JPH06192293A - 環状ペンタペプチド，その製造法およびその用途 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】エンドセリン受容体を選択的に阻害する新規物
質を見いだす。 【構成】一般式 Cyclo （−Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ−Ｅ−） ［式中、ＡはＤ−酸性−α−アミノ酸残基を、Ｂおよび
ＤはＬ−α−アミノ酸残基を、ＣはＤ−中性−α−アミ
ノ酸残基を、Ｅは芳香環基を有するＤ−α−アミノ酸残
基を示す。ただし、Ａが D-Glu でＢが L-Ala でＣが D
-aIle でＤが L-Leu, L-Val または L-Nva であるか、
Ａが D-Glu でＢが L-Ala でＣが D-Val または D-Leu
でＤが L-Leu または L-Val であるか、Ａが D-Glu で
Ｂが L-AlaでＣが D-Nva でＤが L-Val または L-Nva
であるとき、Ｅは D-Trp でなく、Ａが D-Glu でＢが L
-Ala でＣが D-aIle でＤが L-Leu であるとき、Ｅは D
-mTrpでない。］で表される環状ペンタペプチドまたは
その薬理学的に許容される塩。 【効果】本発明の環状ペンタペプチドまたはその薬理学
的に許容される塩は、強力なエンドセリン受容体拮抗作
用を有し、循環機能改善剤または心筋梗塞・急性腎不全
・ぜんそくの予防または治療薬として有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、高血圧治療剤、心・脳
循環疾患治療剤、腎疾患治療剤、ぜんそく治療剤等、医
薬として有用性が期待されるエンドセリン拮抗作用を有
する新規環状ペンタペプチド、その製造法およびその用
途に関する。

【０００２】

【従来の技術】エンドセリン(ＥＴ)は、１９８８年、柳
沢らによりブタ大動脈内皮細胞の培養上清から単離・構
造決定された２１個のアミノ酸から成る血管収縮性ペプ
チドである(柳沢ら、ネイチャー(Nature)，３３２巻、
４１１〜４１２頁)。この後、エンドセリンをコードし
ている遺伝子の研究から、エンドセリンに構造の類似し
たペプチドの存在することが明らかにされ、それぞれエ
ンドセリン−１(ＥＴ−１)、エンドセリン−２(ＥＴ−
２)、エンドセリン−３(ＥＴ−３)と命名されている
が、その構造は以下の通りである(ＥＴ−１，２，３に
おける構成アミノ酸はすべてＬ体である)。

【化１】 〔井上ら、プロシージング・オブ・ザ・ナショナル・ア
カデミー・オブ・サイエンス・ユーエスエー(Proc. Nat
l. Acad. Sci. ＵＳＡ)，８６巻、２８６３〜２８６７
頁〕。上記エンドセリンファミリー系ペプチドは、生体
内に存在し、血管収縮作用を有していることから循環系
調節に関与する内因性因子であると予想され、高血圧
症、心・脳循環疾患(例えば心筋梗塞)、腎疾患(例えば
急性腎不全)との関係が推定されている。また、気管支
平滑筋収縮作用も有しており、ぜんそくとの関係も推定
されている。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】上記エンドセリンファ
ミリー系ペプチドのアンタゴニストが得られれば該ペプ
チドの作用機作の解明に役立つのみならず、これらの疾
患の有効な治療薬になる可能性が大きいと考えられる。
これまで、発酵生産物より得られた、エンドセリンアン
タゴニスト作用を有する環状ペンタペプチドＴＡＮ−１
４６２Ａ，Ｂ，ＴＡＮ−１４７７Ｃ，Ｄ，Ｅ，Ｆ，Ｇ，
Ｈ，Ｉ，ＪおよびＫについて出願がされているが(特願
平２−４１３８２８および特願平３−１２６１６０)、
同様のあるいはそれ以上の効果を有する新規環状ペンタ
ペプチド誘導体を提供することが本発明の課題である。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、エンドセ
リンによる強力な血管平滑筋収縮活性を抑制する作用を
指標として鋭意研究を進め、種々の環状ペンタペプチド
を合成した結果、新規環状ペンタペプチド誘導体に顕著
なエンドセリン拮抗作用のあることを見いだし、本発明
を完成したものである。すなわち本発明は、 １．一般式 Cyclo （−Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ−Ｅ−） (Ｉ) ［式中、ＡはD−酸性−α−アミノ酸残基を、Ｂおよび
ＤはL−α−アミノ酸残基を、ＣはD−中性−α−アミノ
酸残基を、Ｅは芳香環基を有するD−α−アミノ酸残基
を示す。ただし、Ａが D-Glu でＢが L-Ala でＣが D-a
Ile でＤが L-Leu,L-Val または L-Nva であるか、Ａが
D-Glu でＢが L-Ala でＣが D-Val または D-Leu でＤ
が L-Leu または L-Val であるか、Ａが D-Glu でＢが
L-Ala でＣが D-Nva でＤが L-Val または L-Nva であ
るとき、Ｅは D-Trp でなく、ＡがD-Glu でＢが L-Ala
でＣが D-aIle でＤが L-Leu であるとき、Ｅは D-mTrp
でない。］で表される環状ペンタペプチドまたはその薬
理学的に許容される塩、

【０００５】２．一般式 Ｈ−(Ｘ)−ＯＨ (II) ［式中、Ｘは−Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ−Ｅ−，−Ｂ−Ｃ−Ｄ−
Ｅ−Ａ−，−Ｃ−Ｄ−Ｅ−Ａ−Ｂ−，−Ｄ−Ｅ−Ａ−Ｂ
−Ｃ−または−Ｅ−Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ−を示し、Ａ，Ｂ，
Ｃ，ＤおよびＥは請求項１の記載と同意義を有する。］
で表されるペプチドまたは該ペプチドの反応性誘導体を
環化剤で処理し、必要に応じて保護基の脱離反応に付す
ことを特徴とする一般式(Ｉ)で表される環状ペンタペプ
チドまたはその薬理学的に許容される塩の製造法およ
び、

【０００６】３．一般式(Ｉ)で表される環状ペンタペプ
チドまたはその薬理学的に許容される塩を含有してなる
エンドセリン受容体拮抗剤に関する。上記一般式(Ｉ)に
おいて、Ａで表されるD−酸性−α−アミノ酸残基を構
成するアミノ酸としては、例えば、側鎖にカルボキシル
基またはスルホニル基のような酸性基を有するアミノ酸
が挙げられ、さらにその具体例として、グルタミン酸、
アスパラギン酸、システイン酸等が挙げられる。上記一
般式(Ｉ)において、ＢおよびＤで表されるL−α−アミ
ノ酸残基を構成するアミノ酸としては、例えば、グリシ
ン、アラニン、バリン、ノルバリン、ロイシン、イソロ
イシン、ｔ−ロイシン、ノルロイシン、メチオニン、α
−アミノ酪酸、セリン、スレオニン、フエニルアラニ
ン、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニ
ン、チロシン、プロリン等、通常一般に知られるアミノ
酸が挙げられる。上記一般式(Ｉ)において、Ｃで表され
るD−中性−α−アミノ酸残基を構成するアミノ酸とし
ては、例えば、バリン、ロイシン、イソロイシン、アロ
イソロイシン、ノルロイシン、フェニルグリシン、ｔ−
ロイシン、γ−メチルロイシン等が挙げられる。上記一
般式(Ｉ)において、Ｅで表される芳香環状基を有するD
−α−アミノ酸残基を構成するアミノ酸としては、例え
ば、側鎖に芳香環基を有するアミノ酸が挙げられ、その
具体例として、トリプトファン、５−メチルトリプトフ
ァン、フェニルアラニン、チロシン、１−ナフチルアラ
ニン、２−ナフチルアラニン、Ｎⁱⁿ−ホルミルトリプト
ファン等が挙げられる。

【０００７】本明細書において、アミノ酸およびペプチ
ドなどを略号で表示する場合、ＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ Co
mmision on Biochemical Nomenclature による略号ある
いは当該分野における慣用略号に基づくものであり、そ
の例を下記する。 Ｇly ：グリシン Ａla ：アラニン Ｖal ：バリン Ｎva ：ノルバリン Ｉle ：イソロイシン aＩle ：アロイソロイシン Ｌeu ：ロイシン tＬeu ：ターシャリーロイシン γＭeＬeu ：ガンマメチルロイシン Ｍet ：メチオニン Ａrg ：アルギニン Ｌys ：リジン Ｈis ：ヒスチジン Ａsp ：アスパラギン酸 Ｇlu ：グルタミン酸 Ｓer ：セリン Ｔhr ：スレオニン Ｐhe ：フェニルアラニン Ｔyr ：チロシン Ｔrp ：トリプトファン mＴrp ：５−メチルトリプトファン Ｐhg ：フェニルグリシン Ｎal (１) ：１−ナフチルアラニン Ｎal (２) ：２−ナフチルアラニン また本文中で常用される保護基および試薬を下記の略号
で表記する。 Ｂoc ：ｔ−ブトキシカルボニル Ｂzl ：ベンジル ＢrＺ ：２−ブロムベンジルオキシカルボニル ＣlＺ ：２−クロルベンジルオキシカルボニル Ｔos ：ｐ−トルエンスルホニル Ｆor ：ホルミル ＯＢzl ：ベンジルエステル ＯＰac ：フェナシルエステル ＯＮＢ ：ＨＯＮＢエステル ＴＦＡ ：トリフルオロ酢酸 ＴＥＡ ：トリエチルアミン ＩＢＣＦ ：イソブチルクロロホルメート ＤＭＦ ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド ＤＣＣ ：Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイ
ミド ＤＣＵ ：Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルウレア ＨＯＮＢ ：Ｎ−ヒドロキシ−５−ノルボルネン−２,
３−ジカルボキシミド ＨＯＢt ：１−ハイドロキシベンゾトリアゾール ＤＣＭ ：ジクロルメタン ＴＨＦ ：テトラヒドロフラン

【０００８】本発明の環状ペンタペプチド(Ｉ)の薬理学
的に許容される塩としてはナトリウム塩、カリウム塩、
カルシウム塩、マグネシウム塩や、塩酸塩、硫酸塩、リ
ン酸塩などの無機酸付加塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、
クエン酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩、蓚酸塩などの有機
酸塩等が挙げられる。本発明の環状ペンタペプチド(Ｉ)
は、ペプチド合成の常套手段で製造しうる。即ち、液相
合成法、固相合成法のいずれによってもよいが、液相合
成法が好ましい場合もある。そのようなペプチド合成の
手段は、任意の公知の方法に従えばよく、たとえば、M.
Bodansky および M. A. Ondetti 著、ペプチド・シン
セシス(Peptide Synthesis)、インターサイエンス、ニ
ューヨーク、１９６６年；F. M.Finn および K. Hofman
n 著、ザ・プロテインズ(The Proteins)、第２巻、H. N
enrath、R. L. Hill 編集、アカデミックプレスイン
ク、ニューヨーク、１９７６年；泉屋信夫他著「ペプチ
ド合成の基礎と実験」丸善(株)１９８５年；矢島治明、
榊原俊平他著、生化学実験講座１、日本生化学会編、東
京化学同人１９７７年；木村俊他著、続生化学実験講座
２、日本生化学会編、東京化学同人１９８７年；J. M.
Stewart および J. D. Young 著、ソリッド フェイズ
ペプチド シンセシス(Solid Phase Peptide Synthes
is)、ピアスケミカルカンパニー、イリノイ、１９８４
年などに記載された方法、たとえばアジド法、クロライ
ド法、酸無水物法、混酸無水物法、ＤＣＣ法、活性エス
テル法、ウッドワード試薬Ｋを用いる方法、カルボニル
イミダゾール法、酸化還元法、ＤＣＣ／ＨＯＮＢ法、Ｂ
ＯＰ試薬を用いる方法などが挙げられる。

【０００９】本発明の環状ペンタペプチド(Ｉ)は、その
ペプチド結合の任意の位置で２分される２種のフラグメ
ントの一方に相当する反応性カルボキシル基を有する原
料と、他方のフラグメントに相当する反応性アミノ基を
有する原料をペプチド合成の常套手段で縮合させ、つい
で生成物のＣ末端αカルボキシル基およびＮ末端αアミ
ノ基の保護基を同時にまたは段階的に除去したのちこの
両者を公知の縮合方法により分子内で縮合し環状化合物
を得、さらに生成物が保護基を有する場合、その保護基
を常套手段で脱離することにより製造しうる。

【０００１０】原料の反応に関与すべきでない官能基の
保護および保護基、ならびにその保護基の脱離、反応に
関与する官能基の活性化などもまた公知のものあるいは
手段から適宜選択しうる。原料のアミノ基の保護基とし
ては、たとえばカルボベンゾキシ、ｔ−ブチルオキシカ
ルボニル、ｔ−アミルオキシカルボニル、イソボルニル
オキシカルボニル、４−メトキシベンジルオキシカルボ
ニル、２−クロルベンジルオキシカルボニル、アダマン
チルオキシカルボニル、トリフルオロアセチル、フタリ
ル、ホルミル、２−ニトロフェニルスルフェニル、ジフ
ェニルホスフィノチオイル、９−フルオレニルメチルオ
キシカルボニルなどが挙げられる。カルボキシル基の保
護基としては、たとえばアルキルエステル(例、メチ
ル、エチル、プロピル、ブチル、ｔ−ブチル、シクロペ
ンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオク
チル、２−アダマンチルなどのエステル基)、ベンジル
エステル、４−ニトロベン ジルエステル、４−メトキ
シベンジルエステル、４−クロロベンジルエステル、ベ
ンズヒドリルエステル、フェナシルエステル、カルボベ
ンゾキシヒドラジド、ｔ−ブチルオキシカルボニルヒド
ラジド、トリチルヒドラジドなどが挙げられる。

【００１１】セリンの水酸基は、たとえばエステル化ま
たはエーテル化によって保護することができる。このエ
ステル化に適する基としてはたとえばアセチル基などの
低級アルカノイル基、ベンゾイル基などのアロイル基、
ベンジルオキシカルボニル基、エチルオキシカルボニル
基などの炭酸から誘導される基などがあげられる。また
エーテル化に適する基としては、たとえばベンジル基、
テトラヒドロピラニル基、ｔ−ブチル基などである。し
かしながら、セリンの水酸基は必ずしも保護する必要は
ない。チロシンのフェノール性水酸基の保護基として
は、たとえば、ベンジル、２,６−ジクロロベンジル、
２−ニトロベンジル、２−ブロモベンジルオキシカルボ
ニル、ｔ−ブチルなどが挙げられるが、必ずしも保護す
る必要はない。メチオニンはスルホキサイドの形で保護
しておいてもよい。ヒスチジンのイミダゾールの保護基
としては、ｐ−トルエンスルホニル，４−メトキシ−
２,３,６−トリメチルベンゼンスルホニル，２,４−ジ
ニトロフェニル，ベンジルオキシメチル，ｔ−ブトキシ
メチル，ｔ−ブトキシカルボニル，トリチル，ｔ−ブト
キシカルボニル，トリチル，９−フルオレニルメチルオ
キシカルボニルなどがあげられるが、必ずしも保護する
必要はない。トリプトファンのインドールの保護基とし
ては、ホルミル，２,４,６−トリメチルベンゼンスルホ
ニル，２,４,６−トリメトキシベンゼンスルホニル，４
−メトキシ−２,３,６−トリメチルベンゼンスルホニ
ル，β,β，β−トリクロルエチルオキシカルボニル，
ジフェニルホスフィノチオイルなどがあげられるが、必
ずしも保護する必要はない。

【００１２】原料のカルボキシル基の活性化されたもの
としては、例えば対応する酸無水物、アジド，活性エス
テル［アルコール(例、ペンタクロロフェノール，２,
４,５−トリクロロフェノール，２,４−ジニトロフェノ
ール，シアノメチルアルコール，ｐ−ニトロフェノー
ル，Ｎ−ハイドロキシ−５−ノルボルネン−２,３−ジ
カルボキシイミド，Ｎ−ハイドロキシスクシミド，Ｎ−
ハイドロキシフタルイミド，Ｎ−ハイドロキシベンズト
リアゾール)とのエステル］などがあげられる。原料の
アミノ基の活性化されたものとしては、例えば対応する
リン酸アミドがあげられる。縮合反応は溶媒の存在下に
行うことができる。溶媒としては、ペプチド縮合反応に
使用しうることが知られているものから適宜選択されう
る。例えば無水又は含水のジメチルホルムアミド，ジメ
チルスルホキサイド，ピリジン，クロロホルム，ジオキ
サン，ジクロロメタン，テトラハイドロフラン，アセト
ニトリル，酢酸エチル，Ｎ−メチルピロリドンあるいは
これらの適宜の混合物などがあげられる。反応温度は、
ペプチド結合形成反応に使用されうることが知られてい
る範囲から適宜選択され、通常約−２０℃〜３０℃の範
囲から適宜選択される。

【００１３】分子内環化反応はペプチドの任意の位置で
公知の方法で行なうことができる。例えば、まず保護さ
れたペンタペプチドのＣ末端アミノ酸のＣ−α−カルボ
キシ保護基を公知の方法で脱離しついでこれを公知の方
法で活性化したのちＮ末端アミノ酸のＮ−α−アミノ保
護基を公知の方法で脱離するとともに分子内で環化する
こともできる。あるいは保護されたペンタペプチドのＣ
末端アミノ酸のＣ−α−カルボキシル保護基およびＮ末
端アミノ酸のＮ−α−アミノ保護基を同時に脱離したの
ち公知の縮合反応により分子内で環化してもよい。また
分子内環化反応は高度希釈下で行なったほうが好ましい
場合もある。保護基の脱離方法としては、例えばＰd 黒
あるいはＰd 炭素等の触媒の存在下での水素気流中での
接触還元や、また、無水フッ化水素、メタンスルホン
酸、トリフルオロメタンスルホン酸、トリフルオロ酢酸
あるいはこれらの混合液等による酸処理や、また液体ア
ンモニア中ナトリウムによる還元等もあげられる。上記
酸処理による脱離基反応は、一般に−２０℃〜４０℃の
適温でおこなわれるが、酸処理においては、アニソー
ル、フェノール、チオアニソール、m-クレゾール、p-ク
レゾール、ジメチルスルフィド、１,４−ブタンジチオ
ール、１,２−エタンジチオールのごときカチオン補足
剤の添加が有効である。また、ヒスチジンのイミダゾー
ル保護基としてもちいられる２,４−ジニトロフェニル
基はチオフェノール処理により除去され、トリプトファ
ンのインドール保護基として用いられるホルミル基は上
記の１,２−エタンジチオール、１,４−ブタンジチオー
ル等の存在下の酸処理による脱保護以外に、希水酸化ナ
トリウム、希アンモニア等によるアルカリ処理によって
も除去される。

【００１４】このようにして製造された環状ペンタペプ
チド(Ｉ)は反応終了後、ペプチドの分離手段、例えば、
抽出，分配，再沈殿，再結晶，カラムクロマトグラフィ
ー，高速液体クロマトグラフィーなどによって採取され
る。本発明の環状ペンタペプチド(Ｉ)は自体公知の方法
によりナトリウム塩，カリウム塩，カルシウム塩，マグ
ネシウム塩などの塩や、酸付加塩、とりわけ薬理学的に
許容される酸付加塩としても得ることができ、たとえ
ば、無機酸(例、塩酸，硫酸，リン酸)あるいは有機酸
(例、酢酸，プロピオン酸，クエン酸，酒石酸，リンゴ
酸，蓚酸，メタンスルホン酸)などの塩があげられる。

【００１５】次に、本発明の環状ペンタペプチドの薬理
作用について述べる。 (１)ブタ冠動脈平滑筋に対する収縮抑制作用の測定 外膜結合組織を除去した冠動脈右回旋枝から作製した２
×１５mmの螺旋条片を、４mlのマグヌス装置に固定し、
その張力を変重・変位変換器ＵＬ−１０ＧＲ(ミネベア
社)により検出し、ポリグラフ(日本電気三栄)により記
録した。マグヌス 装置は３７℃に保ち、Ｏ₂ ９５％，
ＣＯ₂ ５％混合ガスで飽和したクレブス−ヘンゼライト
液(組成〔mＭ〕:ＮaＣl １１８，ＫＣl ４.７，ＣaＣl₂
２.５，ＫＨ₂ＰＯ₄ １.２，ＮaＨＣＯ₃ ２５.０，ＭgＳ
Ｏ₄ １.２，Glucose １０.０)で満た した。条片は１.
２５−１.５ｇの張力をかけ、１.５時間平衡化し、収縮
応答が一定となるまで３０分間隔で６０mＭ ＫＣl 投与
を繰り返し、さらに１.５時間平衡化した後、測定試料
の投与を行なった。条片の収縮は、個々の条片の６０m
Ｍ ＫＣl に対する収縮応答で正規化して統計処理し
た。抑制作用の測定は、所定の濃度の化合物投与の約１
５分後に、１０^-9Ｍのエンドセリン−１を投与し、その
収縮のコントロールとの比較で行なった。その結果を表
１に示す。

【表１】 ──────────────────────────────── 実施例 サ ン プ ル ET-1に対する抑制作用 番 号 (Control-Sample)/Control×100 ──────────────────────────────── １ [D-Asp¹]-TAN-1462A ５８.１％ ２ [Asp²]-TAN-1462A ４５.２％ ６ [D-Asp¹,Asp²]-TAN-1477D ６３.８％ ──────────────────────────────── Control：１０^-9Ｍ ＥＴ−１による収縮 Sample ：サンプル３×１０^-5Ｍ存在下の１０^-9Ｍ ＥＴ
−１による収縮 本発明の新規環状ペンタペプチド〔Ｉ〕およびその塩の
一部のものは、ブタ冠動脈平滑筋において、エンドセリ
ンによる収縮を抑制する作用を示したが、このような例
は未だ報告されていない。したがって、本発明のペプチ
ド誘導体〔Ｉ〕またはその塩の一部のものは、哺乳動物
(例、マウス、ラット、ウサギ、犬、ネコ、ブタ、ヒト
等)の高血圧症、心筋梗塞あるいは急性腎不全等の治療
に用いることができる。

【００１６】(２)本発明環状ペンタペプチドの、エンド
セリンレセプターへの結合活性を測定した結果を比較例
と共に表２に示す。なおレセプターの結合活性測定法は
以下の通りである。レセプター結合アッセイ ブタの心臓より調製した膜画分をアッセイ用緩衝液を用
いて０.１５mg／mlに希釈し、これを１００μl ずつア
ッセイチューブに分注しアッセイに用いる。この膜画分
懸濁液に、５μＭの放射性ヨードで標識したエンドセリ
ン−１溶液を２μl 、さらに被検ペプチド溶液を３μl
加えて、１時間２５℃で保温した。この後、膜画分懸濁
液を氷冷したアッセイ用緩衝液９００μl で希釈した
後、１２,０００×ｇ、１０分間遠心して上清と沈さに
分離した。沈さには細胞膜とこれに埋め込まれたエンド
セリンレセプターが含まれ、レセプターに結合した放射
性ヨード標識エンドセリンも沈さに回収される。従っ
て、この沈さの放射性ヨードをガンマ線計測機により測
定することにより、エンドセリンレセプターに結合した
放射性ヨード標識エンドセリン量を定量した。

【表２】 ────────────────────────── 実施例 化 合 物 結合活性(*1) 番 号 比 活 性 ────────────────────────── TAN-1462A 1.00(＊2) １ [D-Asp¹]-TAN-1462A 26.6 ２ [Asp²]-TAN-1462A 2.70 ３ [D-tLeu³]-TAN-1462A 2.44 ４ [D-γMeLeu³]-TAN-1462A 1.54 ５ [D-Phg³]-TAN-1462A 1.27 ６ [D-Asp¹,Asp²]-TAN-1477D 22.8 ────────────────────────── ＊１ ブタ心筋膜画分 ＊２ ＩＣ₅₀＝１.１０×１０^-6Ｍ 本発明の化合物、例えば化合物 Cyclo(−Ｄ−Asp−Ala
−Ｄ−aIle−Leu−Ｄ−Trp−)は、マウスを用いた急性
毒性試験(ＬＤ₅₀)において、経口投与では２００mg／kg
以上、腹腔内投与では１００−２００mg／kgであった。
以上のように本発明の新規環状ペンタペプチド〔Ｉ〕ま
たはその塩はエンドセリンのアンタゴニストとしての性
質を有し、循環機能改善剤、血管拡張剤またはぜんそく
治療剤として用いることができる。

【００１７】

【作用・効果】本発明の新規な環状ペンタペプチドは、
エンドセリンアンタゴニストとしてエンドセリンの血管
収縮活性の抑制に顕著な効果を奏する。そのため本発明
の新規な環状ペンタペプチドもしくはその塩は、循環機
能改善剤または心筋梗塞・急性腎不全等の治療剤または
ぜんそく治療剤として用いることができる。本発明のペ
プチドを上記治療薬として用いる場合、そのままあるい
は薬理学的に許容される担体、賦形剤、希釈剤と混合
し、粉末、顆粒、錠剤、カプセル剤、注射剤、座剤、軟
膏剤、徐放型製剤などの剤型で経口的または非経口的に
安全に投与することができる。本発明の誘導体は主とし
て非経口的に投与(例、静脈あるいは皮下注射、脳室内
あるいは脊髄内投剤、経鼻投与、直腸投与)されるが、
場合によっては経口投与されることもある。

【００１８】本発明の誘導体は物質として安定であるた
め生理食塩水の溶液として保存できるが、マンニトー
ル、ソルビトールを添加して凍結乾燥アンプルとし、使
用時に溶解することもできる。本発明のペプチド誘導体
は、遊離体としてあるいはそのアルカリ付加塩または酸
付加塩として投与され得る。その投与量は、誘導体
〔Ｉ〕の遊離体、アルカリ付加塩、酸付加塩ともに、遊
離体の量として、一般に体重１kg当り１μg〜１００mg
の範囲の適量である。さらに詳述すれば、投与量は対象
疾患、症状、投与対象、投与方法などによっても異なる
が、たとえば成人の高血圧症患者に対して注射で投与す
る場合、通常薬効成分〔化合物(１)〕１回量として１μ
g／kg〜１００mg／kg 体重程度を１日１回〜３回程度投
与するのが好都合である。また、点滴でも効果があり、
点滴の場合の全投与量は注射の場合と同じである。この
ペプチドを治療剤として用いる場合には、注意深く精製
を行ない細菌や発熱物質が存在しないように注意しなけ
ればならない。

【００１９】

【実施例】以下に実施例を挙げて本発明をさらに具体的
に説明する。なお、実施例のグリシン以外のアミノ酸は
特記されているものを除いてすべてＬ体である。以下
〔表３〕に発酵生産物であるＴＡＮ−１４６２Ａ，Ｂ、
ＴＡＮ−１４７７Ｃ〜Ｋの化学構造を示す。構成アミノ
酸の命名順序は D-Glu を１位とする。

【表３】 ─────────────────────────── 1 2 3 4 5 ─────────────────────────── TAN-1462A Cyclo(-D-Glu-Ala-D-aIle-Leu-D-Trp-) TAN-1462B Cyclo(-D-Glu-Ala-D-Val- Leu-D-Trp-) TAN-1477C Cyclo(-D-Glu-Ala-D-aIle-Val-D-Trp-) TAN-1477D Cyclo(-D-Glu-Ala-D-Leu- Leu-D-Trp-) TAN-1477E Cyclo(-D-Glu-Ala-D-Leu- Val-D-Trp-) TAN-1477F Cyclo(-D-Glu-Ala-D-Val- Val-D-Trp-) TAN-1477G Cyclo(-D-Glu-Ala-D-Nva- Val-D-Trp-) TAN-1477H Cyclo(-D-Glu-Ala-D-Nva- Nva-D-Trp-) TAN-1477J Cyclo(-D-Glu-Ala-D-aIle-Nva-D-Trp-) TAN-1477K Cyclo(-D-Glu-Ala-D-aIle-Leu-D-mTrp-) ─────────────────────────── 実施例で用いた薄相クロマトグラフィーのプレートはメ
ルク社製品(SILICAGEL60F-254)を用い、展開溶媒として
は、Ｒf１：クロロホルム−メタノール(１９：１)、Ｒf
２：クロロホルム−メタノール−酢酸(９：１：０.５)
を用いた。

【００２０】実施例１ [D-Asp¹]-TAN-1462A の製造 (Ｉ) Boc-D-aIle-Leu-OBzl の製造 Boc-D-aIle-OH・CHA １６.５ｇにAcOEt，水と１Ｎ Ｈ₂Ｓ
Ｏ₄ ６０mlを加え震とうし、AcOEt層を水洗後Ｎa₂ＳＯ₄
で乾燥、濃縮し、残留物を得た。これとH-Leu-OBzl・pT
os ２１.６ｇをＤＭＦ １００mlに溶かして氷冷し、Ｔ
ＥＡ １１.６ml，ＨＯＢt ７.４ｇ，ＤＣＣ １１.４ｇ
を加えて一夜かき混ぜた。生成したＤＣＵ をろ別し、
ろ液を濃縮し、残留物をAcOEtに溶かしこれを４％ＮaＨ
ＣＯ₃水、１ ０％クエン酸水で洗浄し、水洗後、Ｎa₂Ｓ
Ｏ₄で乾燥、濃縮し、残留物にエーテ ルを加えて沈澱と
してろ取した。 収量 ２１.１ｇ(収率９７.１％) m.p. １０９−１１０℃ Ｒf２ ０.８２ [α]_D ²⁵ −１０.４゜(c＝０.９３，ＤＭＦ中) 元素分析 Ｃ₂₄Ｈ₃₈Ｎ₂Ｏ₅として 計算値：Ｃ, 66.33; Ｈ, 8.81; Ｎ, 6.45 実験値：Ｃ, 66.54; Ｈ, 9.03; Ｎ，6.49

【００２１】(II) Boc-D-aIle-Leu-OPac の製造 Boc-D-aIle-Leu-OBzl ２１.１gをメタノール５００ｍ
ｌに溶かし、１０％Pd−炭素を触媒として水素気流下接
触還元した。触媒をろ別した後濃縮し、残留物とＣs₂Ｃ
Ｏ₃ ７.９gを９０％ＭeＯＨ水に溶かし、濃縮し、残留
物をＤＭＦ ２００mlに溶かし、Phenacyl Bromide １
０.６ｇを加えて一夜かき混ぜた。生成したＴＥＡ塩酸
塩をろ別し、ろ液を濃縮し、残留物をAcOEtに溶かしこ
れを４％ＮaＨＣＯ₃水、１０％クエン酸水で洗浄し、水
洗後、Ｎa₂ＳＯ₄で乾燥、濃縮し、残留物にエーテルを
加えて沈澱としてろ取した。 収量 ２２.２ｇ(収率９８.７％) m.p. １１６−１１７℃ Ｒf２ ０.７９ [α]_D ²⁵ −１７.６゜(c＝０.９３，ＤＭＦ中) 元素分析 Ｃ₂₅Ｈ₃₈Ｎ₂Ｏ₆として 計算値：Ｃ, 64.91; Ｈ, 8.28; Ｎ, 6.06 実験値：Ｃ, 65.17; Ｈ, 8.68; Ｎ，6.13

【００２２】(III) Boc-Ala-D-aIle-Leu-OPac の製造 Boc-D-aIle-Leu-OPac ７.４０ｇにＴＦＡ ８０mlを加え
て溶かした後濃縮し、残留物をAcOEtに溶かし、４％Ｎa
ＨＣＯ₃水で洗浄し、Ｎa₂ＳＯ₄で乾燥、濃縮した。これ
をＤＭＦ ８０mlに溶かして氷冷し、ＴＥＡ ２.２mlを
加えた後Boc-Ala-ONB(Boc-Ala-OH ３.３３ｇ，ＨＯＮＢ
３.４８ｇ，ＤＣＣ ４.００ｇより調製)を加え一夜か
き混ぜた。これに(CH₃)₂N(CH₂)₃NH₂ ０.６６mlを加え３
０分間振り混ぜた後濃縮し、残留物をAcOEtに溶かし、
これを４％ＮaＨＣＯ₃水、１０％クエン酸水で洗浄し、
水洗後、Ｎa₂ＳＯ₄で乾燥、濃縮し、残留物にエーテル
を加えて沈澱としてろ取した。 収量 ７.８０ｇ(収率９１.４％) m.p. １５４−１５５℃ Ｒf２ ０.６９ [α]_D ²⁵ −３３.１゜(c＝１.０１，ＤＭＦ中) 元素分析 Ｃ₂₈Ｈ₄₃Ｎ₃Ｏ₇として 計算値：Ｃ, 63.01; Ｈ, 8.12; Ｎ, 7.87 実験値：Ｃ, 63.33; Ｈ, 8.24; Ｎ，7.69

【００２３】(IV) Boc-D-Asp(OBzl)-Ala-D-aIle-Leu-OP
ac の製造 Boc-Ala-D-aIle-Leu-OPac １.７１ｇにＴＦＡ ２０mlを
加えて溶かした後濃縮し、８Ｎ−ＨＣl／ジオキサン１.
０mlを加え、エーテルを加えて析出した結晶をろ取し、
乾燥した。これをＤＭＦ ２０mlに溶かして氷冷し、Ｔ
ＥＡ０.６７mlを加えた。これに、Boc-D-Asp(OBzl)-ONB
(Boc-D-Asp(OBzl)-OH １.１４ｇ，ＨＯＮＢ ０.６９
ｇ，ＤＣＣ ０.８０ｇより調製)を加え一夜かき混ぜた
後濃縮し、残留物に水を加えて沈澱としてろ取した。こ
れをＤＭＦに溶かし、不溶物をろ別した後濃縮し、残留
物にエーテルを加えて沈澱としてろ取した。 収量 ２.００ｇ(収率８４.６％) m.p. １５４−１５５℃ Ｒf２ ０.６８ [α]_D ²⁵ −２.１゜(c＝０.９４，ＤＭＦ中) 元素分析 Ｃ₃₉Ｈ₅₄Ｎ₄Ｏ₁₀として 計算値：Ｃ, 63.39; Ｈ, 7.37; Ｎ, 7.58 実験値：Ｃ, 63.51; Ｈ, 7.45; Ｎ，７．５２

【００２４】（Ｖ) Boc-D-Trp-D-Asp(OBzl)-Ala-D-aIle
-Leu-OPac の製造 Boc-D-Asp(OBzl)-Ala-D-aIle-Leu-OPac １.７０ｇにＴ
ＦＡ ２０mlを加えて溶かした後濃縮し、８Ｎ−ＨＣl／
ジオキサン０.７mlを加え、エーテルを加えて析出した
結晶をろ取し、乾燥した。これをＤＭＦ １５mlに溶か
して氷冷し、ＴＥＡ ０.４８mlを加えた。これに、Boc-
D-Trp-ONB(Boc-D-Trp-OH ０.８４ｇ，ＨＯＮＢ ０.５４
ｇ，ＤＣＣ ０.６３ｇより調製)を加え一夜かき混ぜた
後濃縮し、残留物に水を加えて沈澱としてろ取した。こ
れをＤＭＦに溶かし、不溶物をろ別した後濃縮し、残留
物にエーテルを加えて沈澱としてろ取した。 収量 １.７２ｇ(収率８０.８％) m.p. １８９−１９０℃ Ｒf２ ０.６６ [α]_D ²⁵ ３.９゜(c＝０.９０，ＤＭＦ中) 元素分析 Ｃ₅₀Ｈ₆₄Ｎ₆Ｏ₁₁として 計算値：Ｃ, 64.91; Ｈ, 6.97; Ｎ, 9.08 実験値：Ｃ, 64.84; Ｈ, 6.78; Ｎ，9.13

【００２５】(VI) Boc-D-Trp-D-Asp(OBzl)-Ala-D-aIle-
Leu-OH の製造 Boc-D-Trp-D-Asp(OBzl)-Ala-D-aIle-Leu-OPac １.４８
ｇをＡcＯＨ ４０mlに溶かし、Ｚn 粉末５.２３ｇを加
えて３時間かき混ぜた。Ｚn 粉末をろ別し、ろ液を濃縮
した。残留物にAcOEtを加えて溶かし、１０％クエン酸
で洗浄し、水洗した後Ｎa₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮し、残
留物にエーテルを加えて沈澱としてろ取した。 収量 １.１４ｇ(収率８８.３％) m.p. １２８−１３０℃ Ｒf２ ０.６４ [α]_D ²⁵ １１.６゜(c＝１.０２，ＤＭＦ中) 元素分析 Ｃ₄₂Ｈ₆₆Ｎ₆Ｏ₁₀として 計算値：Ｃ, 62.51; Ｈ, 7.24; Ｎ, 10.41 実験値：Ｃ, 62.68; Ｈ, 7.33; Ｎ，１０．２７

【００２６】（ＶＩＩ） Ｃｙｃｌｏ（−Ｄ−Ａｓｐ−
Ａｌａ−Ｄ−ａＩｌｅ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ｔｒｐ−）
（［Ｄ−Ａｓｐ^１］−ＴＡＮ−１４６２Ａ）の製造 Boc-D-Trp-D-Asp(OBzl)-Ala-D-aIle-Leu-OH ０.８１ｇ
をＤＣＭ ２０mlに溶かして氷冷し、ＨＯＮＢ ０.３６
ｇ，ＤＣＣ ０.４１ｇを加えて３時間かき混ぜた後、生
成したＤＣＵをろ別し、濃縮し、残留物にエーテルを加
えて沈澱としてろ取した。これに氷冷下、エタンジチオ
ール０.１７ml，８Ｎ−ＨＣl／ジオキサン２０mlを加え
て溶かした後１０分間かき混ぜて、濃縮し、残留物にエ
ーテルを加えて沈澱としてろ取し、乾燥した。これをＤ
ＭＦ ２０mlに溶かし、ＴＥＡ １.４mlを含むＤＭＦ ２
００ml中に、３０分かけて滴下した後、一夜かき混ぜて
濃縮した。残留物にアセトニトリルを加えて沈澱として
ろ取し、乾燥した。これのうち０.５０ｇをＤＭＦ ２０
mlに溶かし、Ｐd−炭素を触媒として、水素気流下接触
還元を行なった。触媒をろ別した後濃縮し、残留物を少
量のＡcＯＨに溶かした後、水を加えて、凍結乾燥し
た。さらに、これをワイエムシー社製ＹＭＣ−Ｄ−ＯＤ
Ｓ−５(２cm×２５cm)のカラムを用いる分取液体クロマ
トグラフィーで精製し、目的物を得た。 収量 １９．４ｍｇ（収率４．０％） アミノ酸分析値(１１０℃，２４時間加水分解；( )内
は理論値を示す。)：Asp 1.00(1)；Ala 0.99(1)；Leu
0.83(1) ＬＳＩＭＳ(Ｍ＋Ｈ⁺)＝５９９ (理論値)＝５９９

【００２７】実施例２ [Asp²]-TAN-1462A の製造 (Ｉ) Boc-Asp(OBzl)-D−aIle-Leu-OPac の製造 実施例１(II)で調製したBoc-D-aIle-Leu-OPac １.８５
ｇにＴＦＡ １５mlを加えて溶かした後濃縮し、残留物
をAcOEtに溶かし、４％ＮaＨＣＯ₃水で洗浄し、Ｎa₂Ｓ
Ｏ₄で乾燥、濃縮した。これをＤＭＦ １５mlに溶かして
氷冷し、Boc-Asp(OBzl)-ONB(Boc-Asp(OBzl)-OH １.４２
ｇ,ＨＯＮＢ ０.８７ｇ，ＤＣＣ １.００ｇより調製)を
加え一夜かき混ぜた。これに(CH₃)₂N(CH₂)₃NH₂ ０.１７
mlを加え３０分間振り混ぜた後濃縮し、残留物をAcOEt
に溶かし、これを４％ＮaＨＣＯ₃水、１０％クエン酸水
で洗浄し、水洗後、Ｎa₂ＳＯ₄で乾燥、濃縮し、残留物
にエーテルを加えて沈澱としてろ取した。 収量 ２．４２ｇ(収率９０.６％) m.p. １１６−１１７℃ Ｒf２ ０.７５ [α]_D ²⁵ −４０.１゜(c＝１.０２，ＤＭＦ中) 元素分析 Ｃ₃₆Ｈ₄₉Ｎ₃Ｏ₉として 計算値：Ｃ, 64.75; Ｈ, 7.40; Ｎ, 6.29 実験値：Ｃ, 64.86; Ｈ, 7.63; Ｎ，6.55

【００２８】(II) Boc-D-Glu(OBzl)-Asp(OBzl)-D-aIle-
Leu-OPac の製造 Boc-Asp(OBzl)-D-aIle-Leu-OPac ２.２７ｇにＴＦＡ ２
０mlを加えて溶かした後濃縮し、８Ｎ−ＨＣl／ジオキ
サン１.１mlを加え、エーテルを加えて析出した結晶を
ろ取し、乾燥した。これをＤＭＦ １５mlに溶かして氷
冷し、ＴＥＡ ０.６２mlを加えた。これに、Boc-D-Glu
(OBzl)-ONB(Boc-D-Glu(OBzl)-OH １.２６ｇ，ＨＯＮＢ
０.７４ｇ，ＤＣＣ ０.８５ｇより調製)を加え一夜かき
混ぜた後濃縮し、残留物に水を加えて沈澱としてろ取し
た。これをＤＭＦに溶かし、不溶物をろ別した後濃縮
し、残留物にエーテルを加えて沈澱としてろ取した。 収量 ２.７９ｇ(収率９２.５％) m.p. １５５−１５６℃ Ｒf２ ０.７１ [α]_D ²⁵ −２４.４゜(c＝１.０１，ＤＭＦ中) 元素分析 Ｃ₄₈Ｈ₆₂Ｎ₄Ｏ₁₂として 計算値：Ｃ, 64.99; Ｈ, 7.05; Ｎ, 6.32 実験値：Ｃ, 65.02; Ｈ, 7.14; Ｎ，6.42

【００２９】(III) Boc-D-Trp-D-Glu(OBzl)-Asp(OBzl)-
D-aIle-Leu-OPac の製造 Boc-D-Glu(OBzl)-Asp(OBzl)-D-aIle-Leu-OPac ２.４０
ｇにＴＦＡ ２０mlを加えて溶かした後濃縮し、エーテ
ルを加えて析出した結晶をろ取し、乾燥した。これをＤ
ＭＦ １５mlに溶かして氷冷し、ＴＦＡ ０.５７mlを加
えた。これに、Boc-D-Trp-ONB(Boc-D-Trp-OH ０.９０
ｇ，ＨＯＮＢ ０.５９ｇ，ＤＣＣ ０.６７ｇより調製)
を加え一夜かき混ぜた後濃縮し、残留物に水を加えて沈
澱としてろ取した。これをＤＭＦに溶かし、不溶物をろ
別した後濃縮し、残留物にエーテルを加えて沈澱として
ろ取した。 収量 ２．３５ｇ(収率８１.１％) m.p. １６４−１６５℃ Ｒf２ ０.６７ [α]_D ²⁵ −１８.８゜(c＝０.９９，ＤＭＦ中) 元素分析 Ｃ₅₉Ｈ₇₂Ｎ₆Ｏ₁₃として 計算値：Ｃ, 66.03; Ｈ, 6.76; Ｎ, 7.83 実験値：Ｃ, 65.90; Ｈ, 6.72; Ｎ，7.77

【００３０】(IV) Boc-D-Trp-D-Glu(OBzl)-Asp(OBzl)-D
-aIle-Leu-OH の製造 Boc-D-Trp-D-Glu(OBzl)-Asp(OBzl)-D-aIle-Leu-OPac
２.１５ｇをＡcＯＨ５０mlに溶かし、Ｚn 粉末６.５４
ｇを加えて３時間かき混ぜた。Ｚn 粉末をろ別し、ろ液
を濃縮した。残留物にAcOEtを加えて溶かし、１０％ク
エン酸で洗浄し、水 洗した後Ｎa₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮
し、残留物にエーテルを加えて沈澱としてろ 取した。 収量 １.７４ｇ(収率９１.１％) m.p. １７５−１７６℃ Ｒf２ ０.６２ [α]_D ²⁵ −１９.１゜(c＝１.１３，ＤＭＦ中) 元素分析 Ｃ₅₁Ｈ₆₆Ｎ₆Ｏ₁₂として 計算値：Ｃ, 64.13; Ｈ, 6.97; Ｎ, 8.80 実験値：Ｃ, 64.36; Ｈ, 7.09; Ｎ，8.89

【００３１】(Ｖ) Cyclo(-D-Glu-Asp-D-aIle-Leu-D-Trp
-) ([Asp²]-TAN-1462A)の製造 Boc-D-Trp-D-Glu(OBzl)-Asp(OBzl)-D-aIle-Leu-OH ０.
９５ｇをＤＣＭ ２０mlに溶かして氷冷し、ＨＯＮＢ
０.３６ｇ，ＤＣＣ ０.４１ｇを加えて３時間かき混ぜ
た後、生成したＤＣＵをろ別し、濃縮し、残留物にエー
テルを加えて沈澱としてろ取した。これに氷冷下、エタ
ンジチオール０.１７ml，８Ｎ−ＨＣl／ジオキサン２０
mlを加えて溶かした後１０分間かき混ぜて、濃縮し、残
留物にエーテルを加えて沈澱としてろ取し、乾燥した。
これをＤＭＦ ２０mlに溶かし、ＴＥA １.４mlを含むＤ
ＭＦ ２００ml中に、３０分かけて滴下した後、一夜か
き混ぜて濃縮した。残留物にアセトニトリルを加えて沈
澱としてろ取し、乾燥した。これのうち０.５０ｇをＤ
ＭＦ ２０mlに溶かし、Ｐd−炭素を触媒として、水素気
流下接触還元を行なった。触媒をろ別した後濃縮し、残
留物を少量のＡcＯＨに溶かした後、水を加えて、凍結
乾燥した。 収量 ３２８ｍｇ（収率 ６３.７％） アミノ酸分析値(１１０℃，２４時間加水分解；( )内
は理論値を示す。)：Asp 1.00(1)；Glu 1.06(1)；Leu
0.86(1) ＬＳＩＭＳ(Ｍ＋Ｈ⁺)＝６５７ (理論値)＝６５７

【００３２】実施例３ [D-tLeu³]-TAN-1462A の製造 (Ｉ) Boc-Ala-OPac の製造 Boc-Ala-OH ２８.４ｇとＣs₂ＣＯ₃ ２４.５ｇを９０％
ＭeＯＨ水に溶かし、濃縮し、残留物をＤＭＦ ４５０ml
に溶かし、Phenacyl Bromide ３２.９ｇを加えて一夜か
き混ぜた。生成するＴＥＡ塩酸塩をろ別し、ろ液を濃縮
し、残留物をAcOEtに溶かしこれを４％ＮaＨＣＯ₃水、
１０％クエン酸水で洗浄し、水洗後、Ｎa₂ＳＯ₄で乾
燥、濃縮し、残留物にエーテルを加えて沈澱としてろ取
した。 収量 ４２.４g(収率９１.９％) m.p. １２３℃ Ｒf１ ０.７２ Ｒf２ ０.７４ [α]_D ²⁸ −４６.１゜(c＝１.３６，ＤＭＦ中) 元素分析 Ｃ₁₆Ｈ₂₁ＮＯ₅として 計算値：Ｃ, 62.53; Ｈ, 6.89; Ｎ, 4.56 実験値：Ｃ, 62.94; Ｈ, 6.87; Ｎ，4.63

【００３３】(II) Boc-D-Glu(OBzl)-Ala-OPac の製造 Boc-D-Glu(OBzl)-OH ２.０２ｇをＴＨＦに溶かし、これ
をかき混ぜながら−１５℃に冷やした。Ｎ−メチルモル
ホリン０.６６mlを加え、次にＩＢＣＦ ０.８０mlを加
えた。２分後ＨＣl・H-Ala−OPac とＮ−メチルモルホ
リン０.６６mlのＤＭＦ溶液を加える(ＨＣl・H-Ala−OP
ac は Boc-Ala-OPac １.８４ｇにＴＦＡ20mlを加えて溶
かした後濃縮し、８Ｎ−ＨＣl／ジオキサン１.９５mlを
加え、エーテルを加えて析出する結晶をろ取し、乾燥す
ることにより得た)。−１５℃で３０分かき混ぜた後、
室温に戻す。３０分後、不溶物をろ別した後濃縮し、残
留物をAcOEtに溶かしこれを水、１０％クエン酸水、４
％ＮaＨＣＯ₃水で洗浄し、水洗後、Ｎa₂ＳＯ₄で乾燥、
濃縮し、AcOEt−石油エーテルから再結晶する。 収量 ２.６３ｇ(収率８３.２％) m.p. １２８℃ Ｒf１ ０.５４ Ｒf２ ０.６５ [α]_D ²⁸ −１３.０゜(c＝１.１９，ＤＭＦ中) 元素分析 Ｃ₂₈Ｈ₃₄Ｎ₂Ｏ₈として 計算値：Ｃ, 63.87; Ｈ, 6.51; Ｎ, 5.32 実験値：Ｃ, 63.88; Ｈ, 6.32; Ｎ，5.18

【００３４】(III) Boc-D-Trp-D-Glu(OBzl)-Ala-OPac
の製造 Boc-D-Glu(OBzl)-Ala-OPac １.０５ｇにＴＦＡ ２０ml
を加えて溶かした後濃縮し、８Ｎ−ＨＣl／ジオキサン
０.５８mlを加え、エーテルを加えて析出した結晶をろ
取し、乾燥した。これをＤＭＦ １５mlに溶かして氷冷
し、ＴＥＡ ０.２０mlを加えた。これに、Boc-D-Trp-ON
B(Boc-D-Trp-OH ０.６７ｇ、ＨＯＮＢ ０.４３ｇ、ＤＣ
Ｃ ０.５０ｇより調製)を加え一夜かき混ぜた。生成す
る不溶物をろ別した後濃縮し、残留物をAcOEtに溶しこ
れを水、１０％クエン酸水、４％ＮaＨＣＯ₃水で洗浄
し、水洗後、Ｎa₂ＳＯ₄で乾燥、濃縮し、残留物にエー
テルを加えて沈澱としてろ取した。 収量 １.３９ｇ(収率９７.８％) m.p. １２７−１２９℃ Ｒf１ ０.３６ Ｒf２
０.６２ [α]_D ²⁸ −４.０４゜(c＝１.０４，ＤＭＦ中) 元素分析 Ｃ₃₉Ｈ₄₄Ｎ₄Ｏ₉として 計算値：Ｃ, 65.72; Ｈ, 6.22; Ｎ, 7.86 実験値：Ｃ, 65.62; Ｈ, 6.46; Ｎ，7.78

【００３５】(IV) Boc-Leu-D-Trp-D-Glu(OBzl)-Ala-OPa
c の製造 Boc−D-Trp-D-Glu(OBzl)-Ala-OPac ２１.４ｇをジオキ
サンに懸濁させ、エタンジチオール５.１mlを加え氷冷
し、８Ｎ−ＨＣl／ジオキサンを加え、氷冷下１時間撹
拌した後濃縮し、エーテルを加えて析出する結晶をろ取
し、乾燥する。これをＤＭＦ １５０mlに溶かして氷冷
し、ＴＥＡ ８.４２mlを加える。これに、Boc-Leu-ONB
(Boc-Leu-OH・H₂O ８.２２ｇ、ＨＯＮＢ ６．５１ｇ、
ＤＣＣ ７.５０ｇより調製）を加え一夜かき混ぜた。生
成する不溶物をろ別した後濃縮し、残留物をAcOEtに溶
かしこれを水、１０％クエン酸水、４％ＮaＨＣＯ₃水で
洗浄し、水洗後、Ｎa₂ＳＯ₄で乾燥、濃縮し、残留物に
エーテルを加えて沈澱としてろ取 した。 収量 ２３.０ｇ(収率９２.８％) m.p. １２７−１２８℃ Ｒf１ ０.３５ Ｒf２
０.６３ [α]_D ²⁸ −９.９１゜(c＝１.１５，ＤＭＦ中) 元素分析 Ｃ₄₅Ｈ₅₅Ｎ₅Ｏ₁₀として 計算値：Ｃ, 65.44; Ｈ, 6.71; Ｎ, 8.48 実験値：Ｃ, 65.39; Ｈ, 6.92; Ｎ，8.30

【００３６】(Ｖ) Boc-D-tLeu-Leu-D-Trp-D-Glu(OBzl)-
Ala-OPac の製造 Boc-Leu-D-Trp-D-Glu(OBzl)-Ala-OPac ２.０７ｇをジオ
キサンに懸濁させ、エタンジチオール０.４２mlを加え
氷冷し、８Ｎ−ＨＣl／ジオキサンを加え、氷冷下３０
分撹拌した後濃縮し、エーテルを加えて析出する結晶を
ろ取し、乾燥した。これをＤＭＦ １５mlに溶かして氷
冷し、ＴＥＡ ０.７０mlを加えた。これに、Boc-D-tLeu
-OH ０.６４ｇ、ＨＯＮＢ ０.４１ｇ、ＤＣＣ ０.６３
ｇを加え一夜 かき混ぜた。生成する不溶物をろ別した
後濃縮し、残留物をAcOEtに溶かしこれ を水、１０％ク
エン酸水、４％ＮaＨＣＯ₃水で洗浄し、水洗後、Ｎa₂Ｓ
Ｏ₄で乾 燥、濃縮し、残留物にエーテルを加えて沈澱と
してろ取した。 収量 ２.１３ｇ(収率９２.１％) m.p. １６２−１６４℃ Ｒf１ ０.２７ Ｒf２
０.６４ [α]_D ²⁸ −４.７７゜(c＝０.７８，ＤＭＦ中) 元素分析 Ｃ₅₁Ｈ₆₆Ｎ₆Ｏ₁₁として 計算値：Ｃ, 65.23; Ｈ, 7.08; Ｎ, 8.95 実験値：Ｃ, 65.15; Ｈ, 7.31; Ｎ，9.18

【００３７】(VI) Boc-D-tLeu-Leu-D-Trp-D-Glu(OBzl)-
Ala-OH の製造 Boc-D-tLeu-Leu-D-Trp-D-Glu(OBzl)-Ala-OPac １.４１
ｇを９０％ＡcＯＨ水２０mlに溶かし、Ｚn 粉末４.９１
ｇを加えて３時間かき混ぜる。Ｚn 粉末をろ別し、ろ液
を濃縮する。残留物にAcOEtを加えて溶かし、１０％ク
エン酸で洗浄し、水洗した後Ｎa₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮
し、残留物にエーテルを加えて沈澱として ろ取した。 収量 １.０８ｇ(収率８７.７％) m.p. １４０−１４２℃ Ｒf１ ０.０４ Ｒf２
０.６１ [α]_D ²⁸ ＋９.０９゜(c＝０.９９，ＤＭＦ中) 元素分析 Ｃ₄₃Ｈ₆₀Ｎ₆Ｏ₁₀として 計算値：Ｃ, 62.91; Ｈ, 7.37; Ｎ, 10.24 実験値：Ｃ, 62.70; Ｈ, 7.64; Ｎ，10.24

【００３８】(VII) Cyclo(-D-Glu-Ala-D-tLeu-Leu-D-Al
a-) ([D-tLeu³]-TAN-1462A)の製造 Boc-D-tLeu-Leu-D-Trp-D-Glu(OBzl)-Ala-OH ０.４１ｇ
をＤＣＭ ２０mlに溶かして氷冷し、ＨＯＮＢ ０.１８
ｇ、ＤＣＣ ０.２１ｇを加えて３時間かき混ぜた後、生
成するＤＣＵをろ別し、濃縮し、残留物にエーテルを加
えて沈澱としてろ取した。これに氷冷下、エタンジチオ
ール０.０９ml、８Ｎ−ＨＣl／ジオキサン２０mlを加え
て溶かした後１０分間かき混ぜて濃縮し、残留物にエー
テルを加えて沈澱としてろ取し、乾燥した。これをＤＭ
Ｆ １０mlに溶かし、ＴＥＡ ０.７mlを含むＤＭＦ ９０
ml中に、３０分かけて滴下した後、一夜かき混ぜて濃縮
した。残留物にアセトニトリルを加えて沈澱としてろ取
し、乾燥した。これのうち５０mgをＤＭＦ １５mlに溶
かし、Ｐd−炭素を触媒として、水素気流下接触還元を
行なった。触媒をろ別した後濃縮し、残留物を少量のＡ
cＯＨに溶かした後、水を加えて凍結乾燥した。最後に
これをワイエムシー社製ＹＭＣ−Ｄ−ＯＤＳ−５（２cm
×２５cm)のカラムを用いる分取液体クロマトグラフィ
ーで精製し、目的物を得た。 収量 ９．３mg(収率６.８％) アミノ酸分析値(１１０℃，２４時間加水分解；( )内
は理論値を示す。)：Glu 1.00(1)；Ala 0.98(1)；Leu
0.79(1) ＬＳＩＭＳ(Ｍ＋Ｈ⁺)＝６１３ (理論値)＝６１３

【００３９】実施例４ [D-γMeLeu³]-TAN-1462A の製
造 (Ｉ) Boc-D-γMeLeu-Leu-D-Trp-D-Glu(OBzl)-Ala-OPac
の製造 実施例３(IV)で調製したBoc-Leu-D-Trp-D-Glu(OBzl)-Al
a-OPac ２.０７ｇをジオキサンに懸濁させ、エタンジチ
オール０.４２mlを加え氷冷し、８Ｎ−ＨＣl／ジオキサ
ンを加え、氷冷下３０分撹拌した後濃縮し、エーテルを
加えて析出した結晶をろ取し、乾燥した。これをＤＭＦ
１５mlに溶かして氷冷し、ＴＥＡ ０.７０mlを加え
た。これに、Boc-D-γMeLeu-OH ０.６８ｇ、ＨＯＮＢ
０.４１ｇ、ＤＣＣ ０.６３ｇを加え一夜かき混ぜた。
生成する不溶物をろ別した後濃縮し、残留物をAcOEtに
溶かしこれを水、１０％クエン酸水、４％ＮaＨＣＯ₃水
で洗浄し、水洗後、Ｎa₂ＳＯ₄で乾燥、濃縮し、残留物
にエーテルを加えて沈澱としてろ取した。 収量 ２.０９ｇ(収率８７.７％) m.p. １２１−１２４℃ Ｒf１ ０.２８ Ｒf２
０.６４ [α]_D ²⁸ ＋７.６６゜(c＝１.０１，ＤＭＦ中) 元素分析 Ｃ₅₂Ｈ₆₈Ｎ₆Ｏ₁₁として 計算値：Ｃ, 65.53; Ｈ, 7.19; Ｎ, 8.82 実験値：Ｃ, 65.53; Ｈ, 7.33; Ｎ，9.18

【００４０】(II) Boc-D-γMeLeu-Leu-D-Trp-D-Glu(OBz
l)-Ala-OH の製造 Boc-D-γMeLeu-Leu-D-Trp-D-Glu(OBzl)-Ala-OPac １.４
３ｇを９０％ＡcＯＨ水２０mlに溶かし、Ｚn 粉末４.９
１ｇを加えて３時間かき混ぜた。Ｚn 粉末をろ別し、ろ
液を濃縮した。残留物にAcOEtを加えて溶かし、１０％
クエン酸で洗浄し、水洗した後Ｎa₂ＳＯ₄で乾燥し、濃
縮し、残留物にエーテルを加えて沈澱としてろ取した。 収量 １．１３ｇ(収率９０.２％) m.p. １３５−１３６℃ Ｒf１ ０.０７ Ｒf２
０.６１ [α]_D ²⁸ ＋２２.１゜(c＝１.０７，ＤＭＦ中) 元素分析 Ｃ₄₄Ｈ₆₂Ｎ₆Ｏ₁₀として 計算値：Ｃ, 63.29; Ｈ, 7.48; Ｎ, 10.06 実験値：Ｃ, 63.29; Ｈ, 7.56; Ｎ， 9.96

【００４１】(III) Cyclo(-D-Glu-Ala-D-γMeLeu-Leu-D
-Ala-) ([D-γMeLeu³]-TAN-1462A)の製造 Boc-D-γMeLeu-Leu-D-Trp-D-Glu(OBzl)-Ala-OH ０.４２
ｇをＤＣＭ ２０mlに溶かして氷冷し、ＨＯＮＢ ０.１
８ｇ、ＤＣＣ ０.２１ｇを加えて３時間かき混ぜた後、
生成するＤＣＵをろ別し、濃縮し、残留物にエーテルを
加えて沈澱としてろ取した。これに氷冷下、エタンジチ
オール０.０９ml、８Ｎ−ＨＣl／ジオキサン２０mlを加
えて溶かした後１０分間かき混ぜて濃縮し、残留物にエ
ーテルを加えて沈澱としてろ取し、乾燥した。これをＤ
ＭＦ １０mlに溶かし、ＴＥＡ ０.７mlを含むＤＭＦ ９
０ml中に、３０分かけて滴下した後、一夜かき混ぜて濃
縮した。残留物にアセトニトリルを加えて沈澱としてろ
取し、乾燥した。これのうち５１mgをＤＭＦ １５mlに
溶かし、Ｐd−炭素を触媒として、水素気流下接触還元
を行なった。触媒をろ別した後濃縮し、残留物を少量の
ＡcＯＨに溶かした後、水を加えて凍結乾燥した。最後
にこれをワイエムシー社製ＹＭＣ−Ｄ−ＯＤＳ−５（２
cm×２５cm)のカラムを用いる分取液体クロマトグラフ
ィーで精製し、目 的物を得た。 収量 ２.４mg(収率２.９％) アミノ酸分析値(１１０℃，２４時間加水分解；( )内
は理論値を示す。)：Glu 1.00(1)；Ala 1.00(1)；Leu
1.01(1) ＬＳＩＭＳ(Ｍ＋Ｈ⁺)＝６２７ (理論値)＝６２７

【００４２】実施例５ [D-Phg³]-TAN-1462A の製造 (Ｉ) Boc-D-Phg-Leu-D-Trp-D-Glu(OBzl)-Ala-OPac の製
造 実施例３(IV)で調製したBoc-Leu-D-Trp-D-Glu(OBzl)-Al
a-OPac ２.０７ｇをジオキサンに懸濁させ、エタンジチ
オール０.４２mlを加え氷冷し、８.３Ｎ−ＨＣl／ジオ
キサンを加え、氷冷下３０分撹拌した後濃縮し、エーテ
ルを加えて析出した結晶をろ取し、乾燥した。これをＤ
ＭＦ １５mlに溶かして氷冷し、ＴＥＡ０.７０mlを加え
た。これに、Boc-D-Phg-OH ０.６９ｇ、ＨＯＮＢ ０.４
１ｇ、ＤＣＣ ０.６３ｇを加え一夜かき混ぜた。生成す
る不溶物をろ別した後濃縮し、残留物をAcOEtに溶かし
これを水、１０％クエン酸水、４％ＮaＨＣＯ₃水で洗浄
し、水洗後、Ｎa₂ＳＯ₄で乾燥、濃縮し、残留物にエー
テルを加えて沈澱としてろ取した。 収量 ２.１９ｇ(収率９１.３％) m.p. １５８−１５９℃ Ｒf１ ０.２８ Ｒf２
０.６４ [α]_D ²⁸ −１５.２゜(c＝０.９５，ＤＭＦ中) 元素分析 Ｃ₅₃Ｈ₆₂Ｎ₆Ｏ₁₁として 計算値：Ｃ, 66.37; Ｈ, 6.52; Ｎ, 8.76 実験値：Ｃ, 66.24; Ｈ, 6.64; Ｎ，8.95

【００４３】(II) Boc-D-Phg-Leu-D-Trp-D-Glu(OBzl)-A
la-OH の製造 Boc-D-Phg-Leu-D-Trp-D-Glu(OBzl)-Ala-OPac １.４４ｇ
を９０％ＡcＯＨ水２０mlに溶かし、Ｚn 粉末４.９１ｇ
を加えて３時間かき混ぜた。Ｚn 粉末をろ別し、ろ液を
濃縮した。残留物にAcOEtを加えて溶かし、１０％クエ
ン酸で洗浄し、水洗した後Ｎa₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮
し、残留物にエーテルを加えて沈澱として ろ取した。 収量 １.２４ｇ(収率９８.３％) m.p. １３８−１４０℃ Ｒf１ ０.０５ Ｒf２
０.６１ [α]_D ²⁸ −３.１２゜(c＝１.１９，ＤＭＦ中) 元素分析 Ｃ₄₅Ｈ₅₆Ｎ₆Ｏ₁₀として 計算値：Ｃ, 64.27; Ｈ, 6.71; Ｎ, 9.99 実験値：Ｃ, 64.18; Ｈ, 6.99; Ｎ，９．６６

【００４４】（ＩＩＩ） Ｃｙｃｌｏ（−Ｄ−Ｇｌｕ−
Ａｌａ−Ｄ−Ｐｈｇ−Ｌｅｕ−Ｄ−Ａｌａ−） （［Ｄ
−Ｐｈｇ^３］−ＴＡＮ−１４６２Ａ）の製造 Boc-D-Phg-Leu-D-Trp-D-Glu(OBzl)-Ala-OH ０.４２ｇを
ＤＣＭ ２０mlに溶かして氷冷し、ＨＯＮＢ ０.１８
ｇ、ＤＣＣ ０.２１ｇを加えて３時間かき混ぜた後、生
成するＤＣＵをろ別し、濃縮し、残留物にエーテルを加
えて沈澱としてろ取した。これに氷冷下、エタンジチオ
ール０.０９ml、８Ｎ−ＨＣl／ジオキサン２０mlを加え
て溶かした後１０分間かき混ぜて濃縮し、残留物にエー
テルを加えて沈澱としてろ取し、乾燥した。これをＤＭ
Ｆ １０mlに溶かし、ＴＥＡ ０.７mlを含むＤＭＦ ９０
ml中に、３０分かけて滴下した後、一夜かき混ぜて濃縮
した。残留物にアセトニトリルを加えて沈澱としてろ取
し、乾燥した。これのうち７２mgをＤＭＦ １５mlに溶
かし、Ｐd−炭素を触媒として、水素気流下接触還元を
行なった。触媒をろ別した後濃縮し、残留物を少量のＡ
cＯＨに溶かした後、水を加えて凍結乾燥した。最後に
これをワイエムシー社製ＹＭＣ−Ｄ−ＯＤＳ−５（２cm
×２５cm)のカラムを用いる分取液体クロマトグラフィ
ーで精製し、目的物を得た。 収量 ７.７mg(収率１４.２％) アミノ酸分析値(１１０℃，２４時間加水分解；( )内
は理論値を示す。)：Glu 1.00(1)；Ala 1.04(1)；Leu
0.98(1) ＬＳＩＭＳ(Ｍ＋Ｈ⁺)＝６３３ (理論値)＝６３３

【００４５】実施例６ [D-Asp¹,Asp²]-TAN-1477Dの製
造 （I）Boc-D-Leu-Leu-OBzlの製造 H-Leu-OBzl・pTos ２１.６ｇをＤＭＦ１００ｍｌに溶か
して氷冷し、ＴＥＡ７．７ｍｌ，Boc-D-Leu-ONB（Boc-D
-Leu-OH・H₂O 12.5g,ＨＯＮＢ9.86g, ＤＣＣ１ １.４gよ
り調製）を加え一夜かき混ぜた。生成したＤＣＵをろ別
し、 ろ液を濃縮し、残留物をAcOEtに溶かしこれを４％N
aHCO₃水、１０％クエン酸水で洗浄し、 水洗後、Na₂SO₄
で乾燥、濃縮し、残留物にエーテルを加えて沈澱として
濾取した。 収量 １９．８ｇ（収率 ９１．３％） m.ｐ. ９４−９５℃ Ｒｆ２０．７６ ［α］_D ²⁵＋３．６°（ｃ＝１．０６，ＤＭＦ中） 元素分析 Ｃ₂₄Ｈ₃₆Ｎ₂Ｏ₅として 計算値：Ｃ，６６．３３；Ｈ，８．８１；Ｎ，６．４５ 実験値：Ｃ，６６．３８；Ｈ，８．８７；Ｎ，６．５３

【００４６】（II）Boc-D-Leu-Leu-OPacの製造 Boc-D-Leu-Leu-OBzl ６.０ｇをメタノール２０ｍｌに溶
かし、１０％Ｐｄ−炭素を触媒として、水素気流下接触
還元を行なった。触媒をろ別した後濃縮し、残留物とＣ
ｓ₂ＣＯ₃２．１ｇを９０％ＭｅＯＨ水に溶かし、濃縮し
た。残留物をＤＭＦ６０ｍｌに溶かし、Phenacyl Bromi
de ２．８ｇを加えて一夜かき混ぜた。生成したＴＥＡ
塩酸塩をろ別し、ろ液を濃縮し、残留物をAcOEtに溶か
しこれを４％ＮａＨＣＯ₃水、１０％クエン酸水で洗浄
し、水洗後、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥、濃縮し、残留物にエー
テルを加えて沈澱として濾取した。 収量 ５．４８ｇ（収率 ８５．８％） ｍ．ｐ．９８−９９℃ Ｒｆ２０．６６ ［α］_D ²⁵−３．９°（ｃ＝１．０９，ＤＭＦ中） 元素分析 Ｃ₂₅Ｈ₃₈Ｎ₂Ｏ₆として 計算値：Ｃ，６４．９１；Ｈ，８．２８；Ｎ，６．０８ 実験値：Ｃ，６５．２１；Ｈ，８．５４；Ｎ，６．２４

【００４７】（III）Boc-Asp(OBzl)-D-Leu-Leu-OPacの
製造 Boc-D-Leu-Leu-OPac１．８５ｇにＴＦＡ１５ｍｌを加え
て溶かした後濃縮し、残留物をAcOEtに溶かし、４％Ｎ
ａＨＣＯ₃水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥、濃縮した。
これをＤＭＦ２０ｍｌに溶かして氷冷し、ＴＥＡ０．６
ｍｌを加えた後Boc-Asp（OBzl）-ONB（Boc-Asp（OBzl）
-OH １.４２ｇ，ＨＯＮＢ０.８７ｇ，ＤＣＣ １.００ｇ
より調製）を加え一夜かき混ぜた。これに（CH₃)₂N(C
H₂)₃NH₂ ０.１７ｍｌを加え３０分間振り混ぜた後濃縮
し、残留物をAcOEtに溶かし、これを４％ＮａＨＣＯ
₃水、１０％クエン酸水で洗浄し、水洗後、Ｎａ₂ＳＯ₄
で乾燥、濃縮し、残留物にエーテルを加えて沈澱として
濾取した。 収量 ２．４０ｇ（収率 ８９．９％） ｍ．ｐ．１２１−１２２℃ Ｒｆ２０．６３ ［α］_Ｄ ^２５−２２．８°（ｃ＝１．１７，ＤＭＦ中） 元素分析 Ｃ₃₆Ｈ₄₉Ｎ₃Ｏ₉として 計算値：Ｃ，６４．７４；Ｈ，７．４０；Ｎ，６．２９ 実験値：Ｃ，６４．８１；Ｈ，７．５８；Ｎ，６．１５

【００４８】（IV）Boc-D-Asp(OBzl)-Asp(OBzl)-D-Leu-
Leu-OPacの製造 Boc-Asp(OBzl)-D-Leu-Leu-OPac２．２０ｇにＴＦＡ２０
ｍｌを加えて溶かした後濃縮し、８Ｎ−ＨＣｌ／ジオキ
サン１．０ｍｌを加え、エーテルを加えて析出した結晶
を濾取し、乾燥した。これをＤＭＦ２０ｍｌに溶かして
氷冷し、ＴＥＡ０．９２ｍｌを加えた。これに、Boc-D-
Asp(OBzl)-ONB(Boc-D-Asp(OBzl)-OH１．１７ｇ，ＨＯＮ
Ｂ０．７１ｇ，ＤＣＣ０．８２ｇより調製)を加え一夜
かき混ぜた後濃縮し、残留物に水を加えて沈澱として濾
取した。これをＤＭＦに溶かし、不溶物をろ別した後濃
縮し、残留物にエーテルを加えて沈澱として濾取した。 収量 ２．５０ｇ（収率 ８７．０％） ｍ．ｐ．１１８−１１９° Ｒｆ２０．６３ ［α］_D ²⁵−１３．４°（ｃ＝１．１２，ＤＭＦ中） 元素分析 Ｃ₄₇Ｈ₆₈Ｎ₄Ｏ₁₂として 計算値：Ｃ，６４．６６；Ｈ，６．９３；Ｎ，６．４２ 実験値：Ｃ，６４．８４；Ｈ，７．０３；Ｎ，６．５５

【００４９】（V）Boc-D-Trp-D-Asp(OBzl)-Asp(OBzl)-D
-Leu-Leu-OPacの製造 Boc-D-Asp(OBzl)-Asp(OBzl)-D-Leu-Leu-OPac１．０５ｇ
にＴＦＡ１０ｍｌを加えて溶かした後濃縮し、８Ｎ−Ｈ
Ｃｌ／ジオキサン０．３６ｍｌを加え、エーテルを加え
て析出した結晶を濾取し乾燥した。これをＤＭＦ１０ｍ
ｌに溶かして氷冷し、ＴＥＡ０．３４ｍｌを加えた。こ
れにBoc-D-Trp-ONB（Boc-D-Trp-OH０．４０ｇ，ＨＯＮ
Ｂ０．２６ｇ，ＤＣＣ０．３０ｇより調製）を加え一夜
かき混ぜた後濃縮し、残留物に水を加えて沈澱として濾
取した。これをＤＭＦに溶かし、不溶物をろ別した後濃
縮し、残留物にエーテルを加えて沈澱として濾取した。 収量 ０．７９ｇ（収率 ６２．３％） ｍ．ｐ．１６３−１６４℃ Ｒｆ２０．５８ ［α］_D ²⁵−４．９°（ｃ＝０．７３，ＤＭＦ中） 元素分析 Ｃ₅₈Ｈ₇₀Ｎ₆Ｏ₁₃として 計算値：Ｃ，６５．７６；Ｈ，６．６６；Ｎ，７．９３ 実験値：Ｃ，６５．５９；Ｈ，６．７２；Ｎ，７．８１

【００５０】（VI）Boc-D-Trp-D-Asp(OBzl)-Asp(OBzl)-
D-Leu-Leu-OHの製造 Boc-D-Trp-Asp(OBzl)-Asp(OBzl)-D-Leu-Leu-OPac０．７
５ｇをAcOH２０ｍｌに溶かしＺｎ粉末２．３１ｇを加え
て３時間かき混ぜた。Ｚｎ粉末をろ別し、ろ液を濃縮し
た。残留物にAcOEtを加えて溶かし、 １０％クエン酸で
洗浄し、水洗した後Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮し、残留
物にエーテルを加えて沈澱として濾取した。 収量 ０．５９ｇ（収率 ８７．８％） ｍ．ｐ．９５−９６℃ Ｒｆ２０．５６ ［α］_D ²⁵＋０．１°（ｃ＝０．８５，ＤＭＦ中） 元素分析 Ｃ₅₀Ｈ₆₄Ｎ₆Ｏ₁₂として 計算値：Ｃ，６３．８１；Ｈ，６．８５；Ｎ，８．９３ 実験値：Ｃ，６４．０３；Ｈ，６．９９；Ｎ，８．８９

【００５１】（VII）cyclo(-D-Asp-Asp-D-Leu-Leu-D-Tr
p-)([D-Asp¹,Asp²]-TAN-1477D)の製造 Boc-D-Trp-D-Asp(OBzl)-Asp(OBzl)-D-Leu-Leu-OH ０．
４９ｇをＤＣＭ１０ｍｌに溶かして氷冷し、ＨＯＮＢ
Ｏ，１９ｇＤＣＣ ０．２１ｇを加えて３時間かき混ぜ
た後、生成したＤＣＵをろ別し、濃縮し、残留物にエー
テルを加えて沈澱として濾取した。これに氷冷下、エタ
ンジチオール０．１０ｍｌ，８Ｎ−ＨＣｌ／ジオキサン
２０ｍｌを加えて溶かした後１０分間かき混ぜて、濃縮
し、残留物にエーテルを加えて沈澱として濾取し、乾燥
した。これをＤＭＦ １０ｍｌに溶かし、ＴＥＡ０．７
２ｍｌを含むＤＭＦ １００ｍｌ中に、３０分かけて滴
下した後、一夜かき混ぜて濃縮した。残留物にアセトニ
トリルを加えて沈澱として濾取し、乾燥した。これのう
ち０．２０ｇをＤＭＦ２０ｍｌに溶かし、Ｐｄ−炭素を
触媒として、水素気流下接触還元を行なった。触媒をろ
別した後濃縮し、残留物を少量のＡｃＯＨに溶かした
後、水を加えて凍結乾燥した。 収量 １４９ｍｇ（収率６１．６％） アミノ酸分析値(１１０℃，２４時間加水分解；（）内
は理論値を示す。)：Asp2.00(2);Leu1.92(2) ＬＳＩＭＳ（Ｍ＋Ｈ⁺）＝６４３ （理論値）＝６４３

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁵ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ０７Ｋ 1/02 // Ｃ０７Ｋ 99:00

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】一般式 Cyclo （−Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ−Ｅ−） ［式中、ＡはD−酸性−α−アミノ酸残基を、Ｂおよび
   ＤはL−α−アミノ酸残基を、ＣはD−中性−α−アミノ
   酸残基を、Ｅは芳香環基を有するD−α−アミノ酸残基
   を示す。ただし、Ａが D-Glu でＢが L-Ala でＣが D-a
   Ile でＤが L-Leu,L-Val または L-Nva であるか、Ａが
   D-Glu でＢが L-Ala でＣが D-Val または D-Leu でＤ
   が L-Leu または L-Val であるか、Ａが D-Glu でＢが
   L-Ala でＣが D-Nva でＤが L-Val または L-Nva であ
   るとき、Ｅは D-Trp でなく、ＡがD-Glu でＢが L-Ala
   でＣが D-aIle でＤが L-Leu であるとき、Ｅは D-mTrp
   でない。］で表される環状ペンタペプチドまたはその薬
   理学的に許容される塩。
2. 【請求項２】一般式 Ｈ−(Ｘ)−ＯＨ ［式中、Ｘは−Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ−Ｅ−，−Ｂ−Ｃ−Ｄ−
   Ｅ−Ａ−，−Ｃ−Ｄ−Ｅ−Ａ−Ｂ−，−Ｄ−Ｅ−Ａ−Ｂ
   −Ｃ−または−Ｅ−Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｄ−を示し、Ａ，Ｂ，
   Ｃ，ＤおよびＥは請求項１の記載と同意義を有する。］
   で表されるペプチドまたは該ペプチドの反応性誘導体を
   環化剤で処理し、 必要に応じて保護基の脱離反応に付す
   ことを特徴とする請求項１記載の環状ペンタペプチドま
   たはその薬理学的に許容される塩の製造法。
3. 【請求項３】請求項１記載の環状ペンタペプチドまたは
   その薬理学的に許容される塩を含有してなるエンドセリ
   ン受容体拮抗剤。