JPH04324347A

JPH04324347A - 試験具

Info

Publication number: JPH04324347A
Application number: JP12235291A
Authority: JP
Inventors: Masufumi Koike; 益史小池; Takeshi Hayakawa; 剛早川; Yoshiaki Kanda; 善昭神田
Original assignee: Terumo Corp
Current assignee: Terumo Corp
Priority date: 1991-04-24
Filing date: 1991-04-24
Publication date: 1992-11-13
Also published as: EP0511120A1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、検体中の特定の成分を
検出、定量化するための試験具および成分検出方法に関
する。

【０００２】

【従来の技術】検体中の特定成分、例えば、血液中のグ
ルコース、コレステロール、尿酸、または尿中のグルコ
ース、ヘモグロビン等を検出するに際しては、例えば、
ポリエチレンテレフタレートのような樹脂で構成される
板状の支持体上に、検出すべき特定成分と反応して呈色
する試薬が担持された試薬層を積層した試験紙が用いら
れている。

【０００３】この試験具における試薬層の呈色強度（色
濃度）は、検体中の特定成分の量に応じたものとなるた
め、試薬層の呈色強度を光学的に測定することにより、
検体中の特定成分を定量することができる。

【０００４】また、さらに、試薬層上に検体を一様に展
開する展開層を設けた試験紙も開示されている。

【０００５】ところで、このような試験紙において、操
作性の向上や検体の浸透性の向上のために、試験紙をそ
の両面側から保持部材で挟持してなる試験具が開示され
ている（特開平０２−１７９４５０号）。この試験具の
保持部材には、検体を供給するための開口および試薬層
の呈色強度を測定するための開口が形成されている。

【０００６】また、展開層上に防水性層を積層し、この
防水性層に、検体を供給するための少なくとも１個の小
孔を形成してなる試験具も開示されている（実公昭６０
−３８２１６号）。この試験具によれば、防水性層によ
り試薬層中の水分の蒸発を防止し、保存性を向上するこ
とができる。

【０００７】しかしながら、このような試験具において
は、開口または小孔が形成されているものの、それ以外
の箇所は外気より遮断されており、よって、呈色反応に
必要な気体（大気中の酸素）を試薬層の全面に均一に供
給することができず、呈色ムラが生じることがあるとい
う問題がある。特に、実公昭６０−３８２１６号の試験
具では、防水性層は水分の蒸発を防止するものでり、か
つ検体は小孔を覆うように供給されるため、検体が小孔
内に充満し、試薬層は外気と遮断され、試薬層への酸素
の供給がなされなくなり、呈色反応が不完全となるかま
たは測定時間が長くなる。

【０００８】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、呈色
ムラを防止し、短時間で精度の良い測定ができる試験具
を提供することにある。

【０００９】

【課題を解決するための手段】このような目的は、下記
（１）〜（６）の本発明により達成される。

【００１０】（１）　　検体中の特定成分と反応して呈
色する試薬が担持された試薬層を有する試験紙と、この
試験紙を保持し、検体を供給する開口が形成された保持
部材とを備える試験具であって、前記保持部材には、前
記開口以外の通気用の小孔が形成され、この小孔を介し
て前記試薬層に気体を供給するよう構成したことを特徴
とする試験具。

【００１１】（２）　　前記保持部材は、互いに嵌合し
うる一対の保持部材片で構成され、両保持部材片により
前記試験紙を挟持して保持するものである上記（１）に
記載の試験具。

【００１２】（３）　　前記通気用の小孔は、前記開口
の周囲に形成されている上記（１）または（２）に記載
の試験具。

【００１３】（４）　　前記一対の保持部材片のうちの
一方に前記開口が形成され、他方に前記通気用の小孔が
形成されている上記（２）に記載の試験具。

【００１４】（５）　　前記通気用の小孔の直径が０．
５〜５ｍｍである上記（１）〜（４）のいずれかに記載
の試験具。

【００１５】（６）　　前記試験紙は、光透過性を有す
る支持体を有するものである上記（１）〜（５）のいず
れかに記載の試験具。

【００１６】

【実施例】以下、本発明の試験具を添付図面に示す好適
実施例に基づいて詳細に説明する。

【００１７】図１は、本発明の試験具の構成例を示す平
面図、図２は、図１に示す試験具の断面側面図である。これらの図に示すように、試験具１ａは、試験紙２を後
述する保持部材で保持したものである。

【００１８】試験紙２は、支持体３、試薬層４および展
開層５をこの順に積層したものである。

【００１９】支持体３は、例えば厚さが２０〜５００μ
ｍ　程度の板状をなしており、検体に対して不活性な材
料で構成されている。

【００２０】支持体２の具体的な構成材料としては、ポ
リエチレンテレフタレート、セルロースエステル（セル
ロースジアセテート、セルローストリアセテート、セル
ロースアセテートプロピオネート等）、ビスフェノール
Ａのポリカーボネート、ポリメチルメタクリレート、ポ
リ塩化ビニル、ポリプロピレン、ポリスチレン、ポリビ
ニルアルコール等の各種樹脂、またはガラス等が挙げら
れる。また、支持体２は、上記のうち、２種以上の材料
によるシートを積層したものでもよい。

【００２１】このような支持体３は、光透過性を有する
もの、すなわち、透明または半透明なものであるのが好
ましい。

【００２２】この試薬層４は、担体に、後述する試薬を
担持したものである。

【００２３】この担体としては、非繊維性または繊維性
の多孔質材で構成されているのが好ましい。

【００２４】非繊維性多孔質材としては、メンブランフ
ィルターが代表的であり、その他、珪藻土、微結晶材料
等の多孔体を結合剤中に分散した分散物、ガラスや樹脂
の微小球形ビーズを互いに点接着させた多孔質の集合体
等が挙げられる。

【００２５】また、繊維性多孔質材としては、織編物、
不織布、濾紙、短繊維の集合体等が挙げられる。ここで
、織編物とは、織物、編物またはこれに類するものを含
む。

【００２６】織物組織としては、実用に供されている全
ての種類のもの、例えば、平織、斜文織、朱子織が使用
可能である。

【００２７】また、編物組成についても特に限定はなく
、例えば、よこ編み（平編み）、たて編み（トリコット
編み）、丸編み、平打ち、メリヤス編み等が挙げられる
。

【００２８】このような織編物による担体は、後述する
塗布液の塗布、乾燥により形成される試薬層に比べ、検
体またはその成分の浸透性および酸素等の呈色反応に必
要な気体の透過性が優れている。特に、コレステロール
のような油性の成分でも容易に浸透するため、このよう
な成分を検出するための試験具として用いるのにも適し
ている。

【００２９】なお、試薬層４の担体として、例えば平織
物、平編物のような織り方、編み方に規則性があるもの
を用いた場合には、検体が担体に均一に浸透し、試薬層
４の単位面積当りの検体量を一定とすることにより呈色
ムラを防止することができ、好ましい。

【００３０】このような織編物に代表される繊維性多孔
質材を構成する繊維としては、例えば、綿、カボック、
亜麻、***、ラミー、絹、羊毛等の天然繊維、ナイロン
、テトロン、レーヨン、キュプラ、アセテート、ビニロ
ン、アクリル、ポリエチレンテレフタレート等の化学繊
維、またはこれら天然および化学繊維のうちの２以上の
組合せ（例えば、ナイロンとテトロンの混紡）を挙げる
ことができる。

【００３１】また、これらの繊維の太さは、その種類に
もよるが、通常、０．１〜１．０デニール程度のものが
好ましい。

【００３２】このような担体は、親水性を有するもので
あるのが好ましい。これにより、検体の浸透、拡散が促
進されるからである。

【００３３】このようなものとしては、担体を構成する
材料自体が親水性を有するもの（例えば、綿、絹、ナイ
ロン等の繊維で構成されているもの）の他、担体に親水
化処理を施したものが挙げられる。

【００３４】親水化処理の方法としては、担体をよく洗
浄して、糊やその他の加工剤を除去するといった簡易な
方法でもよいが、好ましくは、担体に後述する界面活性
剤を付与するのがよい。

【００３５】界面活性剤の付与は、例えば、洗浄後の担
体を界面活性剤溶液（例えば、０．０５〜５％）に浸漬
するか、または同様の界面活性剤溶液を担体にスプレー
した後、乾燥する方法により行われる。

【００３６】界面活性剤の種類としては、水溶性のノニ
オン（非イオン）、カチオン、アニオン、両性界面活性
剤のいずれをも用いることができる。特に、ノニオン性
界面活性剤、例えば、ジメチルシロキサン−メチル（ポ
リオキシエチレン）共重合体、ポリオキシエチレンやポ
リグリセリンのアルキルアリールエーテルまたは脂肪酸
エステル、ソルビタンエステル等が好ましい。また、ジ
−２−エチルヘキシルスルホこはく酸ナトリウム（Ａｅ
ｒｏｓｏｌ−ＯＴ）、トリトンｘ−１００、ラウリル硫
酸ナトリウム、コール酸ナトリウム等を用いることもで
きる。

【００３７】また、担体を親水化処理する他の方法とし
て、ポリビニルアルコールのごとき親水性ポリマー水溶
液、または酸化チタン、硫酸バリウム等の微粉体やグリ
セリン、ポリエチレングリコール等の湿潤剤を含有する
親水性ポリマー水溶液で織編物を濡らした後、乾燥する
方法も可能である。この場合、親水性ポリマー水溶液の
濃度は、０．１〜５．０ｗｔ％　程度とするのが好まし
い。

【００３８】さらには、担体にプラズマ処理等を施して
親水化してもよい。

【００３９】試薬層４の厚さは、担体の素材や性状等に
より異るが、通常、１〜５００μｍ程度、特に、５〜３
００μｍ　程度とするのが好ましい。

【００４０】試薬層４には、以下に示す試薬が担持され
ている。

【００４１】試薬の組成は、検体中の検出（定量）すべ
き特定成分により適宜決定される。例えば、検体中のブ
ドウ糖を検出する場合には、酵素であるグルコースオキ
シダーゼ（ＧＯＤ）およびペルオキシダーゼ（ＰＯＤ）
と、発色剤（色原体）とが試薬の主成分である。

【００４２】また、上記酵素に代り、コレステロールオ
キシダーゼおよびコレステロールエステラーゼとペルオ
キシダーゼ、リポプロテインリパーゼおよびグリセロー
ルオキシダーゼとペルオキシダーゼ、ホスホリパーゼＤ
およびコリンオキシダーゼとペルオキシダーゼ等であっ
てもよい。

【００４３】また、検体中（尿）中の潜血（ヘモグロビ
ン）を検出する場合には、ヒドロペルオキシドと、発色
剤とが試薬の主成分である。

【００４４】ヒドロペルオキシドとしては、ビス［４−
（α−ヒドロペルオキシイソプロピル）ベンジル］エー
テル、２，５−ジメチルヘキサン−２，５−ジヒドロペ
ルオキシド、クメンヒドロペルオキシド、２，５−ジメ
チルヘキサノン−２，５−ジヒドロペルオキシド、ジイ
ソプロピルベンゼンヒドロペルオキシド、ｔ−ブチルヒ
ドロペルオキシド、ｐ−メンタンヒドロペルオキシド、
４−メチルフェニルイソプロピルヒドロペルオキシド等
が挙げられる。

【００４５】発色剤としては、ｏ−トリジン、ｍ−トリ
ジン、ベンジジン、テトラメチルベンジジン、ｏ−メチ
ルベンジジン、ｏ−ジアニシジン等のベンジジンまたは
その誘導体、２，７−ジアミノフルオレン、または４−
アミノアンチピリン（４−ＡＡＰ）と該４−ＡＡＰとカ
ップリングを生じるカップリング剤との組み合わせ等が
挙げられる。

【００４６】上記カップリング剤としては、Ｐ−クロロ
フェノール、２，４−ジクロロフェノール、２，４−ジ
ブロモフェノール、２，４，６−トリクロロフェノール
等のフェノール誘導体、４−クロロ−１−ナフタレン、
１，７−ジヒドロナフタレン等のナフタレン誘導体、ま
たはＮ，Ｎ−ジメチルアニリン、Ｎ，Ｎ−ジエチル−ｍ
−トルイジン、Ｎ−エチル−Ｎ−スルホプロピル−ｍ−
トルイジン、Ｎ−エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−
スルホプロピル）−ｍ−トルイジン（ＴＯＯＳ）、５，
６，７，８−テトラヒドロ−１−ナフチルアミン、Ｎ−
エチル−Ｎ−（２−ヒドロキシ−３−スルホプロピル）
−３，５−ジメトキシアニリン等のアニリン誘導体等が
挙げられる。

【００４７】また、その他の発色剤として、４，４’−
ジアミノジフェニル、ｏ−フェニレンジアミン、ｍ−フ
ェニレンジアミン、ｐ−フェニレンジアミン、２，３−
トリレンジアミン、２，４−トリレンジアミン、２，５
−トリレンジアミン、２，６−トリレンジアミン等の種
々の置換フェニレンジアミン類、焦性没食子酸、没食子
酸、フロログルシノール、ヒドロキノン、ロイコインド
フェノール等のフェノール類、グアイヤコール、ピリジ
ン誘導体、置換アジン類、ロイコマラカイトグリーン等
を用いることもできる。

【００４８】このような試薬の担持方法は、例えば、試
薬を含有する液に担体を浸漬するか、または同様の液を
担体にスプレーした後、乾燥することにより行われる。

【００４９】また、試薬層４には、必要に応じ、下記の
ような添加剤が添加されていてもよい。この添加剤とし
ては、前記界面活性剤の他、例えば、ｐＨ調整剤、光反
射性物質、安定剤、増感剤、酸化剤、湿潤剤、粘稠剤等
が挙げられる。

【００５０】ｐＨ調整剤としては、リン酸緩衝液、クエ
ン酸緩衝液、ホウ酸緩衝液、トリス緩衝液、グッド緩衝
液等が挙げられる。

【００５１】光反射物質は、検体が全血である場合に、
赤血球による色濃度測定への影響を排除するためのもの
であり、酸化チタン、硫酸バリウム、アルミニウム、各
種セラミックス等の微粒子が挙げられる。

【００５２】安定剤のうち、呈色後の呈色安定性を向上
するためのものとしては、メチルビニルエーテルと無水
マレイン酸の共重合体、あるいはそのハーフエチルエス
テル等が挙げられる。

【００５３】また、試験具保存中の経時変化を防止する
ための安定剤としては、特公昭５６−４３２３８号公報
、特願平０１−２３８１４８号（特に、２−メルカプト
ベンズイミダゾール）等に記載のものが挙げられる。

【００５４】増感剤は、ヘモグロビンにおけるペルオキ
シダーゼ活性等を増強させるものであり、キノリンおよ
びその誘導体、例えば、キニーネ、シンコニン、６−メ
トキシキノリン、キナルジン、８−アミノ−６−メトキ
シキノリン、２−キノリノール、イソキノリン、ベンゾ
（ｆ）キノリン、３−アミノキノリン等が挙げられる。

【００５５】酸化剤は、検体中に存在するアスコルビン
酸のごとき還元性物質の影響を排除することができるも
のであり、好ましくは酸素酸またはその塩および金属塩
類が使用できる。

【００５６】酸素酸またはその塩としては、ＭＸＯ、Ｍ
ＸＯ３　、ＭＸＯ４　、Ｍ３　Ｈ２　ＸＯ６（ただし、
Ｍは一価の陽イオンとなり得る原子、例えばＮａ、Ｋ、
Ｈ等であり、またＸはハロゲン原子、例えば、Ｉ、Ｂｒ
、Ｃｌ等である）等が挙げられ、具体的には、ＨＣｌＯ
、ＮａＣｌＯ、ＫＣｌＯ、ＨＢｒＯ、ＮａＢｒＯ、ＫＢ
ｒＯ、ＨＩＯ、ＮａＩＯ、ＫＩＯ、ＨＣｌＯ３　、Ｎａ
ＣｌＯ３　、ＫＣｌＯ３　、ＨＢｒＯ３　、ＮａＢｒＯ
３　、ＫＢｒＯ３　、ＨＩＯ３　、ＮａＩＯ３　、ＫＩ
Ｏ３　、ＨＣｌＯ４、ＮａＣｌＯ４　、ＫＣｌＯ４　、
ＨＢｒＯ４　、ＮａＢｒＯ４　、ＫＢｒＯ４　、ＨＩＯ
４　、ＮａＩＯ４　、ＫＩＯ４　、Ｎａ３　Ｈ２　ＩＯ
６　、Ｋ３　Ｈ２　ＩＯ６　等がある。

【００５７】金属塩類としては、塩化第二鉄、塩化第一
銅、硫酸銅、酢酸銅、酢酸水銀、酢酸ビスマス、酢酸鉛
等がある。

【００５８】湿潤剤としては、ポリビニルピロリドン、
ラウリル硫酸ナトリウム、ドデシル硫酸ナトリウム、テ
トラデシル硫酸ナトリウム等のアルキル硫酸塩、ドデシ
ルベンゼンスルホン酸ナトリウム等のアルキルベンゼン
スルホン酸塩、ジオクチルスルホコハク酸ナトリウム、
ジヘブチルスルホコハク酸ナトリムウ等のジアルキルス
ルホコハク酸塩等が挙げられる。

【００５９】粘稠剤としては、ポリビニルアルコール、
ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、アク
リル酸塩、ポリアクリルアミド、ポリ（ヒドロキシエチ
ルメタクリレート）、ポリ（ヒドロキシエチルアクリレ
ート）、カルボキシメチルセルロース等の重合体、ゼラ
チン、アラビアゴム等が挙げられる。

【００６０】なお、試薬層４は、上記担体によるものに
限らず、例えば、ゼラチンに代表される結合剤、上記試
薬および添加剤を含有する塗布液を支持体３の表面に塗
布、浸漬またはスプレーして付着させ、その後乾燥して
形成されたものでもよい。

【００６１】なお、ゼラチン以外の結合剤としては、ポ
リビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、アガロー
ス、ポリビニルベンゼンスルホン酸ナトリウム、ポリビ
ニルプロピオネート等が挙げられる。

【００６２】このような試薬層中には、ゼラチン等の結
合剤を架橋させ得る硬膜剤が添加されていてもよい。

【００６３】硬膜剤としては、例えば、Ｎ，Ｎ’−ヘキ
サメチレン−１，６−ビス（１−アジリジンカルボキサ
ミド）（ＨＤＵ）、トリメチロールプロパン−トリ−β
−アジリジニルプロピオネート（ＴＡＺＭ）、テトラメ
チロールメタン−トリ−β−アジリジニルプロピオネー
ト（ＴＡＺＯ）等のアジリジンの誘導体、その他エポキ
シ系、アクリロイル系、ビニルスルホニル系、クロロト
リアジン系の化合物等が挙げられる。

【００６４】また、このような試薬層は、２層以上あっ
てもよい。この場合、各試薬層にそれぞれ異る試薬を担
持させ、検体中の２種以上の特定物質を検出することが
できるような構成とすることができる。

【００６５】展開層５は、検体を試薬層４上に一様に展
延する機能を有するものである。この展開層５としは、
例えば、メッシュ、織物、編物、不織布、瀘紙、メンブ
ランフィルター等の繊維性または非繊維性の多孔質材で
構成されたものが挙げられるが、そのなかでも、特に、
メッシュ（またはネット）が好ましい。メッシュは、検
体の展開性に優れ、特に、血液や唾液のような比較的粘
度の高い検体でも迅速かつ均一に展開することができ、
しかも通気性を有し、特に、メッシュの目の粗さによっ
ては、検体で濡れた場合でも通気性を維持することがで
き、後述する試薬層４への気体の供給が可能となるから
である。

【００６６】本発明において、メッシュとは、規則的に
配列された網目を有するシート状の部材であって、その
形態は、繊維の織物または編物、一体成形物、加工物等
が挙げられる。

【００６７】このメッシュの構成材料としては、テトロ
ン、ナイロン、レーヨン、ポリプロピレン、ポリエチレ
ン、ポリ塩化ビニル、ＰＥＴ、ＰＢＴのようなポリエス
テル、ポリオレフィン等が挙げられる。

【００６８】また、メッシュの繊維の径は、５０〜２０
０μｍ　程度、特に６０〜１５０μｍ程度のものが好ま
しい。

【００６９】メッシュの網目の粗さは、２０〜３００本
／インチ（＝メッシュ）程度、特に４０〜１００本／イ
ンチ程度であるのが好ましい。２０本／インチ未満であ
ると展開性が劣り、また、３００本／インチを超えると
、通気性、特に、検体で濡れたときの通気性が低下する
からである。

【００７０】このようなメッシュに代表される展開層５
は、検体の展開性の向上のために、親水化処理が施され
ているのが好ましい。この親水化処理は、上記と同様の
洗浄または界面活性剤の付与等の方法により行えばよい
。

【００７１】このような試験紙２は、図２に示すように
、保持部材８により挟持され、展開層５、試薬層４およ
び支持体３を押圧固定する。

【００７２】この保持部材８は、互いに嵌合しうる第１
保持部材片６および第２保持部材片７で構成され、両保
持部材片６および７を嵌合した状態で、それぞれの挟持
部６１および７１が試験紙２の周縁部を所定の圧力で押
圧するようになっている。

【００７３】また、第１およひ第２保持部材片６および
７のほぼ中央部（挟持部６１、７１の内側）には、それ
ぞれ、円形の開口６２および７２が形成されている。

【００７４】第１保持部材片６の開口６２は、光学測定
装置（分析器）により支持体２側から投光、受光を行っ
て試薬層４の呈色強度を測定するための窓として設けら
れたものである。一方、第２保持部材片７の開口７２は
、検体を試験紙２へ供給するための空間として設けられ
たものである。

【００７５】開口６２の直径は、１〜２０ｍｍ程度、特
に、４〜１０ｍｍ程度とするのが好ましい。

【００７６】開口７２の直径は、１〜２０ｍｍ程度、特
に、３〜１０ｍｍ程度とするのが好ましい。

【００７７】なお、これらの開口６２および７２の形状
としては、図示のごとき円形に限らず、例えば、楕円形
、正多角形等であってもよい。

【００７８】このような第１および第２保持部材片６、
７の構成材料は、特に限定されず、例えば、ポリエチレ
ン、ポリプロピレン、ポリ塩化ビニル、ポリスチレン、
ポリアミド、ポリカーボネート、ＰＥＴ、ＰＢＴのよう
なポリエステル、ＡＢＳ樹脂、ＰＭＭＡ等のアクリル系
樹脂等の各種樹脂、アルミナ、シリカ等のセラミックス
、アルミニウム、ステンレス、チタン等の金属等が挙げ
られる。

【００７９】このような保持部材８において、第２保持
部材片７の挟持部７１、すなわち開口７２の周囲には、
挟持部７１を貫通する複数の通気用の小孔７５が形成さ
れている。この小孔７５を形成したことにより、挟持部
６１、７１の内側の位置の試薬層４にも外気が供給され
、試薬層４の全域に呈色反応に必要な酸素等が均一に供
給されるので、呈色ムラが防止される。

【００８０】従って、このような小孔７５は、開口７２
の周囲に均一に分布するように形成するのが好ましく、
その形成個数は、１〜１００個程度、特に、４〜１０個
程度とするのが好ましい。

【００８１】小孔７５の直径は、０．５〜５ｍｍ程度、
特に、０．７〜３ｍｍ程度とするのが好ましい。小孔７
５の直径が０．５ｍｍ未満であると、小孔の形成個数に
よっては通気性が不十分となり、また、５ｍｍを超える
と、試験紙２の押えが不十分となり、呈色が不均一とな
ることがあるからである。

【００８２】なお、小孔７５の形状としては、図示のご
とき円形に限らず、例えば、楕円形、三角形、四角形、
六角形、八角形等の多角形、スリット形状、網目状等で
あってもよい。

【００８３】また、図１および図２では、第１保持部材
片６と第２保持部材片７とがそれぞれ別体で構成された
ものが示されているが、本発明では、両保持部材片が連
結され、または一体的に形成されたものでもよい。例え
ば両保持部材片６、７の一辺同士を連結し、この連結部
を可撓性とすることにより両保持部材片が連結部を中心
に回動するような構成としてもよい。

【００８４】次に、試験具１ａの作用について説明する
。ピペット等により試験具１ａの開口７２内に例えば、
３〜１００μｌ　程度の検体を滴下すると、その検体は
、展開層５上に均一に展開され、次いで試薬層４中に浸
透する。

【００８５】一定時間経過すると、検体中の検出すべき
特定成分と試薬層４中試薬とが反応し、呈色を生じる。例えば、試験紙２が検体中のブドウ糖を検出するための
ものである場合には、下記化１で示すような反応が生じ
、試験紙２が検体中のコレステロールを検出するための
ものである場合には、下記化２で示すような反応が生じ
る。

【００８６】

【化１】

【００８７】

【化２】

【００８８】この場合、化１および化２の式中における
酸素は、大気中より供給される。すなわち、空気中の酸
素は、小孔７５から導入され、展開層５を透過して試薬
層４に供給される。これにより、試薬層４の全域にわた
って上記反応が生じ、呈色ムラが防止される。

【００８９】このようにして得られた呈色部分の呈色強
度を目視により、または光学的に測定する。光学的な測
定の場合には、光学測定装置（分析器）により第１保持
部材片６側から開口６２を介して投光、受光を行い、例
えば、反射吸光度を測定する。

【００９０】なお、本発明の試験具１ａにおいて、開口
７２に過剰の検体（例えば、５０〜ｌ　００μｌ　以上
）が供給された場合には、開口７２から溢れた検体が小
孔７５からも吸収されるので、測定時間の短縮に寄与す
る。

【００９１】図３は、本発明の試験具の他の構成例を示
す断面正面図である。以下、図３に示す試験具１ｂの前
記試験具１ａと相違する点について説明し、同様の事項
についてはその説明を省略する。

【００９２】試験具１ｂにおける保持部材８において、
第２保持部材片７の開口７２の周縁部に、保持部材８の
内側に向けて突出する環状の凸部７３が形成されている
。この凸部７３の先端が展開層５に当接して押圧し、試
験紙２の各層を固定する。

【００９３】このように、第２保持部材片７の裏面に凸
部７３を設けることにより、支持体３、試薬層４および
展開層５の相互間のズレや浮きを確実に防止し、これら
を均一な圧力で接合することができる。その結果、呈色
にムラの発生を防止し、測定精度の向上が図れる。

【００９４】また、試験具１ｂにおける試験紙２は、余
剰の検体を吸収する検体吸収層９を有する。すなわち、
第２保持部材片７の挟持部７１、凸部７３および展開層
５で囲まれる部分には、検体吸収層９が設置されている
。

【００９５】この検体吸収層９は通気性を有するもので
あり、例えば、織物、編物、不織布、濾紙等の繊維性多
孔質材料や、ＰＶＡ架橋物の発泡体等の非繊維性多孔質
材料等が挙げられる。

【００９６】このような試験具１ｂでは、外気は、小孔
７５から導入され、検体吸収層９および展開層５を順次
透過して試薬層４に供給される。

【００９７】図４は、本発明の試験具のさらに他の構成
例を示す断面正面図である。以下、図４に示す試験具１
ｃの前記試験具１ａおよび試験具１ｂと相違する点につ
いて説明し、同様の事項についてはその説明を省略する
。

【００９８】試験具１ｃにおける試験紙２は、前記支持
体３を有さず、前記と同様の試薬層４、展開層５および
検体吸収層９で構成されている。

【００９９】試験具１ｃにおける保持部材８においては
、第２保持部材片７の開口７２の周縁部に、前記と同様
の凸部７３が形成されているが、第２保持部材片７の挟
持部７１には、前記小孔７５は形成されていない。

【０１００】一方、第１保持部材片６には、光学測定用
の開口６２は形成されていない。すなわち、第１保持部
材片６は、前記支持体としての機能を有するものであり
、それ自体が光透過性を有し、第１保持部材片６の中央
部６３を通して投光、受光を行い、試薬層４の呈色強度
を測定する。

【０１０１】また、第１保持部材片６の中央部６３の周
囲には、通気用の小孔６５が形成されている。この小孔
６５は、前記小孔７５と同様のものである。

【０１０２】このような試験具１ｃでは、外気は、小孔
６５から導入され、第１保持部材片６に隣接する試薬層
４に供給される。

【０１０３】本発明の試験具は、検体（例えば、全血、
血漿、血清、尿、糞便、唾液、リンパ液、髄液等の体液
）中のブドウ糖、尿酸、ＢＵＮ、クレアチニン、カルシ
ウム、シュウ酸、蛋白質、リポ蛋白（ＬＤＬ、ＨＤＬ）
、コレステロール、トリグリセリド（中性脂肪）、遊離
脂肪酸、ケトン体、ビリルビン、ウロビリノーゲン、亜
硝酸塩、アスコルビン酸、ヘモグロビン、ミオグロビン
、白血球、ＧＯＴ、ＧＰＴ、ＡＬＰ、γ−ＧＴ等の検出
に適用可能であり、また、これらのうちの２以上を検出
しうる多孔目試験具としても適用可能であり、さらに食
品や環境試料の分析等の他の分野への応用も可能である
。

【０１０４】

【実験例】以下、本発明を具体的実施例を挙げてさらに
詳述する。

【０１０５】（本発明例）図３に示す構成の試験具を次
のようにして作製した。

【０１０６】１．支持体厚さ２００μｍ　のポリエチレンテレフタレート製フィ
ルムを２０ｍｍ×２０ｍｍのサイズに裁断して支持体と
した。

【０１０７】２．試薬層下記に示す組成の溶液１、２および３を調製し、担体で
ある厚さ２６０μｍ　の瀘紙（アドバンテック社製、Ａ
ＤＶＡＮＴＥＣ　Ｎｏ．２）に、まず溶液１を含浸、乾
燥（４０℃、６０分）し、次いで溶液２を含浸、乾燥（
４０℃、１０分）し、その後溶液３を含浸、乾燥（４０
℃、１０分）して、尿中のグルコース検出用試験具の試
薬層を作製した。この試薬層を前記支持体と同サイズに
裁断した。

【０１０８】＜溶液１＞グルコースオキシダーゼ　　３．０ｇペルキシダーゼ　　１００ｍｇタートラジン　　１５０ｍｇ１０％ポリビニルピロリドン（Ｋ３０）水溶液　　３０
ｍｌ５％　Ｇａｎｔｒｅｚ　ＡＮ１３９水溶液　　７０
ｍｌクエン緩衝液（ｐＨ５．５）　　７０ｍｌメタ過ヨ
ウ素酸ナトリウム（酸化剤）　　１００ｍｇ

【０１０９
】＜溶液２＞ｏ−トリジン（酸化呈色指示薬）　　１．０ｇ２−メル
カプトベンズイミダゾール（安定剤）　　８０ｍｇアセ
トン　　１００ｍｌ

【０１１０】＜溶液３＞エチルセルロース　　５５０ｍｇベンゼン−エタノール（４：１）　　１００ｍｌ

【０１
１１】３．展開層テトロン製のメッシュとして、ＮＢＣ工業社製、テトロ
ンメッシュＴＢ４０を用意した。このメッシュの繊維径
は、約８０μｍ　であり、網目の粗さは、５０本／イン
チである。

【０１１２】次に、このメッシュを界面活性剤である１
％トリトンｘ−１００溶液に含浸し、乾燥（４０℃、６
０分）して、展開層を得た。この展開層を前記支持体と
同サイズに裁断した。

【０１１３】４．検体吸収層織物よりなる検体吸収層を下記第２保持部材片の挟持部
内側に充填した。検体吸収層の厚さは、約６５０μｍ　
である。

【０１１４】５．保持部材下記条件の第１保持部材片および第２保持部材片よりな
る保持部材を作製した。

【０１１５】第１および第２保持部材片材料：ポリカー
ボネート保持部材寸法：縦２４ｍｍ×横２４ｍｍ検体供給用開口
の直径：６ｍｍ光学測定用開口の直径：５ｍｍ小孔の配置：検体供給用開口の周囲に６個形成小孔の直
径：１ｍｍ凸部の高さ：０．８ｍｍ

【０１１６】（比較例）保持部材の小孔を形成しない以
外は、上記本発明例と同様の試験具を作製した。

【０１１７】実験１上記本発明例および比較例の試験具について、ブドウ糖
を含む検体（血清）を用いて呈色させ、その呈色の状況
を調べた。その詳細な手順は次の通りである。

【０１１８】まず、生理食塩水に濃度５０００ｍｇ／ｄ
ｌ　になるようにブドウ糖を入れて溶解し、３７℃にて
２時間熱処理し、異性化させたものをブドウ糖原液とし
た。

【０１１９】次に、市販の標準血清（バイオラッド社製
、ライフォチェック生化学コントロール血清Ｉ）のブド
ウ糖濃度を市販の測定キット（和光純薬社製グルコース
テストワコー）により測定し、この測定値に基づき、標
準血清に対しブドウ糖原液を、ブドウ糖濃度がそれぞれ
１００、２５０および４００ｍｇ／ｄｌとなるように添
加し、３種の血清サンプルＮｏ．１、２および３を調整
した。

【０１２０】上記本発明例および比較例の各試験具を１
０個づつ用意し、これら各試験具の検体供給用開口に、
それぞれ上記３種の血清サンプルＮｏ．１〜３を１０μ
ｌ　つ滴下し、１分経過後、分析装置（日本分光社製、
ＵＶＩＤＥＣ−６１０型）を用い、支持体側にて投光、
受光を行って、波長５４１ｎｍの反射光強度を測定し、
ブドウ糖濃度を求めた。

【０１２１】その結果を下記表１（本発明例）および表
２（比較例）に示す。なお、各表中の数値は、血糖値（
ｍｇ／ｄｌ　）を示すものである。

【０１２２】

【表１】

【０１２３】

【表２】

【０１２４】表１に示すように、本発明例の試験具では
、得られたデータにバラツキが少なく、正確な測定結果
が得られている。これは、保持部材に形成された小孔に
より呈色反応に必要な酸素が十分にかつ安定して供給さ
れたことによるものである。。

【０１２５】これに対し、比較例の試験具では、呈色反
応にかかる時間が本発明例の試験具より長く、しかも、
表２に示すように、得られたデータにバラツキがある。

【０１２６】実験２上記本発明例および比較例の各試験具に対し、その検体
供給用開口に過剰の検体（血清サンプルＮｏ．１を１０
０μｌ　）を滴下し、その吸収の状況を観察したところ
、比較例の試験具では、滴下された検体の全量が吸収さ
れるまでに長時間（約８秒）を要したのに対し、本発明
例の試験具では、小孔からも検体が吸収され、滴下され
た検体の全量が吸収されるまでの時間がより短かった。

【０１２７】

【発明の効果】以上述べたように、本発明の試験具によ
れば、保持部材に通気用の小孔を形成したことにより、
呈色反応に必要な気体が小孔を介して試薬層に均一に供
給されるので、呈色反応が促進されるとともに、呈色ム
ラが防止される。よって、短い測定時間でより正確な検
出結果を得ることができる。

【０１２８】また、過剰の検体を滴下した場合でも、検
体が小孔からも吸収されるので、測定時間の短縮が図れ
る。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明の試験具の構成例を示す平面図である。

【図２】図１に示す試験具の断面正面図である。

【図３】本発明の試験具の他の構成例を示す断面正面図
である。

【図４】本発明の試験具の他の構成例を示す断面正面図
である。

【符号の説明】１ａ、１ｂ、１ｃ　　試験具２　　　　　　　　　　　　試験紙３　　　　　　　　　　　　支持体４　　　　　　　　　　　　試薬層５　　　　　　　　　　　　展開層６　　　　　　　　　　　　第１保持部材片７　　　　
　　　　　　　　第２保持部材片６１、７１　　　　挟
持部６２、７２　　　　開口６３　　　　　　　　　　中央部７３　　　　　　　　　　凸部６５、７５　　　　小孔８　　　　　　　　　　　　保持部材

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】　　検体中の特定成分と反応して呈色する
試薬が担持された試薬層を有する試験紙と、この試験紙
を保持し、検体を供給する開口が形成された保持部材と
を備える試験具であって、前記保持部材には、前記開口
以外の通気用の小孔が形成され、この小孔を介して前記
試薬層に気体を供給するよう構成したことを特徴とする
試験具。
【請求項２】　　前記保持部材は、互いに嵌合しうる一
対の保持部材片で構成され、両保持部材片により前記試
験紙を挟持して保持するものである請求項１に記載の試
験具。
【請求項３】　　前記通気用の小孔は、前記開口の周囲
に形成されている請求項１または２に記載の試験具。
【請求項４】　　前記一対の保持部材片のうちの一方に
前記開口が形成され、他方に前記通気用の小孔が形成さ
れている請求項２に記載の試験具。
【請求項５】　　前記通気用の小孔の直径が０．５〜５
ｍｍである請求項１〜４のいずれかに記載の試験具。
【請求項６】　　前記試験紙は、光透過性を有する支持
体を有するものである請求項１〜５のいずれかに記載の
試験具。