JPH0449240A - 抗消化性潰瘍剤、動物用抗消化性潰瘍剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 消化性潰瘍治療の２本柱は過去、現在を通じて［産業上
の利用分野］ 本発明は、抗消化性潰瘍剤、動物用抗消化性潰瘍剤に間
する。

［従来の技術］ 消化性潰瘍は、直接胃液と接する消化管に発生する、少
なくとも粘膜筋板をこえた、境界明瞭な限局性組織欠損
であり、人畜共通な疾患である。

臨床的にはしばしば、その発生部位に応して胃潰瘍、十
二指腸潰瘍、食道潰瘍という病名が使用されている。

消化性潰瘍の原因は、直接的には、胃酸やペプシンの異
常な分泌亢進、粘膜の防御機構の６弓化、局所的貧血等
であるが、現在、これらはストレスにより誘発されるこ
とが多い。動物では、牛、豚、鶏、犬、猫等で発症が報
告されている。（昭和６４年に養賢堂から発行された、
吐山豊秋著の「新編家畜薬理学」の２２４〜２２６頁）
。

制酸剤、自律神経遮断剤である。

［発明が解決しようとする課題］ 消化性潰瘍は、−旦発生すると治癒後も生涯にわたって
再発治癒をくりかえすので、連続投与しても副作用の発
生のない薬剤が望まれている。この点で、現在使用され
ている自律神経遮断剤はいずれも満足すべきものではな
い、又、消化性潰瘍は、前述の通り、ストレスから誘発
されることが多いので、日常的に摂取される食品にも配
合可能な予防効果がある薬剤の開発が強く望まれている
。

かかる現状に鑑み、本発明は、抗消化性潰瘍効果が高く
て副作用が少なく、従って化学療法係数が高く、かつ、
生産コストが低く、しかも、経口、経皮、注射での投与
が可能であり、かつ大量に供給可能であり、その上、毎
日食すことが可能な食品の内に配合可能な新規な抗消化
性潰瘍剤、動物用抗消化性潰瘍を提供するために完成さ
れたものである。

［課題を解決するための手段］ 本発明により、ＬＰＳを含む抗消化性潰瘍剤、動物用抗
消化性潰瘍剤が提供される。この抗消化性潰瘍剤、動物
用抗消化性ｆ！Ｉ瘍剤には、インビトロで培養されるマ
クロファージのＴＮＦ産生能を活性化するＬＰＳのマク
ロファージ活性化能を指標とし、 縦軸に、そのＬＰＳを添加しないときのマクロファージ
のＴＮＦ産生量を与えるマクロファージ活性化能を０％
、マクロファージのＴＮＦ産生量を最大かつ一定のｌｆ
ｔ！　（本明細書の他の箇所においては、「最大恒量」
と称す）にする時のＬＰＳのマクロファージ活性化能を
１００％とするマクロファージ活性化能（％）を表し、
横軸に、そのＬＰＳのリムラステスト陽性ＬＰＳ含有量
を対数尺で表すシグモイド曲線を描くとき、 マクロファージ活性化能のＥＤｓｓを与えるリムラステ
スト陽性ＬＰＳ含有量が０．４〜１００ｎｇ／培養液ｍ
［あるＬＰＳの少なくとも１種が含まれる。

ここて「少なくとも１種を含む」とは、本発明のＬＰＳ
は各別に使用できることはもちろん、そのｆ図される用
途が阻害されない限り、それらの２種以上を任意に朝み
合わせて、又、更には他のいずれの物質とも組み合わせ
て使用できることを意味する。

「マクロファージ」は、免疫担当細胞の一種であり、動
物体内のほとんど全ての組織に分布し、粒子状の異物や
体内の老廃細胞などを捕食して消化する大型のアメーバ
状細胞の総称である。「ＴＮＦＪは、マクロファージに
より産生される腫瘍障害因子（Ｔｕｍｏｒ　　Ｎｅｃｒ
ｏｓｉｓＦａｃｔｏｒ）の総称であり［１９８５年に発
行された　ザ　ジャーナル　オブ　バイオロジカルケミ
ストリー（Ｔｈｅ　　Ｊｏｕｒｎａｌ　　ｏｆＢｊｏｌ
、Ｃｈｅｍ、　、２６０．２３４５〜２３５４頁コ、マ
クロファージの活性が高まるにつれてその産生量は増し
ていく。

「リムラステスト」は、１９６８年にレヴイン（ｌｅｖ
ｉｎ）によりｉＩＪ案された、カブトガニ血球抽出液と
発色合成基質を用いたエンＦ’　）キシン定量法である
。

本発明の抗消化性潰瘍剤、動物用抗消化性潰瘍剤の活性
成分として使用できるＬＰＳは、特にその採取源、生産
方法、精製方法を限定されることはない０例えば、ＩＩ
Ｍや植物から採取されるＬＰＳであっても、或は合成リ
ビドＡのような合成品であってもよい、なお、本明細書
、特にその特許請求の範囲において、採取源は特に名称
で特定されたそのものに限定されることなく、その採取
源の成長、保存、流通の過程で付着、共存する細菌その
他の全てのものが含まれる０例えば、「小麦ＬＰＳＪと
特定された場合には、小麦そのものから採取されたＬＰ
Ｓのみならず、小麦の成長、保存、流通の過程で付着、
共存する細菌その他の全てのものが含まれるものと理解
されたい。なぜならば、特に寄生Ｍ物、寄生動物という
関係が解明されているもの以外にも、特定の植物、動物
、菌界生物、地衣界生物に、それらにより付着、共存を
許されたものが棲息している例が多く存在し得ることは
当業界で良く知られていることであるからである。

これらＬＰＳのうちから、本発明の抗消化性潰瘍剤、動
物用抗消化性潰瘍剤の活性成分として使用できるＬＰＳ
を選択するには、 インビトロで培養されるマクロファージのＴＮＦ産生能
を活性化するＬＰＳのマクロファージ活性化能を指標と
し、 縦軸に、そのＬＰＳを添加しないときのマクロファージ
のＴＮＦ産生量を与えるマクロファージ活性化能を０％
、マクロファージのＴＮＦ産生量を最大恒量にする時の
ＬＰＳのマクロファージ活性化能を１００％とするマク
ロファージ活性化能（％）を表し、横軸に、そのＬＰＳ
のリムラステスト陽性ＬＰＳ含有量を対数尺で表すシグ
モイド曲線を描くとき、 マクロファージ活性化能のＥＤｓ＠を与えるリムラステ
ス［１性ＬＰＳ含有量が０．４〜１０００ｇ／培１！Ｈ
ｍ　ｃであるものを選択すればよい。

ｌムラステスト陽性纏１１ｉｉ１！ＬＰＳ従来より知ら
れている大＆！ｌ菌ＬＰＳ、百日咳菌ＬＰＳ、リピトＡ
等が該当する。

大腸菌ＬＰＳは、例えば、米国デイフコ（Ｄ−ｉｆｃｏ
）社から市販されている。

百日咳菌ＬＰＳは、例えば、フナコシ薬品から市販され
ている。又、公知の百日咳菌、例えば、東浜株Ｉ相菌の
死菌体から、例えば、下記文献２聴の公知方法により調
製することもてきる。

ウェブスター（Ｗｅｂｓｔｅｒ）等著の「ジエイ、イミ
ュノル（Ｊ、Ｉｍｍｕｎｏ　１．）、７４４．５５　（
１９５５）； ウエストファル（Ｗｅ−ｓｔｐｈａｌ）等著の「ツエト
、ナツールフオルシュ（Ｚ、Ｎａｔｕｒｆｏｒｓｃｈ）
Ｊ、７６．１４８　（１９５２）。

リビドＡは、例えば、第一化学薬品から市販されている
。

リムラステスト陽性植物１１１ＬＰｓ 原料植物として使用できるものを下記に例示する。なお
、水閘＊ｔに記載した植物が帰属する科名、１名は、次
の文献の記載を照合して決定された。

課子植物、単子葉類、双子葉類、シダ植物、ソウ類：昭
和５７年（正編）、昭和５８年（続編ンに北隆館から発
行された「原色牧野植物大図鑑」の記載を照合して所属
を決定した。但し、「燕麦」は、昭和４５年に女子栄養
大学出版部から発行された「食用植物図説」と、昭和５
８年に至文堂から発行された「新日本植物誌顕花簡」の
記載を照合し、［裸麦）は、昭和４６年に東京同文書院
から発行された「総合食品事典」の記載を照合し、「鳩
麦」、「カラスビシャク」、「ジャノヒゲ」、「ウコン
」、「マタタビ」、「アマチャヅル」、「ドクダミ」、
「胡椒」、「トウガラシＪ、「ダイウィキョウ」、「ダ
イダイ」、「クズ」、「ナンキンカンゾウ」、「オタネ
ニンジン」、［ボウフウＪ、「オオツヅラフジ」、「ウ
ンカリア・ヒルスタ」は、昭和６３年に北隆館から発行
された「原色牧野和漢薬草大図鑑」の記載を照合し、「
アボガＦ’　Ｊは、昭和５３年に財団法人農林統計協会
から発行された熱帯農業技術叢書第１５号「ブラジルの
果実」の記載を照合し、「カイワレダイコンＪは、昭和
５９年に北隆館から発行された「原色園芸植物大図鑑」
の記載を照合し、「ニクズク」は、昭和４４年に廣用書
店から発行された「図説熱帯植物集成」の記載を明合し
、「クロレラ」は、財団法人日本健康食品協会が昭和６
１年に公示した、「クロレラ規格基準」の記載を照合し
て所属を決定した。

菌類：昭和６２年に保育社から発行された「原色日本新
菌類図鑑」の記載を照合して所属を決定した。但し、酵
母は、昭和３７年に技報堂から発行された「微生物ハン
ドブック」の記載を照合し、「冬虫夏草」は、前掲の「
原色牧野和漢薬草大図鑑」の記載を照合して所属を決定
した。

本発明で使用できる原料植物は、例えば、裸子植物、単
子葉類、双子葉類、シダ植物、ソウ類、菌類の植物であ
り、これらは個別に或は混合して使用できる。

裸子植物としては、例えば、マツ科マツ属植物であるマ
ツを使用できる。

草子葉類植物としては、例えば、イネ科イネ属植物であ
るイネ、イネ科コムギ属植物である小麦、イネ科オオム
ギ属植物である大麦、裸麦、イネ科カラス麦属植物であ
る烏麦、燕麦、イネ科ササ属植物であるクサ笹、イネ科
ジュズダマ属植物である鳩麦、アヤメ科アヤメ属植物で
あるアヤメ、ユリ科ネギ属植物であるニンニク、ユリ科
キジカクシ属植物であるアスパラガス、ユリ科ジャノヒ
ゲ属植物であるジャノヒゲ、ショウガ科ショウガ属植物
であるミョウガ、ショウガ科ウコン属植物であるウコン
、サトイモ科ハンゲ属植物であるカラスビシャクを使用
できる。

双子葉類植物としては、マメ科ダイズ属植物である大豆
、マメ科インゲンマメ属植物である小豆、マメ科ソラマ
メ属植物であるそら豆、マメ科クズ属植物であるクズ、
マメ科カンゾウ属植物であるナンキンカンゾウ、ナス科
ナス属植物であるジャガイモ、トウガラン、ナス科トマ
ト属植物であるトマト、ナス科トウガラン［１物である
トウガラン、バラ科ビワ属Ｍ＃！Ｉであるビワ、バラ科
サクラ属Ｍ物であるモモ、クスノキ科アボガド属植物で
あるアボガド、クルミ科クルミ属植物であるクルミ、ウ
リ科トウナス属植物であるカボチャ、ウリ科アマチャヅ
ル属植物であるアマチャヅル、アブラナ科ダイコン属植
物であるカイワレダイコン、マタタビ科マタタビ属植物
であるマツタビ、ドクダミ科ドクダミ属植物であるドク
ダミ、コシヨウ科コシヨウ属植物である胡椒、シキミ科
シキミ属植物であるダイウィキョウ、ニクズク科ニクズ
ク属植物であるニクズク、ミカン科ミカン属ＶＬ物であ
るダイダイ、ウコギ科オタネニンジン属植物であるオタ
ネニンジン、セリ科サポシュニコビア属植物であるボウ
フウ、ツヅラフジ科オオツヅラフジ属植物であるオオツ
ヅラフジ、アカネ科カギカズラ属植物であるウンカリア
・ヒルスタを使用できる。

シダ植物としては、例えば、トクサ科トクサ属植物であ
るスキナ、ゼンマイ科ゼンマイ属植物であるゼンマイを
使用できる。

ソウ類植物としては、例えば、カッソウ類植物、紅ゾウ
ＭＭ物、緑ソウ類植物、ランソウｎ植物を使用できる。

カッソウ類植物としては、例えは、コンブ科ワカメ属植
物であるワカメ、コンブ科コンブ属植物であるコンブ、
ホンダワラ科ヒジキ属植物であるヒジキを使用できる。

紅ソウ類植物としては、例えば、ウシケノリ科アマノリ
属植物であるアサクサノリを使用できる。緑ソウ類植物
としては、例えば、オオシスティス科クロレラ属植物で
あるクロレラを使用できる。

菌類植物としては、例えば、担子菌類植物、子ノウ菌類
植物を使用できる。担子菌類植物としては、例えば、ヒ
ラタケ科マッオウジ属植物である椎茸、キシメジ科エノ
キタケ属植物であるエノキ茸、キシメジ科シメジ属植物
であるシメジ、タコウキン科マイタケ属植物であるマイ
茸、サルノコシカケ科ポリポラス属植物であるアワビ茸
、ハラタケ科ハラタケ属植物であるマツシュルーム、キ
クラゲ科キクラゲ属植物であるキクラゲ、モエギタケ科
スギタケ属植物であるナメコを使用できる。

子ノウＷ類植物としては、例えば、エントミセタセア科
サツカロミセス属植物であるパン酵母、醸造用酵母を使
用できる。ｌＩ造用酵母にはビール酵母、清酒酵母、葡
萄酒酵母、醤油酵母、味噌酵母等の他、サツカロミセス
　セレヴイシトに属する多くの酵母（例えば、ウィスキ
ーや老酒の製造に使用される酵母）が含まれる。又、バ
ッカクキン科ノムシタケ属植物である冬虫夏草も使用で
きる。

以上に述べた原料植物中のリムラステスト陽性ＬＰＳの
検出、含量測定は、例えば、生化学工業株式会社からト
キシカラーシステムという名称で市販されている試薬セ
ットを使用して実施できる。

即ち、原料植物を同システムのＬＳ−１セツトと合わせ
て発色させ、その発色の強さを、同しく同セットのＥｔ
−２セツトを使用して作成した検量線と対比させればよ
い。

植物源ＬＰＳは、以下に述べる方法で分離、精製できる
。

■原料植物を必要に応して適宜細切、乾燥、粉砕した後
に蒸留水によく懸濁し、上清を回収する。

例えば、原料植物が穀類の種子である場合は、種皮をつ
けたまま、或は、種皮を除いた後に簡単に砕くか、又は
、食用に供せられている程度の粉末になるまで粉砕し、
得られた粉末に水を加えて分散液とし、攪拌した後に沈
降物を静置又は遠心分離により除去するか、粉末に水を
加えて練って得られるドウなミキサー中でゆるやかに水
洗し、沈降物を除去すればよい。

原料植物がクロレラである場合には、まず細胞膜を破砕
し、エタノール洗浄により脂溶性物質を除去した後に水
抽出するとよい。

この水抽出の際の原料植物の粒度、水の温度、液性、添
加量、攪拌の速度、時間、遠心分離の際の条件等は特に
制限する必要はなく、原料植物の種類に応じて適宜調整
すればよい。又、抽出水の温度は高い方がＬＰＳの採取
量、純度ともに高い傾向があるが、操作の便宜上、原料
植物に含まれる澱粉の糊化を招来しない５０℃以下とす
ることが好ましい。又、水の添加量は、原料植物の種類
、粒度により異なるが、穀類種子の場合にはその割合が
７０　ｗ　／　ｖ％以下、望ましくは２０〜５０ｗ／Ｖ
％程度とすると操作上便宜である。更に、攪拌の速度は
、起泡を引き起こさない程度のものとすることが好まし
い、なお、この段階の操作塩で、本発明のリムラステス
ト陽性植物ＬＰＳの純度は、リムラステスト活性データ
から判断して、例えば小麦種子の場合には約３０倍に上
昇する。

以下、穀類種子を原料として使用する場合を例にとり説
明するが、いわゆる当業者であれば、以下の記載を参考
にして、他植物から夾雑する糖、蛋白等を除去してリム
ラステスト陽性ＬＰＳを高純度で回収する方法を実施す
ることは極めて容易である。

■純度を更に上げるためには、上記■て得られた上清を
常法に従って限外濾過に付して分子量５０００以下の画
分を除去すればよい。

■得られた乾燥品を、５０　ｍ　ｇ　／　ｍ　ｌ（こな
るように蒸留水に＠濁し、遠心分離操作に付して上溝を
回収する。

■この上清を氷水で冷却し、酸を添加して酸性にすると
沈殿が生しる。この際使用する酸は特定のものである必
要はなく、例えば、トリクロロ酢＃（以下、ＴＣＡと称
す）、過塩素酸、トリフルオロ酢酸、酢酸、ジクロロ酢
酸を使用できる。

■次いて、遠心分離操作に付して沈殿を回収して蒸留水
で洗浄し、再度遠心分離操作に付して沈殿を回収する。

■沈殿を蒸留水に懸濁し、沈殿が溶解するまでアルカリ
を加える。この際使用するアルカリも特定のものである
必要はなく、例えば水酸化ナトリウム、水酸化カリウム
、アンモニア、炭酸ナトリウム、酢酸ナトリウムを使用
できる。沈殿の溶解時に塩基性がｐＨＩ　ｌより大きく
なると目的のＬＰＳが失活するので注意が必要である。

■次いて酸を加えてｐＨ８としてから３７℃に加温し、
更に酸を加えて酸性にすると沈殿が生ずるので、３７℃
に保温した遠心分離器を使用して遠心分離操作に付す。

なお、この際使用する酸も特定のものである必要はない
。

■上清を回収して水冷し、４℃で再び遠心分層操作に付
す゛ ■上清を回収し、アルカリを添加して中和し、常法に従
って限外濾過て濃縮する。この際使用するアルカリも特
定のものである必要はない。

［相］次いて常法に従ってゲル［過に付して、リムラス
テスト陽性画分を回収して併せる。ゲル濾適用の担体と
しては、例えばセファデックス（Ｓｅｐｈａｄｅｘ）Ｇ
−７５、Ｇ−１００、セファクリル（Ｓｅｐｈａｃｒｙ
ｌ）Ｓ−２００、セファロース（Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ）
６Ｂ　［以上は米国ファルマシア社（Ｐｈａｒｍａｃｉ
ａＩｎｃ、）！！］、バイオゲル（Ｂｉｏｇｅｉ）Ｐ−
１００［米国バイオラッド（Ｂｉｏｒａｄ［ｎｃ、）社
製］、トーヨーバールＨＷ−５０、ＨＷ−５５（東洋曹
達工業社製）を使用できる。

緩衝液はｐＨ３〜１０のものならいずれてもよい。

例えば、トリス−ＨＣＩＬ又はリン酸緩衝液を使用でき
る。

０次いてこの両分に蛋白分解ＷＶＩ素を加え、３７℃て
２時間以上インキユヘーションして残存蛋白質を分解し
、得られた酵素処理液を常法に従って限外濾過により濃
縮する。なお、この際に使用する蛋白分解酵素も特定な
ものである必要はなく、例えば、Ｖ８プロテアーゼ、キ
モトリプシン、トリプシン、サーモライシンを単独で、
或は任意に朝み合わせて使用できる。市販品としては、
例えば、プロナーゼＥ（科研化学社）、プロティネース
Ｋ（メルク社）を使用できる。

０次いでこの両分を常法に従って、例えば、米国ファル
マシア社製のＦＰＬＣシステムでファルマシア社製のモ
ノＱ−セファロース（Ｓｅｐｈ−ａｒｏｓｅ）、Ｑ−セ
フｙａ−ス（Ｓｅｐｈａ−ｒｏｓｅ）を使用して陰イオ
ン交換クロマトグラフィーに付してリムラステスト陽性
画分を得る。

０次いて、常法に従って脱塩のためにゲル濾過に付して
リムラステスト陽性画分を回収する。

以上の操作により、小麦種子の場合には、当初のリムラ
ス活性の約２０％が回収され、純度的９５％のＩＩ＃製
標品が得られる。又、段階の終了時の純度に比へ約１０
００１ｔ：の純度（小麦種子の場合）になる。

以上の方法によって得られたリムラステスト陽性植物Ｌ
ＰＳはそのまま、或いは任意の程度に濃縮した形て提供
てきる。又、促存性を高めるために、凍結乾燥や噴霧乾
燥なとの任意の手段により乾燥粉末として提供すること
もてきる。これらはいずれも常法で生産できる。

動物体内にＴＮＦを産生させるためには、産生前駆（ブ
ライミング）段階と産生開始（トリガリング）段階とが
必要であることは、カーズウエル（Ｃａｒｓｗｅｌｌ）
らにより、プロシーディング　オブ　ナショナル　アカ
デミ−サイエンスオブ　ニーニスニー［Ｐｒｏｃ、Ｎａ
ｔ　Ｉ。

Ａｃａｄ、Ｓｃ　ｉ、ＵＳＡ、、７２．３６６６−３６
７０頁（１９７５年）］に報告されている。

ブライミング段階開始のために投与される薬剤が「ブラ
イマー」　（内因性ＴＮＦ産生促進剤）であり、トリカ
リング段階開始のために投与される薬剤が「トリガー」
　（内因性ＴＮＦ産生剤）である。

ＬＰＳがマクロファージのインビトロＴＮＦ産生能を活
性化する能力を測定するには、マウスのマクロファージ
腹腔常在細胞を採取し、これにブライマーとしての絹み
換えマウスＩＦＮ−γを添加し、次いて、トリガーとし
てのＬＰＳを添加し、そのＴＮＦ活性を測定すればよい
。

ＴＮＦ活性は、Ｌ−９２９庸胞Ｃブａシーデイング　オ
ブ　ナショナル　アカデミ−サイエンス　オブ　ニーニ
スニー　７２、３６６６〜３６７０頁］に対する細胞毒
性を基にして、次のようにして測定する。

Ｌ９２９細胞を、５％仔牛脂児血清を加えたイーグルミ
ニマムエツセンシャル培地（以下、ＭＥＭ培地と表す）
て育成し、８Ｘｌ（１個の細胞が１００μ化の同上培地
に含まれる様にし、９６大の平底プレートて育種する。

育種条件は３７℃、２時間、５％Ｃ０２，１００％Ｈ２
０であり、通常の細胞培養に用いられる方法でよい。そ
の後、アクチノマイシンＤを培地中に終濃度ｌμｇ　／
　ｍλとなるように加え、培ｌＩ液の液量を１５０μλ
とする。即座に、検体を適当にＭＥＭ培地で稀釈したも
のを５０μλ加える（この際稀釈率を適宜調製し、ＥＤ
５＠を求める事ができる）。更に、最終液量２００μｔ
となったＬ９２９纏胞を上記条件で１８時閉環養する。

細胞障害活性を測定するには、まず全培地を除去し、つ
いで０．１％クリスタルバイオレットを含む１％メチル
アルコール溶液を加えて固定染色する。クリスタルバイ
オレットは全有核細胞を染色するが、死細胞は染色後に
プレート底面より水洗で除去されるので、生存細胞の結
果から細胞障害活性を直接測定できる。この染色度を０
Ｄ６９１１ｎ＋＋での吸光度を指標として測定し、対照
群に対する染色度と比較する事で細胞障害活性を測定す
る。活性の定義は次の様に行う。

Ｌ９２９細胞が５０％生存できる検体の稀釈率（Ｎ）を
求める。対照としてウサギＴＮＳ　［腫瘍障害血清（Ｔ
ｕｍｏｒ　　Ｎｅｃｒｏｓｉｒ。

Ｓｅｔｕｍ）］を使用し、このウサギＴＮＳの活性ｎ（
単位／ｍ免）を２．４Ｘ１０６単位／ｍｇ／ｍ１ｈ（Ｄ
ＴＮＦ−αを用いて決定する。このウサギＴＮＳのＥＤ
ｓ＠を与える稀釈率（Ｃ）を求める。

検体活性（単位／ｍλ）は　−　Ｘｎ　　で計算する。

提供できる剤の製造方法 本発明の抗消化性潰瘍剤は、常法の製剤技術により、散
剤、顆粒剤、火剤、錠剤、トローチ剤、カプセル剤、液
剤、貼付剤、軟膏剤、リニメント剤、ローション剤、串
刺、注射剤等の形態で提供できる。又、動物用としては
、更に、飼料添加剤、プレミックス製剤、飲水添加剤と
してｔＩ製することもできる。飼料添加剤とする場合に
は、粉剤か顆粒剤とすることが好ましい。又、プレミッ
クス製剤とは、飼料との混合を容易にするために澱粉な
どの飼料成分で希釈されたものを指す。本発明の抗消化
性潰瘍剤を飼料添加剤、ブレミ・７クス製剤として添加
できる飼料は市販されている飼料のいずれでもよい、又
、ミネラル、ビタミン、アミノ酸等の飼料添加物を含Ｃ
飼料であってもよい。

これら製剤には、所望ならば、保存性、均質性を保持す
るために、常法により、賦形剤、保存剤、緩衝剤等の添
加剤を加えることもてきる。更に、矯味剤、矯臭剤、着
色剤を含めることもてきる。

賦形剤としては、例えば、乳糖、デンプンを使用できる
。保存剤としては、例えば、パラオキシ安息香酸メチル
、パラオキシ安息香酸エチル、バラオキシ安息香酸ブＣ
ピル等のバラオキシ安息香酸エステル類、デヒトａ酢酸
ナトリウム、フェノール、メチルパラベン、エチルパラ
ベン、プロピルバラヘン等を使用できる。緩衝剤として
は、例えば、クエン酸塩、酢酸塩、リン酸塩等が使用で
きる。

以下、製造例、実施例、実験例により本発明を例示する
。

製造例Ｉ（小麦ＬＰＳの製造） ■小型ニーダに、１．０９％の成分を含む硬質小麦粉（
アメリカ又はカナダ産のハートレットスプリング）（３
，，１２０ｇ）を入れ、２．０３地の蒸留水を加えて１
０分間練ってトウとした。１５分間の静置後に１０ｕの
水を加えてゆるやかに攪拌してデンプン乳液を洗い出し
、同時に可溶性成分を溶出させた。この溶出液を５℃の
冷蔵庫中で１２時間静置した後、デンプン等の沈降部を
除去した。上澄み液を凍結乾燥して２０１．１ｇの粉末
を得た（粉末Ａ）。

更に、残留ドウに５ｉｋの蒸留水を加えてゆるやかに攪
拌し、以下、上記と同様に処理して４０゜１ｇの粉末を
得た（粉末Ｂ）。

■これら粉末Ａ、Ｂを米国アミコン社製限外濾過１１Ｈ
Ｆ−Ｌａｂｌに供し、分子量画分５．ｏｏｏについては
中空系カートリッジＨＦ−ＬａｂｌＰＭ５を、分子量画
分１０，０００については中空系カートリッジＨＦ−Ｌ
ａｂｌＰＭｌｏを取り付けて限外濾過を行った［温度５
〜１０℃。入圧２５ｐｓ　＋　（１，７６ｋｇ／ｃｍ２
）−出圧１５ｐｓ　ｉ　（１，０６ｋｇ／ｃｍＱコ。そ
の結果に基づき、各部分を次のように命名した。

粉末Ａ１分子量５，０００以下の部分をａ。

分子ｉ１５，０００以上の部分をａ２ 粉末Ｂ：分子ｆｆ１５，０００以下の部分をｂ１分子量
５，０００以上の部分をｂ２ 粉末Ａ：分子量１０，０００以下の部分をａ３３分子量
１，０００以上の部分をａ４ 粉末Ｂ：分子量１０，０００以下の部分をｂ３３分子量
１，０００以上の部分をｂ４ これら各両分を後記実験例１に詳述する方法に準拠して
リムラステストに付したら、分子量５゜０００以上の両
分には多量のリムラステスト閣性成分が存在するが、分
子量５，０００以下の両分にはほとんど存在しないこと
が確認された。

■上記粉末ａ２の３０ｇを１隻三角フラスコに入れ、６
００　ｍ　ｌの蒸留水を注いで、６０分間スターラーで
攪拌した後、日立冷却高速遠心機５ＣＲ−２０Ｂ　（ロ
ーターＲＰＲｌ　６を事前に４℃に冷却しておいた）で
４℃で遠心分離操作（１０，０００ｇＸ１０分）に付し
て上清を回収した。

■この上清を１１三角フラスコに入れ、水冷下（液温的
２℃）、スターラーで攪拌しながら、事前に２℃に冷却
してあった１００％ＴＣＡ水溶液２０．５ｍ１Ｌを滴下
し、滴下終了後氷水中に１゜分間放置した。

■次いで前記と同様にして４℃で遠心分離操作（１０，
ＯＯＯｇｘｌＯ分）に付して沈殿を回収し、氷水中で冷
却下、３００ｍ１Ｌの蒸留水と共に５００ｍ１のビーカ
ーに入れて懸濁し、氷水中で冷却し、前記と同様にして
４℃で遠心分離操作（１０，０００ｇＸ１０分）に付し
て沈殿を回収した。

■この沈殿をｌａヒビ−−に入れ、蒸留水５゜Ｏｍ　ｌ
で懸濁し、ＩＮ水酸化ナトリウム溶液約３゜５　ｍ　Ｉ
Ｌを使用して中和（ｐＨ７）Ｌ／、ついで、氷水中で冷
却しながら、ＩＮ水酸化ナトリウム溶液約２ｍｌを添加
して０．０２Ｎ水酸化ナトリウム溶液になるようにして
沈殿を溶解した。

■ＩＮ塩酸塩酸約１．５壱ｌえてｐＨ８とし、次いて１
００ｍ１の蒸留水を加えた後にＩＩＬ三角フラスコに移
して３７℃のインキュヘーター内で３０分間ゆっくり振
盪した。

■１００％ＴＣＡ水溶液３０ｍ１を加えて混合した後、
３７℃のインキュヘーター内で１０分間ゆっくり振盪し
てから、約３７℃に保温した遠心分離器トミーＣＤ　Ｉ
　ＯＯＲ（）ミー精器社製）を使用して遠心分離操作（
３，０００ｇＸ１０分）に付した。

■上清を回収して氷冷し、４℃で遠心分離操作（１０，
０００ｇＸ１０分）に付した。

［相］上清を回収してＩＯＮ水酸化ナトリウム溶液約３
．６ｍ１Ｌで中和してｐＨ７とし、限外ａｉ３１ｊＩ器
（東洋ＷＩＷｉＵＨＰ−１５０，１イル９−：ＵＫ　−
１０、Ｎ２圧：４．０ｋｇ／ｃｍ２）で濃縮した。

■得られた濃縮液６０ｍｌを、セファロース（Ｓｅｐｈ
ａｒｏｓｅ）６Ｂカラム［米国ファルマシア社（Ｐｈａ
ｒｍａｃｉａ　　Ｉｎｃ、）製、カラムサイズ：５ｃｍ
（内径）Ｘ１００ｃｍ（２０コを使い、ゲルｍＪｌ！！
［緩衝液：１０ｍＭトリス−ＨＣｌ／ｌ０ｍＭＮａＣ１
（ｐＨ７，５）、流速：６０ｍ１／時］に付して、各２
０　ｍ　ｌの画分を得た。

０初めから４３番目から５６番目迄の両分２８０ｍｌを
併せ、プロナーゼＥ（科研化学社）４５０μｇを加え、
振盪下、３７℃に２時間保温した後に、限外濾過器（東
洋濾紙ＵＨＰ−６２、フィルター：　ＵＫ−１０，Ｎ２
圧：４．Ｏｋｇ／ｃｍ２）て濃縮した。次いて、ファル
マシア社製ＦＰＬＣシステム（カラム：モ／ＱＨＲ１０
／１０）を使って陰イオン交換クロマトグラフィーに付
した。即ち、１０ｍＭ）リス−ＨＣａ（ｐＨ７゜５）と
ｌ０ｍＭのＮａＣＩＬを含む緩衝液で試料をカラムに付
した後、上記緩衝液でＮａＣｌ１量が１６５ｍＭに増加
された結成を持つ緩衝液（２００ｍｌＬ）てカラムを洗
った。次いで、ＮａＣｌ濃度を、１６５ｍＭからＩＭの
Ｎ　ａ　ＣｆＬｌ１度勾配になるように増加させながら
全量４００ｍｌで目的ＬＰＳを溶出させ、各２ｍ１Ｌの
両分を回収した。リムラステスト陽性が確認された、濃
度勾配をかけてから５〜８番目の両分を併せて°、ＬＰ
Ｓ純度約９２％のｓｍｆＬｃＬｐｓ　：　３．０３ｍｇ
　（リムラステストによる大腸菌ＬＰＳ換算値である。

以下のＬＰＳ量も全てこの換算値である）、糖：０．２
３ｍｇ、１！ｒ白：０．０４ｍｇ）を回収した。

０次いてその８ｍλを、セファデックス（Ｓｅｐｈａｄ
ｅｘ）Ｇ−２５Ｃカラム：２．Ｏｃｍ（内径）Ｘ２０．
２ｃｍ　（６６ｍｌ）コを使ってゲル濾過（緩衝液：水
）に付して各３　ｍ　ｐ、の画分を回収した。リムラス
テスト陽性の確認された第９〜１２番目の画分を併せて
、ＬＰＳ純度約９５％の１２ｍ１（ＬＰＳ　：　２．７
ｍｇ、糖：０゜１８ｍｇ、蛋白：０．０３ｍｇ）を回収
した。糖はフェノール−硫酸法で、蛋白はローリ−法で
測定した。なお、この両分は、陰イオン交換クロマトグ
ラフィーにより酸性であることを確認した。

又、ＳＤＳゲル電気泳動法による分子量は６，０００〜
１０，０００だった。

［株］上記画分を一８０℃で凍結後に恒量になるまで凍
結乾燥し、重量を測定したら０．７５ｍｇあった。（以
下、この凍結乾燥標品を小麦ＬＰＳと称す） この小麦ＬＰＳのリムラス活性を後記実験例１記載の方
法で測定したら２．７ｍｇに相当するので、その比活性
は ２．７÷０．７５＝３．６ になる。

また、夾雑物として存在し得る単独の糠は、以上の精製
により実質上全て除去されたと考えられるので、検出さ
れた糖は全て、小麦ＬＰＳを構成している糖と考えられ
る。従って、この段階での小麦ＬＰＳの純度を重量に基
づいて計算すると、蛋白＝０．０３ｍｇ ＬＰＳ＝０．７５−０．０３＝０．７２ｍｇだから、 ０．７２÷０．７５ｘ１００＝９６　（％）である。

小麦ＬＰＳの物性 ■分子量 小麦ＬＰＳを蒸留水に溶解して１ｍｇ／ｍＱ。

溶液を調製し、その４μ党を１．５ｍ化の卜しフチュー
ブに入れた。これに、別途、１ｍＭのＥＤＴＡに２．５
％ＳＤＳ、５％メルカプトエタノール、１０ｍＭ）リス
塩Ｍ　（ｐＨ８，０）を加えて調製したＳＤＳ処理ｆｉ
１μ免を加え、この混液を３分間沸騰水に浸した。ファ
ルマシア社製のファストシステム（Ｐｈａｓｔ　　Ｓｙ
ｓｔｅｍ）を使用し・電極との間に５ＤＳ−バッファー
　ストリップ（Ｂｕｆｆｅｒ　　５ｔｒｉｐ）（ファル
マシア社製）が介在せられた１μ艷の上記混液をゲル［
ファルマシア社製のファスト　ゲル　グラデイエン）（
ＰｈａｓｔＧｅｌＧｒａｄｉｅｎｔ８−２５）に塗付し
、最大電圧２５０ｖ、最大電流１０ｍＡにセットして泳
動を開始させた。泳動終了後、クマシー染色と銀染色に
おける挙動を観察した。

クマシー染色では、染色液としてファルマシア製の０．
１％ファスト　ゲル　ブルー　（Ｐｈ−ａｓｔ　　Ｇｅ
ｌ　　Ｂｌｕｅ）　　Ｒを、脱色液として、メタノール
：酢Ｍ：蒸留水（容量比３：１：６）混液を使用し、次
の順序で染色・脱色を行った。

■５０℃で８分間中色 ２）５０℃で５分間脱色 ３〕５０℃で８分間中色 ４）５０℃で１０分間脱色 ５）５０℃で５分閏保護（グリセロール、酢酸、蒸留水
の容量比５：１０：８５混液） ６〕乾燥 銀染色は、次の順序で行った。

１〕５０℃で２分間、洗浄液（エタノール、酢酸、蒸留
水の容量比５：１：４混液）で処理２〕５０℃で２分間
、洗浄液（エタノ−・ル、酢酸、蒸留水の容量比１０　
：　５　：　８５　混液）で処理３３５０℃で４分間、
洗ＩｆＩ液（エタノール、酢酸蒸留水の容量比１０：５
：８５混液）で処理４）５０℃で６分間、増惑潰（８，
３％グルタルジアルデヒド）で処理 ５）５０℃で３分間、洗浄液（エタノール、酢酸蒸留水
の容量比１０：５：８５混液）て処理６】５０℃で５分
間、洗浄液（エタノール、酢酸蒸留水の容量比１０：５
：８５混液）で処理７）５０℃で２分間、洗浄液（脱イ
オン水）で処理 ８）５０℃で２分間、洗浄液（脱イオン水）て処理 ９）４０℃で１３分間、０．２５ｗ／ｖ％硝酸銀で処理 １０１３０℃で３０秒間、洗浄液（脱イオン水）で処理 １１１３０℃で３０秒間、洗浄液（脱イオン水〉て処理 ＋２＋３０℃で３０秒間、現像液（０，０４ｖ／ｖ％ホ
ルムアルデヒド＋２．５ｗ／ｖ％炭酸ナトリウム洗浄液
）で処理 １３］３０℃で４分間、現像液（０，０４ｖ／ｖ％ホル
ムアルデヒド＋２．５ｗ／ｖ％炭酸ナトリウム洗浄液）
で処理 １４１５０℃で２分間、反応停止液（５％ｖ／ｖ％酢酸
）で処理 １５１５０℃で３分間、保護液（酢酸、グリセロル、蒸
留水の容量比１０：８：８５混液）で処理 １６〕乾燥 ＬＰＳは銀染色に染まるが、クマシー染色には染まらな
い性質を利用して染色帯を観察したら、分子量８，００
０±１，０００の位置に小麦ＬＰＳの主要染色帯が検出
された。

［株］リン含有量 チェンートリバラ（Ｃｈｅｎ−Ｔｏｒ　ｉ　ｂａ−ｒａ
）法［チエン等著、「アナリティカル　ケミストリ（Ａ
ｎａｌｙｔｉｃａｌ　　Ｃｈｅｍｉｓ−ｔ　ｒｙ）　、
ｖｏ　１．２８．１７５６〜１７Ｆ’；８頁（１９５６
年）に準拠して次の通りに行った。

小麦ＬＰＳを蒸留水に溶解して、２５μｇの小麦ＬＰＳ
を含む２０μ琵の溶液を調製し、小試験管に入　れた。

２０μ（の５０ｖ／ｖ％硫酸を添加し、１６０℃で２時
間加熱した。次いて、２０μ化の１０ｖ／ｖ％過塩素酸
を添加した後にガスバーナーで１分間加熱して灰化させ
た。その後に０゜５ｍＱ、の蒸留水、次いて０．５ｍｌ
の反応試薬（１ｍｉの６　Ｎ　ｔ＆　酸、２　ｍ　１１
の蒸留水、２　ｍ　ｌの２．５Ｖ／Ｗ％モリブデン酸ア
ンモニウム及び１　ｍ　Ｌの］Ｏｖ／ｗ％のアスコルビ
ン酸を混合して調製し、その０．５ｍ＋ＩＬを使用）を
添加して室温で３０分間放置した後に、８２００ｍでの
吸光度（ＯＤ　８２１１．、−）を測定した。なお、検
量線作製用の試料としては、リン酸二水素カリウム（和
光純薬社製）を蒸留水で希釈し、リン重量としてそれぞ
れ２．５μｇ、１μｇ・０，２５μｇ・０μｇを含む０
．５ｍＱ、の溶液を調製して使用した。なお、リンＩｇ
はリン酸二水素カリウム４．３９ｇに相当する。得られ
た結果を次表１に示す。

表　　　１ 注：小麦ＬＰＳのデータは、漸機リンの混入（例えば、
リン酸緩衝液に由来する）による誤差を避けるために、
加熱処理をしていない対間のデータを減した値である。

小麦ＬＰＳの分子量を８，０００と仮定し、上表の結果
に基づいてその１分子当たりのリン数を次式により計算
すると１〜４になる。

上記実験でリン数がｌ〜４と変動している原因の１つと
しては、精製段階でのモノフォスフオニステラーゼの混
入により、リン酸が脱離したことも考えられる。

Ｏヘキソサミン含有量 エルソンーモルガン（Ｅｌｓｏｎ−Ｍａｒ　−ｇａｎ）
法（東京化学同人出版「生化学実験講座」Ｎｏ、４の３
７７〜３７９頁）に準拠して次の通りに行った。

小麦ＬＰＳを蒸留水に溶解して１　ｍ　ｇ　／　ｍ　ｌ
の溶液を調製し、その１００μ露をスクリューキャップ
付きスピッツ（イワキガラス社製）に入れ、これに１０
０μ化の８ＮＨＣａを添加して１１０℃で１６時間加熱
した。４ＮＮａＯＨを約２００μを添加してｐＨ７とし
た。その１００μλを分取し、別のスクリューキャップ
付きスピッツに入れ、２００μｔの下記試薬Ａを加えた
後に、１０５℃で１．５時間加熱し、次いて流水で冷却
した。次いて、】００μ丈を分取し、６７０μ込の９６
％エタノールを加え、更に、６７μ艷の下記試薬Ｂを加
えた後に室温で１時間放置し、５３５ｎｍで吸光度を測
定した。検量線作製用試料としては０．２０〜２００μ
ｇ　／　ｍ　ＩＬのＮ−アセチル　グルコサミン（和光
純薬社８１）を使用した。

（試薬Ａ）７５μ役のアセチルアセトンと２．５ｍｊｌ
の１．２５Ｎ炭酸ナトリウムを混合してｖ４Ｉ！。

（試薬Ｂ）１．６ｇのｐ−ジメチルベンスアルデヒドと
３０ｍｕの濃塩酸と３０ｍ地の９６％エタノールを混合
して調製。

結果、小麦ＬＰＳのへキソサミン数は６±２７分子（仮
定分子量８，０００）だった。

０脂肪酸含有量 ９０μ＆の小麦ＬＰＳ蒸留水溶液（１ｍｇ／ｍ１Ｌ）に
１０．ｕｌの内部標準（０，５５ｍＭのマルガリンＭ）
を加えた。１．０ｍλの０．５Ｍナトノウムメチラート
を加えて脂肪酸エステルの加水分解とエステル化を行っ
た。室温で】時間放置後に９６０μ免の０．５ＮＨＣｌ
を加えて中和した。

これに２ｒｒｌｌのへキサンを加えて１５分間激しく攪
拌した。次いて、１，０００ｇで５分間遠心分離を行い
ヘキサン層を分取した。窒素カスてヘキサンを蒸発させ
て、約２０μ（になるまで濃縮した。

このサンプルをガスクロマトグラフィー［本体：島津社
製のＧＣ８ＡＰＦ、キャピラリーカラム：カナダのスベ
ルコ（Ｓｐｅｌｃｏ）社製ＦＳＣＡＰ　　５ｐ２３３０
、キャリヤーガス：望素コに付して脂肪酸量を測定した
。脂肪酸量測定の基準としては、第一化学薬品社製の合
成リピドＡである大Ｉｌｌ菌型ＬＡ−１５−ＰＰ　（分
子量２，０００で、１分子中の脂肪酸数は６であること
が知られている）を用いた。

結果、小麦ＬＰＳの脂肪酸数は６±２７分子（仮定分子
量８，０００）であると推定された。

上記ガスクロマトグラフィーで観察されたチャートを添
付図面第１〜３図に示す。′ｓＩ図は小麦ＬＰＳの、第
２図は大１１１ｉｉｉＬ　Ｐ　Ｓの、第３図は百日咳菌
ＬＰＳのチャートである。

第１〜３図において、図示されている主要ピーク番号に
対応する保持時間（分）は次の通りであった。

第１図：　ビーク番号　　保持時間（分）１　　　　　
　　　　　　　　２　。　４５０２　　　　　　　　　
　　　　２、　７５８第２図：　ビーク番号　　保持時
間（分）１　　　　　　　２．４１７ ２　　　　　　　２．７４２ 第３図：　ビーク番号　　保持時間（分）１　　　　　
　　２．４３３ ２　　　　　　　３．０２８ 第１〜３図の比較により、小麦ＬＰＳのチャドは大腸菌
ＬＰＳのチャートに似ているが、百日咳菌ＬＰＳのもの
とは大きく異なることは明白である。

＠ＫＤＯ含有量 ＫＤＯ（２−ケト−３−デオキシオクトネート）含有量
をジフェニルアミン法［シャビ　アール（Ｓｈａｂｙ　
　Ｒ，）等著、アナリティカルバイオケム（Ａｎａｌｙ
ｔｊｃａｌ　　Ｂｊｏ　−ｃｈｅｍ、）　、５８　（１
）　、１２３〜１２９頁（１９７４年）］に４拠して次
の通りに行フた。

５００　ｍ　ｇのジフェニルアミン、５　ｍ　ｌのエタ
ノール、４５ｍ１の氷酢酸、５　ｏｍａの製塩ｗＩ（全
て和光純薬社＆りを合わせてＫＤＯ検出試薬を調製した
。その５００　ｕｆＬＩこ、１．０５ｍｇ／ｍｌの小麦
ＬＰＳを含む蒸留水２５０　ｐＬを合わせ、１００℃の
沸騰水浴中で３０分間加熱後に冷水（２３℃）中で３０
分間冷却し、ついて日立分光光度計３２０を使って４２
０，４７０．６３０．６６０ｎｍての紫外部吸収を測定
した（それぞれＡ４２ｅ、Ａ　ａ　？　＠、Ａ６３９％
　Ａ６５！１とする）。標準試料としては、１２７４ｇ
／ｍｌのＫＤＯアンモニウム塩［米国シグマ（Ｓ　ｉ　
ｇｍａ）社製］を含む蒸留水２５０μ北を使用した。

検体試料、標準試料それぞれについて、次式の値を求め
た。

Ｓ　＝＝　Ａ　ｔ２１Ｉ−Ａ　ａ−、ｌＩ＋Ａ　６３ｉ
ＩＡ　ａｓｓ検体試料”　ｔｌｉ　（Ｓ　Ｔ）は０．３
７９．　ＩＫｆｆｉ試１１のＩＩ（Ｓｓ）は０．２９４
であった。この値の比較により、小麦ＬＰＳには５±１
モル／分子ｆＩ１８千のＫＤＯが含まれると推定された
。

製造例２（クロレラＬＰＳの製造） ■繕胞膜破砕クロレラ（■マンナンフーズ社製）３０ｇ
を、洗浄液が緑色に着色しなくなるまでエタノールで洗
浄した。

■この洗浄残渣２６ｇを１００ｍｇ／ｍλの濃度で蒸留
水に溶かし、４５℃で２時間振盪後に遠心分離操作（４
℃、１０，０００ｇＸ３０分）に付した。

■上溝を回収し、東洋濾紙Ｎｏ、２で１１１過し、次い
て蒸留水で抽出した。

■抽出液２９０ｍｌを下記条件で陰イオン交換クロマト
グラフィーに付した。

カラム、Ｑ−セラフ０−ス（φ３ｃｍＸ２３ｃｍ、容量
約１８０ｍ込） 緩衝剤：］ＯｍＭ）リス−ＨＣａ（ｐＨ７，５）、Ｎａ
　ＣＩＪ度勾配：］ＯｍＭ、４００ｍＭ、１Ｍ 流速：　］　ＯＯ〜２００ｍ１Ｌ／時 温度：室温 ０２通りした画分３１０ｍ１Ｌをグルコアミラーゼで処
理して澱粉を分解した（ｐＨ５，０，４０℃、約２時間
）。澱粉の分解は、ヨウ素澱粉反応で着色が生しないこ
とにより確認した。

■遠心分離（１０，０００ｇＸ１０分）に付して上清を
回収し、１０ＮＮａＯＨ溶液で中和してｐＨ７とし、分
子量２ｏ万カツトのポアサイズを有するウルトラフィル
ターを使って限外濾過して、分解物の除去及び濃縮を行
った。

■得られた濃縮液３０ｍｇ、をファルマシア社製ＦＰＬ
Ｃシステム（カーｆｔム：　モ／ＱＨＲｌ　Ｏ／　１０
）を使って陰イオン交換クロマトグラフィーに付した。

即ち、Ｉ　Ｏｍ　Ｍ　）リスーＨＣ琵とｌ０ｍＭのＮａ
Ｃ１を含む！Ｉ衝１（ｐＨ７，５＞で試料をカラムに付
した後、上記緩Ｉｉ液でＮａｃａ量が１６５ｍＭに増加
された！Ｉ１１成をしたＭ（２００ｍ史）てカラムを洗
った。次いて、目的ＬＰＳを、ｉ出するため、１６５ｍ
Ｍｂ）らＩＭのＮ　ａ　ＣＩＪ１度勾正勾配るようにＮ
　ａ　ＣａＪ度を増加させながら全量４００ｍλてカラ
ムを洗い、各２ｍｉの両分を回収した。リムラステスト
陽性が確認された、濃度勾配をかけてから５〜８番目の
両分を併せた。

■イ欠いてその８ｍ１ｌを、セフ７デツクズ（Ｓｅｐｈ
ａｄｅｘ）Ｇ−２５［カラム：２．。

ｃｍ（内径）Ｘ２０．２ｃｍ　（６６ｍｌｌ）コを使っ
てゲル濾過（Ｍ衝液：水ンに１寸して各３ｍ兄の画分を
回収した。リムラステスト陽性の確認された第９〜１２
番目の両分を併せて１２ｍ１Ｌｅ回収した（ＬＰＳ　：
　１４．３ｍｇ、糖：２．０ｍｇ、蛋白：　０．５３ｍ
ｇ）、ＬＰＳは後記実験例１記載の方法で、糖はフェノ
ール−＠酸性て、蛋白はローリ−法で測定した。

■上記画分を一８０’Ｃて凍結後に恒星ζこなるまてＩ
Ｉ凍結燥し、重量を測定したら５．８ｍｇあった。（以
下、この凍結乾燥標品をクロレラＬＰＳと称す） このクロレラＬＰＳのリムラス活性は１４．３ｍｇに相
当するので、その比活性は １４．３÷５．８＝２．５ になる。

また、以上の精製で、夾雑物として存在し得る単独の糖
は実賞上全て除去されたと考えられるので、検出された
糖は全て、クロレラＬＰＳを構成している糖と考えられ
る。従って、この段階でのクロレラＬＰＳの純度を重量
に基づいて計算すると、 蛋白＝０．５３ｍｇ ＬＰＳ＝５．　８−０．　５３＝　　６．２７ｍｇだか
ら、 ５．２７÷５．５ｘ１０ｏ＝９１　（％）である。

クロレラＬＰＳの物性 製造例１に記載の方法と同様にして、次の値が得られた
。

分子量＝４０，０００〜９０．０００ リン数＝４±ｌ／分子量１万 ヘキソサミン数＝７±ｌ／分子量１万 脂肪酸数＝６±ｌ／分子量１万 ＫＤＯ数＝２±ｌ／分子量１万 製造例３（百日咳菌ＬＰＳの製造） 千葉県血清研究所から人手した試験用百日咳菌液（２，
ＯＸ　１０１”　！Ｉ胞／ｒｒｌＬ）を死菌体として用
いた。

上記死菌体を２５ｍｇ（乾燥重量）　／ｍｌとなるよう
に滅菌水に懸濁した。これに等量の９０％熱フェノール
液（６８〜７０℃）を添加し、６８℃で１時間振盪しな
がら抽出した。ｓ、０００ｇ、４℃で２０分間遠心分離
して水層を分取した。残りのフェノール層に、上記水層
と等量の滅菌水を加えて同様の抽出を行った。得られた
水層を先の水層と合わせて流水中で一晩透析後に、ロー
タリーエバポレータでｌ／１０に濃縮した。これを８゜
０００　ｇ、４℃で２０分間遠心分離した。上清を分取
し、酢酸ナトリウムを少量加え、０〜４℃の冷エタノー
ルを６倍量加えて一２０℃で一晩放置した。４，０００
ｇ、４℃で３０分間遠心分離して回収した沈殿物をエタ
ノールで２回、次いてアセトンで１回遠心洗浄し、アス
ピレータで乾燥させた。

残さを、２０　ｍ　ｇ　／　ｍ　ＩＬとなるように蒸留
水に懸濁し、米国ブランマン（Ｂｒａｎｓｏｎ）社製の
ソニファイア１８５型で超音波処理（出力コントロール
５．１５分、室温）に付した。次いて２゜５００ｇ、４
℃で１０分間遠心分離し、上清を分取した。

この上清を４℃で、米国シグマ（Ｓ　１ｇｍａ）社製の
核酸分解酵素ＤＮａｓｅ　　１．ＲｎａｓｅＡて１５〜
１６時間処理した（最終的には１０℃ｇ／ｍｌＬのＤＮ
ａｓｅ　　　Ｉ　と、２０℃ｇ／ｍｌＬのＲｎａｓｅＡ
を使用した）。更に同じ濃度の核酸分解酵素を加えて３
７℃で２時間加温した。次いで２．５００ｇ、４℃で１
０分間遠心分離し、上清を分取した。

この上清を米国ゲルマン（Ｇｅｌｍａｎ）社のアクロデ
ィスク（ＡｃｒｏｄｉｓＣ）を使い、孔径０．２μｍで
濾過した。ｍ液を分子篩にかけ［樹脂：米国ファルマシ
ア（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）社製セファロース（Ｓｅｐｈ
ａｒｏｓｅ）６Ｂ、カラムサイズ＝内径５　ｃ　ｍ　Ｘ
長さ１００ｃｍ、緩衝Ｗ＝１０ｍＭのトリス−ＨＣｌ、
１０ｍＭのＮａｃＱ、（ｐＨ７，５）　、流速＝約３ｍ
ｌ／ｃｍ２／時）、生化学工業社製のＬＳ−１キツトを
用いてツムラス活性陽性画分を調べて合わせ、上記ゲル
マン社のアクロディスクを使い、孔径０，２μｍで濾過
した。濾液をイオン交換にかけ［装置：米国ファルマシ
ア（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）社製ＦＰＬＣ１樹脂：米国フ
ァルマシア社製モノＱ　　ＨＲｌ　０／　１０．緩衝液
＝１０ｍＭのトリス−ＨＣａ＋１０ｍＭのＮａＣ１（ｐ
Ｈ７，５）で１５分洗浄し、次いて、ＮａＣＩＬ量を１
６５ｍＭに増加して３０分洗浄し、次いて、２０分かけ
て、ＮａＣ１量が１６５ｍＭからＩＭの濃度勾配になる
ようにＮａＣｌ量を増加させながら洗浄し、次いて、Ｉ
ＭのＮ　ａ　ＣＩＬｆｌで３０洗浄する、流速＝２ｍ＋
Ｌ／分］、生化学工業社製のＬＳ−１キツトを用いてリ
ムラス活性陽性画分を調べて合わせた。

合わせた画分をカラムで脱塩し［樹脂：米国ファルマシ
ア（Ｐｈａｒｍａｃ　ｊ　ａ）社製セファデックスＧ−
２５フアイン（ｆｉｎｅ）、カラムサイズ；内径２ｃｍ
Ｘ長さ２５ｃｍ、溶出液＝蒸留水］、次いて凍結乾燥し
た。

この凍結乾燥標品（４，５０ｍｇ）に混入している可能
性の最も高い物質は核酸である。そこで、紫外吸収曲線
（２００〜４００ｎｍ）をとり、２６０ｎｍでの吸光度
を求めた。吸光度１のときの核ｅＩａ度が５０μｇ／ｍ
ｌであることを用いて上記吸光度から核酸濃度を算出し
たら１％以下であった。又、ＳＤＳ電気泳動ては蛋白質
は明確には検出されなかった。従って、検出感度を考慮
すると、上記凍結乾燥標品に混入している蛋白質は高／
７０〜３％と推定される。従って、上記凍結乾燥標品の
純度は９６％以上と推定された。

製造例１に記載の方法と同様にして測定されたこの百日
咳菌ＬＰＳの物性は次の通りであった。

百日咳菌ＬＰＳの物性 分子量＝６，０００±１，０００． ９．０００±１，０００ （複数観察されたクマシー染色帯のうち、染色強度が最
高の２つの染色帯の値である。） リン数＝５７分子量８千 ヘキソサミン数＝１６±２７分子量８千脂肪酸数＝５７
分子量８千 ＫＤＯ数＝２±１７分子量８千 なお、製造例１に記載の方法と同様にして測定された大
腸菌ＬＰＳ　［米国デイフコ（Ｄｉｒ：ｏ）社！！０１
２８　：　８８］の物性は次の通りであった。

大腸菌ＬＰＳの物性 分子量＝３０．ＯＯＯ＋５．０００ （階段状に連続したクマシー染色帯のうち、染色強度が
最高のものの値である。）リン教＝１２／分子ｔ３万 ヘキソサミン数＝４５±６／分子１１３万脂肪酸数＝１
８／分子量３万 ＫＤＯ数＝５±１７分子１ｉ３万 以下は、本発明のＬＰＳを含む製剤の処方例である。な
お、ＬＰＳ量は、リムラステストによる大Ｉｌ！菌ＬＰ
Ｓ換算量である。

実施例１　（錠剤） 小麦ＬＰ３　　　　　　　　０．０４ｇ６％ＨＰＣ乳糖
　　　　　　　１７８ｇステアリン酸タルク　　　　　
　　　８ｇバレイショデンブン　　　　　　　１４ｇ以
上を混和し、打錠して、０．１ｍｇの小麦ＬＰＳを含む
０．５ｇの錠剤４００個を調製した。

実施例２（内用液剤） クロレラＬＰＳ １　　ｍ　　ｇ 精製水 １００　ｍ　党 実施例３（軟膏剤） 小麦ＬＰＳ ０　、１　ｇ 精製ラノリン ０ｇ ０００ｇ 実施例４（注射剤） 小麦ＬＰＳ ０、　５ｍｇ 合計 １０００ｍ　弛 実験例１（リムラステスト陽性植物ＬＰＳの定Ｉ）各種
植物に含まれるリムラステスト陽性ＬＰＳの定量を、生
化学工業株式会社のトキシカラーシステムを使って行っ
た。

■９６大の平底または丸底プレートに注射用蒸留水を１
穴当たり１８０μ免入れた。ＫＦ４２ｏμ２（試料が固
体の場合には注射用蒸留水に溶解して調製した）をプレ
ートの穴の１つに加えた。プレートミキサーで攪拌しな
がらピペッティングを行って１０倍希釈淑をＳｒ１製し
た。（以後、順次希釈試料を２０μλずつとり、同様に
処理することて１００倍、Ｉ　０００倍、・・・と１θ
倍希釈系列液を調製できる。また、注射用蒸留水と試料
の量比を変えることにより希釈率は任意に設定できる。

）■内部標準として１．５μｇ／ｍｌの大腸菌ＬＰＳ溶
液の１００，０００倍希釈液を調製し、希釈やリムラス
テスト発色が正常であることを確認した。

■上記■の１０倍希釈液３５μ琵を別のプレートの穴に
とり、生化学工業株式会社のトキシカラーシステムのＬ
Ｓ−１セツト３５μ地を添加し、３７℃で３０分間放置
した。ついて１０５μｉの１Ｍ酢酸水を加えて攪拌して
反応を停止させた。

この試料液の波長４１５ｎｍでの吸光度を、９６穴用吸
光度計プレートリーダーＭＴＰ−１００（コロナ！気株
式会社製）で測定した。ハックグランドとしては蒸留水
を、検量線作成用としては４２ｐｇ／ｍａの生化学工業
株式会社のトキシカラーシステムのＥＴ−１セツトを使
用して検量線を作成し、この検量線を基準にして各試料
中のリムラステスト陽性ＬＰＳの定量を行った。（試料
が蒸留水である場合の吸光度をＯとした。、）なお、こ
の方法で前記ＬＳ−１セットを使用した場合にはＩＯ〜
４５　ｐ　ｇ／ｍ９．の範囲内て発色に定量性があるこ
とが確認されたので、この範囲に入らないときは、希釈
率を変えて再実験した。

希釈試料の定量値は、 （検ＩＩ！から読み取った値）×（希釈率）で計算した
。

得られた結果を、固体試料の場合にはｎｇ／ｇ単位で、
液体試料の場合にはｎｇ／ｒｎλ単位て次表１に示す。

なお、表中の試料の欄の会社名、地名等は、当該試料の
入手先、産地をさす。かかる記載がない品はスーパース
トアー忠実屋の神奈川県津久井郡中野町店で購入した品
で、製造者が不明なものを指す。

表　　　１ ツムラステスト陽性 試料（固体）　　　　　　ＬＰＳ量　（ｎ　　）裸子植
物 松の実（興南貿易）　　　　　　　　　　１２５単子葉
類 硬質系小麦種子（千葉製粉）　　　　　２，２５０硬質
系小麦種子（千葉製粉） （分子１ｉ５０００以上）　　　１，０００，０００硬
質系小麦粉（千葉製粉）　　　　　７，５００小麦ふす
ま（千葉製粉） （分子ｆｆ１５０００以上）　　　　　　　　　３００
小麦胚芽（千葉製粉）　　　　　　　　１，６００小麦
胚芽（千葉製粉） （分子量５０００以上）　　　　　＜１０，０００玄米
　　　　　　　　　　　　　　　１，１００米粉（日の
本穀粉） （分子量５０００以上）　３ 米ぬか 米ぬか（分子量５０００以上） コーンフラワー（大洋飼料） （分子量５０００以上） コーングリッツ（大洋飼料） （分子ｊ１５０００以上） コーン（和光食ｔり クマ笹（開本物産） アヤメ（種子） ニンニク（鱗茎） アスパラガス（芽） ミョウガ（花房） ヨクイニン（ウチダ和漢ｇり （原Ｍ物は鳩麦） ハンゲ（松浦薬業） （原植物はカラスビシャク） バクモントウ（栃木天海掌） （原植物はジャノヒゲ） １、　０００．　０００ ２９、　０００ ５００、　０００ 〈　０ １５．０００ ３、　３００ ４、　５００ ４１、　０００ ２、　３００ ５、　５００ ４、　０００ ターメリック（エスピー食品ン　　１９５，０００（原
植物はウコン） 双子葉類 大豆（王女食品ン　　　　　　　　　　　　１５０大豆
（はくれん）（分子１１５０００以上）４００丹波黒大
豆（和光食糧）８５ 小豆く和光食糧）　　　　　　　　　　　　４５０小豆
（和光食糧） （分子量５０００以上’）　　３６，０００，０００ひ
たし豆（和光食糧）　　　　　　　　　８００大正金時
（和光食糧）　　　　　　　　　　５５０大福豆（和光
食糧）　　　　　　　　　　３５０そら豆（生）　　　
　　　　　　　　　　７５０ジヤガイモ（はぐれん） （分子量５０００以上）　　　　　　　　＜０．３ビワ
（種子）　　　　　　　　　　　　　　８００アボガド
（種子）　　　　　　　　　　　９５０モモ（種子）　
　　　　　　　　　　　４，５００クルミ（種子）　　
　　　　　　　　　１，９００ソラ豆（種子）　　　　
　　　　　　　　７５０カポチヤ（種子） トマト（生の実） カイワレダイコン（根を除く） マツタビ（丸久物産） アマチ十ズル（Ｋ、に、桜井） ドクダミ（湿潤重量当たり） （帝京大学薬用植物園） 胡＃Ｉ（白）（エスピー食品） トウガラシ（真南貿易） 六角（真南貿易） ナツメグ（ライオン） （［ｉ物はニクズク） トウヒ（ウチダ和漢薬） （原植物はダイダイ） カッコン（栃木天海堂） （原植物はクズ） ナンキンカンゾウ（ウチダ和漢薬） オタネニンジン（ウチダ和漢薬） ボウフウ（栃木天海堂） １０、　０００ ！０．　５００ ５０、　０００ ４０、　０００ ７３、　０００ １．２００ ２、　３００ ２、　３００ ５、　５００ ２、　０００ ８、　０００ ３、　０００ １８、　０００ ４　δ　、　０００ ５０、　０００ カンボウィ（栃木天海堂）　　　　６００，０００（原
植物はオオッヅラフジ） チョウトウコラ（ウチダ和漢薬）　　　７，０００（原
植物はウンカリア・ヒルスタ） 八味地黄丸（カネボウ薬品）　　　　１７，０００小柴
胡濁（ツムラ）　　　　　　　　　１３．０００五苓１
（ツムラ）　　　　　　　　　　１２，０００猪苓湯（
ツムラ）　　　　　　　　　　１４．０００十全大補′
ＩＢ（ツムラ）　　　　　　　　８．ｏｏ。

八味地黄丸（ツムラ＞　　　　　　　　　ｓ、ｏｏ。

ローヤルゼリー　　　　　　　　　　１．０００［ペキ
ン　ローヤル　ゼリー （Ｐｅｋｉｎ　　Ｒｏｙａｌ　　Ｊｅｌ　Ｉｙ）ハチミ
ツ（加藤美峰園本舗）　　　　　　　８００シダ植物 スギナ（湿潤重量当たり）　　　　　　　　　７００（
帝京大学薬用植物ＩＩ） ゼンマイ（開本物産）　　　　　　　　１０，０００ソ
ウ類 わかめ（三陸天然品）　　　　　　　　１１，０００わ
かめ芽株（４谷健康食品〕 ひしき（生） 芽ひしきく小善本店） コブ（ヤマトタ力ハシ） アサクサノリ（乾燥生ノリ） クロレラ （■ヘルスタージャパンＹＳ） クロレラ （■マンナンフーズＹ５） 菌類 椎茸（下仁田産ン えのき茸（長野県中懸重） しめしく勢多郡宮城町） まいたけ（大利根） あわび茸（羽生） マツシュルーム きくらげ ナメコ エビオス（アサヒビール社製 ビール酵母） ２００　。

８５　。

１０５　。

２３５　。

１３０　。

１、　９００゜ １、　０００゜ 】　６　。

２０　。

４０　。

２０５　。

８　。

２０　。

７５　。

２１　。

２５０　。

　ＯＯ 冬虫夏＊　　　　　　　　　　　　２４０，０００その
他 雪印ナチュレヨーグルト（■１印）　　５，０００グリ
コビフイズスヨーグルト（■グリコ）５０試料（液体） リムラステスト陽性 ＬＰＳ量　（ｎ　　） ビール キリン アサヒ ファインビルスナー ラガービール ハートラント ファイントラフト スーパーイースト ワイン １、　１５０ １、　２５０ １、　５５０ １、　４００ サントリー サントネージュ（白） （赤） ジードル（アップル） 日本酒 大間−級（大間酒造） 黄桜二級（黄桜酒造） ２　、４ 】　、　７ 大寒吟醜二級（玉泉窒酒造） 玄米イ酉 日々−献（大間酒造） 薬味酒 陶陶酒デルカップ（陶陶酒本１ｍ） 宝焼耐（宝酒造） その他 キョーしオピン（湧水製薬） ニンニク抽出液（湧水製薬） グロスキュー（クロレラ工業） 大麦健康メツコール（韓国・−和） サクロンハーブ液（エーザイ） ヘチマ水（自家製） パイオアルゲン（クロレラ工業） パンシロン内服液（ロート製薬） ユンケルファンティー（佐原製薬） コリホグス（小林製薬） ツディ（二接） ミオＤコーワ１００（コーリ） １．２ ＜２．０ ６、　０００ ２、　０００ １、　０００ ノゲイン（二接）　　　　　　　　　　　　　９０ブレ
ン５０（第−Ｉ！薬）　　　　　　　　　７ソルマソク
（大Ｓ製藁）　　　　　　　　　　　６０−ゼリーゴー
ルト（中外製薬）　　　　　　５バスビタン３０（常盤
製薬）　　　　　　　　５チオビタ（太鵬製薬）　　　
　　　　　　　５未満リボビタン（大正製菓）　　　　
　　　　５未満アスハラゴールト（田辺製薬）　　　　
　５未満実験例２（マクロファージのインビト０ＴＮＦ
産生能を活性化する際のＥＤ５０を与えるリムラステス
ト陽性ＬＰＳの含有量が０゜ ４〜１１００ｎ／培養液ｍｌであるＬＰＳの選択方法） ９週齢の、平均体重２９ｇの各群３匹のオスのＣ３Ｈ／
Ｈｅマウスのマクロファージ腹腔常在細胞２００μ見（
２Ｘ１０５個）／穴を９６穴の平底プレートに入れ、ブ
ライマーとしての組換えマウス１．ＦＮ−７（１００単
位／　ｍ　ｌ）を各式に１０μλ宛加えた。別途、各種
ＬＰＳＲを６５℃の熱水（ｇ／ｍｃ）で５時間抽出して
７１製した抽出液を各鵠希釈し、その１Ｏｕ９／穴をブ
ライマー投与の３時間後にトリガーとして加えた。２時
間培Ｍ後に遠心分離操作に付した（３０００ｇ、２０分
）。各式から得られた１３０μλの、ＴＮＦ活性はＬ９
２９纏胞に対する毒性に基づいて測定し、又、リムラス
テスト陽性ＬＰＳ含有量は生化学工業株式会社のトキシ
カラーシステムを使用して測定した。

測定値を、縦軸にＴＮＦ産生量（単位／培養液ｍｌ）を
、横軸（対数尺）に対応リムラステスト陽性ＬＰＳ含有
量（ｎｇ／培養液ｍｌ）を表す座標にプロットし、プロ
ットされた各点から推定されるシグモイド曲線を描いた
。トリガーを投与しなかった場合のＴＮＦ産生量を与え
る各トリガーのマクロファージ活性化能を０％とし、ト
リガー投与の効果として増大するＴＮＦ産生量が最大恒
量に達したときの各トリガーのマクロファージ活性化能
を１００％とし、その５０％に相当するマクロファージ
活性化能を与えるリムラステスト陽性ＬＰＳ含有量を曲
線から読み取った。

マクロファージ活性化能とリムラステスト陽性ＬＰＳ含
有量との相ｒＩ！Ｊ間係が上記条件を満たしたＬＰＳ採
取源の結果を次の表２に示す。表中で、ｒＴＮＦＪはＴ
ＮＦ産生量（単位／培養液ｍｕ）を、「活性化能」はマ
クロファージ活性化能（％）を、「ＬＰＳ」はリムラス
テスト陽性ＬＰＳ含有量（ｎｇ／培！Ｉ液ｍλ）を表す
。なお、トリガー漸添加時のＴＮＦ産生量は０．７５単
位／　ｍ　ｌであったので、ＴＮＦ産生量が０．７５単
位／ｍＱ。

以下である場合をマクロファージ活性化能θ％とし、マ
クロファージ活性化能（％）は次式により計算した。

表　　２ 表２に示された結果を第４〜７図に示す。

１．４〜７図において、縦軸はマクロファージ活性化能
（％）を表し、横軸（対数尺）はリムラステスト陽性Ｌ
ＰＳ含有量（ｎｇ／培養液ｍ１Ｌ）を表している。

第４図において、Ｑはターメリックの、・はカンボーイ
の、口はコンブの、■はアサクサノリのデータを示す。

第Ｓ図において、○はワカメ芽株エキスの、口は芽ヒジ
キの、■はエビオスのデータを示す。

第６図において、○は冬虫夏草の、・はワカメ芽株の、
口はクロレラのデータを示す。

第７図において、○は大腸菌ＬＰＳの、・は小麦ＬＰＳ
の、口は百日咳菌ＬＰＳの、■はリピトＡのデータを示
す。

実験例３（抗消化性潰瘍効果の測定） 各群３匹のＣ３Ｈ／Ｈｅマウス（１２週齢の雄、平均体
重２５ｇ）を２４時閏絶食させた。但し、水は自由に摂
取させた。

各群にそれぞれ５０ｍｇ／匹の、製造例１の■て得られ
た粉末Ａ　　ａ　２　（９００μｇ／ｇのリムラステス
ト陽性ＬＰＳを含む）、■マンナンフーズＹＳから市販
されている纏胞膜破砕クロレラ（３ｍｇ／ｇのリムラス
テスト陽性ＬＰＳを含む）、蒸留水をゾンデて経口投与
し、その１時間後に１．５ｍｇのインドメタシンを各マ
ウスに皮下投与し、腺胃に胃ａｇｉを発生させた。

インドメタシン投与の７時間後に胃を摘出し、２％ホル
マリンで固定した。病変部を切開し、潰瘍の数、長さ、
面積を測定した。結果を各群３匹の平均として次表３に
表す、なお、カッコ内のデータは、蒸留水投与群の値を
１００％とした場合の割合を表している。なお、製造例
１て得られた小麦ＬＰＳを３μｇ静注した場合には潰瘍
発生はほぼ１００％予防された。

表　３ 本発明のＬＰＳを抗消化性潰瘍剤、動物用抗消化性ｉｌ
ｌ　瘍剤として投与するさいの量、投与間隔は、当然、
担当医師或いは獣医師の厳重な管理下、投与対象の年齢
、症状、体重、投与効果を勘案して個別に決定されるが
、人臣の成人（６０ｋ　ｇ）で、経口投与で１μｇ　−
１００ｍ　ｇ、静脈投与でｌＯｒｌｇ−１ｍｇ、経皮投
与で１００　ｎ　ｇ　−１ｍ　ｇが１８１回の投与量の
一応の目安となる。なお、動物では、牛、馬等の大型動
物は上記の量の６０分の１を体重１ｋｇ当たりの量の目
安とし、豚、犬、猫等の中型、小型の動物ではその２倍
量を体重１ｋｇ当たりの量の目安とし、鶏等の鳥類では
更にその２倍量を体重１ｋｇ当たりの量の目安とし投与
できる。

又、小麦ＬＰＳ　（製造例］）、クロレラＬＰＳ（製造
例２）、大腸菌ＬＰＳ　［米国デイフコ＜Ｄｉｒｃｏ）
？ｆ製０１２８：Ｂ８＞、百日咳菌ＬＰＳ　（製造例３
）の毒性値ＬＤ５９（１群２匹の雄ＢＡＬＢ／Ｃマウス
、平均体重４５ｇ、における平均値）は次の通りであっ
た。

［発明の効果］ 本発明により、抗消化性潰瘍効果が高くて副作用が少な
く、従って化学療法係数が高く、かつ、生産コストが低
く、しかも、経口、経皮、注射ての投与が可能であり、
かつ大量に供給可能であり、その上、毎日食すことが可
能な食品の内に配合可能な新規な抗消化性［１剤、動物
用抗消化性Ｊ１瘍が提供される。

【図面の簡単な説明】

第１図は、小麦ＬＰＳをガスクロマトグラフィにかけて
得られる、分子中における脂肪酸の存在を示すピークを
図示したチャートである。 第２図は、大Ｉ細菌ＬＰＳをガスクロマトグラフィーに
かけて得られる、分子中における脂肪酸の存在を示すピ
ークを図示したチャートである。 第３図は、百日咳菌ＬＰＳをガスクロマトグラフィーに
かけて得られる、分子中における脂肪酸の存在を示すピ
ークを図示したチャートである。 第４〜７図は、マクロファージ活性化能とリムラステス
ト陽性ＬＰＳ含有量との相間間係が本発明の条件を満た
している各！ＬＰＳの当該相Ｒ間係を示すグラフである
。 第４〜７図において、縦軸はマクロファージ活性化能（
％）を表し、横軸（対数尺）はリムラステスト陽性ＬＰ
Ｓ含有量（ｎｇ／培養液ｍｌ）を表している。 第４図において、○はターメリックの、・は力ンボーイ
の、口はコンブの、層はアサクサノリのデータをボす。 第５図二二おいて、○はワカメ芽株エキスの、・は芽ヒ
ジキの、口はエビオスのデータを示す。 第６図において、○は冬虫夏草の、・はワカメ芽株の、
口はクロレラのデータを示す。 第７図において、Ｏは大腸菌ＬＰＳの、・は小麦ＬＰＳ
の、口は百日咳＠ＬＰＳの、■はリピドＡのデータを示
す。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）ＬＰＳを含む抗消化性潰瘍剤であり、インビトロ
   で培養されるマクロファージのＴＮＦ産生能を活性化す
   るＬＰＳのマクロファージ活性化能を指標とし、 縦軸に、そのＬＰＳを添加しないときのマクロファージ
   のＴＮＦ産生量を与えるマクロファージ活性化能を０％
   、マクロファージのＴＮＦ産生量を最大恒量にする時の
   ＬＰＳのマクロファージ活性化能を１００％とするマク
   ロファージ活性化能（％）を表し、横軸に、そのＬＰＳ
   のリムラステスト陽性ＬＰＳ含有量を対数尺で表すシグ
   モイド曲線を描くとき、 マクロファージ活性化能のＥＤ＿５＿０を与えるリムラ
   ステスト陽性ＬＰＳ含有量が０．４〜１００ｎｇ／培養
   液ｍｌであるＬＰＳの少なくとも１種を含む抗消化性潰
   瘍剤。 （２）ＬＰＳが、植物から得られるＬＰＳ、細菌から得
   られるＬＰＳ及びリピドＡからなる群から選択される、
   請求項１記載の抗消化性潰瘍剤。 （３）植物が裸子植物、単子葉類植物、双子葉類植物、
   シダ植物、ソウ類植物、菌類植物及びそれらの混合物か
   らなる群から選択されるものである、請求項２記載の抗
   消化性潰瘍剤。 （４）裸子植物がマツ科マツ属植物である、請求項３記
   載の抗消化性潰瘍剤。 （５）マツ科マツ属植物がマツである、請求項４記載の
   抗消化性潰瘍剤。 （６）単子葉類植物がイネ科のイネ属植物、コムギ属植
   物、オオムギ属植物、カラス麦属植物、ササ属植物、ジ
   ュズダマ属植物、アヤメ科のアヤメ属植物、ユリ科のネ
   ギ属植物、キジカクシ属植物、ジャノヒゲ属植物、ショ
   ウガ科のショウガ属植物、ウコン属植物、サトイモ科ハ
   ンゲ属植物及びそれらの混合物からなる群から選択され
   るものである、請求項３記載の抗消化性潰瘍剤。 （７）イネ科イネ属植物がイネである、請求項６記載の
   抗消化性潰瘍剤。 （８）イネ科コムギ属植物が小麦である、請求項６記載
   の抗消化性潰瘍剤。 （９）イネ科オオムギ属植物が大麦、裸麦及びそれらの
   混合物からなる群から選択されるものである、請求項６
   記載の抗消化性潰瘍剤。 （１０）イネ科カラス麦属植物が烏麦、燕麦及びそれら
   の混合物からなる群から選択される、請求項６記載の抗
   消化性潰瘍剤。 （１１）イネ科ササ属植物がクサ笹である、請求項６記
   載の抗消化性潰瘍剤。 （１２）イネ科ジュズダマ属植物が鳩麦である、請求項
   ６記載の抗消化性潰瘍剤。 （１３）アヤメ科アヤメ属植物がアヤメである、請求項
   ６記載の抗消化性潰瘍剤。 （１４）ユリ科ネギ属植物がニンニクである、請求項６
   記載の抗消化性潰瘍剤。 （１５）ユリ科キジカクシ属植物がアスパラガスである
   、請求項６記載の抗消化性潰瘍剤。 （１６）ユリ科ジャノヒゲ属植物がジャノヒゲである、
   請求項６記載の抗消化性潰瘍剤。（１７）ショウガ科シ
   ョウガ属植物がミョウガである、請求項６記載の抗消化
   性潰瘍剤。（１８）ショウガ科ウコン属植物がウコンで
   ある、請求項６記載の抗消化性潰瘍剤。 （１９）サトイモ科ハンゲ属植物がカラスビシャクであ
   る、請求項６記載の抗消化性潰瘍剤。 （２０）小麦から得られるＬＰＳが次の物性を有するも
   のである、請求項８記載の抗消化性潰瘍剤。 分子量：８，０００±１，０００（ＳＤＳ電気泳動法） リン数：１以上／分子量８千 ヘキソサミン数：６±２／分子量８千 脂肪酸数：６±２／分子量８千 ＫＤＯ数：５±１／分子量８千 （２１）双子葉類植物がマメ科のダイズ属植物、インゲ
   ンマメ属植物、ソラマメ属植物、クズ属植物、カンゾウ
   属植物、ナス科のナス属植物、トマト属植物、トウガラ
   シ属植物、バラ科のビワ属植物、サクラ属植物、クスノ
   キ科アボガド属植物、クルミ科クルミ属植物、ウリ科の
   トウナス属植物、アマチャヅル属植物、アブラナ科ダイ
   コン属植物、マタタビ科マタタビ属植物、ドクダミ科ド
   クダミ属植物、コショウ科コショウ属植物、シキミ科シ
   キミ属植物、ニクズク科ニクズク属植物、ミカン科ミカ
   ン属植物、ウコギ科オタネニンジン属植物、セリ科サポ
   シュニコビア属植物、ツヅラフジ科オオツヅラフジ属植
   物、アカネ科カギカズラ属植物及びそれらの混合物から
   なる群から選択されるものである、請求項３記載の抗消
   化性潰瘍剤。 （２２）マメ科ダイズ属植物が大豆である、請求項２１
   記載の抗消化性潰瘍剤。 （２３）マメ科インゲンマメ属植物が小豆である、請求
   項２１記載の抗消化性潰瘍剤。 （２４）マメ科ソラマメ属植物がそら豆である、請求項
   ２１記載の抗消化性潰瘍剤。 （２５）マメ科クズ属植物がクズである、請求項２１記
   載の抗消化性潰瘍剤。 （２６）マメ科カンゾウ属植物がナンキンカンゾウであ
   る、請求項２１記載の抗消化性潰瘍剤。 （２７）ナス科ナス属植物がジャガイモ、トウガラシ及
   びそれらの混合物からなる群から選択されるものである
   、請求項２１記載の抗消化性潰瘍剤。 （２８）ナス科トマト属植物がトマトである、請求項２
   １記載の抗消化性潰瘍剤。 （２９）ナス科トウガラシ属植物がトウガラシである、
   請求項２１記載の抗消化性潰瘍剤。 （３０）バラ科ビワ属植物がビワである、請求項２１記
   載の抗消化性潰瘍剤。 （３１）バラ科サクラ属植物がモモである、請求項２１
   記載の抗消化性潰瘍剤。 （３２）クスノキ科アボガド属植物がアボガドである、
   請求項２１記載の抗消化性潰瘍剤。 （３３）クルミ科クルミ属植物がクルミである、請求項
   ２１記載の抗消化性潰瘍剤。 （３４）ウリ科トウナス属植物がカボチャである、請求
   項２１記載の抗消化性潰瘍剤。 （３５）ウリ科アマチャヅル属植物がアマチャヅルであ
   る、請求項２１記載の抗消化性潰瘍剤。 （３６）アブラナ科ダイコン属植物がカイワレダイコン
   である、請求項２１記載の抗消化性潰瘍剤。 （３７）マタタビ科マタタビ属植物がマタタビである、
   請求項２１記載の抗消化性潰瘍剤。 （３８）ドクダミ科ドクダミ属植物がドクダミである、
   請求項２１記載の抗消化性潰瘍剤。 （３９）コショウ科コショウ属植物が胡椒である、請求
   項２１記載の抗消化性潰瘍剤。 （４０）シキミ科シキミ属植物がダイウイキョウである
   、請求項２１記載の抗消化性潰瘍剤。 （４１）ニクズク科ニクズク属植物がニクズクである、
   請求項２１記載の抗消化性潰瘍剤。 （４２）ミカン科ミカン属植物がダイダイである、請求
   項２１記載の抗消化性潰瘍剤。 （４３）ウコギ科オタネニンジン属植物がオタネニンジ
   ンである、請求項２１記載の抗消化性潰瘍剤。 （４４）セリ科サポシュニコビア属植物がボウフウであ
   る、請求項２１記載の抗消化性潰瘍剤。 （４５）ツヅラフジ科オオツヅラフジ属植物がオオツヅ
   ラフジである、請求項２１記載の抗消化性潰瘍剤。 （４６）アカネ科カギカズラ属植物がウンカリア・ヒル
   スタである、請求項２１記載の抗消化性潰瘍剤。 （４７）シダ植物がトクサ科トクサ属植物、ゼンマイ科
   ゼンマイ属植物及びそれらの混合物からなる群から選択
   されるものである、請求項３記載の抗消化性潰瘍剤。 （４８）トクサ科トクサ属植物がスギナである、請求項
   ４７記載の抗消化性潰瘍剤。 （４９）ゼンマイ科ゼンマイ属植物がゼンマイである、
   請求項４７記載の抗消化性潰瘍剤。 （５０）ソウ類植物がカッソウ類植物、紅ソウ類植物、
   緑ソウ類植物、ランソウ類植物及びそれらの混合物から
   なる群から選択されるものである、請求項３記載の抗消
   化性潰瘍剤。 （５１）カッソウ類植物がコンブ科のワカメ属植物、コ
   ンブ属植物、ホンダワラ科ヒジキ属植物及びそれらの混
   合物からなる群から選択されるものである、請求項５０
   記載の抗消化性潰瘍剤。 （５２）コンブ科ワカメ属植物がワカメである、請求項
   ５１記載の抗消化性潰瘍剤。 （５３）コンブ科コンブ属植物がコンブである、請求項
   ５１記載の抗消化性潰瘍剤。 （５４）ホンダワラ科ヒジキ属植物がヒジキである、請
   求項５１記載の抗消化性潰瘍剤。（５５）紅ソウ類植物
   がウシケノリ科アマノリ属植物である、請求項５０記載
   の抗消化性潰瘍剤。 （５６）ウシケノリ科アマノリ属植物がアサクサノリで
   ある、請求項５５記載の抗消化性潰瘍剤。 （５７）緑ソウ類植物がオオシスティス科クロレラ属植
   物である、請求項５０記載の抗消化性潰瘍剤。 （５８）オオシスティス科クロレラ属植物がクロレラで
   ある、請求項５７記載の抗消化性潰瘍剤。 （５９）クロレラから得られるＬＰＳが次の物性を有す
   るものである、請求項５８記載の抗消化性潰瘍剤。 分子量＝４０，０００〜９０，０００（ＳＤＳ電気泳動
   法） リン数＝４±１／分子量１万 ヘキソサミン数＝７±１／分子量１万 脂肪酸数＝６±１／分子量１万 ＫＤＯ数＝２±１／分子量１万 （６０）菌類植物が担子菌類植物、子ノウ菌類植物及び
   それらの混合物からなる群から選択されるものである、
   請求項３記載の抗消化性潰瘍剤。 （６１）担子菌類植物がヒラタケ科マツオウジ属植物、
   キシメジ科のエノキタケ属植物、シメジ属植物、タコウ
   キン科マイタケ属植物、サルノコシカケ科ポリポラス属
   植物、ハラタケ科ハラタケ属植物、キクラゲ科キクラゲ
   属植物、モエギタケ科スギタケ属植物及びそれらの混合
   物である、請求項６０記載の抗消化性潰瘍剤。 （６２）ヒラタケ科マツオウジ属植物が椎茸である、請
   求項６１記載の抗消化性潰瘍剤。（６３）キシメジ科エ
   ノキタケ属植物がエノキ茸である、請求項６１記載の抗
   消化性潰瘍剤。 （６４）キシメジ科シメジ属植物がシメジである、請求
   項６２記載の抗消化性潰瘍剤。 （６５）タコウキン科マイタケ属植物がマイ茸である、
   請求項６１記載の抗消化性潰瘍剤。 （６６）サルノコシカケ科ポリポラス属植物がアワビ茸
   である、請求項６１記載の抗消化性潰瘍剤。 （６７）ハラタケ科ハラタケ属植物がマッシュルームで
   ある、請求項６１記載の抗消化性潰瘍剤。 （６８）キクラゲ科キクラゲ属植物がキクラゲである、
   請求項６１記載の抗消化性潰瘍剤。 （６９）モエギタケ科スギタケ属植物がナメコである、
   請求項６１記載の抗消化性潰瘍剤。 （７０）子ノウ菌類植物がエンドミセタセア科サッカロ
   ミセス属植物、バッカクキン科ノムシタケ属植物及びそ
   れらの混合物である、請求項６０記載の抗消化性潰瘍剤
   。 （７１）エンドミセタセア科サッカロミセス属植物が、
   パン酵母、醸造用酵母及びそれらの混合物である、請求
   項７０記載の抗消化性潰瘍剤。 （７２）バッカクキン科ノムシタケ属植物が冬虫夏草で
   ある、請求項７０記載の抗消化性潰瘍剤。 （７３）細菌が大腸菌、百日咳菌及びそれらの混合物か
   らなる群から選択されるものである、請求項３記載の抗
   消化性潰瘍剤。 （７４）大腸菌から得られるＬＰＳが次の物性を有する
   ものである、請求項７３記載の抗消化性潰瘍剤。 分子量＝３０，０００±５，０００（ＳＤ Ｓ電気泳動法） リン数＝１２／分子量３万 ヘキソサミン数＝４５±６／分子量３万 脂肪酸数＝１８／分子量３万 ＫＤＯ数＝５±１／分子量３万 （７５）百日咳菌から得られるＬＰＳが次の物性を有す
   るものである、請求項７３記載の抗消化性潰瘍剤。 分子量＝６，０００±１，０００ ９，０００±１，０００ （ＳＤＳ電気泳動法） リン数＝５／分子量８千 ヘキソサミン数＝１６±２／分子量８千 脂肪酸数＝５／分子量８千 ＫＤＯ数＝２±１／分子量８千 （７６）ＬＰＳを含む動物用抗消化性潰瘍剤であり、 インビトロで培養されるマクロファージのＴＮＦ産生能
   を活性化するＬＰＳのマクロファージ活性化能を指標と
   し、縦軸に、そのＬＰＳを添加しないときのマクロファ
   ージのＴＮＦ産生量を与えるマクロファージ活性化能を
   ０％、マクロファージのＴＮＦ産生量を最大恒量にする
   時のＬＰＳのマクロファージ活性化能を１００％とする
   マクロファージ活性化能（％）を表し、横軸に、そのＬ
   ＰＳのリムラステスト陽性ＬＰＳ含有量を対数尺で表す
   シグモイド曲線を描くとき、 マクロファージ活性化能のＥＤ＿５＿８を与えるリムラ
   ステスト陽性ＬＰＳ含有量が０．４〜１００ｎｇ／培養
   液ｍｌであるＬＰＳの少なくとも１種を含む動物用抗消
   化性潰瘍剤。