JPH0363281A - 新規抗生物質エンディナマイシン及びその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は新規抗生物質エンディナマイシン及びその製造
法に関する。

〔従来の技術〕

微生物の生産する抗生物質はこれまでに数多く発見され
ており、感染症の治療に広く用いられている。また抗生
物質のうちで制癌作用を有するものは、制癌剤として使
用されている。

〔発明が解決しようとする課題〕

しかし感染症の治療においては耐性菌の出現が避けられ
ず、耐性菌に有効な新しい骨格を有する抗生物質は絶え
ず求められている。また既存の制癌剤はその治療効果に
おいて十分であるとはいえず、新規制癌抗生物質も期待
されている。

〔課題を解決するための手段〕

本発明を概説すれば、本発明の第１の発明は新規抗生物
質エンディナマイシン（［ｉｎｄｙｎａｍｉｃｉｎ）に
関する発明であって、下記−船式Ｉ：（エンディナマイ
シンＡはＲ＝ＯＨ、エンディナマイシンＢはＲ＝Ｈであ
る。）で表される化合物であることを特徴とする。また
本発明の第２の発明は、抗生物質エンディナマイシンの
製造法に関する発明であって、ミクロモノスポラ（旧ｃ
ｒｏｍｏｎｏｓｐｏｒａ）属に属するエンデイナマイシ
ン生産菌を培養し、その培養物から上記一般式Ｉで表さ
れるエンディナマイシンを採取することを特徴とする。

ミクロモノスポラ属に属するエンディナマイシンの生産
菌の１例としては、本発明者らによって昭和５５年５月
山梨県身延山で採取した土壌試料より分離され、ＭＧ３
３１．−ｈＦ６の菌株番号の付された放線菌がある。こ
の菌株の菌学的性状は次のとおりである。

１、　　形　　態 ＭＧ３３１−ｈＦ６株は、電子顕微鏡下で基中菌糸は長
く直線状あるいはゆるやかに間がって伸長し、短く車軸
分枝した胞子柄上には１個の暗いオリーブ（黒色に近い
）の胞子が懲戒される。胞子は球形で約０．８〜０．９
μｍの大きさを示し、表面は平滑である。気菌糸の懲戒
は認められない。

２、　各種培地における生育状態 色の記載について〔〕内に示すＰＳ型は、コンテイナー
・コーポレーション・オブ・アメ　リ　カ　　（Ｃｏｎ
ｔａｉｎｅ’ｒ　　Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ　　ｏｆ　
　Ａｍｅｒｉｃａ）ノカラー・ハーモニー・マニュアル
（Ｃｏｌｏｒｈａｒｍｏｎｙ　ｍａｎｕａｌ）を用いた
。

（１）　　シスクロース・硝酸塩寒天培地（３０℃培養
） 比較的良好な生育がみられ、はじめうすだいだい［３ｇ
ｃ、　Ｌｔ　Ｔａｎ〕〜明るい黄味だいだい［４ｇｃ、
Ａｐｒｉｃｏｔ　］を呈するが、培養１０日目頃より次
第に黒っぽくなる。気菌糸は着生せず、溶解性色素も認
められない。

（２）　　グルコース・アスパラギン寒天培地　（３０
℃培養） 発育は良好でしわのある盛り上がった生育がみられ、１
こぶ黄だいだい［３１ｃ、Ａｍｈｅｒ　］〜暗い茶〔３
ｐｎ、　Ｄｋ　Ｂｒｏｗｎ］を呈し、培養後１４日目頃
よりオリーブ灰Ｃ１’Ａ　ｉｇ、　０１ｉｖｅ６ｒａｙ
〕〜暗いオリーブＣ１′Ａｐｎ、　Ｄｋ、　０１ｉｖｅ
　］となり、わずかに暗いオリーブの溶解性色素を認め
る。気菌糸は着生しない。

（３）　　グリセリン・アスパラギン寒天培地（■ＳＰ
−培地５．３０℃培養） 気菌糸を着生せず、発育はうすだいだい〔３ｅａ、　Ｌ
ｔ　Ｍｅｌｏｎ　Ｙｅｌｌｏｗ）　〜明るい黄味だいだ
い［４ｉａ、　Ａｐｒｉｃｏｔ　］　〜暗いオリーブ〔
ＩＷｐｎ、　Ｄｋ　０ｌｉｖｅ〕で、溶解性色素は認め
られない。

（４）　　スターチ・無機塩寒天培地（ＩＳＰ−培地４
．３０℃培養） 発育は明るい黄だいだい［３ｉａ、　Ｄｒｉｔｅ　Ｍｅ
Ｊｏｎ　Ｙｅｌｌｏｗ）　〜明るい黄味だいだいＣ４１
ａ。

Ａｐｒｉｃｏｔ　］になり、培養後１４白目頃より次第
に黒っぽくなり暗いオリーブ〔１ｙ２ρｎ、　ＤｋＯｌ
ｉｖｅ　］を呈する。気菌糸は着生せず、溶解性色素も
認められない。

（５）チロシン寒天培地（ＩＳＰ−培地７．３０℃培養
） 発育は明るい黄だいだい［３ｎｃ、　Ａｍｈｅｒ　］〜
うす茶［：　３１ｅ、　Ｃｉｎｎａｍｏｎ］　〜暗いオ
リーブＣ１’Ａｐｎ、　Ｄｋ　０１ｉｖｅ、］　、気菌
糸は着生せず、溶解性色素も認められない。

（６）栄養寒天培地（３０℃培養） 発育はうすだいだいＣ，３ａａ、　Ｉｔ　Ｍｅｌｏｎ　
Ｙｅ−１１ｏｗ〜３　ｇａ、　Ｍｅｌｏｎ　Ｙｅｌｌｏ
ｗ〕〜明るいｆＩｉだいだいＣ３ｉａ、　Ｂｒ１ｔｅ　
Ｍｅｌｏｎ　ｙｅｌｌｏｗ〕を呈し、気菌糸は着生せず
、溶解性色素も認められない。

（７）　　イースト・麦芽寒天培地（ＩＳＰ−培地２．
３０℃培養） 気菌糸は着生せず、発育は盛り上がったしわのある良好
な生育がみられ、明るい）１だいだいＣ３ｎｃ、へｍｂ
ｅｒ〕〜黄茶Ｃ３ｎｅ、　′ｒｏｐａｚｅ〕〜明るい茶
Ｃ４ｐｇ、　Ｄｋ　Ｌｕｇｇａｇｅ　Ｔａｎ〕を呈し、
次第に暗いオリーブ［１′Ａｐｎ、　Ｄｋ　０１ｉｖｃ
〕になる。溶解性色素は認められない。

（８）　　オートミール寒天培地（ＩＳＰ−培地３．３
０℃培養） 発育は広がった中程度の生育で、無色〜うすだいだい［
３ｇｃ、　Ｌｔ　Ｔａｎ〕〜暗いオリーブＣＩ　Ｈｐｎ
、　Ｄｋ　０１ｉｖｅｌを呈し、気菌糸を着生せず、溶
解性色素も認められない。

（９）　　グリセリン・硝酸塩寒天培地（３０℃培養〉 発育はわずかで、オリーブ灰［１％ｉｇ。

０ｌｉｖｅ　Ｇｒａｙ）　〜暗いオリーブ〔１′Ａｐｎ
、　ＤＫＯｌｉｖｅ　）を呈し、気菌糸、溶解性色素と
も認められない。

αＯスターチ寒天培地（３０℃培養） 発育は無色〜うすだいだいＣ３ｅａ、　Ｌｔ　Ｍｅ−１
ｉｏｎ　Ｙｅｌｌｏｗ　〜３　ｇｃ、　Ｌｔ　Ｔａｎ〕
のやや盛り上がった良好な生育がみられ、気菌糸、溶解
性色素は認められない。

０１）リンゴ酸石灰寒天培地（３０℃培養）発育はうつ
すらと貧弱で、うすだいだい〜暗いオリーブ［１％ｐｎ
、　Ｄｋ　０１ｉｖｅ、：ｌを呈し、気菌糸、溶解性色
素とも認められない。

（支）　セルロース（ろ紙片添加合成液、３０℃培養〉 ろ紙面及び試験管壁にうつすらと生育し、うすだいだい
〜灰色を呈する。気菌糸、溶解性色素は認められない。

Ｑ３１　　ゼラチン穿刺培養 １５％単純ゼラチン培地（２０℃培養）では発育は無色
、気菌糸は着生せず、溶解性色素も認められない。グル
コース・ペプトン・ゼラチン培地の場合は３０℃で生育
がみられなかったので、２０℃、２４℃、２７℃、３０
℃で培養を繰返したが、いずれの温度でも生育を認めな
かった。

αつ　脱脂粉乳（３０℃培養） 発育は無色、気菌糸は着生せず、溶解性色素も認められ
ない。

３、生理学的性質 （１）　　生育温度範囲 ペンネット寒天培地〔イーストエキス（デイフコ？［）
０．１％、牛肉エキス（デイフコ社製）０．１％、Ｎ−
Ｚ−アミン・タイプＡ０．２％、グルコース、１．０％
、ひも寒天３．０％、ｐＨ７，３］を用い、２０℃、２
４℃、２７℃、３０℃、３７℃、５０℃の各温度で試験
の結果、５０℃を除いていずれの温度でも生育したが、
最適生育温度は３０℃〜３７℃伺近と思われる。

（２）ゼラチンの液化（１５％単純ゼラチン、２０℃培
養；グルコース・ペプトン・ゼラチン培地、２０℃、２
４℃、２７℃、３０℃培養〉単純ゼラチン培地では培養
後７日目頃より液化カ月忍められ、その後ゆっくりと進
みその作用は中等度〜強い方である。一方、グルコース
・ペプトン・ゼラチン培地はいずれの温度でも生育が認
められなかった。

（３）　　スターチの加水分解（スターチ・１ｌｔｕ　
Ｋ’Ｕ塩寒天培地及びスターチ寒天培地、いずれも３０
℃培養） スターチ・無機塩寒天培地は培養後５［コ目頃より、ス
ターチ寒天培地では７日目頃より氷解性が認められ、い
ずれもその作用は強い方である。

（４）脱脂牛乳の凝固・ペプトン化（脱脂牛乳、３７℃
培養） 培養後８日目頃に凝固が始まり、直ちに完了し、１００
日目頃りペプトン化が始まる。

ペプトン化の進行は極めて遅く、培養後３週間を経ても
完了しない。

（５）　　メラニン様色素の生成（トリプトン・イース
ト・ブロス、ｌ５Ｐ−培地１．２７℃；ペプトン・イー
スト・軟寒天培地、ｌ５Ｐ−培地６．３０℃；チロシン
寒天培地、ｌ５Ｐ−培地７．３０℃培＃） トリプトン・イースト・ブロス、ペプトン・イースト・
鉄寒天培地及びチロシン寒天培地で陰性である。

（６）炭素源の利用性（プリドハム・ゴドＩＪ　−ブ寒
天培地、ｌ５Ｐ−培地９．３０℃培養）Ｄ−グルコース
、Ｌ−アラビノース、Ｄ−アラビノース、Ｄ−キシロー
ス、シュクロース、ラフィノースを利用してよく発育す
る。

フラクトース、ラムノース、ラクトースはおそらく利用
すると思われ、イノシトール、Ｄマンニトールは利用し
ない。

（７）リンゴ酸石灰の溶解（リンゴ酸石灰寒天培地、３
０℃培養） 陰性である。

（８）硝酸塩の還元反応（０，１％硝酸カリウム含有ペ
プトン水、ｌ５Ｐ−培地８．３０℃培養〉 陽性である。

（９）　セルロースの分解（ろ紙片添加合成液、３０℃
培養） 極めて弱いが、わずかに分解しているようである。（培
養後１３０日目まで観察）以上の性状を要約すると、Ｍ
Ｇ３３１−ｈＦＧ株は気菌糸を着生せず、直線状あるい
はゆるやかに曲がって長く伸長した基底菌糸から短く単
軸分枝した胞子柄に１個ずつの暗いオリーブ（黒色に近
い）の胞子が形成される。

胞子は球形で、その表面は平滑である。種々の培地で比
較的良好な生育がみられ、特に天然寒天培地で発育はし
わが多く、厚く盛り上がった生育が認められる。培養初
期には発育はうすだいだい〜明るい黄味だいだいの色調
を呈するが、培養後１４日目頃より暗いオリーブになる
。溶解性色素はほとんど認められない。メラニン様色素
の生成は、トリプトン・イースト・ブロス・ペプトン・
イースト・鉄寒天培地、チロシン寒天培地のいずれの場
合も陰性である。蛋白分解力は中等度〜強い方であり、
スターチの氷解性も強い。なお細胞壁に含まれる２、６
−ジアミノピメリン酸はメソ（ｍｅｓｏ）型が中心で、
ＬＬ型もわずかに認められる。

これらの性状より、Ｍ０３３１−ｈＦＯ株はミクロモノ
スポラに属するものと考えられる。更に近縁の既知菌種
を検索すると、ミクロモノスポラ・グロボサ［Ｍｉｃｒ
ｏｍｏｎｏｓｐｏｒａｇｌｏｂｏｓａ、ザ・ジャーナル
・オブ・アンティビオティクス（Ｔｈｅ　Ｊｏｕｒｎａ
ｌ　ｏｆ　Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ）第３５巻、第１４
３０頁、（１９８２年）；ジャーナル・オブ・バクテリ
オロジー（Ｊｏｕｒ−ｎａｌ　ｏｆ　Ｂａｃｔｅｒｉｏ
ｌｏｇｙ）第１４６巻、第５２７頁、（１９８１年）〕
、及びミクロモノスポラ１ベルキユローサ［Ｍｉｃｒｏ
ｍｏｎｏｓｐｏｒａ　ｖｅｒｒｕｃｕｌｏｓａ　、ザ・
ジャーナル◆オブ・アンティビオティクス第３５巻、第
１４３０頁、（１９８２年）；特公昭５１−３３１９５
号〕が挙げられる。そこでまずＭＧ３３１−ｈＦＧ株と
当研究所に保存中のミクロモノスポラ・グロボサについ
て比較実験を行った。続いてミクロモノスポラ・ベルキ
ュローザを入手し、文献からＭＧ３３１−ｈＦｅ株と性
状の相違しているところを重点的に実際に比較を試みた
。その結果及び文献上の比較を第１表にまとめた。

第１表から明らかなように、ＭＧ３３１−ｂＦ６株はミ
クロモノスポラ・グロボサ及びミクロモノスポラ・ベル
キュローサに類似した性質を示した。なかんずく、ミク
ロモノスポラ・グロボサとは極めて近縁な関係にあり、
ＭＧ３３１−　ｈ　Ｆ　６株がミクロモノスポラ・グロ
ボサと異なるのは炭素源のラムノースの利用及びセル「
７−スの分解の強さ（１３０日観察）である。

史に同類の生産物を検索する過程で、抗坐物質’Ｉ”−
４２３１８を生産するミクロモノスポラ・バブロサス（
Ｍｉｃｒｏｍｏｎｏｓｐｏｒａ　ｐａｐｕｌｏＳｕｓ、
特公昭５９−５２７９号）が類似していることを知った
。ミクロモノスポラ・バブロサスは人手困難で比較実験
かできなかったが、次の諸点でＭＧ３３１−ｈＦ６株よ
りむしろミクロモノスポラ・ベルキュローサに近縁の種
と考えられる。すなわち、ミクロモノスポラ・パブロザ
スは胞子の表面がいぼ状ないし鈍い短線状であり、細胞
壁組成でＬＬ−ジアミノピメリン酸を含まぬ点である。

以上の点を総合して、ＭＧ３３１−ｂＦ６株はミクロモ
ノスポラ・グロボサに最も近縁の種と考えられる。した
がって、ＭＧ３３１−ｈＦＧ株をミクロモノスポラ・グ
ロボサ　ＭＧ３３１−ｈＦ６と同定した。なおＭＧ３３
１．ｈＦＧ株を工業技術院微生物工業技術研究所に寄託
申請し、平成元年４月１０日、微工研閑寄第１０６５■
号（ＦＥＲ，Ｍ　　Ｐ−１０６５１）として受託された
。

本発明に用いることのできる菌株は上記菌株、その変異
株をはじめ、ミクロモノスポラ属に属するエンディナマ
イシン生産菌のすべてが使用できる。

本発明の抗生物質エンディナマイシンは、上記菌株をエ
ンディナマイシン生産に適した培地に接種し培養するこ
とにより製造される。培地としては、通常の放線菌の培
養に用いられる栄養源含有培地でもよいし、栄養源は含
有しないものでもよい。

栄養源としては、例えば市販されているペプトン、肉エ
キス、コーン・ステイープ・リカー綿実粉、落花生粉、
大豆粉、酵母エキス、ＮＺアミン、カゼインの氷解物、
硝酸ソーダ、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウムなど
の窒素源、及び市販されているグリセリン、しょ糖、で
ん粉、グルコース、ガラクトース、マンノース、糖みつ
なとの炭水化物、あるいは脂肪などの炭素源、及び食塩
、リン酸塩、炭酸力ルシウｔ・、硫酸マグネシウムなど
の無機塩を使用できる。その他必要に応じて微量の金属
塩、消泡剤としての動・植・鉱物油などを添加すること
もできる。これらのものは生産菌が利用しエンディナマ
イシンの生産に役立つものであればよく、公知の放線菌
の培養材料はすべて用いることができる。また無機又は
有機のヨウ素塩やヨウ素化合物を上記栄養源含有培地に
添加することにより、エンディナマイシンの生産量を増
大させることができる。

栄養源を含有しない培地としては、無機又は有機のヨウ
素塩やヨウ素化合物の水溶液が挙げられる。

これらの培地に逆相シリカゲル粉末を添加しておくこと
により、培養液から簡便にエンディナマイシンを抽出す
ることができ、且つ生産量もやや増加する。エンディナ
マイシンの大量生産には液体培養が好ましく、培養温度
はエンディナマイシンを生産できる範囲で適用できる。

培養は以上に述べた条件を使用するエンディナマイシン
生産菌の性質に応じて適宜選択して行うことができる。

エンディナマイシンは培養ろ液及び菌体の両方に存在す
る。培養ろ液よりは、ｐＨｌＯ以下で酢酸ブチル、クロ
ロホルム、ブタノールなど水不混和性の有機溶剤で抽出
することができる。

菌体よりは、メタノール、アセトンなどの有機溶剤で抽
出後、抽出液を減圧濃縮し培養ろ液と同様の方法で更に
抽出すること・ができる。培地に逆相シリカゲルを添加
した場合は、菌体と一緒に集め菌体からの抽出と同様な
方法で抽出できる。上述の抽出法に加え、脂溶性物質の
採取に用いられている公知の方法、例えば吸着クロマト
グラフィー、ゲルろ過クロマトグラフィー薄層クロマト
グラフィーよりのかき取り、遠心向流分配クロマトグラ
フィー、高速液体クロマトグラフィーなどを適宜組合せ
、あるいは繰返すことによって、純粋に採取することが
できる。

抗生物質エンディナマイシンＡ及びＢの理化学的性状は
次のとおりである。

エンディナマイシンＡ及びＢの形状、フィールド脱着質
量分析（ＦＤＭＳ＞　、分子式、紫外部及び可視部吸収
極大、溶解性、酸性、中性、塩基性の区別、を第２表に
示す。またエンディナマイシンへ及びＢのプロトン核磁
気共鳴スペクトルの化学シフトを第３表に示す。

更に第１図にエンディナマイシンへの臭化カリウム錠に
よる赤外部吸収スペクトルを示す。

第１図の横軸は波数（ｃｍ−’）を、縦軸は透過率（％
）を表す。

ェンディナマイシンＢは、Ｘ線結晶解析より前記一般式
ＩのＲ＝Ｈの構造であることが決定された。またエンデ
ィナマイシンＡはエンディナマイシンＢと各種理化学的
性状やスペクトルデータを比較検討することで、前記一
般式ＩのＲ＝ＯＨの構造であることが決定された。

抗生物質エンディナマイシンＡ及びＢの生物学的性質は
次のとおりである。

エンディナマイシンＡ及びＢの栄養寒天培地上での各種
細菌に対する発育阻止濃度（寒天平板希釈法による）を
第４表に示す。第４表より明らかなように、エンディナ
マイシンＡ及びＢはダラム陽性菌及び陰性菌に対して強
い抗菌活性を有し、特にダラム陽性菌に対しては非情に
低濃度で生育を阻止した。またエシェリヒア・コＩＪＫ
−１２　　ＭＬ１６２９などの耐性菌の生育も阻止した
。

エンディナマイシンＡを雌性ＩＣＲマウスに腹腔的投与
したときのＬＤ、。は、３゜１〜６．３ｍｇ／ｋｇであ
った。

第５表にエンディナマイシンへの担癌マウスの治療実験
の結果を示す。白血病Ｌ１２１０又はエールリッヒ腹水
癌をそれぞれ移植し、移植直後よりＩＯ日間エンディナ
マイシン八へ腹腔角に注射した。第５表より、エンディ
ナマイシンＡは白血病Ｌ１２１０及びエールリッヒ腹水
癌のいずれに対しても有効であった。

００ ５０ ２５ ６２．５ ３１．３ １５．６ 第 ２０ ５２ ３０ ７４ 〉３９９ ３０ 表 ７０ 〉３３７ 〉２Ｇ１ 〉２９４ ３９ 以上のとおり、エンディナマイシンＡ及びＢの理化学的
性状並びに生物学的性質について詳述したが、このよう
な性質に類似した化合物としては、Ｍ−９２ＶＡ−２（
特装１１ｉ’３５１３３１９５号）とＴ−４２３１８（
特装ｌｐｊ　５　Ｑ−５２７９号）が挙げられる。いず
れも構造に関する記載はなく理化学的性状を示している
に過ぎないが、Ｍ−９２ＶＡ−２はエンディナマイシン
Ａと比較すると、赤外部吸収スペクトルではエンディナ
マイシンＡに見られる１７２０〜１７３０ｃｍ−’の吸
収（ヌジョールで測定しても見られる）がなく、可視部
の吸収もｌＯ〜２０ｎｍずれている。またＭ−９２ＶＡ
−２をエンディナマイシンＢと比較すると、紫外及び可
視部の吸収が明らかに異なる。Ｔ−４２３１８は、炭素
と酸素の元素分析値がエンディナマイシンＡ及びＢの計
算値とは異なっているほか、可視部吸収極大の強度がエ
ンディナマイシンＡの２倍程度の値を示し、エンディナ
マイシンＢとは可視部の吸収が明らかに異なる。更にＭ
−９２ＶＡ−２及びＴ−４２３１８の両者とも酸性物質
と記載されているが、エンディナマイシンＡ及びＢは両
性物質である。したがって、Ｍ−９２ＶＡ−２及びＴ−
４２３１８のいずれもエンディナマイシンと同じグルー
プと考えられるが別物質であることが判明し、エンディ
ナマイシンＡ及びＢは新規物質であると決定した。

〔実施例〕

次に本発明を実施例により説明するが、本発明はこれに
限定されるものではない。

実施例１ 寒天斜面培地で培養したミクロモノスポラ・グロボサＭ
Ｇ３３１−ｈＦ６株〔微工研菌寄第１０６５１号（ＦＥ
ＲＭ　　Ｐ−１０６５１）　］より、グルコース１％、
プロリッチ〔味の素■製〕２％、ドライ・イースト〔オ
リエンタル酵母和製３１％からなる液体培地（ｐＨ７，
０）をｉ　ｏ　Ｏｒｄずつ分注したワツフル付三角フラ
スコ２本に１白金耳ずつ接種し、３０℃で６ト１間振と
う培養した。それを第１次種培養液として、同一培地を
１００ｒｎｌずつ分注したワツフル付三角フラスコ４８
本に４ｄずつ接種し、３０℃で４日間振とう培養し、第
２次種培養液とした。

ヨウ化カリウム１　ｍＭ、シラナイズド・シリカゲル（
メルク社製Ａｒｔ、　　７７１９）　　１％、消泡用シ
リコンオイル〔信越化学工業■製シリコンＫＭ７０）　
０．０２５％からなる液体培地２ＯＡの入ったジャー・
ファーメンタ−６基に第２次種培養液８本ずつを接種し
、３７℃、通気量４１／分、かくはん１００　ｒｐｍの
条件で３日間通気かくはんした。

ろ過により菌体とシリカゲル粉末を集め、それを７１の
メタノールで抽出した。抽出液を減圧濃縮した後、４１
の水を加えて４ｆのクロロホルムでｐＨ７，０にて抽出
した。クロロホルム層に等量の２５ｍＭホウ酸ナトリウ
ム緩衝液（ｐｌｌｉ　ｏ、　ｏ　＞を加えて水層に転溶
した後、水１ｉ″４をｐＨ８、（］に調製して再び等量
のクロロホルトで抽出し、減圧濃縮、して１２５ｍｇの
青色あめ状物質を得た。それに少量のメタノールを加え
、遠心して３４．０　ｍｇの紫色粉末を得た。それを少
ｉ社のジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）に溶解し遠心し
て沈殿を廃棄した後、濃縮、して冷却した。それを遠心
して沈殿を集め、上清は濃縮後少量のメタノールを加え
て冷却した。それを遠心して沈殿を集め、上清は再度同
じ操作を繰返して３たび沈殿を得た。この３回の沈殿を
集めることにより、６．５　ｍｇの赤紫色粉末を得た。

この粉末をＤＭＦに溶解し、ＤＭＦで膨潤させたセファ
デックスＬＨ−２０（ファルマシア社製）のカラＡ（７
０ｍｊ？）にかけＤＭＦで溶出して、メルク社製Ａｒｔ
、５７１５シリカゲルプレートを用いた薄層クロマトグ
ラフィーでＲｆ＊Ｉ０．３〜０．４〔展開液クロロホル
ム−メタノール（１（１１）］に赤紫色の単一なバンド
を示す両分を集めて減圧濃縮し、５．１　ｍｇのエンデ
ィナマイシン粗動貢を得た。この粗動質のうち３．２　
ｍｇをＤＭＦに溶解しく１ｍｇ／ｍｆ）　、０．２ｍｊ
！ずつ高速液体クロマトグラフィー〔■センシュー科学
製、センシューバック・ヌクレオシル（Ｎｕｃｌｅｏｓ
ｉＪ）　５　Ｃｔｏ、４、６　Ｘ　２５０　ｍｍ〕にか
け、ＤＭＦ−０，１％炭酸アンモニウム水溶液（１：　
１）を移動相として、５９０ｎｍの吸収を検出しながら
、０．５ｎｆ１分の流速において、２０分と２５分のピ
ークをそれぞれ分取し減圧濃縮した。その結果、２０分
のピークからは２．４　ｍｇのエンディナマイシンへが
、２５分のピークからは０．５　ｍｇのエンディナマイ
シンＢが、いずれも赤紫色粉末として得られた。

これらは上記条件の高速液体クロマトグラフィーにおい
て、それぞれ単一なピークを与えた。

またエンディナマイシンＢを少量のＤＭＦに溶解し、濃
縮後５℃に保存することにより、０．２ｍｇの赤紫色結
晶を得た。

〔発明の効果〕

以」二詳細に説明した通り、本発明により新規制癌抗生
物質及びその製造法が提供された。本発明による新規制
癌抗生物質は、マウス白血病及びエールリッヒ腹水癌に
有効であり且つ強力な抗菌活性を・示す点で顕著な効果
を有する。

【図面の簡単な説明】

第１図はエンディナマイシンＡの赤外部吸収スペクトル
図である。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、下記一般式 I ： ▲数式、化学式、表等があります▼・・・［ I ］ （式中ＲはＨ又はＯＨを示す）で表される化合物である
   ことを特徴とする抗生物質エンディナマイシン。 ２、ミクロモノスポラ属に属するエンディナマイシン生
   産菌を培養し、その培養物かち請求項１記載のエンディ
   ナマイシンを採取することを特徴とする抗生物質エンデ
   ィナマイシンの製造法。