JPH03504508A - 新規な１α―ヒドロキシビタミンＤ２エピマー、その誘導体及びそれらを含んでなる調剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 新規な１α−ヒドロキシビタミンＤｔ エピマー及び誘導体 本発明は、デパートメント・オン・ヘルス・アンド・ヒユーマン・サービスの補 助金と賞与金による援助を受けた作業の過程においてなされたものである。政府 は、本発明においである種の権限を有する。

本発明は、ビタミンＤ、化合物、より特定すると、新規な１α−ヒドロキシビタ ミンＤ、の（２４Ｓ）エピマー及びそのある種の誘導体に関する。

五景 天然のビタミンＤ誘導ホルモンである１α、２５−ジヒドロキシビタミンＤｓ及 びその２５−デオキシ類似体であるｌα−ヒドロキシビタミンＤ、はいずれも、 カルシウムの腸内吸収及び骨からのカルシウムの流通に関する重要な刺激物とし て、かつ、骨の石灰化の有効な促進物として知られるように、生体内において高 い活性を発揮する。非常に似た活性パターンが１α、２５−ジヒドロキシビタミ ンＤＩ　　（米国特許第３．８８０，８９４号）及びその２５−デオキシ類似体 である１α−ヒドロキシビタミンＤ、（米国特許第３．９０７，８４３号）によ って示される。これらの化合物も同様に、動物または人間における腸内カルシウ ム移送、骨ミネラルの流通及び青石灰化応答のようなビタミンＤタイプ応答の完 全なスペクトルを明らかにする。構造的には、ｌα、２５−ジヒドロキシビタミ ンＤ２とｌα−ヒドロキシビタミンＤ２は、これらがエルゴステロールの側鎖に 生ずるよりなＣ−２４の立体化学を有することに特徴がある。すなわち、これら の化合物が以下に示す構造によって規定され、該構比較的最近、１α、２５−ジ ヒドロキシビタミンＤ２のＣ−２４−エピマーがつくられ、試験された（米国特 許第４，５８８，７１６号及び４，７６９゜１８１号）。この化合物は、上記し た構造により特徴づけられ、ここでＲは側鎖（Ｃ）を示す、顕著なこととして、 このＣ−２４−エピマービタミンＤ誘導体は、腸内カルシウム吸収を刺激しかつ 骨の石灰化を促進するが骨カルシウム流通応答は誘発しないことにおいてはっき りと異なった生物学的活性プロフィルを示す。

及肌立皿示 本発明は、新規なビタミンＤ類似体、すなわち、以下の構造によって示すことが できる１α−ヒドロキシ−２４−エビ−ビタミンＤ、とともに、該化合物のアシ ル及びアルキルシリル誘導体を提供するものである。

したがって、この化合物は、Ｃ−２４に逆のメチル立体化学性（すなわち、２４ 旦−配置）を有するので、公知のｌα−ヒドロキシビタミンＤよとは異なるとと もに、以下により詳細に説明するように、公知のビタミンＤ２誘導体とは、著し く異なったパターンの生物学的活性を発揮する点でも異なる。

ｌα−ヒドロキシ−２４−エビ−ビタミンＤ２の合成は、目的の化合物において 炭素−２４になるべき炭素中心において所望の（旦）の立体化学性を有する適宜 の側鎖単位の組立てと、その側鎖単位の、所望の最終生成物を生ずるように好適 な１α−ヒドロキシル化ビタミンＤ核との縮合とを必要とする。

光学的に活性な側鎖単位の合成は、公表されている手順に従って、商業的に入手 することができるラセミ２．３−ジメチルブタノールを対応する臭化物に転化し 、次に臭化マグネシウム誘導体（１）に転化させることからなるものであった（ ティー・ラダ（Ｔ、　５ｕｄａ）等のジャーナル・オン・ジ・アメリカン・ケミ カル・ソサイエテ４　（Ｊ、　Ａｍ、　Ｃｈｅｗ、　Ｓｏｃ、）第８２巻、第３ ３９６頁、１９６０年、マルチネス（Ｍａｒｔｉｎｅｚ）等のガゼツト・チミ・ イタリ（Ｇａｚｚ、　Ｃｈｉｎ、　Ｉｔａｌ）第９７巻、第９６頁、１９６７年 、ニューヨーク州、ワイリー・アンド・サンズ（Ｗｉｌｅｙ　＆　５ｏｎｓ）社 発行のオーガニック・シンセシス（Ｏｒｇａｎｉｃ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ）訂正 第２巻、第３５８頁、参照）。

以下に示す臭化マグネシウム誘導体（１）は、次に、グリニヤール反応条件の下 で、以下に示す化合物（２）である（旦）−（＋）−ｐ−トルエンスルフィン酸 （−）−メンチルエステルと反応される。この反応は、ジアステレオマーのスル ホキシド、すなわち、化合物（旦）と（丘）の混合物を提供するので重要な工程 であり、これらの化合物は、カラムクロマトグラフィまたは高圧液体クロマトグ ラフィ（ｈｐｌｃ）によって容易に分離されて、２旦（化合物旦）及び２旦（化 合物産）の双方の立体異性体を生ずることができる。

次の、ｐ−トリル−２，３−ジメチルブチル−スルホキシド旦及び丘の酸化は、 対応する光学的に活性なスルホンを生ずる。か（して、上記した式に示すように 、クロロベル安息香酸でのスルホキシド（３）（７）Ｗ化は、（２旦）−２，３ −ジメチルブチル−１）−トリスルホン（旦）を生じ、一方、スルホキシド（丘 ）の類似の処理は、（２Ｓ）−２，３−ジメチルブチル−ｐ−トリスルホン（旦 ）を生ずる。

上記の反応シーケンスは、光学活性の側鎖単位をこれらのスルホニル誘導体とし て形成する新規かつ有効な方法を提供するものであり、該誘導体はその後、Ｃ− ２４にキラリティ中心を有する種々のステロイドすなわちビタミンＤ側鎖の構造 の関する公知の手順に従って使用することができる。上記したトリスルホン（旦 ）及び（旦）は新規な化合物であり、対応する鏡像異性体のフェニルスルホンは 、時間と手間を要する合成により以前はつ（られていた（モリ（Ｍｏｒｉ）等の ［テトラヘドロン・レターズＪ　（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔｅｒｓ） 第３８巻、第２０９９頁（１９８２年）、サカキバラ（Ｓａｋａｋｉｂａｒａ） 等の「ヘトロサイクルズＪ　（Ｈｅｔｒｏｃｙｃｌｅｓ）第１７巻、第３０１頁 （１９８２年）、フエラボッシ（Ｆｅｒｒａｂｏｓｃｈｉ）及びサンタエニロ（ Ｓａｎｔａｎｉｅｌｌｏ）の「シンセティック・コミュニケイションズＪ　（Ｓ ｙｎｔｈＣｏｍａ＋ｕｎ）第１４巻、第１１９９頁（１９８４年）、コチェンス キイ（Ｋｏｃｉｅｎｓｋｉ）等のジャーナル・オン・ザ・ケミカル・ソサイエテ ィ・パーキン・トランザクションズ（Ｊ、　Ｃｈｅｗ、　Ｓａｃ、　Ｐｅｒｋｉ ｎ　Ｔｒａｎｓ、）第１巻、第８３４頁（１９７８年））。

所望の１α−ヒドロキシ−２４−エビ−ビタミンＤ２類似体を得るためには、上 記した手順により得られたままの（２旦）−２，３−ジメチル−１）−トリスル ホン（旦）が好適な側鎖単位である。したがって、化合物（旦）は、クトナー（ Ｋｕｔｎｅｒ）等のジャーナル・オン・ジ・オーガニック・ケミストサイ、第５ ３巻、第３４５０頁（１９８８年）の概略手順を使用して、公知のｌα−ヒドロ キシビタミンＤ−２２−アルデヒド誘導体（以下に示す構造７、該構造において Ｘｌ及びＸｌはヒドロキシ保護基、例えば、ｔ−ブチルジメチルシリルのような アルキルシリル基）と反応される。この縮合は、以下に示す構造（旦）（Ｘｌ及 びＸ２＝ヒドロキシ保護基）により示される側鎖アダクトを生じ、該アダクトは 次に金属アマルガムで還元され、ヒドロキシ基保護の２４−エビ−ビタミンＤ、 誘導体、構造（旦、Ｘｌ及びＸｔ＝ヒドロキシ保護基）を提供する。標準的な手 順に従ってヒドロキシ保護基を除去すると、所望の１α−ヒドトキシー２４−エ ビービタミンＤ２　（化合物上皇、Ｘ’　＝Ｘ”　＝Ｈ）が得られる。

上記構造式により示されるように、本発明の方法は、ＸｌとＸ２が水素である遊 離のヒドロキシ化合物（上皇）と、ＸｌとＸ２がアルキルシリル基を示す、化合 物（旦）のようなヒドロキシ保護誘導体との双方を生ずる。さらにまた、ヒドロ キシ化合物（上皇）が、標準的なアシル化手順によって対応する１−及び／また は３−アシル誘導体により他の誘導体に転換されて、ＸＩとＸｌがアシル基を示 す構造（旦）の化合物を提供することができる。化合物（上皇）のアルキルシリ ル及びアシル誘導体は、高い脂質溶解度が所望される用途を見出せる。

本明細書及び請求の範囲において、「アルキルシリル」なる語は、トリアルキル シリコンラジカルを意味し、該ラジカルにおいて、各アルキル基は、全ての異性 体の形態において１乃至５個の炭素を有することができる。一般例は、トリメチ ルシリル、トリエチルシリル及びｔ−ブチルジメチルシリルを含む、「アシル」 なる語は、全ての異性体の形態（例えば、ホルミル、アセチル、プロピオニルな ど）において１乃至５個の炭素を有する脂肪族アシル基（アルカノシル基）ある いはベンゾイルまたはニトロ、ハロもしくはメチル置換ベンゾイル基のような芳 香族アシル基を意味する。

本発明の方法は、以下に例示する実施例により一層詳細に説明されている。これ らの実施例において、アラビア数字、例えば、上、２．３・・・などによる生成 物または中間物の表示は、上記説明においてこのように番号が付されている構造 をいうものである。

実施例１ ２Ｒ−２３−ジメ　ルブチルー　−トリルスマグネシウムの削り屑（０，２４ｇ 、１０ミリモル）とＩ、の結晶を乾燥したフラスコに入れ、５．０ｍｌの無水テ トラヒドロフランで覆った。１−ブロモ−２，３−ジメチルブタン（１，５４ｇ 、８ミリモル）を窒素雰囲気において撹拌しながら、かつ、しばしば冷却しなが らゆっくりと添加した。混合物を室温で１．５時間またはマグネシウムの殆どが 消費されるまで撹拌した。（化合物上を含む）この混合物を冷却し、１０．０ｄ の無水テトラヒドロフランに入れた２、３５ｇの（Ｒ）　−（＋）　−ｐ−トル エンスルフィン酸（−）−メチルエステル（化合物２）（１０ミリモル）を添加 した。混合物を窒素雰囲気において室温で１６時間撹拌し、冷却し、飽和ＮＨ４ ｃＩ２で分解した。有機相を分離し、水性相をエーテルで数回抽出した０組合わ せた有機相を水とブラインとで洗浄し、Ｍ　ｇ　Ｓ　Ｏ４で乾燥し、ろ過し、蒸 発させた。残渣を７０−２７０メツシユのシリカゲルカラム上でクロマトグラフ 処理し、１．２６ｇのジアステレオマースルホキシド混合物を得た。これを、酢 酸エチルとヘキサンとの混合物を用いて２３０−４００メツシユのシリカゲルカ ラム上でフラッシュクロマトグラフィにより、または酢酸エチル−ヘキサン混合 物を使用して半分取（ｓｅｍｉｐｒｅｐａｒａｔｉｖｅ）　ＨＰ　Ｌ　Ｃ（ゾル パックス・シル（Ｚｏｒｂａｘ　５ｉｔ）、９，４ｘ２５ｃｍカラム）により分 離した。溶離した最初の化合物は、（Ｓ）−（−）−ｐ−トリル−（２旦）−２ ，３−ジメチルブチルスルホキシド（旦）であり、２番目の化合物は（Ｓ）−（ −）−ｐ−）リルー（２旦）−２，３−ジメチルブチルスルホキシド（４）であ った、ＭＳｍ／ｚ（相対強度２２４）Ｍ”、６）　、２０８　（１４）、１４０ （１００）　、１３９　（８）、１２４　（３０）、９２（２２）、９１　（２ １）、４４　（１０）、４３　（７１）、２８　（３４）、２７　（２５）：　 　’ＨＮＭＲ（ＣＤＣＩｓ）６０．８０　（３Ｈ，ｄ、Ｊ＝７．０Ｈｚ）　、０ ．８９（３Ｈ，ｄ、Ｊ＝７．０Ｈ２）　、０．９８　（３Ｈ。

ｄ、Ｊ＝６．５Ｈｚ）、１．６−１．８２　（２Ｈ。

ｍ）　、２．４２　（３Ｈ，ｓ、ＣＨｓ　−Ａｒ）　、２．７１（２Ｈ，ｍ）　 、７．３４　（２Ｈ，ｄ、Ｊ＝１５Ｈｚ）（Ｈ−アリルオルソ）、７．５４　（ ２Ｈ，ｄ、Ｊ＝１５Ｈｚ、Ｈ−アリルオルソ）。（２Ｓ）スルホキシド４　　［ （２１：’＝−１５３，５（ｃＨｃｇ、中、ｃ＝４）；　　（２Ｒ）スルホキシ ド旦［α］”＝−４４４，８（ＣＨＣＱ　ｓ中、ｃ＝４）。

夫立豊ユ ２Ｓ　　−２３−ジメチルブチル−−ト１スル圭２（旦） （２Ｓ）−２，３−ジメチルブチル−ｐ−）リスルホキシド（ま）（５２ｍｇ、 ０．２ミリモル）を１．０ＴＩｌｉｉの無水ジクロロメタンに溶解し、６０ｍｇ （０，３ミリモル）の３−クロロペルオキシ安息香酸を撹拌しながら加えた６反 応混合物を２時間撹拌し、１０％炭酸水素ナトリウムで急冷した、ジクロロメタ ンを更に加え、組合わせた有機抽出物を亜硫酸ナトリウム水溶液とブラインとで 洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥した。溶媒を真空除去し、粗スルホンを、ヘキサン酢 酸エチル混合物を使用してシリカゲルフラッシュクロマトグラフィにより精製し 、スルホン（６）を無色のオイルとして得た０分析のために、ＨＰＣＬ　（ゾル パック、シル９．４Ｘ２５ｃｍカラム）により精製して、純粋な（２旦）−スル ホン（６）４２ｍｇを得た。これは、［ａｌ　”　　＋　１７　（ＣＨＣＪ！ｓ のＣ＝３　、５　）　：ＭＳｍ／ｚ　（相対強度）　２４０（Ｍ”、３）　１９ ７（５）、１５７（１００）、　９２　（１９）、９１（２７）、８５　（２５ ）、８４　（３１）、　４３　（７２３；　’ＨＮＭＲδ０．７７（３Ｈ，ｄ、 　Ｊ＝７　Ｈｚ）、　０．８２（３Ｈ，ｄ、　Ｊ＝７．０　Ｈｚ）、　１．００ （３Ｈ１ｄ、Ｊ＝７．０　Ｈｚ）、１．６６−１．９８（２Ｈ，ｍ）、２．４５ （３Ｈ，ｓ、ＣＨｓ−アリル）、　２．８６（Ｉｌ、　ｄｄ、　Ｊ＝８．１１　 Ｈｚ）、　３．０６　（ＩＮ、　ｄｄ、　Ｊ＝４．１２　Ｈｚ）、７．３５（２ Ｈ，ｄ、Ｊ＝７．０　Ｈｚ、Ｈ−アリルオルソ）　、７．７５（２Ｈ，ｄ、Ｊ＝ ８、Ｈ−アリルオルソ）であった。

罠鳳■ユ ２Ｒ−２３−ジメチルブチル−−ト１スル患２（旦） 上記実施例２に記載の実験手順を使用して、スルホキシド旦を酸化することによ り（２ｆｌ）−スルホン（旦）を得た。得られた（２旦）スルホン（旦）は、［ α１　”＝−１９ＣＣＨＣｆｌ、のｃ＝１．４）の光学回転を示した。

衷！医Ａ ｌα−ヒドロ　シー２４−二ビービ　ミンＤ。

（１旦） （２互）−２，３−ジメチルブチル−ｐ−）リスルホン（旦）を３００μＬの無 水テトラヒドロフラン（イソジケータとして１．１０−フェナントロリンを含有 ）に入れた撹拌溶液にアルゴン下において、＝７＆℃で１８μＬ　（１３０μモ ル）のジイソプロピルアミンを加え、次にｎ−ＢｕＬｉのヘキサン溶液（１，５ ０Ｍ、１３０μモル）８０μＬを加えた。溶液を一７８℃で１５分撹拌しく暗褐 色）、０．３７＋１［！の無水テトラヒドロフランに入れた４ｍｇ　（７μモル ）の保護された無水物（ヱ、Ｘ’　＝Ｘ”　＝ｔ　　ＢｕＭｅｚＳｉ）を加え、 混合物をアルゴン下において一７８℃で１時間撹拌した。反応混合物を１ｍ１ｌ の飽和ＮＨ４Ｃ℃溶液で急冷し、０℃に暖め、酢酸エチルで抽出し、有機相を飽 和ＮａＣｌ２で洗浄した。有機相をＭ　ｇ　Ｓ　Ｏ４で乾燥し、ろ過し、蒸発さ せた。残渣を酢酸エチルに再溶解し、酢酸エチル中でセブ・バック（Ｓｅｐ　Ｐ ａｋ）カラムに通し、蒸発させた。残渣を酢酸エチルの１０％ヘキサン溶液を使 用してＨＰＬＣ（ゾルパックス・シル９．４Ｘ２５ｃｍカラム）により精製し、 ３．３ｍｇ　（５８％）のヒドロキシスルホン（旦、ｘ’　＝ｘ２＝ｔ−ＢｕＭ ｅｘ　Ｓ　ｉ）を得た。ＭＳｏ／ｚ　　（相対強度）８、２　（１４”、２０） 、６８０（３４）、４４０（５２）、２４ｇ（６４）、　１５７（６５１，７５ （１００）。

Ｎａｇ　ＨＰＯ４のメタノール中飽和溶液（１，０ｄ）を、スルホン（旦）３． ３ｍｇを１．０ｍｌの無水テトラヒドリフランに溶解した撹拌溶液に添加し、次 に１６０ｍｇの粉末無水Ｎａ２８ＰＯ４を加えた。混合物をアルゴン下で１５分 撹拌し、０℃に暖め、新鮮な５％ナトリウムアマルガム（約４００ｍｇ）を加え た。混合物を５℃で２０時間撹拌し、５ｍｌのヘキサンを加え、ヘキサン層をデ カント処理した。固体物質を次に酢酸エチルの１０％ヘキサン溶液（３Ｘ５ｄ） で抽出した。組合わせた有機相を飽和ＮａＣβで洗浄し、セブ・バックカートリ ッジによりろ過し、蒸発させた。ＨＰＬＣ（ゾルパックス・シル９．４Ｘ２Ｓｃ ｍカラム）（溶媒として酢酸エチルの１０％ヘキサン溶液）での最終精製により 、１．０５ｍｇ　（４０％）のビタミンＤ２誘導体（旦、ｘ’　＝ｘ２＝ｔ−Ｂ ｕＭｅｚＳｉ）を得た。（副生成物として０．４７ｍｇの２２−ヒドロキシル化 誘導体も得られた。）ＭＳａ＋／ｚ　　（相対強度）　６４０（Ｍ”、２４）、 ５０ｇ（６５）、２４８（６７）、１４７（１３）、７３（１００）、６９（５ ｇ）　；’ＨＮＭＲδ０．５４　（３Ｈ，ｓ、　１ｌｌ−ＣＨ２）、４、１９　 （ＬＨ，ｍ、　３−Ｈ）　、　４．３５　（ＬＨ，ｍ、　１−Ｈ）　、　４．８ ６　（ＩＨ，ｓ、１９２−Ｈ）、５．１７（３Ｈ，ｍ、１９Ｅ−Ｈおよび２２− ２３−Ｈ−Ｓ）、６．００　（ＬＨ，ｄ、　Ｊ＝９．６Ｈｚ、７−Ｈ）　、　６ ．２３　（ＬＨ，ｄ、　Ｊ＝８．８Ｈｚ、６−Ｈ）、ヒドロキシ保護ジオール（ 旦、８００μｇ）を０．５ｄの無水テトラヒドリフランに溶解し、この溶液に、 テトラヒドロフランに溶解したテトラブチルアンモニウムフロリドの１Ｍ溶液９ ０μＬを加えた。混合物をアルゴン下において５５℃で１時間撹拌した。混合物 を冷却し、５ｄのエーテルを加えた。有機相を飽和ＮａＣＪ２溶液で洗浄し、無 水Ｍ　ｇ　Ｓ　ＯＪ上で乾燥し、蒸発させ、２−プロパツールの２０％ヘキサン 溶液に再溶解し、セブ・パックを使用してろ過した。２−プロパツールの２０％ ヘキサン溶液における分取ＨＰＬＣ（ゾルパックス・シル９．４ｍｍＸ２５ｃｍ カラム）により３０８μｇ（７）ｌα−ヒドロキシ−２４−エビ−ビタミンＤ２ （１旦、Ｘ’　＝Ｘ”　＝Ｈ）を得た。１α−ヒドロキシ−２４−エビ−ビタミ ンＤ２は、次のスペクトル特性を示した。ＵＶ　（ＥｔＯＨ）んｍａｎ　：２６ ４ｎｒｎ、λ４□。

２２８；ＭＳｍ／ｚ　　（相対強度）　４１２（Ｍ”、１３）、　３９４（２１ １，３７６（７）、２８７　（４）、２６９　（７）、　２５１　（６）、　２ ５２　（３１）、　２５１　（６）　、　１５２　（３５）、　１５１（１５） 、１３４（１００）、６９（５０）、５５（７３）、’ＨＮＭＲ（ＣＤＣ１，） 　δ０．４９（３−Ｈ，ｓ、　１ｇ−ＣＨ−）、　０．７７　（３−Ｈ，ｄ、　 Ｊニア、　１．２６または２７−ＣＨ，）、０、８５　（３Ｈ，ｄ、　Ｊ＝６． ８．２８−ＣＨｘ）、　ｏ、　９４　（３Ｈ，ｄ、　Ｊ＝６．５．２ｌ−ＣＩ（ ｓ）、４、９４　（ＩＨ，ｓ、　１９Ｚ−Ｈ）　、　５．１３　（２Ｈ，ｍ、２ ２および２３Ｈ）　（５，１１，５゜１３．５．１４）　５．２６　（ＬＨ，ｓ 、　１９Ｅ−Ｈ）　、　５．９９　（ＬＨ，ｄ、　Ｊ：１１．２Ｈｚ、７−Ｈ） 、６．３５（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝１１．２Ｈｚ、６−Ｈ）　、　４．２１　（ＩＨ， ｍ、３−旧、４．４１（ＬＨ，ｍ、　１−Ｈ）、　１　ａ−ヒドロキシ−２４− エビ−ビタミンＤ２は水の１５％アセトニトリル液を使用した逆相ＨＰＬＣ（４ ，６ｍｍｘ２５ｍｍ、ＯＤＳゾルパックスカラム）により、公知の１α−ヒドロ キシビタミンＤ２と区別することができる。この系において溶離する最初の化合 物は、１α−ヒドロキシ−２４−エビ−ビタミンＤ、であり、第２の化合物は公 知のｌα−ヒドロキシビタミンＤ２であった。

１α−ヒドロキシ−２４−エビ−ビタミンＤ２の物１１五１性 この新規な類似体を、ビタミンＤ欠乏ラットにおいて試験した。これらの試験は 、１α−ヒドロキシ−２４−エビ−ビタミンＤ２が、公知の１ａ−ヒドロキシビ タミンＤ２とははっきりと異なる生物学的活性スペクトルを有することを示して いる。下記の第１表においては、代表的な分析結果が示されている。これらは、 腸内カルシウム移送活性（ｒＳ／Ｍ比」）の試験と血清のカルシウムレベルによ り反映される骨のミネラル流通の試験とを含む。これらの分析は、標準的な手順 （例えば、米国特許第４，５８８，１７６号）に従って行なわれた。これらの分 析において使用されたラットは、ビタミンＤを含まない低カルシウムの食事（０ ，０２％Ｃａ、０．３７％Ｐ）に３−１／２週間保持することにより、ビタミン Ｄ欠乏にした。これらは、犠牲にする前に２０時間、試験化合物（またはビヒク ルだけ、−Ｄ対象グループ）を受けた。

第１表のデータは、新規の類似体である１α−ヒドロキシ−２４−エビ−ビタミ ンＤ、が腸内カルシウム移送を刺激する上において、公知の１α−ヒドロキシビ タミンＤ２と略同等の高い活性を発揮していることを示している。一方、この新 規な化合物は、骨からのカルシウムの流通においては活性を示していない。かく して、この新規な化合物は、公知の１α−ヒドロキシビタミンＤ２と構造的には 密接に関連しているが、著しく異なる活性プロフィルを示している。骨からのカ ルシウムの遊離がないことを除き、カルシウムの吸収を刺激することにおいて、 新規な類似体は、骨の質量の損失により特徴づけられる生理的状態の予防または 処置の治療剤として特に適している。

１上１ １α−ヒドロキシビタミンＤ３と１α−ヒドロキシ−２４−エビ−ビタミンＤ。

の腸内カルシウム移送および骨流通活性グループ　　　鳳　　Ｌ止之立ム並立　 　１里１（ｐｍｏｌ）　　Ｓ　／　Ｍ比　　　　血清Ｃａ、　ｍｇ％Ｄ（対照） 　　　０　　２．５±０．３５　　　３．７＋０．２０１α−ヒドロ　３２５　 　４．３±０．４２”　　３．９±０．３９”キシ−２４−６５０４，４±０． ７０”　　４．１±０．２３”ｌａ−ヒト０　３２５　　５．４±０．３７”　 　５．３±０．１５”キシビタミンＤ８ ａそれぞれの対照グループと比較して有意差ｐ＜ｏ、００１゜ ｂ対照に比較して有意差なし。

第１表の結果は、カルセミツク（ｃａｌｃｅａ＋ｉｃ）作用に関しては、新規な １α−ヒドロキシ−２４−二ビービタミンＤ２が公知の１０−ヒドロキシビタミ ンＤ２と同様の生物学的活性スペクトルを有することを示している。しかしなが ら、別のテストは、この新規な化合物が公知の２４−エビーＤ、誘導体とは、悪 性細胞の単球大食細胞に対する分化をはじめとする活性が著しく相違することを 示した０分化活性は、２つの標準的試験、即ち、ニトロブルーテトラゾリウム還 元（ＮＢＴ−還元）と食作用分析とに従って、人間の白血病細胞（ＨＬ−６０細 胞）を使用して分析し、第２表に示すように、新規な化合物を、１α、２５−ジ ヒドロキシビタミンＤｓ　　（著しく効力のある分化剤）および１α、２５−ジ ヒドロキシ−２４−エビ−ビタミンＤ３と比較した。

分析は、オストレム（Ｏｓｔｒｅ■）等（ジャーナル・オン・バイオロジカル・ ケミストサイ（Ｊ、　Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅａ＋、　）第２６２巻、第１４１６４− １４１７１頁、１９８７年）およびデル−力（Ｄｅｌｕｃａ）等（米国特許第４ ，７１７．７２１号）により記載されたようにして行なった。第２表に示す結果 は、１α、２５−ジヒドロキシビタミンＤ３標準は、期待通り、著しいＨＬ−６ ０細胞分化活性を有することを示している。１０−”Ｍという低い投与において も、この化合物は、ＮＥＴ−還元と食作用分析の双方において４日の試験期間で 約６４−６７％の分化を生じた。１α、２５−ジヒドロキシ−２４−エビ−ビタ ミンＤ２は活性が幾分低かったが（ｌａ、２５−ジヒドロキシビタミンＤ、標準 より約５倍低い活性である）、この系において著しく強力な活性、例えば、５ｘ ｌＯ−”Ｍで６０％よりも良好な分化をかつ１０−マＭで８０％よりも良好な分 化を示している。これに対し、ｌａ−ヒドロキシ−２４−エビ−ビタミンＤ８は 、殆どまたは全く細胞分化活性を有していない、最高の場合でも、わずかに１６ −２０％の分化が１０−’Ｍの濃度で観察され、１α、２５−ジヒドロキシ−２ ４−エビ−ビタミンＤ、が４０−５０％の分化を示す１−２Ｘ１０−”Ｍの濃度 では、新規な類似体は有意の分化応答性を示さなかった。かくして、ｌａ−ヒド ロキシ−２４−エビ−ビタミンＤ８は、単球に対する前骨髄球の分化を促進する ことにおいては活性は殆どまたは全く有していない、これらの結果は、本発明の 化合物と以前から製造されている１α。

２５−ジヒドロキシ−２４−エビ−ビタミンＤＩとが、生物学的に著しく相違す ることを示している。

！又Ｉ ＨＬ−６０細胞分化における１α−ヒドロキシ−２４−エビ−ビタミンＤ２の活 性分化％ 化合物　　　　　濃度　　ＮＢＴ還元　　食作用１α、２５　　１Ｘ１０°７８ ７±２　　８９±３−ジヒドロ　　　ｌＸｌ０−”　　　６４±２　　６７±３ １α、　２５　　１ｘｌＧ−’　　　８０±３　　８１±３−ジヒドロ　　　５ Ｘ　１Ｇ−’　　　６４±３６２÷３キシ−２４２Ｘ１０−”　　　４ｇ±３４ ９±２−エビービ　　ｌＸｌ０−”　　　３９±３　　４０±３タミンＤよ １α−ヒト　　ｌＸｌ０−’　　　２２±２　　　１６±２０キシ−２５Ｘ１０ −”　　　１４±２９±１４−エビ−２Ｘ　１０−”　　　６±２　　　６±３ ビタミンＤ＊　　　ｌＸｌ０−”　　　４±２　　　４±２このように、上記分 析は、新規な化合物である１α−ヒドロキシ−２４−エビ−ビタミンＤ２が活性 についての明瞭かつ独特のスペクトルを有し、即ち、カルシウム移送を刺激する 上において大きな効力を有するとともに、骨からのカルシウムの流通においては 活性を全くもたず、しかも分化活性は殆ど有していないことを示しており、本発 明の化合物は先行技術の化合物とは明らかに異なる。

従って、この新規な化合物は、有用な治療剤のレパートリ−に価値のあるものと して加わることができることを示しており、腸内のカルシウム移送の特定の刺激 が所望される場合、例えば、骨の質量の損失により特徴づけられる前翼栄養症ま たは骨粗髭症のような病気に有利に適用することができる。

治療目的には、本発明の新規な化合物は、本技術分野において公知の従来の方法 に従って、無害の溶媒の溶液としてまたは適宜の溶媒もしくはキャリヤのエマル ジョン、懸濁液もしくは分散液として、あるいは丸薬、錠剤もしくはカプセルと して、固形のキャリヤとともに配合することができる。この化合物は、注射によ りまたは適宜の殺菌溶液の静脈内注入により、あるいは消化管を介しての液体ま たは固体投与の形態で有利に投与される。治療目的には、−日当たりＩＬＬｇ乃 至５０μｇの１α−ヒドロキシ−２４−エビ−ビタミンＤ２の投与が適当であり 、かかる投与は、処置されるべき病気および本技術分野において広く理解されて いるように被験者の応答に従って調整される。新規な化合物は特有の作用を行な うので、カルシウム移送刺激だけが所望される場合には単独で投与するのに適し 、あるいは（カルシウムの移送の刺激とともに）ある程度の骨のミネラルの流通 が有利であることが判明した場合には、別の活性ビタミンＤ化合物、例えば、１ α−ヒドロキシビタミンＤ２または１α、２５−ジヒドロキシビタミンＤｔの等 級をつけた投与量とともに投与するのに適している。

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Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. １．構造式 ▲数式、化学式、表等があります▼ を有し、上記式において、Ｘ１およびＸ２は水素原子、アシルおよびアルキルシ リルよりなる群から選ばれることを特徴とする化合物。
2. ２．Ｘ１およびＸ２は水素原子を表わすことを特徴とする請求の範囲第１項に記 載の化合物。
3. ３．請求の範囲第１項の化合物を薬学的に許容することができる付形剤とともに 含むことを特徴とする医薬調剤。
4. ４．請求の範囲第２項の化合物を薬学的に許容することができる付形剤とともに 含むことを特徴とする医薬調剤。