JPH01242530A - 脂肪肝抑制物質 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 「産業上の利用分野」 本発明は、脂肪肝に伴う種々の肝臓機能の異常を抑制す
る脂肪肝抑制物質に関する。

「従来の技術」 脂肪肝は、肝細胞内に脂肪が異常に蓄積した状態をいい
、この際、蓄積する脂肪は主として中性脂肪である。脂
肪肝を惹起する要因は極めて多数知られているが、その
発生機序には共通の要因が関与している。すなわち、肝
臓は、脂肪の代謝・転送に重要な役割を果たしており、
正常状態では肝臓での脂肪の出納は一定の平衡状態に保
たれている。肝臓の中性脂肪は、食事に由来するカイロ
ミクロン中の脂肪酸、末梢脂肪組織より動員されたｆ１
１離脂肪酸および新しく肝臓で合成された脂肪酸に由来
している。このように新しく合成されたかまたは肝臓に
転送されてきた脂肪酸の一部は肝臓で酸化分解されるが
、一部は肝臓のマイクロシームでエステル化されて中性
脂肪となり、蛋白と結合してリポ蛋白の形で血流中に分
泌される。

中性脂肪の代謝回転は他の脂肪に比べて早く、静脈内に
投与された標識遊離脂肪酸は２０分ですでに血流中のリ
ポ蛋白中に見いだされる。このように肝中性脂肪は比較
的速い代謝・回転をしながら平衡状態に保たれているが
、この平衡を乱す、すなわち肝臓における中性脂肪の生
成量と利用量の間に不拘１９１が生ずるような障害が加
わると、脂肪肝が発生する。

脂肪肝は、アルコールの過剰摂取、肥満、糖尿病によっ
て起こることが多（、脂肪の蓄積に伴って、食欲不振、
体重減少°、疲労などを訴える。また、脂肪肝は、脂肪
性肝硬変などの肝障害発生の初期症状としても現われる
ものである。また、ラットなどの動物実験において、エ
チオニン、四塩化炭素、オロト酸などを投与して、脂肪
肝を人為的に作り出し、脂肪肝の発生機序を探ったり、
脂肪肝の抑制方法を検討したりする試みもなされている
。

しかしながら、脂肪肝の治療としては１例えばアルコー
ルを控えたり、食事に気をつけたりする、いわゆる食事
療法が主流となっており、これを積極的に治使する方法
は、未だ見いだされていないのが現状である。

また１本発明者らは、穀類、豆類の外皮から（９られた
＆ｆｌの食物繊維について、その生理活性効果を研究し
、これらが肝機能を活性化する作用を有していることを
見いだし、既に特許出願している（特開昭６２−２０１
６２０号、特願昭６１−２８２９１３号参照）。これら
は、ラットにＤ−ガラクトサミン（肝障害を人為的に発
現させる物′ｔ１）を投与した場合の実験において、血
液中のＧＯＴ、ＧＰＴの上昇を抑制する作用を有してい
る。

しかしながら、肝臓疾患は、実際には多種類のものがあ
り、それぞれ発現機構が異なっているので、これらの食
物繊維あるいはそれから得られたヘミセルロースが、特
にどの肝臓疾患に効果があるのかはよくわかっていなか
った。また、穀類、豆類の外皮から得られた各種の食物
繊維の全てが同様な効果を示すのか、あるいはこれらの
中でも特に優れた効果を示すものがあるのかという点も
不明であった。

［発明が解決しようとする課題Ｊ 本発明は、上記従来技術の問題点に２監みてなされたも
のであり、その目的は、人体に対して全（安全で、脂肪
肝を積極的に抑制する作用を有する物質を提供すること
にある。

「課題を解決するための手段」 本発明による脂肪肝抑制物質は、トウモロコシフスマま
たは小麦フスマより得られたヘミセルロースを主成分と
するものである。

また、本発明による脂肪肝抑制物質は、好ましくは、ト
ウモロコシフスマまたは小麦フスマより澱粉質、蛋白質
等を除去し、この残部をアルカリ抽出して（１られたも
のからなる。

「作用」 本発明者らは、ラットにオロト酸を投与して人為的に脂
肪肝を起こさせる実験において、各櫓の食物繊維および
それらから得られたヘミセルロースの脂肪肝抑制作用を
検討した結果、特にトウモロコシフスマまたは小麦フス
マから得られたヘミセルロースが優れた脂肪肝抑制作用
を有していることを見いだし本発明を完成するに至った
ものである。

この場合１人間の脂肪肝は、オロト酸によって起こるも
のではないが、前述したように脂肪肝の発生機序には共
通の要因が関与しているので、上記実験によって抑制効
果が認められれば１人間の脂肪肝の抑制にも優れた効果
が期待できる。

そして、トウモロコシフスマまたは小麦フスマから得ら
れたヘミセルロースは、人体に全く安全な物質であり、
医薬、食品添加物あるいは飲食品として安心して摂取す
ることができる。

「発明の好ましい態様」 本発明の脂肪肝抑制物質は、トウモロコシフスマまたは
小麦フスマから得られたヘミセルロースを主成分とする
ものであればよく、ヘミセルロースの抽出方法は、いか
なる方法を採用してもよい。例えば、アルカリまたは酸
による抽出、エクストルーダやオートクレーブによる加
圧、熱水抽出、セルラーゼ等の酵素剤を用いた抽出等、
あるいはこれらを適宜組合わせたいかなる方法を採用す
ることもできる。

しかし１本発明の好ましい態様においては、トウモロコ
シフスマまたは小麦フスマより澱粉質。

蛋白質等を除去し、この残部をアルカリ抽出して（１ら
れたものが採用される。

本発明の脂肪肝抑制物質の好ましい製造方法を挙げると
次の通りである。

トウモロコシフスマまたは小麦フスマをそのままアルカ
リ抽出してヘミセルロースに富んだ成分を１ワることも
できるが、ヘミセルロースをより高純度に得るためには
、トウモロコシフスマまたは小麦フスマから澱粉質、蛋
白質、さらに必要に応じて脂質、無機質等を除去した後
、アルカリ抽出することが好ましい。

トウモロコシフスマまたは小麦フスマから澱粉質、蛋白
質、さらに必要に応じて脂質、無機質等を除去する方法
としては、酵素処理、化学的処理、物理的処理のいずれ
を採用してもよく、あるいはこれらを適宜組合せてもよ
い６酵素処理は、例えばα−アミラーゼ、グルコアミラ
ーゼ等の澱粉分解酵素、プロテアーゼ等の蛋白分解酵素
、リパーゼ等の脂質分解酵素、セルラーゼ等の繊維素分
解酵素を、ｐＨ３〜９、温度３０〜１００°Ｃの条件下
に添加作用させて処理することにより行なわれる。また
、化学的処理は、例えばトウモロコシフスマまたは小麦
フスマに鉱酸、有機酸の水溶液を添加し、ｐＨ２〜５の
条件下で加熱するか、または食品用界面活性剤を添加し
、ｐ　Ｈ３〜８の条件下で熱処理することにより行なわ
れる。さらに、物理的処理は、例えばトウモロコシフス
マまたは小麦フスマをホモジナイザー、ハンマーミル等
の粉砕機で粉砕した後、篩別することにより行なわれる
。

こうしてトウモロコシフスマまたは小麦フスマを処理し
た後、アルカリ抽出を行なう。アルカリ抽出は、例えば
水酸化ナトリウム水溶液などのアルカリ水溶液を添加し
て混合し、非セルロース・性多糖類の区分を溶出させる
ことによって行なわれる。本発明の脂肪肝抑制物質は、
このアルカリ抽出液を中和して未精製のまま得ることも
できるが、この中和物をさらに以下のような操作で精製
して（することもできる。すなわち、中和によって沈殿
した蛋白質を遠心分離などの手段で分離除去し、さらに
必要に応じてその上澄液を透析、イオン交換樹脂処理、
イオン交換膜処理、限外濾過膜処理、アルコール精製、
濾材処理等の単独または適宜組合せで処理することによ
り、任意の純度のヘミセルロース成分を含む本発明の脂
肪肝抑制物質を得ることかで′きる。

上記のようにして得られた本発明の脂肪肝抑制物質は、
ヘミセルロースを主成分とし、これに若干のリグニン、
セルロース、灰分等が含有されたものからなっている。

そして１本発明の脂肪肝抑制物質は、抽出液、ａ縮液あ
るいは乾燥粉末などとして製品化できる。乾燥粉末とし
た場合でも、非常に水に溶けやす（、均質な溶液となり
やすいので、調製が容易である。したかって、そのまま
健康飲食品、医薬品として利用可能であり、また、飲食
品に少量添加することにより、飲食品の風味、食感を害
することな（生理活性を付与することができる。

「発明の実施例」 （実験方法） （１）飼料 飼料組成を表１に示す。標準飼料は、糖質源としてショ
糖、蛋白質源としてミルクカゼイン、脂質としてコーン
油、ミネラル混合およびビタンミン混合として１ｌａｒ
ｐｅｒの配合を用いた。標準群以外のものには、全てオ
ロト酸１％を添加した。また、標準群と対照群以外のも
のには、それぞれ表記した食物繊維を添加した。なお、
オロト酸や食物繊維を添加した群においては、その代わ
りにショ糖の一部を減らしている。ここで使用した食物
繊維は、それぞれ次のようにして調製したものである。

■小麦フスマ（硬質系、日清製粉（…製）小麦フスマ（
硬質系５日清製粉■製）を、蒸留水を用いてミキサー中
で攪拌、洗浄し、残留農薬を除去すると共にＮＤＦ値を
８４７％に高めたもので、３０メツシユに篩別して用い
た。飼料にはＮＤＦとして５％相当１を添加した。

■トウモロコシフスマ トウモロコシをウェットミリングして得られたトウモロ
コシフスマの水分散液（固形分１０％）をホモジナイザ
ーにより１分間処理した後、４８メツシ１の篩を用いて
水洗、篩別し、篩上の残渣を回収し乾燥粉末化したもの
を用いた。飼料にはＮＤＦとして５％相当ゴを添加した
。

■トウモロコシヘミセルロース 上記■で調製したトウモロコシフスマ１００ｇを５１２
容の三角フラスコに採る。グルコアミラーゼ（長潮産業
■製、　　ｌ　Ｘ　１０’　ＧＵＮ／ｇ１５　ｇを蒸留
水４ａに溶かして濾紙で濾過し、濾液に０．２Ｍ酢酸塩
緩衝液（ＰＨ４，８）ＩＩ２を加えて調製したグルコア
ミラーゼ溶液５２およびトルエン数滴を上記コーンファ
イバに加えて４０℃で２４時間保ったにれをガラスフィ
ルター（１５１Ｇ３）で濾過し、残渣を水で洗浄した後
、２β容三角フラスコに移し、０．５Ｎ水酸化ナトリウ
ム液１ｅを加え、容器内に窒素ガスを充満させ、ゴム栓
で密栓して室温で１８時時間上う（１３０ストロ一ク／
分）することにより、アルカリ可溶の非セルロース性多
ｒｆ？ｉ類区分の抽出を行なった。このものを遠心分離
（３０００ｒｐｍ、１０分）して液部氷酢酸で中和し、
トリクロール酢酸を最終潤度が７％になるように添加し
て蛋白質を沈殿させた。

沈殿物を遠心分離（５０００ｒｐｍ、１０分）して除去
し、得られた分離液（約７００ｍＩ２．）に水を加えて
約１．５ｇとした後、セロファンチューブを用いて３日
間、流水中で透析した。透析内容物が中性になったのを
確認した後、約４倍哩のエチルアルコール（最終濃度８
０％以上）を加え、−夜装置して沈殿物を充分に生成さ
せた。この沈殿物を遠心分離（４０００ｒ　ｐｍ、１０
分）して採取し、蒸留水１ｅに溶解させ、凍結乾燥して
淡色の粉末１３ｇを得た。この粉末は、水分１２．８％
、灰分】、９％、全窒素０．８％、ヘミセルロース８３
０％、セルロース０１％、リグニン１４％からなってい
る。こうして得られたトウモロコシヘミセルロースを飼
料に２％添加した。

■ペクチン 高メトキシルペクチン（エステル化度６５％、Ｕｎｉｐ
ｅｃｔｉｎｅ社製）を用い、これを飼料に２％添加した
。

■小麦フスマヘミセルロース 上記■で調製した小麦フスマ！００ｇに、２％の水酸化
カルシウムを添加したｌβの水を加え、８０℃で５時間
加熱してヘミセルロースを抽出した６遠心分離（５００
０ｒｐｍ、１０分）して残渣を除いた抽出液を硫酸で中
和した後、濾過脱色し１分両分子遣１０万の限外濾過膜
で脱塩して濃縮した後、凍結乾燥してヘミセルロース粉
末６．４ｇを得た。この粉末は、水分７，３％、灰分４
．１％、全窒素０．２％、ヘミセルロース８４．２％、
セルロース０３％、リグニン５７％からなっている。こ
うして得られた小麦フスマヘミセルロースを飼料に２％
添加した。

（以下、余白） （２）実験動物および飼育方法 実験動物は、４ｉ４令（体重６９〜７７ｇ）のＳＤ系雌
雄ラット用いた。標準飼料により６日間予備飼育したの
ち、ラットの平均体重が各Ｐ１毎に等しくなるように７
匹ずつ６群に分け、各試験飼ト１を投与して１１日間飼
育した。その間、飼料および水は自由に摂取させた０体
重、飼料の摂取は毎日一定時刻に測定した。本飼育１２
日目、絶食させない状態で午ｉｉ′１ｉｌＯ時にネンブ
タール肋腔内注ｑ−ｔにより麻酔し、心臓穿刺により採
血、解剖を行なった。

（３）血清ならびに肝臓の分析 ■血清の生化学値の分析 心臓から採血した血液は、直ちに２０００ｒｐｍで２０
分間遠心分離して血清を分離し、次の６項目について分
析を行なった。

＠Ｇｏ”１１グルタミン酸・オキザロ酢酸・トランスア
ミナーゼ） ヤトロン■製の試験試薬「イアトロザイムＴＡ−ＬＱＪ
　　（商品名）を使用した。

■ＧＰＴ　（グルタミン酸・ピルビン酸・トランスアミ
ナーゼ） ヤトロン■製の試験試薬「イアトロザイムＴＡ−ＬＱＪ
　　（商品名）を使用した。

０ＴＣ（総コレステロール） 協和メデックス（掬製の試験試薬「デタミナーＴＣ５Ｊ
　　（商品名）を使用した。

■ＴＧ（トリグリセライド・中性脂肪）協和メデックス
■製の試験試薬「デタミナ−ＴＧ−３５５５Ｊ　　（商
品名）を使用した。

＠ＰＬ（リン脂質） 協和メデックス（…装の試験試薬「デクミナーＰＬＪ　
　（商品名）を使用した。

■ＯＣＴ　（オルニチン・カルバミル・トランスフェラ
ーゼ） ■肝臓脂質成分の分析 肝臓は、摘出後、直ちに重量を測定し、凍結乾燥した。

乾燥した肝臓は、重量測定後、粉砕、均一化をはかり１
分析試料とした。試料は、０５ｇを秤取し、Ｆｏｌｃｈ
らの方法に準じて脂質の抽出を行なった。すなわち、５
０＋ｎｊ２容共栓付遠心管に試１１を入れ、クロロホル
ム・メタノール混液（２１、Ｖ／Ｖ）１５ｍ、ｃを加え
、サーモミキザーで１５砂間撹拌を３０分置きに３回行
なった後、室１品で２４時間放置した６次に、遠心分離
を３０００ｒｐｍで１０分間行ない、上澄液を濾紙（５
Ｂ）を用いて濾過し、濾液をクロロホルム・メタノール
混液で５０ｍεに定容し１次の４項目の分析に供した。

■総脂質 供試液２０ｍｊ２を秤取し、恒雇既知のフラスコに入れ
、湯浴（９０℃）上で蒸発、乾固させた後、乾燥器（９
５℃）に入れ、・石川に達するまで乾燥し、秤量して脂
質が、を求めた。

（ゆ総コレステロール（ＴＣ） 供試液１ｍｙをＩ「取し、これを生理的食塩水で洗浄後
、協和メデックス■製の試験試薬［デタミナーＴＣ５５
５Ｊ（商品名）を使用して分析した。

■トリグリセライド（ＴＧ） 供試液１ｍρを秤取し、これを生理的食塩水で洗浄後、
和光純襲■製の試験試ＴＸ：　ｒＴｒｉｇｌｙｃｅｒｉ
ｄｅＴｅｓ　ｔ■ａｋｏＪｆ商品名）を使用して分析し
た。

■リン脂質（Ｐ　Ｌ　） 供試液１ｍεを秤取し、これを生理的食塩水で洗浄後、
協和メデックス［ｍ製の試験試薬「デタミナーＰＬ５５
５Ｊ　　（商品名）を使用して分析した。

（４）統計処理 各測定値は、−元装置の分散分析により多重比較を行な
った後、Ｐ＜０．０５　（９５％の信頼確率）において
有意差を検定した。

（実験結果） （＋）成長結果を表２に示す。

体重増加量、飼料効率、内臓摘出層体重は、各群間に有
意差は認められなかった。

肝臓型は、オロト酸添加の各群は、オロト酸無添加のＦ
ｇ準群（ＳＴ群）に比べて有意に高い値を示したが（Ｐ
＜０．０５）、オロト酸添加の各群のなかでは、トウモ
ロコシヘミセルロース群、小麦フスマヘミセルロース群
が、対照群に比べて有伍に低い値を示した。

また、肝臓の屠体重比も、オロト酸添加の各群は、標準
群と比べて高い値を示し、有意差が認められた（Ｐ＜０
．０５）。

（以下、余白） ＋２１　（′Ｘに、各試験群の血清生化学値を表３に示
す。

ＧＯＴは、オロト酸添加各群のなかで、小麦フスマ群、
トウモロコシフスマ群、トウモロコシヘミセルロース群
、小麦フスマヘミセルロース群は、対照群に比べて有意
に低い値を示しＣＰ＜０．０５）、特にトウモロコシフ
スマ群、トウモロコシヘミセルロース群、小麦フスマヘ
ミセルロース群は、標準群との間に有意差は認められな
かった（Ｐｒ０．０５）。ペクチン群は２対照群と差は
なく、トウモロコシヘミセルロース群より有意に高いｆ
１αを示した（Ｐ＜ｏ、０５）。

ＧＰＴは、オロト酸１食物繊維の添加に関係なく、各群
間に有意差は認められなかった。

ＴＣは、オロト酸添加各群のなかで、トウモロコシヘミ
セルロース群、小麦フスマヘミセルロース群以外の群は
、いずれも６１？、群より有意に低い値を示した（Ｐ＜
ｏ、０５）、それに対して、トウモロコシヘミセルロー
ス群、小麦フスマヘミセルロース群は、対！ＩＱ群、小
麦フスマ群、ペクチン群より有意に高い値を示した（Ｐ
＜０．０５＋。

ＴＧは、オロト酸添加各群のなかで、トウモロコシヘミ
セルロース群、小麦フスマヘミセルロース群以外の群は
、標準群よりも有意に低い値を示しくＰｒｏ、０５１　
、　　トウモロコシヘミセルロース群、小麦フスマヘミ
セルロース群は、標準群と有意差が認められないほど高
い値を示した（Ｐ＜０．０５）、ＰＬは、オロト酸添加
各群は標準群より有意に低い値を示したがＣＰ＜ｏ、０
５）、オロト酸添加各群のなかで、トウモロコシヘミセ
ルロース群、小麦フスマヘミセルロース群は他群より有
意に高い値を示した（ｐｒｏ、０５）。

ＯＣＴは１食物繊維添加の各群とＩｎ群との間に有意差
はなく　ＩＰ＜０．０５）、小麦フスマ群、トウモロコ
シフスマ群、トウモロコシヘミセルロース群、小麦フス
マヘミセルロース群は、いずれも対叩群より有意に低い
（１αを示した（ｐ＜０．０５１゜ （以下、余白） 文献によれば、一般にオロト酸添加により血清生化学的
に目立つ変化としては、脂質の著しい低下が挙げられて
いる。１％オロト酸混入飼料を雄ラットに投与した場合
、ＴＣ，ＰＬは１／２程度に、ＴＧはＩ／３程度に低下
し、ＧＯＴは軽度の上昇を示すことが報告されている６ 本実験における１％オロト酸混入飼料を投与した対照群
の結果でも、血清化学値は、上記とほぼ同様な傾向を示
した。一方、オロト酸に各食物繊維を併用して投与した
結果について述べると、トウモロコシヘミセルロース群
、小麦フスマヘミセルロース群は、ＧＯＴの上昇を抑制
し、ＴＣ。

ＰＬ、ＴＧの脂質成分の低下を有意に抑制することが認
められた。これに対して、トウモロコシヘミセルロース
と同じ水溶性食物繊維であるペクチン群においては、上
記のいずれの効果も認められなかった。さらに、小麦フ
スマ群、トウモロコシフスマ群においては、ＧＯＴの上
昇を有意に抑制したが、ＴＣ，ＰＬについては対照群よ
りも僅かに高い値を示し、オロト酸による血清脂質の低
下を抑制する傾向を示した。

（３）次に、各試験群の肝臓脂質成分の分析結果を表４
に示す。

肝臓中の総脂質について、オロト酸添加各群は、標準群
よりも有意に高い値を示しくＰ＜０．０５＞、脂肪肝形
成を示した。小麦フスマ群とペクチン群は、対照群より
有意に高い値を示しくＰ＜０．０５）、ｌ−ウモロコシ
フスマ群、トウモロコシヘミセルロース群、小麦フスマ
ヘミセルロース群は、対照群と差は認められなかった。

各試験群の飼料摂取量をみた場合、食物繊維添加の各群
は、飼料摂取量が多く、シたがってオロト酸の摂取量も
多くなっており、その影響で肝脂質含看が高くなるもの
と考えられる。トウモロコシフスマ群とトウモロコシヘ
ミセルロース群は、肝脂質含量は対照群と有意差はなく
、特にトウモロコシヘミセルロース群、小麦フスマヘミ
セルロース群は、対照群よりオロト酸戸取量が多いにも
がかわらず、低い値を示した。

オロト酸投与による脂肪肝の生化学的特徴は、肝小簗の
周辺部から始まるＴＧ脂肪肝で、オロト酸混入飼料を投
与したラットでは、ＴＧの異常な蓄積が認められると報
告されている０本実験でもオロト酸を投与した対照群の
肝ＴＧは高い値を示した。各食物繊維をオロト酸に併用
して投与した結果では、トウモロコシヘミセルロース群
が肝ＴＧ蓄積において最も低い値を示した。これは。

トウモロコシヘミセルロースが他の食物繊維に比べてＴ
Ｇ蓄積を幾分なりとも抑制している証左と考えられる。

また、小麦フスマ群、小麦フスマヘミセルロース群もＴ
Ｇは比較的低い値を示した。

これに対して、トウモロコシヘミセルロース、小麦フス
マヘミセルロースと同じ水溶性食物繊維であるペクチン
は、対照群より肝ＴＧの蓄積量は有意に多く　（Ｐ＜０
．０５）、［ｆｌｌ清ＴＧの異常に低いことからみても
、オロト酸による脂肪肝の形成を抑制する効果は認めら
れなかった。

（以下、余白） 以上の結果から、トウモロコシヘミセルロース、小麦フ
スマヘミセルロースは、オロト酸投与によるラットの脂
肪肝形成に対し、血清中のＧＯＴならびにＴＣ，ＰＩ−
、ＴＧ値および肝臓の総脂質含量、ＴＧ値から考察した
場合、優れた抗脂肪肝作用を有することが認められた。

「発明の効果」 以上説明したように１本発明の脂肪肝抑制物質は、ラッ
トにオロト酸を投与した実験において優れた脂肪肝抑制
作用を有している。したがって。

人間の脂肪肝抑制に対しても優れた効果が期待される。

また１本発明の脂肪肝抑制物質は、トウモロコシフスマ
または小麦フスマから得られたヘミセルロースからなる
ので、人体に全く安全な物質であり、医薬、食品添加物
あるいは飲食品として安心して摂取することができる。

特許出願人　　日本食品化工株式会社

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）トウモロコシフスマまたは小麦フスマより得られ
   たヘミセルロースを主成分とする脂肪肝抑制物質。
2. （２）トウモロコシフスマまたは小麦フスマより澱粉質
   、蛋白質等を除去し、この残部をアルカリ抽出して得ら
   れた請求項１記載の脂肪肝抑制物質。