JPH05507721A - 酸性多環式エーテル抗生物質 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 酸性多環式エーテル抗生物質 発明の貨景 本発明は、式 を有し、記載のように相対的立体化学を有する新規の酸性多環式エーテル抗生物 質；薬学的に許容しうるその陽イ万ン塩；家禽、ウシまたはブタ用の該抗生物質 を含む栄養飼料組成物；家禽における抗コクシジア薬として、ブタの赤痢の治療 若しくは予防において、またはウシ若しくはブタの成長促進剤としてのその使用 ：その製法に関する発酵法：および該発酵法において該抗生物質を産生ずる微生 物であるアクチノマデユラ（Ａｃｔ　ｉｎｏｍａｄｕｒａ）種に関する。

化合物（１）は、酸性多環式エーテル群の抗生物質の新規のメンバーである。

この系列としては、モネンシン（ｍｏｎｅｎｓｉｎ）（メル・ｌクインデックス （Ｔｈｅ　Ｍｅｒｃｋ　Ｉｎｄｅｘ）、第１１版、メルツク・アンド・カフｉ＜ ニー・インニーボレーテンド（Ｍｅｒｃｋ　ａｎａ　Ｃｏ、、Ｉｎｃ、）、ロー ウェイ、Ｎ、Ｊ、、１９８９．モノグラフ番号６１５７）、ニゲリシン（ｎ　ｉ 　ｇｅ　ｒ　ｉ　ｃ　ｉ　ｎ）　（上記引用文中、モノグラフ番号６４５７）、 ナラジン（ｎａｒａｓｉｎ）（上記引用文中、モノグラフ番号６３３９）　、ラ サロシド（ｌａｓａｌｏｃｉｄ）Ａ（上記引用文中、モノグラフ番号５２４３） およびサリノマイシン（ｓａｌｉｎｏｍｙｃｉｎｌ　（上記引用文中、モノグラ フ番号８３０５）がある、論趙はウェスドリー（ｗｅｓｔ＋ｅｙ＞、「ポリエー テル抗生物質　（Ｐｏｌｙｅｔｈｅｒ　Ａｎｔｆｂｉｏｔｆｃｓ）；、Ａｄｖ、 、イＮ、−１＝−一」Ｅ≧−０，ｊ−一、−−−Ｍｉｃｒｏｂｉｏ１．．２２巻 、１７７〜２２３頁（１９７７）で論及された。

これらの化合物は、概して、コクシジウム抑制薬として、ｐＪ料添加成長促進剤 としておよび／′またはブタの赤痢に対して有用な薬剤として知られている。

犯盟Ω櫃！ アクチノマデユラ種ＡＴＣＣ５５０８０の培養は、水性培地中の好気性条件下で 発酵した場合、前記に定義の式（１）を有する化合物である新規の酸性多環式１ −チル抗生物質を生産する。

本発明は、薬学的に許容しうる陽イオン塩を含む式（Ｉ）を有する前記の化合物 、並びに同化しつる炭素源および窒素源を含む水性栄養培地において回収しうる 量の式（Ｉ）を有する前記の化合物か生成されるまで、好ましくは深部好気性条 件下での前記のアクチノマデユラ種ＡＴＣＣ５５０８０の発酵を含むその製造方 法に関する。抗コクシジア薬として、ブタの赤痢の予防若しくは治療において、 および／または成長促進剤としての使用に対して、化合物（Ｉ）は発＃物から分 離し且つ冥質的に純粋の状態で単離することができる。しかしながら、それは、 例えば、薗糸体と混合した沈殿状態（発酵培地の濾過によって回収される）かま たは発酵培地全部を唄霧若しくは凍結乾燥することによって得られた固体での粗 製状態で代わりに用いられる。

前記の薬学的に許容しつる陽イオン塩としては、制限されないが、ナトリウム、 カリウム、カルシウム、アンモニア、Ｎ、Ｎ′−ジベンジルエチレンジアミン、 Ｎ−メチルグルカミン（メグルミン）およびジェタノールアミンの塩がある。好 ましい陽イオン塩はカリウムおよびナトリウムの塩である。

本発明は、更に、栄養飼料組成物に関し、その一つは式（Ｉ）を有する化合物を ウシまたはブタの成長を促進しおよび／または飼料利用を改良するか或いはブタ において赤＠ご予防しまたは治療するのに有効な量で含むウシまたはブタ用；そ してもう一つは式（Ｉ）を有する化合物を家禽におけるコクシジア感染を制御す るのに有効な量で含む家禽用である。

更に、本発明は、ブタまたはウシに対して式（１）を有する化合物の成長促進性 または飼料利用効率促進性量を、特に栄養飼料組成物の形で投与することを含む 、ブタまたはウシにおいて成長を促進しおよび／または調料利用効率を増大させ る方法：ブタに対して式（Ｉ）を有する化合物をブタの赤痢を予防しまたは治療 する場合の育生量で投与することを含む、ブタの赤痢を予防または治療する方法 ：並びに家禽に対して抗コクシジア有効量の式（Ｉ）を宥する化合物を、特に栄 養飼料組成物の形で投与することを含む、家禽においてコクシジア感染を制御す る方法に関する。

ｆｉ後に、本発明は、アクチノマデユラ種ＡＴＣＣう５０８０の生物学的に純粋 な培ｇ！物であって、同化しうる炭素源および窒素源を含む水性栄養培地中での 発酵によって回収しつる量の式（Ｉ）を有する化合物を生産することができる、 凍結乾燥状態の培養物を含む上記の培養物に関する。

菖咀Ｃ註岨皇説明 式（Ｉ＞を有する本多環式エーテル抗生物質を生産することができる培養物をア クチノマデユラ種と称し、そしてブタペスト条約に基づきアメリカン・タイプ・ カルチャー・コレクション（Ｔｈｅ　Ａｍｅｒｉｃａｎ　ＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒ ｅ　Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏｎ）、Ｏンクビル、メリーランド州において寄託番号Ａ ＴＣＣ５５０８０の基準培養菌株として寄託しな、アメリカン・タイプ・カルチ ャー・コレクション、ロックビル、メリーランド州でのこの培養物の寄託の永続 性およびそれに対する一般による容易な入手可能性は特許の育生期間中を通して 与えらｎる。

この新規の培養物は、日本の岐阜県大野において採取された土壌試料に由来した ものであり：そしてファイザー・インコーボレツテツド（ＰｆｉｚｅｒＴｎｃ、 ）の培養採ｉ物中においてＮ８５４−２４およびＦ、Ｄ、２８８００として同定 された。その説明および分類は、Ｌ、Ｈ，ワン（Ｈｕａｎｇｌ博士によって提供 された。この培ｆｆ物は、放線菌（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ＞の典型的な細 長い菌糸、気中菌糸体および非断片の基質菌糸体を生じることが分かった。

全細胞分析の結果は、更に、それがアクチノマデユラ属に属することを示す。

ＡＴＣＣ１７２培地上での微生物の斜面培養物をＡＴＣＣ１７２ブイヨン中に接 種し且つ振どう機上において２８℃で４日間増殖させた０次に、それを２０分間 遠心分離し、滅菌蒸留水で３回洗浄し、そして放線菌目（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅ ｔａｌｅｓ）のメンバーの同定用に一般的に用いられる培地上で平板培簑した。

培養物を２８°Ｃでインキュベートし、そしてその結果を種々の時間で読み取る が、最も一般的には１４日目である０色は一般的な専門用語で記載されたが、正 確な色はＴｈｅ　Ｃｏ１ｏｒ　Ｈａｒｍｍｏｎｙ　Ｍａｎｕａｌ、第１４版によ る色標との比較によって決定された。全細胞アミノ酸および糖分析の方法は、そ れぞれバヅカー（Ｂａｃｋｅｒ）ら、Ａ　ｐｌ、Ｍｉｃｒｏｂｊｏｌ、、１２巻 。

４２１〜４２３頁（１９６４）および、レチェヴアリア（Ｌｅｃｈｅｖａｌ　１ ｅｒ）、Ｊ、Ｌａｂ、ＣＩ　ｉｎ、Ｍｅｄ、、７１巻、９３４〜９４４頁（１９ ６８）に記載されたものである。

培養物は下記のように同定された。

酵母　出物〜　芽　出物寒天（ＩＳＰ＃２培地、ディフコ（Ｄｉｒｃｏ））−増 殖良好：白色、クリーム色、淡灰色、褐色〜暗褐色（２ｃａ、３ｎｅ、３１）ｇ 、３ρｉ）；***、しわ状、密集または孤立したコロニーとして見える：気中菌 糸体白色〜淡灰色（近灰色列３ｅｂ）裏面帯黄色、帯黄褐色、褐色〜暗褐色（２ ｉａ、３ｎｃ、３％ｇ、３ｐｊ）；可溶性色素なし。

オートミール寒天Ｎ５Ｐ−ｔ３培地、ディフコ）−増殖中程度、帯緑黄色（１１ ／２　１ｃ、１　１／２　ｎｅ）；ｆｆｉかに***、平滑、気中菌糸体なし；裏 面帯黄緑色〜帯緑黄色（１１ｃ、１　１ｙ’２　Ｉｃｅ；可溶性色素クリーム無 色〜クリーム色（２ｃａ）：薄い、平滑、気中菌糸体なし；裏面は表面と同一： 可溶性色素なし。

グリセロール−アスパラギン寒天（Ｉ　Ｓ　Ｐ　＃　５培地、ディフコ）−増殖 不十分〜中程度：クリーム色〜淡樗−桃色（２ｃａ、４ｃａ）；僅かに***、平 滑、密集または孤立しなコロニーとして見える：気中菌糸体なし：Ｉｌｋ面は表 面と同一：可溶性色素なし。

ツザベクースクロース寒　（ワクスマン（Ｗａｋｓｍａｎ）、ｒ放線菌（ＴＨｅ 　Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ）」、２巻、培地：：１．３２８頁、１９６１） −増殖不十分〜中程度：クリーム色（２ｃａ）；薄い、平滑、密集または孤立し たコロニーとして見える：気中菌糸体なし：裏面クリーム色（２ｃａ）；可溶性 色素なし。

グルコース−アスパラギン寒天（同書中、培地＃２）−増殖中程度：淡緑色、帯 黄緑色〜緑色（ｌｃａ、１　１／２ｎｅ、１　１／２ｐｅ、ｌ１ｃ）；僅かに隆 起、平滑、密集１まなは孤立したコロニーとして見える；気中菌糸体なし：裏面 帯緑黄色〜淡緑色（１ｃａ、１　１ｃ、１　１／２ｎｅ）；可溶性色素なし。

５）−増殖不十分〜中程度：褐色〜暗褐色（３１ｅ、３　１ｇ、３ｎｉ）；僅か に〜中程度の***、平滑〜粒状、数点の淡灰色気中菌糸体（３ｄｃ）を有する孤 立したコロニーとして見える；裏面帯黄褐色〜暗褐色（３ｎｅ、３ｎｉ、３ｅ１ ）：可溶性色素帯黄色（２ｉｃ）。

リンゴ酸カルシウム寒天（ワクスマン、Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、Ｒｅｖ、、２１゜ １〜２９．１９５７）−増殖僅か；無色〜クリーム色（２ｃａ）；薄い、平滑、 孤立したコロニーとして見える：気中菌糸体なし：裏面無色、クリーム色〜帯黄 色（２ｃａ、２ｇａ）；可溶性色素なし。

カゼイン寒天（ゴートンおよびスミス、同書中）−増殖中程度〜良好：暗帯黄色 （２ｉｃ）；中程度の***、しわ状、気中菌糸体なし：裏面は表面と同一：可溶 性色素帯黄色＜２　１ｃ）。

３０．３３１頁）−増殖良好：白色、クリーム色、帯黄色、帯黄褐色、褐色〜暗 褐色（２ｃａ、２ｉｃ、３　１ｃ、３　Ｉｅ、３ｎｉ）；***、しわ状；気中菌 糸体白色；裏面帯黄色、帯黄褐色、褐色〜暗褐色（２ｇａ、３ｎｅ、３％ｇ、３ ｎｉ）；可溶性色素製帯黄色（２ｇａ＞。

エマーゾン（Ｅｍｅｒｓｏｎ′ｓ）寒天（同書中、４２８．３３１頁）−増殖中 程度〜良好：白色、クリーム色、灰色〜暗灰色（２ｃａ、２ｅａ、近２ｆｅ、２ ｉｈ、２ｍ１）：高度に***、しわ状、孤立したコロニーとして見える：気中菌 糸体白色〜灰色（近２ｆｅ）：裏面帯黄色、灰色−暗灰色（２ｇａ、近２ｆｅ、 ２ｉｈ、２ｍ１）＋可溶性色素なし。

栄養寒天（同書中、３１４，３３０頁）−増殖中程度：白色：僅かに***、平滑 、気中菌糸体白色；裏面クリーム色（２ｃａ）；可溶性色素なし。

ゼラチン寒天（ゴートンおよびミーム（ＭｉｈｍＬ　Ｊ、Ｂａｃｔｒｉｏｌ、。

７３．１’＋〜２７，１９５７）−増殖不十分〜中程度：褐色〜暗褐色（３１ｅ 、３ｎｉ、３ｐｎ）：中程度の***〜陳起：平滑〜しわ状、孤立したコロニーと して見える、白色気中菌糸体がまばらに有る：裏面褐色〜暗褐色（３ｎｅ、３％ ｇ、３ρ１）：可溶性色素帯黄色（２ｉｃ）。

デンプン実大（同書中）−増殖中程度：８色〜暗褐色＜３％ｇ、３ｐｌ）＋ｆｆ ｉかに〜中程度の***、気中菌糸体の淡灰色点（近３ｃｂ）を有する平滑〜粒状 ：裏面褐色〜暗褐色（３１ｇ、３ｐｌ）；可溶性色素帯黄色（２１ｃ）。

ボテトキャロ・・ｌト寒天（ジャガイモ３０ｇ、ニンジン２．５ｇおよび寒天２ ０ｇだけを用いること以外は、レチェヴアリア（Ｌｅｃｈｅｖａｌ　１ｅｒ）、 Ｌａｂ、ＣＩ　ｉ　ｎ、Ｍｅｄ、、７１．９３４〜９４４．１９６８）−増殖不 十分〜中程度；帯黄緑色−帯緑黄色（１１／２ｃａ、１　１／２　１ｅ、１　１ ／２ｎｇ）；（！かに***、平滑〜粒状、孤立したコロニーとして見える：白色 気中菌糸体かまばらに有る；裏面は表面と同一；可溶性色素なし。

水濃水塵因（２％）−増殖不十分：無色〜クリーム色（２ｃａ）；薄い、平滑、 密集または孤立したコロニーとして見える：気中菌糸体なし：裏面無色〜クリー ム色＜２ｃａ）：可溶性色素なし。

ガーゼ（Ｇａｕｚｅ）の無機培　１（カーゼら、拮抗性放線菌の分類における間 ！（Ｐｒｏｂｌｅｍ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｃ１ａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆＡｎ ｔａｇｏｎｉｓｔｉｃ　Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ、英語版、１９５７゜１３ 頁）−増殖中程度、若干の帯灰黄色点（１１／２　１ｅ）を有する帯黄緑色Ｎｔ ｃ）、薄い、平滑〜粒状：気中菌糸体なし〜まばら、コロニー外観に影響なし； 裏面帯黄緑色（ｔｉｃ）；可溶性色素クリーム色（１１／２　ｃａ）。

塁二竺０互＾撞捜ｌ（同書中）−増殖中程度〜良好；暗緑色、帯黄緑色〜淡桃色 ＜ｌｆｃ、１　１ｇ、ｌｎｉ、４ｅａ、４ｇａ）−中程度の***：平滑、しわ状 〜粒状：気中菌糸体なし〜まばら、コロニー外観に影響なし：裏面は表面と同一 ：可溶性色素帯黄色（１１／２ｉｃ）。

形聾Ｅｆｌｆｆｉ牲ヌー形態学的性質は、酵母抽出物−麦芽抽出物寒天上でのイ ンキュベーションの１６日後に観察された：気中菌糸体白色、増殖性菌糸体帯黄 褐色〜褐色；菌糸分校状、直径０．４〜１．０μｍ−この培地および他の培地上 でのインキュベーションの６週間後でも胞子は生産されなかった。

忠化主烈ユ買−メラニン非生産：硫化水素非生産；ゼラチン液化；エスクリン、 馬尿酸塩およびデンプン非加水分解：硝酸デキストロース以外の有機硝酸塩を亜 硝酸塩に還元ニジエンセン（Ｊｅｎｓｅｎ′ｓ）セルロースブイヨンかま・たは レヴイ７（Ｌｅｖｉｎ）およびシエーンライン（Ｓｃｈｏｅｎｌｅｉｎ′ｓ）セ ルロースブイヨン上で増殖なしおよび分解なし；乳のペプトン化および凝固；カ ゼイン消化陽性：アデニン、ヒボキサンチン、キサンチン、尿素、チロシンおよ びリンゴ酸カルシウム消化陰性；リゾチーム耐性陽性。

炭水化物利用性ニゲルコースおよびラムノース利用：デンプンおよびトレハロー ス利用は不確実：アラビノース、フルクトース、イノシトール、マンニトール、 ラフィノース、スクロース、キシロース、アドニトール、セロビオース、ズルシ トール、エリトリトール、ガラクトース、グリセロール、ラクトース、マルトー ス、マンノース、メレチトース、メリビオース、α−メチル−〇−グルコシド、 リポース、サリシン、ソルビトールおよびソルボース非利用。

有ｌ！酸利用性：酢酸塩、乳酸塩、１０ピオン酸塩およびピルビン酸塩利用：安 息香酸塩、クエン酸塩、デキストリン、リンゴ酸塩、ムチン酸塩、シュウ酸塩、 フェノールおよびコハク酸塩非利用。

炭水化物からの酸生産ニゲルコース、アラビノース、フルクトース、イノシトー ル、マンニトール、ラフィノース、ラムノース、スクロース、キシロース、アド ニトール、セロビオース、ズルシトール、エリトリトール、ガラクトース、グリ セロール、ラクトース、マルトース、メレチトース、メソビオース、α−メチル −Ｄ−グルコシド、リボース、サリシン、ソルビトール、ソルボースおよびトレ ハロースから酸生産；マンノースおよびデンプンがら酸非生産。

温医閲辿− ２１℃　２８°Ｃ１ヱ”Ｃ４５℃ 増殖不十分〜中程度　増殖良好　増殖良好　増殖なし担胞里汁近−全細胞加水分 解物はメソ−ジアミノピメリン酸、ガラクトース、グルコース、マデュロース（ ｍａｄｕｒｏｓｅ）およびリボースを含んだ。

本培養物は、白色、淡灰色〜灰色気中菌糸体：黄緑色〜緑黄色基質菌糸体：およ び遅い増殖の結果としての孤立したコロニーを特徴とする。胞子および胞子鎖は 、６週間の長期間のインキュベーション後でも、異なる培地では！！察されなか った。以下の生化学試験は陽性であった：ゼラチン液化：有機硝酸塩の亜硝酸塩 への還元：カゼインの分解、乳の凝固およびペプトン化：リゾチーム耐性ニゲル コース、ラムノース、＃酸塩、乳酸塩、グロビオン酸塩およびピルビン酸塩の利 用性、全細胞加水分解物は、メソ−ジアミノピメリン酸およびマデュロースを含 んだ、したがって、この培貢物はアクチノマデユラ属に属する。

本培養物は、気中菌糸体の色および大部分の生化学的性質がアクチノマデユラ・ マフラ（Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ　ｍａｃｒａ）（ワン（Ｈｕｎｇ）、Ｌ。

Ｈ，、Ｉｎｔ、Ｊ、Ｓ　ｓｔ、Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、３０：　５６５〜５６８． １９８０））に似ている。しかしなから、オートミール寒天およびガーゼ培地＃ １上において、それぞれ前者の基質菌糸体は黄緑色であるが、後者のそれはクリ ーム−薄桃色およびオフホワイト−淡灰色である。更に、Ａ　マフラ（ｍａｃｒ ａ）は硫化水素を生産し、チロシンを分解するがカゼインは分解せず−そしてス クロースを利用するがラムノースを利用しない。

本培養物と比較して、アクチノマデユラ・プルヴエラシア（ｐｕ　Ｉｖｅｒａｃ ｅａ）（イワミ（Ｉｗａｍｔ）、Ｍ、ら、Ｊ。

Ａｎｔｉｂｉｏｔ、３８：８３”＋〜８３９，１９８５）は、スクロースおよび キシロース利用か陽性およびデンプンの加水分解が陽性であることが興なる。Ａ 。

プルヴエラシアの気中菌糸体は、白色〜淡灰色〜灰色よりもむしろ灰色〜青色で ある。グルコース−アスパラギン寒天上において、Ａ、プルヴエラシアの基質菌 糸体は桃色であるが、本培養物のそれは緑黄色〜淡緑色である。

本培！Ｒ物は、大部分の生物学的性質においてアクチノマデユラ・アトラメンタ リア（ａｔｒａｍｅｎｔａｒｉａ）（ミャドー（Ｍｉ　ｙａｄｏｈ）、Ｓ、　ら 、Ｉｎｔ、Ｊ、５ｖｓｔ、Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、３７：３４２〜３４６．１９８ ７）と関係かあるが、メラニンの生産、セラチンの液化陰性およびラムノース利 用陰性において異なる。

前記に示したデータを基準として、本培養物Ｎ８５４−２４をアクチノマデユラ 属の新規の菌株であるとみなし且つアクチノマデユラ種と称する。それをアメリ カン・タイプ・カルチャー・コレクションに寄託番号ＡＴＣＣ５５０８０として 寄託した。

本発明の抗生物質化合物（Ｉ）は、本アクチノマデユラ種により、炭水化物源、 例えば、糖、デンプン、グリセロール；有機窒素物質、例えば、大豆ミール、カ ザミノ酸、＃母抽出物：成長物質、例えば、穀物可溶性物、魚ミール、綿実ミー ル：鉄、コバルト、銅、亜鉛等のような微量元素を含む無機塩類：並びにＭｉｌ ｌ剤としての炭酸カルシウムまたはリン酸カルシウムからなる培地上において深 部条件下で撹拌および通気しながら約り４℃〜約３６℃で増殖させることによっ て容易に生産される。増殖が完了した後に、抗生物質は、全ブイヨンを有ｌｌ溶 媒、例えば、ｎ−ブタノール、メチルイソブチルゲトン若しくはクロロホルムを 用いて４．０〜８，０のｐＨ範囲で抽出することによって；沈殿した抗生物質を 含んでいる菌糸体を濾去し、その濾液を捨てることによって：または全ブイヨン を単純に１１！ｌ霧乾燥若しくは凍結乾燥することによって容易に回収される。

或いは、菌糸体または全乾燥ブイヨンを前記の有機溶媒の１種類で抽出する。精 製された抗生物質化合物が望まれるならば、それは、以下に例示したように、ａ 絹、塩若しくは遊離酸の生成、クロマトグラフィー、沈殿および／または結晶化 の標準的な方法によって有機抽出物から単離される。

発酵を行う通常の方法において、最初に、アクチノマデユラ種ＡＴＣＣ５５０８ ０を接種した斜面またはルーボトルから、適当な培地上で増殖する増殖性細胞を 掻き取ることによって接種材料を調製する。得られた増殖性細胞を順次に用いて 、適当な増殖培地が入っている振とうフラスコまたは接種材料タンクに接種する 。或いは、接種材料タンクに振どうフラスコから接種する。適当な増殖期（概し て、振どうフラスコ中で１２０〜１４４時間および接種材料タンク中で１６８〜 １９６時間）の後、適当な増殖培地が入っている発酵槽に、振どうフラスコまた は接種材料タンクからの増殖性ブイボンを無菌条件下で接種する。増殖が完了し たら（概して、約１２０〜１９６時間）、抗生物質化合物は、所望に応じて、前 記に概説した方法の一方若しくはもう一方によってまたは以下に例示される具体 的な方法によって粗製または純粋状態で回収される。

式（Ｉ）を有する化合物のインビトロでの抗細菌活性を、１種類またはそれ以上 の微生物に対するｍｃｇ／ｍ＋での最小阻害濃度（ＭＩＣ’ｓ）が測定される標 準法によって試験する。このような方法の一つは、抗生物質感受性試験の国際共 同研究（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｃｏ１１ａｂｏｒａｔｉｖｅＳｔ、ｕｄ ｙ　ｏｎ　Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ　ＳｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙＴｅｓｔｉｎｇ）（ エリクソン（Ｅｒｉｃｃｓｏｎ）およびシュリス（Ｓｈｅｒｒｉｓ＞、Ａｃｔａ 、Ｐｈａｔｈｏｌｏｇｉｃａ　ｅｔＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏ　ｉａ　５ｃａｎｄｉ ｎａｖ、補遺２１７．Ｂ節、６４〜６８［１９７１コ）によって推奨されたもの であつ且つ脳心ｌ１ｉｉ浸出液（ＢＨＩ）寒天および接種材料複製装置を用いる 。−晩中増殖させた試験管を、標準的な播種材料として用いるために１００倍に 稀釈する（約０．００２ｍ１中の２０．０００〜１００，０００個の細胞を寒天 表面上にＷ＜：ＢＨＩ寒天２０ｍ１／皿）、２倍稀釈の試験化合Ｉ！ｖ１２個を 用い、試験薬剤の初期濃度は２００ｍｃｇ／ｍｌである。３７°Ｃで１８時間後 にプレートを読み収った場合、単一コロニーは無視される。試験生物の感受性（ ＭＩＣ）は、裸眼によって判断される完全な増殖の阻害を生じることかできる化 合物の最低濃度として認められる。＃！の多環式エーテル抗生物質と同様に、式 （Ｉ）を有する本化合物は、典型的に、ダラム陽性抗細菌活性、更にはトレハロ ース・ヒオディセンテリエ（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ　ｈｙｏｄｙｓｅｎｔｅｒｉａ ｅ＞　（ブタの赤痢の原因物質）に対する活性を示す。

ニワトリにおけるコクシジア感染に対する式（Ｉ）を有する化合物およびその塩 の効力データは下記の方法によって得られる。１０日令の病原体不含白色レグホ ンの雄のヒナ３〜５羽の群を、化合物（Ｉ）またはそのナトリウム塩および／ま たはカリウム塩を均一に分散させて含むマ・ツシュ飼料で飼育する。この飼料供 給の２４時間後に、各ヒナに、試験されるアイメリア属（Ｅｉｍｅｒｉａ）の特 定の種の接合子嚢を経口的に接種する。ｆｌ！！の群の３〜５羽の１０日令のヒ ナを、化合物ＣＩ）またはその塩を含まない同様のマ・Ｙシュ飼料で飼育する。

更に、それらを２４時間後に感染させ、そして感染対照として用いる。更にもう 一つの群の３〜５羽の１０日令のヒナを、抗生物質不含の同一のマツシュ飼料で 飼育し且つコクシジアに感染させない、これらは正常対照として役立つ、処置の 結果は、Ｅ、アセルヴリナ（ａｃ　ｅ　ｒｖｕ　Ｉ　ｉ　ｎａ）の場合５日後に 、そして他の試験全部に関しては６日後に評価される。

抗コクシジア活性を測定するのに用いた判定基準は、Ｅ、テネラ（ｔｅｎｅ　１ １ａ＞に関しては、Ｊ、Ｅ、リンチ（１，、ｙｎｃｈ）、「抗コクシジア活性の 初期評価の新規の方法（Ａ　Ｎｅｗ　Ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　ｔｈｅＰｒｉｍａｒ ｙ　Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＡｎｔｉｃｏｃｃｉｄｉａｌＡｃｔｉｖｉ　 ｔｙ）Ｊ　、Ａｍ、Ｊ、Ｖｅｔ、Ｒｅｓ、、２２．３２４　Ｎ３２６゜１９６１ の後の０〜４：および他の種に関しては、Ｊ、ジョンソン（Ｊｏｈｎｓｏｎ）お よびＷ、Ｈ，ライド（Ｒｅｉｄ）、［抗コクシジア薬剤。

ニワトリのヒナにおけるバッテリーおよびフロアベン実験での病変評点技術（Ａ ｎｔｉｃｏｃｃｉｄｉａｌ　Ｄｒｕｇｓ、Ｌｅｓｉｏｎ　ＳｃｏｒｉｎｇＴｅｃ ｈｎｉｑｕｅｓ　ｉｎ　Ｂａｔｔｅｒｙ　ａｎｄ　Ｆｌｏｏｒ　ＰｅｎＥｘｐｅ ｒｉｍｅｎｔｓ　ｉｎ　Ｃｈｉｃｋｓ）」、Ｅｘ　、Ｐａｒａｓｉｔ、。

ｌ旦、３０〜３６．１９７０によって考案された評点システムの変法に基づく〇 〜３の病変評点から成る。活性は、各被処理群の病変評点を感染対照の病変評点 で除することによって測定される。この試験において、化合物（Ｉ）およびその 陽イオン塩は、ニワトリのマツシュ飼料中に約１０〜１１００ｐｐのａ度で配合 された場合、家禽においてアイメリア・テネラ、Ｅ５アセルヴリナ、Ｅ、マキシ マ＜ｍａｘｉｍａ）およびＥ、ネヵトリクス（ｎｅｃａｔｒｉｘ）感染に対する 活性を示す。

更に、式（ｒ）を有する本化合物は、概して、ハミル（Ｈａｍｉ　ｌ　Ｉ　）ら 、米国特許第４．５８２，８２２号明細書に定義されたように、ある種の他の既 知の抗コクシジア薬、例えば、ニカルバジン、４．４′−ジニトロ力ルバニリド またはナフタレンアミンとの組合わせで育用である。

家禽におけるコクシジウム症の予防または制御に対して、本発明の化合物を家禽 に対して適当な担体中で経口投与する０便宜上、薬剤を飲料水中または家禽飼料 中で単純に与えて、治療的投薬量の薬剤を毎日の水または家禽飼料と一緒に摂取 するようにする。薬剤は飲料水中に、好ましくは、液体′ａ縮物の形で直接計量 するか或いは直接飼料にそのまま、または更に一般的に、治療薬の固体担体中ブ レミックス若しくは濃ｌａ物の形で加えることができる。治療薬は、実質的に純 粋な状９（例えば、遊′Ｍ、酸または薬学的に許容しつるその塩）或いは分析さ れた粗製状態、例えば、湿潤若しくは乾燥菌糸体または乾燥全ブイヨンであるこ とができる。適当な担体は、所望に応じて液体または固体であり、例えば、水、 各種ミール（例えば、大豆油ミール、亜麻仁油ミール、トウモロコシ穂軸ミール ）および家禽のｒｉＩ料に一般的に用いられているような鉱物配合物である。特 に有効な担体は家禽飼料それ自体、すなわち、家禽飼料の少量部分である。担体 は、プレミ・ｙクスか配合される最終飼料において活性材料の均一の分布を容易 にする。これは、備かに低比率の本強力薬剤が必要とされるので重要である。化 合物をプレミックス中に、そして引き続き飼料中に完全に配合することは重要で ある。この点に関して、薬剤は適当な油性ビヒクル、例えば、大豆油、コーン油 、綿実油等または揮発性有ｍ溶媒中に分散または溶解した後、担体と配合するこ とができる。

活性材料の濃ａ物中での比率は、最終飼料中の薬剤の量を、適当な比率のプレミ ックスと飼料とを配合することによって望ましい濃度の治療薬を得るように調整 することができるので広範に変化しつる、高力価のｎａ！Ｉｖは、飼料製造業者 によって前記に記載したように大豆油ミールおよび他のミールなどのタンパク質 性担体と配合されて、家禽に直接与えるのに適している濃厚助剤を生じる。この ような場合、家禽は通常の飼料を消費することが可能である。或いは゛、このよ うな濃厚助剤を家禽飼料に直接加えて、本発明の１種類またはそれ以上の化合物 の治療的有効量を含む栄養的に平均のとれた最終飼料を製造する。混合物をｇ単 性によって、例えば、■形ブレンダー中で完全に配合して均一性を確実にする。

家禽での使用に対して、本明細書中に記載した化合物の使用濃度は種々の状況下 において変化する。増殖期中、すなわち、ニワトリに関しては最初の５〜１２週 間中の連続低濃度投薬は有効な予防処置である。立証された感染の治療において は、感染を克服するのに更に高濃度を必要とすることがある。化合物（Ｉ）の飼 料中の使用濃度は、概して、約１０〜１１００ｐｐの範囲である。飲料水中で投 与した場合、その濃度は、水の平均−日清ｇｔｉｌに対する飼料の平均−日消費 量の重量比を要因とした投薬の同一の日用量を提供する量である。

ブタまたはウシにおける成長の促進および／または飼料利用効率の増大における 式（Ｉ）を有する化合物およびその塩の活性は、被験動物の試験群に飼料中で各 種４度の化合物（Ｉ）または塩を直接与えることによって測定することができる 。或いは、英国特許第１．１９７．８２６号明細書に、飼料中の抗生物質の評価 に関するインビトロでの瘤胃法が詳述されている。

ブタの赤痢の予防若しくは始原においてまたはウシ若しくはブタでの成長を促進 するおよび／または飼料利用効率を増大させる場合の使用に対しては、式（１） を有する化合物または塩を飼料添加剤として投与することが好ましい、それを用 いて家禽飼料の製造に関して前記に詳述したのと十分に類似の方法にしたかって 製造された飼料は、？ｆ３療薬か均一に分散している飼料を製造するのに重要で ある。

ウシまたはブタの飼料中の化合物（Ｉ＞の使用濃度は、概して、約１〜１１００ Ｐｐの範囲である０反榔動物において、式（Ｉ）を有する化合物は、瘤網胃簀中 に保持される巨丸剤形で経口投与することもでき、治療薬を実質的に一定速度で 長期間、例えば、４〜８週間にわたって放出して、飼料中での前記の日用量と同 等の用量、すなわち、 平均日用量ミリグラム−（１０〜１０１００）ｐｐ平均−日飼料消費量ｋｇを与 える。典型的なこのような制御放出巨丸剤は、カーディナル（Ｃａｒｄ　ｉ　ｎ ａ　ｌ　）　、米国特許第４．６０１，８９３号明細書のものて′ある。

本発明を下記の実施例によって例証する。しかしながら、本発明がこれらの実施 例の具体的な説明に制限されないということを理解すべきである。

Ｘ組已１ アクチノマデユラ種ＡＴＣＣ５５０８０の発酵式Ｎ）を　する　生　のナトリウ ム塩としての最初に、アクチノマデユラ種を、下記のように調製され且つ組成を 宥するＡＴＣＣ培地番号１７２を用いて、ＡＴＣＣ５５０８０培貢物を斜面また はルーボトル上の固体培地に接種することによって増殖させた。

可溶性デンプン　２０ 酵母抽出物　５ カゼイン酵素の加水分解産物　５ 炭酸カルシウム　１ 蒸留水１０１００Ｏまで： ＫＯＨでｐＨ７，０にし：寒天を加えた　２０同時に、３００ｍ１振どうフラス コを、下記の培地の一方または他方１００ｍ１を各フラスコに用いて調製した。

Ｃ′　グラム／すＶトル　ＪＤＹＴＴ　グラム／リットルモレロース　１０　セ レローズ　１０ 大豆粉　１０　コーンスターチ　５ トウモロコシ発酵固形物　５　トウモロコシ浸漬溶液　５コーンスターチ　１０ 　カゼイン酵素加水分解産物　５塩化ナトリウム　５　塩化コバルト　０．００ ２塩化コバルト　０．００２　炭酸カルシウム　３炭酸カルシウム　１ 次に、培地含有振とうフラスコを１２０℃および１５ｐ、ｓ、ｔ、で３ｏ分間滅 菌した。冷却後、その培地に、上記の７クチノマデユラ種斜面培養から掻き取っ た増殖性細胞懸濁液を接種した。フラスコは、１．５〜２．５インチを１５０〜 ２００サイクル／分（ＣＰＭ）で移動する振どう機上において２８℃で４〜５日 間振とうした。

同時に、５リットル発＃容器を、上記のＣ′若しくはＪＤＹＴＴ培地または下記 の培地の１種類を３リットル含むように調製した。

大豆粉　１０ トウモロコシ浸漬溶液　１０ 塩化コバルト　０．００２ 硫酸マグネシウム　０．１０ 炭酸カルシウム　３ 硫酸マンガン　０．１０ 消泡剤〈１０重量％エチレンオキシド含有ポリプロピレングリコール、Ｐ２Ｏ０ ０，１ｍ１）を加え、そして容器を密封し且つ１２０”Ｃおよび１５ｐ、ｓ、ｔ 。

で１時間滅菌した０次に、その容器に、一つの振とうフラスコ（約３％接種材料 ）を接種し、そして液体１容量当り空気１容量の毎分の空気速度を用いて１７０ ０回転／分（ＲＰＭ）で撹拌しながら３０℃で１２０〜１６８時間発酵させた。

発酵が完了した時点で（枯草菌（Ｂ、５ｕｂｔｉｌｉｓ）ＡＴＣＣ６６３３に対 する抗生物質ディスク検定に基づいて）、発酵を止め且つ珪藻土によって中性の ＰＨで濾過した。フィルターケーキをメタノール中でスラリーにし、真空中で濃 縮し、そして２〜３容量の水で稀釈した後、１／３〜１／２容量のメチルイソブ チルケトンかまたはｎ−ブタノールで２回抽出した。溶媒層を吸引または遠心分 離によって水性相から分離し、真空中に放ち且つ濃縮して、式（Ｉ）を有する抗 生物質を粘稠油として粗製状態で生成した。

ブイヨンおよび引き続きの回収流の生物活性は、枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕ ｂｔｉ　Ｉ　１ｓ）ＡＴＣＣ６６３３または黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏ ｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ）ＡＴＣＣ６５３８の感受性菌株を用いることによ ってめることができる。ブイヨンおよび回収流中の成分は、アナルテク（Ａｎａ ｌｔｅｃｈ）シリカゲルＧＦプレートを用いて酢酸エチルをｆｆ１Ｍ剤として用 いる薄層クロマトグラフィー（ｔｉｃ）によって視覚化することができる。展開 されたグレートにバニリン試薬（エタノール７５ｍ１および８５％リン酸２５ｍ １中にバニリン３ｇ）を噴霧し且つ８０℃まで加熱する６式（Ｉ）を有する抗生 物質生成物は赤色スポットとして現れる。展開されたｔｉｃプレートに、更に、 黄色ブドウ球菌かまたは枯草菌を播種した寒天を載せ、それに塩化２．３．５− トリフェニル−２Ｈ−テトラゾリウム−水和物を加え且つ３７℃で１６時間イン キュベートして、抗生物質を視覚化することができる（桃色のバックグラウンド に対して白色スポット）。

大型発酵容器での拡大は、Ｃ′またはＪＤＹＴＴ培地０．７リツトルが入ってい る振とうフラスココ調製することによって行うことかできる。振とうフラスコ接 種材料を２８℃で５〜７日間発酵させ且つ用いて、それぞれＪＤＹＴＴ培地１０ ０リットルが入っている２００リットル発酵容器に接種した。７〜１０日間進行 した後の発酵物を採取した。全ブイヨンを、メチルイソブチルケトン３３リツト ルを用いて中性のＰＨで抽出した。有機抽出物をアルファ・デラヴアル（ａｌｐ ｈａ−ＤｅＬａｖａ＋）セパレーター上で分離し且つ真空下で濃縮して、式Ｉを 有する粗製抗生物質を油として生成した。その油をシリカゲル上のクロマトグラ フィーによって分離し、最初にヘキサンで、次にＣＨ２Ｃｌ２で、そして最後に 酢酸エチルで溶離した。生成物含有画分を合わせ、そして溶離剤としてＣＨＣｌ 　３／アセトンを用いて再度クロマトグラフィーによって分離し且つストリップ して、式（Ｉ）を有する粗製抗生物質を生成した。粗′＃物をクロロホルム中に 取り、稀リン酸で、続いてＰＨ９，０のリン酸１衝液で抽出しな、有機相を乾燥 させ（Ｎ　ａ　２　Ｓ　Ｏ４）　、ストリップし、そして残留物をジエチルエー テル／ヘキサンから晶出させ、そして高真空下で乾燥させて、式（Ｉ）を有する 抗生物質をそのナトリウム塩の形で３５０ｍｇ生成した：ｍ、ｐ、１６０〜１６ ２℃。

Ｃ５ｏＨｓ　５０ｔ７Ｎａの分析計算値：Ｃ，６２，５８：Ｈ，９，０４゜実測 ｉｉ：　ｃ、６２．１６；Ｈ，９，２５゜１３ＣＮＭＲ（ＣＤＣＩ　３）ＰＰｍ 　（括弧内は結合した水素の数）：１８０．６０　（０）、１０６．７０　（０ ）、９９．５３　（０）、９８．４７　（０）、９６．６１（１）、９４．７４ （１）、８８．７４（１）、８４．５９（１）。

８４．０９　（０）、８３．８５　（１）、８３．２０　（０）、８０．７７　 （１）。

８０．４６　（１）、８０．２５　（０）、８０．２５　（１）、７９．６４　 （１）。

７４、３３　（１）、　７３．７２け＞、　６７、４８　（１）、　６１．７０ 　（３）　。

６１．４７（１）、６０．３０（３）、５９．８８（３）、５８．９６（３）。

５６．８１　（３）、４６．２６　（１）、４５．９７　（１）、４５．３５　 （１）。

４０．７４　（１）、３９．３４　（１）、３６．８５　（１）、３２．６６　 （２）。

３１．８９（２）、３１．１４（２）、２９．９４（２）、２８．９５（２）。

２８．２５　（３）、２７．６９　（２）、２６．６９　（３）、２５．７５　 （２）。

２４．３６（２）、２２．５２（３）、１８．５２（３）、１３．２４（３）。

１２．５９　（３）、１２．５３　（３）、１２．０３　（３）、１１．５５　 （３）。

１１、４９　（３）および１０．０２　（３）。

寒旌区ｌ 遊離　の影のイ合　（１） 式（Ｉ）を有する遊離酸の形の抗生物質を、ナトリウム塩のクロロホルム溶液を 等量の塩酸と一緒に分液漏斗中においてＰＨ２で激しぐ振とうすることによって 製造した。相を分離し、そしてクロロホルム層を水で洗浄した後、真空下で蒸発 させて遊離酸を得た：ｍ、ｐ、１０９〜１１１°Ｃ：栗謄区旦 ＸＩＩ結、Ｐ“　のルビジウム塩としてのイム物＜１）前の実施例の遊離酸の形 （７０ｍｇ）をＣＨＣｌ３の１００ｍ１中に溶解させた。炭酸ルビジウム（水１ ００ｍ１中１５０ｍｇ＞を加え、その混合物を分液漏斗中において激しく振とう した。有機相を分離し、水で洗浄し、そして蒸発させて、本標題生成物を白色固 体として得た。これをエーテル／ヘキサン（３二１＞から徐々に蒸発させること によって再結晶させた。Ｊ、ボードナー（ＢｏｒｄｎｅｒＪ博士による単結晶Ｘ 線分析により、本発明の抗生物質は、前記に示したような相対的立体化学式（Ｉ ）を有することが示された。

要約書 Ｘ線結晶学によって立証された構造を有する酸性多環式エーテル抗生物質を、新 規の微生物であるアクチノマデユラ（Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ）種ＡＴＣＣ５ う０８０の発酵によって生成する。この新規の抗生物質は、家禽における抗コク シジア物質として、ブタの赤痢の予防および治療において並びにウシおよびブタ の成長促進剤として有用である。

補正書の翻訳文提出書 （特許法第１８４条の８） 平成　５年　９月　〆日 特許庁長官　麻　生　渡　殿　ヒ田 １、特許出願の表示 ＰＣＴ／ＵＳ９１１０６０８４ ２、発明の名称 酸性多環式エーテル抗生物質 ３、特許出願人 名　称　ファイザー・インニーボレーテ・ソド４、代理人 住　所　東京都千代田区大手町二丁目２番１号新大手町ビル　２０６区 ５、補正書の提出日 Ｃ′　グラム／リットル　ＪＤＹＴＴ　グラム／ｉル、トルセレローズ　１０　 セレローズ　１０ 大豆粉　１０　コーンスターチ　５ トウモロコシ発酵固形物　５　トウモロコシ浸漬溶液　５コーンスターチ　１０ 　カゼイン酵素加水分解産物　５塩化ナトリウム　５　塩化コバルト　０．　０ ０２塩化コバルト　０．　００２　炭酸カルシウム　３炭酸カルシウム　１ 次に、培地含有振とうフラスコを１２０℃および１５ｐ、ｓ、ｉ、（１，０５ｘ １０’ｋｇ／ｍ２）で３０分間滅菌した。冷却後、その培地に、上記のアクチノ マデユラ種斜面培養から掻き取った増殖性細胞懸濁液を接種した。フラスコは、 １゜５〜２，５インチを１５０〜２００サイクル／分（ＣＰＭ）で移動する振と う機上において２８℃で４〜５日間振とうした。

同時に、５リットル発酵容器を、上記のＣ′若しくはＪＤＹＴＴ培地または下記 の培地の１積項を３リットル含むように調製した。

大豆粉　１０ トウモロコシ浸漬溶液　１０ 塩化コバルト　０．　００２ 硫酸マグネシウム　０．１０ 炭酸カルシウム　３ 硫酸マンガン　０．１０ 消泡剤（１０重量％エチレンオキシド含有ポリプロピレングリコール、Ｐ２Ｏ０ ０，１ｍ１）を加え、そして容器を密封し且つ１２０℃および１５ｐ、ｓ、ｉ。

（１，０５Ｘ１０’ｋｇ／ｍ２）で１時間滅菌した。次に、その容器に、一つの 振とうフラスコ（約３％接種材料）を接種し、そして液体１容量当り空気１容量 の毎分の空気速度を用いて１７００回転／分（ＲＰＭ）で攪拌しながら３０°Ｃ て１２０〜１６８時間発酵させた。

国際調査報告 Ｐｗｒｎ　ＰＣＴｆｌＷＩＯｌｓｕ貿−ｍ「−１ｔ＋’ｍ１（２１１−Ｗａｎ　 ３ＶｉＳ＾　５３０９２

Claims (19)

【特許請求の範囲】
1. １．式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、ＭｅはＣＨ３を表わす） を有する化合物または薬学的に許容しうるその陽イオン塩。
2. ２．ナトリウム塩またはカリウム塩の形である請求項１に記載の化合物。
3. ３．アクチノマデュラ（Ａｃｔｉｎｏｍａｄｕｒａ）種ＡＴＣＣ５５０８０また はその突然変異体若しくは組換え体を、同化しうる炭素源および窒素源を含む水 性栄養培地中の深部好気性条件下において、回収しうる量の前記の化合物が生成 されるまで発酵させることを含む請求項１に記載の化合物を製造する方法。
4. ４．前記の化合物を発酵培地から分離する工程を更に含む請求項３に記載の方法 。
5. ５．前記の分離工程が、発酵培地を濾過し且つ前記の化合物および菌糸体の混合 物を回収することを含む請求項４に記載の方法。
6. ６．前記の分離工程が、前記の発酵培地を噴霧乾燥または凍結乾燥し且つ前記の 化合物を粗製状態で回収することを含む請求項４に記載の方法。
7. ７．アクチノマデュラ種ＡＴＣＣ５５０８０を発酵させることを含む請求項３に 記載の方法。
8. ８．ウシにおいて成長を促進しまたは飼料利用効率を改良するのに有効な量の請 求項１に記載の化合物を含むウシ用の栄養飼料組成物。
9. ９．ブタにおいて赤痢を予防若しくは治療し、成長を促進しまたは飼料利用効率 を改良するのに有効な量の請求項１に記載の化合物を含むブタ用の栄養飼料組成 物。
10. １０．家禽においてコクシジア感染を予防または制御するのに有効な量の請求項 １に記載の化合物を含む家禽用の栄養飼料組成物。
11. １１．ウシにおいて成長を促進しまたは飼料利用効率を増大させるのに有効な量 の請求項１に記載の化合物をウシに対して投与することを含む、ウシにおいて成 長を促進しまたは飼料利用効率を増大させる方法。
12. １２．請求項８に記載の栄養飼料組成物をウシに対して投与することを含む、ウ シにおいて成長を促進しまたは飼料利用効率を増大させる方法。
13. １３．ブタにおいて赤痢を予防若しくは治療し、成長を促進しまたは飼料利用効 率を増大させるのに有効な量の請求項１に記載の化合物をブタに対して投与する ことを含む、ブタにおいて赤痢を予防若しくは治療し、成長を促進しまたは飼料 利用効率を改良する方法。
14. １４．請求項９に記載の栄養飼料組成物をブタに対して投与することを含む、ブ タにおいて赤痢を予防若しくは治療し、成長を促進しまたは飼料利用効率を改良 する方法。
15. １５．家禽においてコクシジア感染を予防または制御するのに有効な量の請求項 １に記載の化合物を家禽に対して投与することを含む、家禽においてコクシジア 感染を予防または制御する方法。
16. １６．請求項１０に記載の栄養飼料組成物を家禽に対して投与することを含む、 家禽においてコクシジア感染を予防または制御する方法。
17. １７．ＡＴＣＣ５５０８０の識別特性を有するアクチノマデュラ属の菌株または その突然変異体若しくは組換え体の生物学的に純粋な培養物であって、同化しう る炭素源および窒素源を含む水性栄養培地中での発酵によって回収しうる量の請 求項１に記載の化合物を産生することができる上記の培養物。
18. １８．凍結乾燥状態の請求項１７に記載の培養物。
19. １９．アクチノマデュラ種ＡＴＣＣ５５０８０である請求項１７に記載の培養物 。