JPH04256441A - β2−ミクログロブリン用吸着剤 - Google Patents
β2−ミクログロブリン用吸着剤Info
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- JPH04256441A JPH04256441A JP3103231A JP10323191A JPH04256441A JP H04256441 A JPH04256441 A JP H04256441A JP 3103231 A JP3103231 A JP 3103231A JP 10323191 A JP10323191 A JP 10323191A JP H04256441 A JPH04256441 A JP H04256441A
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- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【0001】
【産業上の利用分野】本発明は、β2 −ミクログロブ
リンの吸着剤に関するものであり、更に詳しくは、血液
中または血しょう中より、β2 −ミクログロブリンを
除去する為の吸着剤に関するものである。
リンの吸着剤に関するものであり、更に詳しくは、血液
中または血しょう中より、β2 −ミクログロブリンを
除去する為の吸着剤に関するものである。
【0002】
【従来の技術】β2 −ミクログロブリンは、全アミノ
酸配列の分析により、免疫グロブリンのCドメインと類
似の、分子量約12000の糖鎖を持たない単純タンパ
クであることが分かっている。ところで、長期間にわた
って血液透析を行っている患者では、血液中の遊離のβ
2 −ミクログロブリン濃度が健常者の10〜100倍
にも増大しており、透析患者に高率で発生する手根管症
候群(アミロイドーシス)は、このβ2 −ミクログロ
ブリンが原因物質と考えられている。従来より血液ある
いは血しょう中よりβ2 −ミクログロブリンを除去し
ようとする試みがなされているが、未だ実用に耐え得る
ような除去方法は見いだされていない。例えば、透析膜
による分離ではβ2 −ミクログロブリン以外の有用タ
ンパク質も除去されたり、除去量が少ないなどの欠点を
有している。
酸配列の分析により、免疫グロブリンのCドメインと類
似の、分子量約12000の糖鎖を持たない単純タンパ
クであることが分かっている。ところで、長期間にわた
って血液透析を行っている患者では、血液中の遊離のβ
2 −ミクログロブリン濃度が健常者の10〜100倍
にも増大しており、透析患者に高率で発生する手根管症
候群(アミロイドーシス)は、このβ2 −ミクログロ
ブリンが原因物質と考えられている。従来より血液ある
いは血しょう中よりβ2 −ミクログロブリンを除去し
ようとする試みがなされているが、未だ実用に耐え得る
ような除去方法は見いだされていない。例えば、透析膜
による分離ではβ2 −ミクログロブリン以外の有用タ
ンパク質も除去されたり、除去量が少ないなどの欠点を
有している。
【0003】また、不活性担体に抗β2 −ミクログロ
ブリン抗体を担持させた例(特開昭62−871597
号)があるが、抗体の生産クローニング等の吸着剤の調
製に時間とコストがかかり、大量使用には不向きである
。
ブリン抗体を担持させた例(特開昭62−871597
号)があるが、抗体の生産クローニング等の吸着剤の調
製に時間とコストがかかり、大量使用には不向きである
。
【0004】また、各種多孔質担体に疎水性の強いリガ
ンドを結合させて吸着させる例(特開昭63−9987
5号、同62−240068号)では、その強疎水性故
にβ2 −ミクログロブリン吸着量は大きいが、実際の
血液あるいは血しょう中に大量に存在する他のタンパク
(特に疎水性の強いタンパク、例えば免疫グロブリン等
)、脂質等まで吸着してしまう。そのため実際の血液ま
たは血しょう中ではβ2 −ミクログロブリンの吸着量
と吸着速度が小さくなるので使用は困難と考えられる。 更にこれらの従来技術で開示されている担体の孔径、2
0〜2000オングストロームの範囲では他のタンパク
とのサイズ上の選択は困難と考えられる。また、従来技
術の吸着剤は生体適合性がなく、そのまま実際の血液、
血しょうに適用するには血液適合性の面で問題が残され
ている。
ンドを結合させて吸着させる例(特開昭63−9987
5号、同62−240068号)では、その強疎水性故
にβ2 −ミクログロブリン吸着量は大きいが、実際の
血液あるいは血しょう中に大量に存在する他のタンパク
(特に疎水性の強いタンパク、例えば免疫グロブリン等
)、脂質等まで吸着してしまう。そのため実際の血液ま
たは血しょう中ではβ2 −ミクログロブリンの吸着量
と吸着速度が小さくなるので使用は困難と考えられる。 更にこれらの従来技術で開示されている担体の孔径、2
0〜2000オングストロームの範囲では他のタンパク
とのサイズ上の選択は困難と考えられる。また、従来技
術の吸着剤は生体適合性がなく、そのまま実際の血液、
血しょうに適用するには血液適合性の面で問題が残され
ている。
【0005】
【発明の解決しようとする課題】本発明の吸着剤は、従
来の吸着剤の欠点を克服し、血液または血しょう中より
β2 −ミクログロブリンを選択的に吸着除去し得る吸
着剤を提供することを目的とする。
来の吸着剤の欠点を克服し、血液または血しょう中より
β2 −ミクログロブリンを選択的に吸着除去し得る吸
着剤を提供することを目的とする。
【0006】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、従来より
β2 −ミクログロブリンが拡散でき、しかも血液中の
その他の多量に存在するタンパク質(アルブミン、グロ
ブリン)が拡散しにくい細孔径がデキストランの分子量
にして1万から5万の範囲にあることを見いだしていた
。
β2 −ミクログロブリンが拡散でき、しかも血液中の
その他の多量に存在するタンパク質(アルブミン、グロ
ブリン)が拡散しにくい細孔径がデキストランの分子量
にして1万から5万の範囲にあることを見いだしていた
。
【0007】また、β2 −ミクログロブリンは塩基性
のドメインを有しカルボキシル基、スルホン酸基等の酸
性基と電気的な相互作用をとり得ることまた、β2 −
ミクログロブリンを構成するアミノ酸のうち、中性アミ
ノ酸の側鎖の疎水基が吸着剤の疎水基と相互作用するこ
とを見いだし、酸性基と疎水性基の双方を有する吸着剤
で相乗的な効果が現れることが見いだし本発明を完成す
るに至った。即ち、本発明は、吸着のための官能基とし
て疎水基とカルボキシル基の双方を有することを特徴と
するポリアミノ酸多孔質体からなるβ2 −ミクログロ
ブリン用吸着剤を提供するものである。好適にはその細
孔径がデキストランの分子量にして1万から5万である
。本発明における疎水基とはメチル基、エチル基、プロ
ピル基、ヘキシル基、等のアルキル基、フェニル基、ナ
フチル基等の芳香族疎水基をいう。
のドメインを有しカルボキシル基、スルホン酸基等の酸
性基と電気的な相互作用をとり得ることまた、β2 −
ミクログロブリンを構成するアミノ酸のうち、中性アミ
ノ酸の側鎖の疎水基が吸着剤の疎水基と相互作用するこ
とを見いだし、酸性基と疎水性基の双方を有する吸着剤
で相乗的な効果が現れることが見いだし本発明を完成す
るに至った。即ち、本発明は、吸着のための官能基とし
て疎水基とカルボキシル基の双方を有することを特徴と
するポリアミノ酸多孔質体からなるβ2 −ミクログロ
ブリン用吸着剤を提供するものである。好適にはその細
孔径がデキストランの分子量にして1万から5万である
。本発明における疎水基とはメチル基、エチル基、プロ
ピル基、ヘキシル基、等のアルキル基、フェニル基、ナ
フチル基等の芳香族疎水基をいう。
【0008】本発明におけるポリアミノ酸とは、グルタ
ミン酸、アスパラギン酸及びこれらのアミノ酸の疎水性
エステル誘導体の1種または2種以上を重合したもので
あり、これらのアミノ酸またはアミノ酸誘導体を含むも
のであれば他のアミノ酸との共重合体でもよい。共重合
できるアミノ酸としては、アラニン、グリシン、オキシ
プロリン、イソロイシン、ロイシン、プロリン、セリン
、スレオニン、バリン及びこれらの誘導体などを挙げる
ことができる。これは1種でも、又は2種以上使用して
もよい。
ミン酸、アスパラギン酸及びこれらのアミノ酸の疎水性
エステル誘導体の1種または2種以上を重合したもので
あり、これらのアミノ酸またはアミノ酸誘導体を含むも
のであれば他のアミノ酸との共重合体でもよい。共重合
できるアミノ酸としては、アラニン、グリシン、オキシ
プロリン、イソロイシン、ロイシン、プロリン、セリン
、スレオニン、バリン及びこれらの誘導体などを挙げる
ことができる。これは1種でも、又は2種以上使用して
もよい。
【0009】ポリアミノ酸多孔質体とは、前述のポリア
ミノ酸自身を多孔質膜化しても良いし、多孔質繊維化し
たものでも良いし、多孔質ビーズ化したものでもよい。 また、各種担体上にコーティングまたは、化学結合させ
た後多孔質化しても良いし、多孔質担体上にコーティン
グまたは化学結合させてもよい。これらに用いられる担
体は、ガラス、金属塩類、炭素等の無機物質でも良いし
、ポリマー等の有機物質であってもよい。また、これら
の担体の形状も、粉状、ビーズ状、膜状、繊維状、中空
糸状、等いろいろな形状のものが利用できるが、吸着カ
ラム、吸着カートリッジ等のモジュールに合わせて選ぶ
ことが出来る。
ミノ酸自身を多孔質膜化しても良いし、多孔質繊維化し
たものでも良いし、多孔質ビーズ化したものでもよい。 また、各種担体上にコーティングまたは、化学結合させ
た後多孔質化しても良いし、多孔質担体上にコーティン
グまたは化学結合させてもよい。これらに用いられる担
体は、ガラス、金属塩類、炭素等の無機物質でも良いし
、ポリマー等の有機物質であってもよい。また、これら
の担体の形状も、粉状、ビーズ状、膜状、繊維状、中空
糸状、等いろいろな形状のものが利用できるが、吸着カ
ラム、吸着カートリッジ等のモジュールに合わせて選ぶ
ことが出来る。
【0010】化学結合させる方法は、担体の官能基を利
用して適当な結合試薬を用いて結合させる方法、例えば
、アミノプロピルシリカゲルに、トルエンジイソシアネ
ートまたはテレフタル酸クロリド等の二官能試薬を反応
させ、疎水基とカルボキシル基の両方を有する該ポリア
ミノ酸のアミノ基、カルボキシル基、水酸基等を結合さ
せる方法が挙げられる。ポリアミノ酸自身を多孔質化す
る方法としては、例えば該ポリアミノ酸を適当な溶剤を
溶解し、これと非相溶性の媒体中で分散して、ポリアミ
ノ酸の溶媒を蒸発除去し、析出させる方法(特開昭62
−1728号)や、重合する前のアミノ酸NCA(N−
カルボキシ−α−アミノ酸無水物)をこれと相溶性であ
るが、重合すると非相溶性になる媒体中で重合を行わせ
る方法がある。前者の方法では、ポリアミノ酸の貧溶媒
を添加しておき、析出させた後、これを抽出等の方法で
除去して多孔質化を行うことができ、貧溶媒の種類、添
加量によって細孔径を制御することができる。
用して適当な結合試薬を用いて結合させる方法、例えば
、アミノプロピルシリカゲルに、トルエンジイソシアネ
ートまたはテレフタル酸クロリド等の二官能試薬を反応
させ、疎水基とカルボキシル基の両方を有する該ポリア
ミノ酸のアミノ基、カルボキシル基、水酸基等を結合さ
せる方法が挙げられる。ポリアミノ酸自身を多孔質化す
る方法としては、例えば該ポリアミノ酸を適当な溶剤を
溶解し、これと非相溶性の媒体中で分散して、ポリアミ
ノ酸の溶媒を蒸発除去し、析出させる方法(特開昭62
−1728号)や、重合する前のアミノ酸NCA(N−
カルボキシ−α−アミノ酸無水物)をこれと相溶性であ
るが、重合すると非相溶性になる媒体中で重合を行わせ
る方法がある。前者の方法では、ポリアミノ酸の貧溶媒
を添加しておき、析出させた後、これを抽出等の方法で
除去して多孔質化を行うことができ、貧溶媒の種類、添
加量によって細孔径を制御することができる。
【0011】後者の方法は、基本的には、どの様なアミ
ノ酸、アミノ酸誘導体の組合せでも良いが、細孔径の制
御は溶媒の種類、重合温度、重合触媒、重合時間をうま
く組み合わせて行うことが必要である。これらの方法で
得られる多孔質体の大きさは、任意に変えられるが、実
際に血液または血しょうを通液してβ2 −ミクログロ
ブリンを除去する場合、吸着カラム、吸着カートリッジ
等のモジュールに合わせて選ぶことが出来る。
ノ酸、アミノ酸誘導体の組合せでも良いが、細孔径の制
御は溶媒の種類、重合温度、重合触媒、重合時間をうま
く組み合わせて行うことが必要である。これらの方法で
得られる多孔質体の大きさは、任意に変えられるが、実
際に血液または血しょうを通液してβ2 −ミクログロ
ブリンを除去する場合、吸着カラム、吸着カートリッジ
等のモジュールに合わせて選ぶことが出来る。
【0012】本発明における多孔質体の細孔径はデキス
トランの分子量換算で1万から5万の範囲であることが
好ましい。多孔質体の細孔径はデキストラン標準分子量
物質によるゲルパーミエーションクロマトグラフィー(
GPC)によって評価できる。
トランの分子量換算で1万から5万の範囲であることが
好ましい。多孔質体の細孔径はデキストラン標準分子量
物質によるゲルパーミエーションクロマトグラフィー(
GPC)によって評価できる。
【0013】すなわち、ポリアミノ酸を構成成分として
含有してなる多孔質体を適当な方法でふるい分け、液体
クロマトグラフィー用のステンレスカラムに充填する。 孔径評価用のビーズは100μm以下のもので、できる
だけ均一サイズが好ましい。ステンレスカラムのサイズ
は、通常市販されている(例えば日本精密(株)社製4
.6mmφ*150mm)カラムで充分である。GPC
測定を行う標準分子量物質は、できるだけ該多孔質体と
の相互作用が無いものが好ましく、デキストラン標準分
子量物質(シグマケミカル社製)が適当である。その他
の標準分子量物質、例えば球状タンパク質、ポリエチレ
ングリコール等は、必ずしも分子量の順番に溶出しなか
ったり、吸着されてしまうことがあり適当でない。
含有してなる多孔質体を適当な方法でふるい分け、液体
クロマトグラフィー用のステンレスカラムに充填する。 孔径評価用のビーズは100μm以下のもので、できる
だけ均一サイズが好ましい。ステンレスカラムのサイズ
は、通常市販されている(例えば日本精密(株)社製4
.6mmφ*150mm)カラムで充分である。GPC
測定を行う標準分子量物質は、できるだけ該多孔質体と
の相互作用が無いものが好ましく、デキストラン標準分
子量物質(シグマケミカル社製)が適当である。その他
の標準分子量物質、例えば球状タンパク質、ポリエチレ
ングリコール等は、必ずしも分子量の順番に溶出しなか
ったり、吸着されてしまうことがあり適当でない。
【0014】測定方法は、標準分子量デキストランを用
いた通常の水系GPC測定でよい。即ち、蒸留水を溶離
液として、液体クロマトグラフィー装置により種々の分
子量のデキストランの溶出容量を測定するものである。
いた通常の水系GPC測定でよい。即ち、蒸留水を溶離
液として、液体クロマトグラフィー装置により種々の分
子量のデキストランの溶出容量を測定するものである。
【0015】
【作用】本発明により、血液中または血しょう中からの
β2 −ミクログロブリンの選択的吸着技術が確立され
た。そのメカニズムは明かではないが、例えば吸着剤の
細孔径の制御により内部に拡散できるタンパク質分子を
限定でき、ポリアミノ酸の有する疎水基とカルボキシル
基がβ2 −ミクログロブリンを特異的に吸着するため
ではないかと考えられる。
β2 −ミクログロブリンの選択的吸着技術が確立され
た。そのメカニズムは明かではないが、例えば吸着剤の
細孔径の制御により内部に拡散できるタンパク質分子を
限定でき、ポリアミノ酸の有する疎水基とカルボキシル
基がβ2 −ミクログロブリンを特異的に吸着するため
ではないかと考えられる。
【0016】
【発明の効果】本発明のβ2 −ミクログロブリン用吸
着剤は、(1)β2 −ミクログロブリン以外の有用タ
ンパク質を吸着することなく選択性が高い(2)β2
−ミクログロブリンの吸着量及び吸着速度が大きい(3
)吸着剤は生体適合性を有するなどの優れた効果を奏す
る。
着剤は、(1)β2 −ミクログロブリン以外の有用タ
ンパク質を吸着することなく選択性が高い(2)β2
−ミクログロブリンの吸着量及び吸着速度が大きい(3
)吸着剤は生体適合性を有するなどの優れた効果を奏す
る。
【0017】
【実施例】以下実施例にしたがって、本発明をさらに詳
しく説明するが、本発明は、これら実施例に限られるも
のではない。なおβ2 −ミクログロブリン吸着テスト
は後述した。 製造例1 平均重合度500のポリ−γ−メチル−L−グルタメー
ト(以下PMLG)の2.5%ジクロルエタン溶液50
g中に、ラウリン酸メチル4mlを加えてよく撹拌する
。これを、部分鹸化ポリビニルアルコール2.5%水溶
液500ml中に撹拌分散しながら50℃でジクロルエ
タンを蒸発除去する。得られたポリアミノ酸多孔質体を
濾過し、温水で充分洗浄して、完全にポリビニルアルコ
ールを除去する。更にメタノールにより、内部のラウリ
ン酸メチルを完全に抽出除去する。この多孔質体を分級
して、37〜74μmのものを取り出し、ステンレスカ
ラムに充填して、GPC測定を行った。その結果、排除
限界分子量は約4万であった。更にこの多孔質ポリアミ
ノ酸粒子を1N苛性ソーダ水溶液中で30℃1時間放置
した後蒸留水で完全に苛性ソーダを洗浄した。この粒子
の一部を乾燥して滴定によってカルボキシル基を定量し
たところメチルエステル部分の約45%が加水分解によ
ってカルボキシル基になっていることが解った。
しく説明するが、本発明は、これら実施例に限られるも
のではない。なおβ2 −ミクログロブリン吸着テスト
は後述した。 製造例1 平均重合度500のポリ−γ−メチル−L−グルタメー
ト(以下PMLG)の2.5%ジクロルエタン溶液50
g中に、ラウリン酸メチル4mlを加えてよく撹拌する
。これを、部分鹸化ポリビニルアルコール2.5%水溶
液500ml中に撹拌分散しながら50℃でジクロルエ
タンを蒸発除去する。得られたポリアミノ酸多孔質体を
濾過し、温水で充分洗浄して、完全にポリビニルアルコ
ールを除去する。更にメタノールにより、内部のラウリ
ン酸メチルを完全に抽出除去する。この多孔質体を分級
して、37〜74μmのものを取り出し、ステンレスカ
ラムに充填して、GPC測定を行った。その結果、排除
限界分子量は約4万であった。更にこの多孔質ポリアミ
ノ酸粒子を1N苛性ソーダ水溶液中で30℃1時間放置
した後蒸留水で完全に苛性ソーダを洗浄した。この粒子
の一部を乾燥して滴定によってカルボキシル基を定量し
たところメチルエステル部分の約45%が加水分解によ
ってカルボキシル基になっていることが解った。
【0018】製造例2
製造例1において、平均重合度500のポリ−γ−メチ
ル−L−グルタメートの代わりに平均重合度450のポ
リ−β−ベンジル−L−アスパルテートを用いた他は製
造例1と全く同様な方法で多孔質体を製造した。得られ
た粒子の排除限界分子量は約5万であった。これを製造
例1と同様に苛性ソーダ処理してカルボキシル基を定量
するとベンジルエステル部分の約65%が加水分解によ
ってカルボキシル基になっていることが解った。
ル−L−グルタメートの代わりに平均重合度450のポ
リ−β−ベンジル−L−アスパルテートを用いた他は製
造例1と全く同様な方法で多孔質体を製造した。得られ
た粒子の排除限界分子量は約5万であった。これを製造
例1と同様に苛性ソーダ処理してカルボキシル基を定量
するとベンジルエステル部分の約65%が加水分解によ
ってカルボキシル基になっていることが解った。
【0019】比較例1
製造例1において、苛性ソーダ処理をしなかったほかは
製造例1と全く同様な方法で多孔質体を製造した。
製造例1と全く同様な方法で多孔質体を製造した。
【0020】比較例2
製造例2において、苛性ソーダ処理をしなかったほか製
造例1と全く同様な方法で多孔質体を製造した。
造例1と全く同様な方法で多孔質体を製造した。
【0021】実施例
製造例1、2及び比較例1、2で得られた吸着剤それぞ
れ1gを、人工透析患者血しょう50ml中に浸漬し、
撹拌しながら、37℃で、血しょう中のβ2−ミクログ
ロブリン濃度(β2 )、全タンパク質濃度(TP)、
アルブミン/グロブリン比(A/G)の経時変化を測定
した。 0時間
4時間
β2 TP A/G
β2 TP A/G
mg /L g/dl −
mg /L g/dl −製造例1
13.5 4.2 1.5 2.6
4.2 1.5製造例2 13.5 4.2
1.5 2.3 4.2 1.5比
較例1 13.5 4.2 1.5
4.5 4.2 1.5比較例2 13.5
4.2 1.5 6.4 4.2 1
.5上記から明らかなように、β2 は4時間後におい
て、製造例1、2の場合には比較例1、2の約半分又は
半分以下である。
れ1gを、人工透析患者血しょう50ml中に浸漬し、
撹拌しながら、37℃で、血しょう中のβ2−ミクログ
ロブリン濃度(β2 )、全タンパク質濃度(TP)、
アルブミン/グロブリン比(A/G)の経時変化を測定
した。 0時間
4時間
β2 TP A/G
β2 TP A/G
mg /L g/dl −
mg /L g/dl −製造例1
13.5 4.2 1.5 2.6
4.2 1.5製造例2 13.5 4.2
1.5 2.3 4.2 1.5比
較例1 13.5 4.2 1.5
4.5 4.2 1.5比較例2 13.5
4.2 1.5 6.4 4.2 1
.5上記から明らかなように、β2 は4時間後におい
て、製造例1、2の場合には比較例1、2の約半分又は
半分以下である。
Claims (2)
- 【請求項1】 吸着のための官能基として疎水基とカ
ルボキシ基の双方を有することを特徴とするポリアミノ
酸の多孔質体からなるβ2 −ミクログロブリン用吸着
剤。 - 【請求項2】 その細孔径がデキストランの分子量に
して1万から5万であることを特徴とする請求項1記載
のβ2 −ミクログロブリン用吸着剤。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP3103231A JPH04256441A (ja) | 1991-02-06 | 1991-02-06 | β2−ミクログロブリン用吸着剤 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP3103231A JPH04256441A (ja) | 1991-02-06 | 1991-02-06 | β2−ミクログロブリン用吸着剤 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH04256441A true JPH04256441A (ja) | 1992-09-11 |
Family
ID=14348691
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP3103231A Pending JPH04256441A (ja) | 1991-02-06 | 1991-02-06 | β2−ミクログロブリン用吸着剤 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPH04256441A (ja) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0647470A2 (en) * | 1993-10-06 | 1995-04-12 | Ajinomoto Co., Inc. | Adsorbent for beta2-microglobulin |
JP2008156617A (ja) * | 1994-09-23 | 2008-07-10 | Massey Univ | クロマトグラフ用樹脂およびその使用方法 |
-
1991
- 1991-02-06 JP JP3103231A patent/JPH04256441A/ja active Pending
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0647470A2 (en) * | 1993-10-06 | 1995-04-12 | Ajinomoto Co., Inc. | Adsorbent for beta2-microglobulin |
EP0647470A3 (en) * | 1993-10-06 | 1995-05-03 | Ajinomoto Kk | Adsorbent for beta2-microglobulin. |
JP2008156617A (ja) * | 1994-09-23 | 2008-07-10 | Massey Univ | クロマトグラフ用樹脂およびその使用方法 |
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