JPH01252603A

JPH01252603A - ５−フルオロウラシル担持体

Info

Publication number: JPH01252603A
Application number: JP7818088A
Authority: JP
Inventors: Tatsuro Ouchi; 辰郎大内
Original assignee: Ihara Chemical Industry Co Ltd
Current assignee: Ihara Chemical Industry Co Ltd
Priority date: 1988-04-01
Filing date: 1988-04-01
Publication date: 1989-10-09

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】（産業上の利用分野）本発明は、脱アセチル化グリコールキチンの低級アルキ
レン基を介したアミド結合による５−フルオロウラシル
担持体並びにその製造方法及び該担持体からなる抗腫瘍
剤に関する。

（従来の技術）キチンは、甲殻類や菌類の外骨格を形成する組織多糖で
セルロースと非常に良く似た化学構造及び物性を持ち、
地球上では非常に豊富な資源である。このキチンは強固
な結晶構造を持つため、溶解性や反応性に欠けるか、キ
チンを強アルカリ条件下で脱アセチル化したキトサンは
塩を作ると木溶性となり、またキチンをエチレンオキサ
イドでヒドロキシエチル化したグリコール化キチンも水
溶性となり、化学修飾が容易になる。

これらキチン及びその誘導体は、一般に毒性が低く、生
体内分解吸収性であるなどバイオマテリアルに適した性
質を数多く備えた高分子物質である。これらの中でも特
に部分Ｎ−アセチル化キチン又は部分Ｎ−アセチル化キ
トサンは白血病Ｌ　１２１０脱水ガン細胞を選択的に凝
集させ、その増殖を阻害し、また、キチンの水溶性低級
同族体のＮ−アセチルキトオリゴｖｉ（特にヘキサオー
ス）は強い免疫賦活抗腫瘍活性を示すことが近年報告さ
れ、キチン、キトサンが抗Ｉｌ！ｉ瘍活性を有する多糖
として脚光を浴びつつある（例えば特゛聞閉５９−２７
８２６号、同６２−１２３１２３号）、このように、キ
チン、キトサンは低毒性、生体内分解吸収性でＪｌｉｉ
σ細胞への選択的集積部な有しているので、見方を変え
れば、これらは高分子医薬のキャリアーとしての条件を
満たしていると言える。

一方、５−フルオロウラシル（５ＦＵ）は、代謝拮抗阻
害剤として働く抗腫瘍剤で、強い抗腫瘍活性を有するが
同時に強い毒性があり、その副作用抑制が問題となって
いる。

（発明が解決しようとする課題）したかって本発明の目的はこのような抗腫瘍活性、低毒
性、生体内分解吸収性及び腫瘍細胞への選択的束ｆｆ１
ｆＥを有するキチン、キトサン化合物と抗腫瘍剤として
有用な５−ＦＵとを組合わせた新規な化合物を提供する
ことにある。

（課題を解決するための手段）本発明者は、５ＦＵの副作用の軽減、薬効の持続性、タ
ーゲツティング、活性の増大を期待して、キチン誘導体
への共有結合による５ＦＵの担持を行い、高分子プロト
ラグ（ＭａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌａｒＰｒｏｄｒｕｇ）
の観点から、５ＦＵ担持の結合様式、スペイサ−の有無
、グリコール化するか否かか、抗腫瘍活性に及ぼす影響
について検討し、この検討過程において、下記式（Ｉ）
で表わされる脱アセチル化グリコールキチンのアルキレ
ン基を介したアミド結合による５−フルオロウラシル担
持体が、５ＦＵの放出性能が高く、かつ、優れた抗腫瘍
活性を示すことを見いだし、本発明をなすに至った。

すなわち、本発明は（１）式（１）で表わされる５−フルオロウラシル１ｕ
持体、（式中、ｎは１００以上の整数であり、好ましくＬ！：
２．５ｘ　１０２〜４．８ｘ　ｌＯＺであＺ＋。）（２
）式（Ｉ）で表わされる請求項１記載の５−フルオロウ
ラシル担持体を含有してなる抗腫瘍剤。

（３）キチンをアルカリ処理してアルカリキチンとし、
アルカリキチンにエチレンオキサイドを反応させて、部
分脱アセチル化グリコールキチンを得、次いで得られた
部分脱アセチル化グリコールキチンと１−β−カルボキ
シエチル−５−フルオロウラシルとを反応させることを
特徴とする式（Ｉ）て表わされる請求項１記載の５−フ
ルオロウラシル担持体の製造方法を提供するものである。

この５ＦＵ担持体は、そのままの形で腫瘍細胞に取り込
まれ、そこで５ＦＵがリリースして、５ＦＵとして作用
し、キャリアーの部分脱アセチル化゛グリコールキチン
は、目的達成後分解・吸収される。

したかってその投与量は５ＦＵ換算で従来の５ＦＵとほ
ぼ同様になるようにするのか好ましい。

（実施例）次に本発明を実施例に基づきさらに詳細に説明する。

実施例１（ｉ）１−β−カルボキシエチル−５−フルオロウラシ
ルの合成５ＦＵ残基として用いた１−β−カルボキシエ２を経て
以下のように合成した。

エタノール４２８ｍ１に５ＦＵ１　１０ｇ　　（７７ｍ
ｍｏｌ）と金属ナトリウム０．０８６ｇを加えて水素の
発生か見られなくなってからエチルアクリレート９　、
７　ｍ　（８９ｍｍｏｌ）加えて反応系が透明になるま
で還流攪拌を行った。冷却後、減圧下に濃縮し、少量の
エタノールで再結晶することにより、５ＦＵへのエチル
アクリレートのマイケル付加物２を得た。収率８２％、
融点１２７〜１２８℃。

続いてこの２　１４　ｇ　（６９ｆｍｏｌ）を３Ｎ　　
ＨＣ立１４ｏｍｌ中、６０°Ｃて６時間加水分解させた
後。

塩酸を除去し、水から再結晶することにより、無色針状
結晶の３を得た。収率９１％、融点１８６〜１８７℃。

（ｉｉ）脱アセチル化グリコールキチンの合成Ｒ２二〇
Ｈ２ＱＣ）（２Ｃ）（２０ｆ−１重版のキチン４　　Ｌ
ｏｇを２００ｍ１の４５重量％ＮａＯＨ水溶液中に投入
して２時間攪拌することにより、キチンは著しく膨潤し
てアルカリキチン５となった。これを濾過、圧搾するこ
とにより過剰のアルカリを除去した。このアルカリキチ
ンを１見の三ロフラスコに入れ、２００ｇの氷を加えて
、羽根付き撹拌棒で十分に攪拌し、氷浴下で、ＮａＯＨ
６５ｇを水３９０ｇに溶解したアルカリ水溶液をこの系
にさらに加えた。この時系のＮａＯＨ１度は約１８重量
％であった。氷が系内に存在する間にバブルしながらエ
チレンオキサイドをキチンの構成単位のモル数の８〜ｌ
Ｏ倍と大過剰に加えた。反応が進行するにつれて白濁し
ていた系は透明となり、粘度が増加した。反応後透明に
なった粘性溶液をメタノール／アセトン（９：１容量比
）に投入し、再沈殿させた。水可溶部の再沈を繰返すこ
とにより十分に精製した後、凍結乾燥して部分脱アセチ
ル化グリコールキチン６を得た。

アルカリ処理時間、エチレンオキサイドのバブリング速
度など反応条件を変えることにより、６として次の第１
表の試料を調製した。

第１表注）ａ：グルコラミン・ユニット当りのグリコール化度
（％）で、元素分析値と脱アセチル化度から算出した。

ｂ：脱アセチル化度（％）で、試料を０．５容量％−酢
酸水溶液に溶解し、これをｌ／４００　Ｎ−ポリビニル
硫酸カリウム水溶液で滴定することにより算出した。

ｃ；Ｐｎで、粘度をΔ１４定して次式より算出した。

（ｉｉｉ）式（Ｉ）の化合物の合成３　３．６ｇ　　（１８ｍｍｏｌ）とＮ−ヒトロキシサ
クシンイミト（ｔｌＯＮｓｕ）　２．　１　ｇ　　（１
９ｍｍｏｌ）を１００摺のテトラヒドロフラン（ＴＩＩ
Ｆ）に溶解する。溶液か透明になってから、系を氷で冷
やしながら。

Ｎ、Ｎ′−ジシクロへキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）
３　、９　ｇ　（１９ｍｍｏｌ）を加えて２４時間攪拌
し、精製する尿素を除くことにより、３を活性化エステ
ルとし、１．５ｇの部分アセチル化グリコ−キチン６−
１を４００摺の水に溶かした水溶液をこのＴＨＦ溶液に
加えて、不均一下で、５０°Ｃで５日間攪拌した０反応
終了後、新たに生じた尿素をろ別し、ろ液を減圧ａ縮し
、その残渣をメタノール／アセトン（９：１容量比）に
投入することにより沈澱として目的の化合物（Ｉ）−１
を得た。

グルコサン・ユニット当りの５ＦＵの導入率（Ｄ５ＦＵ
）は、ｌ−β−カルボキシエチル５ＦＵの入”２０＝２
７０ｎｍ、６”２０＝９１００をｍａｘ　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　ｗａｘ基準にして、グ
リコールキチンへ５ＦＵ残渣か担持したままの形で、島
津製作所製ＵＶ−２４０型分光光度計を使用してＵｖス
ペクトルを測って算出した。

試料（１）−１グルコサミン・ユニット当、りの５ＦＵの導入率（Ｄ５
ＦＵ）＝７．７％グルコサミン・ユニット当りのグリコール化度＝７８％
、脱アセチル化度＝４２％、百ｎ＝３２００、水に可溶
。

実施例２部分脱アセチル化グリコールキチンの試料６−２を用い
て（ｉｉ）と全く同じ条件下で６−２と３とのカップリ
ング反応を行い、（Ｉ）−２を得た。

試料（Ｉ）−２グルコサミン・ユニット当りの５ＦＵの導入率（Ｄ５Ｆ
Ｕ）＝８．９％グルコサミン・ユニット当りのグリコール化度＝７８％
、脱アセチル化度＝６１％、Ｐｎ＝２５００、水に可溶
。

実施例３（抗腫瘍活性試験）ＣＤＦ、マウス（５退会）にＰ−３８８１ｙ＠ｐｈｏｃ
ｙｔｔｃ　１ｅｕｋｅｓ＋ｉａ　（白血病）細胞を１×
１０６個／マウスを腹腔内投与し、所定量の式（１）の
ポリマーを翌日と５日目に腹腔内投与した。

実験群には、ｌ投与レベルに対して各６匹を、対照群に
は３０匹を用いた。抗腫瘍活性の評価は、次式で第２表
に表わされる生存日数比率により行い、結果を第２表に
示す。

第　２　表（抗腫瘍活性）なお、Ｔ／Ｃの値が１２０以上の場合に、その試料は活
性があると評価される。

［急性毒性試験］式（Ｉ）の化合物をマウスに投与したが、投与量が８０
０　ｍｇ／　ｋｇまでは、マウスの急激な体重減少は見
られず、急性毒性はないと判断できる。

従つて、ＬＤ５０もｓ　ＯＯｍｇ／　ｋｇ以上であると
言える。

［５ＦＵの放出挙動試験］０．０ＩＮ−ＮａＯＨ１０，Ｉ　Ｎ−ＨＣｕ、生理食塩
水あるいはリン酸緩衝液中、３７°Ｃで本発明の化合物
（Ｉ）の加水分解を行った結果、このようなｉｎ　ｖｊ
ｔｒｏにおいては、加水分解を受は易いことが分った。

化合物（Ｉ）の化合物が加水分解を受けると、１−β−
カルボキシエチル５ＦＵがまずリリースしてくることが
分った。

０３、明の効果）本発明の５ＦＵ担持体は、５ＦＵの放出性か優れ、抗腫
瘍活性を示し、毒性の少ない有用な化合物である。

Claims

【特許請求の範囲】

（１）式（ I ）で表わされる５−フルオロウラシル担
持体。 ▲数式、化学式、表等があります▼・・・（ I ）（式中、ｎは１００以上の整数である。）
（２）式（ I ）で表わされる請求項１記載の５−フル
オロウラシル担持体を含有してなる抗腫瘍剤。
（３）キチンをアルカリ処理してアルカリキチンとし、
アルカリキチンにエチレンオキサイドを反応させて、部
分脱アセチル化グリコールキチンを得、次いで得られた
部分脱アセチル化グリコールキチンと１−β−カルボキ
シエチル−５−フルオロウラシルとを反応させることを
特徴とする式（ I ）で表わされる請求項１記載の５−
フルオロウラシル担持体の製造方法。