００）１ｇをジ
クロロメタン５ｍｌに溶解し、有機溶剤溶液とした。ｒ
ＥＰＯ１ｍｇ及びニッピハイグレードゼラチンタイプＢ
４０ｍｇを１ｍｌの日本薬局方注射用水に溶解し、孔径
０．２２μｍのメンブランフィルターで無菌濾過して水
溶液とした。ホモジナイザーによって攪拌下（２８，０
００ｒｐｍ）の上記有機溶剤溶液中に上記水溶液を滴下
し、さらに同回転数で３０秒間攪拌混合することによっ
てＷ／Ｏ型乳化物を得た。次に、予め別に氷冷しておい
た１Ｍ−硫酸アンモニウムを含む0.５％−カルボキシメ
チルセルロースナトリウム水溶液２００ｍｌに上記Ｗ／
Ｏ型乳化物を加え、１０，０００ｒｐｍ の速度で３０
秒間攪拌混合し、Ｗ／Ｏ／Ｗ型乳化物を生成せしめた。
以下、上記実施例１と同様にして、ｒＥＰＯ含有マイク
ロカプセルを得た。得られたｒＥＰＯ含有マイクロカプ
セルは、その最大粒径が５５μｍであって平均粒径が２
３μｍであり、その変動係数が４８％であった。また、
ｒＥＰＯの取込み率は約９５％であった。

【００２７】実施例５ ポリ乳酸重合体（重量平均分子量５，０００）１ｇをジ
クロロメタン５ｍｌに溶解し、有機溶剤溶液とした。ｒ
Ｇ−ＣＳＦ１ｍｇ及びニッピハイグレードゼラチンタイ
プＢ４０ｍｇを１ｍｌの日本薬局方注射用水に溶解し、
孔径０．２２μｍのメンブランフィルターで無菌濾過し
て水溶液とした。ホモジナイザーによって攪拌下（２
８，０００ｒｐｍ）の上記有機溶剤溶液中に上記水溶液
を滴下し、さらに同回転数で３０秒間攪拌混合すること
によってＷ／Ｏ型乳化物を得た。次に、予め別に氷冷し
ておいた１Ｍ−塩化カリウムを含む０．５％−日本薬局
法精製ゼラチン水溶液２００ｍｌに上記Ｗ／Ｏ型乳化物
を加え、１０，０００ｒｐｍの速度で３０秒間攪拌混合
し、Ｗ／Ｏ／Ｗ型乳化物を生成せしめた。以下、上記実
施例１と同様にしてｒＧ−ＣＳＦ含有マイクロカプセル
を得た。得られたｒＧ−ＣＳＦ含有マイクロカプセル
は、その最大粒径が６０μｍであって平均粒径が２５μ
ｍであり、その変動係数は４４％であった。また、ｒＧ
−ＣＳＦの取込み率は約９０％であった。

【００２８】実施例６ ポリ乳酸グリコール酸共重合体（乳酸／グリコール酸比
率＝７５／２５、重量平均分子量１０，０００）２５０
ｍｇをジクロロメタン５ｍｌに溶解し、有機溶剤溶液と
した。ｒＥＰＯ１ｍｇ及びニッピハイグレードゼラチン
タイプＢ４０ｍｇを１ｍｌの１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐ
Ｈ６．５）に溶解し、生理活性物質溶液とした。ホモジ
ナイザーによって攪拌（２８，０００ｒｐｍ）下の上記
有機溶剤溶液中に上記生理活性物質溶液を滴下し、更に
同回転数で３０秒間攪拌混合してＷ／Ｏ型乳化物を得
た。次に、予め別に氷冷しておいた０．１Ｍ−塩化カル
シウムを含む０．５％−ポリビニルアルコール水溶液２
００ｍｌ中に上記Ｗ／Ｏ型乳化物を加え、７，５００ｒ
ｐｍの速度で３０秒間攪拌混合し、Ｗ／Ｏ／Ｗ型乳化物
を生成せしめた。以下、上記実施例１と同様にして、ｒ
ＥＰＯ含有マイクロカプセルを得た。得られたｒＥＰＯ
含有マイクロカプセルは、その最大粒径が２５μｍであ
って平均粒径が１３μｍであり、その変動係数が４７％
であった。また、ｒＥＰＯ取込み率は約９０％であっ
た。

【００２９】実施例７ ポリ乳酸グリコール酸共重合体（乳酸／グリコール酸比
率＝７５／２５、重量平均分子量１０，０００）１ｇを
ジクロロメタン５ｍｌに溶解し、生体適合高分子物質の
有機溶剤溶液とした。ｒＥＰＯ１ｍｇ及びニッピハイグ
レードゼラチンタイプＢ４０ｍｇを１ｍｌの日本薬局方
注射用水に溶解し、孔径０．２２μｍのメンブランフィ
ルターで無菌濾過し、生理活性物質の水溶液とした。ホ
モジナイザーによって攪拌（２８，０００ｒｐｍ）下の
上記有機溶剤溶液中に上記水溶液を滴下し、更に同回転
数で３０秒間攪拌混合してＷ／Ｏ型乳化物を得た。次
に、予め別に氷冷しておいた各種濃度の塩化ナトリウム
を含む０．５％−ポリビニルアルコール水溶液２００ｍ
ｌ中に上記Ｗ／Ｏ型乳化物をそれぞれ加え、１０，００
０ｒｐｍの速度で３０秒間攪拌混合し、Ｗ／Ｏ／Ｗ型乳
化物を生成せしめた。更に、これらのＷ／Ｏ／Ｗ型乳化
物を含む分散液を引続き室温で穏和に攪拌することによ
り、残存する塩化メチレンを揮散させ、かつポリ乳酸グ
リコール酸共重合物を固化させた後、３，０００ｒｐ
ｍ、１０分間の遠心分離により生成したマイクロカプセ
ルを捕集した。

【００３０】このようにして得られたマイクロカプセル
を再び注射用水に分散し、更に遠心分離を行う操作を５
回繰り返すことにより、外水層中のポリビニルアルコー
ル、塩化ナトリウム及び遊離したｒＥＰＯ、ポリ乳酸グ
リコール酸共重合物を洗浄した。最終的に捕集されたマ
イクロカプセルは５％−マンニトール水溶液５ｍｌに再
分散した後、凍結乾燥に供した。二次乳化工程での外水
層の塩濃度のみを変えて調製した各ｒＥＰＯ含有マイク
ロカプセルの最大粒径、平均粒径及び変動係数を求め、
また、その形状を観察した。結果を第１表に示す。

【００３０】

【表１】

【００３１】

【発明の効果】本発明によれば、Ｗ／Ｏ／Ｗ型乳化物を
つくる際の外水層に所定濃度の塩物質を存在させること
により、粘度調整や分別整粒操作を必要とすることなく
粒径が微細かつ均一なマイクロカプセルを製造すること
ができ、工業上有利である。また、この方法で製造され
る本発明の生理活性物質と生体適合高分子物質とからな
るマイクロカプセル型徐放性製剤は、優れた徐放性を有
しており、一回の投与により長期間に亘って生理活性物
質の薬効を発現させることができる。

【図面の簡単な説明】

【図１】 図１は、実施例１で得られたｒＥＰＯ含有マ
イクロカプセル中のｒＥＰＯ含有量の経時的変化を示し
たグラフ図である。

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 生理活性物質を含有する内包物と生体内
   分解性及び／又は生体内組織適合性を有する生体適合高
   分子物質で形成された外殻物質とを有し、最大粒径が１
   ５０μｍ以下であって平均粒径が５〜１００μｍであ
   り、かつ、変動係数が５０％以下であることを特徴とす
   るマイクロカプセル型徐放性製剤。
2. 【請求項２】 生理活性物質を含有する水溶液と生体内
   分解性及び／又は生体内組織適合性の生体適合性高分子
   物質を含有する有機溶剤溶液とでＷ／Ｏ型乳化物を調製
   し、次いでこのＷ／Ｏ型乳化物と水溶性高分子物質の水
   溶液とで二次乳化させてＷ／Ｏ／Ｗ型乳化物を調製し、
   得られたＷ／Ｏ／Ｗ型乳化物から上記有機溶剤を蒸散、
   固化させ、更に洗浄し、乾燥させて生理活性物質を内包
   物とし、かつ、生体適合高分子物質を外殻物質とするマ
   イクロカプセル型徐放性製剤を調製するに際し、上記二
   次乳化工程でその外水層に０．１Ｍ濃度ないし飽和濃度
   の塩物質を存在させることを特徴とするマイクロカプセ
   ル型徐放性製剤の製造法。