JPH0363215A

JPH0363215A - 歯垢分解組成物

Info

Publication number: JPH0363215A
Application number: JP1195424A
Authority: JP
Inventors: Gentarou Okada; 岡田　嚴太郎; Hirofumi Akano; 裕文赤野; Takeshi Sato; 猛佐藤; Hajime Okumura; 奥村　一; Kichiya Kawamura; 川村　吉也
Original assignee: Nakano Vinegar Co Ltd
Current assignee: Nakano Vinegar Co Ltd
Priority date: 1989-07-29
Filing date: 1989-07-29
Publication date: 1991-03-19
Also published as: EP0411770A1; KR910002422A; CA2022055A1; US5085851A

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】〔産業上の利用分野〕本発明はう蝕原性連鎖球菌ストレプトコッカス・ミュー
タンス（■■叫仝：ｏｃｃｕｓ　ｍｕｔａｎｓ）が産生
ずる歯垢（デンタルプラーク）の主成分である不溶性グ
ルカン（ムタン）を高効率で分解し、新たな歯垢の形成
を阻止する歯垢分解組成物に関するものであって、これ
により、ストレプトコッカス・ミュータンスの口腔内へ
の定着を抑制し、主としてう蝕を予防することに関する
。

〔従来の技術〕

歯牙の表面に形成され、付着している歯垢（デンタルプ
ラーク）はその７０％が口腔内細菌、約２０％が該細菌
により合成された多糖、ならびに約１０％が食物残渣で
あるといわれている。従来より、口腔内細菌ストレプト
コッカス・ミュータンスはう蝕原性細菌として特定され
ており、このストレプトコッカス・ミュータンスは、グ
ルコシルトランスフェラーゼやデキストラン合成酵素を
産生し、これら酵素はシ＝１糖からムタンやデキストラ
ンなどの歯垢の成分である粘着性グルカンを生成させ、
また、更にこのストレプトコッカス・ミュータンスによ
り歯垢内部に貯留された酸は、歯のエナメル質を脱灰し
てう蝕を誘発するといわれており、歯垢はう蝕の起因物
質と見なされている。

歯の清掃には、主として歯磨き剤を併用して歯ブラシで
歯の表面に付着した食物残渣や歯垢を機械的に除去する
方法が用いられている。しかし、歯ブラシの使用方法が
適切さを欠くと、歯間や臼歯の咬合部位などが充分清掃
されず、う蝕、歯槽膿漏、歯肉炎などの口腔内疾患を惹
起する原因ともなっている。この歯ブラシ清掃の欠点を
補うべく、歯垢を生物化学的手法により除去する目的で
、デキストラナーゼを歯磨き剤等の口腔用組成物中に配
合することが提案されている（特公昭４８−３４８９７
号）。

デキストラナーゼ産生菌としては従来から、主としてア
スペルギルス（ハ〃ヵ住肚旺）属、ペニシリウム（Ｐｅ
ｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）属、フザリウム（Ｆｕｓａｒｉｕ
ｎ＋）属、ケトミウム　（Ｃｈａｅｔｏｍｉｕｓ）属や
フミコラ（Ｈｕｍｉｃｏｌａ）属などに属する糸状菌、
アクチノマイセス（Ａｃｔｉｎｏｍ　ｃｅｓ）属やスト
レプトミセス（辣■虹並匹聾）属などに属する放線菌、
およびバチルス　（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属、ブレビバク
テリウム（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、コルネ
バクテリウム（ｋｕ並ｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属、セルビ
ブリオ（Ｃｅｌｌｖｉｂｒｉｏ）属やラクトバチルス（
Ｌａｃ　ｔｏｂａｃ　ｉ　１１ｕｓ）属などに属する細
菌などが知られている。

しかしながら、上記の各種微生物の産生ずるデキストラ
ナーゼは、いずれも歯垢に対する分解活性が満足するも
のでなく、当該技術分野においては、歯垢に対し高分解
活性を示すデキストラナーゼが望まれていた。

一方、デキストラナーゼ産生菌の培養方法は、細菌性多
糖デキストランを炭素源および酵素産生の誘導物質とし
て、培養培地に添加する方法がとられているが、デキス
トランは高価な多糖であるので、デキストラナーゼの製
造コストは高く、この面からも、デキストラナーゼの作
用を高め、可能な限り少量のデキストラナーゼを使用し
てもなお効果的に歯垢を分解する手段の開発も切望され
ていた。

〔発明が解決しようとする課題〕

本発明の課題は歯垢に対し、高い分解活性を有する新た
なエンドデキストラナーゼを含有する歯垢分解組成物を
提供することにあり、また、該デキスラナーゼ作用を相
乗的に高める配合成分を更に配合した歯垢分解組成物を
提供することにある。

そして、このことにより効率的に歯垢中の不溶性グルカ
ンあるいは歯垢そのものを分解し、ストレプトコッカス
・ミュータンスの口腔内への定着を有効に抑制し、新た
な歯垢形成を阻止することによりう蝕を防止しようとす
るものである。

〔課題を解決するための手段〕

本発明者らはすでに、新規デキストラナーゼ産生菌株を
検索し、グラム陽性土壌細菌アルスロバクタ−・グロビ
フォルミスＷ３１菌（ＮＲＲＬ　Ｂ−４４２８゜ＮＲＲ
ＬＨＮｏｒｔｈｅｒｎ　Ｒｅｇｉｏｎａｌ　Ｒｅ５ｅａ
ｒｃｈ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ。

Ｐｅｏｒｉａ、　Ｉｌｌ、　、υ、Ｓ、Ａ、）またはそ
の突然変異株が新規なエンドデキストラナーゼを産生ず
ることを見出し、該菌株またはその突然変異株を用いて
、工業的使用に供し得るエンドデキストラナーゼの製造
方法を提供している（特願昭６３−５２６６１号、特願
昭６３−５２６６２号〉が、本発明者らは、このグラム
陽性土壌細菌アルスロバクタ−・グロビフォルミスＷ３
１菌（ＮＲＲＬ　Ｂ−４４２８）の産生ずるエンドデキ
ストラナーゼＩおよび■は単独でも、他起源のデキスト
ラナーゼに比し、３〜６倍もの高率でストレプトコッカ
ス・ミュータンスの産生ずる不溶性グルカンを分解する
ことを知見し、また、本エンドデキストラナーゼと共に
各種生物起源のα−アミラーゼを併用すると、前記不溶
性グルカンの分解に顕著な相乗効果を示すことを認め本
発明を完成した。

すなわち、本発明は、アルスロバクタ−属に属する微生
物の産生ずるエンドデキストラナーゼを含有する歯垢分
解組成物に関するものであり、また、本発明は、アルス
ロバクタ−属に属する微生物の産生ずるエンドデキスト
ラナーゼに加えて、さらにα−アミラーゼを含有する歯
垢分解組成物に関するものである。

以下、本発明を更に詳述する。

本発明において使用するエンドデキストラナーゼとして
は、例えば先の出願（特願昭６３−５２６６１号、特願
昭６３−５２６６２号）に関るグラム陽性土壌細菌アル
スロバクタ−・グロビフォルミスＷ３１菌（ＮＲＲＬＢ
−４４２８）由来のエンドデキストラナーゼＩおよび■
が好適であるが、本菌とその突然変異株、およびアルス
ロバクタ−（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ）属に属する細
菌とその突然変異株で、エンドデキストラナーゼを産生
ずる菌株はすべて使用可能である。

以下に、上記エンドデキストラナーゼＩおよび■の諸性
質について記載する。

エンドデキストラナーゼＩ；（１）作用本酵素はデキストランに作用し、主としてイソマルトト
リオースおよびイソマルトテトラオースを生成する。

（２）基質特異性主として細菌性多糖デキストランを水解する。

（３）至適ｐＨ及び安定ｐＨ範囲ｐ　Ｈ４，０〜７．５の範囲で作用し、至適ｐＨは６．
０付近にある（０．２５％デキストラン、３０°Ｃ，６
分間反応、デキストランはファルマシア製Ｔ　２０００
を使用した）。

又、ｐ　Ｈ５，０〜７．５の範囲にて安定である（５ｍ
Ｍ　ＣａＣＩ＝を含有する５０ｍＭβ、β′−ジメチル
グルクール酸緩衝液中で４°Ｃ１２４時間放置後、それ
ぞれの残存活性を測定した）。

（４）作用温度範囲及び最適作用温度約２０〜５５°Ｃの範囲で作用し、最適作用温度は４５
°Ｃ付近にある＜０．２５％デキストラン、ｐＨ６，０
゜６分間反応）。

（５）熱安定性ｐ　Ｈ６，０，１０分間各種温度で加熱処理後、それぞ
れの残存活性を測定した。その結果４５°Ｃまでは１０
０％、５０°Ｃで約６０％の残存活性を示し、６０″Ｃ
でほぼ完全に失活した。

（６）分子量５ＤＳ−ボリアクリルアミドゲル電気泳動（ＳＯＳ−Ｐ
ＡＧＥ）法により推定された精製エンドデキストラナー
ゼ■の分子量は約１０７，０００である。

（７）等電点（ｐｌ）ＬＫＢ社製等電点電気泳動装置（１１０ｄカラム〉によ
り測定された精製エンドデキストラナーゼＩの等電点は
４．２９である。

（８）阻害、活性化及び安定化５ｍＭの水銀、ｔｐｌなどの重金属イオンにより、また
これと同一濃度のＫＭｎＯ，およびＮ−ブロモスクシン
イミドなどにより阻害される。

一方、５ｍＭのカルシウムイオンにより活性化される。

エンドデキストラナーゼ■；（１）作用本酵素はデキストランに作用し、主としてイソマルトト
リオースおよびイソマルトテトラオースを生成する。

（３）至適ｐＨ及び安定ｐＨ範囲ｐＨ４，５〜７．０の範囲で作用し、至適ｐＨは６．０
付近にある（０．２５％デキストラン、３０°Ｃ，６分
間反応、デキストランはファルマシア製Ｔ　２０００を
使用した）。

又、ｐ　Ｈ５，０〜７．５の範囲にて安定である（５ｍ
ＭＣａＣ１□を含有する５０ｍＭβ、β′−ジメチルグ
ルクール酸緩衝液中で４°Ｃ１２４時間放置後、それぞ
れの残存活性を測定した）。

（４）作用温度範囲及び最適作用温度約２０〜５０°Ｃの範囲で作用し、最適作用温度は４０
°Ｃにある（０．２５％デキストラン、ｐＨ６，０，６
分間反応）。

（５）熱安定性ｐＨ６，０，１０分間各種温度で加熱処理後、それぞれ
の残存活性を測定した。その結果４０°Ｃまでは１００
％、４５°Ｃで約６０％の残存活性を示し、５５°Ｃで
ほぼ完全に失活した。

（６）分子量５ＤＳ−ポリアクリルア旦ドゲル電気泳動（ＳＯ５ＰＡ
ＧＥ）法により推定された精製エンドデキストラナーゼ
■の分子量は約７０，０００である。

（７）等電点（ｐｉ）ＬＫＢ社製等電点電気泳動装置（１１０Ｉｌｉカラム）
により測定された精製エンドデキストラナーゼ■の等電
点は４．５１である。

（８）阻害、活性化及び安定化５ｓ＋Ｈの水銀、銅などの重金属イオンにより、またこ
れと同一濃度のにＭｎＯ，およびＮ−プロモスクシンイ
ξドなどにより阻害される。

一方、５ａ＋Ｈのカルシウムイオンにより活性化される
。

また、これらのエンドデキストラナーゼは、先の出Ｊ１
１（特願昭６３−５２６６１号、特願昭６３−５２６６
２号）明細書に記載に準じた例えば以下の方法により得
られる。

エンドヌクレアーゼＩ；菌株としてはアルスロバクタ−・グロビフォルξスＷ３
１（ＮＲＲＬ　Ｂ−４４２８，ＮＲＲＬＨＮｏｒｔｈｅ
ｒｎ　ＲｅｇｉｏｎａｌＲｅｓｅａｒｃｈ　Ｌａｂｏｒ
ａｔｏｒｙ、　Ｐｅｏｒｉａ、１１１．、Ｕ、Ｓ、Ａ、
）を使用し、デキストランを唯一の炭素源に用い、エン
ドデキストラナーゼＩ及び■を誘導生成せしめる。

窒素源としては、有機窒素含有物として各種アミノ酸、
マルトエキス、ペプトン、肉エキス、尿素等が、又、無
機窒素化合物としては塩化アンモニウム、硫酸アンモニ
ウム、硝酸アンモニウム等が単独又は組み合わせて用い
る事が出来る。

その他、ξネラル、ビタミン類等を適時添加するとよい
。なお、培地中にアスパラギンを添加することによりデ
キストラナーゼ■及び■の生産性を高めることができる
。

培養温度は２０〜３５℃が適しており、より好ましくは
２８〜３０°Ｃがよい。培養ｐＨは５．５〜８．５が適
しているが、より好ましくはｐＨ６，０〜６．５がよい
。培養日数は２〜３日間である。本菌の培養方法は、液
体培養および固形培養のいずれも可能であるが、好気的
に液体培養するのが好ましい。

培養終了後、公知の方法によりエンドデキストラナーゼ
■及び■を得る事が出来るが、例えば、培養液中の菌体
を遠心分離法を用いて除去し、無細胞上清液を得る。次
いでこの上清液を９０％飽和硫安で塩析し、得られる沈
澱を５ａ＋Ｍカルシウムイオンを含有する２０＋ｍＭ酢
酸緩衝液（ｐＨ６，０）で透析したＬ　ＤＥＡＲ−セフ
ァロースカラムにのせる。０．２阿塩化ナトリウムで溶
出される活性画分をバイオゲルＰ−１５０カラムでゲル
濾過を行い、先に溶出される活性画分を更にＤＥＡＥ！
−セファロースカラムにかけることにより、精製エンド
デキストラナーゼＩを得ることができる。また、前記バ
イオゲルＰ−１５０を用いたゲル濾過で、後から溶出さ
れる活性される活性画分をＤＢＡＥ−セファロースカラ
ムにかけることにより、精製エンドデキストラナーゼ■
を得ることができる。

本発明において使用するエンドデキストラナーゼは、上
記のように精製されたもののみではなく、上記培養物か
ら遠心分離によって菌体を除去した粗酵素液の形態であ
ってもよい。

また、本発明の歯垢分解組成物において、エンドデキス
トラナーゼとともに含有せしめられるα−アミラーゼと
しては、例えばバチルス（ＢａｃｉｌｌｕＳ）属、アエ
ロバクタ−（Ａｅｒｏｂａｃｔｅｒ）属、アスペルギル
ス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）属、ストレプトミセス（
Ｓ　ｔｒｅｐｔｏａ＋ｙｃｅｓ）属、シュードモナス（
Ｐｓｃｕｄｏｍｏｎａｓ）属等の微生物、麦芽等の植物
体由来のものあるいは唾液中のα−アミラーゼ等が挙げ
られ、いかなる起源のものも使用することができる。

さらに、本発明の歯垢分解Ｕ酸物の具体的な形態として
は、例えば、各種歯磨き剤、義歯洗浄剤、トローチ等の
固形状口中清涼剤、マウスウォッシュ等の液状口中清涼
剤、チューインガム等の口腔用組成物、各種キャンディ
−類等を例示することができる。

なお以下に、本発明の実施例を示すが、該実施例におい
て使用した不溶性グルカンは次のように調製されたもの
である。すなわち１０％ショ糖。

０．０５％Ｍｇ５Ｏ，・７）！２０．０．２％に、ＨＰ
Ｏ４，１％ポリペプチドからなる液体培地（ｐＩ（７，
０，３００ｄＸ１０）に、う蝕原性連鎖球菌（Ｂ豆躬恋
囲Ｘ■旧ｔａｎｓ　ＩＦＯ１３９５５株〉を接種し、３
７°Ｃにて４日間静置培養する。得られた培養液をアド
ヴアンテック社製濾紙（Ｎａ　２　）を用いた濾過法に
より、不溶性物質を濾別した。濾紙上に残存する不溶性
物質を蒸留水にて充分洗浄し、残渣の懸濁液（約２００
１１１１）をロータリーエバポレーターを用いて濃縮し
く６０’Ｃ）、凍結乾燥を施した。これら一連の操作を
経て、３１の培養液より不溶性グルカンの凍結乾燥標品
約４．８ｇを得た。

また、同じく以下の実施例において使用するデキストラ
ナーゼあるいはアミラーゼの酵素活性は、１、０％デキ
ストランＴ２Ｏ００：容液あるいは０．３％可溶性澱粉
溶液０．５　ｄ、５ｍＭＣａ”を含有する酢酸緩衝液（
ｐＨ６，０）　１．０−および酵素溶液０．５　ｍから
なる溶液を３０°Ｃで一定時間反応させた後、反応混液
１．　Ｏｄにつき酵素反応により生じた還元糖をＳｏｍ
ｏｇｙｉ−Ｎｅｌｓｏｎ法を用いて定量し、この条件下
で、いずれも１分間に１μｍｏｌのグルコースに相当す
る還元力を生成する酵素量をそれぞれ１ユニツトとして
算出したものである。

実施例１１０％シｇ糖、　０．０５％Ｍｇ５Ｏａ・７Ｈ，０，０
，２％ＫｔＨＰＯ４゜ポリペプトン１％からなる液体培
地（ｐＨ７，０）中でストレプトコッカス・ミュータン
スＩＦＯ１３９５５株を３７’Ｃ，１４日間静置培養し
た。培養開始時より培＃液中にステンレスワイヤーを挿
入しておいたところ、ステンレスワイヤー上に多量の人
工プラークが付着・形成された。大型試験管（１８Ｘ１
８０　ａｕ＋＋）に１５−の既報（特願昭６３−５２６
６１号、特願昭６３−５２６６２号〉に準じて調製したアルスロバクタ−・グロビフォル鴫ス
Ｗ３１菌（ＮＲＲＬ　Ｂ−４４２８）起源の粗エンドデ
キストラナーゼ、ならびに高度に精製したエンドデキス
トラナーゼ■あるいは■溶液（各１５ユニツト含有）を
入れ、上記人工プラークが付着したステンレスワイヤー
をｐＨ６，０，３０°Ｃで２０．４０．６０分間反応さ
せたところ、いずれの場合も人工プラークは一部分解・
可溶化され、反応後４０分でステンレスワイヤー上から
完全に剥離した。

従って、アルスロバクタ−・グロビフォル稟スＷ３１菌
（ＮＲＲＬ　Ｂ−４４２８）起源のエンドデキストラナ
ーゼは歯垢の主構成分である不溶性グルカンを強力に分
解・可溶化する能力を有していることが確認された。

実施例２前記不溶性グルカンを０．２％含有する２０ｍＭ酢酸緩
衝液（ｐＨ６，０，＋５ｍＭ　Ｃａ”　）　２．４　ｒ
ｎｌに、アルスロバクタ−・グロビフォルミスＷ３１菌
（ＮＲＲＬ　Ｂ−４４２８）起源の精製エンドデキスト
ラナーゼ■あるいは■溶液（各０．２７ユニツト含有）
を１００μｉ加え、３７°Ｃで反応させた。さらに対照
として、糸状菌ケトくラム・グラシリ　（Ｃｈａｅｔｏ
ｍｉｕｍ　　肛匹旦紅、ペニシリウム・リラシナム（Ｐ
ｅｎｉｃｉｌｌｉｕｏ＋旦凰１…畦、ペニシリウム・フ
ニキュローサム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｆｕｎｉｃｕ
ｌｏｓｕｍ）などの市販デキストラナーゼ製剤溶液（通
常各０．２７ユニツトが含有されていた）を不溶性グル
カンに上記反応と同一条件下で反応せしめた。経時的に
生成される還元糖をＳｏａ＋ｏｇｙｉ−Ｎｅｔｓｏｎ法
を用いて定量し、また不溶性グルカン中の全糖をフェノ
ール硫酸法で定量し、不溶性グルカンの分解率を算出し
た。

得られた結果（第１図参照）を総合すると、アルスロバ
クタ−・グロビフオミスＷ３１菌（ＮＲＲＬ　Ｂ４４２
Ｂ）のエンドデキストラナーゼはケトミウム属のデキス
トラナーゼに比べて約３倍、またペニシリウム属のデキ
ストラナーゼに比して約６倍の分解率を示すことが判明
した。

実施例３前記不溶性グルカンを０．２％含有する２０ｍＭ酢酸緩
衝液（ｐＨ６，０，＋５ｍＭ　　Ｃａ”）　２．４ＩＩ
Ｉｉに、アルスロバクタ−・グロビフォル旦スＷ３１１
（ＮＲＲＬ　Ｂ−４４２８）起源の精製エンドデキスト
ラナーゼＩあるいは■溶液（各０．３および１．０ユニ
ツト含有）を１００μｌ加え、３７°Ｃで反応させた。

また、大麦麦芽αアミラーゼ（ＳＩＧＭＡ社製）、バチ
ルス属（Ｂａｃｉｌ　Ｉｕｓ３ρ、）結晶α−アミラー
ゼ（ＳＩＧＭＡ社製）、バチルス・リケニフオルミス（
Ｂａｃｉｌｌｕｓ　Ｉｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｔｓ）結晶
α−アミラーゼなどの市販α−アくラーゼ製剤（各１．
０ユニフト含有）を単独で不溶性グルカンに上記反応と
同一条件下で反応せしめた。この際、経時的に生成され
る還元糖をＳｏｍｏｇｙｉ−Ｎｅｌｓｏｎ法を用いて定
量し、不溶性グルカン分解活性を６６０ｎｍの吸光度と
して表示した。

得られた結果（第２図参照）から、試みた各種α−ア旦
クラーゼ例外なく単独で、不溶性グルカンの初期分解に
寄与することが明らかとなった。

実施例４前記不溶性グルカンを０．２％含有する２０ｍＭ酢酸緩
衝液（ｐＨ６，０，＋　５　ｍＭ、　Ｃａ”）　２．４
　ｄに、アルスロバクタ−・グロビフォルξスＷ３１菌
（ＮＲＲＬ　Ｂ−４４２８）起源の精製エンドデキスト
ラナーゼ【あるいは■　（各０．３および１．０ユニツ
ト）を単独で用いた溶液、あるいは上記精製エンドデキ
ストラナーゼ（０，３ユニツト〉と共に大麦麦芽α−ア
ξラーゼ（ＳＩＧＭＡ社製）、バチルス属結晶α−アミ
ラーゼ（ＳＩＧＭＡ社製）、ヒト唾液α−アミラーゼ（
ＳＩＧＭＡ社製）、バチルス・リケニフォルミス結晶α
−アミラーゼの各０．７ユニツトとを併用した溶液をそ
れぞれ１００μｌ加え、３７℃で反応させた。この際、
経時的に生成される還元糖をＳｏｓｏｇｙｉ−Ｎｅｌｓ
ｏｎ法を用いて定量し、不溶性グルカン分解活性を６６
０ｎｍの吸光度として表示した。

得られた結果（第３図参照）を総合すると、アルスロバ
クタ−・グロビフォルミスＷ３１菌（ＮＲＲＬＢ−４４
２８）の産生ずるエンドデキストラナーゼに各種生物起
源のα−アミラーゼを適量併用すると、例外なく不溶性
グルカンの初期分解に顕著な相乗効果を示し、エンドデ
キストラナーゼ使用量の減少を可能ならしめることが明
らかとなった。

実施例５前記不溶性グルカンを０．２％含有する２０ｍＭ酢酸緩
衝液（ｐＨ６，０，＋５ｍＭ　　Ｃａ”）　２．／Ｉｒ
Ｒ１に、アルスロバクタ−・グロビフォルミスＷ３１菌
（ＮＲＲＬ　Ｂ−４４２８）起源の精製エンドデキスト
ラナーゼＩあるいは■　（各０．３ユニツト）を単独で
用いた溶液、バチルス・リケニフォルミスα−アξラー
ゼ（１，０ユニツト）を単独で用いた溶液、精製エンド
デキストラナーゼ（０，１ユニツト）と共にバチルス・
リケニフォルミスα−アξラーゼ（０，９ユニツト）と
を併用した溶液、精製エンドデキストラナーゼ（０，２
ユニツト）と共にバチルス・リケニフオルζスα−アξ
ラーゼ（０，８ユニツト）とを併用した溶液、および精
製エンドデキストラナーゼ（０，３ユニツト）と共にバ
チルス・リケニフオルξスα−アミラーゼ（０，７ユニ
ツト）とを併用した溶液をそれぞれ１００μｌ加え、３
７°Ｃで反応させた。

この際、経時的に生成される還元糖をＳｏｍｏｇｙｉ−
Ｎｅｌｓｏｎ法にて定量し、不溶性グルカン分解活性を
６６０ｎａ＋の吸光度として表示した。

得られた結果（第４図参照）から、精製エンドデキスト
ラナーゼとα−アミラーゼとを併用すると不溶性グルカ
ンの初期分解に顕著な相乗効果が出現し、エンドデキス
トラナーゼ使用量の減少を可能ならしめている。

〔発明の効果〕

エンドデキストラナーゼ（系統名；ｌ、６−α−Ｄ−グ
ルカン６−グルカノヒドロラーゼ、　ＥＣ３，２゜１．
１１）は細菌性多糖デキストランをエンド様式で加水分
解する酵素として知られており、う蝕原性連鎖球菌スト
レプトコッカス・逅ニータンスなどが生産する不溶性グ
ルカン（ムタン）中のα−１゜６−グルコシド結合をも
特異的に切断する能力を有しているが、前記実施例から
明らかなように、本発明のアルスロバクタ−属に属する
微生物が産生ずるエンドデキストラナーゼは、ケトミウ
ム属やペニシリウム属起源のデキストラナーゼに比し、
デキストラン分解活性単位で同一酵素単位を使用しても
、ストレプトコッカス・ごニータンスＩＰ０１３９５５
株の産生ずる不溶性グルカンに対し３〜６倍の高分解率
を示している（実施例２）。さらに、アルスロバクタ−
属に属する微生物が産生ずるエンドデキストラナーゼと
共にα−アミラーゼを併用すると、前記不溶性グルカン
の分解に顕著な相乗効果を示すことが明らかである（実
施例４および５）。

そして、このα−アミラーゼの使用は高価なエンドデキ
ストラナーゼの使用量の減少を可能ならしめるという利
点をもたらすものである。

さらに、本発明において使用するエンドデキストラナー
ゼはヒト唾液α−アくラーゼの存在下で、相乗的に歯垢
中の不溶性グルカンの分解に寄与し、また、唾液中のＣ
ａ”″は本発明において使用するエンドデキストラナー
ゼの有効な保護剤としての作用を有すものである。

したがって、本発明の歯垢分解剤の効果は極めて顕著な
ものであって、これにより、ストレプトコッカス・ξニ
ータンスの口腔内への定着及び新たな歯垢形成を阻止し
、う蝕を有効かつ効率的に防止することが可能となるも
のである。

【図面の簡単な説明】

第１図はアルスロバクタ−・グロビフォルごスＷ３１菌
エンドデキストラナーゼおよび他の糸状菌起源のデキス
トラナーゼの不溶性グルカンに対する分解率の比較を示
す図であり、第２図はアルスロバクタ−・グロビフォル
ごスＷ３１菌エンドデキストラナーゼおよび起源を異に
する各種α−アミラーゼの不溶性グルカンに対する分解
活性の比較を示す図である。また、第３図はアルスロバ
クタ−・グロビフォルミスＷ３１菌エンドデキストラナ
ーゼと起源を異にする各種α−アミラーゼとを併用した
場合の不溶性グルカンに対する分解活性の比較を示す図
であり、第４図はアルスロバクタ−・グロビフォルミス
Ｗ３１菌エンドデキストラナーゼとバチルス・リケニフ
ォルミスα−アミラーゼとを併用した場合の不溶性グル
カンに対する分解活性の比較を示す図である。

Claims

【特許請求の範囲】１、アルスロバクター属に属する微生物が産生するエン
ドデキストラナーゼを含有する歯垢分解組成物。２、アルスロバクター属に属する微生物が産生するエン
ドデキストラナーゼ及びα−アミラーゼを含有する歯垢
分解組成物。３、アルスロバクター属に属する微生物がアルスロバク
ター・グロビフォルミスＷ３１菌株（ＮＲＲＬＢ−４４
２８）である請求項１または２記載の歯垢分解組成物。４、上記組成物の形態が、歯磨き剤、義歯洗浄剤、トロ
ーチ、マウスウォッシュ、チューインガム、あるいはキ
ャンディーである請求項１〜３記載の歯垢分解組成物。