JPH04213308A - プロペンアミド誘導体とアニオン性単量体との共重合物およびその用途 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 【０００１】 【産業上の利用分野】本発明は、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓ
ｐ　のトリペプチドを必須単位として有する新規なアニ
オン性プロペンアミド誘導体共重合物とその塩、および
それを有効成分とする動物細胞の接着阻害剤、血小板の
凝集・粘着抑制剤並びにＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ　のト
リペプチドを必須単位として有するアニオン性プロペン
アミド誘導体架橋共重合物とその塩、およびそれを有効
成分とする動物細胞培養基体に関するものである。 【０００２】 【従来の技術】フィブロネクチンは細胞−細胞外基質の
接着に関与するタンパク質であり、血小板凝集やガン転
移にも関与していると考えられている。これらの相互作
用は一連の細胞表面のレセプターにより仲介され、フィ
ブロネクチンは分子量約２５万の巨大分子であるにもか
かわらず、これらのレセプターがそのＡｒｇ−Ｇｌｙ−
Ａｓｐ　配列を特異的に認識することが明らかにされ、
レセプターとの相互作用に重要なものであることが報告
されている（ネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ）　、第３０９
　巻、３０頁、１９８４年）。 以来、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ　配列を有するオリゴあ
るいはポリペプチドを用いる研究が成されている。 【０００３】例えば、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ　配列を
有する種々の鎖状及び環状のオリゴペプチドを用いて血
小板凝集を阻害する方法（高分子学会予稿集（Ｐｏｌｙ
ｍｅｒ　Ｐｒｅｐｒｉｎｔｓ，　Ｊａｐａｎ）、第３８
巻、３１４９頁、１９８９年、特開平２−１７４７９７
号）　、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ　配列を有するペプチ
ドを細胞移動抑制剤として用いる方法（特開平２−４７
１６号）　、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ　を固定化したＰ
ＭＭＡ膜を細胞接着膜として用いる方法（高分子学会予
稿集（Ｐｏｌｙｍｅｒ　Ｐｒｅｐｒｉｎｔｓ，　Ｊａｐ
ａｎ）、第３７巻、７０５　頁、１９８８年）　が報告
されている。さらに、ポリマーにＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓ
ｐ　を必須構成単位とするペプチドを共有結合させ動物
細胞培養基体、生体複合人工臓器用基体として用いる方
法（特開平１−３０９６８２号、特開平１−３０５９６
０号）　、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ　配列を有
するポリペプチドを体外血液用血小板保護剤として用い
る方法が開示されている（特開昭６４−６２１７　号）
　、また、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ　配列を有するオリ
ゴペプチドあるいはその繰り返し構造を有するポリペプ
チドを用いて、ガン転移を抑制する方法が知られている
（（Ｉｎｔ．　Ｊ．　Ｂｉｏｌ．　Ｍａｃｒｏｍｏｌ．
）、第１１巻、２３頁、１９８９年、同誌、第１１巻、
２２６　頁、１９８９年、（Ｊｐｎ．　Ｊ．Ｃａｎｃｅ
ｒ　Ｒｅｓ．）　第６０巻、７２２　頁、１９８９年）
　。 【０００４】一般に高分子物質は多様な性状、機能を有
し生体との間で示される相互作用も低分子の場合と非常
に異なっている。そこで低分子薬物、生理活性ペプチド
などを高分子に結合させることで、それらの化合物と細
胞との相互作用や生体内における挙動を抑制しようとす
る研究が盛んに行なわれている。この様な、高分子のラ
イフサイエンスへの応用は、医用高分子材料、高分子医
薬、診断用材料、バイオリアクター、バイオアフィニテ
ィー材料などへ幅広く試みられており、これらに関する
高分子材料とその用途については、竹本喜一、砂本順三
、明石満　　共編“高分子と医療”（三田出版会）、千
畑一郎編“バイオテクノロジーシリーズ固定化酵素”（
講談社、山崎誠、石井信一、岩井浩一編“アフィニティ
ークロマトグラフィー”（講談社）に詳しく記載されて
いる。 【０００５】プロペン酸誘導体から合成したプロペンア
ミド誘導体はビニル基を有しており、ビニル重合により
各種アニオン性ビニル単量体と容易に共重合物を形成す
ることができ、種々の材料に供することができる。水不
溶性のビニル重合体にＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ　を必須
単位とするオリゴペプチドを高分子反応により高分子に
導入した例は見られるが、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ　を
必須単位とするオリゴペプチドを側鎖に有する重合可能
なプロペンアミド誘導体の水溶性アニオン性共重合物お
よびハイドロゲルは知られておらず、これらはレセプタ
ーとの結合能の増強および血液中での安定化等が期待で
きる。 【０００６】 【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、Ａｒ
ｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ　のトリペプチドを必須単位として
有する新規なアニオン性プロペンアミド誘導体共重合物
とその塩、およびそれを有効成分とする動物細胞の接着
阻害剤、血小板凝集・粘着抑制剤、並びにＡｒｇ−Ｇｌ
ｙ−Ａｓｐ　のトリペプチドを必須単位として有する新
規なアニオン性プロペンアミド誘導体架橋共重合物とそ
の塩、およびそれを有効成分とする動物細胞培養基体を
提供することである。 【０００７】 【課題を解決するための手段】本発明は、下記一般式〔
Ｉ〕の側鎖に、下記一般式〔ＩＩ〕で表される接着性ペ
プチドを必須単位として有するプロペンアミド誘導体と
、下記一般式〔ＩＩＩ　〕で表わされるアニオン性単量
体の共重合物又はその塩を提供するものである。 【０００８】一般式〔Ｉ〕 Ｒ１Ｒ２Ｃ　＝ＣＲ３　−ＣＯ−［ＮＨ］−式中、Ｒ１
　、Ｒ２　は水素原子又はカルボキシル基を表し、Ｒ３
　は水素原子、メチル基、エチル基、ハロゲン原子又は
カルボキシメチル基を表す。 【０００９】一般式〔ＩＩ〕 −［Ｒ４］−［ＣＯ］−（［Ｘ］−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａ
ｓｐ−［Ｙ］）ｎ−［Ｚ］−［Ｒ５］− 式中、Ｘ，ＹはＳｅｒ，　Ｇｌｙ，　Ｖａｌ，　Ａｓｎ
，　Ｐｒｏ　から選択されるアミノ酸残基又はこれらの
アミノ酸からなるペプチド残基を表し、Ｚは−Ｏ−又は
−ＮＨ−を示す。Ｒ４　、Ｒ５　のいずれか一方は水素
原子を、他方は炭素数が１〜１１の直鎖又は分岐のアル
キレン基、又は炭素数が６〜１１のアリーレン基を表し
、置換基を有していてもよい。ｎは１〜５の整数を表す
。 【００１０】置換基としては、カルボニル基、カルボキ
シル基、アミノ基、ヒドロキシル基、スルホ基、ハロゲ
ン原子、アリール基、ニトロ基、シアノ基、不飽和基の
２重結合、３重結合等があげられ、同一鎖に２つ以上有
していてもよい。 【００１１】一般式〔ＩＩＩ　〕 Ｈ２Ｃ＝ＣＲ６　−［ＣＯ］−［Ｗ］−Ｒ７式中、Ｒ６
　は水素原子又はは炭素数１〜３のアルキル基で置換基
を有していてもよい。Ｗは−Ｏ−又は−ＮＨ−を示す。 Ｒ７　は水素原子又は炭素数が１〜１２の直鎖又は分岐
のアルキル基、又は炭素数が６〜１１のアリール基であ
り、置換基として少なくともカルボキシル基、スルホ基
、ホスホロ基のいずれか一つを含み、さらに置換基を有
していてもよい。 【００１２】置換基としては、カルボニル基、カルボキ
シル基、アミノ基、ヒドロキシル基、スルホ基、ハロゲ
ン原子、アリール基、ニトロ基、シアノ基、不飽和基の
２重結合、３重結合等があげられ、同一鎖に２つ以上有
していてもよい。又、アミド結合、エステル結合、エー
テル結合、尿素結合、カルバミン酸エステル結合、炭酸
エステル結合等を、同一鎖に２つ以上有していてもよく
さらにヘテロ環を有していてもよい。 【００１３】一般式〔Ｉ〕、〔ＩＩ〕、〔ＩＩＩ　〕に
おいて、［　　］は［　　］内の基が存在するかあるい
は存在しなくてもよいことを示す。 【００１４】本発明はさらに、上記アニオン性プロペン
アミド誘導体共重合物およびその塩を有効成分とする動
物細胞の接着阻害剤および血小板凝集・粘着抑制剤を提
供するものである。共重合物中のプロペンアミド誘導体
由来の構成単位の含有量は、好ましくは０．１〜９０モ
ル％、さらに好ましくは０．５〜６０モル％である。 【００１５】アニオン性プロペンアミド誘導体共重合物
およびその塩の分子量は好ましくは３０万以下、特に３
０００−２０万の範囲で、室温で水溶性であることが好
ましい。 【００１６】本発明はまた、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ　
のペプチド配列を必須単位として共有結合してなるプロ
ペンアミド誘導体のアニオン性架橋共重合物及びその塩
を提供するものである。架橋共重合物は水溶液中でハイ
ドロゲル状であることが好ましい。架橋共重合物を合成
する場合、プロペンアミド誘導体、アニオン性単量体に
加え多官能性単量体を添加する。多官能性単量体として
は、トリエチレングリコールジメタクリレート、メチレ
ンビスアクリルアミド等のジメタクリレート、ジアクリ
レート、ジメタクルアミド、ジアクリルアミドやジビニ
ルベンゼン等の芳香環を有する多官能性単量体、さらに
細胞接着性フラグメントを有する多官能性単量体等を用
いることができる。架橋共重合物中、プロペンアミド誘
導体由来の構成単位の含有量は、好ましくは０．１〜９
０モル％、さらに好ましくは０．５〜６０モル％であり
、また多官能性単量体由来の構成単位の含有量は、好ま
しくは０．１〜３０モル％、さらに好ましくは０．５〜
２０モル％である。本発明はさらに、この架橋共重合物
又はその塩を有効成分とする動物細胞の培養基体を提供
するものである。 【００１７】本発明に係わる接着性ペプチドに用いられ
るアミノ酸はＬ体、Ｄ体どちらでもよいが、好ましくは
Ｌ体である。 【００１８】本発明に用いることのできるアニオン性単
量体は通常の重合可能なビニル単量体であればよく、特
に限定されない。 【００１９】例えば、アクリル酸、メタクリル酸、イタ
コン酸、マレイン酸、フマル酸、クロトン酸、２−アク
リルアミドグリコール酸、２−メタクリルアミドグリコ
ール酸、スチレンスルホン酸、ビニルスルホン酸、２−
アクリルアミド−２−メチルプロパンスルホン酸アミド
、４−ビニル安息香酸等のカルボキシル基、スルホン酸
基を有するビニル単量体、５−アミノ吉草酸、６−アミ
ノカプロン酸、１２−アミノラウリン酸のＮ−メタクリ
ロイル誘導体、及びＮ−アクリロイル誘導体等が挙げら
れる。 【００２０】さらに、Ｎ−メタクリロイルグリシン、Ｎ
−メタクリロイル−β−アラニン、Ｎ−メタクリロイル
アラニン、Ｎ−メタクリロイル−γ−アミノ酪酸、Ｎ−
メタクリロイルバリン、Ｎ−メタクリロイルロイシン、
Ｎ−メタクリロイルイソロイシン、Ｎ−メタクリロイル
ノルバリン、Ｎ−メタクリロイルノルロイシン、Ｎ−メ
タクリロイルセリン、Ｎ−メタクリロイルスレオニン、
Ｎ−メタクリロイルメチオニン、Ｎ−メタクリロイルフ
ェニルアラニン、Ｎ−メタクリロイルチロシン、Ｎ−α
−メタクリロイルトリプトファン、Ｎ−メタクリロイル
プロリン、Ｎ−メタクリロイルヒドロキシプロリン、Ｎ
−メタクリロイルアスパラギン酸、Ｎ−メタクリロイル
アスパラギン、Ｎ−メタクリロイルグルタミン酸、Ｎ−
メタクリロイルグルタミン、Ｎ−α−メタクリロイルア
ルギニン、Ｎ−α−メタクリロイルシトルリン、Ｎ−ア
クリロイルグリシン、Ｎ−アクリロイル−β−アラニン
、Ｎ−アクリロイルアラニン、Ｎ−アクリロイル−γ−
アミノ酪酸、Ｎ−アクリロイルバリン、Ｎ−アクリロイ
ルロイシン、Ｎ−アクリロイルイソロイシン、Ｎ−アク
リロイルノルバリン、Ｎ−アクリロイルノルロイシン、
Ｎ−アクリロイルセリン、Ｎ−アクリロイルスレオニン
、Ｎ−アクリロイルメチオニン、Ｎ−アクリロイルフェ
ニルアラニン、Ｎ−アクリロイルチロシン、Ｎ−α−ア
クリロイルトリプトファン、Ｎ−アクリロイルプロリン
、Ｎ−アクリロイルヒドロキシプロリン、Ｎ−アクリロ
イルアスパラギン酸、Ｎ−アクリロイルアスパラギン、
Ｎ−アクリロイルグルタミン酸、Ｎ−アクリロイルグル
タミン、Ｎ−α−アクリロイルアルギニン、Ｎ−α−ア
クリロイルシトルリン等のアミノ酸残基を有するビニル
単量体が挙げられる。 【００２１】また、メタクリロイルオキシエチルリン酸
、メタクリロイルオキシエチルフェニルリン酸、メタク
リロイルオキシデカノイルリン酸等の側鎖にリン酸基を
有するビニル単量体も使用することができる。 【００２２】好ましくは、グリシン、β−アラニン、４
−アミノ酪酸、５−アミノ吉草酸、６−アミノカプロン
酸、１２−アミノラウリン酸、４−アミノ安息香酸、ロ
イシン、グルタミン酸のＮ−メタクリロイル誘導体、及
びＮ−アクリロイル誘導体、ロイシン、グルタミン酸の
Ｎ−メタクリロイル誘導体、及びＮ−アクリロイル誘導
体、並びにアクリル酸、メタクリル酸、イタコン酸、マ
レイン酸である。 【００２３】本発明のアニオン性プロペンアミド誘導体
共重合物の塩として例えば、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、
リン酸塩、ホウ酸塩等の無機酸との塩や、酢酸塩、トリ
フルオロ酢酸塩、トリフルオロメタンスルホン酸塩、乳
酸塩、酒石酸塩等の有機酸との塩が挙げられ、そのよう
な塩への変換は慣用手段で行なうことができる。 【００２４】ペプチド合成方法は特に限定されるもので
はなく、液相法、固相法、および自動合成装置による合
成方法が挙げられる。これらの合成方法の詳細について
は、生化学実験講座“タンパク質の化学ＩＶ”ｐ２０７
−４９５（日本生化学会編、東京化学同人）、“続生化
学実験講座タンパク質の化学（下）”（日本生化学会編
、東京化学同人）、泉屋ら編“ペプチド合成の基礎と実
験”（丸善）に記載されている。また、市販されている
合成ペプチドを利用することも可能である。 【００２５】プロペン酸誘導体とアミノアルキルカルボ
ン酸および細胞接着性ペプチドの結合方法としては、活
性エステル法、混合酸無水物法、アジド法、酸塩化物法
、対称酸無水物法、ＤＣＣ法、ＤＣＣ−アディティブ法
、カルボニルジイミダゾール法等を利用したアミド結合
合成方法が挙げられる。プロペン誘導体とアニオン性単
量体の共重合物および架橋共重合物は一般のラジカル重
合法、イオン重合法により得られる。水溶性重合物はゲ
ルろ過法、透析法等により特定の分子量分画を行なうこ
とが出来る。架橋共重合物は多官能性単量体の組成を変
えることで含水率、ゲル強度等の物性が異なるハイバロ
ゲルとして得ることができる。 【００２６】本発明のアニオン性プロペンアミド誘導体
共重合物およびその塩は、細胞接着性蛋白質のコア配列
Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ　を有し、該コア配列を介して
細胞接着性蛋白質と同様の機序で細胞に接着する。その
ため、細胞接着性蛋白のアゴニスト又はアンタゴニスト
として種々の生物活性を示し、免疫調整作用、創傷治癒
作用、毛細血管中で起こる癌細胞による血小板凝集抑制
作用、神経疾患治癒作用などの広範な生物活性が認めら
れている。 【００２７】従って、本発明のアニオン性プロペンアミ
ド誘導体共重合物およびその塩は、その少なくとも一種
を、場合により慣用の担体又は医薬用助剤とともに、癌
転移抑制剤、創傷治癒剤、免疫調整剤、血小板凝集粘着
抑制剤として患者に投与することが可能である。特に、
動物細胞接着阻害剤又は血小板凝集粘着抑制剤としての
使用が好ましい。その投与量は、０．２μｇ／ｋｇ〜４
００ｍｇ／ｋｇの範囲で、症状、年齢、体重等に基づい
て決定される。 【００２８】本発明のアニオン性プロペンアミド誘導体
共重合物およびその塩は、ペプチド系医薬に一般に使用
されている投与方法、即ち非経口投与方法、例えば静脈
内投与、筋肉内投与、皮下投与等によって投与するのが
好ましい。そのような注射用製剤を製造する場合、本発
明のアニオン性プロペンアミド誘導体共重合物およびそ
の塩を例えば、後記実施例で示すようにＰＢＳ又は生理
食塩水に溶解して、注射用製剤としてもよく、あるいは
０．１Ｎ程度の酢酸水等に溶解した後、凍結乾燥製剤と
してもよい。この様な製剤には、グリシンやアルブミン
等の慣用の安定剤を添加してもよい。さらに、本発明の
アニオン性プロペンアミド誘導体共重合物およびその塩
は、例えばリポソーム中に包容したマイクロカプセル剤
あるいはミクロスフェア状、ハイドロゲル状とすれば、
経口投与することも可能であり、座剤、舌下錠、点鼻ス
プレー剤等の形にすれば、消化管以外の粘膜からも吸収
させることが可能である。 【００２９】動物細胞の培養における細胞培養基体の使
用方法については、通常の方法で行なわれ特に限定され
ない。例えば、接着性ペプチドを共有結合処理したビー
ズ培養液中に浮遊させて低速度で撹拌を行なうことで動
物細胞をマイクロキャリアー表面に接着させ培養する方
法、接着性ペプチドを共有結合処理したシャーレ・ロー
ラーびん等の上で動物細胞を培養する方法、接着性ペプ
チドを共有結合処理した中空糸に培養液を還流させ動物
細胞を中空糸内面に接着させ培養する方法、接着性ペプ
チドを共有結合処理したマイクロキャリアーを充填した
カラムを用いる方法等が挙げられる。 【００３０】この発明の細胞培養基体は、種々の細胞の
培養に使用することができ、細胞の種類は特に限定され
ず、生体由来細胞、ハイブリドーマ等が挙げられる。 【００３１】 【実施例】以下実施例により本発明を更に説明するが本
発明はこれに限定されるものではない。 【００３２】 製造例１ カルボキシエチルメタクリルアミドをショッテンバウマ
ン反応により合成した。即ち、β−アラニン１７．８ｇ
（０．２ｍｏｌ）の水酸化ナトリウム水溶液にメタクリ
ル酸クロリド２０．９ｇ（０．２ｍｏｌ）を氷冷下滴下
し、４時間撹拌後、塩酸により中和した。減圧濃縮し、
沈澱した塩化ナトリウムをろ別した。濃縮液をクロロホ
ルムで抽出し、乾燥後減圧濃縮してクロロホルムを留去
した。濃縮物をエーテルで洗浄し製造物１を白色固体と
して１７．６ｇ得た。（収率５６％） 製造物１ ＣＨ２＝ＣＣＨ３−ＣＯ−ＮＨ−Ｃ２Ｈ４−ＣＯＯＨ【
００３３】 製造例２〜８ 製造例１と同じ方法によりアクリル酸クロリド、メタク
リル酸クロリド、エタクリル酸クロリドと４−アミノ酪
酸、５−アミノ吉草酸、６−アミノカプロン酸、１２−
アミノラウリン酸、ロイシン、グルタミン、ｐ−アミノ
安息香酸、グリシン、グルタミン酸との反応により以下
のプロペン酸誘導体を製造した。 製造物２ ＣＨ２＝ＣＨ−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）３−ＣＯＯＨ収
率５２％ 製造物３ ＣＨ２＝ＣＣ２Ｈ５　−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）４−Ｃ
ＯＯＨ収率６１％ 製造物４ ＣＨ２＝ＣＣＨ３−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）５−ＣＯＯ
Ｈ収率６９％ 製造物５ ＣＨ２＝ＣＨ−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）１１　−ＣＯＯ
Ｈ収率７１％ 製造物６ ＣＨ２＝ＣＨ−ＣＯ−ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３
）２）　−ＣＯＯＨ収率６４％ 製造物７ ＣＨ２＝ＣＣＨ３−ＣＯ−ＮＨ−ＣＨ（Ｃ２Ｈ４ＣＯＮ
Ｈ２）　−ＣＯＯＨ収率５９％ 製造物８ ＣＨ２＝ＣＨ−ＣＯ−ＮＨ−ｐ　−Ｃ６Ｈ４−ＣＯＯＨ
収率６８％ 製造物９ ＣＨ２＝ＣＣＨ３−ＣＯ−ＮＨ−ＣＨ２　−ＣＯＯＨ収
率６３％ 製造物１０ ＣＨ２＝ＣＣＨ３−ＣＯ−ＮＨ−ＣＨ（Ｃ２Ｈ４ＣＯＯ
Ｈ）−ＣＯＯＨ収率５７％ 【００３４】 製造例１１ アミノエチルメタクリルアミドをショッテンバウマン反
応により合成した。即ち、エチレンジアミン１２０ｇ（
２ｍｏｌ）を溶かしたクロロホルム溶液（４００ｍｌ）
へ、メタクリル酸クロリド２０．９ｇ（０．２ｍｏｌ）
を氷冷下滴下し４時間撹拌後減圧濃縮してクロロホルム
を留去した。 濃縮物に５％炭酸水素ナトリウム水溶液５０ｍｌを加え
クロロホルムで抽出した。硫酸ナトリウム上で乾燥の後
濃縮し、クロロホルム／メタノール＝７／３を溶離液と
したアルミナカラムクロマトグラフィーにより精製した
。 （製造物１１） ＣＨ２＝ＣＣＨ３−ＣＯ−ＮＨ−Ｃ２Ｈ４−ＮＨ２　収
量１４．８ｇ（５７．８％、０．１１６ｍｏｌ）【００
３５】 製造例１２ 製造例１で合成したカルボキシエチルメタクリルアミド
をラジカル重合により重合した。カルボキシエチルメタ
クリルアミド２ｇを２０ｍｌのＤＭＦに溶解し、和光純
薬製のラジカル開始剤Ｖ６５（２，２−アゾビス（２，
４−ジメチルバレロニトリル））１０ｍｇを加え窒素気
流下６５℃で４時間重合した。重合物は酢酸エチルで沈
澱させた後、スペクトラポア７（分子分画量３０００）
を用い純水に対して透析し、低分子量画分を除いた後、
凍結乾燥した。収量１．２４ｇ（製造物１２）【００３
６】分子量は東ソー（株）製　ＴＳＫｇｅｌ　Ｇ３００
０ＳＷ　カラムを用い、移動相は０．２Ｍリン酸緩衝液
（ｐＨ７．４）とし、流速１．０ｍｌ／ｍｉｎ　で測定
した。ＰＥＧ換算分子量は約３００００であった。 【００３７】 製造例１３ 製造例１で合成したカルボキシエチルメタクリルアミド
をラジカル重合により重合しハイドロゲルを作成した。 【００３８】シラン処理したガラス板（５ｃｍ×６ｃｍ
×１ｃｍ）２枚とガスケットを用意した。カルボキシエ
チルメタクリルアミド２ｇとメチレンビスアクリルアミ
ド１００ｍｇ（５ｗｔ％）を蒸留水１２ｍｌに溶解し１
Ｎ　ＮａＯＨ　でｐＨ７．４に合わせた。これに過硫酸
アンモニウム１０ｍｇを加え充分窒素置換をした後、ガ
ラス板の間に注入した。万力でガラス板を押え、６０℃
で２０時間重合させた。生成したハイドロゲルを蒸留水
で洗浄し未反応単量体を除いた。（紫外線ランプにより
滅菌処理した後細胞培養実験に供した）（製造物１３） 【００３９】 合成例１〜１４ 接着性ペプチドの固相法による合成Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌ
ｄ方式によるペプチド合成装置を用いて合成を行なった
。α−アミノ酸の保護には、Ｂｃｏ基を用いＡｒｇ−Ｇ
ｌｙ−Ａｓｐ　を必須単位として含むオリゴペプチドを
合成し、その末端に製造例１−８に示したプロペン酸誘
導体およびアクリル酸、メタクリル酸、エタクリル酸を
縮合させた。トリフルオロメタンスルホン酸を用いて樹
脂からの切断及び側鎖保護基の除去を行ない、分取用Ｈ
ＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィー）で精製し、単一
ピークを示すプロペンアミド誘導体を得た。これを、陰
イオン交換樹脂カラム（アンバーライトＩＲＡ−４００
；Ｃｌ型）を通し塩酸塩とした。 【００４０】以下、ＡｒｇをＲ、ＧｌｙをＧ、Ａｓｐを
Ｄ、ＳｅｒをＳ、ＰｒｏをＰと示す。また保護基、試薬
の略号は以下の様である。 【００４１】 Ｂｏｃ　　　　　　　　：ｔ−ブトキシカルボニルＯＢ
ｚｌ　　　　　　：ベンジルエステルＨＯＢｔ　　　　
：ヒドロキシベンゾトリアゾールＯＳｕ　　　　　　：
Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドＯＮｂ　　　　　　：ニ
トロベンジルエステルＴＦＡ　　　　　　：トリフルオ
ロ酢酸ＤＣＣ　　　　　　：ジシクロヘキシルカルボジ
イミドＤＣ　ｕｒｅａ　　　：シクロヘキシルウレアＭ
ｔｓ　　　　　　　　：メシチレンスルホニルＤＭＦ　
　　　　　：ジメチルホルムアミド【００４２】 【００４３】 【００４４】 【００４５】 【００４６】 【００４７】 【００４８】 【００４９】 【００５０】 合成物９ 　　　　　　　　　ＣＨ２＝ＣＨ−ＣＯ−ＮＨ−ＣＨ（
ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２）　−ＣＯ−ＲＧＤＳ　　　　
　　　　　　（配列番号９） 　　収率３１％ 　　アミノ酸分析（ｎｍｏｌ／５０μｌ）　　　　　　
　　　　　　　　Ｒ：０．９８１４　　　　　　　　　
　　　　　Ｇ：１．０５１９　　　　　　　　　　　　
　　Ｄ：０．９７３１　　　　　　　　　　　　　　Ｓ
：０．８９８９　　　　　　　　ロイシン：０．９８５
３　　マススペクトル　　Ｍ＋　：　　６０１【００５
１】 合成物１０ 　　　　　　　　　ＣＨ２＝ＣＣＨ３−ＣＯ−ＮＨ−Ｃ
Ｈ（Ｃ２Ｈ４ＣＯＮＨ２）　−ＣＯ−ＲＧＤＳ　　　　
　　　　　　（配列番号１０） 　　収率３３％ 　　アミノ酸分析（ｎｍｏｌ／５０μｌ）　　　　　　
　　　　　　　　Ｒ：０．９７７１　　　　　　　　　
　　　　　Ｇ：１．０５０１　　　　　　　　　　　　
　　Ｄ：０．９６５１　　　　　　　　　　　　　　Ｓ
：０．８９６９　　　　グルタミン酸：０．９５８７ 　　マススペクトル　　Ｍ＋　：　　６３０【００５２
】 【００５３】 【００５４】 【００５５】 【００５６】 合成例１５ 合成物１５ ＣＨ２＝ＣＣＨ３−ＣＯ−ＮＨ−Ｃ２Ｈ４−ＣＯ−ＲＧ
ＤＳ　　（配列番号１５） 【００５７】合成物１５を逐次延長法により液相法で合
成した。 （１）　ＢｏｃＳｅｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚｌ　の合成Ｂｏ
ｃＳｅｒ（Ｂｚｌ）　６０ｇ（０．２ｍｏｌ）を４００
ｍｌの酢酸エチルに加え、さらにトリエチルアミン２１
ｇ（０．２ｍｏｌ）、臭化ベンジル３５．４ｇ（０．２
ｍｏｌ）を加えて還流下４時間反応させた。冷却後、塩
をろ別し、ＮａＨＣＯ３水溶液、ＮａＣｌ水溶液で洗浄
した。これをＮａ２ＳＯ４で乾燥した後減圧乾固し、白
色粉末５４ｇ（収率６８％）を得た。 【００５８】（２）　ＢｏｃＡｓｐ（ＯＢｚｌ）Ｓｅｒ
（Ｂｚｌ）ＯＢｚｌの合成ＢｏｃＳｅｒ（Ｂｚｌ）ＯＢ
ｚｌ　３０ｇ（７８ｍｍｏｌ）にＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２
＝１／１　　２００ｍｌを加え室温で１時間撹拌した後
、ＴＦＡとＣＨ２Ｃｌ２を減圧濃縮した。これを酢酸エ
チルに溶解しＮａＨＣＯ３水溶液で中和した後ＮａＣｌ
水溶液で洗浄した。Ｎａ２ＳＯ４で乾燥してから酢酸エ
チルを減圧留去した。 【００５９】この化合物と、ＢｏｃＡｓｐ（ＯＢｚｌ）
ＯＳｕ　３２．８ｇ（７８ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２５
００ｍｌに溶解し終夜撹拌した。 減圧下ＣＨ２Ｃｌ２を留去してから酢酸エチルに溶解し
た。ＮａＨＣＯ３水溶液、１Ｍクエン酸水溶液、ＮａＣ
ｌ水溶液の順に洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥してから減
圧乾固して白色粉末を４１ｇ（収率８９％）得た。 【００６０】（３）　ＢｏｃＧｌｙＡｓｐ（ＯＢｚｌ）
Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚｌ　の合成ＢｏｃＡｓｐ（ＯＢ
ｚｌ）Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚｌ　　３５ｇ（５９ｍｍ
ｏｌ）にＴＦＡ：ＣＨ２Ｃｌ２＝１：１２００ｍｌを加
え室温で１時間撹拌した後、ＴＦＡとＣＨ２Ｃｌ２を減
圧濃縮した。これを酢酸エチルに溶解しＮａＨＣＯ３水
溶液で中和した後ＮａＣｌ水溶液で洗浄した。Ｎａ２Ｓ
Ｏ４で乾燥してから酢酸エチルを減圧留去した。 【００６１】この化合物とＢｏｃＧｌｙ　　９．８ｇ（
５９ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２に溶解し、ＤＣＣ１２．
２ｇ（５９ｍｍｏｌ）を氷冷下加え３時間撹拌してから
、さらに室温で終夜撹拌した。ＤＣｕｒｅａをろ別して
から減圧濃縮し酢酸エチルに溶解した。ＮａＨＣＯ３水
溶液、１Ｍクエン酸水溶液、ＮａＣｌ水溶液の順に洗浄
し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥してから減圧乾固して白色粉末
を３０．５ｇ（収率７５％）得た。 【００６２】（４）　ＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ）ＧｌｙＡ
ｓｐ（ＯＢｚｌ）Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚｌ　の合成 ＢｏｃＧｌｙＡｓｐ（ＯＢｚｌ）Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）ＯＢ
ｚｌ　２５ｇ（３９ｍｍｏｌ）にＴＦＡ：ＣＨ２Ｃｌ２
＝１：１２００ｍｌを加え室温で１時間撹拌した後、Ｔ
ＦＡとＣＨ２Ｃｌ２を減圧濃縮した。これを酢酸エチル
に溶解しＮａＨＣＯ３水溶液で中和した後ＮａＣｌ水溶
液で洗浄した。Ｎａ２ＳＯ４で乾燥してから酢酸エチル
を減圧留去した。 【００６３】この化合物とＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ）　１
７．８ｇ（３９ｍｍｏｌ）をＤＭＦ４００ｍｌに溶解し
、ＤＣＣ８．０ｇ（３９ｍｍｏｌ）、　ＨＯＢｔ　６．
８ｇ（４５ｍｍｏｌ）を氷冷下加え３時間撹拌してから
、さらに室温で終夜撹拌した。ＤＣｕｒｅａをろ別して
から減圧濃縮し酢酸エチルに溶解した。ＮａＨＣＯ３水
溶液、１Ｍクエン酸水溶液、ＮａＣｌ水溶液の順に洗浄
し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥してから減圧乾固して白色粉末
を１９．５ｇ（収率５０％）得た。 【００６４】（５）　合成物１５の合成ＢｏｃＡｒｇ（
Ｍｔｓ）ＧｌｙＡｓｐ（ＯＢｚｌ）Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）Ｏ
Ｂｚｌ１５．０ｇ（１５ｍｍｏｌ）にＴＦＡ：ＣＨ２Ｃ
ｌ２＝１：１を１００ｍｌ加えて室温で１時間撹拌した
後、ＴＦＡとＣＨ２Ｃｌ２を減圧濃縮した。 これを酢酸エチルに溶解しＮａＨＣＯ３水溶液で中和し
た後、ＮａＣｌ水溶液で洗浄した。Ｎａ２ＳＯ４で乾燥
してから酢酸エチルを減圧留去した。 【００６５】この化合物とカルボキシエチルメタクリル
アミド２．４ｇ（１５ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２２００
ｍｌに溶解しＤＣＣ３．１ｇ（１５ｍｍｏｌ）を氷冷下
加え３時間撹拌してから、さらに室温で終夜撹拌した。 減圧濃縮してからアセトンを加え、生じたＤＣｕｒｅａ
をろ別した。減圧濃縮後、酢酸エチルに続いてエーテル
で洗浄し、減圧乾燥して白色粉末を１０．０ｇ（収率６
５％）得た。 【００６６】この化合物１０ｇ（９．８ｍｍｏｌ）のＴ
ＦＡ溶液に、１Ｍ−トリフルオロメタンスルホン酸−チ
オアニソール−ｍ−クレゾールのＴＦＡ溶液を氷冷下加
えて１時間反応させ、ペプチド側鎖および末端の保護基
の脱保護を行なった。反応液をエーテル中に投入しオイ
ル状の沈澱物を蒸留水に溶解し酢酸エチルで洗浄した後
、陰イオン交換樹脂カラム（アンバーライトＩＲＡ−４
００；Ｃｌ型）に通して塩酸塩とし凍結乾燥した。白色
固体４．８ｇ（収率８０％）が得られた。 【００６７】 合成例１６ 合成物１６ ＣＨ２＝ＣＣＨ３−ＣＯ−ＮＨ−Ｃ２Ｈ４−ＣＯ−ＲＧ
ＤＳＧＮＨ２（配列番号１６） 【００６８】合成例１５と同様な方法でペプチド鎖を延
長した。以下にその概略を示す。 （１）　ＢｏｃＳｅｒ（Ｂｚｌ）ＧｌｙＮＨ２　の合成
ＢｏｃＳｅｒ（Ｂｚｌ）　　　　　　　　　：５９ｇ（
０．２ｍｏｌ）ＧｌｙＮＨ２・ＨＣｌ　　　　　　　　
　：２２．１ｇ（０．２ｍｏｌ）Ｎ−メチルモルホリン
　　：２０．２ｇ（０．２ｍｏｌ）ＣＨ２Ｃｌ２　　　
　　　　　　　　　　　：８００ｍｌＤＣＣ　　　　　
　　　　　　　　　：４１．２ｇ（０．２ｍｏｌ）（１
）　の収量　　　　５８．３ｇ（収率８３％）【００６
９】 （２）　ＢｏｃＡｓｐ（ＯＢｚｌ）Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）Ｇ
ｌｙＮＨ２の合成（１）　の生成物　　　　　　　　：
５６．２ｇ（０．１６ｍｏｌ）ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２　
　　　　　　　　　：２００ｍｌ／２００ｍｌＢｏｃＡ
ｓｐ（ＯＢｚｌ）　　　　　　　　：５１．７ｇ（０．
１６ｍｏｌ）ＣＨ２Ｃｌ２　　　　　　　　　　　　　
　：８００ｍｌＤＣＣ　　　　　　　　　　　　　　：
３３ｇ（０．１６ｍｏｌ）（２）　の収量　　　　７１
．２ｇ（収率８０％）【００７０】（３）　ＢｏｃＧｌ
ｙＡｓｐ（ＯＢｚｌ）Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）ＧｌｙＮＨ２　
の合成 （２）　の生成物　　　　　　　　：６６．７ｇ（０．
１２ｍｏｌ）ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２　　　　　　　　　
　：２００ｍｌ／２００ｍｌＢｏｃＧｌｙ　　　　　　
　　　　　　　　：５１．７ｇ（０．１２ｍｏｌ）ＣＨ
２Ｃｌ２　　　　　　　　　　　　　　：７００ｍｌＤ
ＣＣ　　　　　　　　　　　　　　：２４．７（０．１
２ｍｏｌ）（３）　の収量　　　　６１．８ｇ（収率８
４％）【００７１】 （４）　ＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ）ＧｌｙＡｓｐ（ＯＢｚ
ｌ）Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）ＧｌｙＮＨ２　の合成（３）　の
生成物　　　　　　　　：６１．３ｇ（０．１ｍｏｌ）
ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２　　　　　　　　　　：２００ｍ
ｌ／２００ｍｌＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ）　　　　　　　
　　：４５．６ｇ（０．１ｍｏｌ）ＤＭＦ　　　　　　
　　　　　　　　：８００ｍｌＤＣＣ　　　　　　　　
　　　　　　：２２．５（０．１ｍｏｌ）ＨＯＢｔ　　
　　　　　　　　　　：１４ｇ（０．１ｍｏｌ）（４）
　の収量　　　　４２．８ｇ（収率４５％）【００７２
】 （５）　合成物１６の合成 （４）　の生成物　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　：５．０ｇ（５．３ｍｍｏｌ） ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　：５０ｍｌ／５０ｍｌカルボキシエチル
メタクリルアミド：０．８３ｇ（５．３ｍｍｏｌ） ＤＭＦ　　　　　　　　　　　　　　：５０ｍｌＤＣＣ
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　：１．１ｇ（５．３ｍｍｏｌ） ＨＯＢｔ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　：０．７２ｇ（５．３ｍｍｏｌ） １Ｍ−トリフルオロメタンスルホン酸−チオアニソール
−ｍ−クレゾールのＴＦＡ溶液　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　：２５０ｍｌ 【００７３】 合成例１７ 合成物１７ ＲＧＤＧ−ＮＨ−Ｃ２Ｈ４−ＮＨ−ＣＯ−ＣＣＨ３＝Ｃ
Ｈ２　（配列番号１７） 【００７４】合成物１７を逐次延長法により液相法にて
合成した。 （１）　ＢｏｃＧｌｙＯＮｂ　の合成 ＢｏｃＧｌｙ３５ｇ（０．２ｍｏｌ）、トリエチルアミ
ン２８ｍｌ（０．２ｍｏｌ）、臭化ｐ−ニトロベンジル
４３．２ｇ（０．２ｍｏｌ）を酢酸エチル４００ｍｌに
加えて５時間還流した後、室温で１晩放置した。沈澱物
をろ別しろ液をＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄した後、水洗
し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥、ろ液を減圧濃縮し酢酸エチル
−ヘキサンより再結晶させた。５２．７ｇ（収率８５％
）。 【００７５】以下合成例１５と同様な方法でペプチド鎖
を延長した。以下に、その概略を示す。 （２）　ＢｏｃＡｓｐ（ＯＢｚｌ）ＧｌｙＯＮｂの合成
（１）　の生成物　　　　　　　　：４６．５ｇ（０．
１５ｍｏｌ）ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２　　　　　　　　　
　：２００ｍｌ／２００ｍｌＢｏｃＡｓｐ（ＯＢｚｌ）
　　　　　　　　：４８．５ｇ（０．１５ｍｏｌ）ＣＨ
２Ｃｌ２　　　　　　　　　　　　　　：７５０ｍｌＤ
ＣＣ　　　　　　　　　　　　　　：３０．９ｇ（０．
１５ｍｏｌ）（２）　の収量　　　　６４．０ｇ（収率
８０％）【００７６】 （３）　ＢｏｃＧｌｙＡｓｐ（ＯＢｚｌ）ＧｌｙＯＮｂ
　の合成（２）　の生成物　　　　　　　　：６４．０
ｇ（０．１２ｍｏｌ）ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２　　　　　
　　　　　：２００ｍｌ／２００ｍｌＢｏｃＧｌｙ　　
　　　　　　　　　　　　：２１ｇ（０．１２ｍｏｌ）
ＣＨ２Ｃｌ２　　　　　　　　　　　　　　：７５０ｍ
ｌＤＣＣ　　　　　　　　　　　　　　：２４．７ｇ（
０．１２ｍｏｌ）（３）　の収量　　　　５８．８ｇ（
収率８３％）【００７７】 （４）　ＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ）ＧｌｙＡｓｐ（ＯＢｚ
ｌ）ＧｌｙＯＮｂ　の合成（３）　の生成物　　　　　
　　　：５３．７ｇ（９１ｍｍｏｌ）ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃ
ｌ２　　　　　　　　　　：２００ｍｌ／２００ｍｌＢ
ｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ）　　　　　　　　　：４１．５ｇ
（９１ｍｍｏｌ）ＤＭＦ　　　　　　　　　　　　　　
：８００ｍｌＤＣＣ　　　　　　　　　　　　　　：１
８．７ｇ（９１ｍｍｏｌ）ＨＯＢｔ　　　　　　　　　
　　　：１３．５ｇ（０．１ｍｏｌ）（４）　の収量　
　　　４６．５ｇ（収率５５％）【００７８】 （５）　ＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ）ＧｌｙＡｓｐ（ＯＢｚ
ｌ）Ｇｌｙの合成（４）　の生成物９．２９ｇ（１０ｍ
ｍｏｌ）を９０％酢酸３００ｍｌに溶かし、Ｚｎ　末３
２．７ｇ（０．５ｍｏｌ）を加え、０℃で３時間撹拌し
た。Ｚｎ　末をろ別し、ろ液を減圧濃縮、これにクエン
酸を加えて酸性にし酢酸エチルで抽出した。 Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し減圧濃縮してからエーテルを加え
て白色粉末６．２６ｇ（収率７９％）を得た。 【００７９】 （６）　合成物１７の合成 （５）　の生成物　　　　　　　　　　　　　　　　：
５．３１ｇ（６．７ｍｍｏｌ）アミノエチルメタクリル
アミド：０．８６ｇ（６．７ｍｍｏｌ）ＤＭＦ　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　：６０ｍｌＤＣ
Ｃ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　：１
．４ｇ（６．７ｍｍｏｌ）ＨＯＢｔ　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　：０．９５ｇ（７ｍｍｏｌ）１
Ｍ−トリフルオロメタンスルホン酸−チオアニソール−
ｍ−クレゾールのＴＦＡ溶液　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　：２５０ｍｌ 【００８０】 合成例１８ 合成物１８ ＣＨ２＝ＣＣＨ３−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）３−ＲＧＤ
Ｇ−ＮＨ−Ｃ２Ｈ４−ＮＨ−ＣＯ−ＣＣＨ３＝ＣＨ２　 （配列番号１８） 【００８１】合成例１７の（１）〜（５）と同様の合成
を行なった後、以下の合成により合成物１８を得た。 （１）　ＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ）ＧｌｙＡｓｐ（ＯＢｚ
ｌ）Ｇｌｙ−ＮＨ−Ｃ２Ｈ４−ＮＨ−ＣＯ−ＣＣＨ３　
＝ＣＨ２ ＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ）ＧｌｙＡｓｐ（ＯＢｚｌ）Ｇｌ
ｙ　　：５．１９ｇ（６．７ｍｍｏｌ）アミノエチルメ
タクリルアミド：０．８６ｇ（６．７ｍｍｏｌ）ＤＭＦ
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　：６０
ｍｌＤＣＣ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　：１．４ｇ（６．７ｍｍｏｌ）ＨＯＢｔ　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　：０．９５ｇ（７ｍｍ
ｏｌ）（１）　の収量４．７ｇ（収率８０％）マススペ
クトル　　Ｍ＋　：　　８８５（２）　合成物１８の合
成 （１）　の生成物　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　：４．４ｇ（５ｍｍｏｌ）ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２
　　　　　　　　　　　　　　　　　　：５０ｍｌ／５
０ｍｌカルボキシエチルメタクリルアミド：０．７９ｇ
（５ｍｍｏｌ） ＤＭＦ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　：５０ｍｌＤＣＣ　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　：１．０３ｇ（５ｍｍｏｌ
） ＨＯＢｔ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　：０．６８ｇ（５ｍｍｏｌ） １Ｍトリフルオロメタンスルホン酸−チオアニソール−
ｍ−クレゾールのＴＦＡ溶液　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　：２５０ｍｌ アンバーライトＩＲＡ−４００　　　　：ＣＩ型処理【
００８２】 合成例１９ 合成物１５と製造物１とのラジカル共重合物を合成した
。 合成物１５　　５００ｍｇ（０．８２ｍｍｏｌ）と製造
例１の単量体６７７ｍｇ（３．２８ｍｍｏｌ）を水１０
ｍｌに溶解し１Ｎ　ＮａＯＨ　でｐＨ７．４に調整した
後、開始剤として、過硫酸カリウム５．１ｍｇと亜硫酸
水素ナトリウム２．０ｍｇを加え窒素気流下２０℃で２
０時間重合した。 【００８３】スペクトラポア７（分子分画量３０００）
を用いて純水に対して透析し、低分子量分を除いた後、
凍結乾燥させた。収量４９０ｍｇ（合成物１９）【００
８４】アミノ酸分析の値から共重合物の組成を求めたと
ころ合成物１５が１９％導入されていることがわかった
。（β−アラニンとＧｌｙの値から算出）　【００８５
】合成物１９をゲルクロマトグラフィーにより分子量分
画を行なった。分子量は、製造例１２と同様の方法で測
定した。 画分１　　　　分子量約５３０００　　（合成物１９−
１）画分２　　　　分子量約２１０００　　（合成物１
９−２）画分３　　　　分子量約　　８０００　　（合
成物１９−３）【００８６】 合成例２０ 合成物１５と製造例１の単量体の共重合を合成例１９と
同様の方法で開始剤の量を変えて行なった。 【００８７】 合成例２１、２２ 合成例１９と同じ方法で単量体組成を変えて共重合を行
なった。 【００８８】 合成例２１ 合成物１５の組成　　　　４８％（β−アラニンとＧｌ
ｙ　の値から算出） 【００８９】 【００９０】 合成例２３〜３８ 合成例１９と同じ方法で合成物１〜１４、１６および１
７と各種アニオン性単量体との共重合を行なった。 【００９１】 【００９２】 【００９３】 【００９４】 【００９５】 【００９６】 【００９７】 【００９８】 合成例３０ 単量体　　　　合成物　　８　　　　　　　　　　　　
　　　　５００ｍｇ（０．６９ｍｍｏｌ）　　　　　　
　　　　アクリル酸（東京化成製）　　２０２ｍｇ（２
．７６ｍｍｏｌ）開始剤　　　　過硫酸カリウム　　　
　　　　　　　　　３．５ｍｇ　　　　　　　　　　亜
硫酸水素ナトリウム　　　　　　１．４ｍｇ収量　　　
　　　２３３ｍｇ（合成物３０）分子量　　　　１００
００ 合成物８の組成　　　　　　１４％ 元素分析Ｎ値　　　　　　９．６２％ 重合溶媒、透析液は水／メタノール＝１／１を使用した
。 【００９９】 分子量　　　　１２０００ 【０１００】 【０１０１】 【０１０２】 【０１０３】 【０１０４】 【０１０５】 【０１０６】 【０１０７】 合成例３９ 合成物１５・合成物１８と製造物１のハイドロゲルをラ
ジカル重合法により合成した。シラン処理したガラス板
（５ｃｍ×６ｃｍ×１ｃｍ）２枚とガスケットを用意し
た。合成物１５　　０．２３ｇ（０．４ｍｍｏｌ）　、
合成物１８　　０．２８ｇ（０．４ｍｍｏｌ）と製造物
１　　１．４９ｇ（９．４ｍｍｏｌ）を蒸留水に溶解し
、１０ｗｔ％の単量体溶液とした。１Ｎ　ＮａＯＨ　で
ｐＨ７．４に合わせてから、過硫酸アンモニウム１０．
４ｍｇを加え充分窒素置換をした後、ガラス板の間に注
入した。万力でガラス板を押え、６０℃で４０時間重合
させた。生成したハイドロゲルを蒸留水で洗浄し未反応
モノマーを除いた。合成物３９中の合成物１５・合成物
１８の単量体比は約８％であった。（元素分析Ｎ値　　
１２．０７％）生成したゲルは紫外線ランプにより滅菌
処理した後、細胞培養実験に供した。 【０１０８】 試験例１　　細胞接着性阻害活性の測定本発明のプロペ
ンアミド誘導体の共重合物の塩は、細胞のフィブロンネ
クチンやビトロネクチンに対する接着を阻害する。その
活性の測定方法を以下に示す。本実験例で用いられた競
争法は基本的に生化学分野では広く用いられているもの
であり、例えば“Ｍｅｔｈｏｄｓ　ｉｎ　Ｅｎｚｙｍｏ
ｌｏｇｙ”、８２、８０３−８３１（１９８１）、特開
平１−３０９６８２号、同２−１７４７９７号に開示さ
れている。 【０１０９】 実験方法 １．　　フィブロネクチンおよびビトロネクチン吸着プ
レートの作製市販のフィブロネクチン（ヒト由来：生化
学工業（株）より購入）あるいはビトロネクチン（ヒト
由来　　フナコシ薬品（株）より購入）をＰＢＳで各々
１．０μｌ／ｍｌ、２．０μｌ／ｍｌに希釈しその希釈
液０．５ｍｌを２４穴のプラスチックプレートに入れ３
７℃で一晩保温しコーティングした。次に非特異的吸着
を防ぐ目的で牛血清アルブミン（ＢＳＡ１％）を加え３
７℃で１時間保温し、その後通常の洗浄操作（ＰＢＳ）
を加え充分に水切りしてフィブロネクチン吸着プレート
を作製した。同様の操作によりビトロネクチン吸着プレ
ートを作製した。 【０１１０】 ２．　　接着阻害実験 凍結乾燥により得たプロペンアミド誘導体の共重合物の
塩をＤｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ　Ｍｏｄｉｆｉｅｄ　Ｅａｇ
ｌｅｓ　Ｍｅｄｉｕｍ（以下ＤＭＥＭと略記する）に溶
解し、０、０．２５、０．５、１．０、１．５ｍｇ／ｍ
ｌの各濃縮の溶液とした。この溶液０．２５ｍｌを上記
方法で作製したプレートに入れ、そこへ血管内皮細胞（
４×１０６　ｃｅｌｌｓ　／ｍｌ）の懸濁液を０．２５
ｍｌ加え、３７℃で１時間保温し細胞を接着させた。Ｄ
ＭＥＭ培地で３回洗浄し、未接着の細胞を剥離し、２％
トリパンブルーで染色して細胞数を計測した。結果を表
１及び表２に示す。 【０１１１】 　　　　表１　　フィブロネクチンに対する細胞接着阻
害（ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
濃度（ｍｇ／ｍｌ）　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　０　　　　　　　０．２５　　　　　　０
．５　　　　　　　１．０　　　　　　　１．５　　　
　　　添加化合物 　　　　合成物１９−１　　　　×　　　　　　　　△
　　　　　　　　○　　　　　　　　○　　　　　　　
　○　　　　合成物１９−２　　　　×　　　　　　　
　△　　　　　　　　○　　　　　　　　○　　　　　
　　　○　　　　合成物１９−３　　　　×　　　　　
　　　△　　　　　　　　○　　　　　　　　○　　　
　　　　　○　　　　合成物２０　　　　　　　　×　
　　　　　　　△　　　　　　　　○　　　　　　　　
○　　　　　　　　○　　　　合成物２１　　　　　　
　　×　　　　　　　　△　　　　　　　　○　　　　
　　　　○　　　　　　　　○　　　　合成物２２　　
　　　　　　×　　　　　　　　△　　　　　　　　△
　　　　　　　　△　　　　　　　　○　　　　合成物
２３　　　　　　　　×　　　　　　　　×　　　　　
　　　△　　　　　　　　△　　　　　　　　○　　　
　合成物２４　　　　　　　　×　　　　　　　　△　
　　　　　　　○　　　　　　　　○　　　　　　　　
○　　　　合成物２５　　　　　　　　×　　　　　　
　　△　　　　　　　　○　　　　　　　　○　　　　
　　　　○　　　　合成物２６　　　　　　　　×　　
　　　　　　△　　　　　　　　○　　　　　　　　○
　　　　　　　　○　　　　合成物２７　　　　　　　
　×　　　　　　　　△　　　　　　　　○　　　　　
　　　○　　　　　　　　○　　　　合成物２８　　　
　　　　　×　　　　　　　　△　　　　　　　　△　
　　　　　　　○　　　　　　　　○　　　　合成物２
９　　　　　　　　×　　　　　　　　△　　　　　　
　　○　　　　　　　　○　　　　　　　　○　　　　
合成物３０　　　　　　　　×　　　　　　　　△　　
　　　　　　△　　　　　　　　○　　　　　　　　○
　　　　合成物３１　　　　　　　　×　　　　　　　
　△　　　　　　　　△　　　　　　　　○　　　　　
　　　○　　　　合成物３２　　　　　　　　×　　　
　　　　　△　　　　　　　　○　　　　　　　　○　
　　　　　　　○　　　　合成物３３　　　　　　　　
×　　　　　　　　△　　　　　　　　○　　　　　　
　　○　　　　　　　　○　　　　合成物３４　　　　
　　　　×　　　　　　　　△　　　　　　　　○　　
　　　　　　○　　　　　　　　○　　　　合成物３５
　　　　　　　　×　　　　　　　　△　　　　　　　
　○　　　　　　　　○　　　　　　　　○　　　　合
成物３６　　　　　　　　×　　　　　　　　△　　　
　　　　　○　　　　　　　　○　　　　　　　　○　
　　　合成物３７　　　　　　　　×　　　　　　　　
△　　　　　　　　○　　　　　　　　○　　　　　　
　　○　　　　合成物３８　　　　　　　　×　　　　
　　　　△　　　　　　　　○　　　　　　　　○　　
　　　　　　○　　　　製造物１２　　　　　　　　×
　　　　　　　　×　　　　　　　　×　　　　　　　
　×　　　　　　　　×　　　　ＲＧＤ　　　　　　　
　　　　　×　　　　　　　　×　　　　　　　　×　
　　　　　　　×　　　　　　　　△　　　　ＲＧＤＳ
　　　　　　　　　　×　　　　　　　　×　　　　　
　　　×　　　　　　　　△　　　　　　　　△　　　
　（ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）　；　　○：５０以下、△
：５１〜９９、×：１００以上　　【０１１２】 　　　　表２　　　　ビトロネクチンに対する細胞接着
阻害（ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　濃度（ｍｇ／ｍｌ）　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　０　　　　　　　　１０　　　　　　　
　５０　　　　　　　１００　　　　　　　３００　　
　　　　添加化合物 　　　　合成物１９−１　　　　×　　　　　　　　○
　　　　　　　　○　　　　　　　　○　　　　　　　
　○　　　　合成物１９−２　　　　×　　　　　　　
　○　　　　　　　　○　　　　　　　　○　　　　　
　　　○　　　　合成物１９−３　　　　×　　　　　
　　　○　　　　　　　　○　　　　　　　　○　　　
　　　　　○　　　　合成物２０　　　　　　　　×　
　　　　　　　○　　　　　　　　○　　　　　　　　
○　　　　　　　　○　　　　合成物２１　　　　　　
　　×　　　　　　　　○　　　　　　　　○　　　　
　　　　○　　　　　　　　○　　　　合成物２２　　
　　　　　　×　　　　　　　　△　　　　　　　　△
　　　　　　　　○　　　　　　　　○　　　　合成物
２３　　　　　　　　×　　　　　　　　×　　　　　
　　　△　　　　　　　　△　　　　　　　　○　　　
　合成物２４　　　　　　　　×　　　　　　　　○　
　　　　　　　○　　　　　　　　○　　　　　　　　
○　　　　合成物２５　　　　　　　　×　　　　　　
　　○　　　　　　　　○　　　　　　　　○　　　　
　　　　○　　　　合成物２６　　　　　　　　×　　
　　　　　　○　　　　　　　　○　　　　　　　　○
　　　　　　　　○　　　　合成物２７　　　　　　　
　×　　　　　　　　○　　　　　　　　○　　　　　
　　　○　　　　　　　　○　　　　合成物２８　　　
　　　　　×　　　　　　　　△　　　　　　　　△　
　　　　　　　○　　　　　　　　○　　　　合成物２
９　　　　　　　　×　　　　　　　　○　　　　　　
　　○　　　　　　　　○　　　　　　　　○　　　　
合成物３０　　　　　　　　×　　　　　　　　△　　
　　　　　　○　　　　　　　　○　　　　　　　　○
　　　　合成物３１　　　　　　　　×　　　　　　　
　△　　　　　　　　△　　　　　　　　○　　　　　
　　　○　　　　合成物３２　　　　　　　　×　　　
　　　　　○　　　　　　　　○　　　　　　　　○　
　　　　　　　○　　　　合成物３３　　　　　　　　
×　　　　　　　　○　　　　　　　　○　　　　　　
　　○　　　　　　　　○　　　　合成物３４　　　　
　　　　×　　　　　　　　○　　　　　　　　○　　
　　　　　　○　　　　　　　　○　　　　合成物３５
　　　　　　　　×　　　　　　　　○　　　　　　　
　○　　　　　　　　○　　　　　　　　○　　　　合
成物３６　　　　　　　　×　　　　　　　　○　　　
　　　　　○　　　　　　　　○　　　　　　　　○　
　　　合成物３７　　　　　　　　×　　　　　　　　
○　　　　　　　　○　　　　　　　　○　　　　　　
　　○　　　　合成物３８　　　　　　　　×　　　　
　　　　○　　　　　　　　○　　　　　　　　○　　
　　　　　　○　　　　製造物１２　　　　　　　　×
　　　　　　　　×　　　　　　　　×　　　　　　　
　×　　　　　　　　×　　　　ＲＧＤ　　　　　　　
　　　　　×　　　　　　　　×　　　　　　　　×　
　　　　　　　△　　　　　　　　△　　　　ＲＧＤＳ
　　　　　　　　　　×　　　　　　　　×　　　　　
　　　△　　　　　　　　△　　　　　　　　○　　　
　（ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）　；○：１００以下、△：
１０１〜１９９、×：２００以上【０１１３】 試験例２　　血小板凝集阻害活性の測定本発明において
合成したプロペンアミド誘導体の共重合物の塩のｉｎ　
ｖｉｔｒｏ系での血小板凝集阻害作用をヒト多血小板血
漿を用いて検討した。以下にその実験方法を示す。 【０１１４】 実験方法 新鮮なヒト血液に１／９量の３．８％クエン酸ナトリウ
ムを加え遠心分離（１０００ｒｐｍ　、１０分）し、上
層を多血小板血漿として分取した。凍結乾燥より得たプ
ロペンアミド誘導体の共重合物の塩を０−１．５ｍｇ／
ｍｌの種々の濃度になるように生理食塩水に溶解した。 この塩溶液２５μｌを血漿２００μｌに加え、３７℃で
３分間インキュベートしたのち、５０μＭアデノンシ二
リン酸（ＡＤＰ）溶液あるいは２００μｇ／ｍｌのコラ
ーゲン溶液を２５μｌ加え凝集の様子をアグリゴメータ
ーを用いて透過度を測定することにより検定した。結果
を表３に示す。 【０１１５】 凝集阻害率（１−Ｔ／Ｔ０　）×１００％Ｔ０　＝プロ
ペンアミド誘導体の共重合物の塩、非添加時の透過度 Ｔ　　＝プロペンアミド誘導体の共重合物の塩、添加時
の透過度 【０１１６】 　　表３　　　　血小板凝集阻害 　　　　添加化合物　　　　　　　　　　　　　　　　
阻害活性　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　ＡＤＰ刺激　　　　　　コラーゲン刺激　　　　
合成物１９−１　　　　　　　　　　○　　　　　　　
　　　　　　　　　○　　　　合成物１９−２　　　　
　　　　　　○　　　　　　　　　　　　　　　　○　
　　　合成物１９−３　　　　　　　　　　○　　　　
　　　　　　　　　　　　○　　　　合成物２０　　　
　　　　　　　　　　　○　　　　　　　　　　　　　
　　　○　　　　合成物２１　　　　　　　　　　　　
　　○　　　　　　　　　　　　　　　　○　　　　合
成物２２　　　　　　　　　　　　　　○　　　　　　
　　　　　　　　　　△　　　　合成物２３　　　　　
　　　　　　　　　△　　　　　　　　　　　　　　　
　○　　　　合成物２４　　　　　　　　　　　　　　
○　　　　　　　　　　　　　　　　○　　　　合成物
２５　　　　　　　　　　　　　　○　　　　　　　　
　　　　　　　　○　　　　合成物２６　　　　　　　
　　　　　　　○　　　　　　　　　　　　　　　　○
　　　　合成物２７　　　　　　　　　　　　　　○　
　　　　　　　　　　　　　　　○　　　　合成物２８
　　　　　　　　　　　　　　○　　　　　　　　　　
　　　　　　△　　　　合成物２９　　　　　　　　　
　　　　　○　　　　　　　　　　　　　　　　○　　
　　合成物３０　　　　　　　　　　　　　　△　　　
　　　　　　　　　　　　　○　　　　合成物３１　　
　　　　　　　　　　　　○　　　　　　　　　　　　
　　　　○　　　　合成物３２　　　　　　　　　　　
　　　○　　　　　　　　　　　　　　　　○　　　　
合成物３３　　　　　　　　　　　　　　○　　　　　
　　　　　　　　　　　○　　　　合成物３４　　　　
　　　　　　　　　　○　　　　　　　　　　　　　　
　　○　　　　合成物３５　　　　　　　　　　　　　
　○　　　　　　　　　　　　　　　　○　　　　合成
物３６　　　　　　　　　　　　　　○　　　　　　　
　　　　　　　　　○　　　　合成物３７　　　　　　
　　　　　　　　○　　　　　　　　　　　　　　　　
○　　　　合成物３８　　　　　　　　　　　　　　○
　　　　　　　　　　　　　　　　○　　　　製造物１
２　　　　　　　　　　　　　　×　　　　　　　　　
　　　　　　　×　　　　ＲＧＤ　　　　　　　　　　
　　　　　　△〜○　　　　　　　　　　　　△〜○　
　　　ＲＧＤＳ　　　　　　　　　　　　　　△〜○　
　　　　　　　　　　　△〜○　　　　　　　　ＩＣ５
０（μｇ／ｍｌ）；○：４０以下、△：４０〜８０、×
：８０以上【０１１７】 試験例３　　動物細胞の増殖性の評価 実施例および比較例にて作成した動物細胞培養基体を用
いて細胞培養を行なった。細胞は血管内皮細胞を用い、
培養液はＤＭＥＭおよび１０％ウシ胎児血清（ＦＣＳ）
を含むＤＭＥＭを用いた。この培養液に細胞を１×１０
４　個／ｍｌの割合となるように浮遊させ、予め架橋共
重合物を入れておいたプラスチックシャーレの中に、１
×１０４　個／ｃｍ２　となる割合で加えた。これを３
７℃、５％の炭酸ガス雰囲気下にて培養した。培養後、
位相差顕微鏡にて接着性および増殖性の観察を行った。 結果を表４に示した。 【０１１８】 　　表４　　動物細胞の増殖性の評価 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　ＤＭＥＭ培地　　　　　　ＤＭＥＭ／ＦＣＳ培地　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　接
着性　　　　増殖性　　　　　　接着性　　　　増殖性
　　　　実施例（合成物３９）　　　　○　　　　　　
　　○　　　　　　　　　　○　　　　　　　　○　　
　　比較例（製造物１３）　　×〜△　　　　×〜△　
　　　　　△〜○　　　　△〜○　　　　　　　　　　
　　○：良好、　　　　△：やや不良、　　　　×：不
良【０１１９】比較に用いた製造物１３は、ＦＣＳを含
まないＤＭＥＭ培地において、細胞接着性および増殖性
は、実施例の合成物３９の基体に比べ劣っていた。 【０１２０】 【配列表】 【０１２１】 配列番号：１ 配列の長さ：４ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列の特徴： 特徴を表す記号：ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｓｉｔｅ　存在位
置：１ 特徴を決定した方法：Ｅ 他の情報：Ｘａａ　は４Ａｂｕで置換されている配列 Ｘａａ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　 １　 【０１２２】 配列番号：２ 配列の長さ：７ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列の特徴： 特徴を表す記号：ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｓｉｔｅ　存在位
置：１ 特徴を決定した方法：Ｅ 他の情報：Ａｌａ　はｂＡｌａで置換されている配列 Ａｌａ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａ
ｓｐ　１　　　　　　　　　　　　　　　５　【０１２
３】 配列番号：３ 配列の長さ：１０ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列の特徴： 特徴を表す記号：ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｓｉｔｅ　存在位
置：１ 特徴を決定した方法：Ｅ 他の情報：Ａｌａ　はｂＡｌａで置換されている配列 Ａｌａ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａ
ｓｐ　Ａｒｇ　ＧｌｙＡｓｐ　１　　　　　　　　　　
　　　　　５　　　　　　　　　　　　　　　　　　１
０　【０１２４】 配列番号：４ 配列の長さ：１６ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列の特徴： 特徴を表す記号：ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｓｉｔｅ　存在位
置：１ 特徴を決定した方法：Ｅ 他の情報：Ａｌａ　はｂＡｌａで置換されている配列 Ａｌａ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａ
ｓｐ　Ａｒｇ　ＧｌｙＡｓｐ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ
　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　 １　　　　　　　　　　　　　　　５　　　　　　　　
　　　　　　　　　　１０　　　　　　　　　　　　　
　　　　　１５　 【０１２５】 配列番号：５ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列の特徴： 特徴を表す記号：ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｓｉｔｅ　存在位
置：１ 特徴を決定した方法：Ｅ 他の情報：Ｘａａ　は４Ａｂｕで置換されている配列 Ｘａａ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　Ｓｅｒ　１　 【０１２６】 配列番号：６ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列の特徴： 特徴を表す記号：ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｓｉｔｅ　存在位
置：１ 特徴を決定した方法：Ｅ 他の情報：Ｘａａ　はＮｖａ　で置換されている配列 Ｘａａ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　Ｓｅｒ　１　　　　
　　　　　　　　　　　５　【０１２７】 配列番号：７ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列の特徴： 特徴を表す記号：ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｓｉｔｅ　存在位
置：１ 特徴を決定した方法：Ｅ 他の情報：Ｘａａ　はＡｃｐ　で置換されている配列 Ｘａａ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　Ｓｅｒ　１　　　　
　　　　　　　　　　　５　【０１２８】 配列番号：８ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列の特徴： 特徴を表す記号：ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｓｉｔｅ　存在位
置：１ 特徴を決定した方法：Ｅ 他の情報：Ｘａａ　は１２−アミノラウリン酸で置換さ
れている 配列 Ｘａａ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　Ｓｅｒ　１　　　　
　　　　　　　　　　　５　【０１２９】 配列番号：９ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列 Ｌｅｕ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　Ｓｅｒ　１　　　　
　　　　　　　　　　　５　【０１３０】 配列番号：１０ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列 Ｇｌｎ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　Ｓｅｒ　１　　　　
　　　　　　　　　　　５　【０１３１】 配列番号：１１ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列の特徴： 特徴を表す記号：ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｓｉｔｅ　存在位
置：１ 特徴を決定した方法：Ｅ 他の情報：Ｘａａ　はｐ−アミノ安息香酸で置換されて
いる配列 Ｘａａ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　Ｓｅｒ　１　　　　
　　　　　　　　　　　５　【０１３２】 配列番号：１２ 配列の長さ：６ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列の特徴： 特徴を表す記号：ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｓｉｔｅ　存在位
置：１ 特徴を決定した方法：Ｅ 他の情報：Ｘａａ　はＮｖａ　で置換されている配列 Ｘａａ　Ｇｌｙ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　Ｓｅｒ　１
　　　　　　　　　　　　　　　５　【０１３３】 配列番号：１３ 配列の長さ：６ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列 Ｇｌｙ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　Ｓｅｒ　Ｐｒｏ　１
　　　　　　　　　　　　　　　５　　　【０１３４】 配列番号：１４ 配列の長さ：７ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列 Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　Ｓ
ｅｒ　１　　　　　　　　　　　　　　　５　　　【０
１３５】 配列番号：１５ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列の特徴： 特徴を表す記号：ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｓｉｔｅ　存在位
置：１ 特徴を決定した方法：Ｅ 他の情報：Ａｌａ　はｂＡｌａで置換されている配列 Ａｌａ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　Ｓｅｒ　１　　　　
　　　　　　　　　　　５　【０１３６】 配列番号：１６ 配列の長さ：６ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列の特徴： 特徴を表す記号：ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｓｉｔｅ　存在位
置：１ 特徴を決定した方法：Ｅ 他の情報：Ａｌａ　はｂＡｌａで置換されている配列 Ａｌａ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　Ｓｅｒ　Ｇｌｙ　１
　　　　　　　　　　　　　　　５　　　　　【０１３
７】 配列番号：１７ 配列の長さ：４ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｎ末端フラグメント 配列 Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　Ｇｌｙ　 １　　　　　　　　　 【０１３８】 配列番号：１８ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：中間部フラグメント 配列の特徴： 特徴を表す記号：ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｓｉｔｅ　存在位
置：１ 特徴を決定した方法：Ｅ 他の情報：Ａｌａ　はｂＡｌａで置換されている配列

Claims (8)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】　　下記一般式〔Ｉ〕の側鎖に、下記一般
   式〔ＩＩ〕で表される接着性ペプチドを必須単位として
   有するプロペンアミド誘導体と、下記一般式〔ＩＩＩ〕
   で表されるアニオン性単量体との共重合物又はその塩。 一般式〔Ｉ〕 Ｒ１Ｒ２Ｃ＝ＣＲ３　−ＣＯ−［ＮＨ］−式中、Ｒ１　
   、Ｒ２　は水素原子又はカルボキシル基を表し、Ｒ３　
   は水素原子、メチル基、エチル基、ハロゲン原子又はカ
   ルボキシメチル基を表す。 一般式〔ＩＩ〕 −［Ｒ４］−［ＣＯ］−（［Ｘ］−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａ
   ｓｐ−［Ｙ］）ｎ−［Ｚ］−［Ｒ５］− 式中、Ｘ，ＹはＳｅｒ，　Ｇｌｙ，　Ｖａｌ，　Ａｓｎ
   ，　Ｐｒｏ　から選択されるアミノ酸残基又はペプチド
   残基を表し、Ｚは−Ｏ−又は−ＮＨ−を示す。Ｒ４　、
   Ｒ５　のいずれか一方は水素原子を、他方は炭素数が１
   〜１１の直鎖又は分岐のアルキレン基、又は炭素数が６
   〜１１のアリーレン基を表し、置換基を有していてもよ
   い。ｎは１〜５の整数を表す。 一般式〔ＩＩＩ　〕 Ｈ２Ｃ＝ＣＲ６　−［ＣＯ］−［Ｗ］−Ｒ７式中、Ｒ６
   　は水素原子又は炭素数１〜３のアルキル基で置換基を
   有していてもよい。Ｗは−Ｏ−又は−ＮＨ−を示す。Ｒ
   ７　は水素原子又は炭素数が１〜１２の直鎖又は分岐の
   アルキル基、又は炭素数が６〜１１のアリール基であり
   、置換基として少なくともカルボキシル基、スルホ基、
   ホスホロ基のいずれか一つを含み、さらに置換基を有し
   ていてもよい。一般式〔Ｉ〕、〔ＩＩ〕、〔ＩＩＩ　〕
   において［］は［　　］内の基が存在するかあるいは存
   在しなくてもよいことを示す。
2. 【請求項２】　　分子量が約３，０００　〜２００，０
   ００　の範囲である、請求項１記載のプロペンアミド誘
   導体共重合物又はその塩。
3. 【請求項３】　　プロペンアミド誘導体由来の構成単位
   の含有量が０．１〜９０モル％である請求項１記載の共
   重合物又はその塩。
4. 【請求項４】　　請求項１記載のプロペンアミド誘導体
   とアニオン性単量体との架橋共重合物又はその塩。
5. 【請求項５】　　プロペンアミド誘導体由来の構成単位
   及び多官能性単量体由来の構成単位の含有量が、それぞ
   れ０．１〜９０モル％及び０．１〜３０モル％である請
   求項４記載の架橋共重合物又はその塩。
6. 【請求項６】　　請求項１、２又は３記載のプロペンア
   ミド誘導体共重合物又はその塩を有効成分とする動物細
   胞の接着阻害剤。
7. 【請求項７】　　請求項１、２又は３記載のプロペンア
   ミド誘導体共重合物又はその塩を有効成分とする血小板
   凝集・粘着抑制剤。
8. 【請求項８】　　請求項４又は５記載のプロペンアミド
   誘導体とアニオン性単量体との架橋共重合物又はその塩
   を有効成分とする動物細胞培養基体。