JPH0317094A - レベカマイシン類似体の安定な溶液およびその製造 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 技術分野 本発明は抗腫瘍性化合物、８−Ｎ−（ジエチルアミノエ
チル）レベカマイシンの安定な溶液およびそれを形成す
る好ましい方法を指向する。

発明の背景 カネコ（Ｋａｎｅｋｏ）ほかの米国特許第４．　７８５
．　０８５号は式： （ｃＨ２）　．ＮＲＩＲ２ （式中、ｎは２であり、Ｒ１およびＲ２はそれぞれエチ
ルである。） を有する８−Ｎ−（ジエチルアミノエチル〉レベカマイ
シンを含むレベカマイシン類似体を開示している。その
化合物はカネコ（Ｋａｎｅｋｏ）ほかの米国特許第４．
　７８５．　０８５号中に６−（２−ジエチルアミノエ
チル）レベカマイシンとして示され、その製造は該特許
の実施例１中に記載され、実験動物系中の腫瘍の増殖の
抑制に対するその有効性は該特許の表３中に示されでい
る。しかし、該化合物は注射可能な水溶液を形成するよ
うに水に加えたとき十分に水溶性でない。むしろそれは
懸濁液を形成する。

レベカマイシン類似体の溶解度を増加させる酸付加塩お
よび塩基性塩を形成する技術はカネコ（κａｎｅｋｏ）
ほかの９欄、９〜４１行に示唆されている。８−Ｎ−（
ジエチルアミノエチル）レベカマイシンの塩酸塩の製造
はカネコ（Ｋａｎｅｋｏ）ほかの実施例２中に記載され
、そこに６−（２−ジエチルアミノエチル）レベカマイ
シン塩酸塩とじて示され、実験動物系中の腫瘍の増殖の
抑制に対するその有効性は該特許の表３中に示されてい
る。

塩酸塩を含む８−Ｎ−（ジエチルアミノエチル）レベカ
マイシンの酸付加塩に関して遭遇する問題は遊離塩基と
反応した酸１モル当量を含む結晶性酸付加塩が、薬学的
剤形として使用またはそれに希釈する十分な濃度に水に
加えると十分に貯蔵安定である水溶液を形成しないこと
である。むしろ、長期研究は薬学的組成物に対して許容
できると思われる期間、すなわち室温で少くとも２年、
よりも短かい期間中に異常な物理的不安定性を示した。

これらの意外な物理的不安定性にはゲル化、沈殿、濁り
および、結晶性塩の溶液を注射可能溶液としての実際の
使用またはそれを与えるための水による希釈に対し不適
当にする液晶相の形成が含まれる。

この目的は室温で少くとも２年の期間中実質的に化学的
および物理的に安定である注射または注射のための希釈
に対する８−Ｎ−（ジエチルアミノエチル）レベカマイ
シンの水溶液を提供することである。

「安定」という語は以下に、他の方法で限定されないと
き、光から（例えば不透明物質による光の遮蔽により、
または溶液のアンバーガラス容器中の収容により〉保護
したときに室温で歩くとも２年の期間中実質的に化学的
および物理的に安定であることを意味する。「実質的に
化学的に安定」という語は、分析が、初めに溶解した８
−Ｎ（ジエチルアミノエチル）レベカマイシンの少くと
も９５重量％がなお溶液中に存在することを示すことを
意味する。「実質的に物理的に安定」という語はゲル、
沈殿、濁りまたは液晶相、あるいは溶液を注射に適合し
なくする他の粒状物質の形戒が実質的にないことを意味
する。

発明の概要 水中の有用な濃度の８−Ｎ−（ジエチルアミノエチル）
レベカマイシンとともに一定量の特定の酸の使用が前記
濃度の８−Ｎ−（ジエチルアミノエチル）レベカマイシ
ンの安定な水溶液を与えることが見出された。酸はその
ｉモル当量が８−Ｎー（ジエチルアミノエチル）レベカ
マイシンを可溶化する薬学的に許容できる酸である。酸
は４未満のｐ＋＋を与えるために前記モル等価を越える
量で使用される。モル当量量で使用された酸は本発明の
利点を与えない。例えば、水溶液中に配合された結晶性
酸付加塩自体は安定な溶液を与えない。

室温で安定であることのほかに、この溶液は低温例えば
輸送中または貯蔵の間に遭遇する冷凍温度または寒冷条
件における溶解度を増進した。

この安定な溶液は実質的に、 （ａ）　　水、 （ｂ）５０ｍｇ／ｍｌ・水までの濃度における有効投与
量の８−Ｎ−（ジエチルアミノエチル）レベカマイシン
、および （ｃ）　　モル等価の存在が成分（ｂ）を可溶化する酸
であって、前記モル等価を越えて存在して３〜４の範囲
内の安定化ｐＨを与える薬学的に許容できる酸、 からなる。

「有効投与量」という語はこ〜にそれ自体または希釈後
に投与されるときの抗腫瘍有効量を意味するために使用
される。

「モル当量（ｍｏｌａｒ　ｅｑｕｉｖａｌｅｎｔ）　Ｊ
または「モル等価（ｍｏｌａｒ　ｅｑｕｉｖａｌｅｎｃ
ｅ）」という語は８−Ｎ（ジエチルアミノエチル）レベ
カマイシン１．０モルに対し酸１．０モル当量が塩基を
完全に中和するために必要であることを意味する。従っ
て、二塩基酸例えば酒石酸では１０モルの８−Ｎ−（ジ
エチルアミノエチル）レベカマイシンが酸１モル当量と
して０．５モルの酸を必要とし、モル等価を越える酸を
与えるために０．５モルより多い酸を必要とする。

前記の安定な水溶液を調製する好ましい方法は、（ａ）
　　少くとも１■／ｒｎｌ・水溶液の濃度における水中
の８−Ｎ−（ジエチルアミノエチル）レベカマイシンの
懸濁液を形戊する段階、 （８）モル等価の存在が段階（ａ）において形成された
懸濁液中に存在する８−Ｎ−（ジエチルアミノエチル）
レベカマイシンを可溶化する薬学的に許容できる酸を前
記モル等価を越える量に加えて３〜４の範囲内の安定化
ρ０を与える段階、を含む。

詳細な説明 次に、初めに安定な溶液について説明する。

水成分は注射可能な溶液の調製に適する例えば注射用水
、ＵＳＰ，であるべきである。

８−Ｎ−（ジエチルアミノエチル）レベカマイシンは通
常少くともＯ．ｌｍｇ／ｍ１・水の濃度、しばしば少く
ともｌｍｇ／ｍｌ・水の濃度、または少くとも５ｍｇ／
ｍｊ！・水の濃度で存在すべきであり、この濃度が抗腫
瘍有効注射可能濃度の範囲を与えるかまたはそれに希釈
できるからである。上限は酸或分（ｃ）の可溶化効果に
より許される上限であり、８Ｎ−（ジエチルアミンエチ
ル）レベカマイシンとモル当量の前記酸との酸付加塩の
溶解度により決定される。８−Ｎ−（ジエチルアミノエ
チル）レベカマイシンの濃度は溶液が冷蔵条件、通常２
〜８℃、にさらされたときに結晶化が起こるようなもの
であってはならない。５０ｍｇ／ｍｌの一般的上限は毒
性試験から明らかにされる薬物に対する最高意図用量以
上であるように選ばれ、有効投与量への希釈を可能とす
る。

前記のように、酸或分（ｃ）は薬学的に許容できるもの
でなければならない。これは酸戊分（ｃ）が遊離塩基の
毒性に有意に寄与しないものでなければならないことを
意味する。

酸或分（ｃ）は、好ましくはその酸付加塩（遊離塩基と
モル当量の酸とから形成された）が室温で２５ｍｇ／ｍ
ｆより高い水中溶解度を有するするものである。この溶
解度基準を満たす薬学的に許容できる酸或分（ｃ）には
、例えばＬ−　（＋）一酒石酸、Ｄ．　　Ｌ−リンゴ酸
、Ｌ−　（−）−リンゴ酸、クエン酸、Ｌ−　（＋）一
乳酸、ラクトビオン酸、メタンスルホン酸、リン酸、ピ
ログルタミン酸、コハク酸および硫酸が含まれる。これ
らの中で最も好ましい酸はＬ−　（＋）一酒石酸である
。

前記のように、酸或分（ｃ）は或分（ｂ）とのモル等価
を越えて存在して約３〜約４の範囲内のｐＨを与える。

約４の上限は安定なくすなわち物理的に安定な）溶液を
与えるために満たされねばならない。

約３のｐＨ未満の配合物が安定であるけれども、そのよ
うな酸性ｐＨは生理学的受容性に対して望ましくない。

好ましくは戊分（ｃ）は８−Ｎ−（ジエチルアミノエチ
ル）レベカマイシンの濃度が約ｌＯ〜２５ｍｇ／ｍｌ・
水溶液であるときに約３．０〜約３．６の範囲内のｐＨ
を与えるように存在する。

最も好ましくは、酒石酸が成分（ｃ）として、８一Ｎ−
（ジエチルアミンエチル）レベカマイシンと等モル量で
使用される。８−Ｎ−（ジエチルアミノエチル）レベカ
マイシンが２５ｍｇ／ｍ！・水溶液の濃度で存在する場
合にこれが３．２のｐＨを与える。

よく知られているように、この組或物の水による希釈は
中性の方へ溶液ｐＨの上昇を生ずる。純度の差が同一濃
度の活性にもか５わらず小さいｐＨ変動を生ずることに
注意すべきである。

前記のように、この溶液を調製する好ましい方法は水中
の８−Ｎ−（ジエチルアミンエチル）レベカマイシンの
懸濁液を形成し、次いで酸戊分を加えて必要なｐＨを与
えることである。これは次いで、例えば室温で５〜ｌ５
時間かくはんされる。

わずかの濁りは濾過により容易に除去される。

あるいは、この溶液を、初めに酸を水に、次いで８−Ｎ
−　（ジエチルアミノエチル）レベカマイシン活性戊分
を加えることにより、または酸および活性或分を容器に
加え、次いで水を加えることにより調製することができ
る。

公知の方法例えば加熱、強いかくはん、音波処理などを
用いて溶解の速度を増進させることができる。

この溶液はまた酸付加塩〔８−Ｎ−（ジエチルアミノエ
チル）レベカマイシンの必要な初期溶解度が与えられる
ように酸から形成した〕を水に加え、次いで酸付加塩中
に存在すると同様の酸または或分（ｃ）に対する基準を
満たす他の酸を用いてｐＨを３〜４の範囲に調整するこ
とにより容易に調製される。

悪性＠瘍に冒された噛乳動物宿主、例えば実験動物宿主
の治療に対する治療使用において、本発明の溶液は腫瘍
の増殖の抑制に有効な量、すなわち腫瘍増殖抑制投薬量
で投与すべきである。一般に、腫瘍増殖抑制量は約０．
１〜約１　０　０　ｍｇ／　ｋｇ・動物体重毎日の範囲
内であろう。化合物の実際の好ましい投与量が治療され
る動物の容態、腫瘍の場所、腫瘍の型、および投与の経
路の要件により広く変動することを理解すべきである。

抗腫瘍剤の作用を修飾する多くの因子が、例えば年令、
体重および性、食事、投与の時間、排出の速度、宿主の
状態並びに疾患の重さを含めて本発明に関連する当業者
により考慮されよう。一定の組の条件に対する最適投与
（または適用）レートは普通の投与量決定試験を用いて
当業者により容易に確認されることができる。

この溶液は、注射可能量が必要な投与量を与えればそれ
自体を注射に使用でき、または注射可能量が過度に高い
投与量を与えれば注射のために希釈することができる。

希釈は米国局方注射用水、生理食塩水、５％デキストロ
ース溶液などで容易に行なわれる。

注射可能濃度は通常遊離塩基毎一・水に関して０．　１
　〜５　０　ｍｇ／ｍｌの範囲内である。

次の実施例は本発明の代表的態様を示すために与えられ
、範囲の制限を解すべきではない。

実施例工 １２ｍｇ／ｍｌ（遊離塩基毎一・水）溶液を遊離塩基す
なわち８−Ｎ−（ジエチルアミノエチル）レベカマイシ
ン（９６．２％純度）　２　４　９．　２ｍｇ，　Ｌ　
−（＋）一酒石酸５４，Ｏ■および注射用無菌水２〇一
から次のように調製しな：遊離塩基を水中に懸濁させた
。次いで酸を加えた。次に光から保護するためアルミニ
ウム箔で包んだフリントガラスバイアル中でかくはんを
室温で一夜行なった。生じたわずかに濁った溶液を次に
０．２ミクロンアクロディスク（Ａｃｒｏｄｉｓｃ）　
Ｃ　Ｒフィルターに通して濾過すると透明黄色溶液が生
じた。配合は遊離塩基対酸１１モル比に相当する。濾過
した溶液のｐｌ｛は３，６であった。

遊離塩基５　２　０．　１　５■および酒石酸１１２．
６■を用いたことを除いて前記と同様に溶液を作ると、
２　５　ｍｇ／ｍｊ’　（遊離塩基毎一・水）を含み、
遊離塩基および酒石酸１：１のモル比で含み、３．２の
ｐＨを有する溶液が調製される。

実施例■ １０ｍｇ／ｍｌ（遊離塩基毎一・水）溶液を８一Ｎ−（
ジエチルアミノエチル）レベカマイシン（９６％純度）
　　１０．４　０ｇ，　Ｌ　−　（＋）一酒石酸２．　
２　６　ｇおよびＵＳＰ注射用無菌水適量１（１１）０
一までから次のように調製した：８−Ｎ−（ジエチルア
ミノエチル）レベカマイシンを注射用水の一部（必要量
の９０％）中に懸濁させた。次いでＬ−（＋）一酒石酸
を加え、懸濁液を一夜かくはんするとわずかに濁った溶
液が形成された。

次いで注射用水を１（１１）０ｄまで適量加え、溶液を
ゲルマン・カプセル・フィルター（Ｇｅｌｍａｎ　Ｃａ
ｐｓｕｌｅＦｉｌｔｅｒ）　（Ｐ／　Ｎ　１　２　１　
２　０　）を通して窒素圧下に無菌的に濾過し、無菌受
器中に捕集した。溶液をｕｓｐｒ型フリントガラスアン
プル中へ無菌的に満たした（１０ｍｌ／アンプル）。ア
ンプルを無菌窒素ガスでフラッシュし、密封した。溶液
は遊離塩基および酒石酸を１：ｌのモル比で含み、３．
５のｐＨを有した。

５６℃までの温度における４週間貯蔵による試験は物理
的または化学的変化を与えず、２〜３０℃で光から保護
して貯蔵したときに少くとも２年の推定貯蔵寿命を示し
た。

静脈内注入による投与のために得られた溶液を、例えば
１　ｍｇ遊離塩基毎一・水に米国局方注射用水または５
％デキストロース溶液で希釈することができる。希釈し
た溶液は通常室光条件下で２４時間物理的に安定である
と認められた。

実施例■ ８−Ｎ−（ジエチルアミノエチル）レベカマイシン　２
５ｍｇ＠一・水を含む溶液を次に示すように酸および酸
対塩基のモル比で調製した。これを光から保護して５６
℃で４週間貯蔵し、次の結果が得られた： Ｌ−　（＋）一酒石酸 （１酸：１塩基） しー（＋）一酒石酸 （ｌ酸：２塩基〉 Ｌ−　（−）−リンゴ　酸 （ｌ，７酸：１塩基） Ｌ−（−）−リンゴ　酸 （ｌ酸：ｌ塩基） リ　　　ン　　酸　　　　　　３．５ （１．２酸：■塩基） リ　　　ン　　酸　　　　　　４．５ （｛酸：Ｉ塩基冫 しー（＋）一乳酸　　　３．６ （２，５酸；１塩基） コハク酸　　　　３．５ （４酸：ｌ塩基） ラクトビ才ン酸　３．３ （３酸：１塩基） ５．　１　　ゲルを形戊 ３．２ ３．４ ３．８　　沈殿を形成 変化が認められず 変化が認められず 変化が認められず 濁った溶液を形成 変化が認められず 変化が認められず 変化が認められず ９日 分析せず １（１１） ９４ ９９ ９８ １（１１） ９９ １０２ 前記は物理的安定性の取得におけるｐＨの臨界性を示す
。前記試験における結果の物理的変化なしは２〜３０℃
で光から保護して貯蔵したときに少くとも２年間の物理
的安定性を予想させる。

前記溶液はまた１週間の間５回〜２０℃と室温との間の
サイクリングによる凍結／解凍試験で試験した。前記の
物理的に安定であると認められた溶液はまたこの試験で
物理的に安定であり、前記溶液が有害な結果なく冷却ま
たは凍結さえさせることができる二とを示した。

実施例■ 酒石酸で調製した８−Ｎ−（ジエチルアミンエチル）レ
ベカマイシンをカンサー・ケモセラピー・レポー｝　（
［：ａｎｃｅｒ　Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．Ｒｅｐｔｓ），
　　３．　　１〜１０３　（１９７２）中のゲラン（Ｇ
ｅｒａｎ）ほかの報告に従って移植マウス白血病Ｐ−３
　８　８に対する抗腫瘍活性について試験した。スクリ
ーニング操作にはＩＸ１０８［水細胞で腹腔内に感染さ
せたＣＤＦ　１めすマウス（１８〜２２グラム）に対す
る試験化合物の腹腔内（ＩＰ）、およびＩＸＩＯ６腹水
細胞で静脈内に感染したＣＤＦ　１めすマウス（１８〜
２２グラム）に対する静脈内（ＩＶ）の投与が含まれた
。薬物療法は第１日（移植の日）に開始し、５連続日に
対する毎日１注射からなった。２５■の遊離塩基毎一・
水の濃度および遊離塩基と１：■モル比の酒石酸で８−
Ｎ−（ジエチルアミノエチル）レベカマイシンの溶液を
用い、ＩＰ注射に対し０．　５　ｍｌおよびＩＶ注射に
対し０．　２社中に含まれるように投与量を希釈により
調製し、下記に「発明」として示される。下記の結果中
、ＭＳＴは中央生存時間を日数で表わし：％Ｔ／Ｃは対
照動物の中央生存時間で割った試験動物の中央生存時間
×１（１１）であり．ＡＷＣは第５日における平均体重
変化、ダラム単位である。マイトマイシンＣが比較のた
めに含まれる。ＩＰ試験に対する結果は次のとおりであ
った： マイトマイシン 発 明 対 照 Ｃ ２０．５ ２０，５ １５，５ １６，５ ｌ５，０ １０ ＴＶ試験に対する結果は次のとおりであったマイトマイ
シン 発 明 対 照 Ｃ ■２．０ １１．０ ９．５ １２．５ １２．０ １１．０ １０．０ ７．５ 上記は本発明の酒石酸含有溶液が抗腫瘍活性を有するこ
とを示す。

変形は当業者に明らかであろう。

従って本発明 の範囲は特許請求の範囲により規定されるものである。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）実質的に （ａ）水、 （ｂ）５０ｍｇ／ｍｌ・水までの濃度における有効投与
   量の８−Ｎ−（ジエチルアミノエチル）レベカマイシン
   、 （ｃ）モル等価の存在が成分（ｂ）を可溶化する酸であ
   って、前記モル等価を越えて存在して３〜４の範囲内の
   安定化ｐＨを与える薬学的に許容できる酸、 からなる安定な溶液。 （２）酸が３．０〜３．６の範囲内のｐＨを与えるよう
   に添加される、請求項（１）記載の安定な溶液。 （３）酸が、その８−Ｎ−（ジエチルアミノエチル）レ
   ベカマイシンとの酸付加塩が室温で２５ｍｇ／ｍｌより
   大きい水中溶解度を有するような酸である、請求項（２
   ）記載の安定な溶液。 （４）酸がＬ−（＋）−酒石酸、Ｄ，Ｌ−リンゴ酸、Ｌ
   −（−）−リンゴ酸、クエン酸、Ｌ−（＋）−乳酸、ラ
   クトビオン酸、メタンスルホン酸、リン酸、ピログルタ
   ミン酸、コハク酸および硫酸からなる群から選ばれる、
   請求項（３）記載の安定な溶液。 （５）酸がＬ−（＋）−酒石酸、Ｌ−（−）−リンゴ酸
   、リン酸、Ｌ−（＋）−乳酸、コハク酸およびラクトビ
   オン酸からなる群から選ばれる、請求項（４）記載の安
   定な溶液。（６）酸がＬ−（＋）−酒石酸である、請求
   項（５）記載の安定な溶液。 （７）Ｌ−（＋）−酒石酸および８−Ｎ−（ジエチルア
   ミノエチル）レベカマイシンが等モル量で存在する、請
   求項（６）記載の安定な溶液。 （８）８−Ｎ−（ジエチルアミノエチル）レベカマイシ
   ンが１０ｍｇ／ｍｌ・水の濃度で存在する、請求項（７
   ）記載の安定な溶液。 （９）８−Ｎ−（ジエチルアミノエチル）レベカマイシ
   ンが２５ｍｇ／ｍｌ・水の濃度で存在する、請求項（７
   ）記載の安定な溶液。 （１０）８−Ｎ−（ジエチルアミノエチル）レベカマイ
   シンの安定な水溶液を調製する方法であって、（ａ）少
   くとも１ｍｇ／ｍｌ・水の濃度における水中の８−Ｎ−
   （ジエチルアミノエチル）レベカマイシンの懸濁液を形
   成する段階、 （ｂ）モル等価の存在が段階（ａ）において形成された
   懸濁液中に存在する８−Ｎ−（ジエチルアミノエチル）
   レベカマイシンを可溶化する薬学的に許容できる酸を前
   記モル等価を越える量に加えて３〜４の範囲内の安定化
   ｐＨを与える段階、 を含む方法。 （１１）段階（ｂ）において酸が３．０〜３．６のｐＨ
   範囲を与えるように添加される、請求項（１０）記載の
   方法。 （１２）酸がＬ−（＋）−酒石酸である、請求項（１１
   ）記載の方法。 （１３）酸が８−Ｎ−（ジエチルアミノエチル）レベカ
   マイシンに等モル量に添加される、請求項（１２）記載
   の方法。 （１４）段階（ａ）における８−Ｎ−（ジエチルアミノ
   エチル）レベカマイシンの濃度が１０ｍｇ／ｍｌである
   、請求項（１３）記載の方法。 （１５）段階（ａ）における８−Ｎ−（ジエチルアミノ
   エチル）レベカマイシンの濃度が２５ｍｇ／ｍｌである
   、請求項（１３）記載の方法。